EVOLUO GENTICA

1999 Islndia Companhia de Biotecnologia - base de dados com os perfis de DNA de todos os residentes do Pas Informao gentica - disponibilizada a Investigadores, fins mdicos Investigao Populao ideal para relacionar as doenas e a Gentica Islndia- Consequncias Registos mdicos Informao genealgica Privacidade, consentimento e comercializao? DESCOBERTAS CIENTFICAS Sculo XIX Matria constitudas por tomos Clulas unidades fundamentais dos organismos Ncleo fora de vida das clulas Cromossomas papel na hereditariedade Achados arqueolgicos Ncleo fora de vida das clulas Cromossomas papel na hereditariedade Arqueologia Manipulao gentica espcies Domesticao animais Cultivo de plantas SELECO 8000 a 1000 AC Cavalos, Camelos, Bois, Lobos 5000 AC Cultivo milho, trigo , arroz, tmaras 883-859 AC Rei assrio Assurnasirpal II Polinizao Artificial TAMAREIRAS 400 variedades em 4 osis do Sahara 800 a 900 AC Escola Hipocrtica da Medicina 384 a 322 AC - Aristteles GRCIA Hipcrates Tratado - Na Semente HUMORES: activos, saudveis, doentes Humores - portadores de caractersticas hereditrias - transportados para o smen - alteraes durante a vida - transmitidos descendncia GRCIA - Aristteles Smen - formado a partir do sangue, calor vital, descendncia semelhante aos pais Sangue menstrual - matria bruta para descendncia

TEORIAS TRANSMISSO HEREDITRIA 1600-1850 Biologia Moderna Aristteles e Hipcrates (o sangue menstrual seria o meio de cultura e o tero uma incubadora, transmisso de homnculos- a mulher seria simples portadora do embrio j existente no espermatozide) Teoria Epigentica Harvey (1600) Foi Harvey quem escreveu baseado no trabalho de Aristteles esta teoria - diz que um organismo deriva de um ovo, que se diferencia em num adulto durante o perodo embrionrio. Teoria da Preformao (Sculo XVIII) Casper Wolff (Sculo XVIII) ARGUMENTOS Teoria Epigentica Teoria Atmica Dalton (1808) Com o trabalho de Casper Wolf (provou que nem todas as estruturas estavam presentes nas clulas sexuais mas antes iam sendo adquiridas ao longo do desenvolvimento embrionrio) e juntamente com a Teoria Atmica de Dalton, a Teoria da Preforma estava quase posta de parte!!! A TEORIA ATMICA diz que toda a matria composta por tomos (estruturas invisveis). Teoria Celular Schleiden e Schwann (1830) A TEORIA CELULAR (1830) diz que todos os organismos so compostos por unidades bsicas que so as clulas. Isto foi possvel provar com o aparecimento do microscpio. Teoria Seleco Natural Darwin (1859) As espcies actuais descendem de espcies ancestrais por modificaes destas Descendncia maior que a suportvel pelo ambiente TRAOS VANTAJOSOS - Sobrevivncia prolongada e reproduo Acumulao de variaes ao longo do tempo Isolamento reprodutivo nova espcie Teoria da Transmisso Caracteres Mendel (1900 DUPLICAO RESULTADOS) Ervilheira - caractersticas determinadas por genes situados em loci distintos Um locus com 2 genes indivduo - um nr igual de caractersticas (igualdade de transmisso dos sexos) Teoria - actualidade Igualdade no nr de cromossomas para os 2 sexos DNA mitocondrial - materno em maior quantidade 9 meses - efeitos atravs da me

Evoluo da Gentica At 1959 Definio das doenas hereditrias de tipo Mendeliano Bioqumica do metabolismo Descrio das malformaes congnitas Antropometria e grupos sanguneos 1956- determinao do nr normal de cromossomas na espcie humana (caritipo) Dcada 60 Caritipo e definio das grandes cromossomopatias Estudo das enzimas a nvel celular Hereditariedade multifactorial Conselho gentico Dcada 70 Polimorfismo cromossmico e gnico Localizao de genes Gentica das populaes e estudo dos efeitos ambientais Diagnstico pr-natal e fertilizao in vitro Dcada 80 Teraputica gnica pela dieta Preveno de cromossopatias Teraputica profiltica Seleco gamtica in vitro Dcada 90 Interveno mdica e cirrgica sobre o embrio e o feto Diagnstico gentico pr-implantao Microinjeco intracitoplasmtica de um espermatozide Projecto do Genoma humano Actualidade Potencialidades diagnsticas e teraputicas do conhecimento pleno da sequnciao genmica Farmacogentica- desenvolvimento de novos frmacos atravs do conhecimento de todos os genes do genoma humano Aplicaes da Gentica Descoberta da relao doena gentica mutao gnica ou cromossmica especficas Deteco, Tratamento, Aconselhamento gentico - Doenas Genticas Cancro Doena gentica a nvel somtico Imunogentica Histocompatibilidade Genes de susceptibilidade doenas multifactoriais DIAGNSTICO Preveno Tratamento RASTREIO Medicina Forense alterao

Histria Familiar EVOLUO - Humanidade Sade Pblica Risco Recorrncia Predictilidade - Doenas Tratamento - Doenas Terapia Gnica - tratamento de doenas genticas mediante introduo de cpias normais do gene afectado nas clulas de indivduos doentes Biotecnologia transgnicos Tecnologia de DNA Recombinante manipulao e clonagem de genes em vectores de DNA bacteriano ou vrico e transferncia para clulas hospedeiras Gentica - Ferramentas Testes genticos diagnstico - preditivo - pr-natal - deteco de portadores Caritipo (1956) ACONSELHAMENTO GENTICO - Acessoria de um casal que deseja tomar uma deciso quanto sua reproduo. CONSELHO GENTICO Definio da OMS: constitui a preveno de gentipos que acarretam doena e/ou um efeito congnito mediante a identificao prospectiva ou retrospectiva dos casais capazes de os produzir Definio da Sociedade Americana de Gentica Humana: trata-se de um processo comunicativo que trata os problemas humanos relacionados com o aparecimento ou com o risco de recidiva de um determinado transtorno numa famlia Patologia Gentica 1. Monognica (mendeleana) Em 1902 Archibald Garrod publica a relao entre a doena humana e as leis da hereditariedade de Mendel (publicadas em 1865) Archibald Garrod props uma transmisso recessiva para a Alcaptonria Victor Mckusic apresenta uma catlogo com mais de 11000 doenas monognicas (Mendelian Inheritance in Man) 2. Cromossmica Em 1959 definida a etiologia cromossmica do Sndrome de Down por Lejeune Anteriormente Langdon Down j tinha publicado uma classificao de atraso mental em raas (caucasianas, etope, malaio, mongolide) 3. Multifactorial Resulta da interaco de um ou mais genes com um ou mais factores ambienciais

Doenas multifactoriais esto na base de cerca de metade das malformaes congnitas Doenas multifactoriais podero representar doenas crnicas em idade adulta (Artrite reumatide, hipertenso arterial, psicoses) Somtica 4. Adquirida ou cumulativa Provocada por efeitos aditivos de mltiplas mutaes em diferentes genes (cancro, doenas autoimunes)

Frequncia doenasAos Gnicas anos Cromossmicas 1.8/1000

25> 25 anos

Global

2/1000

3.8/1000

Monognicas

3.6/1000

16.4/1000

20/1000

Multifactoriais

46.4/1000 600/1000

646.4/1000

Somticas

--------

240/1000

240/1000

Gentica - Estudo da hereditariedade e da variao (diversidade) - Estudo das clulas, descendncia e populaes Gentica transmisso Anlise bioqumica e molecular Estudos citolgicos Gentica das populaes Gentica de Transmisso Estudo da transmisso de traos dos progenitores para os descendentes ao longo de geraes EXPERINCIAS DE MENDEL ANLISE DE PEDIGREES Padres de hereditariedade seguidos ao longo de geraes Modo de hereditariedade de uma caracterstica ou trao Pedigree Anemia c.falciformes Doena Autossmica Recessiva AA HOMOZIGOTO NORMAL Aa HETROZIGOTO PORTADOR aa HOMOZIGOTO AFECTADO

RFLPs - "restriction fragment length polymorphisms (termo usado para descrever diferentes alelos de um locus que podem distiguir-se por Southern) Herana de alelos para a Anemia de C.Falciformes estudo por RFLP Diferentes genotipos: homozito normal (AA), heterozigoto homozigoto recessivo com anemia (aa) - identificados por RFLP Citogentica Estudo da estrutura dos cromossomas e anomalias CARITIPO Cromossomas caractersticos de uma espcie dispostos por ordem G- banding bandas horizontais caractersticas de cada cromossoma Painting Sondas especficas para cromossomas ou zonas de cromossomas Fluorescence In-Situ Hybridization (FISH) BANDA - parte do cromossoma que se distingue claramente dos segmentos adjacentes por surgir mais claro ou escuro em uma ou mais tcnicas de bandas Tcnicas de banding 1) bandas distribuidas ao longo de todo o cromossoma ( Bandas G, Q e R) 2) restritas a um numero especficos de bandas ou estruturas dos cromossomas (Bandas C, e nucleolus organizer regions - NOR's cromossomas acrocntricos) BANDAS G Uso frequente designao G por corarem pelo Giemsa podem produzir-se com outros corantes Regies escuras - heterocromticas, zonas ricas em AT Regies claras - eucromticas, zonas ricas em GC BANDAS R Aproximadamente o reverso das bandas G R - significa "reverse Regies escuras eucromticas Regies claras - heterocromticas BANDAS Q Semelhante s bandas G Fluorescncia Zona heterocromticas coram menos com esta tcnica do que com as Bandas G BANDAS G e R FLUORESCENTES Anlise Qumica e Molecular Tecnologia de DNA recombinante Biotecnologia portador (Aa),e

Gentica das Populaes Estudo processos evolutivos Previses de variaes genticas Previses de frequncia de genes em geraes futuras

CONCEITOS BSICOS Componentes celulares Diviso celular Interaces celulares Steam Cells e especializao Vrus e pries Componentes celulares Actividades e anomalias celulares - caractersticas herdadas Funcionamento celular de indivduos portadores de doena tratamento Compreenso - aparecimento da doena

Genoma Conjunto de todos os genes Maioria dos genes - no activos Instrues genticas numa clula GENE sequncia de DNA com determinada funo DNA codifica protenas e DNA no activo Maior parte DNA - no expresso Genes - unidades de hereditariedade responsveis pela sntese de protenas ou pela regulao da expresso de genes Sequncia de cido desoxirribonucleico (DNA) ALELOS variaes na sequncia de DNA do mesmo gene Alelo dominante- Produz um efeito notvel, quando presente numa s cpia Alelo recessivo - Produz efeito notvel, quando presente em duas cpias Fentipo - Expresso observvel da combinao de alelos Gentipo - Combinaes dos alelos num indivduo

Transmisso de informao Nvel molecular Nvel familiar Estudo das populaes O conhecimento da informao contida no genoma humano poder personalizar a Medicina e prever doenas futuras NVEL CELULAR O corpo humano constitudo por trilies de clulas. Todas as clulas possuem a mesma informao gentica excepto os glbulos vermelhos - diferenciao. Todos os rgos possuem steam cells em pequena quantidade. Clulas usadas para tratamento das doenas de Alzheimer e Parkinson. INDIVIDUAL Gentipo alelos presentes Fentipo alelos expressos FAMILIAR dos genes paternos e maternos dos genes dos avs Primos direitos partilham 1/8 dos genes Estudo com pedigree-caractersticas especficas POPULAO Populao corresponde a a uma coleco de alelos, que se distingue de outras populaes pela frequncia dos alelos. Pool de genes conjunto de alelos numa populao. EVOLUO Comparao de sequncias de DNA (genes, sequncias de a.a., ) pode revelar proximidade de espcies. Clulas humanas - 4 categorias Epiteliais Musculares Nervosas Tecidos conjuntivos PROCARIOTAS- organismos unicelulares e multicelulares sem ncleo EUCARIOTAS organismos unicelulares e multicelulares com ncleo e organelos cidos Nucleicos - DNA e RNA (armazenamento, expresso e transmisso de informao gentica) Informao DNA RNA protenas DNA - clulas EUCARIOTAS e PROCARIOTAS Cadeia dupla Cadeia simples Vrus DNA 4 tipos de Blocos de DNA - adenina, timina, guanina e citosina Base + Acar + Grupo fosfato NUCLEOTDEO Bases nitrogenadas Organizao das bases - ALFABETO - sequncia de 3 bases codifica aminocido

Aminocidos - blocos PROTENAS RNA Linguagem intermdia clulas eucariotas RNA RNA transporta cpia sequncia do DNA - apresenta a restantes pores da clula DNA molculas de RNA protenas RNA Vrus GENE - Unidade funcional hereditariedade, responsvel pela sntese de protenas ou pela regulao da expresso de genes Arranjo linear nucleotdeos Armazenamento informao Replicao, expresso e mutao ALELOS - variaes da sequncia de DNA no mesmo gene Mutao variao num gene que afecta a aparncia, sade ou bioqumica de um indivduo SNPs (single nucleotide polymorphims) - variaes de bases no DNA POLIMORFISMO - variaes em sequncias de DNA presentes em mais de 1% da populao PROCARIOTA BACTRIA- molcula circular de DNA EUCARIOTAS vrias molculas lineares molculas DNA e protenas CARITIPOS ordenam pares de cromossomas cromossomas corados ou marcados com qumicos fluorescentes diferentes padres de luminosidade Cromossomas Visualizao (bacterianos e vrus) microscopia electrnica Visualizao (eucaritas, em meiose ou mitose) microscopia ptica Cromossomas Homlogos tamanho localizao centrmero sequncia de loci emparelhamento na meiose Um indivduo cujas clulas possuem 3 cpias de cada cromossoma denomina-se TRIPLOIDE 2/3 dos POLIPLOIDES resultam da fertilizao de um ocito por 2 espermatozides e os restantes resultam da fertilizao de um ocito DIPLOIDE por um espermatozide HAPLOIDE 15% dos abortos espontneos so de TRIPLOIDES

ANEUPLOIDIA (x n) n cromossomas anormal n HAPLIDE (n) LEVEDURAS MUTAO CROMOSSMICA duplicao deleco rearranjo de fragmentos de DNA MUTAO GNICA duplicao deleco substituies de nucleotdeos Cdigo Gentico 4 tipos NUCLEOTDEOS Sequncia nucleotdica de um gene codifica composio aminoacdica de uma protena Tripletos de nucleotdeos codificam a.a Componentes Qumicos Clulas molculas Qumicos da vida macromolculas Vitaminas e sais minerais menores quantidades Macromolculas celulares: Carbohidratos Lpidos Protenas cidos Nucleicos Macromolculas estruturas celulares Hidratos Carbono: Energia Estrutura celular Protenas Coagulao Transmisso nervosa Contraco muscular Enzimas Estrutura celular Lpidos Hormonas Energia cidos Nucleicos Transmisso informao

Sndrome de Lesch-Nyhan Cristais de cido rico nos rins e atraso mental e comportamento auto-agressivo MORTE por infeco ou falncia renal aos 30 anos.

