CARACTERSTICAS DEL VIRUS DE LA INFLUENZA AVIAR Y UNA NUEVA VACUNA Flu-VLPs

CARACTERSTICAS DEL VIRUS DE LA INFLUENZA AVIAR Y UNA NUEVA VACUNA Flu-VLPs REVISO. INTRODUCCIN Una nueva alternativa en vacunas para la pandemia de influencia aviar han abierto nuevas investigaciones, para formar anticuerpos en los animales y el hombre. Debido a que el virus de la influenza aviar es un mutgeno cuando infecta diferentes especies, las vacunas existentes que forman anticuerpos contra H7N1 y H5N1 se van descontinuando, lo que hizo necesario estudiar una vacuna la cual no solo ataque estas dos sepas, sino que adems pueda existir RESUMEN La influenza aviar es causada por el virus de la influenza tipo A, perteneciente a la familia Ortomyxoviridae. Es un agente zoonotico que posee glicoprotenas de membrana con actividad de neuraminidasa o hemaglutinina, que le otorgan gran variacin antignica llevando a la aparicin de infeccin respiratoria aguda autolimitada tanto en animales como en humanos. La aparicin de nuevas cepas contra las cuales la poblacin no posee inmunidad y lleva a la aparicin de pandemias. Las vacunas disponibles en la actualidad no ofrecen proteccin contra el virus H5N1 a excepcion de una nueva investigacin de la Flu-VLPs elaborada con particulas similares a las proteinas de la superficie viral (Hemoaglutinina (HA), neuroaminidasa (NA) y proteina transmembranal M2) que ejerce una accion contra H7N1 y H5N1. el mejoramiento vacunacional va encaminado a evitar perdidas economicas en la avicultura, por la disminucin de la produccin de huevos y mortalidad de los animales, que significan CARACTERISTICAS Los virus FLU pertenecen a la familia Orthomyxoviridae y se caracterizan por la segmentacin de su ARN y la presencia de cpside. Se han descrito tres tipos de virus FLU: A, B, C, clasificados de acuerdo con la capacidad de en grandes perdidas economicas. la posibilidad de generar reaccin cruzada. LINA MARIA BARRERA SANCHEZ

reaccin serolgica de sus protenas internas (nucleoprotenas y matriz intracelular). Las caractersticas morfolgicas de todos los tipos, subtipos y cepas del virus de la influenza son similares. Su tamao oscila entre 80 y 120 nm de dimetro.

Pueden existir como partculas esfricas o filamentosas y estn cubiertos por proyecciones o espinas superficiales (spikes), las cuales, en los virus FLU A, son glucoprotenas que poseen actividad de neuraminidasa o hemaglutinina. Poseen una envoltura que se deriva de la membrana de la clula husped y una nucleocpside, compuesta de y varios segmentos separados.

Hemaglutinina

neuraminidasa

El virus tipo A tiene subtipos determinados por los antgenos de superficie encontrados en las espinas. En ellas se expresan dos glicoprotenas de gran importancia: hemaglutinina y neuraminidasa. Se conocen 16 tipos de hemaglutinina en las cepas humanas, H1 a H16, de los cuales los subtipos H1, H2 y H3 son los que se expresan en el hombre. Es el sitio de unin del virus con la clula husped para iniciar la infeccin.

Los subtipos H5 y H7 pueden circular entre las aves por meses como formas muy leves de la enfermedad, hasta mutar a una forma muy patgena y de rpida dispersin. Existen nueve variedades de neuraminidasa, N1 a N9, fundamentales en la penetracin del virus. Los subtipos expresados en el humano son el N1 y N2. Esta enzima cliva la unin entre el cido Nacetilneuramnico y la D-galactosa o D-galactosamina adyacente en el eritrocito. Juega un papel importante al promover la liberacin de viriones maduros Otras a partir de una clula infectada. protenas

La envoltura est compuesta por una doble capa lipdica, en cuya superficie interna hay una protena de matriz M, la cual proporciona estabilidad al virin y crea un medio ambiente selectivo para la inclusin de protenas codificadas por el virus que resulta importante en el estadio temprano de la replicacin viral. La protena M tambin sirve como antgeno especfico de tipo. Dentro de la envoltura existe la nucleocpside, la cual est fragmentada en 8 segmentos.

Los datos disponibles sugieren que los segmentos del genoma son incorporados al azar a viriones maduros, un proceso que slo rara vez podra dar como resultado un virin que contenga todos los segmentos del genoma necesarios para la infeccin, pero que podra explicar una mayor capacidad de infeccin determinada por la agregacin de viriones de la influenza. Al estar agregados, se complementan dos o ms partculas virales, mientras que, si se presentaran aislados y cada uno careciera de uno o ms segmentos de ARN, podra no producirse Variacin infeccin. antignica

Las mutaciones puntuales en los genes que codifican estos antgenos ocasionan cambios en las protenas virales, que permiten evadir la respuesta inmune y llevan a la aparicin de enfermedad, aun existiendo anticuerpos previos; esta situacin se denomina cambio antignico menor (antigenic drift). Si llega a producirse un intercambio gentico entre diferentes especies de virus de la influenza, con reordenamiento del genoma y generacin de un nuevo subtipo viral, se produce el fenmeno conocido como cambio antignico ECOLOGA mayor Y (antigenic shift). FISIOPATOLOGA

Las aves acuticas constituyen el mayor reservorio de virus FLU A y juegan un papel preponderante en la cadena de transmisin del virus, con la posibilidad de diseminarlo a otras aves y animales acuticos, especialmente, cuando migran. La transmisin entre aves ocurre por la eliminacin del virus en las heces, que contaminan agua o alimentos, y tambin por la generacin de aerosoles. La cepa H5N1 tiene la capacidad de sobrevivir ms tiempo en el ambiente que otras cepas. Se ha encontrado que los patos pueden excretar grandes cantidades de virus altamente patgeno sin enfermar, actuando como reservorios y perpetuando la transmisin a otras aves.

Los cerdos tienen la capacidad de infectarse con cepas de distintas especies en forma simultnea, lo cual permite el reordenamiento gentico y la generacin de nuevas cepas, que pueden ser transmitidas al hombre y a otras

especies. Se ha observado, tambin, infeccin con la cepa H5N1 en mamferos, como tigres en cautiverio y, experimentalmente, en gatos. La infeccin con los virus de influenza tradicionales puede ser adquirida por transferencia de secreciones respiratorias que contienen el virus, de una persona infectada a una persona susceptible, por contacto directo y, tal vez, por contacto indirecto (fomites), con autoinoculacin a conjuntivas o tracto respiratorio. Despus de la transmisin, el virus penetra en las clulas del epitelio respiratorio de la trquea y de los bronquios, y se realiza la replicacin viral intracelular con destruccin de las clulas infectadas. La duracin del periodo de incubacin, hasta el comienzo de la enfermedad, vara entre 18 y 72 horas. Para los virus A (H5N1), puede tardarse un poco ms (de 5 a 17 das). LA VACUNA Se hicieron estudios para crear particulas similares al virus de la influenza (Flu-VLPs) derivados del nucleo retroviral que mimetiza las propiedades de la superficie viral de dos virus de influenza altamente patgenos de cada subtipo antigenico H7N1 o H5N1. se ha demostrado que, con recuperacin del RNAs viral de una cepa, se caracterizo la Flu-VLPs incorporando las proteinas HA, NA y M2 demostrando que induce a la formacin de anticuerpos neutralizantes en DIAGNOSTICO se utiliz inicialmente un tcnica de ELISA para testar los sueros de lotes de pollos de engorde, ponedoras, reproductoras y detectar la presencia de anticuerpos frente a virus de influenza tipo A. Los datos de esta inspeccin demostraron niveles altos de anticuerpos frente a AIV, lo que indicaba infecciones no reconocidas de AIV en estos lotes. En base a esta informacin, se realiz una segunda investigacin en lotes seleccionados de pollos de engorde, reproductoras y ponedoras. En este trabajo, se aislaron nueve AIV subtipo H9N2. Los datos serolgicos de esta investigacin indicaron que los pollos de lotes con historia previa de infeccin del tracto respiratorio y algunos sin claros sntomas clnicos respiratorios haban seroconvertido al AIV H9N2. altos titulos en micos.

MEDIDAS

DE

CONTROL

SALUD

PBLICA

Es necesario que se aplique la vacunacin. Los expertos afirman que una de las cosas que s se conoce es que "el virus, cuando se contagia entre humanos, es mortal, mucho ms que el virus al que estamos acostumbrados". Los cientficos reconocen que no pueden tomarse precauciones para un brote entre humanos ya que an se desconoce la forma del virus y de qu forma mutar. Se ha reconocido el nexo entre los sistemas agrcolas y la propagacin del virus, sobretodo por el contacto entre aves de corral de produccin casera que contribuira a la circulacin del virus. Los desplazamientos y la comercializacin de aves vivas sin control veterinario son causas fundamentales en la propagacin de la enfermedad. Los pases han de notificar los casos de la enfermedad a la OIE y enviar informacin a los pases vecinos sobre los brotes y campaas hechas. Las siguientes son medidas a tomar: a. Vigilancia epidemiolgica (elaboracin de un protocolo de actuacin en caso de deteccin de un caso humano de gripe A(H5N1) y notificacin de los posibles exticas de pases afectados casos) . Restricciones en la importacin de carne de ave fresca y derivados, aves Informacin a todas las instituciones sanitarias nacionales y comunitarias, revisin y actualizacin del Plan Nacional de la Gripe y el Plan Nacional de Actuacin DISCUSIN La influenza es una enfermedad altamente mutgeno que requiere estudios peridicos contra el ataque de las sepas que se vuelven resistentes en los diferentes animales. Aunque la FLU-VLPs acta en formacin de anticuerpos altamente eficaz en virus H7N1 y H5N1, no tiene reaccin cruzada lo cual hace resistente a otras sepas contra las actuales vacunas. ante una Pandemia de Gripe.

BIBLIOGRAFA 1 RONCANCIO VILLAMI, Gustavo Eduardo. Influenza aviar: la gripa del pollo. Mdico internista, Hospital Universitario de San Ignacio; profesor,Facultad de Medicina, Pontificia Universidad Javeriana, Bogot, D. C. 23/09/2005. 2 www.virologyj.com Judit Szcsi y Col. Induction of neutralising antibodies

by virus-like particles harbouring surface proteins from highly pathogenic H5N1 and H7N1 influenza viruses. September 2006. 3 www.ingentaconnect.com Naeem K y Col. Seroprevalence of avian influenza virus and its relationship with increased mortality and decreased egg production. Avian Pathology, Volume 32, Number 3, June 2003, pp. 283-287 4 www.exopol.com Albert Canals i Rosell. Influenza aviar altamente patgena (peste aviar). Veterinari Oficial del Departament de Salut. Generalitat Catalunya. 10/2006.

Situacin Mundial de la Influenza Aviar y sus implicaciones en Amrica Latina Publicado el: 13/10/2010 Calificacin: Autor: Miguel A. Mrquez, United States Soybean Export Council American Soybean Association-IM. Consultor Internacional. Guadalajara, Mxico. Julio 2010 Introduccin La Ortomixovirosis o Influenza Aviar de Alta Patogenicidad en aves domsticas, ha sido reportada con una frecuencia creciente a lo largo de los ltimos 55 aos en las industrias avcolas de diferentes pases y en diversos continentes, proceso preocupante y difcil de explicar por veterinarios clnicos, avipatlogos, virlogos, inmunlogos y epidemilogos. Asimismo, la constante circulacin viral, con la aparicin y desaparicin del agente de la Influenza Aviar de Baja Patogenicidad, tanto en parvadas de pollo (Gallus gallus domesticus), como de pavos (Meleagris gallopavo), denota la gran actividad y plasticidad gentica de estos ortomixovirus. Por otro lado, el concepto de fronteras nacionales entre los pases parece ser ya no ms vlido, debido al nuevo comportamiento viral el cual debe ser contemplado ahora como "global" desde un punto de vista geogrfico, dada su intensa movilidad intra e intercontinental. El creciente nmero de brotes reportados debidamente documentados, provocados por virus de Influenza Aviar de Alta Patogenicidad (IAAP) desde mediados del siglo pasado, demuestra una intensa activacin de esta enfermedad, la cual esta causando de ms en ms, un mayor nmero de

brotes, los cuales toman carcter epizotico y algunos de entre estos episodios adquieren proporciones de panzootias, provocando como es el caso de la Influenza Aviar por virus H5N1 en el Sureste Asitico el cual ha producido enormes prdidas econmicas por la mortalidad misma y por los severas medidas de erradicacin con sacrificio de los animales, adems de la terrible y cuantiosa penuria pecuniaria, resultante de las medidas cuarentenarias y de bioseguridad, tales como, la restriccin de movilizacin, control de la comercializacin y las barreras sanitarias intraestatales o bien internacionales entre pases, que terminan arruinando la economa avcola y pecuaria de las naciones afectadas. Desde 1955, han sido cientficamente documentados ante la Office International des Epizooties (OIE) de Pars, actualmente conocida como Organizacin Mundial de Salud Animal (OMSA), numerosos brotes de Influenza Aviar (IA) causados por virus de Alta Patogenicidad, es decir, que durante ultimas seis dcadas se han presentado, un promedio de 1.7 brotes por ao en diferentes continentes y lo ms preocupante es que las ltimos veinte aos, estas epizootias han ocurrido a lo largo de la dcada de los aos 90 del siglo pasado y la primera dcada del presente siglo, esto aunado a los cientos de virus de Baja Patogenicidad que han sido aislados durante los ltimos 60 aos. En la mayora de los casos, y cuando el diagnstico ha sido confiable y precoz porque han existido los medios tcnicos y sobretodo, econmicos, la IA ha sido controlada por medio de la erradicacin, gracias al sacrificio total de las aves afectadas y de las no afectadas, en estrecha vecindad. Sin embargo, en algunos de estos pases, particularmente donde histricamente se opt por la vacunacin para el control y la prevencin de esta enfermedad altamente infecto-contagiosa, ella ha tomado desgraciadamente un carcter crnicoenzotico. Todo esto indica, entonces, que los virus causantes de la Influenza Aviar de Alta y de Baja Patogenicidad, en los prximos aos incrementarn su presencia y acelerarn su virulencia en la avicultura industrial de pases desarrollados y en naciones en desarrollo, por igual, debido al intenso intercambio comercial, resultado y consecuencia directa de numerosos tratados de libre comercio, entre bloques de pases no forzosamente vecinos e igualmente a causa de la globalizacin econmica y cultural del mundo y a la intensa movilizacin internacional de productos avcolas, gracias a los modernos y rpidos medios de transportacin, as como, la diaria trashumancia de millones de seres humanos en perpetuo, multidinario y acelerado movimiento areo, sin descartar por supuesto, la posibilidad y el riesgo que representa, la migracin estacional de aves acuticas y terrestres. Reportaje realizado en Porciamricas 2010

Etiologa Los virus responsables de la Influenza Aviar son capaces de provocar severas infecciones agudas en el caso de virus de alta patogeninicidad y crnicas,

sobre todo, en el caso de virus de baja patogenicidad. Clnicamente cursan con cuadros caracterizados por neumo-entero-encefalitis. Los agentes de la Influenza Aviar forman parte de la gran familia Orthomixoviridae del Tipo A. Son partculas vricas envueltas por una capa bilipdica, que miden aproximadamente 100 nm, portan cido ribonucleico (ARN) y su genoma esta dividido de ocho segmentos en sentido inverso. Adems, poseen unas remarcables protenas de superficie, 16 hemogalutininas y 9 neuroaminidadas, lo que les confiere una enorme potencial de recombinacion de hasta 144 diferentes subtipos. De entre ellos, los subtipos ms importantes en medicina aviar son los subtipos H5 y H7, sin embargo, el los virus H9 ostentan un potencial infectolgico que no debemos perder de vista en el futuro cercano.

Virus de Influenza Aviar, Egipto, 2010

Ahora bien, los subtipos H5 y H7 se pueden clasificar en virus de Alta y de Baja Patogenicidad. La Organizacin Mundial para la Salud Animal (AMSA), mejor conocida como Oficina Internanacional de Epizootias (OIE), con sede en Paris, Francia, los define de la manera siguiente: "Para propsitos del Comercio Internacional los virus H5 y H7 de Influenza Aviar Notificable (IAN), son aquellos que son capaces de provocar la enfermedad en aves corral con IPIV >1.2 en pollos 6 semanas de edad o causar mortalidad >75% en pollos 4-8 semanas edad inoculados va intravenosa".

Estructura de los virus de Influenza Aviar. Ntese el genoma divido en ocho segmentos Perodo de incubacin El perodo de incubacin de los virus de IA en aves infectadas naturalemente puede ser muy corto, 24 a 36 horas, dependiendo de la virulencia del agente y de la susceptibilidad del hospedador, puede llegar hasta 14 das. Desde el punto de vista clnico se toma un promedio de 7 das. Patogenia El proceso infeccioso se inicia con la inhalacin o ingestin de lo viriones infectivos, a continuacin ocurre la colonizacin de las vas respiratorias altas, en particular, la penetracin ocurre por la mucosa nasal y la faringe, o bien, por la celulas epiteliales de la mucosa intestinal del aparato digestivo. Las enzimas del tipo tripsina permiten la fijacin de las hemoaglutininas ocurre la penetracin viral, para que ocurran mltiples ciclos de replicacin. Las partculas vricas se dispersan va el sistema vascular para entonces replicarse en todo tipo de rganos parenquimatosos, encfalo y piel. Los signos clnicos, sintomatologa y la muerte ocurre por falla mltiple de los rganos. Los daos causados por los ortomixovirus son el resultado de tres procesos: 1) Replicacin directa de los virus en clulas, tejidos y rganos. 2) Efectos indirectos debidos a la produccin masiva de mediadores celulares, tales como las citocinas, e 3) isquemias provocadas por trombosis vascular.

Sntomas

lesiones

La intensidad de los signos y sntomas provocados por los virus de la influenza aviar, varan en intensidad dependiendo si se trata de agentes de baja o de alta patogenicidad. Los sntomas respiratorios son estornudos y estertor traqueal, bronquial, disnea y conjuntivitis. Los digestivos son enteritis con hemorrgias petequiales y equimticas con una intensa diarrea de color verde. Finalmente se abre un cuadro neurolgico, que consiste en incoordinacin,

ataxia, y parlisis con opisttonos y episttonos. Un signo ms que revelador es la tortcolis y las contracciones tnico-clnicas. Se trata de un cuadro neuro-entero-neurolgico congestivo hemorrgico masivo. Quiz la nica lesin patognomnica diferencial con la enfermedad de Newcastle es la presencia de sufuciones drmicas que no son otra cosa que hemorragias bajo de la piel.

Replicacin

viral

Como es bien sabido, los virus de influenza presentan un alto rango de error durante su proceso de replicacin, muy en particular, durante la trascripcin de sus genomas, debido a la baja fidelidad de su polimerasa ARN 1. Dicho riesgo de alto error, provoca la aparicin de un fenmeno en el cual aparecen subespecies, entre las cuales muchos genotipos virales diferentes co-circulan dentro del husped y cada subespecie de virus tiene potencialmente diferente habilidad para adaptarse al husped2. La ventaja de la presencia de una alta tasa de error, consiste en la habilidad de los virus para adaptarse rpidamente a las nuevas condiciones ambientales. Esto puede ocurrir, por ejemplo, durante la infeccin de una nueva especie de hospedador que requiere de cambios genticos de adaptacin para la replicacin ptima y la transmisin del virus. La principal desventaja que presenta una alta tasa de error, es la produccin de muchos genotipos virales que pueden tener una menor capacidad de adaptacin al hospedador original. La mayora de los cambios de los nucletidos son eventualmente eliminados del juego de genes debido a que ellos aportan, ya sea, un factor de seleccin neutral o negativo para la replicacin continua del genotipo viral. En algunas ocasiones, estas mutaciones neutrales o sinnimas pueden aumentar en su frecuencia cuando ellas se hayan ligadas a un cambio no sinnimo, que confiere al genotipo viral un factor de seleccin debido a un cambio al azar. Dichos cambios sinnimos y no sinnimos proveen marcadores de gran utilidad en el rastreo epidemiolgico de los virus durante un brote 3. Para muchos virus, la tasa de cambio mutacional, ocurre a un ritmo constante y predecible, el cual ha sido frecuentemente llamado: "reloj molecular" 4. La tasa de cambio mutacional, incluye tanto a los cambios sinnimos como los no sinnimos, y ella puede ser determinada en los virus del mismo linaje, si ellos son muestreados a travs del tiempo. La tasa evolutiva puede ser tambin determinada, por medio del examen de los cambios no sinnimos o del aminocido, los cuales pueden ocurrir en virus del mismo linaje cuando se muestrean al paso del tiempo. Los virus de influenza se encuentran en una gran variedad de especies, a menudo causando cuadros infecciosos severos. Sin embargo, entre los hospedadores naturales de los virus de influenza aviar, como son las aves

acuticas continentales y aves martimas costeras migratorias, el virus se puede considerar inicialmente como avirulento5. Cuando un virus de influenza infecta a un hospedador de una especie nueva, puede replicarse causando la enfermedad ocasionalmente, y dicho virus raramente se transmitir en la nueva especie para causar una epizootia. Por ejemplo, en el caso del virus H5N1 que provoc la "gripe" de los pollos en Hong Kong, pas de pollos a seres humanos en al menos 18 casos causando seis defunciones durante 1997, mostr afortunadamente en aquel momento, poca capacidad para causar una epidemia de carcter mundial6. La transmisin entre mamferos, tambin puede ocurrir de manera regular, por ejemplo, existen numerosos reportes de virus de influenza porcina que han infectado a seres humanos (zoonosis) y viceversa (antropozoonosis) 7. Afortunadamente, los brotes epidmicos resultantes de la transmisin de virus entre especies diferentes son raros. El cruzamientos de virus entre especies puede resultar en la introduccin de un nuevo subtipo, portador de una nueva hemoaglutinina y/o neuraminidasa a los seres humanos, por medio de un cambio antignico, el cual puede conducir a una epidemia o pandemia (caso reciente de la Influenza Pandmica A/H1N1 de marzo-abril del 2009 y que se haya aun esta en curso), debido a que el nuev o husped no posee inmunidad protectora suficiente contra la nueva cepa recombinada de influenza. Este tipo de cambios antignicos entre los virus de influenza han ocurrido en tres ocasiones en la poblacin avcola de este planeta durante el siglo pasado 8. Aunque las introducciones de virus de influenza en aves han sido frecuentes, estos brotes una vez que se han descubierto, usualmente, no han continuado o persistido durante largo tiempo debido a los esfuerzos por controlarlos o por la falla de los virus a adaptarse al nuevo husped. Sin embargo, al menos han ocurrido tres brotes que se han extendido a lo largo de los aos y de los cuales se han aislado mltiples virus. Estos casos han sido el brote por el subtipo H5N2 de Pennsylvania de 1983-19849, el brote ocurrido en Mxico por un virus H5N2 de 1994-1995 hasta la fecha10, y el brote reportado en el Noreste de los Estados Unidos por el subtipo H7 en los mercados de aves vivas de 1999 hasta el presente11. Estos tres brotes han sido una estupenda y nica oportunidad para poder estudiar los cambios evolutivos en las aves domsticas, primariamente en los pollos y en los pavos.

