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finalmente producir el bioetanol mediante una fermentacin alcohlica. A continuacin se muestra una revisin, de los principales trabajos relacionados al estudio de estas etapas de produccin de bioetanol realizados durante el 2011. Chiaramonti et al. (2011) estudiaron la torrefaction como un nuevo enfoque para el pretratamiento de la biomasa para la produccin de bioetanol. Ellos encontraron que se mejora la molienda de materiales fibrosos, lo que reduce la demanda de energa para la molienda de la materia prima antes de la hidrlisis, y se abre la estructura de la biomasa, para que est ms accesible a las enzimas para la hidrlisis. Para esto fue utilizada biomasa molida de la poda del olivo en diferentes condiciones, a saber, 180 a 280C durante 60-120 min, y luego fue utilizado como sustrato en los experimentos de hidrlisis. La bioconversin se llev a cabo con una mezcla de enzimas, y con una cepa comercial de Saccharomyces cerevisiae. Los experimentos demostraron que la biomasa quemada puede ser enzimticamente hidrolizada y fermentada a etanol. Por otro lado, Park et al. (2011) estudiaron un proceso simple para la produccin de etanol desde columnas de paja de arroz (sacarificacin directa de caa DiSC), logrando una significante acumulacin de carbohidratos (glucosa, fructosa, sucrosa). Otro estudio sobre el efecto del petratamiento en la produccin de bioetanol, fue el realizado por Chen et al. (2011). Ellos estudiaron el impacto que genera el pretratamiento con cido diluido en la estructura del bagazo de caa utilizando calor de microondas. Para ello fueron estudiadas tres temperaturas 130, 160 y 190C con dos tiempos de calentamiento, 5 y 10 min. Los experimentos indican que el aumento de la temperatura destruy la estructura lignocelulsica del bagazo de caa de manera significativa, obteniendo los mejores resultados con casi la destruccin total de la hemicelulosa y desaparicin de la estructura cristalina de la celulosa. En contraste, la caracterstica de la lignina se mantuvo inalterable. Lu et al. (2011) tambin investigaron la utilizacin de microondas como apoyo al pretratamiento con cido diluido en la produccin de bioetanol desde paja. Monavari et al. (2011a) determinaron que al emplear sales metlicas puede ser reducida la severidad del pretratamiento con cido diluido, debido a la reduccin de la energa de activacin. Ellos estudiaron la utilizacin de chips de pino utilizando sulfato ferroso como catalizador del cido. El uso del catalizador
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aument la produccin de glucosa de 74% a 78%. Otro trabajo que estudia la hidrlisis cida como pretratamiento es el desarrollado por Srilekha et al. (2011), pero adems ellos estudian la presencia de inhibidores (furanos y fenoles) en la hidrolisis enzimtica y fermentacin, utilizando paja como material lignocelulsico adems de un co-cultivo de dos microorganismos. La concentracin de etanol encontrada fue de 12 g L-1, con un rendimiento, productividad volumtrica de etanol y eficiencia de fermentacin de 0.33 g L-1 h-1, 0.4 g g-1 y 95%, respectivamente con el co-cultivo de Saccharomyces cerevisiae OVB 11 y Pichia stipitis NCIM 3498. Adems, los mismo autores, Monavari et al. (2011b), realizaron pruebas utilizando como pretratamiento de bagazo de caa, un cido diluido orgnico (acido lctico). El bagazo despus de su almacenamiento con el 0.5% de cido lctico, se obtuvo un rendimiento de glucosa despus de la hidrlisis enzimtica de 79% del terico, basado en la cantidad disponible de materia prima. Sin embargo, el almacenamiento utilizando como materia prima madera de abeto con cido lctico, antes de pre-tratamiento, con o sin adicin de SO2, no fue eficiente y sus resultados fueron inferiores a los obtenidos solo utilizando SO2. Velmurugan y Muthukumar (2011) optimizaron el uso de cido oxlico en el pretratamiento de mazorcas