DIFERENCIAS ENTRE LAS CELULAS EUCARIOTAS PROCARIOTAS Y LOS VIRUS

Dentro del mundo microscpico hay dos tipos de organizacin celular principalmente: * CELULAS PROCARIOTAS A este grupo pertenecen las bacterias y las cianobarterias, miden de 0.5 a 3 micrmetros, su material gentico se encuentra disperso en el citoplasma, su pared celular est formada principalmente por pptido glucano, para su movilidad posee flagelos simples, carece de orgnulos como aparato de Golgi, cloroplastos y mitocondrias sustituyendo estos ltimos por evaginaciones membranosas que realizan la respiracin celular y para llevar a cabo su divisin celular utiliza el mecanismo de fisin binaria gemacin. *CELLULAS EUCARIOTAS Forman parte de los animales, plantas y hongos y que a diferencia de las procariotas miden de 10 a 100 micrmetros poseen una membrana nuclear (ncleo) en donde se encuentra su material gentico , para su movilidad posee cilios y flagelos complejos , posee aparato de Golgi, cloroplastos o mitocondrias para la respiracin celular y generalmente utiliza la mitosis como proceso de divisin celular. *VIRUS Otro grupo que es importante analizar son los virus que son partculas infecciosas que pueden llegar a medir de 18 hasta 300 nanmetros, para su replicacin requieren de la existencia de una clula anfitriona ya que no lo pueden hacer por si solos. Por ultimo solo poseen una molcula de cido nucleico que puede ser ADN o ARN.

UTILIDAD CLINICA DE LAS FORMAS Y AGRUPACIONES DE LAS BACTERIAS

El conocer las diferentes formas que pueden presentar los distintos tipos de bacterias as como las agrupaciones que pueden llegar a tener es de vital importancia para conocer la patogenicidad de dichos organismos y la resistencia que pueden llegar a presentar a diversos antibiticos, para lo cual el mdico debe de tener en cuenta estas caractersticas obtenidas en un examen bacterioscopico al recomendar el tratamiento al paciente.

USOS, CUIDADOS Y LIMPIEZA DEL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

En el laboratorio de microbiologa es importante seguir ciertas reglas para lograr llevar a cabo de manera ordenada y sin incidentes la realizacin de prcticas debido a que trabajamos con algunos microorganismos patgenos que podran causarnos diversas enfermedades si no tenemos cuidado al manejarlos: USOS- En este laboratorio podemos realizar infinidad de prcticas, para saber y conocer ms a fondo el comportamiento de las bacterias en los diferentes medios de cultivo, de manera que as podamos comprender su comportamiento durante alguna enfermedad que ocasionen en el paciente. LIMPIEZA- Se debe verificar que nuestro campo de trabajo est limpio, el material que vallamos a utilizar y sobre todo que nuestras manos estn limpias antes y despus de realizar la prctica, garantizndonos as, buenos resultados en los anlisis. CUIDADOS- Manejar con precaucin el material que nos es proporcionado para la realizacin de cada prctica, as como no entrar con alimentos al laboratorio, verificar que las llaves de gas queden cerradas despus de la prctica, evitara que ocurra algn incidente.

UTILIDAD DEL MICROSCOPIO OPTICO, ELECTRONICO Y DE FLUORESCENCIA

El microscopio es un .instrumento de precisin que nos permite la observacin de objetos que por su tamao no son perceptibles a simple vista, existen diversos tipos:
TIPOS DE CARACTERISTICAS MICROSCOPIO ptico o de El contraste se logra por absorcin campo claro UTILIDAD MEDICA *Se utiliza en la observacin de tejidos y microorganismos. *Las muestras requieren tincin tincin para observar organismos complejos *Se utiliza en la observacin de microorganismos presentes en un tejido Utilizando anticuerpos fluorescentes se pueden identificar tipos especficos de microorganismos presentes en un mezcla compresa *Nos ayuda a observar virus los cuales sabemos que son demasiado pequeos, asi como la ultra estructura celular.

Fluorescencia

Se basa en la capacidad de emitir luz visible que tienen los especmenes fluorescentes cuando se les ilumina con luz violeta

Electrnico

Hace pasar un haz de electrones a travs de la preparacin.

EXAMEN BACTERIOSCOPICO El examen bacterioscopico se lleva a cabo usando la tcnica de tincin Gram, en la cual se evala la afinidad tinto rial de la bacteria, as como la morfologa que estas pueden presentar y su agrupacin