Ecologa

viral

Aunque los virus de la influenza de las aves pueden infectar una amplia variedad de aves y mamferos, el hospedador natural de estos virus son las aves silvestres acuticas migratorias. Cuando otras especies animales, incluyendo pollos, cerdos, caballos, y seres humanos, son infectados por virus de Influenza, estos ltimos pueden considerarse como hospedadores aberrantes. La distincin entre un husped normal y uno aberrante, es de gran importancia, cuando se intenta determinar la evolucin de los virus en y entre diferentes grupos de hospedadores. La tasa evolutiva de un virus de Influenza en los reservorios del hospedador natural tiende ser lenta, mientras que en los mamferos es ms rpida. La tasa de evolucin mayor en mamferos, se piensa es debida, a la presin selectiva

ejercida sobre los virus para adaptarse a una especie hospedadora aberrante. Los virus de Influenza Aviar aislados a partir de pollos y de pavos, han sido errneamente clasificados juntos con los ortomixovirus de aves silvestres acuticas, continentales y martimas migratorias, cuando se determinaron las tasas de cambio evolutivo con el objeto de establecer las tasas de capacidad evolutiva y mutacional de un virus de cualquier especie hospedadora. Para esto, dos condiciones primarias deben asumirse, primera: todos los aislamientos incluidos en el estudio y anlisis, deben de haber descendido de una simple y sola introduccin de virus. La segunda: un brote debe permanecer el tiempo suficiente y necesario, para poder establecer y determinar una tendencia. En el caso de las aves domsticas han ocurrido recientemente tres brotes, los cuales cumplen con estos criterios, ya que la secuencia de la hemoaglutinina y de los genes no estructurales fue estudiada. Las secuencias de stos tres virus que causaron los brotes, fueron comparados con virus de influenza, las cuales a nivel de aminocidos son altamente conservados por todas las protenas virales internas. Este consenso en la secuencia provee tambin, un punto de origen comn para comparar todos los virus de Influenza. Las tasas evolutivas que se determinaron en los tres brotes, fueron similares a los que se observ en mamferos, lo cual provee una fuerte evidencia de la capacidad de adaptacin de los virus de Influenza a nuevas especies de huspedes, como es el caso del pollo y del pavo. 12

Proceso

Evolutivo

El primer brote de Influenza Aviar de Alta Patogenicidad, fue reportado y descrito por el cientfico italiano Edoardo Perroncito en 187813. Se trata de un fascinante reporte que describe la devastadora y virulenta enfermedad como una entidad infecto-contagiosa que afect, las aves de corral criadas en los valles y colinas alrededor de la ciudad de Turn, en el Piamonte italiano. Dicha epizootia, se inici con un cuadro clnico caracterizado por signos benignos, que subsecuentemente se transform en un cuadro neumo-entero-enceflico severo, que mat a la casi totalidad de las aves criadas en el rea mencionada. Es muy posible que los signos y sntomas inicialmente descritos por Perroncito correspondan a la forma causada por los virus de Influenza Aviar de Baja Patogenicidad y que subsecuentemente, despus de la circulacin dentro de la poblacin susceptible, los virus hayan mutado a la forma de Alta Patogenicidad. De hecho, gracias a las modernas pruebas de Biologa Molecular, ha sido posible demostrar que los virus de Alta Patogenicidad han mutado a partir de virus progenitores de Baja Patogenicidad de los subtipos H5 y H7, como han sido los casos de los brotes de Pennsylvania 1993-94, de Mxico 1994-95, Italia de 1999-2000 y Chile del 2000. La etiologa viral de la IAAP, no fue identificada sino hasta 1901, por otros dos cientficos italianos, Centanni y Savonuzzi, quienes demostraron que la "Peste Aviar", poda ser reproducida en el laboratorio administrando homogenizados ultrafiltrados en filtros de cermica, obtenidos de rganos colectados de aves muertas por dicha enfermedad.14

La mayor parte de virus de IA han sido aislados de aves silvestres, particularmente de las acuticas pertenecientes a los rdenes Anseriformes y Charadriiformes. Es ms, estas aves al parecer fungen como reservorios naturales y de hecho, funcionan como almacenes de genes, lo que permite la perpetuacin de los virus de Influenza Aviar en la naturaleza. Sin embargo, es muy importante sealar que dichas aves perpetan solamente virus de Baja Patogenicidad, ya que a pesar del enorme nmero de aislamientos de virus de Baja Patogenicidad que se hacen de estas especies de voltiles, muy pocas veces se han aislado virus de Alta Patogenicidad, por lo que se ha sugerido que ellas son los hospedadores naturales de los virus de Influenza Aviar, y en los que los virus se han adaptado adecuadamente. Contrariamente, las aves domsticas, es decir, los individuos del Orden Galliformes, Familia Phaisanidae, no parecen ser los hospedadores naturales de los ortomixovirus, por lo tanto, el grado de adaptacin al husped es bajo, lo cual podra posiblemente explicar porqu las mutaciones virales documentadas han ocu rrido prcticamente siempre en aves domsticas. De hecho, el nico brote de Influenza Aviar de Alta Patogenicidad en aves silvestres que haya sido reportado asociado a con la mortalidad de 1,300 golondrinas de mar (Sterna hirundo) fue en 1961 en frica del Sur.

Brotes de Influenza Aviar de Alta Patogenicidad reportados desde 1955 Desde que se comprob que los brotes de IAAP son causados por virus muy virulentos de Influenza en 1955, y la demostracin de que los virus de los subtipos H5 y H7, son los principales responsables de los brotes de IAAP en 1959, veinte y dos epizootias han sido reportadas en las aviculturas industriales en diferentes partes del mundo15. De stas, veinte y una han ocurrido en aves domsticas y solamente una ha ocurrido, como hemos mencionado, en golondrinas martimas silvestres. Tomando en cuenta la zona geogrfica en donde se han reportado los brotes, en relacin al desarrollo y la estructura de la avicultura del pas en cuestin y en lo concerniente a las polticas implementadas de erradicacin o de vacunacin, las epizootias de IAAP, han tenido un impacto diferente en la economa de los pases afectados. Por ejemplo, sin duda alguna, la epizootia ocurrida en la Lombarda y en el Veneto italianos y despus en el resto de Italia, causada por virus de Alta Patogenicidad H7N3, entre 1999 y 2000, ha sido la ms costosa que se tenga conocimiento. Brotes documentados causados por virus altamente patognicos de Influenza Aviar, reportados desde la identificacin del agente causal de la Influenza Aviar en 1955. Modificado por Swayne y Suarez16 y Alexander.17 Virus de Influenza Aviar A/chicken/Scotland/59 Subtipo Pas H5N1 Escocia

A/tern/South Africa/61 A/turkey/Ontario/7732/66 /chicken/Victoria/76 AA/chicken/Germany/79 A/turkey/England/199/79 A/chicken/Pennsylvania/1370/83 A/turkey/Ireland/1378/83 A/chicken/Victoria/85 A/turkey/England/50-92/91 A/chicken/Victoria/92 A/chicken/Puebla/8623-607/94 A/chicken/Queretaro/14588-19/95 A/chicken/Queensland/95 A/chicken/Pakistan/447/95 A/chicken/Pakistan/1369-CR2/95 A/Hong Kong/220/97 A/chicken/New South Wales/1651/97 A/chicken/Italy/330/97 A/turkey/Italy/4580/99 A/chicken/Chile/2000 A/chicken/Holland/2003 A/chicken/Indonesia/2003 A/chicken/South Korea/2003

H5N3 H7N3 H7N7 H7N7 H7N7 H5N2 H5N8 H7N7 H5N1 H7N3 H5N2 H5N2 H7N3 H7N3 H7N3 H5N1 H7N4 H5N2 H7N1 H7N3 H7N7 H5N1 H5N1

Africa del Sur Canad Australia Alemania Inglaterra EUA Irlanda Australia Inglaterra Australia Mxico Mxico Australia Pakistan Pakistan China Australia Italia Italia Chile P. Bajos, Blgica, Alemania Indonesia Corea del Sur

A/chicken/Japan/2004 A/chicken/Taiwan/2004 A/chicken/Hong Kong/2004 A/chicken/Pakistan/2004 A/chicken/Viet Nam/2004 A/chicken/Thailand/2004 A/chicken/Cambodia/2004 A/chicken/Laos/2004 A/chicken/China/2004 A/chicken/Malaysia/2004 A/chicken/ North Korea/2005

H5N1 H5N2 H5N1 H7N3 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H5N1 H7N1

Japn Taiwan Hong Kong Pakistan Viet Nam Tailandia Camboya Laos China Malaysia North Korea

Como adicin a lista arriba descrita, un gran nmero de aislamientos virales a partir de aves silvestres, se han dado en forma de cascada, entre 2006 y 2009 en Rusia, Ucrania, Croacia, Turqua, Irn, Irak, Grecia, Italia, Francia, Espaa y EUA, etc., todos ellos por virus H5N1, algunos de Alta y otros de Baja Patogenicidad, as como, la mayora de los brotes de IAAP en aves domsticas ocurridos del 2005 al segundo semestre del 2009 en Asia, Europa y frica, particularmente en Indonesia, Vit Nam y Egipto. Adems de los brotes arriba descritos, se han documentado las epizootias de Italia en 1878, Egipto en 1923 y 1945 y la de Estados Unidos en 1929. Los brotes ms devastadores han sido los de Pennsylvania, con prdidas de ms de 464 millones de dlares, el de Mxico que afect a 25 millones de aves y el de Italia con el sacrificio de 17 millones de individuos. En Octubre del 2002, se report por medio de la prueba de Inhibicin de la Hemoaglutinacin, nueva y desalentadoramente, la presencia de un virus de Influenza Aviar de Baja Patogenicidad, en este caso un subtipo H7N3 en pavos, en las provincias de Brescia, Mantova, Vicenza y Verona en el norte Italia, con la notificacin de 140 focos. El anlisis filogentico llevado a cabo en el gen de la hemoaglutinina H, indic que este aislamiento forma parte del linaje Euroasitico H7. Dicho virus esta relacionado con el subtipo H7N1, pero no es parecido al que provoc el brote epizotico de 1999-2001 en Italia. El virus, tampoco tiene ninguna relacin con el virus vacunal del subtipo H7N3, con el cual se elabor la vacuna inactivada en aceite que se uso para el control del brote anterior (A/ck/Pakistan/95). Tan pronto como la infeccin pareca salirse de control, se estableci una campaa de vacunacin aprobada previamente por la Comisin

Veterinaria de la Comunidad Econmica Europea18. Asimismo, todos estamos concientes del brote de IA de Alta Patogenicidad que ha ocurrido en marzo del ao 2003 en los Pases Bajos y el cual en el transcurso de semanas se extendi a las fronteras de Blgica y despus de Alemania. En los tres casos se ha procedido a la erradicacin por sacrificio.

La catstrofe ocurrida a fines del ao 2003 y a lo largo del 2004, 2005 y 2006 en el Sureste Asitico, causada por ortomixovirus de Alta Patogenicidad, H5N1, que afectaron inicialmente, Indonesia, Corea del Sur, Japn, Vit Nam, Tailandia, Camboya, Laos y China y el subtipo H7N3 de Alta Patogenicidad que infect a Pakistn, son un excelente ejemplo de la peligrosidad y rapidsima difusin actual de los patgenos, debido a los medios masivos de transportacin area, que potencialmente pueden difundir y contagiar la poblacin animal y/o humana en cuestin de 48-72 horas. Las prdidas que ha sufrido la industria avcola asitica han sido cuantiosas, adems de lo terriblemente preocupante que fue el escape viral zoontico de los ortomixovirus aviares a la poblacin humana en pases como Indonesia, Vit Nam y Egipto por mencionar los ms importantes, son prueba de la aceleracin de las posibilidades de mutacin por recombinacin (Drift) o por error en la hemoaglutinina o neuroaminidasa (Shift), la que ostentan estos virus, son indudablemente una potencial amenaza peligro para la poblacin humana. Todo esto oblig a la Oficina Internacional des Epizootias (OIE) de Paris, a la Organizacin Mundial para la Agricultura y Alimentacin (FAO) de Roma y al Organizacin Mundial de la Salud (WHO) de Ginebra, Suiza, a organizar una reunin de emergencia para el control y prevencin de la Influenza Aviar en Bangkok, Tailandia, en febrero del 2004 y abril del 2005, para tomar las acciones correctivas, con el objeto de evitar una nueva gran panzootia de Influenza Aviar a nivel mundial. Es claro y evidente que la Influenza Aviar, se ha ido transformando de una enfermedad de carcter local, a regional a mundial. Otro hecho contundente es que ante la globalizacin de las economas del mundo, la IA se ha mundializado y que ha pasado de ser una enfermedad extica a una entidad de carcter enzotico/endmico en muchos pases del mundo, principalmente en el Sureste Asitico.

Situacin

de

la

Influenza

Aviar

en

el

Continente

Americano

Los nicos paises en Amrica que han sido afectados recientemente por virus de baja y/o de alta patogenicidad de IA han sido los Estados Unidos en 19831984 por virus de IAAP H5N2, Mxico en 1994-1995 por virus de IAAP H5N2, Canad en 2007 y 2008 por virus IAAP H7N3, Guatemala, por virus de IABP H5N2 en el 2000 y El Salvador en el 2001, Repblica Dominicana por virus de IABP en el 2008 y Hait en el mismo ao. El resto de las otras naciones del Continente Americano, afortunadamente se han mantenido libres de la influenza aviar.

Prevencin

La mejor accin para para un pais, zona o compartimento en el el control y la prevencin de la influenza aviar es la erradicacin total por medio del sacrificio de los animales enfermos y la destruccin de todo alimento, cama, y el lavado y desinfeccin de los galpones y material contaminado, de acuerdo a las normas especificadas por la OIE en su Cdigo de Salud para los Animales Terrestres.

Vacunacin En algunos paises las caratersticas de sus industrias avcolas y las circunstancias como se han presentado los brotes y epizootias causadas por virus de alta y de baja patogenicidad de la IA, han obligado a algunos pases a recurrir a la vacunacin, como han sido los casos de Mxico, Guatemala, El Salvador, Italia, algunos estados de la Unin Americana, Tailandia, China, Indonesia, y ms recientemente Egipto. Existen dos tipos de inmungenos para la prevencin de la IA, las vacunas inactivadas en vehculo oleoso y las vacunas recombinantes. Las primeras se han empleado amplia y masivamente en los paises arriba mencionados. Son muy seguras, inmunognicas y econmicas. Se aplican por va subcutnea en la parte media posterior del cuello, ya sea a un da de edad en incubadora, pero ms comunmente en granja entre los 7 y 10 das de edad de las aves. Las segundas son igualmente eficientes, se aplican a un da de edad en la incubadora, pero su costo puede ser alto.

Conclusiones Del listado antes mencionado, podemos observar que las hemoaglutininas ms comunes en patologa e infectologa aviar, son la H5 y la H7. Adems, de los brotes de IAAP ocurridos desde 1955, el 58 % de los casos fueron causados por subtipos H5 y el 42 % de los brotes fueron provocados por subtipos H7. Todos los continentes han sido afectados, siendo los pases que se hallan dentro del paralelo 60 Latitud Norte, incluyendo el brote de Escocia de 1959 y los que se hallan dentro de los 45 de Latitud Sur, considerando el brote de Chile del 2002, han sido las regiones geogrficas ms afectadas. Sin embargo, las epizootias que han sido ms comunes han ocurrido entre los 30, tanto de Latitud Norte, como 30 de Latitud Sur, como fue el caso de la presencia del virus H5N2 de Baja Patogenicidad en Repblica Dominicana al inicio del 2008. Es evidente que nos encontramos ante una preocupante reactivacin y aceleracin de esta ortomixovirosis, provocada sin duda alguna, por el intenso comercio intra e intercontinental, que ha favorecido la introduccin de virus de Influenza Aviar Baja Patogenicidad, en aviculturas de regiones geogrficas que estaban libres y que consideraban a esta infeccin como una enfermedad extica. Conforme vaya aumentando la comercializacin, ir por ende, aumentando el riesgo y la alta posibilidad de la aparicin de un mayor nmero de brotes con una mayor frecuencia. Los Departamentos de Salud Animal de los pases que cuenten con una avicultura industrial de poca consideracin o de gran importancia, debern todos,

implementar las medidas sanitarias estipuladas por la OIE y debern de capacitar a personal veterinario y a profesionales afines, tales como virlogos, inmunlogos, epizootilogos/epidemilogos, y expertos en biologa molecular, para establecer campaas de vigilancia pasiva y activa permanentemente a nivel nacional e internacional, llevar a cabo muestreos constantes, aislamiento y estudio de las secuencias de amino cidos en el sitio de ruptura de las hemoaglutininas, con el objeto de construir los arboles filogenticos y los linajes de los virus aislados con el objeto de poder hacer el rastreo de los mismos. La industria avcola mundial, las naciones y los organismos internacionales, debern levantar los fondos econmicos necesarios para financiar la construccin y el funcionamiento de laboratorios a nivel nacional, regional y global y para organizarse por medio de una red global de laboratorios de diagnstico de referencia y de investigacin para el estudio de esta enfermedad, con el objeto de hacer exitosamente el control, la prevencin y la erradicacin de esta ortomixovirosis. En la mayora de los pases se ha optado con xito, por la erradicacin por medio del sacrificio de cientos de miles o millones de aves, como fue el caso chileno, sin embargo, en otros pases como Mxico, Guatemala, El Salvador, Pakistn e Italia, debido a las caractersticas y circunstancias especficas y especiales que enfrentaron en su momento, se vieron obligados ha recurrir a la vacunacin para el control y prevencin de esta enfermedad, haciendo consecuentemente que ahora, la Influenza Aviar haya tomado, en ellos un carcter enzotico, mientras que en otros pases o regiones la Influenza Aviar sea considerada aun, como una entidad infecciosa extica. Referencias Bibliogrficas 1 Parvin, J.D., A. Moscona, W.T. Pan, J.M. Leider, P. Palese. 1986. Measurement of the mutation rates of animal viruses: influenza A virus and poliovirus type 1. J. Virol. 59, 377-383. 2 Domingo, E., E. Martnez Salas, F. Sobrino, J.C. de la Torre, A. Portela, C. Lpez Galidez, P. Prez-Brena and Villanueva and R. Njera. 1985. The quasispecies (extremely heterogeneous) nature of viral RNA genome populations: biological relevance- a review. Gene 40, 1-8. 3 Lindstrom, S., A.Endo, S. Sugita, M. Pecoraro, Y. Hiromoto, M. Kamada, T. Takashahi, K. Nerome, 1998. Phylogenetic analysis of the matrix and nonstructural genes of equine influenza viruses. Arch. Virol. 143, 1585-1598 4 Buonaugurio, D. A., S. Nakada, J.D. Parvin, M. Krystal, P. Palese, W.M. Fitch. 1986. Evolution of human influenza viruses over 50 years, uniform rate of change in NS gene. Science 232, 980-982. 5 Slemons, R.D., D.C. Johnson, J.S. Osborn, F. Hayes, 1974. Type-A influenza viruses isolated from wild free-flying ducks in California. Avian Dis. 18, 119-124.

6 Mounts, A.W., H. Kwong, D.S. Izurieta, Y.Y. Ho, T.K. Au, M. Lee, C. BuxtonBridges, S.W. Williams, K.H. Mak, J.M. Katz, W.W. Thompson, N.J. Cox, K. Fukuda, 1999. Case-control study of risk factors for avian influenza A (H5N2) disease, Hong Kong, 1997. J. Infect. Dis. 180, 505-508. 7 Dowle, W.R., A.W. Hattwick, 1977. Swine influenza virus infections in humans. J. Infect. Dis. 136, S386-S389. 8 Webster, R.G., W.J. Bean, O.T. Gorman, T.M. Chambers, Y. Kawaoka, 1992. Evolution and ecology of influenza viruses. Microbiol. Rev. 56, 152-179. 9 Suarez, D. L., D.A. Senne, 2000. The link between the live bird markets and the Pennsylvania H5N2 avian influenza outbreak of 1983-1984. Avian Dis. 10 Garcia, M., D.L. Suarez, J.M. Crawford, J.W. Latimer, R.D. Slemons, D.E. Swayne, M.L. Perdue, 1997. Evolution of H5 subtype avian influenza viruses in North America. Virus Res. 51, 115-124. 11 D.L., M. Garcia, J. Latimer, D. Senne, M. Perdue, 1999. Phylogenetic analisis of H7 avian influenza viruses isolated from the live bird markets of the Northeast United States. J. Virol. 73, 3567-3573. 12 Suarez, David L. Evolution of avian influenza viruses. Veterinary Microbiology. 74 (2000). 15-27. 13 Perroncito, E. Epizzotia tifoide nei gallinacei. Annali Accademia Agricoltura. Torino. 21, 87-126. 1878. 14 Centanni E., E. Savunozzi: La Peste Aviaria. Atti dellAccademia delle Scienze Mediche e Naturalli di Ferrara. 111-123, 1901. 15 Alexander, D.J.: The history of avian influenza in poultry. World Poultry No. Special, 7-8, 2000. 16 Swayne D.E. and D.L. Suarez. Highly pathogenic avian influenza. Rev. Sci. Tech. Off. Int. Epiz. 19, 463-482. 17 Alexander D.J. A review of avian influenza in different bird species. Vet Microbiol. 74, 3-13, 2000. 18 Capua, Ilaria, Stefano Maragnon, Calogero Terregino and Giovani Cattoli: The Avian Influenza Experience, AI in Italy, 1997-2002. Lecture given during the Educational Program of the 55th International Poultry Exposition. January 23, 2003. Atlanta, Georgia. USA.

