UNIVERSIDAD PRIVADA NORBERT WIENER FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

E.A.P. TECNOLOGA MDICA LABORATORIO CLINICO Y ANATOMA PATOLGICA.

INFORME DEL CURSO DE INMUNOLOGA II PRUEBAS NO-TREPONMICAS PARA DIAGNSTICO DE SFILIS.

DOCENTE: PUNCHIN, Elisa. ALUMNO: MENESES LAZN, ALEJANDRO SANTIAGO.

Lima Per 2013

Marco terico La sfilis es una infeccin bacteriana (Treponema pallidum) cuya va de contagio ms frecuente es el contacto sexual. La infeccin generalmente

desarrolla enfermedad en un transcurso de varios aos. En las etapas tempranas, la sfilis causa enfermedad en los rganos genitales, en las membranas mucosas y en la piel. Sin tratamiento la sfilis puede conducir a problemas graves, tales como problemas en el corazn, problemas neurolgicos (neurosfilis), ceguera, demencia y la muerte. Las tasas de infeccin por sfilis han aumentado en los Estados Unidos desde 1996, especialmente entre hombres que tienen sexo con otros hombres. La sfilis se transmite de persona a persona mediante el contacto directo con una lcera o lesin sifiltica, habitualmente durante el sexo anal, vaginal u oral. Las mujeres embrazadas que padecen la enfermedad la pueden transmitir a sus bebs. La sfilis no se contagia a travs de asientos de inodoro, picaportes de puertas, piscinas, baeras/tinas, prendas de vestir o utensilios de cocina. Mientras que los problemas de salud que ocasiona la sfilis en adultos y recin nacidos son graves, las lceras genitales provocadas por la sfilis tambin facilitan la transmisin o adquisicin del VIH por va sexual. SINTOMATOLOGIA Sfilis primaria: En la mayora de los casos, el nico sntoma evidente de la sfilis primaria es una lcera indolora, llamada "chancro", que aparece dentro de las dos a seis semanas despus de que la persona se infect con el T. pallidum. Por lo general, la lcera aparece en el pene, la vulva, la vagina o el ano. Tambin puede aparecer en el cuello del tero, la lengua, los labios y en otras partes del cuerpo. La lcera suele curarse sin tratamiento en pocas semanas. Sfilis secundaria: El sntoma ms comn de la sfilis secundaria es una erupcin de lesiones pequeas y parecidas a las de la viruela (por lo general, de color

castao rosceo), que al agruparse tienen el aspecto de un sarpullido que no genera picazn. Si bien pueden aparecer en cualquier parte del cuerpo, los sntomas clsicos de la sfilis secundaria son el sarpullido en las palmas de las manos y las plantas de los pies. Sfilis latente: La sfilis latente (oculta) se diagnostica cuando la persona ha generado anticuerpos contra la bacteria pero no tiene ningn sntoma de infeccin. Si bien alguien que tiene sfilis latente generalmente no se considera contagioso (esto significa que es muy poco probable que transmita la bacteria a otros), se recomienda el tratamiento para prevenir complicaciones graves durante las etapas tardas de la enfermedad. La sfilis latente se puede dividir en latente temprana o latente tarda, dependiendo de cunto tiempo la persona haya tenido la infeccin. Las personas con sfilis latente tarda (aquellas personas que han estado infectadas durante al menos un ao) o sfilis latente de duracin desconocida (aquellas personas que no saben cundo adquirieron la infeccin) requieren hacer un tratamiento ms agresivo que aquellas personas que tienen una infeccin latente temprana (que han estado infectadas por menos de un ao). Sfilis terciaria: Si la sfilis primaria, secundaria o latente no recibe tratamiento, la bacteria puede diseminarse y causar dao en rganos internos, incluyendo el cerebro, los nervios, los ojos, el corazn, los vasos sanguneos, el hgado, los huesos, y las articulaciones. Esto puede conducir a una variada gama de problemas graves para la salud, los cuales incluyen infartos, parlisis, aneurismas y enfermedad del corazn. Neurosfilis: Esto ocurre cuando el T.Pallidum infecta el cerebro o la mdula espinal (sistema nervioso central). La infeccin puede ocurrir durante cualquier etapa de la sfilis y puede causar daos neurolgicos graves, incluyendo parlisis, falta de sensibilidad fsica, ceguera y sordera graduales. La neurosfilis puede ser lo suficientemente grave como para causar incapacidad permanente o la muerte. Los estudios han demostrado que las personas VIH positivas infectadas con el T.

Pallidum tienen ms probabilidades de desarrollar neurosfilis, an durante las etapas tempranas de la infeccin. PRUEBA DE RPR-DIAGNSTICO PARA SFILIS. Materiales y equipos Reactivo R.P.R. Carbn Antgeno Suspensin: 0.003% 0.09% cardiolipina, Colesterol, 0.020-0.022% en Lecitina, solucin

suspendido

alcohlica. Control Reactivo: Suero humano conteniendo azida de sodio como persevante. Dispensador de antgeno RPR. Tarjetas y dispensadores suficiente. Pipeta sexolgicas de 50 uL y 100 uL. Solucin fisiolgica. Rotador serolgico. de muestra en cantidad

Procedimientos:

Mezclar con algun material esteril e inerte.

agregar una gota de los reactivos de control y una gota de la muestra en distintos circulos de la cartilla.
Cuidar de que las muestras y los reactivos de control no mantengan contacto con nada, ni entre si. Haber rotulado la parte inferior para identificar las muestras.

Esperar cuatro minutos.