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Secreo Celular: DNA -> mRNA -> tRNA-> Retculo .> Golgi -> Secreo GOLGI CENTRO PRODUO VESICULAR VESCULAS MENBRANOSAS SNTESE ACARES LIGAO A PROTENAS GLICOPROTENAS LIGAO A LPIDOS GLICOLPIDOS FINALIZAO PROTENAS ARMAZENAMENTO SECREES CELULARES LISOSSOMAS VESCULAS MENBRANOSAS ENZIMAS DEGRADAO: Fragmentos bacterianos Organelos DOENA TAY-SACHS ARMAZENAMENTO LISOSSMICO DEFICIT ENZIMA DE DEGRADAO CIDO GORDO - hexosaminidase A Cromossoma 15 gene HEXA - codifica subunidade alpha da enzima beta-Nacetylhexosaminidase A DOENA AUTOSSMICA RECESSIVA BANHA CLULAS NERVOSAS ATRASO MENTAL, CONVULSES PERDA AUDIO PERDA MOBILIDADE MORTE 3 ANOS APOS SINTOMATOLOGIA PEROXISSOMAS VESCULAS MENBRANOSAS ENZIMAS DEGRADAO LPIDOS SNTESE CIDOS BILIARES DESINTOXICAO RADICAIS LIVRES ABUNDNCIA CLULAS FGADO E RIM ADRENOLEUCODISTROFIA Acumulao cidos Gordos - crebro e espinal medula Hiperpigmentao pele Acares - doseamento sanguneo aumentado Fraqueza muscular Irregularidade batimento cardaco MITOCONDRIA SECREO ENZIMAS CATALIZAO ATP ENERGIA CELULAR

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MEMBRANA CELULAR SUPERFICIE CELULAR INTERACES CELULARES RECEPTORES CELULARES TRANSDUO CELULAR CITOESQUELETO ESTRUTURA CELULAR MOVIMENTOS CELULARES DIVISO CELULAR EPIDERMLISE BOLHOSA Anomalia filamentos intermedirios

MITOSE
Processo pelo qual o material gentico das clulas eucaritas duplicado e distribudo durante a diviso celular 1 CLULA 2 CLULAS FILHAS CICLO CELULAR Processo contnuo pelo qual as clulas passam durante a vida Varivel de tecido para tecido 2 FASES - INTERFASE (no diviso), MITOSE (diviso) INTERFASE Funes bioqumicas celulares activas 2 fases G (paragem) 1 fase S (sntese) FASE G0 - fase de quiescncia clula mantm funes bioqumicas no pode replicar o DNA nem dividir FASE G1 Sntese de protenas, carbohidratos e lpidos Preparao das molculas da membrana celular das futuras clulas filhas Durao varivel de clula para clula Clulas embrionrias quase toda a vida Clulas medula ssea 16 a 24 horas FASE S Replicao de todo o genoma da clula Sntese de protenas Formao de centrolos (compostos por microtubulos) Cromossoma composto por 2 cpias unidas pelo centrmero Durao 8 a 10 horas, maioria das clulas

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FASE G2 Aps replicao do DNA e antes da mitose Sntese de protenas Formao de membranas celulares - vesculas clulas somticas 2 clulas filhas com material gentico idntico ao da clula me Cromossomas condensam e observam-se em microscpio 2 CROMTIDES material do cromossoma geneticamente idntico PROFASE DNA concentrado impede a separao dos cromossomas Microtubulos iniciam o fuso mittico Ruptura da membrana nuclear METAFASE Cromossomas alinham-se no centro da clula placa equatorial ANAFASE Membrana plasmtica rompe no centro da clula Separao das cromtides pelo centrmero TELOFASE Citocinese diviso dos organelos e macromolculas pelas 2 clulas filhas Separao do material gentico CICLO CELULAR Checkpoints grupos de protenas interactuam para reparao do DNA TELMEROS possuem sequncia de DNA repetida No final de cada mitose os Telmeros perdem 50 a 200 nucleotdeos No final de 50 mitoses os telmeros perdem uma quantidade de DNA indica o final das divises celulares TELOMERASE mantm telmeros presente nos espermatozides, ovos, Clulas cancro, clulas medula CICLO CELULAR FACTORES EXTRACELULARES Hormonas Factores de crescimento FACTORES INTRACELULARES Ciclinas Cinases FASES APOPTOSE Sinalizao do receptor celular para a morte celular Activao de enzimas Caspases destruio do citoesqueleto destruio das enzimas de replicao e reparao do DNA diviso do DNA em fragmentos

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destruio mitocondrias inactivao da adeso celular libertao de fosfolpido para a superfcie externa da menbrana celular adeso de macrfagos STEAM CELLS TOTIPOTENTES steam cell do ovo ou do embrio com pouco desenvolvimento Capacidade de diferenciao elevada PLURIPOTENTES steam cell que persiste no embrio e clulas progenitoras Menor capacidade de diferenciao celular CLULAS PROGENITORAS clula pluripotente com capacidade de especializao num nr restrito de tipo celular DESENVOLVIMENTO Gmetas Meiose Desenvolvimento pr-natal Defeitos congnitos Maturao e idade Gmetas espermatozide ocito gnadas estruturas responsveis pela produo gamtica n DIPLIDE (2n) CLULAS SOMTICAS EUCARITAS Cromossomas Homlogos tamanho localizao centrmero sequncia de loci mesmos genes na mesma ordem podem ter para o mesmo gene diferentes alelos emparelhamento na meiose Um individuo cujas clulas possuem 3 cpias de cada cromossoma denomina-se TRIPLOIDE 2/3 dos POLIPLOIDES resultam da fertilizao de um ocito por 2 espermatozides e os restantes resultam da fertilizao de um ocito DIPLOIDE por um espermatozide HAPLOIDE 15% dos abortos espontneos so de TRIPLOIDES n HAPLIDE (n) 1 cpia de cada cromossoma, 1 cpia do genoma n DIPLIDE (2n) 2 cpias de cada cromossoma, 2 cpias do genoma

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ANEUPLOIDIA (x n) n cromossomas anormal POLIPLOIDE (x n) ABORTO ESPONTNEO

MEIOSE
Processo pelo qual a diviso celular produz gmetas em animais e esporos na maioria das plantas clulas sexuais 4 clulas filhas com metade do material gentico da clula progenitora 2 divises REDUCTORA (I) e EQUATORIAL(II) REDUCTORA ou I reduz a metade o nr de cromossomas replicados (de 46 para 23), com ruptura do centrmero EQUATORIAL ou II produz 4 clulas de 2 clulas da meiose I, separando os cromossomas replicados, sem ruptura do centrmero PROFASE I Cromossomas replicados condensados visveis ao microscpio Sinapse cromossomas homlogos alinhados gene a gene Crossing over (novas combinaes de genes) METAFASE I Cromossomas homlogos alinhados no centro da clula Cada membro do homlogo adere a uma fibra de plos opostos DIVERSIDADE - padro como os homlogos se localizam 3 pares homlogos 23 23 pares cromossomas homlogos - 223 LEI DA SEGREGAO INDEPENDENTE 3 pares homlogos 23 23 pares cromossomas homlogos - 223 ANAFASE I Separao dos Homlogos Centrmero de cada homlogo mantem-se unido TELOFASE I Cromossomas homlogos POLOS OPOSTOS Citocinese PROFASE II Cromossomas condensados e visveis METAFASE II Cromossomas alinhados no equador ANAFASE II Cromossomas separam-se pelo centrmero

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TELOFASE II Cromossomas na forma no replicada polos opostos 4 clula filhas com 1 cpia do genoma

Maturao Gamtica
ESPERMATOGNESE Meiose I espermatcitos secundrios haplides Meiose II espermattides haplides OOGNESE Meiose I 1 Glbulo polar e 2 Ocito (Haplides) Meiose II 1 Glbulo polar origina 2 clulas filhas (morrem), 2 Ocito d lugar ao Ovo e ao 2 Glbulo polar Antes nascimento Ocitos permanecem em Profase I Puberdade a meiose I prossegue em 1cito por ms, que permanece na Metafase II Ovulao libertao de um ocito secundrio Fertilizao faz com que a a meiose se complete no ocito secundrio DESENVOLVIMENTO PR-NATAL OVULAO E IMPLANTAO CLIVAGEM 1 dia aps fertilizao o zigoto sofre mitose e inicia a clivagem, isto , perodo deintensasa mitoses dando lugar a clulas chamadas de BLASTMEROS MRULA surge quando os BLASTMEROS assumem a forma de uma amora ou bola slida (4 dia). BLASTOCISTO surge um lquido central e um prolongamento central MASSA CELULAR CENTRAL este prolongamento central ceular que vai originar o embrio (7 dia) TROFOBLASTO aps a implantao as clulas mais externas do embrio produzem hormonas da gravidez gonadotrofinas corinicas (b- hcg), que previnem a menstruao TESTE GRAVIDEZ 2 SEMANA surge um espaao entre a massa celular interna e as clulas externas ancoradas ao tero CAVIDADE AMNITICA A MASSA CELULAR INTERNA origina uma camada BILAMINAR ECTODERME (camada mais prxima da cavidade amnitica) e ENDODERME (camada mais prxima do blastocisto) GSTRULA quando surgem 3 camadas celulares: ENDODERME, MESODERME, ECTODERME CMADAS GERMINATIVAS PRIMORDIAIS Diferenciao Celular Ectoderm: skin, nervous system Endoderm: lining of gut and internal organs Mesoderm: muscles, bones, heart

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Desenvolvimento pr- natal

OVO FERTILIZADO - 12 a 24 horas aps ovulao CLIVAGEM 30 horas (3 dia) MRULA 3 ao 4 dias BLASTOCISTO 5 dia 2 semana GSTRULA final da 2 semana GMEOS DIZIGTICOS 2 espermatozides fertilizam 2 ocitos ovulao nos 2 ovrios no mesmo ms 2 ocitos libertos do mesmo ovrio tendncia hereditria MONOZIGTICOS um nico ovo fertilizado d lugar a 2 embries iguais 3 tipos - MONOZIGTICOS 2 amnios e 2 corions embries separam-se cedo 1 amnio e 1 corion embries separam-se tarde 2 amnios e 1 corion embries partilham mesmo corion

ORGANOGNESE diferenciao das 3 camadas celulares em rgos e sistemas 3 SEMANA 14 dia notocrdio (percursor esqueleto) e tubo neural (percursor do SNC) 18 dia corao 4 SEMANA crescimento e diferenciao Braos Pernas Rins e pulmes primitivos 28 dia encerramento do tubo neural 5 e 6 SEMANAS Cabea> restante poro Dedos 7 e 8 SEMANAS Esqueleto (cartilagem) FETO Defeito DO TUBO NEURAL se estiver presente encontra-se a alfa-fetoprotena produzida no fgado do feto em grandes quantidade e detecta-se na circulao materna. A ecografia deve revelar o defeito do tubo neural- teste durante a 5 semana de gravidez FETO 1 TRIMESTRE Propores do corpo aproximam-se das do recm- nascido Movimento do feto Aproximao dos olhos Substituio de cartilagem por osso Desenvolvimento dentrio (12 semana) 12 a 15 SEMANAS diferenciao sexual (activao do gene SRY 6 semana)

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2 TRIMESTRE 4 MS Cabelo Sobrancelhas Unhas 18 SEMANA cordas vocais 5 MS posio fetal, 500g 3 TRIMESTRE - maturao dos sistemas digestivo e respiratrio, acumulao de gordura

Defeitos hereditrios diferente defeitos congnitos Defeitos Hereditrios -> Defeitos Congnitos causa gentica -> descendncia Perodo Crtico - Perodo durante o qual anomalias genticas, substncias txicas, vrus podem alterar uma estrutura especfica. PERODO CRTICO varivel Mos e Ps curto Crebro -longo SNDROMES Atraso mental

TERATOGNIOS Talidomida Thalidomide babies Tetraciclinas manchas nos dentes Cocana aborto, problemas comportamentais Cigarro aborto, recm-nascido baixo peso, prematuros lcool Sndrome alcolico fetal Nutrientes Vitamina A (tratamento Acne aborto, defeitos corao, SNC e face) Infeces vricas HIV, Herpes simplex, Rubola lcool Sndrome alcolico fetal facies cabea pequena e face achatada atraso no desenvolvimento semelhante em grupos tnicos diferentes Sndromes - rpida progresso Ataxia Telangectsica Sndrome Cockayne Sndrome Hutchinson-Gilford Sndrome Rothund - Thomson Tricotiodistrofia Sndrome Werner Erros reparao DNA -> Sndromes Progerides

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GENES e IDADE: Controle da insulina Sistema imunitrio Controle ciclo celular Metabolismo lpdico Resposta ao stress Produo de enzimas antioxidantes

ESTUDO CROMATINA Cromatina no ncleo em interfase: Eucromatina (e) -> descondensada -> geneticamente activa Heterocromatina (h) -> condensada -> geneticamente inactiva HETEROCROMATINA fortemente condensada ao logo do ciclo celular DNA de replicao tardia no perodo S composta especialmente por DNA altamente repetitivo pobre em genes geneticamente praticamente inactiva EUCROMATINA grau de condensao varia ao longo do ciclo celular DNA de replicao precoce no perodo S contm elevada proporo de DNA rica em genes o local onde se situam os genes mais activos A eucromatina sensvel DNAse. A heterocromatina em interfase visvel sob a forma de regies densas e fortemente coradas chamadas crommeros. Tipos de DNA 1.sequncia nica 2.moderadamente repetitivo 3.altamente repetitivo - satlite (entre outros) em sequncias nica

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Heterocromatina e DNA satlite bandas C ( ) = H DNA sat. Relaes estruturais entre a Hetrocromatina constitutiva e o DNA satlite. A heterocromatina constitutiva localiza-se especialmente nos centrmeros e nestas zonas que se concentra preferencialmente o DNA satlite. uma regio genmica muito plstica e marca pelas bandas C. Podem coexistir nestas regies tipos diferentes de DNA satlites pertencentes s 5 famlias onde se agrupam de acordo com a variabilidade e o comprimento das suas sequncias. No entanto, a relao entre este tipo de cromatina e o DNA satelite ainda muito obscuro. Apesar da heterocromatina marcar pelas bandas C, estas no distinguem os diferentes tipos de DNA que se possam encontrar numa mesma regio, aparecendo uma banda uniforme. Alm disso h regies heterocromticas em que no se encontra nenhum dos tipos de DNA satlite referidos. Uma prova de como ainda obscura a relao heterocromatina/DNA satlite reside no facto de no genoma humano existir cerca de 3% de DNA satlite enquanto que h cerca de 20% de material marcado pelas bandas C.