Virology Journal, 2006; 3: 70-70 (ms artculos en esta revista)

La induccin de anticuerpos neutralizantes del virus de partculas-como la acogida de protenas de superficie altamente patgena H5N1 y H7N1 virus de la gripe
BioMed Central Judit Szcsi (judit.szecsi @ ens-lyon.fr) [1], Bertrand bosn (bboson@ens-lyon.fr) [1], Per Johnsson (per.johnsson @ ens-lyon.fr) [1], Pia Dupeyrot-Lacas (Pia.DupeyrotLacas @ ens-lyon.fr) [1], Mikhail Matrosovich (Mikhail.Matrosovich @ med.unimarburg.de) [5], Hans-Dieter Klenk (Klenk@med.uni- marburg.de) [5], David Klatzmann (david.klatzmann @ chups.jussieu.fr) [6], Viktor Volchkov (volchkov@cervilyon.inserm.fr) [1], Franois-Loc Cosset (flcosset @ ens - lyon.fr) [1] [1] INSERM, U758, F-69007 Lyon, Francia [2] Ecole Normale Suprieure de Lyon, F-69007 Lyon, Francia [3] IFR128 BioSciences Gerland de Lyon, F-69007 Lyon, Francia [4] Epixis SA, Lyon, F-69007 Lyon, Francia [5] Institut de pieles Virologie, Universitatsklinikum Giessen und Marburg, D-35033 Marburg, Alemania [6] Laboratoire de Biologie et Thrapeutique des Patologas Immunitaires, CNRSUMR7087, Universit Pierre et Marie Curie, Hpital Piti-Salptrire, 83 Bd de l'Hpital, 75013 Paris, Francia Copyright 2006 Szcsi et al; licenciatario BioMed Central Ltd Este es un artculo de acceso abierto distribuido bajo los trminos de la licencia Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/2.0], que permite el uso ilimitado, distribucin y reproduccin en cualquier medio, siempre que la obra original es debidamente citados.

Resumen
Existe una urgente necesidad de desarrollar nuevos enfoques para la vacunacin contra la nueva, altamente patgeno virus de la gripe aviar. En este sentido, la ingeniera influenza viral-al igual que las partculas (gripe-VLPs) derivados de ncleo partculas retrovirales que imitan las propiedades de la superficie viral de dos altamente patgena del virus de la gripe H7N1, ya sea o subtipo H5N1 antignica. Demostramos que, a la recuperacin viral RNAs de un campo de tensin, uno puede fcilmente generar vectores de expresin que codifican la HA, NA y M2 protenas de superficie del virus de cualquiera de preparar y de alto valor de gripe VLPs. Nos caracterizan a estos Gripe-VLPs la incorporacin de la HA, NA y M2 protenas y demostrar que inducen alto ttulo de anticuerpos neutralizantes en ratones. Influenza virus infecta a miles de personas cada ao, causando graves epidemias, con la mortalidad [1]. Por otra parte, existe una creciente preocupacin por una posible pandemia de gripe, como muy virulenta de gripe aviar se estn extendiendo las cepas de Asia sudoriental, con un alto riesgo de cruzar especies de barreras especficas [2].

Con esa amenaza, debemos estar bien preparados para evitar la mortalidad excesiva, en caso de que una pandemia virulenta ocurrir. La vacunacin, hasta la fecha, ha sido la mejor manera de proteger a las personas de la infeccin por influenza. Las vacunas contra la gripe se han utilizado para ca. 50 aos [3]. Las actuales vacunas contra la gripe inactivados son en su mayora frmulas que dependen de la actividad antignica de las glicoprotenas de superficie del virus de la gripe: una hemaglutinina (HA) y neuraminidasa (NA) [4]. Un problema importante, para la elaboracin de una vacuna contra la gripe, es la falta de inmunidad cruzada contra generado diferentes subtipos del virus de la gripe. Esto se debe a la alta capacidad mutagnica del virus de la gripe para generar formas que pueden escapar al sistema inmune. Antignica cambios antignicos y derivas son los mecanismos evolutivos que conducen a serolgicamente diferentes subtipos del virus de la gripe o contra las cepas que una vacuna no es eficaz [5]. De este modo, las nuevas vacunas deben estar preparados durante cada epidemia de gripe estacional y, sobre todo, no hay ninguna vacuna contra la novela, las nuevas cepas de alta patogenicidad. Las vacunas contra la gripe generalmente son producidos a partir de virus cultivados en huevos embrionados de pollo. Esto implica que la fabricacin de una vacuna contra la preparacin, desde la aparicin de un nuevo subtipo de virus de la gripe hasta la disposicin de la vacuna, lleva varios meses [6]. Por otra parte, hay que modificar el HA de la gripe altamente virulentas cepas con el fin de ser capaces de producir vacunas sin matar a los embriones. Recientemente, invertir mtodos genticos han sido utilizados para producir las vacunas por cultivo celular [6, 7]. Por ltimo, en caso de una pandemia, la vacuna contra la produccin tiene que ser masiva, rpida y segura. En total, hay una gran necesidad para el desarrollo de nuevas formulaciones inmunognica que puede ser preparado rpidamente como las vacunas contra las nuevas aviar altamente patgena del virus de la gripe. Como un paso a lo largo de esta carretera, aqu se describe un nuevo virus de la gripe inmungeno utilizando la ingeniera viral-al igual que las partculas (gripe-VLPs) que imitan las propiedades de la superficie viral de dos altamente patgena del virus de la gripe H7N1 y H5N1 subtipos. Se ha utilizado la superficie de las protenas HA, NA y M2 de dos altamente patgeno virus de la gripe aviar: A/Chicken/FPV/Rostock/1934 (H7N1) [8] y A/Thailand/KAN-1/04 (H5N1) [9, 10 ] Para generar la gripe VLPs (H7-VLPs y H5-VLPs, respectivamente). La hemaglutinina de influenza es responsable de virion apego a las clulas diana a travs del reconocimiento y unin a la terminal de cido sialic grupos en la membrana de protenas obligado de la clula husped (revisado en [11]]. La neuraminidasa destruye no funcionales receptores a los que se puede obligar a hemaglutinina y, por tanto, facilita el acceso a virus de las clulas diana en las primeras etapas de la infeccin y promueve la salida de la progenie viral partculas de las clulas infectadas a finales de la infeccin [12, 13]. M2 es una pequea protena transmembrana con un canal inico la actividad que regula el pH en el interior del virion viral durante la entrada en la clula y la protege nueva sntesis de cido-lbil H5 y H7 hemagglutinins durante su transporte a travs de pH bajo compartimientos celulares (revisado en [14, 15] ). Clonacin de vectores de expresin para la HA, NA y M2 del virus H7N1 se ha descrito en otra parte [8, 16 - 19]. La cepa aislada de virus humanos de infeccin por virus H5N1, A/Thailand/KAN-1/04 (H5N1) [9], fue amablemente facilitada por Pilaipan Puthavathana la Universidad de Mahidol, Bangkok, Tailandia. Hemos hecho un paso de la semilla original del virus en las clulas MDCK y aislado viral RNA utilizando el Alto Pure RNA Kit de aislamiento (Roche Molecular bioqumicos, Mannheim, Alemania). HA, NA y M2 de codificacin de secuencias fueron amplificados total de ARN viral mediante Superndice de transcriptasa reversa y primers especficos

(secuencias estn disponibles bajo peticin). Productos de PCR fueron introducidos en un promotor CMV impulsada por el plsmido de expresin de una manera idntica a la utilizada para H7N1 [18]. Gripe-VLPs estaban reunidos en la replicacin de las partculas central defectuoso derivados de virus de la leucemia murina (MLV). Para efectos de inmunizacin, que consisti en vaco "ncleo" de partculas generadas por la nica expresin de las protenas Gag MLV [20], mientras que para los ensayos de infecciosas, que comprende MLV GagPol protenas recombinantes y una codificacin del genoma la protena verde fluorescente (GFP) [16 , 19]. Transduccin de este gen marcador en el 'infectadas' las clulas diana y la expresin de GFP en las clulas transduced es, en efecto, un reflejo fiel de la infeccin pasos mediada por las glicoprotenas de la superficie de retrovirus derivados de VLPs [17, 21, 22] y, por lo tanto, es un manera conveniente para el estudio de clulas entrada y neutralizacin de virus altamente patgenos en los laboratorios de categora 2 [23 - 25]. Nos produce la gripe-VLPs acogida en su superficie HA, HA y NA, ya sea o M2, o las tres protenas derivadas de la H7N1 o virus H5N1, de la expresin transitoria en clulas 293T de superficie (HA, NA, M2) e internos (Gag, GFP marcador genoma) los componentes virales. Expresin de las diferentes protenas virales en las clulas de productores y su incorporacin a amortiguar-sacarosa purificada partculas virales se caracteriz por Western blot utilizando anticuerpos especficos primaria (Fig. 1A]. Todas las protenas son fcilmente expresadas en las clulas de productores (no se muestra). La hemaglutinina, que se detect como uncleaved HA 0 precursores y HA 1 / HA 2 exfoliados maduro formas, ha sido admitida en la superficie de las partculas virales en los niveles ms altos para ambos VLPs-H7 y H5-VLPs, cuando se expresa junto con NA (Fig. 1A ). La neuraminidasa y la protena M2 Tambin se han detectado en purificado partculas virales (Fig. 1A], an en niveles bajos en comparacin con su expresin en las clulas de productores (datos no presentados). La expresin de la gripe durante M2-VLP produccin no haya influido en la incorporacin de HA o NA en las partculas virales (Fig. 1A]. En cambio, slo pequeas cantidades de protenas HA fueron detectados en las partculas de NA cuando no era co-productor expresado en las clulas, con una baja correlacin entre las cantidades de Gag-MLV derivados cpside (CA), protenas (Fig. 1A]. Esto fue probablemente debido a una menor efectividad de liberacin de VLPs en el sobrenadante de clulas en ausencia de NA. De hecho el tratamiento de estas ltimas clulas purificadas con neuraminidasa de Vibrio cholerae eficiente inducida por la liberacin de partculas virales (datos no presentados). Esto confirma el papel esencial de NA para promover la liberacin de partculas virales de la superficie celular mediante la eliminacin de cido sialic receptores de las clulas de productores [12, 26]. Para estimar la concentracin de la gripe-VLPs, se determin su "transduccin de ttulos' mediante la adicin de diluciones seriadas de los preparativos de partculas virales albergar un gen marcador GFP a TE671 rabdomiosarcoma clulas humanas. El medio fue entonces sustituido por un medio de cultivo normal y la transduccin de ttulo se deduca 72 horas ms tarde desde el porcentaje de buenas prcticas agrarias de clulas positivas medido por fluorescencia de clulas activadas por clasificador (FACS) el anlisis, tal como est descrita anteriormente [22]. De acuerdo con datos bioqumicos (Figura 1A], la gripe-VLPs produce en ausencia de NA muestran relativamente bajo de transduccin de ttulos, por debajo de tu 10 5 / ml (Fig. 1B]. En consonancia con su efecto sobre la incorporacin HA (Figura 1A], la presencia de NA aumento de la infectividad de alrededor de 100 veces para H7-VLPs

y 1000 veces para H5-VLPs, el aumento de transduccin de ttulos superiores a los obtenidos con VLPs acogida VSV-G ( VSV-VLPs), uno de los ms eficientes viral glicoprotena de superficie en estas determinaciones [17]. De nota, la infecciosidad de la gripe-VLPs se concreta y completamente abolida por el suero inmune de los animales inoculados con el tipo salvaje del virus de la gripe (Figura 2A]. Curiosamente, la transduccin de ttulos obtenidos con VLPs-H7 fueron alrededor de 50 veces ms bajos que los obtenidos con H5-VLPs (Fig. 1B]. Por otra parte, la incorporacin de M2 a la gripe-VLPs aumento de la infectividad de H7-VLPs de alrededor de 10 veces (Figura 1B], como se inform anteriormente [27], pero no el de H5-VLPs, lo ms similar H5 HA incorporacin se alcanzaron los niveles independientemente de si o no se expres M2 (Fig. 1A]. Esto sugiere que H7 HA, pero no H5 HA, fue sensible a M2 funciones. En consonancia con su capacidad para regular el interior de pH endosomal compartimentos, el papel de gripe durante M2-VLP produccin es, probablemente, para evitar la acidificacin y la activacin prematura de la protena HA, un evento para que el virus H7N1 HA es aparentemente ms sensible que la HA de virus H5N1 cepa utilizada en este estudio. En conjunto, estos resultados indican que la HA, NA y M2 incorpora a la superficie de VLPs son funcionales, ya que mediar eficazmente clulas entrada. Estamos entonces a analizar si la gripe VLPs albergar las tres protenas virales pueden inducir una respuesta inmunitaria especfica y anticuerpos neutralizantes en ratones. Para estos estudios, H7-VLPs o H5-VLPs se concentraron y se purifica por ultracentrifugacin [19] antes de la inyeccin en ratones BalbC. Control de VLPs, la incorporacin de la VSV-G glicoprotena [17, 18], tambin se prepara y se inyecta a ratones en paralelo. Como un intento de inducir la cruz-anticuerpos neutralizantes contra diferentes cepas de gripe, generamos H7-VLPs o H5-VLPs tratados con una solucin tampn de citrato en pH5.3 durante 10 minutos. De hecho, a bajo pH, HA irreversible sufre cambios conformacionales que son necesarios para inducir la fusin de la membrana [28]. Tales cambios conformacionales alterar la estructura y antigenicidad de Alta Disponibilidad [29, 30] y puede resultar en la exposicin de eptopos conservados, escondidos en la conformacin HA nativo, que podra inducir transversal anticuerpos neutralizantes que no son planteados de otra manera, sobre todo en regiones conservadas de HA 2 [31]. Cambios conformacionales fueron verificadas por la demostracin de una completa prdida de la infecciosidad de bajo pH tratada con partculas (datos no presentados) [28]. Acerca de 10 8 de partculas H7-VLPs o H5-VLPs, tratados o no tratados, a bajo pH, as como VSV-VLPs partculas en repetidas ocasiones se inyecta por va intraperitoneal a 5 semanas de edad, mujeres BalbC ratones a las 2 semanas de intervalo. Los sueros fueron cosechadas 2 semanas despus de cada inyeccin (cosechas S1, S2, S3 y S4) y se decomplemented inactivacin por calor a 56 C durante 1 hora. A continuacin se determin la actividad neutralizante de los sueros utilizando la gripe-o VLPs el VSV-VLPs albergar un gen marcador GFP. Los resultados de un experimento tpico se muestra en la Fig. 2A, se muestran como el% de neutralizacin de la S2 suero en comparacin con el pre-S0 sueros inmunes, es decir, el suero recolectadas antes de la primera inoculacin para cada ratn, por un 1 / 100 de dilucin de estos sueros. El suero de los ratones inyectados con H7-VLPs neutralizado especficamente H7-VLPs, pero ni el H5-VLPs ni el VSV-VLPs y viceversa. El suero de los ratones inyectados con nativos de gripe VLPs neutralizado de manera ms eficiente la homloga de gripe VLPs de los sueros de ratones inyectados con pH cido desnaturalizado VLPs de gripe, pero no la neutralizacin cruzada se observ para la ltima sueros. En consonancia, como prueba en

immunoblots de H7-VLPs vs. H5-VLPs, no reactividad cruzada del H7 y H5-VLP sueros se observ para HA. Los anticuerpos contra el M2 que detect M2, ya sea de cepa del virus de la influenza se han planteado en algunos ratones inmunizados (Figura 2B], de acuerdo con la fuerte homologa de secuencia entre H7 M2 y H5 M2. No hay reaccin cruzada NA anticuerpos pueden ser detectados (Fig. 2B], quizs debido a la relativamente ineficientes incorporacin de esta glicoprotena en la gripe de VLPs. Slo algunos otros no especficos de protena se observaron bandas (Fig. 2B], lo que sugiere que la respuesta de anticuerpos contra la gripe-VLPs era especfica. Para investigar cmo neutralizar el aumento de ttulos despus de repetidas inmunizaciones, a fin de determinar las curvas de valoracin para cada suero cosecha. Los resultados se muestran en la Fig. 2C como la media de valores de neutralizacin de suero de los distintos grupos de ratones. Las curvas de neutralizacin fueron similares para ambos subtipos H5 y H7 de sueros. Se encontr que los sueros S1, cosechados 2 semanas despus de la primera inyeccin, tena una participacin importante en la neutralizacin de la actividad, con un 50% de neutralizacin de activityreached a la 1 / 500 de suero de dilucin y con un ID de 90 a la 1 / 100 de dilucin. La S2, S3 y S4 sueros haba mucho ms alto de neutralizacin de las actividades, incluso a altas diluciones, con acreditacin 95 obtenidas en la 1 / 2500 de dilucin para el S3 y S4 o sueros. En total, estos resultados indican que retrovirales VLPs derivados de la incorporacin de HA, NA y M2 gripe protenas son capaces de inducir la produccin de anticuerpos en ratones. Por otra parte, la respuesta inmune inducida por estas partculas es rpido y robusto, eficaz neutralizacin lograr slo dos semanas despus de la primera inyeccin. Los anticuerpos producidos son especficos, ya que no reaccin cruzada entre las diferentes cepas de influenza se observ. Esa ingeniera Gripe-VLPs, que pueden prepararse con gran rapidez tan pronto como el virus de la gripe ARN's son aislados, por lo tanto, podra proporcionar un mtodo til para obtener de manera oportuna un conjunto eficiente de los reactivos inmunolgicos, tales como sueros, anticuerpos y virus de la gripe-como las partculas para estudiar la neutralizacin de contencin en laboratorios de baja. Por otra parte, proponemos que la gripe VLPs funcional que incorporan el virus de la gripe en las protenas de superficie defectuosa ncleo partculas retrovirales podra proporcionar un til inmunognica aplicable a la formulacin de una vacuna. Esa gripeVLP puede ser aumentado a altos ttulos de mamferos o en cultivos celulares de insectos para preparar vacunas in vitro [32], o, alternativamente, podra ser secretada en vivo a la inoculacin con plsmidos [20] o vectores virales [33 - 35] .

Situacin mundial de la influenza aviar y sus implicancias para Amrica latina

La influenza aviar de alta patogenicidad (IAAP) en aves domsticas, ha sido reportada con una frecuencia creciente a lo largo de los ltimos 55 aos en la industria avcola de diferentes pases y en diversos continentes, situacin sanitaria difcil de explicar por veterinarios, especialistas y cientficos dedicados a temas avcolas y epidemilogos.