Agregar una gota del reactivo RPR en cada circunferencia que haya sido rellenada con reactivos de control o muestras.

Luego de pasado el tiempo de reaccin, visualizar bajo luz leve para identificar.

Los bordes negruzcos y la presencia de sobrenadante negruzco representan la reaccin.

Resultados Solo 2 posibles reportes son realizados con este test: Reactivo y No Reactivo. a) REACTIVO: Indica pequeos o grandes agregados en el centro o en la periferia del crculo del test. b) NO REACTIVO: Indica la ausencia de agregados dentro del crculo del test. Cuestionario 1. La prueba de RPR es diagnstica de Sfilis? Es una prueba que detecta la presencia de anticuerpos que produce el cuerpo al estar presente el Treponema en el organismo. La produccin de el anticuerpo llamado Reagina se activa por la presencia de las espiroquetas de la bacteria. Por lo tanto, la prueba solamente confirma la presencia del anticuerpo, mas no la presencia de la enfermedad o la bacteria. 2. La prueba de RPR es de mayor sensibilidad y especificidad que el VDRL? Son del mismo grado de sensibilidad y especificidad, pues ambas refieren la presencia del anticuerpo Reagina en el organismo.

3. La prueba de RPR sirve para control de tratamiento de Sfilis? No, pues siempre va a arrojar un resultado positivo (Reactivo) mientras haya presencia de anticuerpos contra Treponema. Por otro lado, al cruzar con algunas enfermedades autoinmunes como lupus, y otras enfermedades bacterianas o virales y consumo de drogas, puede dar positivo tambin para cualquiera de estas a pesar de haber sido eliminada la bacteria causante de sfilis.

PRUEBA DE V.D.R.L. (VENEREAL DISEASE RESEARCH LABORATORY) EN DIAGNSTICO DE SFILIS: Materiales y equipos: Reactivo V.D.R.L. en Suspensin: 0.003% cardiolipina, 0.020-0.022% Lecitina, 0.09% Colesterol, suspendido en tampn buffer. Control Reactivo: Suero humano conteniendo azida de sodio como preservante. Dispensador de antgeno VDRL. Dispensadores de muestra en cantidad suficiente. Pipeta automtica de 50 y 100 uL y puntas serolgicas. Solucin fisiolgica. Rotador. Microscopio Placa de vidrio excavada Gradilla y tubos de vidrio 13x100

Procedimiento.

agregar en una lamina portaobjetos una gota de la muestra. Agregar en otra lamina portaobjetos una gota del control positivo.
De preferencia siempre hacerlo en laminas separadas para que no haya contaminacin.

Esperar cuatro minutos antes de leer.

Agregar en cada lamina una gota del reactivo de VDRL. Mezclar con algun material esteril e interte.

Visualizar luego del tiempo de espera la reaccin o no reaccin. Visualizar sobre aglutinoscopio.

Se visualiza la presencia de un sobrenadante blanquecino y opacidad en la muestra.

Para la prueba semi-cuantitativa: Realizar diluciones seriadas en tubos de ensayo con la muestra y Cloruro de Sodio (NaCl), (1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32, 1:64). Posteriormente colocar una gota de cada tubo de dilucin, con puntas de pipeta estriles, en una lmina o casilla distinta. Colocar una gota de reactivo VDRL en cada casilla y dejar reaccionar por 4 minutos. Visualizar a la luz la reaccin. Resultados El resultado positivo se caracteriza por presentar sobrenadante blanquecino y ser opaco. El resultado positivo, a su vez, puede visualizarse con mayor efectividad al microscopio. Cuestionario 1. Se usa el VDRL en la neurosfilis? Si, detecta igualmente la presencia de Treponema pallidium en tejido nervioso como las pruebas treponmicas. As lo asevera Nery Sez Pozas, y colaboradores en su publicacin de 1997 en la Revista Cubana de Medicina Integral, con el tema El diagnstico de laboratorio de la sfilis. Revisin bibliogrfica. 2. El ttulo de VDRL es importante para el control de tratamiento? Puede ser importante para determinar la intensidad con que el cuerpo est respondiendo a la amenaza bacteriana, pero siempre dar resultado positivo. 3. La prueba de VDRL es prueba diagnstica para Sfilis? Es prueba diagnstica para la presencia de anticuerpos que combaten la presencia de Treponema pallidium. 4. Ttulos altos en VDRL sirve como diagnstico de Sfilis? Si, pues de esta forma comprobamos que la carga bacteriana est provocando una produccin excesiva de Reagina. 5. La pruebas no treponmicas son mejores que las treponmicas? Las pruebas Treponmicas tienen una mayor especificidad y sensibilidad y no cruzan con otras enfermedades, por lo que son mejores que las pruebas

no treponmicas, pero estas ltimas dan un resultado ms inmediato y por un menor costo.

PREGUNTAS ADICIONALES: 1. Por qu en el VDRL se inactiva el suero? Para que haya una reaccin tipo aglutinina. 2. Qu es el cloruro de colina, como interviene en el antgeno del VDRL? Interviene para evitar la inactivacin del suero. Es un aditivo utilizado mayormente en alimentos, amina cuaternaria saturada. Resulta de la reaccin de la trimetilamina y del xido etileno con el cloruro de hidrgeno por el proceso de Davy. Tambien se le denomina solamente colina. 3. El LCR con que metodologa trabajaras? porque? Con la prueba de VDRL, pues el RPR es una prueba no-treponmicas para ser aplicada en suero (sangre) mientras que el VDRL tambin se puede aplicar en LCR.