COMPOSICIN DE LA PARED CELULAR DE LAS BACTERIAS

Todas las bacterias poseen una pared celular y debido a la composicin de esta se pueden clasificar en Gram positivas y Gram negativas: Una bacteria Gram positiva posee una pared celular gruesa formada por peptidoglucano, que permite la difusin de los metabolitos a la membrana plasmtica, durante una infeccin el peptidoglucano puede interferir en la fagocitosis y estimular diversas respuestas inmunitarias. La pared celular de las bacterias Gram positivas tambin puede presentar otros componentes como los acidos teitoicos que son fundamentales para la viabilidad celular y constituyen los factores de virulencia. Los cidos Lipoteitoicos favorecen la fijacin a otras bacterias y a receptores especficos. Por ultimo tambin est formada por polisacridos completos. La pared celular de las bacterias Gram negativas contienen dos capas situadas en el exterior de la membrana citoplasmtica y por fuera de esta se encuentra una capa delgada de peptidoglucano, no contienen acidos teitoicos ni lipoteitoicos, pero presentan un espacio periplsmico que contienen enzimas hidrolticas, importantes para llevar a cabo su metabolismo pero que tambin pueden ser factores de virulencia. En la zona ms externa de la pared celular se encuentra una mlecula anfipatica denominada LPS (lipopolisacarido) que estimula respuestas inmunitarias. Tambien presenta unas protenas llamadas porinas que regulan el paso de sustancias a travs de la membrana.

TINCIN DE GRAM DE ACUERDO A LA COMPOSICIN DE LA PARED

Debido a los componentes de la pared celular de las bacterias Gram positivas, en especial a la gruesa capa de peptidoglucano, y a su composicin qumica, el complejo cristal violetalugol, es retenido y aun despus del tratamiento con el decolorante, conserva el colorante bsico, por lo que se observan al microscopio de color azul oscuro o violeta una vez concluida la tcnica de tincin. Las bacterias Gram negativas pierden el colorante cuando son tratadas con el decolorante debido a que el alcohol disuelve el contenido lipdico de la pared celular lo que aumenta su permeabilidad, dando como resultado la perdida de complejo cristal violeta- lugol. Debido a esto las bacterias se observan al microscopio de color rosado.

MEDIOS DE CULTIVO

Un medio de cultivo es un material alimenticio que se usa en el laboratorio para el desarrollo de los microorganismos. Una vez que ha sido preparado, u medio de cultivo puede ser inoculado para despus ser incubado en condiciones que avorezcan el crecimiento microbiano. El crecimiento de microorganismos es el cultivo. Los medios de cultivo deben contener los nutrientes necesarios para el desarrollo del microorganismo. En muchos casos sern necesarias ciertas vitaminas para el crecimiento. El agar es el principal agente solidificante utilizado en medios bacteriolgicos, el cual se disuelve por completo a una temperatura de 100 grados y se solidifica a una de 40 grados. De acuerdo a sus consistencia los medios de cultivo se pueden clasificar como: *Lquidos- Se denominan caldos de cultivo y no tienen agar en su formulacin. *Semislidos: contienen 0.5% de agar y se utilizan para estudiar nla movilidad de las bacterias. Slido: Contienen de 1.52 % de agar. Estos medios inmovilizan a las clulas permitindoles crecer y formar colonias. De acuerdo a su composicin se clasifican en: Definido: Se conoce la composicin exacta del cultivo. Mnimos: nicamente le proporcionan al microorganismo los nutrientes necesarios para crecer, no para desarrollarse ptimamente. Complejos: No se conoce la composicin exacta del medio, se utilizan para cultivar bacterias desconocidas o bacterias con requerimientos nutricionales muy complejos. De acuerdo a su funcin se clasifican en: *Medios selectivos: Poseen uno o ms componentes aadidos, los cuales inhibirn o prevendrn el crecimiento de ciertos tipos de especies o promovern el crecimiento de las especies deseadas. *Medios diferenciales: Permiten distinguir entre diferentes tipos de bacterias con base en alguna caracterstica observable en su patrn de crecimiento en el medio.

Medios de enriquecimiento: contienen algn componente ue permite el crecimiento de cierto tipo especfico de bacteria, pero no contienen sustancias inhibidoras. *Medios enriquecidos: Se emplean para cultivar microorganismos que requieren uun gran numero de factores de crecimiento. Generalmente contienen estractos biolgicos poco usuales como sangre.

MECANISMOS DE ACCIN DE LOS DESINFECTANTES Y ANTISEPTICOS METODO

EBULLICIN

MECANISMO DE ACCIN

USOS

AUTOCLAVE

Las altas temperaturas *En la purificacin del agua provocan la desnaturalizacin *Esterilizacin de de las protenas instrumentos *Eliminacin de microorganismos Al combinarse la presin y *Esterilizacin del material de laboratorio y material el calor, la membrana se quirrgico destruye y las protenas se

desnaturalizan
ALCOHOL Por su composicin qumica destruye a los lpidos y desnaturaliza protenas debido a su pH. Rompen los cidos nucleicos, precipitan las protenas y provocan la oxidacin de enzimas esenciales Aniquilacin de los grupos terminales: hidroxilo, carbonilo, amino y sulfhdrico Desnaturaliza las protenas *Desinfeccin de la piel *Desinfeccin de instrumentos *Satirizante de manos *Antisepsia de tejidos y como desinfectante

COMPUESTOS YODADOS

ALDEHIDOS

Se utiliza como desinfectante de instrumental de laboratorio Se utiliza en la esterilizacin de material del laboratorio (es poco efectivo ) Forma parte de la estructura qumica de los detergentes y funciona como desinfectante Desinfeccin de implantes de plstico, lentes de contacto y prtesis quirrgicas

CALOR HMEDO

AMONIO

Desnaturalizacin de las membranas celulares Oxidacin de la pared bacteriana debido al radical oxidrilo que presenta el perxido

Perxido de hidrogeno

GRADOS DE DESINFECCIN
La desinfeccin se define como la eliminacin de toda forma de microorganismo con excepcin de las esporas, presentes en cualquier objeto inanimado. Los desinfectantes se clasifican en 3 grados: *Desinfeccin de nivel alto: Se utilizan en objetos empleados en procedimientos invasivos que no pueden soportar los mtodos de esterilizacin P/e algunos endoscopios, instrumentos quirrgicos de plstico. Los desinfectantes pueden ser: el calor hmedo, el glutaraldehdo, etc.