Asimismo, la constante circulacin viral, con la presencia y desaparicin del agente de la influenza aviar de baja patogenicidad (IABP), tanto en parvadas de pollos, como de pavos, denota la gran actividad y plasticidad gentica de estos ortomixovirus. El creciente nmero de brotes reportados y debidamente documentados, causados por el virus de IAAP desde mediados del siglo pasado, demuestra una intensa activacin de esta enfermedad, la cual est causando de ms en ms, un mayor nmero de brotes, los cuales toman carcter epizotico y algunos de estos episodios adquieren proporciones de panzootias, como es el caso de la influenza aviar por virus H5N1 en el Sureste Asitico. Este virus ha producido enormes prdidas econmicas debido a la elevada mortalidad, las severas medidas de erradicacin con sacrificio de los animales, controles cuarentenarios y de bioseguridad, la restriccin de movilizacin, control de la comercializacin y las barreras sanitarias nacionales e internacionales, que terminan desbastando la economa avcola y pecuaria de las naciones afectadas. Desde 1955, numerosos brotes de influenza aviar (IA) causados por virus de alta patogenicidad, han sido reportados a la Organizacin Mundial de la Salud Animal (OIE), de tal manera que durante las ltimas seis dcadas se han presentado un promedio de 1.7 brotes por ao en diferentes continentes. Lo ms preocupante es que estas epizootias han ocurrido a lo largo de la dcada de los aos 90 y la dcada actual del presente siglo. En la mayora de los casos, y cuando el diagnstico ha sido confiable y precoz porque han existido los medios tcnicos y econmicos para realizarlos, la IA ha sido controlada por medio de la erradicacin, gracias al sacrificio total de las aves afectadas y de las no afectadas, en estrecha vecindad. Sin embargo, en los pases donde se opt por la vacunacin para el control y la prevencin de esta enfermedad altamente infecto-contagiosa, la IA ha tomado desgraciadamente un carcter crnico-enzotico. Esto hace suponer que los virus causantes de la IA en los prximos aos incrementarn su presencia y acelerarn su virulencia en la avicultura industrial de pases desarrollados y en naciones en desarrollo, por igual, debido al intenso intercambio comercial, resultado y consecuencia directa de numerosos tratados de libre comercio, entre bloques de pases e igualmente a causa de la globalizacin econmica y cultural del mundo. La movilizacin de productos avcolas, as como la diaria trashumancia de millones de seres humanos y el acelerado movimiento areo, sin descartar por supuesto, la posibilidad y el riesgo que representa, la migracin estacional de aves acuticas y terrestres, son los responsables de la difusin de este virus. Este artculo constituye el captulo I del documento Riesgo de introduccin de la influenza aviar en la Repblica Argentina: anlisis preliminar publicado

en el marco del Proyecto de prevencin y control de la influenza aviar en la Argentina, Senasa-IICA-Prosap (BIRF 7425-AR).Etiologa. Los agentes de la influenza aviar forman parte de la familia Orthomixoviridae del tipo A. Son partculas vricas envueltas por una capa bilipdica, que miden aproximadamente 100 nm, portan cido ribonucleico (ARN) y su genoma est dividido en ocho segmentos en sentido inverso. Adems, poseen unas remarcables protenas de superficie, 16 hemogalutininas y 9 neuroaminidadas, lo que les confiere un enorme potencial de recombinacin de hasta 144 diferentes subtipos. De entre ellos, los subtipos ms importantes en medicina aviar son los subtipos H5 y H7. Sin embargo, los virus H9 ostentan un potencial infectante que no debemos perder de vista en el futuro cercano. Los virus responsables de la IA son capaces de provocar severas infecciones agudas en el caso de virus de alta patogenicidad y crnicas, sobre todo, en el caso de virus de baja patogenicidad. Clnicamente cursan con cuadros caracterizados por neumonteroencefalitis. Ahora bien, los subtipos H5 y H7 se pueden clasificar en virus de alta y de baja patogenicidad. La OIE los define de la manera siguiente: "A los efectos del Comercio Internacional, los virus H5 y H7 de influenza aviar notificable (IAN) son aquellos capaces de provocar la enfermedad en aves de corral con IPIV ndice de Patogenicidad intravenosa (IPIV)>1.2 en pollos de 6 semanas de edad o causar mortalidad >75% en pollos de 4-8 semanas de edad inoculados por va intravenosa". Patogenia El proceso infeccioso se inicia con la inhalacin o ingestin de lo viriones infectivos. A continuacin, ocurre la colonizacin de las vas respiratorias altas, en particular, la penetracin ocurre por la mucosa nasal y la faringe, o bien, por la clulas epiteliales de la mucosa intestinal del aparato digestivo. La protena HA0 de las cepas de baja virulencia es desdoblada durante el ciclo de replicacin por proteasas extracelulares del husped que incluyen a la tripsina, presente en un nmero restringido de clulas acotadas al tracto respiratorio e intestinal. Estos virus poseen pocos aminocidos bsicos en el sitio de clivaje. Las cepas de alta virulencia poseen mltiples aminocidos bsicos en el sitio de clivaje de la protena HA0 y son fragmentadas por enzimas intracelulares (endoproteasas) que incluyen a la furina, presente en un gran nmero de tejidos y rganos, causando una intensa viremia. Los daos causados por los ortomixovirus son el resultado de tres procesos: 1) replicacin directa de los virus en clulas, tejidos y rganos; 2) efectos indirectos debidos a la produccin masiva de mediadores celulares, tales

como las citocinas; y 3) isquemias provocadas por trombosis vascular. Signos y lesiones El perodo de incubacin de los virus de IA en aves infectadas naturalmente puede ser muy corto, 24 a 36 horas, dependiendo de la virulencia del agente y de la usceptibilidad del hospedador, puede llegar hasta 14 das. Desde el punto de vista clnico suele ser comn asumir un promedio de 7 das para este parmetro. La intensidad de los signos provocados por los virus de la influenza aviar vara dependiendo de si se trata de agentes de baja o de alta patogenicidad. Los signos respiratorios son tos, estertor traqueal y bronquial, disnea y conjuntivitis. Los signos digestivos son enteritis con hemorragias petequiales y equimticas y con una intensa diarrea de color verde. Finalmente, en algunos casos se abre un cuadro neurolgico que consiste en incoordinacin, ataxia y parlisis con opisttonos y episttonos. Signos usualmente reveladores de la infeccin son la tortcolis y las contracciones tnico-clnicas. Replicacin viral Los virus de influenza presentan un alto rango de error durante su proceso de replicacin, muy en particular, durante la trascripcin de sus genomas, debido a la baja fidelidad de su polimerasa ARN (Parvin et al, 1986). Esto provoca la aparicin de un fenmeno en el cual aparecen subtipos, entre las cuales muchos genotipos virales diferentes co-circulan dentro del husped y cada subespecie de virus tiene potencialmente diferente habilidad para adaptarse al husped (Domingo et al, 1985). La ventaja de la presencia de una alta tasa de error consiste en la habilidad de los virus para adaptarse rpidamente a las nuevas condiciones ambientales. Esto puede ocurrir, por ejemplo, durante la infeccin de una nueva especie de hospedador que requiere de cambios genticos de adaptacin para la replicacin ptima y la transmisin del virus. La principal desventaja que presenta una alta tasa de error es la produccin de muchos genotipos virales que pueden tener una menor capacidad de adaptacin al hospedador original. La mayora de los genotipos son eventualmente eliminados debido a que aportan un factor de seleccin negativo para la replicacin continua del genotipo viral original. Los virus de influenza se encuentran en una gran variedad de especies, a menudo causando cuadros infecciosos severos. Sin embargo, entre los hospedadores naturales de los virus de influenza aviar, incluyendo a las aves acuticas continentales y aves martimas costeras migratorias, el virus se puede considerar inicialmente como avirulento (Slemons et al, 1974). Cuando un virus de influenza infecta a un hospedador de una especie nueva,

puede replicarse causando la enfermedad ocasionalmente, y dicho virus raramente se transmitir en la nueva especie para causar una epizootia. Por ejemplo, el virus H5N1 que provoc la "gripe" de los pollos en Hong Kong y pas de pollos a seres humanos en al menos 18 casos causando seis defunciones durante 1997, mostr afortunadamente en aquel momento, poca capacidad para causar una epidemia de carcter mundial (Mounts et al, 1999). La transmisin entre mamferos tambin puede ocurrir de manera regular; por ejemplo, existen numerosos reportes de virus de influenza porcina que han infectado a seres humanos y viceversa (Dowle et al, 1977). Afortunadamente, los brotes epidmicos resultantes de la transmisin de virus entre especies diferentes son raros. El cruzamiento de virus entre especies puede resultar en la introduccin de un nuevo subtipo, portador de una nueva hemoaglutinina y/o neuraminidasa. Estos cambios antignicos, pueden conducir a una epidemia o pandemia debido a que el nuevo husped no posee inmunidad protectora suficiente contra la nueva cepa. ste, es claramente, el caso reciente de la influenza pandmica A/H1N1 que comenz en marzo-abril del 2009 y que an est en curso. Este tipo de cambios antignicos entre los virus de influenza ha sido reportado en tres ocasiones en la poblacin avcola mundial durante el siglo pasado (Webster et al, 1992) y de las cuales se han aislado mltiples virus. Estos tres casos han sido el brote por el subtipo H5N2 de Pennsylvania de 1983-1984 (Suarez y Senne, 2000), el brote ocurrido en Mxico por un virus H5N2 de 1994-1995 hasta la fecha (Garca et al, 1997), y el brote reportado en el Noreste de los Estados Unidos por el subtipo H7 en los mercados de aves vivas de 1999 hasta el presente (Suarez et al, 1999). Estos tres brotes han sido una estupenda y nica oportunidad para poder estudiar los cambios evolutivos en las aves domsticas, primariamente en los pollos y en los pavos. Ecologa y proceso evolutivo Aunque los virus de la influenza de las aves pueden infectar una amplia variedad de aves y mamferos, el hospedador natural de estos virus son las aves silvestres acuticas migratorias. Cuando otras especies animales, incluyendo pollos, cerdos, caballos, y seres humanos son infectados por virus de IA estos ltimos pueden considerarse como hospedadores aberrantes. La distincin entre un husped normal y uno aberrante es de gran importancia, cuando se intenta determinar la evolucin de los virus en y entre diferentes grupos de hospedadores. La tasa evolutiva de un virus de IA en los reservorios del hospedador natural tiende a ser lenta, mientras que en los mamferos es ms rpida. La tasa de evolucin mayor en mamferos, se piensa que es debida a la presin selectiva ejercida sobre los virus para adaptarse a una especie hospedadora aberrante. El primer brote de IA de alta patogenicidad fue reportado y descrito por el

cientfico italiano Edoardo Perroncito en 1878 (Perroncito, 1878). Se trata de un fascinante reporte que describe la devastadora y virulenta enfermedad como una entidad infecto-contagiosa que afect las aves de corral criadas en los valles y colinas alrededor de la ciudad de Turn, en el Piamonte italiano. Dicha epizootia, se inici con un cuadro clnico caracterizado por signos benignos, que subsecuentemente se transform en un cuadro neumo-enteroenceflico severo que mat a la casi totalidad de las aves criadas en el rea mencionada. Es muy posible que los signos inicialmente descritos por Perroncito correspondan a la forma causada por los virus de influenza aviar de baja patogenicidad y que subsecuentemente, despus de la circulacin dentro de la poblacin susceptible, los virus hayan mutado a la forma de alta patogenicidad. De hecho, gracias a modernas pruebas de biologa molecular, ha sido posible demostrar que los virus de alta patogenicidad han mutado a partir de virus progenitores de baja patogenicidad de los subtipos H5 y H7, en varias ocasiones, incluyendo los brotes de Pennsylvania (1983-84), Mxico (1994-95), Italia (1999-2000) y de Chile (2002). La etiologa viral de la IAAP no fue identificada sino hasta 1901, por otros dos cientficos italianos, Centanni y Savonuzzi, quienes demostraron que la "peste aviar", poda ser reproducida en el laboratorio administrando homogenizados ultrafiltrados en filtros de cermica, obtenidos de rganos colectados de aves muertas por dicha enfermedad (Centanni y Savunozzi, 1901). La mayor parte de virus de IA han sido aislados de aves silvestres, particularmente de las acuticas pertenecientes a los rdenes Anseriformes y Charadriformes. Estas aves, al parecer son los reservorios naturales y de hecho, funcionan como almacenes de genes, lo que permite la perpetuacin de los virus de IA en la naturaleza. Sin embargo, es muy importante sealar que dichas aves perpetan solamente virus de baja patogenicidad ya que, a pesar del enorme nmero de aislamientos de virus de baja patogenicidad que se hacen de estas especies de aves, muy pocas veces se han aislado virus de alta patogenicidad, por lo que se ha sugerido que ellas son los hospedadores naturales de los virus de IA y en los que los virus se han adaptado adecuadamente. Contrariamente, las aves domsticas, es decir, los individuos del Orden Galliformes, Familia Phaisanidae, no parecen ser los hospedadores naturales de los ortomixovirus. Por lo tanto, el grado de adaptacin al husped es bajo, lo cual podra posiblemente explicar porqu las mutaciones virales documentadas han ocurrido prcticamente siempre en aves domsticas. De hecho, el nico brote de IA de alta patogenicidad en aves silvestres que ha sido reportado asociado a la mortalidad de 1300 golondrinas de mar (Sterna

hirundo) fue en 1961 en frica del Sur. Brotes de influenza aviar de alta patogenicidad reportados desde 1955 Desde que se comprob que los brotes de IAAP son causados por virus muy virulentos de influenza en 1955, y la demostracin de que los virus de los subtipos H5 y H7 son los principales responsables de los brotes de IAAP en 1959, veintids epizootias han sido reportadas en la avicultura industrial en diferentes partes del mundo (Alexander, 2000a). De stas, veintiuna han ocurrido en aves domsticas y solamente una ha ocurrido, como hemos mencionado, en golondrinas martimas silvestres. Tomando en cuenta la zona geogrfica en donde se han reportado los brotes, en relacin al desarrollo y la estructura de la avicultura del pas en cuestin y en lo concerniente a las polticas implementadas de erradicacin o de vacunacin, las epizootias de IAAP han tenido un impacto diferente en la economa de los pases afectados. Por ejemplo, sin duda alguna, la epizootia ocurrida en la Lombarda y en el Veneto italianos y despus en el resto de Italia, causada por virus de alta patogenicidad H7N3, entre 1999 y 2000, ha sido la ms costosa que se tenga conocimiento. Tabla 1.1. Brotes documentados causados por virus altamente patognicos de influenza aviar, reportados desde la identificacin del agente causal de la influenza aviar en 1955. Modificado por Swayne y Suarez, 2000, y Alexander, 2000 (b). Virus de influenza aviar Subtipo Pas A/chicken/Scotland/59 H5N1 Escocia A/tern/South Africa/61 H5N3 frica del Sur A/turkey/Ontario/7732/66 H7N3 Canad A/chicken/Victoria/76 H7N7 Australia A/chicken/Germany/79 H7N7 Alemania A/turkey/England/199/79 H7N7 Inglaterra A/chicken/Pennsylvania/1370/83 H5N2 EE UU A/turkey/Ireland/1378/83 H5N8 Irlanda A/chicken/Victoria/85 H7N7 Australia A/turkey/England/50-92/91 H5N1 Inglaterra

A/chicken/Victoria/92 H7N3 Australia A/chicken/Puebla/8623-607/94 H5N2 Mxico A/chicken/Queretaro/14588-19/95 H5N2 Mxico A/chicken/Queensland/95 H7N3 Australia A/chicken/Pakistan/447/95 H7N3 Pakistn A/chicken/Pakistan/1369-CR2/95 H7N3 Pakistn A/Hong Kong/220/97 H5N1 China A/chicken/New SW/1651/97 H7N4 Australia A/chicken/Italy/330/97 H5N2 Italia A/turkey/Italy/4580/99 H7N1 Italia A/chicken/Chile/2002 H7N3 Chile A/chicken/Holland/2003 H7N7 P. Bajos, Blgica, Alemania A/chicken/Indonesia/2003 H5N1 Indonesia A/chicken/South Korea/2003 H5N1 Corea del Sur A/chicken/Japan/2004 H5N1 Japn A/chicken/Taiwan/2004 H5N2 Taiwan A/chicken/Hong Kong/2004 H5N1 Hong Kong A/chicken/Pakistan/2004 H7N3 Pakistn A/chicken/Viet Nam/2004 H5N1 Vietnam A/chicken/Thailand/2004 H5N1 Tailandia A/chicken/Cambodia/2004 H5N1 Camboya A/chicken/Laos/2004 H5N1 Laos A/chicken/China/2004 H5N1 China A/chicken/Malaysia/2004 H5N1 Malasia

A/chicken/ North Korea/2005 H7N1 Corea del Norte Se deben agregar a la lista arriba descrita, un gran nmero de aislamientos virales a partir de aves silvestres, que se han dado en forma de cascada, entre 2006 y 2009 en Rusia, Ucrania, Croacia, Turqua, Irn, Irak, Grecia, Italia, Francia, Espaa y EE.UU., entre otros, todos ellos por virus H5N1, algunos de alta y otros de baja patogenicidad, as como la mayora de los brotes de IAAP en aves domsticas ocurridos del 2005 al segundo semestre del 2009 en Asia, Europa y frica, particularmente en Indonesia, Vietnam y Egipto. Adems de los brotes mencionados, se han documentado las epizootias de Italia en 1878, Egipto en 1923 y 1945, y la de Estados Unidos en 1929. En Octubre del 2002, se report por medio de la prueba de inhibicin de la hemoaglutinacin, nueva y desalentadoramente, la presencia de un virus de influenza aviar de baja patogenicidad, en este caso un subtipo H7N3 en pavos, en las provincias de Brescia, Mantova, Vicenza y Verona en el norte Italia, con la notificacin de 140 focos. El anlisis filogentico llevado a cabo en el gen de la hemoaglutinina H indic que este aislamiento forma parte del linaje Euroasitico H7. Dicho virus est relacionado con el subtipo H7N1, pero no es parecido al que provoc el brote epizotico de 1999-2001 en Italia. El virus tampoco tiene ninguna relacin con el virus vacunal del subtipo H7N3, con el cual se elabor la vacuna inactivada en aceite que se uso para el control del brote anterior (A/ck/Pakistan/95). Tan pronto como la infeccin pareca salirse de control, se estableci una campaa de vacunacin aprobada previamente por la Comisin Veterinaria de la Comunidad Econmica Europea (Capua et al, 2003). Asimismo, otra importante epidemia de IA de alta patogenicidad ocurri en marzo del ao 2003 en los Pases Bajos, el cual en el transcurso de semanas se extendi a las fronteras de Blgica y despus de Alemania. En los tres casos se procedi a la erradicacin por sacrificio. La catstrofe ocurrida a fines del ao 2003 y a lo largo del 2004, 2005 y 2006 en el Sureste Asitico, causada por un virus H5N1 de alta patogenicidad que afect inicialmente a Indonesia, Corea del Sur, Japn, Vietnam, Tailandia, Camboya, Laos y China, y el subtipo H7N3 de alta patogenicidad que infect a Pakistn, son un excelente ejemplo de la peligrosidad y rapidsima difusin actual de los patgenos, debido a los medios masivos de transportacin area, que potencialmente pueden difundir y contagiar la poblacin animal y/o humana en cuestin de 48-72 horas. Las prdidas que ha sufrido la industria avcola asitica han sido cuantiosas; adems de lo terriblemente preocupante que fue el escape viral zoontico del virus aviar a la poblacin humana y son prueba de la aceleracin de las posibilidades de mutacin (drift) o por error en la hemoaglutinina o neuroaminidasa (shift). Los cambios antignicos del tipo drift, ocurren en

ambos tipos de virus A y B y causan epidemias peridicas, mientras que los shift son responsables de las pandemias mundiales. Este cambio en la situacin epidemiolgica mundial oblig a la OIE, a la FAO y a la Organizacin Mundial de la Salud (OMS) a organizar una reunin de emergencia para el control y prevencin de la influenza aviar en Bangkok, Tailandia, en febrero del 2004 y abril del 2005, para tomar las acciones correctivas, con el objeto de evitar una nueva gran panzootia de influenza aviar a nivel mundial. Es claro y evidente que la influenza aviar, se ha ido transformando de una enfermedad de carcter local, a una de impacto regional y finalmente, mundial. Otro hecho notorio es que ante la globalizacin de las economas del mundo, la IA ha pasado de ser una enfermedad extica a una entidad de carcter enzotico/endmico en muchos pases del mundo principalmente en el Sureste Asitico. Los nicos pases en Amrica cuya industria ha sido recientemente afectada por virus de baja y/o de alta patogenicidad de IA han sido los Estados Unidos en 1983-1984 por virus de IAAP H5N2; Mxico en 1994-1995 por virus de IAAP H5N2; Chile en junio de 2002 por virus de IAAP H7N3; Canad en 2007 y 2008 por virus IAAP H7N3; Guatemala por virus de IABP H5N2 en el 2000 y El Salvador en el 2001; Repblica Dominicana por virus de IABP en el 2008 y Hait en el mismo ao. Control y erradicacin La mejor accin para un pas, zona o compartimento en el control y la prevencin de la influenza aviar es la erradicacin total por medio del sacrificio de los animales enfermos y la destruccin de los cadveres y de todos los elementos relacionados con las aves infectadas (cama, alimento, etc.). El lavado y desinfeccin de los galpones y material contaminado, de acuerdo a las normas especificadas por la OIE en su Cdigo de Salud para los Animales Terrestres, es otra de las prcticas a implementar. En algunos pases, las caractersticas de su industria avcola y las circunstancias en que se han presentado los brotes y epizootias causadas por virus de alta y de baja patogenicidad de la IA, obligaron a recurrir a la vacunacin, como han sido los casos de Mxico, Guatemala, El Salvador, Italia, algunos estados de la Unin Americana, Tailandia, China, Indonesia y ms recientemente, Egipto. Existen dos tipos de inmungenos para la prevencin de la IA: las vacunas inactivadas en vehculo oleoso y las vacunas recombinantes. Las primeras se han empleado amplia y masivamente en los pases arriba mencionados. Son muy seguras, inmunognicas y se elaboran, en general con virus homlogos. Las segundas son igualmente eficientes, se aplican al da de edad en la planta

de incubacin. El efecto alcanzado por las vacunas es la disminucin de la excrecin viral en los enfermos. Las aves vacunadas requieren una mayor concentracin viral para enfermarse y la tasa de mortalidad y morbilidad es menor. Conclusiones De los casos mencionados, podemos observar que las hemoaglutininas ms comunes en patologa e infectologa aviar, son la H5 y la H7. Adems de los brotes de IAAP ocurridos desde 1955, el 58 % de los casos fueron causados por subtipos H5 y el 42 % de los brotes fueron provocados por subtipos H7. Todos los continentes han sido afectados. Es evidente que nos encontramos ante una preocupante reactivacin y aceleracin de esta virosis, provocada sin duda alguna, por el intenso comercio intra e intercontinental, que ha favorecido la introduccin de virus de baja patogenicidad en aviculturas de regiones geogrficas que estaban libres y que consideraban a esta infeccin como una enfermedad extica. Conforme vaya aumentando la comercializacin ir, por ende, aumentando el riesgo y la alta posibilidad de la aparicin de un mayor nmero de brotes con una mayor frecuencia. Los servicios de salud animal de los pases que cuenten con una avicultura industrial de poca consideracin o de gran importancia, debern implementar las medidas sanitarias estipuladas por la OIE, debern capacitar al personal veterinario y a los profesionales afines para establecer campaas de vigilancia pasiva y activa permanentemente a nivel nacional e internacional, llevar a cabo muestreos constantes, aislamiento viral y el estudio gentico de las secuencias de amino cidos en el sitio de ruptura de las hemoaglutininas con el objeto de construir los rboles filogenticos y los linajes de los virus aislados, para as poder hacer el rastreo de los mismos. Los organismos sanitarios nacionales e internacionales y la industria avcola mundial, debern procurar fondos econmicos necesarios para financiar la construccin y el funcionamiento de laboratorios tanto a nivel nacional como regional y laboratorios de referencia internacional para organizarse por medio de una red global de laboratorios de diagnstico y de referencia para IA, con el objeto de hacer exitosamente el control y la prevencin de esta enfermedad aviar. En la mayora de los pases se ha optado con xito por la erradicacin por medio del sacrificio de cientos de miles o millones de aves, como fue el caso chileno. Sin embargo, en otros pases como Mxico, Guatemala, El Salvador, Pakistn e Italia, debido a las caractersticas especficas y especiales que enfrentaron en su momento, se vieron obligados a recurrir a la vacunacin como herramienta para el control y prevencin de esta enfermedad, permitiendo que la IA haya tomado en ellos un carcter enzotico, mientras que en otros pases o regiones la enfermedad sea considerada an, como una entidad infecciosa extica.