Heterocromatina constitutiva - constituida por sequncias de DNA altamente repetitivas (DNA satlite) heterocromatina justacentromrica - telmeros - constrio secundria Heterocromatina facultativa constituida por DNA de sequncia nica e moderadamente repetida) cromossoma X nas clulas femininas Inactivao do cromosoma X - mecanismos A inactivao d-se ao acaso e o X inactivado pode ser o de origem paterna ou o de origem materna, nas diferentes clulas do mesmo organismo O X inactivado mantm-se constante para cada linha celular Heterocromatina constitutiva DNA altamente repetitivo (DNA satlite) funcionalmente inactiva sempre condensada ocupa a mesma posio em # homlogos Heterocromatina facultativa DNA sequncia nica e moderadamente repetida activa e inactiva grau de condensao varivel no tem sempre a mesma posio em # homlogos

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A heterocromatina constitutiva mantm o seu grau de condensao ao longo do ciclo celular, no contm genes e inactiva sob o ponto de vista de actividade funcional. Tem no entanto um papel importante como protectora da eucromatina bem como na distribuio rigorosa do material gentico durante as divises celulares. A heterocromatina facultativa pode funcionar como eucromatina ou heterocromatina, dependendo do tipo de clulas ou meio ambiente. composta por genes que esto inactivos em determinados tipos de tecidos ou durante momentos particulares do ciclo celular. Funes e papel biolgico da Heterocromatina Estabilidade da cromatina - nos telmeros e centrmeros - durante o emparelhamento dos cromossomas Proteco da eucromatina - posio relativa no ncleo em interfase - regulao da formao de pontos de quiasma Especiao e evoluo - frequncia de quebras e rearranjos > nestas zonas. Variao: - utilizao dos polimorfismos como marcadores genticos A heterocromatina no tem actividade gnica mas tem funes importantes. Entre elas encontram-se: - manter a estrutura centromrica - manter reprimidos elementos parasitas Evoluo A evoluo da heterocromatina est associada do DNA satlite. A evoluo deu-se custa de duplicaes, deleces, inverses e transposies (jumping genes ou sequncias mveis). Pensa-se que o DNA altamente repetitivo pode ter surgido a partir de um fenmeno de mutao numa pequena sequncia nica, que causa divergncia de pequenas sequncias repetidas, seguido de amplificao, havendo assim substituio de pequenas sequncias repetidas por outras mais complexas. Alm disso a diversidade destas regies auxiliada pelos transposes ou sequncias mveis. Tambm fenmenos de crossing over desigual quer na meiose quer na mitose podem ter contribuido para essa evoluo. Como se trata de uma regio geneticamente inactiva, a que ao longo do tempo se foram acumulando as mutaes que tm um papel importante na evoluo das espcies. Na evoluo, o aumento de tamanho nos cromossomas est associado adio das zonas heterocromticas enquanto os polimorfismos esto associados deleco. Embora no homem alteraes nestas zonas no afectem o fentipo, h evidncia que em certas circunstncias estas zonas facilitam rearranjos estruturais e contribuem para criar uma barreira reprodutiva entre espcies.

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Herana Mendeliana
Experincias de Mendel Herana de um s gene Segregao Terminologia Herana de um s gene - Homem Formas de Transmisso Dominncia e Recessividade Herana de dois genes Anlise do Pedigree Gregor Johann Mendel Biografia 1822 Nascido em Heinzedorf (Rpublica Checa) 1843 Mosteiro de S.Toms, apoio estudos 1849 Professor 1851/53 - Universidade de Viena 1854 regresso ao Mosteiro de S.Toms (ensino de Cincias durante 16 anos) 1856 - Experincias com ervilheiras de cheiro 1868 Nomeado Abade do mosteiro 1884 morte por doena renal Mendel - experincias Pisum Savitum Ervilhas de cheiro Organismo: Fcil crescimento Fcil hibridizao cruzamento artificial Fcil reproduo Maturao numa s estao Leis de Mendel - Homem Gergor Mendel descreveu 2 leis bsicas de hereditariedade usando cruzamentos de plantas. Estas leis so aplicadas a organismos diploides LEI DA SEGREGAO Mendel usou a estatstica para investigar porque que algumas caractersiticas desapareciam na gerao hbrida A Lei da Segregao diz que alelos de um gene so distribuidos em 2 gmetas separados durante a meiose . Mendel demonstrou que isto ocorre usando 7 caracterstiticas da mesma planta Avaliao de diferentes caractersticas na Ervilheira LEI DATRANSMISSO INDEPENDENTE - a transmisso de 2 ou mais genes em diferentes cromossomas independente pois nameiose forma-se gmetas com diferentes combinaes desses genes

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Mendel - experincias Caracteres e Traos 7 caracteres unitrios caractersticas visveis Cada caracter 2 formas contrastantes 2 traos forma da semente; Redonda e Lisa - R, Rugosa r Cor da Semente; Amarela Y, verde y Forma da Vagem; lisa e completa V, com constries v Cor da vagem; Verde G, amarela g Posio da Flor; Axial F, terminal T Altura do Caule; Alta T, baixa t Cor da Flor; roxa, branca Cruzamento de Ervilheiras Altura caule t com t (baixa t com baixa t) T com T (alta T com alta T) t com T (baixa - t com alta T) T com t (alta T com baixa t) Cruzamento de Ervilheiras Altura caule t com t (baixa t com baixa t) descendncia toda baixa- t T com T (alta- T com alta T) descendncia toda alta T T com t (alta- T com baixa t) descendncia alta T, descendncia alta T e baixa -t

Cruzamento de Ervilheiras - MONOHBRIDO 1 par de TRAOS contrastantes Gerao parental - P1 2 estirpes parentais com formas contrastantes do caracter Cruzamento 1 Gerao filial F1 Auto-fertilizao 2 Gerao filial F2

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Cruzamento True breeding Monohbrido Cruzamento de Ervilheiras t com T (baixa/an t com alta T) descendncia toda alta- T em F1 descendncia alta T e baixa/an t em F2 TRAO an desaparece em F1 e reaparece em F2 PROPORO 3 (ALTAS):1 (ANS) em F2 Cruzamento Non true breeding Monohbrido Cruzamento de Ervilheiras T com T (alta - T com alta T) descendncia alta- T e baixa - t em F1 descendncia alta T e baixa/an t em F2 TRAO an aparece em F1 e em F2 Cruzamento Monohbrido Non True-breeding - F1 gerao alta - T gerao baixa an - t Cruzamento Monohbrido Non True-breeding F2 gerao alta - T gerao baixa an - t Altura mascara baixa estatura Caracterstica DOMINANTE Caracterstica RECESSIVA Hibridizao - caractersticas desaparecem e reaparecem na gerao seguinte POSTULADOS Mendel Factores unitrios Unidades bsicas da hereditariedade Factores transmitidos, sem se alterarem de gerao para gerao e determinam traos expressos em cada planta 1 POSTULADO Os caracteres genticos so controlados por factores unitrios, que existem em PARES em organismos individuais

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Organismo diplide recebe 2 factores Factor unitrio para cada TRAO Exemplo altura do caule factores (alta T, baixa/ an t) Combinaes possveis dos factores tt, Tt, TT 2 POSTULADO Quando 2 factores unitrios diferentes responsveis por um nico caracter esto presentes num mesmo indivduo, um factor unitrio DOMINANTE sobre o outro, que se diz ser RECESSIVO Factor ALTO - T dominante sobre o factor BAIXO/ANO t Trao que desaparece na gerao F1 mas reaparece em F2 pois em F1 est sob influncia do factor DOMINANTE e por isso diz-se RECESSIVO Relao Dominncia e Recessividade s faz sentido quando 2 factores diferentes esto presentes 3 POSTULADO Durante a formao dos gmetas, os factores unitrios constituintes do par separam-se e segregam aleatoriamente, de forma que cada gmeta recebe um ou o outro com igual probabilidade Ervilheira TT origina gmetas s com factor T Ervilheira Tt origina 50% de gmetas com factor T e 50% de gmetas com o factor t 4 POSTULADO Durante a formao dos gmetas, os pares de factores unitrios segregam independentemente uns dos outros Resultado da segregao cada gmeta recebe um elemento de cada par de factores unitrios Para cada par um factor no influncia a segregao de outros pares Todas as combinaes possveis de factores unitrios sero encontrados nos gmetas com igual frequncia Experincias de Mendel Vantagens Organismo experimental ideal Estudo de 1 ou de nr reduzido de traos em cada experincia Registos quantitativos precisos Derivao de postulados a partir da anlise dos dados experimentais

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TERMINOLOGIA GENTICA MODERNA TRAOS expresso visvel dos factores unitrios FENTIPO manifestao fsica do trao FACTORES UNITRIOS genes ALELOS formas alternativas de um nico gene SIMBOLOGIA alelo recessivo (letra minscula), alelo dominante (letra maiscula) GENTIPO combinao de 2 factores unitrios num indivduo HOMOZIGOTO 2 alelos iguais HETEROZIGOTO 2 alelos diferentes

Punnett Square diagrama de cruzamentos genticos gmetas femininos e masculinos frequncias/idade resultados genotpicos e fenotpicos CRUZAMENTO MONOHBRIDO Non true breeding - Tt Rcio genotpico para cruzamento monohbrido 1 TT: 2 Tt : 1 tt Rcio fenotpico para cruzamento monohbrido 3 plantas altas :1 planta baixa 3:1 Racios 1:2:1 - genotpico 3:1 - fenotpico CRUZAMENTO MONOHBRIDO - Non true breeding - Mendel Rcios no exactos Teste de Cruzamento indivduo gentipo desconhecido / indivduo homozigoto recessivo identifica gentipo desconhecido Rcios no exactos Teste de Cruzamento cruzammento de um indivduo de gentipo desconhecido com um indivduo homozigoto recessivo

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Tipos de Hereditariedade Tipo herana probabilidade do casal ter um filho afectado, um filho portador, um filho saudvel Mendel - caractersticas dos autossomas Autossmico Dominante Autossmico Recessivo Dominncia e Recessividade Conceito de Mendel uma caracterstica mascara outra Conceitos actuais Caractersticas de abundancia de protena habilidade da protena codificada pelo alelo de compensar a protena ausente/ anormal codificada pelo outro alelo Autossmico recessivo perda de funo Autossmico dominante protena anormal interfere com funo de protena normal Caractersticas Recessivas mais graves e sintomas mais precoces alelos permanecem na populao Caractersticas Dominantes graves desaparecem na populao sintomas tardios e no muito graves permanecem na populao

ABORDAGEM ANALTICA - MENDEL - O que levou Mendel a deduzir que os factores unitrios existiam em pares? 2 traos contrastantes 2 factores distintos - Porque desaparece um dos tra em F1? o trao recessivo e o seu factor unitrio no desaparecem so MASCARADOSA ou escondidos pois reaparecem em F2 um factor de cada tipo deve ser transmitido a cada indivduo em F1 mas como 1 ALELO DOMINANTE sobre o outro , s se manifesta o TRAO DOMINANTE - Como se explica a proporo 3:1 na gerao F2? Proporo esperada se os alelos segregarem aleatriamente para os gmetas e se a fertilizao for aleatria Sem conhecimento dos mecanismos celulares, Mendel props a existncia de UNIDADES de HEREDITARIEDADE e explicou como estas so transmitidas de uma gerao para outra.

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CRUZAMENTO TESTE 1 Caracter Plantas altas de F2 de cruzamento monohbrido alta x an podem ter gentipos TT ou Tt. Como saber o gentipo destas plantas? CRUZAMENTO TESTE Cruza-se indivduo de fentipo dominante e gentipo desconhecido com um indivduo homozigoto recessivo FACTORES UNITRIOS SEPARADOS CONTROLAM OS TRAOS ALTA E AN 1 Caracter

Cruzamento de Ervilheiras DIHBRIDO 2 CARACTERES 2 pares de TRAOS contrastantes em simultneo amarela,lisa X verde,enrugada amarela,enrugada X verde,lisa Proporo Fenotpica Dihbrida 9:3:3:1 LE DO PRODUTO DAS PROBABILIDADES 2 Caracteres Considerar o cruzamento dihbrido como 2 cruzamentos monohbridos conduzidos separadamente Considerar os 2 pares de traos contrastantes como sendo herdados independentemente EXEMPLO Probabilidade de a planta ser alta ou an no afecta a probabilidade de as suas sementes serem lisas ou rugosas Quando 2 eventos independentes ocorrem simultaneamente, a probabilidade combinada de 2 resultados igual ao produto das probabilidades individuais da ocorrncia

Cruzamento de Ervilheiras TRIHBRIDO 3 CARACTERES 3 pares de TRAOS contrastantes em simultneo 8 Gmetas diferentes a elaborao de um diagrama de Punnet complicado Alternativa Diagrama ramificado Forked-line method DIAGRAMA RAMIFICADO 3 pares traos contrastantes Aplicao da Lei do produto das probabilidades no clculo das propores fenotpicas da gerao F2 de um cruzamento trihbrido

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- A utilizao da Matemtica na Biologia no se efectuava. - Falta de conhecimentos na Fsica da Hereditariedade. - A explicao de Mendel para a varao nas espcies contraditria em relao Teoria dos evolucionistas Mendel explicou como a variao trasnmitida descendncia e no explicou porque alguns fentipos sobrevivem preferencialmente. 1879, Walter Flemming DESCOBERTA CROMOSSOMAS Permitiu o estudo do trabalho de Mendel por outros cientistas e a ligao do mesmo ao comportamento dos cromossomas durante a meiose. Sutton e Boveri - TEORIA CROMOSSMICA DA HEREDITARIEDADE Correlao do comportamento dos cromossomas durante a meiose com o princpio da segregao e distribuio independente de Mendel. Factores unitrios=cromossomas Postulados Mendel- Homem Par factores unitrios par de GENES nos cromossomas homlogos Segregao de factores unitrios durante formao de gmetas Segregao dos homlogos durante gametognese Distribuio independente dos factores unitrios segregados Cromossomas no homlogos distribuem-se independentemente Leis de Mendel - Homem Lei da Segregao alelos de um gene distribudos em 2 gmetas separados na meiose Lei da distribuio independente - a transmisso de 2 ou mais genes em diferentes cromossomas independente SEGREGAO cromossomas e genes na meiose - SEGREGAO: distribuio igual dos alelos para os 2 gmetas variao das combinaes allicas herana de 2 alelos para um s gene MEIOSE explicao do cruzamento de Mendel - (tt), (Tt) e (TT) Segregao - cromossomas e genes na meiose, herana de 2 alelos para um s gene HOMOZOGTICO 2 alelos identicos (aa, AA) HETEROZIGTICO 2 alelos diferentes, HBRIDO de Mendel (Aa) gene - 2 alelos alelo dominante letra maiscula alelo recessivo letra minscula

