EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS: SANGRE TOTAL INTRODUCCION La biologa molecular es una de las herramientas ms tiles de las que se vale

hoy en da la ciencia y la medicina moderna. La obtencin de cido desoxirribonucleico (ADN), es el punto de partida para la mayora de anlisis genticos; incluso contando con pequeas cantidades de ADN, es posible amplificar genes especficos in vitro a travs de la reaccin en cadena de la polimerasa (PCR por sus siglas en Ingls : Polymerase Chain Reaction) (1). Esta revolucionaria tcnica le vali a su inventor, Kary B. Mullis, el premio Nobel de qumica en 1993. FUNDAMENTOS TERICOS: Todas las clulas, a excepcin de las clulas anucleadas de los eritrocitos maduros en humanos, contienen ADN en sus ncleos celulares. Tambin podemos encontrar ADN dentro de otros compartimentos celulares diferentes al ncleo, como las mitocondrias y los cloroplastos. La cantidad de ADN presente en algunos tejidos es muy pequea; por este motivo no representa una fuente conveniente de extraccin, aislamiento y purificacin, para ser empleado en diferentes estudios de carcter gentico, biolgico. y/o bioqumico. Muchos tejidos contienen alta actividad de desoxirribonucleasa (DNAasa) que rompe la macromolcula en pequeos fragmentos. Para seleccionar un tejido como fuente de ADN debe reunir dos condiciones: contener gran cantidad de material gentico y poseer baja actividad de DNAasa. El tejido linfoide, y en este caso el timo y el bazo representan materiales biolgicos que son utilizados con mucha frecuencia como fuente de cantidades considerables de ADN para diferentes estudios. Despus de extrado el ADN suele ser rpidamente desnaturalizado y por lo tanto se debe tener mucho cuidado en su remocin, aislamiento y purificacin con el fin

de obtener un producto que conserve la identidad e integridad estructural con el ADN de la clula de la cual proviene. El estrs o tensin mecnica o fsico qumica, que acompaan los procesos de purificacin de las molculas de ADN deben ser evitadas al mximo y las nucleasas inhibidas. Factores como los iones Ca2+ y Mg2 son importantes para la actividad del las DNAasas .El citrato de sodio presente en las soluciones empleadas para la extraccin y purificacin del ADN, atrapa estos iones e impide, de esta forma, la accin de las enzimas que digieren estas molculas. Con el fin de eliminar en forma definitiva la actividad de las nucleasas, las etapas de remocin de las protenas deben ser llevadas a cabo tan rpido como sea posible y en fro. Las nucleoprotenas, son protenas que aparecen asociadas con los cidos nucleicos de las clulas eucariotas; son insolubles en agua y en soluciones de baja fuerza inica pero solubles en soluciones de alta fuerza inica; propiedad que debe ser tenida en cuenta durante los procesos de extraccin inicial. LOS ACIDOS NUCLEICOS. Es muy probable que, en la actualidad, todo mundo haya escuchado hablar de los cidos nucleicos, en particular del ADN, simplemente por los descubrimientos recientes y por las grandes innovaciones tecnolgicas en la investigacin del ADN, los cuales no dejan de aparecer casi a diario en los grandes peridicos. Las inciales ADN significan cido desoxirribonucleico. Se encuentra en todas las clulas. Al ADN muchas veces se le llama la molcula central de la vida, ya que contienen las unidades de la herencia, que se llaman genes son un cdigo qumico que especifica el tipo de protena que un organismo puede producir y estas protenas incluyen a las enzimas que regulan la mayor parte de la actividad celular.

ESTRUCTURA DE LOS ACIDOS NUCLEICOS. Cada molcula de ADN est formada por dos polmeros extremadamente largos sostenidos entre s por enlaces de hidrgeno y enrollados en lo que se conoce como doble hlice. Cada uno de los dos polmeros est formado por numerosas subunidades llamadas nucletidos, enlazadas covalentemente formando las cadenas. Cada nucletido est compuesto por tres partes: un compuesto de fsforo llamado fosfato, un azcar de 5 carbonos simples y una base nitrogenada. Existen cuatro bases nitrogenadas en el ADN, por lo tanto hay cuatro diferentes nucletidos. Su ordenamiento lineal especfico dentro del polmero constituye el cdigo qumico (cdigo gentico). En otras palabras, los genes son bsicamente un ordenamiento de nucletidos. En nuestro ADN que simplemente determina como sern nuestras protenas.