Situacin actual del subtipo H7N3 del virus de influenza aviar en Mxico
12/11/12 | Alejandro Garca , Introduccin Desde hace tiempo los virus de Influenza Aviar han mostrado ser una amenaza constante para la produccin avcola y salud humana, debido a que muta muy frecuente y a su constante movimiento gentico. Los recientes eventos con diferentes subtipos del virus de Influenza como (2) H5N1 o H1N1 pandmico en Asia, Europa, Medio Oriente y frica, ilustra sto . Influenza Aviar (IA), es una enfermedad de animales; Veterinarios y Cientficos Veterinarios juegan un papel importante en el manejo y prevencin, para que la enfermedad no tenga contacto con humanos. Debemos resolver el problema de los portadores (aves silvestres y migratorias), ya que el virus es movilizado por ellas, poniendo en riesgo a las parvadas avcolas comerciales. El control y la prevencin de estas aves es esencial para evitar una posible (27, 28) pandemia humana . Virus de Influenza Tipos: A, Subtipos: H1 N1 Patotipos: Baja y Alta Genotipos: Clades (H5N1)(7). se B a a patogenicidad (H5 y dividen y en: C H17 N9 H7).

Los virus de Influenza son ARN segmentados, de sentido negativo, los virus poseen envoltura y pueden infectar una gran variedad de aves y mamferos. Sin embargo, el reservorio original de los virus de Influenza se considera que son las aves acuticas silvestres, gaviotas y aves (35) playeras .

El virus demuestra un alto grado de variacin gentica, sobre todo en los genes de la hemaglutinina y la neuraminidasa, con 17 distintas hemaglutininas y 9 subtipos diferentes de neuraminidasa, casi todas se han identificado en aves silvestres a excepcin de H17, la cual se aisl en vampiros que habitan Guatemala. Muchos de estas hemaglutininas (HA) y neuraminidasa (NA) tambin han sido aislados de aves de corral, aunque los pollos y pavos no se consideran un reservorio para el virus de la Influenza Aviar.

La Influenza tambin es comn en algunas especies de mamferos, incluyendo cerdos, caballos y seres humanos, pero slo con seleccionadas subtipos HA y NA, incluyendo la influenza H1N1 (21) en los cerdos, los caballos H3N8, y H1N1 y H3N2 en los seres humanos . Debido a la propensin de los virus de recombinarse e infectar a otras especies, virus con nuevas combinaciones de genes pueden surgir. Por ejemplo, los recientes brotes de influenza en cerdos de Amrica del Norte han incluido no slo los clsicos de los virus H1N1, sino tambin a (12, 40) los virus H3N2 y H1N2 . El virus de la Influenza, al igual que otros virus de ARN, carece de un mecanismo de "correccin", los pequeos errores que se producen cuando el virus se replica no se corrigen. Como resultado, su composicin gentica cambia constantemente de varias maneras. A estos pequeos cambios del mismo subtipo del virus de Influenza A se le conoce como antignico (25) "drift" . Est bien documentado que el virus de Influenza humana se somete a variaciones antignicas frecuente, que es la acumulacin de mutaciones puntuales en el dominio antignico de la protena HA. Como resultado, los virus con una estructura antignica ligeramente cambiada emergen y puede escapar a la inmunidad adquirida del husped, si esta inmunidad se adquiere por infeccin natural o vacunacin. Por lo tanto, para mantener una ptima proteccin mediante la vacunacin, las cepas predominantes en la actualidad de los virus de Influenza deben ser incluidos en la vacuna contra la Influenza cada ao, lo que requiere una reevaluacin anual y los frecuentes cambios a la formulacin de la vacuna. Debido a sus ocho segmentos de ARN, el virus puede compartir sus genes, entre el mismo subtipo, como ejemplo el brote que se present en 2002 en Chile con el subtipo H7N3 aislado de reproductoras pesadas, ah se insertaron en la HA, 30 aminocidos que provenan de la NP del mismo subtipo, o en Canad en 2004 con el mismo subtipo, en ese caso se insertaron en la HA, aminocidos provenientes del gen de la Matrix. O la insercin en la HA del virus de IA, de material gentico del tipo 28S rRNA, proveniente de clulas aviares, como sera el caso del virus Mexicano H7N3, en donde se insertaron 8 aminocidos en el sitio de incisin de la HA, Otro evento de mayor riesgo es cuando diferentes subtipos de HA y NA, llegan a infectar a la misma clula, cuando esto sucede, un nuevo virus hbrido se produce. Este dramtico suceso se conoce como antignico "shift". Como las poblaciones humanas no tienen inmunidad contra el nuevo virus resultante, y como no hay ninguna vacuna que puede proporcionar una proteccin adecuada, el cambio antignico ha resultado histricamente en las pandemias que causan enfermedades inusualmente severas en un gran nmero de personas. Para que esto ocurra, el nuevo subtipo debe tener genes de virus de Influenza humana que le permitan (8, 16, 32, 34) transmitirse fcilmente de humano a humano . Eventos genticos generan patogenicidad en virus influenza aviar Adquisicin de nucletidos a partir de genoma aviar. Ej. H7N3 Mxico. Recombinacin Gentica entre mismo subtipo. H7N3 (HA-NP- Chile); H7N3 (HA-M Canad). Recombinacin Gentica entre diferentes subtipos Antgeno Shift. H5N1 Asitico; H1N1 Pandmico. Substitucin de nucletidos en algunos genes. Antgeno Drift. H7N7 ( PB1 -Holanda); NS, H1N1- 1918. Produccin Interfern y sobreproduccin de inflamatorias citoquinas mediante macrfagos, causando severa aguda neumona en el husped. Eliminacin de nucletidos en algunos genes (NA, NS). Sitios de Glicolisacin, H5N2 ( Pennsylvania USA, 1983). El primer brote de alta patogenicidad del virus de Influenza Aviar fue reportado y descrito por el cientfico italiano Edoardo Perroncito en 1878. Este es un informe innovador que describe la

enfermedad devastadora y virulenta como una entidad contagiosa que afect a las aves. La etiologa del virus altamente patgeno no fue identificado hasta 1901, por dos cientficos italianos que mostraron que la "gripe aviar" podra ser reproducida en el laboratorio mediante la administracin de ultrafiltrados homogeneizados en filtros de cermica, usando rganos procedentes de aves muertas afectadas por la enfermedad. La mayora de los virus de Influenza Aviar han sido aislados de aves migratorias, en particular de aves acuticas pertenecientes a los rdenes Anseriformes y Charadriformes. Estas aves son aparentemente los reservorios naturales y de hecho, sirven como almacn de genes, que (9) permiten la perpetuacin de los virus de Influenza Aviar en la naturaleza . A diferencia de las aves domsticas, quiero decir, del orden Galliformes, familia Phaisanidae, no parecen ser los huspedes naturales de estos orthomyxovirus. Por lo tanto, el grado de adaptacin a estos husped es bajo, lo que podra explicar por qu las mutaciones virales documentadas han ocurrido casi siempre en las aves domsticas. Huspedes del tipo a del virus de influenza.

Ecologa de los virus de influenza aviar. Aves migratorias son el principal reservorio de los tipos A del virus de Influenza, que pueden ser trasmitidos a las aves domesticas y mamferos, incluyendo humanos. Los patos son miembros de la subfamilia Anatinae, la cual contiene la mayora de especies aviares anserine. Esta subfamilia es cosmopolita en distribucin, y sus miembros ocupan casi todos los habitats acuticos. La ecologa de estas aves, facilita el mantenimiento y distribucin de los virus de Influenza Aviar. Aunque aislamientos del tipo A de Influenza en humanos y el actual H5N1 AP, tpicamente infecta el tracto respiratorio superior, el sitio primario de infeccin en los patos es el intestino. Los virus de Influenza Aviar entran al medio ambiente cuando el husped defeca o secreta lquido bucal, y es cuando estas aves infectan huspedes susceptibles mediante el agua o alimento. El ttulo viral de los subtipos H4N7, H7N3 y H11N9

en patos Mallard, es mayor y con ms persistencia en eliminacin traqueal que mediante heces fecales. Cada pato infectado, se estima que puede eliminar al medio ambiente, 1 billn de viriones mediante heces fecales, adems estos viriones son estables en el agua. Los virus han sido aislados de agua de la superficie de presas, en donde llegan aves migratorias. La trasmisin por aerosoles no debe ser descartada. La informacin anterior, provoca que estos virus de baja patogenicidad persistan en la poblacin de patos a travs de la trasmisin fecal-oral. Este mecanismo podra explicar parcialmente la alta prevalencia de infeccin de los patos Dabbling, ya que sus hbitos alimenticios son superficiales, en comparacin con los patos (buceadores), que tienen menor tasa de aislamiento viral y en donde su alimento est en las partes ms profundas de estos depsitos de agua. La prevalencia de infeccin en patos de Norte Amrica y Euro Asia, exhibe un patrn anual cclico, con el ndice mximo antes y durante la migracin otoal, como resultado de afluencia de aves jvenes inmunolgicamente inmaduras. Experimentalmente patos Pekn infectados han eliminado el virus durante 3 semanas. No es muy claro cmo la poblacin de patos adquieren los virus de Influenza durante la primavera de cada ao. Viriones infectantes quiz persistan durante el invierno en las aguas congeladas de las reas de reproduccin y se re - infectan los patos cuando stos retornan en primavera. Alternativamente, la poblacin de patos, quiz lleve los virus durante toda su migracin, esto debido a que durante un ao completo existe prevalencia en los patos. Aunque la persistencia en habitats congelados, podra jugar un papel importante en la perpetuacin de los virus. Algunos subtipos son aislados con ms frecuencia que otros. Tres subtipos H3, H4, y H6, son comunes en patos tanto de Norte Amrica como Europa. Y la combinacin ms frecuente es H4N6 y H6N2. Es de mencionar que estos subtipos, cuando en forma experimental se les han adiciona aminocidos bsicos en la conexin peptdica de la HA, han mostrado capacidad de virulencia en aves domsticas. Es sabido que a los patos se les considera los Caballos De Troya, ya que de stos puedes salir virus altamente patgenos, sin que se afecten estas aves, pero a las aves comercial s provocan severos daos, como sera el caso del H5N1, el cual fue aislado de estas aves en Indonesia y Japn. El precursor de este subtipo de IAAP, se sabe que se origin de patos que venan de Japn y llegaron a Hong Kong, el virus en ese momento era de Baja Patogenicidad. Eventos de mortalidad en aves migratorias. 1961. Sudfrica. H5N3 golondrinas 2002. Kowloon y Penfold Park en Hong Kong. 2005. Qinghai Lake en China. H5N1 - Patos, Gansos, Cisnes. de H5N1 Mar. Patos.

La Influenza Aviar puede manifestarse con una variedad de sntomas en pollos y pavos, a partir de una infeccin clnicamente inaparente a una con alta mortalidad. El virus generalmente se puede separar en virus que causan principalmente una infeccin de mucosas y vas respiratorias, referida como Influenza Aviar de Baja Patogenicidad (IABP). Estos virus son ms comnmente aislados de aves comerciales, y los signos clnicos generalmente varan desde una infeccin asintomtica a bajas en la produccin de huevos y enfermedad respiratoria leve, aunque algunos virus de baja patogenicidad pueden causar mortalidad, generalmente debido a (26) la coinfeccin con patgenos secundarios . Virus de Influenza Aviar de Alta Patogenicidad causa alta morbilidad y mortalidad, y est en la lista A de la Oficina Internacional de Epizootias (OIE). IAAP se considera una enfermedad extica en los Estados Unidos y Mxico. La OIE considera a los subtipos H5 y H7 como importantes para los pollos, los cuales son poco frecuentes aislados de aves migratorias, a menudo causan brotes de Influenza en pollos y pavos en los Estados Unidos. La razn de la discrepancia aparente entre los subtipos de distribucin de los virus de Influenza en patos silvestres y las aves domsticas sigue siendo (9) desconocido . Histricamente, slo los subtipos H5 y H7 de Influenza se asocian con virus de Alta Patogenicidad aviar. Debido a la creciente preocupacin acerca de los virus H5 y H7 de Influenza, cepas representativas de estos brotes fueron secuenciadas y comparados con las bases de datos existentes para determinar la secuencia de las relaciones de cada virus, utilizando el anlisis filogentico. Este anlisis de secuenciacin tambin se conoce como epidemiologa molecular, y proporciona la forma ms precisa de determinar las relaciones de (29) los aislamientos de los virus entre s . En los ltimos diez aos, ha habido ms de sesenta brotes con el virus de Alta Patogenicidad de Influenza Aviar H5 y H7, estos serotipos han afectado a diferentes animales y se han identificado en diferentes continentes (Amrica, Europa, Asia, Oceana y frica), siete de estos (14, 22) brotes de alta patogenicidad han provenido de virus de baja patogenicidad . 31 eventos de IAAP

Los pases del Continente Americano que recientemente han sido afectados por el virus de Influenza Aviar de Baja y/o Alta Patogenicidad son: Estados Unidos en 1983-1984 H5N2 Influenza Aviar del virus altamente patgeno, Mxico en 1994-1995 virus H5N2 HPAI, Chile en junio de 2002 con el virus Influenza Aviar altamente patgena H7N3, Canad en 2007 y 2008 con HPAI subtipo H7N3, el virus de baja patogenicidad H5N2 en Guatemala en el ao 2000 y El Salvador en 2001, la Repblica Dominicana con el virus de Influenza Aviar de Baja (35) Patogenicidad en 2008 y Hait en el mismo ao . En la mayora de los brotes de Influenza Aviar, las aves afectadas fueron sacrificadas, adems de todas las aves que se encontraban en un radio de 6 kilmetros, este procedimiento, junto con medidas de bioseguridad, han contribuido a controlar las enfermedades y en algunos (34) pases, Influenza Aviar ha desaparecido (Chile, Canad, EE.UU., etc.) . Subtipo h7 de alta patogenicidad. H7N3, H7N7 y H7N1, son los subtipos de Influenza Aviar, que han sido reconocidos como causantes de brotes graves de Influenza en diferentes partes del mundo, en donde ha afectado a: pollos de engorde, ponedoras, aves de combate, pavos, avestruces, patos, gallinas de (41) guinea, codornices, faisanes y aves de corral . Subtipos H7 IABP - ltimos 5 aos.

La tasa de mutacin para estos subtipos H7, en lo que se refiere a cambios de nucletidos en el gen de la hemaglutinina, se ha estimado mediante el anlisis de regresin lineal y fue de 7.0 X10-3 sustituciones de nucletidos por sitio por ao. Esta tasa de mutacin es similar a las tasas de mutacin que se han descrito anteriormente para el virus H3 de influenza humana. Sin embargo, se estima que la tasa de mutacin del virus de influenza aviar H7 es menor al subtipo H5. Los brotes del virus de Influenza Aviar H7 se han venido observando desde 1994, y se han (30) aislado principalmente en los mercados de aves vivas en el noreste de Estados Unidos . Estos mercados de aves vivas, a menudo atienden a grupos tnicos especficos, proporcionan una gran variedad de aves de corral vivas, incluyendo pollos, pavos, aves de caza, y patos que pueden ser sacrificados en el lugar o vendidos en directo para el consumidor. Como parte de un programa de vigilancia federal activo, muchos subtipos diferentes del virus de Influenza Aviar han sido aislados de estos mercados de aves vivas. Virus de Influenza Aviar H7N2 ha estado circulando en el noreste de Estados Unidos desde 1994 y ha sido asociado con al menos cinco diferentes brotes en aves industrializadas en siete estados. La preocupacin por mercados de aves vivas en la introduccin del virus de Influenza Aviar se ha trasladado hasta Hong Kong, ah se prohbe la venta de patos y gansos vivos en los mercados, adems de un programa integral de vigilancia y estrictos requisitos sanitarios. Estos cambios han resultado ser eficaces para reducir la incidencia de aves infectadas en los mercados. Y disminuir un riesgo adicional de una posible introduccin a las parvadas comerciales y humanos. H7 altamente patgeno en avicultura mundial de 1990 a 2012.

Pases que erradicaron el subtipo H7N3 de influenza aviar altamente patgeno.

La erradicacin fue lograda en estos pases, mediante el sacrificio inmediato de parvadas afectadas y cercanas al brote, as como restriccin de movimiento de aves, subproductos, etc., y estrictas medidas de bioseguridad. Adems de contar con el apoyo de sus gobiernos, mediante la compensacin. Es de mencionar que estos dos virus altamente patgeno, afectaron reproductoras pesadas y se originaron rpidamente (3 semanas) de virus de baja patogenicidad. Casos humanos En los Pases Bajos en febrero de 2003, del subtipo H7N7 de Influenza Aviar caus enfermedad leve en 89 personas y muri un veterinario, del pulmn se aisl el virus, esta es la nica comunicacin de accidentes mortales en seres humanos. En 2004, dos trabajadores de aves comerciales desarrollaron sntomas respiratorios y conjuntivitis leve, despus de un brote de Influenza Aviar altamente patgena H7N3 en Canad. La Agencia de Proteccin en Salud del Reino Unido informa al menos 4 infecciones en seres humanos con Influenza Aviar de Baja Patogenicidad H7N2. Los casos reportados estn asociados con infecciones H7N2 en aves de corral. Situacin en Mamferos.

Hasta principios de 1960 slo el subtipo H7N7 del virus de Influenza era reconocido en caballos, el subtipo H3N8 comenz a suplantar al H7N7. En este caso, el subtipo pareca ser una introduccin completamente nueva de este virus en la poblacin de caballos. Un virus de Influenza Aviar altamente patgena H7N7 ha causado infecciones en cerdos sin enfermedad durante un brote en Holanda en 2003. Programa de vacunacin. Italia y USA, vacunan a los pavos. Pakistn, utiliza vacuna inactivada emulsionada que contiene tres subtipos de IA (H5, H7 y H9).

I NFLUE NZ A AV I AR

Artculo 10.4.1. Disposiciones generales

1. A efectos de comercio internacional, la influenza aviar de declaracin obligatoria es una infeccin de las aves de corral causada por cualquiera de los virus de influenza aviar de tipo A perteneciente a los subtipos H5 o H7 o por cualquiera de los virus de influenza aviar con un ndice de patogenicidad intravenosa (IPIV) superior a 1,2 (o que cause mortalidad en al menos el 75% de los casos) como se describe a continuacin. Los virus de la influenza aviar de declaracin obligatoria se dividen en dos categoras: virus altamente patgenos y virus levemente patgenos. a. Los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos tienen un IPIV superior a 1,2 en pollos de 6 semanas de edad, o causan la muerte de al menos el 75% de los pollos de 4 a 8 semanas de edad infectados por va intravenosa. Los virus H5 y H7 que no tienen un IPIV superior a 1,2 o que causan una mortalidad inferior al 75% en una prueba de capacidad letal intravenosa debern ser secuenciados para determinar si en el sitio de escisin de la molcula de hemoaglutinina (H0) se hallan presentes mltiples aminocidos bsicos. Si la secuencia de aminocidos es la misma que la observada en otros virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos aislados anteriormente, se considerar que se trata de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos. b. Los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria levemente patgenos son todos los virus de influenza aviar de tipo A pertenecientes a los subtipos H5 y H7 que no son virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos. Las aves de corral son todas las aves domesticadas, incluidas las de traspatio, que se utilizan para la produccin de carne y huevos destinados al consumo, la produccin de otros productos comerciales, la repoblacin de aves de caza o la reproduccin de todas estas categoras de aves, as como los gallos de pelea, independientemente de los fines para los que se utilicen.

2.

Las aves mantenidas en cautividad por motivos distintos de los enumerados en el prrafo anterior (por ejemplo las aves criadas para espectculos, carreras, exposiciones o concursos, o para la reproduccin o la venta de todas estas categoras de aves, as como las aves de compaa) no se considera que son aves de corral. 3. A efectos de comercio internacional, el presente captulo no trata solamente de la presencia de signos clnicos causados por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria, sino tambin de la presencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria pese a la ausencia de signos clnicos. A efectos de comercio internacional, un Miembro no debe decretar la suspensin inmediata del comercio de productos avcolas en respuesta a una notificacin, de acuerdo con lo dispuesto en el Artculo 1.2.3. del Cdigo Terrestre, de presencia de infeccin por virus de influenza aviar altamente patgenos o levemente patgenos en aves que no sean de corral, incluidas las aves silvestres. Cuando se detecten anticuerpos contra los subtipos H5 o H7 de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria en aves de corral y su presencia no se deba a una vacunacin, se efectuarn investigaciones inmediatamente. En caso de que los resultados positivos sean espordicos, la presencia de infeccin podr descartarse mediante una investigacin epidemiolgica completa e investigaciones en un laboratorio la que no se desprendan ms pruebas de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria. La presencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria se define por: a. el aislamiento y la identificacin de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos o la deteccin de cido ribonucleico (ARN) especfico de este tipo de virus en aves de corral o en un producto derivado de aves de corral, o b. el aislamiento y la identificacin de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria levemente patgenos o la deteccin de ARN especfico de este tipo de virus en aves de corral o en un producto derivado de aves de corral.

4.

5.

6.

A efectos del Cdigo Terrestre, por explotacin libre de influenza aviar de declaracin obligatoria se entender una explotacin en la que una vigilancia epidemiolgica acorde con lo contemplado en los Artculos 10.4.27. a 10.4.33. ha demostrado la ausencia de indicios de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria. A efectos del Cdigo Terrestre, el perodo de incubacin de la influenza aviar de declaracin obligatoria es de 21 das. Las normas para las pruebas de diagnstico y las pruebas de patogenicidad se describen en el Manual Terrestre. Cualquier vacuna que se utilice deber ser conforme a las normas descritas en el Manual Terrestre.

Artculo 10.4.2. Determinacin de la situacin sanitaria de un pas, una zona o un compartimento respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria
La situacin sanitaria de un pas, una zona o un compartimento respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria puede determinarse en funcin de los siguientes criterios: 1. la influenza aviar de declaracin obligatoria sea de declaracin obligatoria en todo el pas, exista un programa continuo de informacin sobre la enfermedad y todas las sospechas de presencia de la enfermedad notificadas sean objeto de investigaciones en el terreno y, si procede, en un laboratorio; una vigilancia adecuada de la enfermedad permita demostrar la presencia de infeccin en aves de corral a pesar de la ausencia de signos clnicos, as como el riesgo asociado a otras aves que no sean de corral; este objetivo se podr alcanzar gracias a un programa de vigilancia de la influenza aviar de declaracin obligatoria acorde con lo contemplado en los Artculos 10.4.27. a 10.4.33.; todos los factores que puedan contribuir a la presencia de la influenza aviar de declaracin obligatoria y el historial de cada uno de ellos sean tomados en consideracin.