*Desinfeccin de nivel intermedio (alcoholes, fenoles, compuestos yodados): Se utilizan para la limpieza de superficies o instrumentos en los que es poco probable la contaminacin por esporas bacterianas o microorganismos con alto grado de resistencia P/E los laringoscopios, los espculos vaginales etc. *Desinfeccin de nivel bajo: Se utilizan para tratar instrumentos y dispositivos que no revisten ninguna importancia, como los electrodos de del electrocardiograma y los estetoscopios, debido a que no atraviesas las mucosas ni losas tejidos estriles.

MECANISMO DE LA TOMA DE MUESTRA Y MEDIOS DE TRANSPORTE

EXTRACCIN DE LQUIDO CEFALORRAQUIDEO Se debe realizar la puncin en condiciones de mxima asepsia, desinfectar la zona con yodo- povidona al 2%, realizar la puncin en los espacios intervertebrales L-3L-4, L-4 L5, o entre L-5-S1. Al llegar al espacio subaracnoideo, retirar el estilete y dejar salir libremente el LCR, recolectarlo en 3 tubos estriles cnicos con taparrosca. Extraer un volumen mnimo de 3 ml/tubo. UROCULTIVO Se debe obtener la orina de la maana debido a que se encuentra ms concentrada pero si no es posible el paciente debe abstenerse de orinar durante 3 horas previas a la toma de muestra el volumen recomendado a recolectar es de 25 a 30 ml, el mecanismo depende de las condiciones del paciente al que bse le valla a tomar la muestra. El recipiente debe ser un envase esteril de boca ancha y cierre de tapn de rosca. ABSCESOS ABIERTOS Lavar con suero fisiolgico estril la superficie de la herida para retirar la flora colonizante, recoger el pus mediante jeringa y aguja, aspirando preferentemente de zonas profundas. Para muestras lquidas se intentara obtener de 1-10 ml. Transporte- se utilizara para el envo tubos estriles con tapa- rosca. ABSCESOS CERRADOS Realizar la antisepsia de la zona a puncionar con alcohol al 70% de forma concntrica comenzando por el centro, abarcar una zona de 10 cm, repetir la operacin con Yodo povidona, dejar secar al menos 1 min para que el antisptico ejerza su accin. Realizar una puncin-aspiracin del absceso con jeringa y aguja, traspasar la muestra a un contenedor estril. Deber enviarse un volumen de muestra entre 1-5 ml. EXUDADO FARINGEO Mediante un hisopo de algodn o catter (k30-k33) aspirar el moco por va per o retro nasal contra la pared posterior de la faringe y amgdalas, tocando cualquier exudado. Evitar tocar la lengua. Enviar en un escobilln especial o con mango de hilo de alambre flexible e hisopo con medio de transporte de Amies.

HERIDAS QUIRURGICAS La toma de muestra se realizara con tcnica asptica de limpieza de la zona con suero fisiolgico para eliminar la contaminacin superficial. Se realizara por puncin y se colocar la muestra en recipiente estril con tapa de rosca. CATETERES INTRAVASCULARES Desinfectar con alcohol al 70% una zona de piel correspondiente a 10 cm, hacerlo en forma de crculos comenzando por el centro , repetir la misma operacin con iodforo. Retirar el catter con la mxima asepsia, cortar los 5cm distales del catter que corresponden a la porcin intravascular. Introducir el segmento del catter en un recipiente estril. HEMOCULTIVO Lavarse las manos, colocar ligadura y campo estril, palpar la vena a puncionar, realizar antisepsia con alcohol al 70%, repetir el procedimiento usando yodopovidona al 10%, dejar actuar al antisptico, mientras acta el iodforo, desinfectar el tapn de goma del frasco de hemocultivo con alcohol al 70%. Colocarse los guantes estriles y extraer la sangre sin tocar el campo desinfectado, inyectar directamente la sangre en el frasco , mover la sangre para que esta y el medo de cultivo se mezclen. COPROCULTIVO El recipiente donde se depositara la muestra debe estar limpio o estril con boca ancha y cierre hermtico. Modo de obtencin: Solo se procesan materias liquidas o pastosas.Sison pastosas se toma una porcin del recipiente donde hayan sido emitidas y se transfieren al frasco, se seleccionan las partes con mucus, pus o sangre. En caso de heces liquidas se puede utilizar una jeringa para el aspirado del material fecal.