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Gentipo alelos do indivduo Fentipo expresso da combinao allica Fentipo mutante variao expresso do gene, mutao Meiose comportamento cromossomas Lei da Segregao Caracteres herdados (alelos) separao na meiose Cada zigoto 1 cpia de cada alelo Cada zigoto 1 alelo de cada progenitor

SEGREGAO Gerao parental/ 1 Gerao P1 2 Gerao / 1 Gerao filial F1 3 Gerao F2

HERANA MENDELIANA Autossmica Dominante Acondroplasia pulmes pequeno, tamanho normal de cabea e tronco Hipercolestermia familiar colesterol elevado e doena cardaca Doena Huntington movimentos progressivos incontrolveis e alteraes de personalidade, incio na meia idade Intolerncia Lactose no digesto da lactose, clicas aps ingesto Sndrome de Marfan Pulmes longos, dedos finos, aorta coartada Distrofia miotnica cansao muscular progressivo Neurofibromatose marcas castanhas na pele, tumores benignos da pele Doena poliqustica renal quistos renais, hamatria, tenso alta, dor abdominal Polidactilia dedos extra Porfiria hematria, febre, dor abdominal, dor cabea, coma e morte

sexo feminino e masculino podem estar afectados pode haver transmisso do sexo masculino para sexo masculino transmisso com igual frequncia dos 2 sexos criana afectada um dos progenitores afectado Geraes sucessivas afectadas - caracterstica no salta geraes Uma das geraes no afectada transmisso para

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Autossmica Recessivo sexo feminino e masculino podem estar afectados Sexo feminino e masculino podem transmitir excepto se caracterstica provoca morte antes da idade reprodutiva individuo afectado homozogtico Indivduos portadores heterozigticos Consanguinidade Salta geraes Pais de indivduo afectado - heterozigotos ou doentes Distribuio Independente herana de duas ou mais caractersticas, atribudas a um gene com alelos diferentes genes localizados em cromossomas diferentes herana de um gene no influncia a herana do outro gene Caractersticas Recessivas mais graves e sintomas mais precoces, alelos permanecem muito tempo na pupolao Caractersticas Dominantes quando graves desaparecem na populao porque os indivduos so muito doentes ou morrem cedo e no chegam a reproduzir-se, podem ser substitudos por mutao quando tm sintomas tardios e no muito graves permanecem na populao MENDEL Cor e Superfcie da semente da ervilha Enrugada e lisa (R - dominante) Amarela (Y - dominante) e verde Cada progenitor produz 4 tipos de gmetas: RY, Ry, rY, ry Mendel prossegue o cruzamento Cruzamento dihbrido Distribuio Independente Cruzamento Dibrido MENDEL Racio 9:3:3:1 - explica que um gene no influncia a transmisso do outro LEI DA DISTRIBUIO INDEPENDENTE Herana mais do que um gene Probabilidade de obter planta rryy de cruzamento dihbrido (RrYy) Cruzamento de um gene de cada vez

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Multiplicao dos resultados

Rr com Rr e Yy com Yy produto rr - 25% ou produto yy 25% ou produto rryy 1/4x1/4= 1/16 Pedigree Esquema - relaes familiares - genealgicas Geneticistas relaes familiares estudo caractersticas Inicialmente os pedigrees serviam apenas para mostrar a genealogia exemplo do Pedigree do Egipto: extenso vertical porque tinham como objectivo cruzar pessoas do mesmo sangue: pedigree de uma famlia com ploidactilia: extenso lateral porque tinam muitos filhos; Pedigree de consanguinidade entre primos: tem maior risco de passarem doenas recessivas porque partilham os mesmos avs Posteriormente comearam a ser usados para estudar caractersticas herdadas- exemplos pedigrees AD e AR Smbolos unidos por linhas verticais e horizontais Linhas verticais geraes Linhas horizontais parentes Geraes nmeros romanos Indivduos de uma gerao numerao Arbica Inicialmente os pedigrees serviam apenas para mostrar a genealogia exemplo do Pedigree do Egipto: extenso vertical porque tinham como objectivo cruzar pessoas do mesmo sangue: pedigree de uma famlia com ploidactilia: extenso lateral porque tinam muitos filhos; Pedigree de consanguinidade entre primos: tem maior risco de passarem doenas recessivas porque partilham os mesmos avs Posteriormente comearam a ser usados para estudar caractersticas herdadas- exemplos pedigrees AD e AR

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Smbolos
Sexo feminino Sexo masculino Sexo feminino expressa a caracterstica Sexo masculino expressa a caracterstica Sexo masculino portador Sexo masculino portador

Smbolos
Sexo feminino - morto Sexo masculino - morto p p Gravidez

Aborto espontneo Gravidez interrompida

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Gerao Pais Adopo

Consanguinidade

Relao Precedente

Probando Descendncia

Gmeos idnticos

Ser que em todos os genes existe um para de alelos que apresentam a relao dominncia recessividade descrita por Mendel? No Alterao Propores Mendel Anlise do Pedigree Inicialmente os pedigrees serviam apenas para mostrar a genealogia exemplo do Pedigree do Egipto: extenso vertical porque tinham como objectivo cruzar pessoas do mesmo sangue Pedigree de uma famlia com polidactilia: extenso lateral porque tinham muitos filhos Pedigree de consanguinidade entre primos: tem maior risco de passarem doenas recessivas porque partilham os mesmos avs ALBINISMO Incapacidade produo melanina Cabelo, pele, pupilas Pedigree de caracterstica AR Albinismo homozogtico recessivo no possui enzima que produz a melanina: Afecta ambos os sexos Salta geraes neste Pedigree no afacta 1 e 2 geraes Pedigree - AR Pais no afectados tm filhos e filhas doentes Existem geraes que no manifestam a doena A doena determinada pelo alelo recessivo. O fentipo normal determinado pelo alelo dominante. Pedigree de caracterstica AR Albinismo homozogtico recessivo no possui enzima que produz a melanina: Afecta ambos os sexos Salta geraes neste Pedigree no afecta 1 e 2 geraes

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As Leis de Mendel so operativas mas as razes de Mendel raramente so observveis porque o tamanho da amostra pequeno. O aparecimento de indivduos afectado depende muito do acaso na unio de heterozigotos no relacionados. Os casamentos consanguneos aumentam a frequncia de homozigotos afectados. FREQUNCIA RELATIVA DOS GENTIPOS NA POPULAO EQUILIBRIO - Hardy-Weinberg f(A)= p f(a)= q f(AA)= p2 f(Aa)= 2pq f(aa)= q2 BRAQUIDACTILIA ossos terminais dedos curvos curtos Pedigree de AD Braquidactilia 5 dedo curovo e curto:

No h saltos nas geraes- indivduos afectados em todas as geraes O alelo normal recessivo O alelo anormal dominante Pedigree o fentipo tende a estar presente em todas as geraes Indivduos AA so muito raros Nas Doenas dominantes de manifestao tardia importante rastreio prsintomtico! VARIAES FENOTPICAS NORMAIS Populaes isoladas divergem geneticamente diferenas tnicas Mesma Etnia variao/diversidade VARIAO GENTICA CONTNUA caractersticas com fentipos mesurveis dentro de um intervalo de valores (ex: peso, altura) DESCONTNUA 2 ou mais fentipos distintos para 1 mesma caracterstica (ex: traos das ervilheiras de Mendel) POLIMORFISMO 2 ou mais fentipos alternativos para uma caracterstica

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A anlise destes Pedigrees tem interpretao diferente dos Pedigrees de Doenas autossmicas Recessivas

Por vezes a anlise do Pedigree pode ser inconclusivo tanto pode explicar uma condio AD como AR Exemplo Pedigree de Alopecia Pode ser AD porque esto afectados ambos os sexos e no h saltos nas geraes Pode ser AR porque os indivduos no afectados no Pedigree podem ser portadores Os Pedigrees inconclusivos surgem mais frequentemente em famlias pequenas ou quando a caracterstica estudada no for sufucientemente grave para impedir os Heterozigotos de terem filhos Podem tentar obter-se mais informaes com testes bioqumicos aos portadores

Doena de Clulas Falciformes Doena AR . Michael tem a doena . Ellen, irm de Michael, saudvel, est grvida e deseja saber qual a probabilidade de ter um filho portador do alelo . Tim, marido de Ellen , saudvel e no possui histria da doena na sua famlia . necessrio saber qual o risco de Ellen ser portadora e qual o risco de Ellen passar o alelo mutado descendncia . Probabilidade de Ellen ser portadora de 2/3 (Punnet square b) . Probabilidade de Ellen passar o alelo mutado ao feto de (Punnet square c) . Total de probabilidade de Ellen te 1 filho portador do alelo de 1/3 Herana Mendeliana

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1. Expresso do gene e racios Mendelianos 2. Herana Materna e Genes Mitocondriais 3. Linkage Expresso do Gene Homozigotia de alelos recessivos antes do nascimento

interrupo do desenvolvimento do feto para o mesmo gene

Variabilidade no fentipo - Mltiplos alelos

Fentipos intermdios - Heterozigotos de condies de Dominncia incompleta de alelos fentipos intermdios em relao aos Homozigticos

Alelos Codominantes - so expressos os 2 alelos Epistasia - 1 gene condiciona a expresso de outro gene Gentipo de Penetrncia incompleta - no expresso em todos os indivduos que o herdam, fentipos com expresso varivel Genes Pleiotrpicos - possuem vrias expresses Fenocpia - caracterstica que parece ser Herdada mas ambiental Heterogeneidade Gentica - 2 ou mais genes especificam o mesmo fentipo

Extenses Leis de Mendel

Conjunto dos Genes do Indivduo Expresso dos genes FENTIPO Se expresso dos genes (Dominante/Recessivo) no segue a transmisso simples de Mendel

Se mais do que 1 par de genes influncia a expresso de um dado carcter PROPORES FENOTPICAS MODIFICAO CLSSICAS de F2 (3:1 e 9:3:3:1) SOFREM

LEIS DA SEGREGAO E DISTRIBUIO INDEPENDENTE SO VLIDAS GENTICA NEO-MENDELIANA Modelos de Hereditariedade propostos face a dado genticos que no se enquadram precisamente com as propores Mendelianas esperadas.

DOMINNCIA INCOMPLETA E CO-DOMINNCIA

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INTERACO GNICA HEREDITARIEDADE LIGADA AO X HEREDITARIEDADE INFLUENCIADA PELO SEXO EXPRESSO FENOTPICA E AMBIENTE Funo - ALELO Formas alternativas de um mesmo gene Possuem informao gentica diferente Podem manifestar-se ou no como protenas diferentes Podem codificar ou no funes diferentes de uma mesma protena ALELO SELVAGEM O alelo mais frequente numa populao ou que arbitrariamente designado NORMAL Responsvel pelo fentipo selvagem Geralmente DOMINANTE e o seu produto funcional na clula usado como padro de comparao relativamente a todas as mutaes que ocorram no mesmo locus O processo de MUTAO fonte de novos alelos A MUTAO pode ou no resultar em novos fentipos Um novo fentipo resulta da alterao da actividade funcional do produto celular controlado pelo gene ENZIMA Eliminao da funo Reduo/aumento da afininade para o substracto Simbologia- ALELO 1 LETRA DO TRAO Alelo dominante maiscula Alelo recessivo minscula Tall, dwarf D, d AUSNCIA DE DOMINNCIA Alelos maiscula para ambos D2, D2 ALELO SELVAGEM Alelo mais frequente letra seguida de smbolo + FUNO DO GENE o smbolo representa funo do gene cdc cell division cycle dnaA gene que codifica a protena dnaA da replicao do dna DOENA CAUSADA PELO GENE o smbolo representa doena causada pelo mau funcionamento do gene leu mutao que interrompe a sntese do aa leucina HD doena de Huntington BRCA1 breast cancer gene Herana Materna

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Lei da Segregao

2 Progenitores contribuem com o mesmo nr de genes para a descendncia

GENES - MITOCNDRIA
Genes mitocondriais ausncia de crossing over, ausncia de reparao do DNA e intres Vrias cpias de 1 Mini-cromossoma (25 cromossoma) - 37 Genes codificam: RNAt, RNAr protenas de reaces energticas Linkage genes unidos no mesmo cromossoma; do lugar a uma descendncia na sua maioria com um gentipo semelhante parental e em pequena % com um gentipo recombinante Mapas de Linkage - referem-se a distancias entre genes unidos baseados nas frequncias de crossing over - desenvolvidos a partir de estudos de linked genes - pode examinar-se um grupo de sequncias de DNA unidas conhecidas para seguir a hereditariedade de certo cromossoma Linked genes genes unidos no mesmo cromossoma do lugar a uma descendncia na sua maioria com um gentipo semelhante parental e em pequena % com um gentipo recombinante

Haplotipo - grupo de dna unido e de sequncia conhecida Alelos cis/trans - possibilidade de prever a probabilidade de certos gentipos na descendncia atravs do conhecimento dos alelos unidos estarem em posio cis ou trans e das frequncias de crossing over

Combinao allica letal Gentipo que provoca a morte

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Doena Huntington Ces Mexicanos

Letal - Indivduo

Doena de Huntington
NO Letal Populao

REPRODUO

Combinao allica letal qualquer combinao Allica letal, provoca a morte do indvduo antes que este se possa reproduzir e previne a passagem de genes descendncia Exemplo Ces Mexicanos sem plo (combinao allica letal heterozigoto dominante HH) DOSE DUPLA DOMINNCIA - LETAL ALELOS LETAIS DOMINANTES CES MEXICANOS 1 ALELO DOMINANTE AUSNCIA PLO 2 ALELOS DOMINANTES - LETAL