2.

3.

Artculo 10.4.3. Pas, zona o compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria
Puede considerarse que un pas, una zona o un compartimento est libre de influenza aviar de declaracin obligatoria cuando una vigilancia de la enfermedad acorde con lo contemplado en los Artculos 10.4.27. a 10.4.33. ha demostrado la ausencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos y levemente patgenos en aves de corral en el pas, la zona o el compartimento durante los 12 ltimos meses. Si se detecta la presencia de infeccin en aves de corral, el pas, la zona o el compartimento libre hasta entonces de la enfermedad podr recuperar su estatus sanitario: 1. en el caso de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos, 3 meses despus de haber aplicado medidas de sacrificio sanitario (que incluyan la desinfeccin de todas las explotaciones afectadas), siempre y cuando se haya ejercido una vigilancia acorde con lo contemplado en los Artculos 10.4.27. a 10.4.33. durante ese perodo de 3 meses; en el caso de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria levemente patgenos, podrn sacrificarse las aves de corral para consumo humano a condicin que renan las condiciones descritas en el Artculo 10.4.19. o podrn aplicarse medidas de sacrificio sanitario, pero en ambos casos: 3 meses despus de la desinfeccin de todas las explotaciones afectadas, siempre y cuando se haya ejercido una vigilancia acorde con lo contemplado en los Artculos 10.4.27. a 10.4.33. durante ese perodo de 3 meses.

2.

Artculo 10.4.4. Pas, zona o compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos
Puede considerarse que un pas, una zona o un compartimento est libre de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos cuando: 1. se ha demostrado la ausencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos en aves de corral en el pas, la zona o el compartimento durante los 12 ltimos meses, aunque se desconozca su situacin respecto de la infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria levemente patgenos, o cuando una vigilancia de la enfermedad acorde con lo contemplado en los Artculos 10.4.27. a 10.4.33. ha demostrado que el pas, la zona o el compartimento no rene los criterios para ser reconocido(a) libre de influenza aviar de declaracin obligatoria, pero entre los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria detectados no se ha identificado ninguno altamente patgeno.

2.

En algunos casos ser necesario adaptar la vigilancia a partes del pas, o a las zonas o los compartimentos existentes, en funcin de factores histricos o geogrficos, de la estructura del sector avcola, de los datos sobre la poblacin de aves o de la proximidad de brotes recientes. Si se detecta la presencia de infeccin en aves de corral, el pas, la zona o el compartimento libre hasta entonces de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos podr recuperar su estatus sanitario 3 meses despus de haber aplicado medidas de sacrificio sanitario (que incluyan la desinfeccin de todas las explotaciones afectadas), siempre y cuando se haya ejercido una vigilancia acorde con lo contemplado en los Artculos 10.4.27. a 10.4.33. durante ese perodo de 3 meses.

Artculo 10.4.5.

Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria

Para las aves de corral vivas (que no sean pollitos de un da)

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. las aves de corral no manifestaron ningn signo clnico de influenza aviar de declaracin obligatoria el da del embarque; las aves de corral permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria desde su nacimiento o durante, por lo menos, los 21 ltimos das; las aves de corral se transportan en contenedores nuevos o debidamente desinfectados; si las aves de corral se vacunaron contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, la vacunacin se llev a cabo conforme a lo dispuesto en el Manual Terrestre, y se adjuntar al certificado, en ese caso, documentacin que especifique la naturaleza de la vacuna empleada y la fecha de la vacunacin.

3. 4.

Artculo 10.4.6. Recomendaciones para la importacin de aves vivas que no sean de corral
Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. las aves no manifestaron ningn signo clnico de infeccin viral compatible con la influenza aviar de declaracin obligatoria de las aves de corral el da del embarque; las aves permanecieron en condiciones de aislamiento aprobadas por los Servicios Veterinarios desde su nacimiento, o durante, por lo menos, los 21 das anteriores al embarque, y no manifestaron ningn signo clnico de infeccin viral compatible con la influenza aviar de declaracin obligatoria de las aves de corral durante el perodo de aislamiento; una muestra estadsticamente vlida de aves elegida conforme a lo contemplado en el Artculo 10.4.30. se someti, menos de 14 das antes del embarque, a pruebas de diagnstico que demostraron que estaban libres de infeccin viral caracterstico de la influenza aviar de declaracin obligatoria de las aves de corral; las aves se transportan en contenedores nuevos o debidamente desinfectados; si las aves se vacunaron contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, la vacunacin se llev a cabo conforme a lo dispuesto en el Manual Terrestre, y se adjuntar al certificado, en ese caso, documentacin que especifique la naturaleza de la vacuna empleada y la fecha de la vacunacin.

3.

4. 5.

Artculo 10.4.7. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria

Para las aves de corral de un da vivas

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. las aves de corral permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria desde su nacimiento; las aves de corral descienden de manadas parentales que permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria durante, por lo menos, los 21 das anteriores a la recoleccin de los huevos y durante la recoleccin; las aves de corral se transportan en contenedores nuevos o debidamente desinfectados; si las aves de corral o las manadas parentales se vacunaron contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, la vacunacin se llev a cabo conforme a lo dispuesto en el Manual Terrestre y se adjuntar al certificado, en ese caso, documentacin que especifique la naturaleza de la vacuna empleada y la fecha de la vacunacin.

3. 4.

Artculo 10.4.8. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos

Para las aves de corral de un da vivas

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. las aves de corral permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos desde su nacimiento; las aves de corral descienden de manadas parentales que permanecieron en una explotacin libre de influenza aviar de declaracin obligatoria durante, por lo menos, los 21 das anteriores a la recoleccin de los huevos y durante la recoleccin; las aves de corral se transportan en contenedores nuevos o debidamente desinfectados; si las aves de corral o las manadas parentales se vacunaron contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, la vacunacin se llev a cabo conforme a lo dispuesto en el Manual Terrestre y se adjuntar al certificado, en ese caso, documentacin que especifique la naturaleza de la vacuna empleada y la fecha de la vacunacin.

3. 4.

Artculo 10.4.9. Recomendaciones para la importacin de aves vivas de un da que no sean de corral
Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. 3. las aves no manifestaron ningn signo clnico de infeccin viral caracterstico de la influenza aviar de declaracin obligatoria de las aves de corral; las aves permanecieron en condiciones de aislamiento aprobadas por los Servicios Veterinarios desde su nacimiento; las aves de la manada parental se sometieron, en el momento de la recoleccin de los huevos, a una prueba de diagnstico que demostr que estaban libres de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria; las aves se transportan en contenedores nuevos o debidamente desinfectados; si las aves o las manadas parentales se vacunaron contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, la vacunacin se llev a cabo conforme a lo dispuesto en el Manual Terrestre y se

4. 5.

adjuntar al certificado documentacin que especifique la naturaleza de la vacuna empleada y la fecha de la vacunacin.

Artculo 10.4.10. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria

Para los huevos para incubar de aves de corral

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. los huevos proceden de un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria; los huevos proceden de manadas parentales que permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria durante, por lo menos, los 21 das anteriores a su recoleccin y durante su recoleccin; los huevos se transportan en embalajes nuevos o debidamente desinfectados; si las manadas parentales se vacunaron contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, la vacunacin se llev a cabo conforme a lo dispuesto en el Manual Terrestre y se adjuntar al certificado, en ese caso, documentacin que especifique la naturaleza de la vacuna empleada y la fecha de la vacunacin.

3. 4.

Artculo 10.4.11. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos

Para los huevos para incubar de aves de corral

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. los huevos proceden de un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos; los huevos proceden de manadas parentales que permanecieron en una explotacin libre de influenza aviar de declaracin obligatoria durante, por lo menos, los 21 das anteriores a su recoleccin y durante su recoleccin; las cscaras de los huevos se desinfectaron (de conformidad con lo previsto en el Captulo 6.4.); los huevos se transportan en embalajes nuevos o debidamente desinfectados; si las manadas parentales se vacunaron contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, la vacunacin se llev a cabo conforme a lo dispuesto en el Manual Terrestre y se adjuntar al certificado, en ese caso, documentacin que especifique la naturaleza de la vacuna empleada y la fecha de la vacunacin.

3. 4. 5.

Artculo 10.4.12. Recomendaciones para la importacin de huevos para incubar de aves que no sean de corral

Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. las aves de la manada parental se sometieron, 7 das antes de la recoleccin de los huevos y en el momento de su recoleccin, a una prueba de diagnstico que demostr que estaban libres de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria; las cscaras de los huevos se desinfectaron (de conformidad con lo previsto en el Captulo 6.4.); los huevos se transportan en embalajes nuevos o debidamente desinfectados; si las manadas parentales se vacunaron contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, la vacunacin se llev a cabo conforme a lo dispuesto en el Manual Terrestre se adjuntar al certificado documentacin que especifique la naturaleza de la vacuna empleada y la fecha de la vacunacin.

2. 3. 4.

Artculo 10.4.13. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria

Para los huevos destinados al consumo humano

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. los huevos se produjeron y se embalaron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria; los huevos se transportan en embalajes nuevos o debidamente desinfectados.

Artculo 10.4.14. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos

Para los huevos destinados al consumo humano

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. 3. los huevos se produjeron y se embalaron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos; las cscaras de los huevos se desinfectaron (de conformidad con lo previsto en el Captulo 6.4.); los huevos se transportan en embalajes nuevos o debidamente desinfectados.

Artculo 10.4.15. Recomendaciones para la importacin de productos a base de huevo de aves de corral

Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. la mercanca se elabor con huevos que cumplan con los requisitos descritos en el Artculo 10.4.13. o en el Artculo 10.4.14., o la mercanca se someti a un tratamiento que garantice la destruccin de los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria, conforme a lo contemplado en el Artculo 10.4.25.;

Y 3. se tomaron las precauciones necesarias para evitar el contacto de la mercanca con cualquier fuente de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria.

Artculo 10.4.16. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria

Para el semen de aves de corral

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que los reproductores donantes: 1. 2. no manifestaron ningn signo clnico de influenza aviar de declaracin obligatoria el da de la toma del semen; permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria durante, por lo menos, los 21 das anteriores a la toma del semen y durante la toma.

Artculo 10.4.17. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos

Para el semen de aves de corral

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que los reproductores donantes: 1. 2. no manifestaron ningn signo clnico de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos el da de la toma del semen; permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos durante, por lo menos, los 21 das anteriores a la toma del semen y durante la toma.

Artculo 10.4.18. Recomendaciones para la importacin de semen de aves que no sean de corral

Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que los reproductores donantes: 1. 2. 3. permanecieron en condiciones de aislamiento aprobadas por los Servicios Veterinarios durante, por lo menos, los 21 das anteriores a la toma del semen; no manifestaron ningn signo clnico de infeccin viral compatible con la influenza aviar de declaracin obligatoria de las aves de corral durante el perodo de aislamiento; se sometieron, menos de 14 das antes de la toma del semen, a pruebas de diagnstico que demostraron que estaban libres de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria.

Artculo 10.4.19. Recomendaciones para las importaciones procedentes de pases, zonas o compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria o influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos

Para las carnes frescas de aves de corral

Las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que toda la remesa de carnes frescas procede de aves de corral: 1. que permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos desde su nacimiento o durante, por lo menos, los 21 ltimos das; que se sacrificaron en un matadero autorizado situado en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos y sometidas, conforme a lo contemplado en el Captulo 6.2., a inspecciones ante mortem y post mortem en las que se reconocieron libres de signos compatibles con la influenza aviar de declaracin obligatoria.

2.

Artculo 10.4.20. Recomendaciones para la importacin de productos crnicos de aves de corral

Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. 2. la mercanca se elabor con carnes frescas que reunan las condiciones descritas en el Artculo 10.4.19., o la mercanca se someti a un tratamiento que garantice la destruccin de los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria, de conformidad con lo contemplado en el Artculo 10.4.26.;

Y 3. se tomaron las precauciones necesarias para evitar el contacto de la mercanca con cualquier fuente de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria.

Artculo 10.4.21. Recomendaciones para la importacin de productos derivados de aves de corral que no sean harinas de plumas o de aves de corral destinados a la alimentacin animal o al uso agrcola o industrial
Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. las mercancas se elaboraron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria y proceden de aves de corral que permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria desde su nacimiento hasta el momento de su sacrificio o durante, por lo menos, los 21 das anteriores a su sacrificio, o las mercancas se sometieron a un tratamiento que garantice la destruccin de los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria (en estudio);

2.

Y 3. se tomaron las precauciones necesarias para evitar el contacto de las mercancas con cualquier fuente de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria.

Artculo 10.4.22. Recomendaciones para la importacin de plumas y plumones de aves de corral

Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. las mercancas proceden de aves de corral tal como se definen en el Artculo 10.4.19. y se elaboraron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria, o las mercancas se sometieron a un tratamiento que garantice la destruccin de los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria (en estudio);

2.

Y 3. se tomaron las precauciones necesarias para evitar el contacto de las mercancas con cualquier fuente de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria.

Artculo 10.4.23. Recomendaciones para la importacin de plumas y plumones de aves que no sean aves de corral
Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. las mercancas se sometieron a un tratamiento que garantice la destruccin de los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria (en estudio), y

2.

se tomaron las precauciones necesarias para evitar el contacto de las mercancas con cualquier fuente de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria.

Artculo 10.4.24. Recomendaciones para la importacin de harinas de plumas y de aves de corral

Independientemente de la situacin sanitaria del pas de origen respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria, las Autoridades Veterinarias debern exigir la presentacin de un certificado veterinario internacional que acredite que: 1. las mercancas se elaboraron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria y proceden de aves de corral que permanecieron en un pas, una zona o un compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria desde su nacimiento hasta el momento de su sacrificio o durante, por lo menos, los 21 das anteriores a su sacrificio, o las mercancas se sometieron a uno de los tres siguientes tratamientos: a. calor hmeda con una temperatura mnima de 118 C durante, por lo menos, 40 minutos, o b. proceso de hidrolizacin continua bajo presin de vapor de, por lo menos, 3,79 bares a una temperatura mnima de 122 C durante, por lo menos, 15 minutos, o c. sistema alternativo de procesamiento de despojos que asegure que el producto alcance una temperatura interna de 74C como mnimo;

2.

Y 3. se tomaron las precauciones necesarias para evitar el contacto de las mercancas con cualquier fuente de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria.

Artculo 10.4.25. Procedimientos para la inactivacin de los virus de influenza aviar en los huevos y productos a base de huevo
Para inactivar los virus de influenza aviar que puedan estar presentes en los huevos y productos a base de huevo conviene que la temperatura aplicada durante los procedimientos normalizados de fabricacin industrial se mantenga constante durante el siguiente tiempo:

Temperatura interna (C) Huevo entero Huevo entero mezclado Huevo entero mezclado Clara de huevo lquida Clara de huevo lquida Yema salada al 10% Clara de huevo seca Clara de huevo seca 60 60 61,1 55,6 56,7 62,2 67 54,4

Tiempo 188 segundos 188 segundos 94 segundos 870 segundos 232 segundos 138 segundos 20 horas 513 horas

Las temperaturas indicadas equivalen a una escala de reduccin logartmica de 7. Otros tiempos y temperaturas cuya eficacia est cientficamente demostrada tambin podrn convenir para inactivar los virus.

Artculo 10.4.26. Procedimientos para la inactivacin de los virus de influenza aviar en la carne
Para inactivar los virus de influenza aviar que puedan estar presentes en la carne conviene que la temperatura aplicada durante los procedimientos normalizados de fabricacin industrial se mantenga constante durante el siguiente tiempo:

Temperatura interna (C) Carne de ave 60,0 65,0 70,0 73,9

Tiempo 507 segundos 42 segundos 3,5 segundos 0,51 segundos

Las temperaturas indicadas equivalen a una escala de reduccin logartmica de 7. Otros tiempos y temperaturas cuya eficacia est cientficamente demostrada tambin podrn convenir para inactivar los virus.

Artculo 10.4.27. Vigilancia epidemiolgica: introduccin

En los Artculos 10.4.27. a 10.4.33. del presente captulo se definen, en complemento de las disposiciones del Captulo 1.4., los principios y recomendaciones para la vigilancia de la influenza aviar de declaracin obligatoria en el territorio de los Miembros que deseen determinar su situacin sanitaria respecto de esta enfermedad. Puede tratarse de la situacin de todo el territorio del pas o de una zona o un compartimento del mismo. Estas recomendaciones tambin son vlidas para los Miembros que deseen demostrar la ausencia de influenza aviar de declaracin obligatoria despus de un brote, as como para los que deseen conservar el estatus de pas, zona o compartimento libre de la enfermedad. La presencia de virus de influenza aviar en aves silvestres plantea un problema particular. En realidad, ningn Miembro puede declarar libres de influenza aviar sus poblaciones de aves silvestres. Pero la definicin de la influenza aviar de declaracin obligatoria del presente captulo se refiere a la infeccin de las aves de corral exclusivamente y las recomendaciones de los Artculos 10.4.27. a 10.4.33. se aplican a esta definicin. El impacto y la epidemiologa de la influenza aviar de declaracin obligatoria varan mucho segn las regiones del mundo y, por consiguiente, es imposible formular recomendaciones especficas para todas las situaciones posibles. Las estrategias empleadas para demostrar la ausencia de la enfermedad con un grado aceptable de fiabilidad tendrn que adaptarse a cada situacin local. Variables como la frecuencia de los contactos de las aves de corral con las aves silvestres, los diferentes niveles de bioseguridad y sistemas de produccin, y la agrupacin de diferentes especies susceptibles, incluidas aves acuticas domsticas, requieren estrategias de vigilancia especficas para cada situacin. Incumbe al Miembro solicitante facilitar datos cientficos que expliquen la epidemiologa de la influenza aviar de declaracin obligatoria en la regin considerada y muestren cmo se controlan todos los factores de riesgo. Por consiguiente, los Miembros tienen suficiente margen de maniobra para presentar argumentos bien fundados que demuestren, con un

grado aceptable de fiabilidad, la ausencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria. La vigilancia de la influenza aviar de declaracin obligatoria se llevar a cabo en el marco de un programa continuo destinado a demostrar la ausencia de infeccin por virus de influenza aviar en todo el territorio de un pas o en una zona o un compartimento del mismo.

Artculo 10.4.28. Vigilancia epidemiolgica: condiciones y mtodos generales

1. Un sistema de vigilancia epidemiolgica acorde con lo previsto en el Captulo 1.4. debe funcionar bajo la responsabilidad de la Autoridad Veterinaria. Deber establecerse, en particular: a. un procedimiento oficial y permanente para detectar e investigar los brotes de enfermedad o de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria; b. un procedimiento para tomar y transportar rpidamente muestras de casos sospechosos de influenza aviar de declaracin obligatoria a un laboratorio capaz de diagnosticar la enfermedad, tal como se describe en el Manual Terrestre; c. un sistema de registro, gestin y anlisis de los datos de diagnstico y vigilancia de la enfermedad. El programa de vigilancia de la influenza aviar de declaracin obligatoria deber: a. incluir un sistema de alerta precoz que abarque toda la cadena de produccin, distribucin y transformacin de las aves, para notificar los casos sospechosos. Los avicultores y trabajadores en contacto cotidiano con los animales, as como quienes efectan los diagnsticos, deben sealar rpidamente cualquier sospecha de influenza aviar de declaracin obligatoria a la Autoridad Veterinaria y ser apoyados, directa o indirectamente (por ejemplo, por veterinarios privados o paraprofesionales de veterinaria), por programas de informacin gubernamentales y por la Autoridad Veterinaria. Todos los casos sospechosos de influenza aviar de declaracin obligatoria debern ser investigados inmediatamente. Dado que no es siempre posible despejar las dudas mediante investigaciones epidemiolgicas y clnicas nicamente, se tomarn y se enviarn muestras a un laboratorio para que se sometan a las pruebas pertinentes. Esto requiere que los kits de muestreo, as como cualquier otro tipo de material, estn siempre a la disposicin de los encargados de la vigilancia de la enfermedad. El personal encargado de la vigilancia deber poder pedir ayuda a un equipo especializado en el diagnstico y el control de la influenza aviar de declaracin obligatoria. Cuando se sospeche que la salud pblica corre peligro, se informar de inmediato a las autoridades sanitarias competentes; b. prescribir, cuando sea pertinente, inspecciones clnicas, peridicas y frecuentes, y pruebas serolgicas y virolgicas de los grupos de aves de alto riesgo (por ejemplo, los situados en lugares adyacentes a un pas, una zona o un compartimento infectado(a) por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria o en lugares donde se mezclen pjaros y aves de corral de diferentes orgenes, como pueden ser los mercados, las poblaciones de aves de corral que viven cerca de aves acuticas u otras fuentes potenciales de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria). Un sistema de vigilancia eficaz identificar peridicamente casos sospechosos que requerirn un seguimiento y una investigacin para confirmar o descartar que la causa de la sospecha es la presencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria. La frecuencia con la que tales casos sospechosos pueden presentarse variar segn las situaciones epidemiolgicas, por lo que no puede precisarse de antemano con seguridad. Las solicitudes de reconocimiento de la ausencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria incluirn, por consiguiente, informacin detallada sobre el nmero de casos sospechosos y sobre cmo fueron investigados y resueltos. Esta informacin comprender los resultados de las pruebas de laboratorio, as como las medidas de control a las que se hayan sometido los animales afectados durante la investigacin (cuarentena, prohibicin de los desplazamientos, etc.).

2.

