Fermentacin alcoholica con levaduras Alcoholic fermentation from yeasts

Jonathan Muoz Giraldo, Laura Franco Salazar

Resumen En esta prctica se estudi el proceso de fermentacin alcohlica que llevan a cabo las levaduras en un proceso en continuo y en batch. La levadura que se utiliz es Saccharomyces cerevisiae. En la fermentacin alcohlica se produce dixido de carbono y alcohol etlico (etanol). Se usaron concentraciones de 15, 30, 45 y 50 g/L de glucosa como azcar total reductor para determinar la cintica del cultivo en bach utilizando cuatro fermentmetros que garantizan las condiciones anaerbicas favorables para la produccin de etanol, tomando muestras cada hora para medir absorbancia a 600nm para la determinacin de la concentracin de la biomasa. Para la fermentacin en continuo en un bioreactor se tomaron muestras cada 90 minutos para realizar anlisis de azcar y determinacin de la concentracin de etanol. Despus de obtener los datos experimentales se compar los rendimientos en la formacin al utilizar clulas libres e inmovilizadas. La inmovilizacin se realiza mezclando una suspensin de levaduras al 1% en solucin isotnica estril con una solucin estril al 2 % de Alginato de sodio. Palabras clave: fermentometro. fermentacin, Saccharomyces cerevisiae, bioreactor,

Abstract
In this work we studied the alcoholic fermentation process carried out by yeasts in a continuous process and batch. The yeast used is Saccharomyces cerevisiae. In the alcoholic fermentation produces carbon dioxide and ethyl alcohol (ethanol). Concentrations were used 15, 30, 45 and 50 g / L glucose as reducing the total sugar to determine the kinetics of the culture using four fermentmetros bach to ensure anaerobic conditions favorable for production of ethanol, taking samples every hour to measure absorbance at 600nm for the determination of the concentration of biomass. For continuous fermentation in a bioreactor was sampled every 90 minutes for sugar analysis and determination of the concentration of ethanol. After obtaining

the experimental data yields compared training using free and immobilized cells. Immobilization is accomplished by mixing a suspension of yeast at 1% solution in sterile isotonic with a sterile 2% solution of sodium alginate.

Keywords:
fermentometro.

fermentation,

Saccharomyces

cerevisiae,

bioreactor,

Introduction
La fermentacin alcohlica es un proceso biolgico de fermentacin en ausencia de oxgeno (O2), originado por la actividad de algunos microorganismos como la levadura y bacterias, que procesan los azcares (carbohidratos) como: glucosa, sacarosa, fructosa, entre otros. Los productos finales que se obtienen de este proceso son: etanol, dixido de carbono, NADH y ATP [1]. La fermentacin alcohlica es un proceso anaerbico, realizado por las levaduras y algunas clases de bacterias. Estos microorganismos convierten el azcar en alcohol etlico y dixido de carbono. La fermentacin alcohlica, inicia con gliclisis, donde la glucosa se degrada en un cido pirvico y este se convierte luego en CO2 y etanol [2]. Las levaduras son hongos microscpicos unicelulares importantes por su capacidad para realizar descomposicin mediante la fermentacin de varios compuestos orgnicos principalmente los carbohidratos. El proceso de fermentacin alcohlica

puede ser empleado por varios microorganismos o levaduras, la utilizada en este experimento es la levadura comn mejor conocida como Saccharomyces cerevisae que es un hongo unicelular capaz de generar dixido de carbono y etanol durante el proceso de fermentacin llevado a cabo cuando se encuentra en un medio muy rico en azcares como por ejemplo la glucosaya que el pequeo nmero de carbonos en este monosacrido, comparado con los disacridos maltosa, lactosa y sacarosa hace que el proceso de rompimiento de la molcula requiera menos energa y por lo tanto sea un proceso ms rpido, como resultado se obtiene una fermentacin ms efectiva, produciendo CO2 en un periodo ms corto de tiempo [3]. En la actualidad, ha surgido un inters creciente en la inmovilizacin de clulas para la produccin de alcohol, debido principalmente a las numerosas ventajas que ofrece. La inmovilizacin celular permite el aumento en la productividad, la factibilidad del proceso en continuo, la estabilidad celular y los bajos costos de recuperacin y

reciclo en los procesos de separacin. Sin embargo, su implementacin en los procesos industriales es aun limitada y su aplicacin depender de los futuros desarrollos en los procedimientos de inmovilizacin que puedan ser fcilmente escalables. Una de las tecnologas contemporneas que son ms promisorias para la fermentacin de etanol, es la fermentacin en continuo usando clulas de levaduras inmovilizadas. Los sistemas de fermentacin en continuo con clulas inmovilizadas aunque inicialmente exitosos, fueron condenados a fallar por varias razones. Estas incluyen problemas de ingeniera (como biomasa en exceso, problemas con la remocin de CO2, optimizacin de las condiciones de operacin, obstrucciones y generacin de canales de flujo en el biorreactor), inalcanzables costos (en los precios de los soportes) y desventajas (en operacin inestable y procesos complejos). Sin embargo, recientes desarrollos en el diseo de biorreactores y la comprensin de la fisiologa de las clulas inmovilizadas, junto con la aplicacin de materiales de soporte novedosos, proporcionan un nuevo estmulo en la investigacin y la aplicacin de esta promisoria tecnologa. La mayor parte del etanol es producido mediante fermentaciones por lotes. La concentracin de sustrato al inicio del proceso es de

15-25% (p/v) y el pH se ajusta a un valor de 4-5 para disminuir los riesgos de infeccin. El proceso se lleva a cabo a 30-35C. Generalmente el rendimiento es del 90% del mximo terico. El resto de sustrato es convertido en biomasa y otros metabolitos. La concentracin de etanol al trmino de la fermentacin es de 80-100 g/L. En la mayora de las destileras, el tiempo de fermentacin es de 24 horas, aumentndose 6 horas para la sedimentacin de las levaduras en los tanques. Los procesos por lotes tienen mayores costos del biorreactor, mayores requerimientos de mantenimiento y operacin, bajo control del proceso y menores productividades que los procesos continuos. Sin embargo, a nivel industrial, aunque la productividad es importante, es ms relevante la conversin de sustrato considerando que la mayor parte de los costos de produccin corresponden a la materia prima. Ademas de esto existen algunos factores que pueden afectar positiva o negativamente la fermentacin ya sea actuando sobre el desarrollo de las levaduras o incidiendo directamente sobre la propia fermentacin. Los ms relevantes son los siguientes: Temperatura: A mayor temperatura la fermentacin transcurre ms rpidamente, sin

embargo es menos pura, es decir, se produce menos etanol y ms cantidad de compuestos secundarios. Las levaduras a 30C tienen su temperatura ptima de desarrollo. Por encima de 35C la actividad disminuye rpidamente y mueren antes de 45C. Oxigeno: Aunque la fermentacin es un proceso anaerbico, las levaduras mantienen una leve respiracin utilizando para ello el oxgeno disuelto en el mosto. Nutrientes: fuente de levaduras. Los azcares energa para son las

Bibliografa
1. Bruce E. Rittmann, Perry L. McCarty. Biotecnologia del medio ambiente, principios y aplicaciones. McGraw Hill, pag 62-63. 2. Jos Bohrquez, Diana Vergara, Nilson Rosales, Yuris Gil. Vinos y fermentacin alcohlica [en linea]. http://es.scribd.com/doc/634 64515/Informe-6Fermentacion-Alcoholica. visitado el 7 de junio del 2012.