1 CRUZAMENTO

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2 CRUZAMENTO

Combinao allica letal

ABORTOS ESPONTNEOS 25% PROBABILIDADE ALELO RECESSIVO MESMO GENE

ME

PAI

Alelos Mltiplos 2 alelos (1 em cada homlogo) para cada gene autossmico Populao vrios alelos para mesmo gene Combinaes allicas diferentes fentipos diferentes Predictibilidades - influncia de outros genes e ambiente Cada indivduo possui 2 alelos para cada gene autossmico mas cada gene pode existir na Populao em vrias combinaes allicas devido existncia de alelos mutantes Correlaes entre gentipos e fentipos torna-se difcil dar predictibilidades devido influncia de outros genes e do prprio ambiente Exemplo de doena em que possivel dar predictibilidade a fenilcetonria (PKU) FENILCETONRIA - Quando a enzima est ausente o indivduo possui atraso mental profundo

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- No entanto a administrao de uma dieta especfica sem fenilalanina desde o nascimento at aos 8 anos de idade impede a sua acumulao nas clulas cerebrais e permite um desenvolvimento cerebral praticamente normal - Existem cerca de 300 alelos mutantes cuja combinao permite a identificao de 4 formas diferentes de PKU: - PKU com atraso mental profundo - PKU moderada - PKU ligeira - PKU sem sintomas excepto excreo excessiva de fenilalanina na urina O conhecimento do tipo de combinao allica pode dar aos pais uma pista acerca da restrio alimentar mais ou menos rigorosa a instituir

PREVISO GENTIPO Fenilcetonria (PKU

FENTIPO

FENILCETONRIA >300 alelos mutados Fenilcetonria (PKU) 4 fentipos bsicos: PKU com atraso mental profundo PKU moderada PKU ligeira PKU com excreo excesso de aa na urina FIBROSE QUSTICA CENTENAS alelos mutados Dificuldade na identificao - testes de portadores 1989 1 Alelo mutado (F508), 70% casos TESTES GENTICOS paineis de mutaes de grupos tnicos Fibrose Qustica (FQ) fentipos - Homozigticos para F508 FQ com infeces respiratrias e insuficincia Pancretica DESCOBERTA DE NOVOS ALELOS > susceptibilidade para bronquite novo alelo Ausncia de vas deferens novo alelo DOMINNCIA COMPLETA - 1 alelo expresso e o outro no DOMINNCIA INCOMPLETA - Descendncia com um fentipo intermdio em relao aos traos contratantes dos progenitores - Fentipo do Heterozigoto intermdio em relao ao Homozigoto Tecnicamente - falta de dominncia

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Dominncia Incompleta COR FLOR Vermelha e Branca 1 GENE com 2 alelos (alelos vermelha, branca) em que nenhum dominante Resultados de F2: Proporo fenotpica 1:2:1 Proporo genotpica 1:2:1 Casos claros de dominncia incompleta so raros Casos de aparente dominncia completa, se estudados a nvel enzimtico casos de dominncia incompleta Doena de Tay-Sachs Doena metablica com acumulao de lpidos Actividade da enzima Hexosaminidase

Doena de Tay-Sachs AR REACO NO OCORRE

ENZIMA Hezaminidase A

CORTEX CEREBRAL Acumulao Lpidos

FENTIPO GERAL Heterozigoto - saudvel Homozigoto Dominante - saudvel Homozigoto Recessivo doente FENTIPO NVEL ENZIMTICO Heterozigoto Fentipo Intermdio 50% enzima Homozigoto Recessivo ausncia de enzima Homozigoto Dominante saudvel Nvel enzimtico normal Heterozigoto Fentipo Intermdio 50% enzima suficiente para as clulas Fenotipicamente normal Homozigoto Recessivo Doente ausncia completa da enzima fatal 1 a 3 anos de vida

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Cabelo Encaracolado Condio Homozigtica Dominante Incompleta Heterozigoto Fentipo Intermdio Homozigoto Dominante Liso Homozigoto Recessivo Caracis

HIPERCOLESTERAMIA FAMILIAR Nr receptores reduzido clulas fgado Colesterol sanguneo elevado HOMOZIGOTOS RECESSIVOS 2 alelos mutantes ausncia de receptores das clulas hepticas morrem na infncia de enfarte miocrdio HETEROZIGOTOS 1 alelo mutante e 1 alelo normal 50% do nr de receptores das clulas hepticas morrem no incio da idade adulta

FIBROSE QUSTICA A existncia de mltiplos alelos dificulta a execuo do teste de portador para FQ e a habilidade de dar predictibilidade para a descendncia O gene da FQ foi descoberto em 1989, os investigadores identificaram um alelo mutante chamado de deltaF508, responsvel por cerca de 70% dos casos na populao Mais tarde foram descobertos mais alelos e tambm que nem sempre a mesma combinao allica responsvel pelo mesmo fentipo Tipos de fentipos: -homozigtico para deltaF508 possuem infeces respiratrias severas e funo pancretica deficiente - maior susceptibilidade para bronquite - ausncia dos vasos deferentes Os testes genticos para a FQ incluem painis de mutaes mais frequentes em determinados grupos tnicos Heterozigoto nr receptores Homozigoto Ausncia receptores Populao geral nr receptores normal CO-DOMINNCIA Heterozigoto Expresso dos 2 ALELOS 2 ALELOS responsveis pela produo de 2 produtos gnicos detectveis e distintos Grupo sanguneo MN Glicoprotenas presentes nas membranas dos glbulos vermelhos funcionam como antignios nativos, conferam identidade bioqumica e imunolgica aos indivduos Glicoprotenas possuem 2 formas M e N Descrito um locus no cromossoma 4 com 2 alelos LM e LN

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GENTIPO L LM LM LN LN LN
M

FENTIPO M MN N

CRUZAMENTO LM LN x LM LN

1/4 - LM LM - LM LN - L N LN

EXPRESSO INDIVIDUAL DO GENE diferente do FENTIPO INTERMDIO ALELOS MLTIPLOS Vrias formas alternativas de um gene EX: Grupo sanguneo ABO Antignios de superfcie dos eritrcitos com 2 formas - A e B Um gene localizado no cromossoma 9 Fentipo ABO do indivduo determinado atravs da mistura de uma amostra sangunea com um soro anti A ou anti B (aglutinao de eritrcitos) Sistema ABO Antignios A e B Carbohidratos que se ligam a protenas dos eritrcitos 4 Fentipos: A aglutinao com anti A B aglutinao com anti B AB aglutinao com antiA e antiB O ausncia de aglutinao Sistema ABO Antignios A e B possuem um percurssor comum substncia H Alelo IA codifica enzima que faz adio do resduo N-acetil-glucosamina substncia H Alelo IB codifica enzima que faz a adio de um resduo de galactose substncia H Heteozigotos IAIB - expressam ambas as enzimas (Co-dominncia) Homozigotos IoIo possuem a substncia H mas no ocorre adio de resduos substncia H CO DOMINNCIA e DOMINNCIA COMPLETA Sistema ABO NOMENCLATURA ANTERIOR 1 Gene 3 alelos IA, IB, I0 Alelos do gene I (Isoaglutinognio) - GENTIPOS Grupo A - gentipo IAIA ou IAi Grupo B gentipo IBIB ou IBi Grupo AB gentipo IAIB Grupo o gentipo sem antignios A ou B, ii IA Co dominante relativamente a IB IA e IB dominantes relativamente a I0

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Sistema ABO NOMENCLATURA ANTERIOR IA e IB ALELOS CO-DOMINANTES IA IB Receptor universal I0I0 Dador Universal Aplicao compatibilidade nas transfuses sanguneas, parentesco Diagrama Punnet - aplicvel FENTIPO BOMBAY Fentipo descoberto em Bombay Mulher sem Antignios A e B com a Me AB e transmitiu o alelo IB a 2 dos filhos Mulher com gentipo B e funcionalmente tipo O - FENTIPO Bombay Resultado de mutao recessiva que impede a sntese da substncia H. Mutao no gene H que codifica a enzima que cataliza a sntese da substncia H. Nos HOMOZIGTICOS hh o Gentipo ABO no se manifesta o Fentipo sempre O! LOCUS SECRETOR Presena dos antignios A e B nos fludos corporais (saliva, suco gstrico, smen e fludos vaginais) Caracter sob influncia do alelo dominante. ANTIGNIOS Rh Antignios incompatibilidade imunolgica me - feto Eritroblastose fetal Doena hemoltica do recm-nascido

Me Rh-, Feto Rh+ 1 Gestao

Produo Anticorpos Anti Rh aps 1 gestao de feto Rh+

Me Rh-, Feto Rh+ 2 Gestao

Risco dos Anticorpos Anti Rh passarem para feto e destruio dos eritrcitos Rh+ fetais

ANEMIA HEMOLTICA

Incompatibilidade imunolgica me feto 10% Apenas 0,5% resultam em Anemia Hemoltica MULHERES tipo O com Fetos A ou B - produzem Anti-corpos Anti-A e Anti-B que atingem clulas - fetais que entraram na circulao materna antes que estas possam - desencadear a produo de Anti-corpos TRATAMENTO Injeco materna de droga (Rhogam) logo aps 1 parto Droga reveste Antignios das clulas fetais que entram na circulao materna antes que possam desencadear produo de Anticorpos

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INVESTIGAES Inicialmente 2 alelos, Rh+ dominante Wiener 8 alelos Fisher- Race 3 genes ligados (2 alelos cada), localizados no mesmo cromossoma Interaco Gnica Caracteres individuais com Fentipos discretos ou descontnuos podem estar sob controle de mais do que 1 gene Interaco gnica no forosamente interaco directa de produtos Gnicos funo celular dos produtos de 2 genes relaciona-se com o um mesmo fentipo Epistasia expresso de 1 gene oculta ou modifica a expresso de outro gene Alguns casos de interaco gnica resultam na produo de novos fentipos em F2 (inexistentes em P1 e F1) para alm da produo de razes dihbridas modificadas. Epistasia 1 GENE afecta a expresso de outro GENE 1 GENE mascara outro GENE Leis de Mendel no podem aplicar-se Genes que controlam a expresso de um mesmo caracter de forma antagonista ou cooperativa (complementar). Homozigotia do alelo recessivo de 1 locus mascara a expresso dos alelos do outro locus (fentipo Bombay) Alelos do primeiro locus so epistticos relativamente aos alelos do segundo locus e estes ltimos hipostticos relativamente aos primeiros A expresso de um alelo dominante do primeiro locus mascara a expresso de alelos do segundo locus 8cor das abboras) A homozigotia do alelo recessivo de qualquer um dos loci mascara a expresso do alelo dominante do outro locus (cor das flores da ervilheira)

Factores alteram razes Fenotpicas Mendeleanas

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Fenmeno
Alelos letais Alelos multiplos Dominncia Incompleta Co-Dominncia

Efeito-Fentipo
Uma classe morre cedo Produz muitas variantes fenotpicas Fentipo do Heterozigoto intermdio do dos 2 Homozigotos Fentipo do Hereozigoto distinto e no intermdio do dos 2 Homozigotos 1 Gene mascara ou afecta a expresso fenotpica de outro Gene

Exemplo
Aborto espontneo Fibrose Qustica Hipercolestermia familiar Tipos ABO

Espistasia

Fentipo Bombay

Fenmeno
Penetrncia

Efeito-Fentipo
Alguns indivduos no apresentam o fentipo que seria de esperar para determinado Gentipo Gentipo associado a 1 Fentipo De intensidade varivel O Fentipo inclui muitos sintomas, que podem surgir em diferentes subgrupos em diferentes indivduos Condio causada pelo ambiente cujos sintomas e padro de ocorrncia se assemelha a trao hereditrio conhecido Diferentes Gentipos associados a 1 mesmo Fentipo

Exemplo
Polidactilia

Expressividade Pleiotropia

Polidactilia Porfiria Variegada Infecco

Fenocpia

Heterogeneidade gentica

Surdez

Penetrncia Alguns Fentipos mutantes manifestam-se sempre como fentipos diferentes, enquanto outros produzem uma % de Fentipos iguais ao Selvagem. GRAU EXPRESSO DE UM TRAO ESTUDO QUANTITATIVO: PENETRNCIA - % de indivduos que apresentam expresso (ainda que parcial) do gene mutante EXPRESSIVIDADE Gama de fentipos correspondentes ao gentipo mutante Herana Multifactorial

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Genes e ambiente Metodologia investigao caractersticas multifactoriais Caracterstica multifactorais - exemplos

TALENTO

ALCOOLISMO

GENES

AMBIENTE

OBESIDADE

GENES raro, actuao isolada Doenas Monognicas influncia outros genes, ambiente Gene e Ambiente On the Origin of Species Charles Darwin Variao Organismos 2 FACTORES: Natureza dos organismos Natureza das condies 2 Foras - INTERACO

HERANA

AMBIENTE

CARACTERSTICA

OU
Mendeliana

Polignica

Um s gene responsvel

Mais do que um gene responsvel

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CARACTERSTICA

Mendeliana

Polignica

MULTIFACTORIAIS ou COMPLEXAS

AMBIENTE

PODEM SER

CARACTERSTICA: Polignica Pura - sem influncia do ambiente (rara) Caractersticas Multifactoriais exemplos: Peso Cor da pele Doena Comportamentos Expresso do Gene Homozigotia de alelos recessivos antes do nascimento interrupo do desenvolvimento do feto para o mesmo gene

Variabilidade no fentipo - Mltiplos alelos

Fentipos intermdios - Heterozigotos de condies de Dominncia incompleta de alelos fentipos intermdios em relao aos Homozigticos Mltiplos alelos para o mesmo gene Variabilidade no fentipo Heterozigotos de condies de Dominncia incompleta de alelos fentipos intermdios em relao aos Homozigticos Alelos Codominantes - so expressos os 2 alelos Epistasia - 1 gene condiciona a expresso de outro gene Gentipo de Penetrncia incompleta - no expresso em todos os indivduos que o herdam, fentipos com expresso varivel Genes Pleiotrpicos - possuem vrias expresses Fenocpia - caracterstica que parece ser Herdada mas ambiental Heterogeneidade Gentica - 2 ou mais genes especificam o mesmo fentipo Linkage

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Haplotipo. grupo de dna unido e de sequncia conhecida Alelos cis/trans - possibilidade de prever a probabilidade de certos gentipos na descendncia atravs do conhecimento dos alelos unidos estarem em posio cis ou trans e das frequncias de crossing over Penetrncia - Alguns Fentipos mutantes manifestam-se sempre como fentipos diferentes, enquanto outros produzem uma % de Fentipos iguais ao Selvagem.