Artculo 10.4.29. Estrategias de vigilancia epidemiolgica

1. Introduccin La poblacin que sea sometida a vigilancia para identificar la enfermedad y la infeccin comprender todas las especies de aves de corral susceptibles presentes en el pas, la zona o el compartimento. La vigilancia ser pasiva y activa. La frecuencia de la vigilancia activa ser de al menos cada 6 meses. Se combinar vigilancia aleatoria y especfica y se utilizarn mtodos moleculares, virolgicos, serolgicos y clnicos. La estrategia empleada podr basarse en un mtodo de muestreo aleatorio, que requerir una vigilancia compatible con la demostracin de ausencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria con un nivel de confianza aceptable desde el punto de vista estadstico. Para la vigilancia aleatoria se emplearn las pruebas serolgicas que se describen en el Manual Terrestre. Los resultados positivos que se obtengan en las pruebas serolgicas se confirmarn o anularn con mtodos moleculares o virolgicos. La vigilancia especfica (es decir, basada en la mayor probabilidad de presencia de la infeccin en determinados lugares o determinadas especies) podr ser una estrategia apropiada. Se utilizarn mtodos virolgicos y serolgicos simultneamente para definir la situacin sanitaria de las poblaciones de alto riesgo respecto de la influenza aviar de declaracin obligatoria. El Miembro deber demostrar que la estrategia de vigilancia escogida es adecuada para detectar la presencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria, de acuerdo con lo previsto en el Captulo 1.4. y con la situacin epidemiolgica, incluidos los casos de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos que se hayan detectado en cualquier tipo de aves. Por ejemplo, ser adecuado concentrar la vigilancia clnica en una especie que tenga probabilidades de manifestar signos clnicos claros (pollos, por ejemplo) y las pruebas virolgicas y serolgicas en las especies que pueden no manifestar signos clnicos (patos, por ejemplo). Si un Miembro desea declarar libre de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria determinada zona o determinado compartimento de su territorio, adaptar la encuesta y el mtodo de muestreo a la poblacin de dicha zona o dicho compartimento. En el caso de las encuestas aleatorias, la estrategia de muestreo deber tener en cuenta la necesidad de un nivel de prevalencia apropiado desde el punto de vista epidemiolgico. El tamao de la muestra seleccionada para las pruebas tendr que ser lo suficientemente grande para detectar la infeccin, si sta estuviese presente en un porcentaje mnimo determinado previamente. El tamao de la muestra y la prevalencia estimada de la enfermedad determinarn el nivel de confianza en el resultado de la encuesta. El Miembro justificar su eleccin de niveles de prevalencia y confianza en funcin de los objetivos de la vigilancia y de la situacin epidemiolgica, de conformidad con lo previsto en el Captulo 1.4. La seleccin de la prevalencia en particular debe, obviamente, basarse en la situacin epidemiolgica predominante o histrica. Sea cual fuere el tipo de encuesta escogido, tanto la sensibilidad como la especificidad de las pruebas de diagnstico que se empleen sern factores clave de la misma, de la determinacin del tamao de la muestra y de la interpretacin de los resultados obtenidos. Lo ideal sera que la sensibilidad y la especificidad de las pruebas empleadas se validasen para el historial de vacunacin e infeccin y para la clase de animales de que se compone la poblacin objeto de la encuesta. Sea cual fuere el sistema de pruebas que se emplee, el sistema de vigilancia deber prever que se obtendrn falsos resultados positivos. Si se conocen las caractersticas del sistema de pruebas, se podr calcular de antemano la proporcin de falsos resultados positivos que se obtendr. Se deber disponer de un procedimiento eficaz de seguimiento de los animales positivos para poder determinar a la postre, con un alto grado de fiabilidad, si indican o no la presencia de infeccin. Este procedimiento incluir tanto pruebas suplementarias como investigaciones de seguimiento, para las cuales se tomar material de diagnstico en la

unidad de muestreo original, as como en manadas que puedan tener vnculos epidemiolgicos con dicha unidad. Los principios en que se basa la vigilancia de la enfermedad o la infeccin estn bien definidos desde el punto de vista tcnico. Los programas de vigilancia destinados a demostrar la ausencia de infeccin o de circulacin de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria debern prepararse cuidadosamente para evitar resultados insuficientemente fidedignos o excesivamente costosos y complicados desde el punto de vista logstico. La preparacin de un programa de vigilancia requiere, por lo tanto, la colaboracin de profesionales con competencia y experiencia en este campo. 2. Vigilancia clnica La vigilancia clnica tiene por objeto la deteccin de signos clnicos de influenza aviar de declaracin obligatoria en la manada. Aunque se considera muy importante para el diagnstico realizar una criba serolgica masiva, la vigilancia basada en los exmenes clnicos no deber subestimarse. El control de los parmetros de produccin (aumento de la mortalidad, disminucin del consumo de agua y alimentos, presencia de signos clnicos evocadores de enfermedad respiratoria o disminucin de la puesta, por ejemplo) es importante para la deteccin precoz de la presencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria. En algunos casos, la nica indicacin de la presencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria levemente patgenos es, precisamente, una disminucin del consumo de alimentos o de la puesta. La vigilancia clnica y las pruebas de laboratorio se harn siempre en serie para resolver los casos de sospecha de influenza aviar de declaracin obligatoria que se hayan detectado con cualquiera de estos mtodos complementarios de diagnstico. Las pruebas de laboratorio podrn confirmar una sospecha clnica, mientras que la vigilancia clnica contribuir a confirmar un resultado serolgico positivo. Toda unidad de muestreo en la que se detecten animales sospechosos ser sometida a restricciones hasta que se haya descartado una infeccin por influenza aviar de declaracin obligatoria. La identificacin de las manadas sospechosas es fundamental para localizar las fuentes de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria y determinar sus caractersticas moleculares, antignicas y biolgicas en general. Es esencial que los virus de influenza aviar de declaracin obligatoria aislados sean enviados regularmente al Laboratorio de Referencia regional para la determinacin de sus caractersticas genticas y antignicas. 3. Vigilancia virolgica La vigilancia virolgica mediante las pruebas que se describen en el Manual Terrestre ser til: para controlar las poblaciones de riesgo, para confirmar los casos clnicos sospechosos, para el seguimiento de los animales seropositivos, para comprobar la mortalidad diaria normal y permitir la deteccin precoz de la infeccin en manadas vacunadas o en explotaciones vinculadas epidemiolgicamente con un brote. Vigilancia serolgica La vigilancia serolgica tiene por objeto la deteccin de anticuerpos contra virus de influenza aviar de declaracin obligatoria. Una reaccin positiva a la prueba de deteccin de estos anticuerpos puede deberse a cuatro causas: a. infeccin natural por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria, b. vacunacin contra la influenza aviar de declaracin obligatoria, c. presencia de anticuerpos maternos transmitidos por una manada parental vacunada o infectada (suelen encontrarse en la yema y pueden persistir en la descendencia hasta cuatro semanas), d. falsos resultados positivos debidos a una prueba poco especfica. a. b. c. d.

4.

Se podr utilizar suero recolectado para otros estudios, pero no debern comprometerse los principios de la encuesta serolgica que se describen en este captulo ni el objetivo de realizar una encuesta estadsticamente vlida sobre la presencia de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria. Si se observan concentraciones de manadas seropositivas, podrn deberse a distintos motivos, como la composicin de la poblacin analizada, la exposicin a la vacuna o la presencia de infeccin. Como una concentracin de reacciones puede ser signo de infeccin, la encuesta deber prever la investigacin de todos los casos. La concentracin de resultados positivos siempre tiene importancia desde el punto de vista epidemiolgica y, por lo tanto, debe ser objeto de una investigacin. Si no se puede excluir que la vacunacin sea la causa de las reacciones positivas, se emplearn mtodos de diagnstico que permitan diferenciar los anticuerpos debidos a la infeccin de los inducidos por la vacunacin. Los resultados de las encuestas serolgicas, tanto aleatorias como especficas, son importantes para suministrar pruebas fidedignas de la ausencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria en un pas, una zona o un compartimento. Por lo tanto, es esencial documentar ntegramente la encuesta. 5. Vigilancia virolgica y serolgica de las poblaciones vacunadas La estrategia de vigilancia depender del tipo de vacuna que se utilice. La proteccin contra la influenza aviar depende del subtipo de hemaglutinina. Por consiguiente, existen dos estrategias generales de vacunacin: 1) con virus completos de influenza aviar inactivados, y 2) con vacunas basadas en la expresin de hemaglutinina. En el caso de poblaciones vacunadas, la vigilancia se basar en mtodos virolgicos o serolgicos, o en ambos, y en la vigilancia clnica. Puede ser apropiado utilizar aves centinela. stas no debern estar vacunadas ni tener anticuerpos contra virus de influenza aviar, y debern ser identificadas de manera clara y permanente. Slo se utilizarn aves centinela cuando no se disponga de mtodos de laboratorio adecuados. En el Artculo 10.4.33. se explica cmo interpretar los resultados serolgicos de animales vacunados.

Artculo 10.4.30. Documentacin acreditativa de la ausencia de influenza aviar de declaracin obligatoria o de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos en un pas, una zona o un compartimento
1. Miembros que declaren libre de influenza aviar de declaracin obligatoria o de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos la totalidad de su territorio o una zona o un compartimento del mismo: condiciones de vigilancia suplementarias Adems de las condiciones generales arriba descritas, un Miembro que declare libre de influenza aviar de declaracin obligatoria o de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos la totalidad de su territorio, o una zona o un compartimento del mismo, deber aportar pruebas de la existencia de un programa eficaz de vigilancia de la enfermedad. La estrategia y las caractersticas del programa dependern de la situacin epidemiolgica y su planificacin y ejecucin se atendrn a las condiciones y mtodos generales que se prescriben en el presente captulo para demostrar la ausencia de infeccin en las poblaciones susceptibles de aves de corral (vacunadas o no) durante los 12 ltimos meses. Todo ello requerir el apoyo de un laboratorio capaz de identificar la infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria levemente y altamente patgenos mediante las pruebas de deteccin de virus o de anticuerpos descritas en el Manual Terrestre. La vigilancia podr concentrarse en la poblacin de aves de corral expuesta a riesgos especficos asociados al tipo de produccin, la posibilidad de contacto directo o indirecto con aves silvestres, la pertenencia a manadas de aves de distintas edades, las

pautas de comercio locales, incluidos los mercados de aves vivas, el uso de agua corriente que pueda estar contaminada, la presencia de ms de una especie en la explotacin o medidas de bioseguridad deficientes. 2. Condiciones suplementarias para los pases, zonas o compartimentos en que se aplica la vacunacin La vacunacin puede formar parte de un programa de control sanitario destinado a interrumpir la transmisin de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos. El nivel de inmunidad por manada requerido para que la transmisin se interrumpa depender del tamao, de la composicin (las especies de aves, por ejemplo) y de la densidad de la poblacin susceptible. Por lo tanto, no es posible establecer una norma. La vacuna deber reunir las condiciones prescritas en el Manual Terrestre para las vacunas contra la influenza aviar de declaracin obligatoria. Segn la epidemiologa de la influenza aviar de declaracin obligatoria en el pas, la zona o el compartimento, se podr tomar la decisin de vacunar nicamente a determinadas especies o a otras subpoblaciones de aves de corral. Ser necesario someter a pruebas virolgicas y serolgicas todas las manadas vacunadas, para cerciorarse de que no circulan virus. La utilizacin de animales centinela ofrecer garantas suplementarias de la ausencia de circulacin de virus. Las pruebas se repetirn cada 6 meses o menos, segn el riesgo de circulacin de virus en el pas, la zona o el compartimento. Se aportarn tambin pruebas de la eficacia del programa de vacunacin.

Artculo 10.4.31. Miembros que recobren el estatus de pas, zona o compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria o de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos despus de un brote: condiciones de vigilancia suplementarias
Adems de las condiciones generales que se describen en los Artculos anteriores, un Miembro que recobre el estatus de pas, zona o compartimento libre de influenza aviar de declaracin obligatoria o de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos despus de un brote deber aportar pruebas de que dispone de un programa de vigilancia activa, adaptado a las circunstancias epidemiolgicas del brote, para demostrar la ausencia de infeccin. La vigilancia comprender las pruebas de deteccin de virus o de anticuerpos descritas en el Manual Terrestre. La utilizacin de aves centinela facilitar la interpretacin de los resultados de la vigilancia. Un Miembro que declare libre de influenza aviar de declaracin obligatoria o de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos (con o sin vacunacin) la totalidad de su territorio, o una zona o un compartimento del mismo, despus de un brote deber comunicar los resultados de un programa de vigilancia activa en virtud del cual la poblacin de aves de corral susceptible a la influenza aviar de declaracin obligatoria o a la influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos es sometida peridicamente a exmenes clnicos, y demostrar que dicho programa ha sido planificado y ejecutado de conformidad con las condiciones y mtodos generales que se describen en el presente captulo. El nivel de confianza en los resultados de la vigilancia ser cuando menos equivalente al que ofrece una muestra aleatoria representativa de la poblacin de riesgo.

Artculo 10.4.32.

Explotaciones libres de influenza aviar de declaracin obligatoria en compartimentos libres de influenza aviar de declaracin obligatoria debida a virus altamente patgenos: condiciones de vigilancia suplementarias
Para que una explotacin pueda ser declarada libre de influenza aviar de declaracin obligatoria ser necesario demostrar la ausencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria. Las aves de la explotacin debern ser sometidas a pruebas de deteccin o de aislamiento de virus y a mtodos serolgicos de manera aleatoria, segn las condiciones generales descritas en el presente captulo. La frecuencia de las pruebas depender del riesgo de infeccin y el intervalo mximo de tiempo entre las pruebas ser de 21 das.

Artculo 10.4.33. Utilizacin e interpretacin de las pruebas serolgicas y de deteccin de virus

Las aves de corral infectadas por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria producen anticuerpos contra la hemaglutinina (HA), la neuraminidasa (NA), las protenas no estructurales (PNE), la nucleoprotena/matriz (NP/M) y las protenas combinadas con polimerasa. No se describir aqu la deteccin de anticuerpos contra estas ltimas. Las pruebas para la deteccin de anticuerpos contra NP/M son las tcnicas ELISA, de bloqueo y directa, y la prueba IDGA (inmunodifusin en gel de agar). Las pruebas para la deteccin de anticuerpos contra la NA son la inhibicin de neuraminidasas (IN), la prueba indirecta de anticuerpos fluorescentes y las pruebas ELISA directa y de bloqueo. En el caso de la hemaglutinina, los anticuerpos son detectados por pruebas de inhibicin de la hemaglutinacin (IH) y por pruebas ELISA y de neutralizacin (SN). La prueba IH es fiable en las aves, pero no en los mamferos. La prueba SN puede detectar anticuerpos contra la hemaglutinina especficos de subtipos y es la mejor para los mamferos y algunas especies de aves. La prueba IDGA es fiable para detectar los anticuerpos contra la NP/M en pollos y pavos, pero no en las dems especies de aves. Como alternativa, se han creado pruebas ELISA de bloqueo para detectar anticuerpos contra la NP/M en todas las especies de aves. Las pruebas de IH y IN pueden utilizarse para clasificar los virus de influenza aviar en 16 subtipos de hemaglutinina y 9 subtipos de neuraminidasa. Estos datos son tiles para las investigaciones epidemiolgicas y la clasificacin de los virus de la influenza aviar. Puede vacunarse a las aves de corral contra la influenza aviar con distintos tipos de vacunas, como las vacunas con virus completo inactivado o las de expresin de la hemaglutinina. Los anticuerpos contra la hemaglutinina confieren proteccin especfica contra un subtipo. Pueden adoptarse varias estrategias para distinguir a las aves vacunadas de las infectadas, como, por ejemplo, la vigilancia serolgica de aves centinela no vacunadas o pruebas serolgicas especficas de las aves vacunadas. La infeccin de aves no vacunadas (aves centinela inclusive) por virus de influenza aviar se detecta por la presencia de anticuerpos contra la NP/M, contra protenas especficas de un subtipo HA o NA, o contra PNE. Las aves de corral vacunadas con vacunas a base de virus completos de influenza aviar inactivados que contengan un virus de influenza del mismo subtipo H pero con distinta neuraminidasa podrn ser sometidas a pruebas para la vigilancia de la exposicin a un virus de campo utilizando pruebas serolgicas destinadas a la deteccin de anticuerpos contra la NA del virus de campo. Por ejemplo, las aves que sean vacunadas con el virus H7N3 ante una amenaza de epidemia por el virus H7N1 podrn ser diferenciadas de las aves infectadas (DIVA) mediante la deteccin de anticuerpos especficos contra el subtipo NA de la protena N1 del virus de campo. A falta de pruebas de diferenciacin (DIVA), los ttulos de anticuerpos contra las protenas no estructurales, que sern mucho ms bajos en las aves vacunadas con vacunas inactivadas que en las aves infectadas, tambin permitirn la diferenciacin. Los resultados obtenidos experimentalmente con este sistema son alentadores, pero no se ha validado an su utilizacin en condiciones de campo. En las aves vacunadas con vacunas de expresin de la hemaglutinina se detectan los anticuerpos contra la hemaglutinina especfica, pero contra ninguna otra protena vrica de la influenza aviar. La infeccin es patente si se detectan anticuerpos contra NP/M o PNE, o contra la protena de la NA especfica del virus de campo. Las vacunas empleadas debern ser conformes a las normas del Manual Terrestre.

Todas las manadas en las que se obtengan resultados positivos en las pruebas serolgicas sern objeto de investigaciones. La situacin de cada manada en la que se obtengan resultados positivos de infeccin o circulacin de virus de influenza aviar se documentar con los resultados de las investigaciones epidemiolgicas y de las investigaciones suplementarias en laboratorio. La prueba de confirmacin ser ms especfica que la prueba de criba y su sensibilidad ser por lo menos equivalente a la de esta ltima. Se facilitar informacin sobre las caractersticas y la validacin de las pruebas utilizadas. 1. Seguimiento de los resultados positivos en las poblaciones vacunadas En las poblaciones vacunadas se deber descartar la posibilidad de que los resultados positivos sean prueba de circulacin de virus. Se aplicar por lo tanto el siguiente procedimiento para investigar los resultados positivos obtenidos en las pruebas serolgicas realizadas durante la vigilancia de las aves de corral vacunadas contra la influenza aviar. La investigacin consistir en examinar todos los indicios que puedan confirmar o invalidar la hiptesis segn la cual los resultados positivos de las pruebas serolgicas empleadas en la encuesta inicial no se deben a la circulacin de virus. Todas las informaciones epidemiolgicas debern ser fundadas y los resultados debern figurar en el informe final. Es muy importante saber qu tipo de vacuna se ha empleado para adoptar una estrategia de serologa que permita diferenciar a los animales infectados de los vacunados. a. Las vacunas con virus inactivado podrn utilizar subtipos de neuraminidasa tanto homloga como heterloga entre las cepas de vacuna y de campo. Si las aves de corral de la poblacin tienen anticuerpos contra la NP/M y han sido vacunadas con virus completo inactivado, se emplearn las siguientes estrategias: i. Las aves centinela debern dar resultado negativo en las pruebas de deteccin de anticuerpos contra la NP/M. Si dan resultado positivo, que indica infeccin por virus de influenza aviar, se realizarn pruebas de IH especficas para identificar el virus H5 o H7 de la influenza aviar. ii. Si las aves se han vacunado con virus completo inactivado que contena NA homloga de virus de campo, la presencia de anticuerpos contra PNE puede indicar presencia de infeccin. Se iniciar la toma de muestras para descartar la posibilidad de presencia de virus de influenza aviar mediante aislamiento de virus o deteccin del genoma especfico o de protenas del virus. iii. Si las aves se han vacunado con virus completo inactivado que contena NA heterloga de virus de campo, la presencia de anticuerpos contra PNE o NA de virus de campo podr indicar presencia de infeccin. Se iniciar la toma de muestras para descartar la posibilidad de presencia de virus de influenza aviar mediante aislamiento o deteccin del genoma especfico o de protenas del virus. b. Las vacunas de expresin de la hemaglutinina contienen HA de la protena o del gen homloga de la HA de virus de campo. Las aves centinela precitadas podrn ayudar a detectar la infeccin. En aves vacunadas o centinela, la presencia de anticuerpos contra NP/M, PNE o NA de virus de campo es indicio de infeccin. Se iniciar la toma de muestras para descartar la posibilidad de presencia de virus de influenza aviar mediante aislamiento o deteccin del genoma especfico o de protenas del virus. Seguimiento de los resultados positivos que indican infeccin para determinar si se trata de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos o levemente patgenos Si se detectan anticuerpos que indican la presencia de infeccin por virus de influenza aviar, como se explica en el punto a) i) anterior, se iniciarn las investigaciones epidemiolgicas y virolgicas para determinar si la infeccin se debe a virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos o levemente patgenos. Se realizarn controles virolgicos en todas las poblaciones de aves en que se detecten anticuerpos y exista riesgo de infeccin. Se analizarn muestras para detectar la presencia de virus de influenza aviar mediante aislamiento e identificacin del virus, o mediante deteccin de las protenas o los cidos nucleicos especficos de los virus de influenza aviar de tipo A (Figura 2), o mediante ambas cosas. El aislamiento de virus es la mejor manera de

2.

detectar la infeccin y el mtodo se describe en el Manual Terrestre. Se analizarn todos los virus de influenza aviar que se aslen para determinar los subtipos HA y NA y se harn pruebas in vivo a pollos o el secuenciado del punto de corte proteoltico HA de los subtipos H5 y H7, o ambas cosas, para determinar si se trata de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos o levemente patgenos, o de virus de influenza aviar levemente patgenos pero no de declaracin obligatoria. Como alternativa, se han elaborado y validado pruebas de deteccin del cido nucleico que son tan sensibles como el aislamiento de virus, pero que, adems, permiten obtener el resultado en pocas horas. Las muestras en que se detecte HA de los subtipos H5 y H7 con mtodos de deteccin del cido nucleido sern sometidas a pruebas de aislamiento e identificacin del virus y a pruebas in vivo en pollos, o al secuenciado de los cidos nucleicos para determinar si el punto de corte proteoltico corresponde al de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria altamente patgenos o levemente patgenos. Los sistemas de deteccin del antgeno, debido a su escasa sensibilidad, son mejores para la criba de casos clnicos de infeccin por virus de influenza de tipo A, buscando protenas NP/M. Las muestras que den resultado positivo en las pruebas de deteccin de NP/M sern sometidas a pruebas de aislamiento, identificacin y determinacin de la patogenicidad del virus. Los resultados de laboratorio sern examinados teniendo en cuenta la situacin epidemiolgica. Otros datos que se necesitan para completar la encuesta serolgica y evaluar la posibilidad de circulacin de virus, son, fundamentalmente: a. b. c. d. e. f. caracterizacin de los sistemas de produccin existentes, resultados de la vigilancia clnica de los casos sospechosos y sus cohortes, cuantificacin de las vacunas administradas en los lugares afectados, protocolo sanitario e historial de las explotaciones afectadas, control de la identificacin de los animales y de sus desplazamientos, otros parmetros importantes relacionados con la transmisin de virus de influenza aviar de declaracin obligatoria en la regin.