GRAU EXPRESSO DE UM TRAO ESTUDO QUANTITATIVO: PENETRNCIA - % de indivduos que apresentam expresso (ainda que parcial) do gene mutante EXPRESSIVIDADE Gama de fentipos correspondentes ao gentipo mutante Quais as causas de variao fenotpica e penetrncia incompleta? BACKGROUND GENTICO AMBIENTE BACKGROUND GENTICO EXCEPES - AVALIAO: Quando a expresso de outros genes restaura o fentipo normal em indivduos com gentipo mutante SUPRESSO DA MUTAO A localizao fsica de um gene em relao a outro material gentico pode influenciar a sua supresso EFEITO POSICIONAL EFEITO POSICIONAL - Se um gene estiver includo numa translocao ou inverso, a expresso do gene pode ser alterada, em particular no caso de se posicionar aps o rearranjo numa reagio de heterocromatina. AMBIENTE TEMPERATURA influencia os fentipos A actividade qumica depende da energia cintica das substncias envolvidas nas reaces e a energia cintica depende da temperatura. ROSAS flores vermelhas a 23 C flores brancas a 18 C GATOS SIAMESES, COELHOS HIMALAIAS plo escuro nas regies do corpo mais frias (nariz, orelhas e patas) enzima que produz o pigmento inactiva a temperaturas altas

MUTANTES TERMOSENSVEIS

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Fentipo mutante a uma temperatura e normal a outra temperatura til para o estudo de mutaes que interrompem processos essenciais durante o desenvolvimento.

EFEITOS NUTRICIONAIS ENZIMA ESSENCIAL

IMPEDE SNTESE DE NUTRIENTE

INACTIVA
MUTANTES AUXOTRFICOS MUTANTES NUTRICIONAIS estudos de Gentica molecular, base da teoria - um gene - uma enzima, Beadle e Tatum 1940

MUTAES NUTRICIONAIS HUMANOS Fenilcetonria Intolerncia lactose Glactosmia Diabetes Ataxia dependente da Vitamina E Fenilcetonria Impossibilidade de metabolizar a Fenialalanina mutaes recessivas no gene fenilalanina hidroxilase QUADRO CLSSICO - FENILCETONRIA Atraso mental eczema hipopigmentao distrbios neurolgicos (hiperactividade, irritabilidade, tremores, convulses) INTOLERNCIA LACTOSE Lactose dissacardeo composto por glucose e galactose 7% no leite humano, 5% no leite de vaca Lactase enzima que cliva glicose em galactose produzida em nveis suficientes durante os 1s anos de vida alguns grupos tnicos produo de Lactase reduz drasticamente Diarreias clicas vmitos consumo de formas processadas do leite (queijo, iogurte) em alguns casos bem tolerado Tratamento

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Dieta sem lactose Suplementos Clcio, Ferro Lactase Traos genticos - expresso Traos genticos NEM TODOS OS TRAOS SE EXPRESSAM AO MESMO TEMPO NA VIDA DE UM INDIVDUO Sequncia de crescimento e desenvolvimento corresponde expresso sequencial de mltiplos genes, necessrios em cada etapa Mutaes em diferentes genes vo manifestar-se em diferentes etapas da vida

MUTAES

ABORTO ESPONTNEO AFECTAM PROTENAS NECESSRIAS AO DESENVOLVIMENTO PR-NATAL

MUTAES MANIFESTAM APS NASCIMENTO

DOENA

MUTAES expresso ps nascimento MUTAO Hexosaminidase A DOENA DE TAY-SACHS Autossmica recessiva Doena metabolismo lpidos RN normais 5 meses vida atraso no desenvolvimento, cegueira, paralisia, morte antes dos 4 anos X recessiva Doena metabolismo cidos nucleicos (falha na recuperao de purinas - Acumulao cido rico) atraso mental, auto-mutilao dos dedos e lbios, paralisia e morte aos 6-8 meses Tratamento com alopurinol aumenta esperana de vida para os 40 anos MUTAES expresso idade adulta DOENA DE HUNTINGTON AD 30 50 anos lbulos frontais do cortx cerebral PARAMILOIDOSE DOENA DE MACHADO-JOSEPH DOENA DE ALZHEIMER

GENTICA DO CANCRO

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Tumor - Proliferao anormal das clulas benigna ou maligna Tipos de tumores Benignos proliferao celular anormal no invade tecidos circundantes permanece no seu local de origem hipertrofia Malignos: proliferao celular anormal invade tecidos circundantes e distantes atravs dos sistemas circulatrios e linfticos apenas estes so considerados cancros. Cancro - Expresso fsica dos processos de proliferao, diferenciao sobrevivncia anormais de qualquer tipo de clula -> tumor maligno Propriedades - clulas cancerosas - Proliferao celular independente da densidade da cultura (as clulas normais em cultura proliferam at atingirem uma densidade finita) -Estimulao do crescimento autcrino (produo dos seus prprios factores de crescimento) - Reduzida adeso celular (fraca expresso de molculas de adeso na superfcie celular de clulas cancerosas) Factores carcinogneos Qumicos Fsicos Biolgicos Mecanismos de mutao espontnea: Danos oxidativos Erros - aco das polimerases e recombinases Reduo e reordenamento cromossmico e

Vigilncia Imunitria

Oncogenes Presentes nos retrovirus Derivam de mutaes nos proto-oncogenes Surgem por dois mecanismos: 1. Viral 2. Gentico

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Causam multiplicao celular excessiva No basta haver uma nica mutao para ser induzida a transformao maligna

Mutaes adicionais

Supressores tumorais Codificam protenas que reduzem ou inibem a progresso do ciclo celular Quando inactivos - aumento da probabilidade de formao de tumor

Ciclo celular descontrolado Gene p53: Inactivo em 70% dos cancros Bloqueia o ciclo celular no checkpoint em G1 Mutado por: 1. Radiaes gama e UV 2. Calor 3. Stress Oxidativo A estabilizao do p53 e o aumento da sua concentrao crucial para a homeostasia celular Imortalidade Limite de Hayflick: Clulas normais - capacidade limitada para se dividirem

Aps determinado nmero de divises tornam-se senescentes Teoria do encurtamento dos telmeros: Telmeros: 1. Extremidade dos cromossomas 2. No codificam genes em particular 3. Funo protectora Quanto maior o seu comprimento - maior o nmero de replicaes Telmeros: encurtamento - deixa de haver funo protectora

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Aumento da probabilidade de mutaes Clulas cancro -> telomerase -> Totipotncia A activao dos mecanismos que previnem o encurtamento dos telmeros - no so nica condio para a imortalidade das clulas necessrio que ocorram: 1. mutaes nos proto-oncogenes com formao de oncogenes 2. inactivao de supressores tumorais Genes- Cancro Predispsio individual de cada um tem um papel decisivo na resposta final Regulao - Ciclo celular O incio do ciclo celular determinado pela disponibilidade de factores de crescimento Durante a transio das Fases: G1 S G2 M Checkpoints - O ponto principal da regulao do ciclo celular ocorre no final da fase G1. Crescimento descontrolado Em certos tipos de clulas neoplsicas, o crescimento descontrolado deve-se a: hiperplasia mutaes activao de Proto oncogenes (C-Myc, C-Fos, C-Ras) deleco de supressores tumorais p53, RB, p19, p21, p27, BAX e BCL-2

controlo do ciclo celular e regulao da apoptose Crescimento celular de forma autnoma devido a inactivao de genes supressores tumorais. A perda destes genes est a relacionada com aparecimento de tumores. Gene RB e P53- genes supressores tumorais mais importantes

Retinoblastoma Gene Rb codifica uma protena que expressa em

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todas as clulas e que existe na forma: Activa: hipofosforilada Inactiva: Hiperfosforilada Na forma activa, Rb serve de paragem ao desenvolvimento do ciclo celular de G1 S (checkpoint) Apoptose Morte celular programada/ apoptose - tipo de "autodestruio celular Necrose difere da apoptose por representar um fenmeno degenerativo no programado. Mesmo agente etiolgico pode provocar tanto necrose quanto apoptose; - As clulas cancerosas no atingem a apoptose, pois apresentam baixo nvel de diferenciao. - Deste modo apresentam uma durao mdia de vida bastante superior ao das clulas normais. - Este aumento do tempo de vida das clulas contribu para o desenvolvimento do tumor primrio e de metastases. - um tipo de morte celular, desencadeada, entre outros estmulos, por mutaes potencialmente lesivas. Gene bcl2 regulador da apoptose Translocao especfica numa regio deste gene, inibindo a apoptose, logo: imortalizando a clula e permitindo que novas mutaes adicionais se perpetuem e levem ao cancro. Cancro hereditrio vs Cancro espordico Cancro hereditrio : padro de transmisso Mendeliano ou monognico A susceptibilidade ao cancro herdada

envolvimento de um gene de alta penetrncia Uma mutao neste caso ocorre na linhagem germinativa estando presente nas clulas do indivduo Devemos suspeitas da ocorrncia de uma sndrome de cancro hereditrio quando: - existe uma histria familiar importante de cancro, principalmente envolvendo parentes de 1 e 2 graus; - a idade de aparecimento do cancro precoce em relao ao tumor espordico correspondente; - observa-se o desenvolvimento de mltiplos tumores primrios no mesmo paciente. Tratamentos

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A maioria das drogas utilizadas actualmente no tratamento do cancro ou danificam o DNA ou inibem a sua replicao substncias txicas tanto para clulas normais como para cancerosas Inibio da Angiognese Endostatina e Angiostatina - bloqueiam a proliferao de clulas endoteliais Drogas direccionadas a Oncogenes cido Retinoco Leucemia promielcita aguda Oncogenes PML/RAR Herceptina - Cancro da mama Oncogenes Erb-2 (amplificao do gene ERB-2)

Identificao molecular de pequenos inibidores de oncogenes Protenas cnases protena tirosina cnase BCR/ABL (translocao do cromossoma Philadelphia) Leucemias mielognicas crnicas Importncia na Medicina Dentria A prevalncia de cancros na cavidade oral tem vindo a aumentar devido a: - Aumento dos hbitos tabgicos e alcolicos - Falta de hbitos de higiene - Reduzida vigilncia mdica - Primeiro contacto com o meio externo Proto-oncogene C- Myc um dos principais causadores de cancro na cavidade oral. Os cancros da cavidade oral so uns dos que mais apresentam metstases, pela grande descamao e proliferao celular do epitlio de revestimento. Instabilidade cromossmica: ndice elevado de mutaes nas clulas somticas Mutaes gnicas alterao a nvel de um gene Mutaes cromossmicas alterao na estrutura de um cromossoma Mutaes genmicas alterao no n de cromossomas

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Mutaes espontneas
erros na replicao

Mutaes induzidas

agentes fsicos agentes qumicos vrus

ndice de mutao induzida

Depende de: tipo de agente indutor dose tempo de exposio

Barreiras mutao espontnea ou induzida: organizao estrutural do cromossoma proteco a nvel celular sistema de reparao do DNA

Mutaes e instabilidade cromossmica

Mutaes

proteco celular

reparao do DNA

acumulao de leses no DNA

instabilidade cromossmica
Relao instabilidade cromossmica - cancro ALGUNS EXEMPLOS DE SNDROMES DE INSTABILIDADE CROMOSSMICA

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Ataxia Telangiectasia - sensibilidade s radiaes ionizantes Sndrome de Bloom - sensibilidade luz ultravioleta Anemia de Fanconi - sensibilidade a agentes alquilantes Todos com elevada susceptibilidade para o cancro pois tm mutaes em genes de reparao do DNA (ou proteco celular)

Instabilidade cromossmica: ndice elevado de mutaes ndice elevado de mutaes: maior probabilidade de uma mutao ocorrer num gene associado ao cancro

Transformao maligna
Cancro como doena gentica: mutaes em genes responsveis pela regulao do ciclo de diviso celular FOS, JUN e MYC so genes de resposta imediata a estmulos extracelulares. Seguese a expresso sequencial das ciclinas D1, E, A e B Activao sequencial de CDKs (cyclin-dependent kinases) por ligao s ciclinas. O ciclo pode bloquear em checkpoints especficos (a, b, c). Mutaes que do origem ao cancro: - Activao de proto-oncogenes (relacionados programada) em oncogenes. Ex: MYC com a proliferao celular

- Inactivao de genes supressores relacionados com a limitao da proliferao e com a apoptose. Ex: TP53 Mutaes que do susceptibilidade ao cancro: - Inactivao de genes supressores relacionados com instabilidade cromossmica. Ex: genes de reparao - Mutaes que do origem metastizao: - Inactivao de genes supressores de metstases. Ex: KISS1

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Distribuio da populao em 4 categorias, quanto ao risco de desenvolvimento de um tumor (Knudson, 1985) 1 categoria: um nvel irredutvel de cancro, a menor incidncia possvel, inevitvel porque est relacionada com uma instabilidade inerente ao prprio material gentico. 2 categoria: tumores que resultam de uma exposio em excesso aos agentes mutagnicos. 3 categoria: inclui tumores que resultam de uma relativa insuficincia gentica para tolerar a exposio aos agentes mutagnicos. 4 categoria: inclui tipos de cancro onde a influncia ambiencial insignificante. o caso de neoplasias autossmicas dominantes, par as quais a mutao inicial passa atravs da linha germinal. Citogentica do Cancro (dados histricos) 1890 - David von Hansemann - Estudos celulares em bipsias de carcinomas 1914 Boveri - Teoria da mutao somtica no cancro: as alteraes cromossmicas so as modificaes celulares responsveis pela transio de uma proliferao normal para maligna 1956 - Tjio e Levan - Identificao do nmero de cromossomas 1960 - Nowell e Hungerford - Descoberta do cromossoma Philadelphia em doentes com leucemia mielide crnica Cromossoma Philadelphia: t(9;22)(q34;q11) Importncia das Alteraes Citogenticas no Cancro As alteraes cromossmicas surgem de uma forma no ao acaso, ou seja, de uma forma especfica para tipos especficos de tumor. Alteraes Primrias Aparecem quase sempre como nica alterao e associadas a tipos especficos de tumor. Principal valor: no diagnstico Alteraes Secundrias Aparecem em adio alterao primria, e frequentemente dominam o padro cariotpico nas ltimas fases da doena. Principal valor: prognstico Efeitos gerais das alteraes cromossmicas I. Aumento de material gentico activo II. Perda de material gentico activo III. Recolocao de material gentico activo (efeito de posio)

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I. Aumento de material gentico activo Aneuploidias: trissomias, tetrassomias, etc. - desequilbrio na dosagem protoncogene-supressor Amplificao gnica: HSRs (homogeneously stained regions) DMs (double-minutes) Perda de imprinting aumento de dose do produto de um gene que deveria manifestar-se em hemizigotia; esse gene passa a funcionar como oncogene. Ex: IGF2 ( insulin-like growth factor 2) em casos de tumor: pulmonar, ovrico, testcular, cervical, renal, gstrico. II. Perda de material gentico activo Deleces deleco dos genes supressores. Exs: RB1, TP53, BRCA1, etc Perda de heterozigotia (LOH) Gene supressor com imprinting Uma s mutao suficiente para abolir a funo de um supressor com imprinting. Ex: H19 em casos de tumor: pulmonar, ovrico, testcular, cervical, renal, gstrico. III. Recolocao de material gentico activo Como que as translocaes activam oncogenes? H dois mecanismos: 1. Recolocao de um protoncogene sob controlo de um promotor activo. Nas doenas hematolgicas malignas , o protoncogene normalmente colocado junto a genes relacionados com regies promotoras de Ig, ou junto do gene TCR (T-cell receptor) 2. Fuso de genes (envolve sempre um protoncogene) que d origem formao de um novo gene (neooncogene). Exs: LMC, LMA-M3, etc. A translocao activa oncogenes por efeito de posio Exs: LMC, LMA-M3, etc. Translocao 9;22 na LMC: d origem a fuso e formao de novo gene Mecanismos de aco dos oncogenes 1. Estimulao da proliferao celular Activao de protoncogenes por recolocao.Ex: - t(8;14) no linfoma de Burkitt

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2. Bloqueio da diferenciao Fuso de genes e formao de neoncogene. Ex: - t(15;17) na LMA-M3: a fuso do gene receptor do cido retinico com o locus PML (promyelocytic leukemia) forma um receptor quimrico que activa a desacetilase, bloqueando a diferenciao celular. 3. Inibio da apoptose Fuso de genes e formao de neoncogene. Exs: - t(9;22) na LMC: a fuso BRC-ABL inibe a apoptose por induo do gene BCL2, o que vantajoso para a actuao do processo oncognico na populao de clulas susceptveis. - t(14;18) no linfoma folicular: a fuso BCL2-cadeia pesada da Ig leva a um excesso de produo do produto de gene BCL2, que inibe a apoptose.

Estudos citogenticos no cancro - concluso Identificao das alteraes primrias: Importncia no diagnstico Importncia no prognstico Identificao das alteraes secundrias: Importncia no prognstico Identificao de alteraes recorrentes ps tratamento: avaliao da remisso

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Estudo gentico do sexo

Determinismo gentico do sexo - conjunto de factores e mecanismos genticos que definem especificamente o sexomasculino ou feminino Diferenciao sexual - expresso fenotpica da constituio gentica global Formas de determinismo gentico do sexo: Genes responsveis, no localizados em cromossomas especialmente diferenciados Cromossomas sexuais, diferenciados para esse fim. Tambm portadores de informao gentica que no exclusiva do caracter sexo Cromossomas sexuais Constituio cromossmica XX - sexo feminino Constituio cromossmica XY - sexo masculino Cromossoma X Hiptese de Lyon O corpsculo de Barr nas clulas femininas corresponde ao cromossoma X inactivo; este tanto pode ser o de origem paterna como o de origem materna, nas diferentes clulas do mesmo organismo (ao acaso) A inactivao uma vez ocorrida mantm-se constante para cada linha celular Consequncias da Hiptese de Lyon - compensao de dose - mosaicismo - variabilidade de expresso em mulheres heterozigticas Vantagem selectiva da variabilidade de expresso - doenas ligadas ao X Exemplo: hemofilia - inactivao do X usada para identificar portadoras saudveis Exemplos: sndrome Lesch-Nyhan (presena ou no de enzima HGPRT nos cabelos) distrofia muscular Duchene (presena ou no de distofina na biopsia muscular) Sndrome de Rett Exclusivamente em raparigas. Hiptese: -hereditariedade dominante ligada ao X, com letalidade no sexo masculino hemizigtico

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Centro de inactivao no cromossoma X: o gene XIST Localizao do gene XIST: banda Xq13.3 Processo geral de inactivao reconhecimento do n de cromossomas X iniciao: no centro de inactivao espalhamento da inactivao manuteno da inactivao

O gene XIST no produz uma protena, mas antes um transcrito de RNA que permanece no ncleo, cobre o X donde transcrito e inactiva-o, por alterao da estrutura da cromatina mediada pelos mecanismos de metilao de DNA e desacetilao histnica.

Inactivao ao acaso: - por volta do 16 dia do desenvolvimento embrionrio (num estadio com 10002000 clulas aproximadamente) Incio da inactivao em tecidos especficos Ex: inactivao nos linfcitos T feita a partir de um pool de cerca de 10 stem cells (Puck et al, 1992) Desvios da inactivao ao acaso N DE CLULAS INICIAIS NA ALTURA DA INACTIVAO quanto menor fr o n de clulas iniciais maior ser o desvio SELECO POSITIVA aumento do ndice de proliferao celular, evoluo de novos loci com funes novas vantajosas SELECO NEGATIVA diminuio do ndice de proliferao celular por alteraes gnicas ou cromossmicas Desvio total da inactivao ao acaso Alteraes estruturais do X que sero inviveis se no houver compensao por inactivao Padres de inactivao no caso de anomalias do X Clula normal: alterao estrutural do X: t(X;autossoma) equilibrada: t(X;autossoma) desequilibrada: clula com mais de dois X: inactivao do X ao acaso inactivao do X anormal inactivao do X normal inactivao do X anormal inactivao de todos os X menos um

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Monossomia do X e efeitos no fentipo feminino Efeitos antes da formao dos corpos de Barr ( 16 dia do desenvolvimento embrionrio) No h reactivao do X inactivo nos ocitos (origina as caractersticas gondicas no sndrome de Turner) Ausncia das regies que escapam inactivao no X inactivo (origina as caractersticas somticas no sndrome de Turner) Atraso mental ligado ao X (XLMR) 1.8 / 1000 sexo masculino na populao masculina, to comum como o sndrome de Down Sndrome Martin-Bell (X frgil) 40% dos casos de XLMR procura de genes no cromossoma X a partir dos quais o Homo se tornou Sapiens Gillian Turner, Am J Hum Genet, 58: 1109-1110, 1996 - O atraso mental prevalente no sexo masculino, sendo o excesso na ordem dos 25-50%. Este excesso devido a genes no cromossoma X. - Esto identificados no cromossoma X numerosos genes responsveis por atraso mental (X-linked mental retardation). - Um dos sndromes mais conhecidos relacionados com o atraso mental no X o Xfrgil. Mas a forma mais comum e mais interessante de atraso mental ligada ao X tem o nome de nonspecific XLMR (Kerr et al., 1991). Contudo, pode no ser diagnosticada, pois o nico problema traduz-se na capacidade de aprendizagem reduzida. Mutaes nestes genes podem estar associadas a desenvolvimento do pensamento abstracto, planeamento e comunicao verbal complexa; por outras palavras, estes so os genes para a inteligncia superior.

Diferenciao sexual Constituio cromossmica XX - sexo feminino Constituio cromossmica XY - sexo masculino Uma espcie com o padro cromossmico XX/XY constitucionalmente feminina Gnada indiferenciada at 6 semana do desenvolvimento embrionrio

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Determinao dos caracteres sexuais primrios - presena do Y: diferenciao do testculo - ausncia do Y: diferenciao do ovrio Determinao dos caracteres sexuais secundrios androgneos, ligados a receptores especficos, determinam os caracteres sexuais masculinos Factores de regulao envolvidos na diferenciao das gnadas masculina e feminina

Factores implicados na formao da gnada bipotencial e diferenciao dos testculos e ovrio

5 sexos 1.Sexo masculino 2.Sexo feminino 3.Pseudohermafroditismo masculino 4.Pseudohermafroditismo feminino 5.Hermafroditismo verdadeiro Intersexo 1. Hermafroditismo verdadeiro Observa-se tecido gondico de ambos os sexos

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2. Pseudohermafroditismo masculino Observam-se apenas testculos, secundrios 3. Pseudohermafroditismo feminino Observam-se apenas ovrios, secundrios Nveis de desenvolvimento sexual 1. Determinao do sexo cromossmico (46,XX ou 46,XY) 2. Determinao do sexo gondico (ovrio ou testculo)

ambiguidade

nos

caracteres

sexuais

ambiguidade

nos

caracteres

sexuais

3. Determinao do sexo fenotpico (caracteres sexuais internos e externos) 4. Determinao do sexo psicolgico 5. Determinao do sexo educacional e social MULHER XY Sndrome de feminizao testicular Gene que controla a proteina receptora de androgneos, e portanto a diferenciao dos caracteres sexuais secundrios CAUSA: deficincia nos receptores de androgneos - mutao no gene do X - defeito do receptor HOMEM XX Perda de uma linha celular que continha o cromossoma Y Mosaico no detectado envolvendo a presena do cromossoma Y Translocao de todo ou parte do Y para um autossoma ou cromossoma X Mutao num locus no cromossoma X capaz de causar desenvolvimento testicular na ausncia do Y (male determinant inhibitor, Xp11-pter) Diferenciao Sexual/Desenvolvimento Sexual Caractersticas herana cromossomas sexuais Inactivao do Cromossoma X Imprinting Genmico e Fentipo

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5 SEMANA

9 SEMANA

EMBRIES

DIFERENCIAO SEXUAL

Sex determining region of the Y

GENE SRY
SEXO

Ductos de Muller

Ductos de Woolf

SEXO FEMININO

SEXO MASCULINO

SEXO HETEROGAMTICO 2 cromossomas sexuais diferentes SEXO HOMOGAMTICO 2 cromossomas sexuais iguais CROMOSSOMA X centenas de genes identificados CROMOSSOMA Y cerca de 85 protenas que codificam genes ESTUDOS INICIAIS Cr. X e Y H. Henking, 1891 Identificou uma estrutura nuclear nos espermatozides de algumas espcies Designou a estrutura de corpo X X body C. McClung, 1894 Identificou uma estrutura gentica invulgar nalguns espermatozides Designou a estrutura de Heterocromossoma E.B. Wilson, 1906 Estudou insectos Protenor Identificou 12 autossomas + 2 cromossomas X e 12 autossomas + 1 cromossoma X Mecanismo XX/XO de determinao sexual depende da distribuio aleatria do cromossoma X por metade dos gmetas durante a meiose masculina Estudou insectos Lygaeus Identificou 12 autossomas + 2 cromossomas X e 12 autossomas + 1 cromossoma X, 1 cromossoma Y Mecanismo XX/XY de determinao sexual os machos so heterogamticos e noutras espcies pode ser a fmea heterogamtica (EX: Borboletas, aves, peixes) H.V. Winiwarter, 1912 Estudou preparaes espermatogoniais metafsicas Identificou 47 cromossomas Idetificou em fmeas 48 cromossomas J.H.Tijo e A.Levan, 1956

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Desenvolvimento da tcnica de preparao de cromossomas Observaram que todas as clulas metafsicas tinham 46 cromossomas 1 par de cromossomas apresentava diferenas do macho para a fmea Morfologia cromossoma Y Palindromes 95% do DNA est numa linguagem que se l igualmente nas duas direces EX: Madam, Im Adam Esta versatilidade conhecida como a hall of mirrors do cromossoma Y promove instabilidade das enzimas de replicao do DNA Como consequncia durante a meiose, partes do cromossoma Y unem-se e perdem-se partes importantes do Y causa de infertilidade masculina Morfologia cromossoma X Brao curto e brao longo (p e q) Extremos regies pseudoauatossmicas: PAR1 PAR2 Zonas Pseudoautossmicas 5% do cromossoma 63 Genes Pseudoautossmicos podem emparelhar com partes do cromossoma X (pode haver crossing over) Cromossoma Y 63 Genes Pseudoautossmicos Codificam Protenas que funcionam nos 2 sexos Protenas participam em: Crescimento sseo Divuso celular Imunidade Transduo sinalizao Sntese de Hormonas Sntese de Receptores Fertilidade Metabolismo energia - Male Specific region MSY - at 2003 (altura em que foi sequenciado o cromossoma Y) conhecida por regio no recombinante - MSY composto por 3 classes de sequncias de DNA: - 10 a 15% - sequncias transpostas do CR. X (99% igual ao do X, Genes que codificam Protenas so raros) - 20% - Sequncias de DNA do CR. X degeneradas (possuem alguma semelhana ao X, remanescentes de autossoma que deu lugar ao brao longo do CR.X) - 65% - Sequncias de DNA palindrmicas designadas de Amplicons: -codificam 27 Protenas - Genes responsveis pela fertilidade como o SRY

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SRY /TDF TDF (Testis determining factor) ou SRY zona responsvel pela masculinizao SRY codifica 1 protena (SRY transcripting factor)responsvel pelo control da expresso de outros genes

TDF

SRY transcripting factor

ESTIMULOS

Testculos
Secreo Hormona AntiMulleriana Secreo Testosterona

Destruio estruturas femininas

Desenvolvimento estruturas masculinas

DHT

Epididimos, Vas Deferens, Vesculas seminais, Ductos de ejaculao

Uretra, Prostata, Penis, Escroto

Fentipo Feminino Caritipo XY

Androgen Insensitivity Syndrome

Mutao no Cr. X Ausncia receptores da Testosterona

Cessa desenvolvimento masculino durante perodo embrionrio por falta de receptores

Pseudohemarfroditismo masculino Testiculos presentes Gene SRY funcionante Hormonas Anti-Mullerinas presentes Ausncia: mamas, menstruao Presena: penis

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GUEVEDOCES Republica Dominicana Crianas que aos 12 anos apresentam penis! Feto no desenvolve estruturas masculinas Criana com fentipo Feminino PSEUDO HERMAFRODITISMO - Presena das 2 estruturas sexuais em diferentes estadios da vida

Diagnstico Anteriormente Puberdade Testes Pr-natais permitem diagnstico no recm-nascido Actualmente Teste Pr-natal indica presena dos cromossomas XY e nasce uma criana com Fentipo Feminino Antes da Puberdade tem Fentipo feminino embora em termos cromossmicos seja do sexo masculino. A PUBERDADE corresponde ao perodo em que que as glndulas produzem TESTOSTERONA e se se acativam genes responsveis pela masculinizao, surgindo o fentipo masculino. TRANSEXUAIS - Fentipo e Gentipo correspondentes ao mesmo sexo - Indivduo sente-se de sexo oposto ao do seu Fentipo e Gentipo HOMOSEXUAIS 1991 Estudos em gmeos Homozigticos 52% Homosexuais - 2 reas cerebrais diferentes nos homens Homosexuais dos Heterosexuais 1993, National Cancer Institute Sequncia de DNA do cromossoma X idntica em irmos homosexuais Estudos posteriores genes candidatos Homosexualidade no esto necessriamente localizados no cromossoma X, podem estar nos Autossomas CARACTERSTICAS Cromossomas sexuais Cromossoma Y Caractersticas raras, Y tem poucos genes Cromossoma X 2 cpias de alelos recessivos, 1 cpia de alelo dominante