Todo el proceso de investigacin se documentar como procedimiento normalizado de ejecucin del programa de vigilancia epidemiolgica.

Figura 1 Esquema de las pruebas de laboratorio para determinar la presencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria mediante encuestas serolgicas o despus de las mismas

Figura 2. - Esquema de las pruebas de laboratorio para determinar la presencia de infeccin por virus de influenza aviar de declaracin obligatoria mediante mtodos virolgicos

AGID Inmunodifusin en gel de agar (Agar gel immunodiffusion)

DIVA Diferenciar entre animales vacunados e infectados (Differentiating infected from vaccinated animals) ELISA Prueba inmunoenzimtica HA HI NA Hemaglutinina Inhibicin de la hemaglutinacin Neuraminidasa

NP/M Nucleoprotena y protena matriz NSP S Protena no estructural Ausencia de caracterizacin del virus de la influenza aviar
En estos diagramas se indican las pruebas recomendadas para las investigaciones en las manadas de aves de corral.

La gripe aviar: preguntas y respuestas

1. Qu es la gripe aviar? 2. Se ha notificado alguna vez la gripe aviar en humanos? 3. Cundo se origin la actual crisis? 4. Por qu la cepa H5N1 es ms preocupante? 5. Cmo se puede contagiar a los humanos? 6. Cules son los sntomas en humanos? 7. Podra provocar una pandemia entre humanos? 8. Se ha dado este tipo de mutacin alguna vez? 9. Sirve de algo vacunarse frente a la gripe comn? 10. Existe algn medicamento eficaz frente a la gripe aviar? 11. Qu estn haciendo los gobiernos?

1. Qu es la gripe aviar?
La gripe aviar o gripe de las aves es una enfermedad infecciosa originada por el virus influenza tipo A. Esta enfermedad, bien conocida desde hace aos en el mbito de la sanidad animal, fue identificada por primera vez en la Lombarda italiana en 1878, pudindose aislar el virus en 1955. Se considera que todas las aves son vulnerables a la gripe aviar, pero algunas especies son ms resistentes a la infeccin que otras. La infeccin causa un amplio espectro de sntomas en las aves, desde una variante leve que a veces se manifiesta como plumas erizadas o disminucin en la produccin de huevos, hasta un cuadro muy contagioso y mortfero que ocasiona graves epidemias, caracterizado por su rpida aparicin, la gravedad de los sntomas y evolucin fulminante. El virus de la gripe aviar pertenece a la familia Orthomixoviridae, gnero influenza tipo A. Estos virus estn divididos en subtipos sobre la base de sus protenas de membrana hemaglutinina (H) y neuroaminidasa (N). Hasta la fecha se reconocen 15 subtipos de hemaglutininas (H1-H15) y 9 subtipos de neuraminidasas (N1-N9). Los brotes ms graves han sido causados por las cepas H5 y H7. Es un virus altamente contagioso entre las aves, y su transmisin entre pollos u otras especies puede producirse por contacto directo con material infectado, de granja a

granja, o por va mecnica (equipos contaminados, vehculos, alimentos, jaulas o ropa). Los virus transportados por el aire pueden tambin causar infeccin al ser inhalados por las aves. Puede vivir largos perodos de tiempo en el ambiente, especialmente a bajas temperaturas, ya que se destruye a temperaturas superiores a los 60. Cada vez cobra ms importancia el papel que juegan determinados vectores como las moscas u otros insectos. La enfermedad puede extenderse de un pas a otro a travs del comercio internacional de aves de corral vivas. Las aves migratorias pueden transportar el virus a grandes distancias y en el pasado han sido implicadas en la expansin internacional de la gripe aviar altamente patognica. Se dice que un simple gramo de estircol contaminado contiene suficientes virus para infectar a un milln de aves, lo que da idea de alta transmisibilidad de esta enfermedad. Hay numerosos antecedentes, as por ejemplo, durante 1983 y 1984 se produjo una epizootia en EEUU, originada por el subtipo H5N2, que aunque inicialmente caus una baja mortalidad, en los siguientes 6 meses dio lugar a una mortalidad del 90%, obligando, para parar el brote, al sacrificio de ms de 17 millones de aves con un gasto de 65 millones de dlares.

2. Se ha notificado alguna vez la gripe aviar en humanos?

Se ha confirmado la afectacin humana de la gripe aviar desde 1997: 1997: En Hong Kong, la cepa H5N1 afect tanto a pollos como a humanos. Fue la primera vez que se document la transmisin directa de aves a humanos. Durante este brote fueron hospitalizadas 18 personas y 6 fallecieron. En un intento de controlar el brote, sacrificaron cerca de 1,5 millones de pollos. La investigacin sanitaria concluy que el contacto estrecho con las aves haba sido la causa de la infeccin en humanos, sin mutaciones ni cambios genticos. Se produjo una limitada y posiblemente dudosa transmisin al personal sanitario, sin sntomas de importancia. 1999: Nuevamente en Hong Kong se confirmaron 2 casos de gripe aviar en nios, por la cepa H9N2; ambos se recuperaron sin que se confirmaran otros casos. La posterior investigacin sugiri que las aves de corral haban sido la fuente de infeccin, aunque se dej abierta la posibilidad de transmisin de persona a persona. 2003: Dos casos de gripe aviar por la cepa H5N1 ocurrieron entre los miembros de una familia de Hong Kong que haba viajado a China. Uno de ellos se recuper y el otro falleci. No pudo determinarse el foco de infeccin, ni la causa de la muerte poco tiempo despus de otro miembro de la familia por una insuficiencia respiratoria aguda, ya que no pudieron tomarse muestras. No slo hubo casos en pases y civilizaciones un tanto alejadas de nuestro entorno, sino que en plena Europa, en Holanda en esas mismas fechas se confirm un brote por la cepa H7N7 que infect a 84 personas que trabajaban con aves de corral. Uno de ellos muri (era veterinario). Como en otras ocasiones se constat la posibilidad de transmisin entre humanos.

3. Cundo se origin la actual crisis?

Desde mediados de Diciembre del 2003 ha aumentado el nmero de pases asiticos que han informado de brotes epidmicos de gripe aviar con la cepa H5N1 altamente patognica en pollos y patos. Tambin se ha informado de brotes en muchas especies de aves salvajes y cerdos. Otras reas han notificado brotes de gripe aviar, pero sin embargo las pruebas diagnsticas han confirmado que no se trata de la cepa H5N1. En concreto en Taiwn y China el virus detectado ha sido el H5N2. Estos brotes no tienen precedente histrico ni en su magnitud ni en su amplia distribucin geogrfica, ni en sus consecuencias econmicas, devastadoras para los pases asiticos. Ms de la mitad de los pases afectados era la primera vez que sufran casos de gripe aviar. En los esfuerzos por controlar estos brotes se han sacrificado ms de 100 millones de aves. En las ltimas semanas se han detectado casos de aves infectadas en las puertas de la Unin Europea, y adems en los ltimos das se ha notificado la infeccin en aves de corral y otras aves en pases como Suecia, Reino Unido y Canad, en todos los casos por la cepa H5N1. Los dos ltimos casos registrados han fallecido en Tailandia, uno en Bangkok y otro en la provincia nortea de Chiang Rai. Actualmente se han detectado otros 7 pacientes sospechosos de estar infectados por virus aviares, por lo que permanecen en cuarentena.

4. Por qu la cepa H5N1 es ms preocupante?

Son varios los motivos: 1. La cepa H5N1 es una cepa que muta rpidamente y con gran facilidad. 2. Tendencia demostrada a adquirir genes de virus que infectan a otras especies animales 3. Su capacidad para causar enfermedad grave en el hombre ha quedado ya constatada en varias ocasiones. 4. Los estudios de laboratorio realizados han demostrado que los aislados de este virus tienen una alta patogenicidad y pueden tener serios efectos en el hombre. 5. Las aves que sobreviven a la infeccin excretan el virus al menos 10 das, oralmente y por las heces, facilitando una posterior propagacin entre las aves de corral y aves migratorias. Los casos registrados en humanos estn recogidos en la tabla 1, actualizada a fecha del da 1 de Noviembre/2005: Tabla 1: casos humanos de infeccin por gripe aviar (1/11/2005) Tabla I: Casos humanos de infeccin por gripe aviar (1 de noviembre de 2005)
Indonesia Vietnam Thailandia N casos (n fallecidos) 5 (3) 91 (41) 19 (14) 4 (4) 119 (62) Camboya Total

5. Cmo se puede contagiar a los humanos?

El virus de la gripe aviar no se transmite de persona a persona. Segn informa la OMS, hasta el momento no se ha podido demostrar con una base cientfica y rigurosa que el virus haya tenido una transmisin entre humanos. Tampoco se ha notificado con suficiente credibilidad que profesionales de la salud se hayan infectado al tratar a pacientes afectados por este virus. De momento, slo se transmite de ave a humano y en casos excepcionales. La nica va de contagio confirmada es sta, y suele tener lugar por va respiratoria. Por tanto, es necesario un contacto directo, reiterado y prximo con las aves o sus excrementos. En todos los brotes que han ocurrido a lo largo de la historia, incluido el que nos ocupa, todos los casos han sido en personas expuestas de una forma estrecha y continuada a aves, ya fuera en granjas o en mercados de animales vivos. Segn la OMS, no hay evidencia alguna de que el contagio de las aves al ser humano se realice por va alimentaria. Adems, el virus no sobrevive a altas temperaturas (bastan 4 horas a 56, o con 3 minutos a 60, para su destruccin), con lo que con adecuados procesos de coccin se destruye. Lo que s se ha confirmado es que las epidemias extensas de gripe aviar en los pjaros aumentan las oportunidades para la exposicin humana. Adems, la circulacin simultnea en el ambiente de virus humanos de la gripe estacional con virus de la gripe aviar incrementa el riesgo de mutaciones del virus aviar, por lo que siempre es aconsejable la vacunacin frente a la gripe comn en las personas que estn en contacto con aves sospechosas de estar infectadas o cuya infeccin es conocida.

6. Cules son los sntomas en humanos?

La OMS ha publicado un primer informe en el que se detallaban las caractersticas clnicas y epidemiolgicas de los primeros 10 casos humanos de H5N1 en el brote de Vietnam, el cual puede ser consultado a travs de la web. Tambin otras publicaciones cientficas como Weekly Epidemiological Record o The New England Journal of Medicine tratan los casos de infecciones en humanos, recopilando el espectro clnico y la evolucin de los pacientes. Por estas descripciones, se sabe que las principales caractersticas clnicas son muy similares a las de la gripe comn, con fiebre elevada (generalmente mayor de 38), tos y dolor de garganta, mialgias y dolores osteomusculares, cansancio y malestar general, infecciones oculares e infecciones respiratorias. sta ltima afeccin es la ms frecuente y la de mayor entidad, ya que suelen desarrollar una neumona vrica aguda, de curso fulminante y evolucin fatal. En las pruebas complementarias realizadas suele apreciarse una marcada linfopenia, elevacin de las enzimas hepticas y un infiltrado bilateral en las radiografas de trax, inespecfico y de rpida evolucin. El virus aviar, adems de reproducirse en los sitios habituales de la gripe comn, suele

replicarse en otros rganos, tales como el hgado, sistema nervioso central y tubo digestivo. El tiempo que transcurre entre la exposicin al virus y el comienzo de la enfermedad es variable, con una mediana de 3 das y un rango entre 2 y 8 das. El curso clnico de la principal serie recogida por la literatura queda reflejado en la tabla 2: Tabla II: Curso clnico de los casos humanos infectados por virus aviares
Hong-Kong 1997 (n = 18) Fallo Respiratorio Insuficiencia cardiaca Insuficiencia renal Das hasta la muerte* Muertes (%) 8 (44%) Thailandia 2004 (n = 17) 13 (76%) Vietnam 2004 (n = 10) 9 (90%) Ho-Chi-Minh 2005 (n = 10) 7 (70%) Camboya 2005 n = 4) 4 (100%)

7 (41%)

4 (22%)

5 (29%)

1 (10%)

2 (20%)

23

12

12

6 (33%)

12 (71%)

8 (80%)

8 (80%)

4 (100%)

*Das desde el inicio de los sntomas hasta el fallecimiento (mediana)

Como puede apreciarse destaca la predisposicin por atacar el aparato respiratorio y la elevada mortalidad que ha presentado en los casos de humanos infectados por virus aviares, de ah la importancia y la alarma social que se est desencadenando en nuestros das.

7. Podra provocar una pandemia entre humanos?

Todos los virus de la gripe tipo A, incluidos los estacionales, son genticamente lbiles y se adaptan bien para eludir las defensas del husped. Su composicin gentica cambia conforme se va replicando en el hombre y en los animales, y la cepa de partida se ve reemplazada por una nueva variante antignica, de ese modo el virus evoluciona a un nuevo virus frente al cual la poblacin no est inmunizada. Eso explicara la evolucin de la infeccin por estos virus durante perodos de tiempo, con brotes de pandemia peridicos, separados por varios de endemias y epidemias, a medida que la poblacin diana va creando nuevos anticuerpos y se inmuniza. sta es tambin la causa de que la composicin de la vacuna antigripal cambie anualmente. Investigaciones recientes han demostrado que virus de baja patogenicidad pueden, despus de estar circulando incluso durante perodos breves de tiempo en una

poblacin de aves de corral, mutar y transformarse en virus hiperpatgenos. As ha ocurrido en numerosas ocasiones, por ejemplo en los aos 1983 y 1984 en EEUU, la cepa H5N2 caus inicialmente una muy baja mortalidad en las aves, pero al cabo de 6 meses mut y adquiri una gran virulencia, con tasas de mortalidad cercanas al 90%. Para controlar el brote tuvieron que sacrificar 17 millones de aves. Algo parecido ocurri en Italia a finales de la dcada de los aos 90, con la cepa H7N1 que tras presentar inicialmente una baja patogenicidad, mut despus de 9 meses, ocasionando una elevadsima mortalidad entre las aves. En esta ocasin murieron o fueron sacrificadas ms de 13 millones de aves. Las cepas gripales A, incluidos todos los subtipos, pueden intercambiar o recombinar su material gentico y fusionarse, formando un nuevo subtipo distinto de los dos virus originales. Como las poblaciones carecen de inmunidad frente al nuevo subtipo, y como no hay ninguna vacuna que confiera proteccin contra l, el cambio gentico puede ocasionar pandemias altamente mortferas. As, los virus de la gripe humana y aviar pueden intercambiar genes cuando una persona est simultneamente infectada con virus de ambas especies. Por tanto, si la cepa H5N1 se combina con otra cepa gripal tipo A dentro de un mismo portador puede crear una mutacin capaz de reproducirse y transmitirse entre humanos, con la mortalidad de la gripe aviar y la facilidad de contagio de la gripe convencional. Este intercambio de genes y recombinacin gentica podra producirse con muchas ms facilidad en los cerdos, muy susceptibles a la infeccin por virus humanos y aviares, y considerados potenciales tubos de ensayo (Figura 1). Hasta la fecha no hay ninguna confirmacin de transmisin de persona a persona, pero ese hecho marcara el inicio de una pandemia de gripe.

Figura 1: Proceso de recombinacin gentica y formacin de nuevos subtipos de virus

8. Se ha dado este tipo de mutacin alguna vez?

La respuesta es afirmativa. A juzgar por lo ocurrido a lo largo de la historia, las

pandemias de gripe tienden a producirse como media unas tres o cuatro veces cada siglo, como resultado de la aparicin de un nuevo subtipo del virus que se transmite fcilmente de una persona a otra. Desde 1580, se han registrado un total de 31 pandemias, algunas de ellas de considerable mortalidad y devastadoras para la poblacin. En el siglo XX, en los aos 1918 y 1919, tuvo lugar una de las ms famosas pandemias de gripe, la llamada gripe espaola, no porque fuera en nuestro pas donde se originase y propagase al resto del mundo, sino porque en aquella poca no haba censura en nuestro pas y pudieron notificarse todos los datos recogidos a diferencia de lo que ocurri en muchos otros pases. Aquella pandemia supuso la muerte de entre 40 y 50 millones de personas en todo el mundo, menos de un milln espaoles. A esta pandemia siguieron las de 19571958 y 1968-1969, tambin con gran mortalidad e innumerables prdidas humanas y econmicas. Los expertos coinciden en que la aparicin de otra pandemia de gripe es inevitable y posiblemente inminente.

9. Sirve de algo vacunarse frente a la gripe comn?

Tanto la OMS como la Unin Europea recomiendan vacunar de la misma forma que se vena haciendo hasta ahora, es decir, a los grupos de riesgo y por tanto ms vulnerables, personal sanitario y mayores de 65 aos. No se recomienda vacunar a los nios como norma general, y en todo caso se debera consultar con su pediatra segn las pautas de la Sociedad Espaola de Pediatra. En relacin con el brote actual y el peligro potencial de transmisin e infeccin en humanos, se recomienda la vacunacin a todo el personal que trabaje con aves infectadas por virus aviares, sospechosas de estar infectadas o procedentes de los pases afectados. La vacuna de la gripe humana no protege frente a la gripe aviar, pero si llegaran a coincidir ambas infecciones, servira de freno para una recombinacin de ambos virus. Actualmente hay vacunas disponibles para las cepas H5N1 pero son slo vlidas para las aves y no para los humanos. Aunque hay varios ensayos en humanos con esa cepa de virus aviar, slo se podr fabricar una vacuna especfica cuando el virus animal haya mutado y pueda contagiarse de persona a persona. Por tanto, las vacunas de las que se dispone en la actualidad no protegen a las personas de la enfermedad causada por la cepa H5N1 del virus. En estos ltimos das se ha notificado el desarrollo, por expertos en gripe del Reino Unido, Italia y Noruega, junto con investigadores del Instituto francs Pasteur, de la primera vacuna que podra servir para humanos, contra la cepa H7N1 de la gripe aviar, cepa que se cree puede jugar un papel importante en la infeccin en humanos, estando previsto que en la primavera del 2006 comiencen los ensayos clnicos de la nueva vacuna denominada RD-3.

10. Existe algn medicamento eficaz frente a la gripe aviar?

Los frmacos antivricos, algunos de los cuales pueden usarse con intencin de

profilaxis o de tratamiento, son eficaces frente a las cepas del virus gripal en adultos y nios, pero no estn exentos de inconvenientes. Adems son de suministro limitado y de precio elevado. Disponemos de dos tipos de frmacos: 1. Los inhibidores de la protena integral M2, que son la amantadina y rimantidina. 2. Los inhibidores de la neuraminidasa: oseltamivir y zanimivir. Estos frmacos han sido autorizados para su uso como prevencin y tratamiento de la gripe aviar en humanos en algunos pases y han demostrado ser eficaces con independencia de la cepa causante de infeccin. Sin embargo, los anlisis iniciales de los virus aislados de los casos de evolucin fatal de Vietnam indican que los virus son resistentes a los inhibidores M2. Parece que el frmaco que ofrece ms garantas y el ms recomendado frente a las cepas H5N1 en la actualidad es el oseltamivir.

11. Qu estn haciendo los gobiernos?

La prioridad inmediata es detener la propagacin de la epidemia entre la poblacin de las aves de corral, estrategia que reduce las probabilidades de exposicin el ser humano. Se est llevando a cabo la vacunacin de las personas con alto riesgo de exposicin a las aves infectadas, usando para ello las vacunas antigripales ms eficaces frente a las cepas circulantes de la gripe humana, permitiendo reducir las posibilidades de coinfeccin del ser humano con cepas aviares y humanas y reducir tambin la posibilidad de recombinacin del material gentico. Adems, los trabajadores que participan en la matanza selectiva de las aves de corral deben protegerse adecuadamente con ropa y material correctos, adems de recibir frmacos antivricos como profilaxis de la infeccin. En Espaa, hasta la fecha, no se ha notificado ningn caso de infeccin en aves, ni por supuesto en humanos. Aparte de la prohibicin de importar productos avcolas procedentes de los pases afectados, hay una permanente alerta de los sistemas de vigilancia epidemiolgica y virolgica, habindose establecido por el Instituto de Salud Carlos III y por la Direccin General de Salud Pblica del Ministerio de Sanidad un protocolo de vigilancia a desarrollar ante un posible caso de infeccin humana por el virus de la gripe aviar. Hay motivos para la preocupacin, probablemente muy marcado sobre todo por las aves migratorias que se dirigen a tierras africanas en estas fechas y que en primavera regresan a Europa; sin embargo, la muy baja mortalidad ocasionada entre los humanos (hasta el momento, 62 muertos en un continente con ms de 800 millones de habitantes) y la difcil transmisin entre humanos hacen albergar, sin bajar la guardia, la esperanza de que no suponga un problema importante para la sociedad actual, muy castigada en muchsimos otros frentes a los cuales tambin habra que mirar y no de reojo precisamente. Conviene recordar que de las 6 fases de que consta el Plan de la OMS de accin frente a la gripe, nos encontramos en la fase 3, que concierne a la transmisin de aves a humanos y no en la fase 4, que atae a la transmisin entre humanos. Por tanto, no hay motivo para tanta alarma social, aunque no podemos olvidarnos de mirar a los pases afectados y los que pueden afectarse con facilidad, los pases africanos, no slo por una cuestin de solidaridad, sino tambin de sentido

comn