GENES Cromossoma X

PRESENTES

HEMIZIGOTIA SEXO MASCULINO

EXCEPO

GENES Regies Pseudoautossmicas

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GENES Regies Pseudoautossmicas PARs - regio homologia que permite formao de sinapses e segregao do X e Y durante a meiose Caracterstica - X - Recessiva Expressa sempre no sexo Masculino Expressa no sexo Feminino Homozigtico e raramente num Heterozigtico Transmitida de Me Heterozigtica ou Homozigtica para filho afcetado Mulher afectada tem Pai acfectado e Me afectada ou Heterozigtica Os Traos Fenotpicos controlados por Genes X Recessivos facilmente identificados em Pedigrees devido ao padro Crisscross de hereditariedade. Todos os filhos de Mes Homozigticas manifestam o Trao Daltonismo Hemofilias A e B Sndrome de Lesch-Nyhan Distrofia muscular de Duchenne

Caracterstica - X - Dominante Raras Expresso do gene difere de acordo com o sexo Expresso no sexo feminino com apenas 1 cpia Expresso no sexo masculino mais grave Aborto espontneo frequente letal no sexo masculino - INCONTINENTIA - PIGMENTI - CHG Congenital Generalized Hypertricosis Doenas D e r - Cromossoma X Megalocrnea r Aumento da crnea Doena de Norrie r Crescimento anormal da retina Ritinite Pigemntar r Constrio do campo visual, cegueira nocturna Agamaglobulinmia r - Ausncia de alguns anticorpos Doena Granulomatosa Crnica r Infeces da pele e pulmes Diabetes insipidus r Urina copiosa Doena de Fabry r Dor abdominal, leses da pele, falncia renal Hipofosfatmia r e D Vitamina D resistente Deficincia da Ornitina transcarbamilase r atraso mental e amonaco no sangue Imunodeficincia combinada r falta de clulas imunitrias Sndrome de iskott-Aldrich r diarreia hemorrgica, infeces, reduo plaquetria Sndrome de Lesh-Nyhan r atraso mental auto mutilao, clculos renais Distrofia Muscular Duchenne r fraqueza muscular progressiva Amelogenesis imperfecta - D esmalte anormal Sndrome de Alport r surdez, inflamao tubulos renais Displasia ectodrmica anidrtica r agenesias dentrias, reduo pilosidade e glndulas sudorparas Sndrome de Rett D- atraso mental, neurodegenerao

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SEXO FEMININO INACTIVAO 1 dos cromossomas X PRECIPITAO ACASO Clulas expressam X materno Clulas expressam X paterno CORPSCULOS BARR Ncleo clula feminina I NTERFASE Cromossoma X precipitado Inactivo DNA com grupos metilo que impede transcrio para RNA Gene XIST- codifica RNA que se liga a local especfico no cromossoma X inactivo. Inactivao do X pode alterar o fentipo, mas no altera o gentipo 1961 Hiptese de Mary Lyon - Corpsculo de Barr correspondia ao cromossoma X inactivo - Inactivao ocorria cedo no desenvolvimento embrionrio INACTIVAO SEM EFEITO ALELO INACTIVO SEM IMPORTNCIA

HOMOZIGOTOS X

HETEROZIGOTOS X

INACTIVAO LEVA A EXPRESSO DE UM ALELO OU DE OUTRO ALELO

DOENA Xr Displasia Ectodrmica Anidrtica Mulheres Heterozigticas - pele com ausncia de glndulas (ALELO NORMAL INACTIVO) - pele com glndulas sudorparas (ALELO MUTADO INACTIVO) MULHER UM MOSAICO PARA O CROMOSSOMA X

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Clonagem
A palavra clone vem do grego kln que significa rebento ou broto Clonar significa produzir uma cpia gentica de um indivduo Clonagem Humana Obteno de seres humanos geneticamente idnticos, no que respeita ao contedo de genes localizados no ncleo Apesar dos avanos, esta ainda est longe de acontecer As questes ticas e religiosas limitam o seu desenvolvimento Clonagem Embrionria: Obteno de embries geneticamente idnticos, por separao das clulas totipotenciais de um embrio Pode ocorrer espontaneamente (como nos gmeos monozigticos) Pode ser efectuado em espcies animais de elevado valor econmico, obtendo o desenvolvimento de vrios embries a partir do original

S poder ocorrer diversidade gentica entre estes, se houver heteroplasmia mitocondrial no ovo, com partilha assimtrica das mitocndrias pelas clulas resultantes da sua diviso, e/ou acumulao de mutaes ps-embrionrias Clonagem Somtica: Obteno de embries geneticamente idnticos relativamente ao DNA nuclear, por transplante do ncleo diplide de uma clula somtica de um indivduo para o citoplasma de um ovcito previamente anucleado Mtodo artificial Em 1975 os anfbios foram os primeiros organismos a serem clonados Processo de Clonagem da Ovelha Dolly

Inicialmente possibilitouse a regresso da expresso do DNA das clulas adultas numa forma inactiva, por reduo da concentrao do soro de 10% para 0,5% no meio de cultura em que as clulas foram mantidas em proliferao. As clulas foram conduzidas quiescncia prpria do estdio G0 do ciclo celular Estas apagaram as marcas da sua passagem por uma forma diferenciada da mama do organismo adulto de que foram recolhidas, por inactivao dos genes responsveis pelo fentipo funcional adulto. Tornaram-se totipotentes

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O ncleo de uma destas clulas somticas permitiu que o ovo obtido tenha um nmero normal de cromossomas da espcie De seguida iniciam-se mitoses, por aco de protenas e do RNA acumulado no citoplasma Durante estas divises, o DNA foi reprogramado pelas protenas do citoplasma ovocitrio As chaves utilizadas foram as protenas informacionais citoplasmticas ovocitrias seleccionadas evolutivamente pelo sexo feminino Acontecimentos embrionrios e a sua sequncia foram respeitados Os embries obtidos por clonagem somtica podem ser utilizados para fins reprodutivos ou teraputicos Clonagem Reprodutiva: Obteno de embries e sua implantao intra-uterina para virem a desenvolver-se como fetos e originarem novos indivduos Clonagem Teraputica : Os embries so obtidos da mesma forma e posteriormente desenvolvidos in vitro at fase de blastocisto (sem implantao intra-uterina) Da massa celular interna dos blastocistos, so colhidas clulas pluripotentes para serem usadas para fins teraputicos Vantagem: evita a rejeio, se o doador fosse a prpria pessoa vantagens: por exemplo no caso de substituir o tecido cardaco numa pessoa que sofreu um infarto. No caso de portadores de doenas genticas no seria possvel usar as clulas da prpria pessoa, mas de um doador que fosse compatvel, por exemplo um familiar de um doente afectado por distrofia muscular.

Objectivos dos Investigadores

Obteno de clulas estaminais que possam ser usadas no tratamento de certas doenas, como diabetes, doenas cardacas, doenas de Parkinson e Alzheimer

Clulas estaminais

- clulas extraordinrias cujo o destino ainda no est decidido podem transformar-se em vrios tipos de clulas diferentes por diferenciao

Por exemplo, as doenas de Parkinson e Alzheimer resultam de leses em grupos de determinadas clulas no crebro. Ao fazer 1 transplante das clulas estaminais de um embrio para a parte do crebro com leses, os cientistas esperam substituir o tecido do crebro que se perdeu.

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Para evitar problemas ticos na remoo de clulas estaminais, os investigadores procuram como fontes a medula ssea de adultos e o sangue do cordo umbilical Melhorar a reproduo de animais para consumo Salvar espcies em vias de extino Medula ssea- no s as clulas estaminais retiradas de um adulto com o seu consentimento seriam eticamente aceitveis para a maioria dos indivduos e governos, como tb melhores para os pacientes. Basta pensar num indivduo q padece de uma doena q esta a matar as clulas do crebro. As clulas estaminais poderiam ser retiradas da sua medula ssea, seriam manipuladas em laboratrio para se tornarem em clulas cerebrais e voltariam a ser implantadas no crebro, no existindo, assim, uma rejeio imunitria do transplante. Sangue do cordo umbilical que normalmente eliminado no parto.A particularidade da recolha destas clulas que estas so retiradas sem afectar a me ou a criana e so, tambm, 100% compatveis com o beb caso este venha a desenvolver alguma doena. Contudo, provvel que as clulas estaminais dos embries apresentem, entretanto, as perspectivas mais imediatas para novos tratamentos e curas. Aspectos Positivos e Negativos O homem desconhece o significado da palavra limite e teme no conhecer o desconhecido. Surge assim, um problema no que diz respeito ao modo como esta tcnica utilizada. Ser esta um capricho ou uma necessidade? Aspectos positivos Reduo das desvantagens face ao que vantajoso A humanidade a principal beneficiada Avano da cincia e cura de certas doenas Aspectos negativos O uso indevido desta tcnica poder trazer consequncias nefastas no que diz respeito a aspectos morais tica A clonagem est sujeita a todas as observaes ticas e jurdicas que a condenam amplamente Possibilidade da clonagem substituir a reproduo pela duplicao Reduo da diversidade entre os indivduos com o objectivo de seleccionar caractersticas especficas, com a possvel despersonalizao destes Produo de clones de plantas e animais destinados ao consumo humano ou produo de outros produtos, tendo grande impacto na reduo da diversidade da flora e da fauna A dignidade de uma pessoa um aspecto tico fundamental Os opositores da clonagem consideram existir instrumentalizao da mulher Os apoiantes esto a favor da proibio da clonagem reprodutiva, mas no da clonagem teraputica Dignidade da pessoa clonada

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Instrumentalizao da mulher - argumentam a ilegalidade do emprstimo de vulos e de tero por parte da mulher. Construo de um tero artificial substituindo o papel da mulher neste tipo de experincia Pessoa clonada - esta padeceria de um sofrimento profundo, cuja a entidade psquica corre o risco de ser comprometida, pois recairiam sobre ela expectativas e atenes nefastas Uso de embries clonados para a investigao Na Clonagem, o homem deve ser respeitado de acordo com valores culturais, sociais e legislativos Embries praticamente impossvel controlar como sero usados, teriam de ser destruidos, o que recorreramos ao aborto o q ilegal A tcnica da clonagem uma forma de obter embries: - Envolve a criao de um embrio humano que contenha a composio gentica completa de algum que j est vivo - Se implantado no tero da mulher, o embrio poderia, teoricamente, desenvolver-se num clone - Se utilizado para investigao, o embrio iria fornecer clulas estaminais para curar doenas Por parte dos cientistas, nunca existiu qualquer inteno de implantar os embries numa mulher, mas sim o uso destes para a investigao ou tratamento A criao de um embrio com esta finalidade considerada por muitas pessoas, religies e por alguns governos como eticamente errada, da a grande polmica que gira em torno da clonagem hoje em dia

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INFERTILIDADE
Infertilidade - Quando a eficcia dos espermatozides no tm capacidade de fecundar o ocito FECUNDAO - Muco cervical tem funo mobilizadora dos espermatozides mas por vezes dificulta a sua passagem FECUNDAO - Estimulao ovrica - Introduo de agulha na vagina com inseminao dos embries na cavidade uterina - Colocam-se 2 a 3 embries no mximo > 500 000 CICLOS/ ano (no Mundo inteiro fazem-se cerca deste valor de fertilizaes) 1-3% RN HEREDITARIEDADE MATERNA - Cada vez mais existem problemas de fertilidade - Em termos de hereditariedade ns somos mais filhos da Me do que do Pai - No ocito existem muitas mitocndrias que passam para o embrio - Por isso existem vrias doenas de hereditariedade mitocndrial - 50 000 Espermatozides so colocados em volta do ocito para haver fecundao na reproduo medicamente assistida MICROINJECO INTRACITOPLASMTICA - ICSI Microinjeco - corresponde a uma tcnica em que se vai esmagar a cauda do espermatozide e posteriormente se vai injectar o seu contedo no ocito - 1 ejaculado normal deve ter entre 20 a 250 milhes de espermatozides para haver uma fecundao normal - Podem ocorrer situaes em que h falta de mobilidade dos espermatozides Microinjeco FASES: - 75% dos ocitos fecundam - Coloca-se na estufa e aguarda-se at s 16 horas, quando se vai observar - A observao seguinte feita aps 72 horas Microinjeco - Aplicaes: Casos Casos Casos Casos Casos de Ejaculao retrgrada (problemas que surgem por trauma ou outra) de Espermatozides imveis pacientes paraplgicos de Azoospermia obstrutiva (por inflamaes dos epiddimos) de hipoplasia - Azoospermia secretora (reduo de produo de Sz)

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CULTURA IN VITRO DE Sz - Trabalhos recentes que ainda no so aplicados na clnica - Esto em investigao RISCOS Populao masculina infrtil: caritipo normal 89% anomalias de nr (Klinefelter, 47,XYY) 3% anomalias de estrutura

47,XXY TESE 35% TESE ECSI (GR) 2 (3 RN) ANEUPLOIDIAS 7% DGPI CRIO PROFILCTICA EZ MICRODELECES Cromossoma Y - Causa importante de infertilidade - indicao para congelao profictica de espermatozides - Porque o indivduo vai deixar de produzir Ez passados 5 a 10 anos FACTORES EPIGENTICOS - No provocam mutao mas alteram a fertilidade EXEMPLOS: factores que alteram o fentipo Imprinting genmico IMPRINTING GENMICO -Conhecem-se cerca de 50 genes (GENES IMPRINTED) humanos em que apenas um dos alelos se vai manifestar - Est relacionada com uma metilao dependente do sexo embrionrio (IMPRINTING PARENTAL) SNDROME DE BECKWITH-WIEDMANN Pensa-se que podem estar associados a embries com ICSI, FIV, Ez ejaculado, O Prof. Barros no concorda e diz que a literatura existente defende que estes embries so to normais quanto as outras PROTOCOLO Estudo gentico Indicao/prtica criteriosa Monotorizao da gestao Avaliao das crianas nascidas imediata e alongo prazo DIAGNSTICO PR-IMPLANTAO Bipsia embrionria ao 3 dia

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- Antes de transferir o embrio para o tero faz-se um estudo cromossmico -Indicao - casos de Mes que j fizeram interrupes da gravidez por Trissomia 21 - Tambm se pode fazer a escolha do sexo mas estes casos esto reservados para doenas ligadas ao sexo PCR por exemplo na doena dos pzinhos RFLP SSCP

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