de maz para su posterior hidrlisis y fermentacin. El hidrolizado obtenido tras el lavado de la biomasa posee 32.55 g L-1 de xilosa, 2.74 g L-1 de glucosa y concentraciones bajas de algunos inhibidores. La produccin de etanol, utilizando Scheffersomyces stipitis, a partir de este hidrolizado fue de 10.3 g L-1, cercano el 11.9 g L-1 terico. Posteriormente fue utilizado un sistema de diafiltracin, el cual redujo eficazmente el cido actico en el hidrolizado, aumentando la velocidad de fermentacin. El contenido de hemicelulosa de los slidos recuperados se redujo de 27.86% antes del pre-tratamiento a slo 6.76% despus del tratamiento. La mayor parte de la celulosa se mantuvo en la biomasa pretratada. La mayor produccin de etanol, despus de la sacarificacin y fermentacin simultneas (SSF) utilizando S. stipitis fue de 21.1 g L-1. Tsoutsos y Bethanis (2011), estudiaron los dos proceso de hidrlisis cida ms comunes (por lotes y continuo agitado) mediante el desarrollo de un simulador especfico para diferentes materias primas. La simulacin se aplic en un amplio rango de temperaturas (100-240C) y concentraciones de cido (0.5 a 3.0% p/p), con
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el fin de optimizar la productividad de las pentosas y hexosas fermentables. La productividad de xilosa oscil entre 85-95% en las condiciones ms ptimas en comparacin con los valores tericos, mientras que grandes variaciones de glucosa fueron frecuentes (10-55%) en comparacin con los valores tericos. Los mejores resultados tericos se han logrado para la hidrlisis de paja de trigo en un reactor discontinuo. Por otro lado, Tang et al. (2011) presentan el uso de la sacarificacin simultnea y co-fermentacin (SSCF) de residuos lignocelulsicos de la produccin de furfural comercial (residuos de furfural, FR) y granos de maz para comparar diferentes medios nutricionales. Tanto la produccin de etanol, como el nmero de clulas vivas de levadura se increment con el aumento de maz, mientras que la proporcin de muerte celular de la levadura se redujo con la SSCF de granos de FR y maz. Una concentracin de etanol de 73.1 g L-1 a 120 h, que corresponde a un rendimiento de 101.1% de etanol basado en celulosa y almidn de maz FR, se obtuvo en SSCF del 7.5% FR y el 14.5% de granos de maz con medio mineral y sal. Los efectos de la hidrlisis enzimtica en el rendimiento de produccin de bioetanol tambin han sido estudiados, es as como Kuila et al. (2011) evaluaron el efecto del pretratamiento enzimtico sobre Lantana camara para mejorar rendimiento en la produccin de bioetanol. Una ptima deslignificacin enzimtica (88.79%) fue lograda despus de 8 h de incubacin. Despus de la deslignificacin el sustrato fue tratado con una mezcla de carbohidratasas para una sacarificacin apropiada. El sustrato de la enzima tratada produjo la reduccin de azcar (713.33 mg / g sustrato seco) despus de 9 h de sacarificacin. Utilizando una cepa de levadura convencional, 9.63 g L-1 de bioetanol fueron producidos a partir de las muestras sacarificadas de Lantana camara. Otro estudio del efecto del pretratamiento enzimtico sobre la produccin de bioetanol, fue el realizado por Wi et al. (2011). El objetivo de este trabajo fue encontrar un proceso de pretratamiento que mejore la conversin enzimtica de la biomasa en azcares. La materia prima utilizada fue Paja tratada previamente por dos procesos: un proceso con molienda hmeda adems de un tratamiento de explosin, y un proceso de molienda en seco. Los efectos de los tratamientos previos se estudiaron tanto en trminos de cambios estructurales y composicin y los cambios en la susceptibilidad a la hidrlisis enzimtica. Despus de la aplicacin de los procesos
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hmedos y secos, las cantidades de celulosa y xilosa en la paja fueron 37-38% y 1415%, respectivamente, en comparacin con el 31% y el 12% de los controles sin tratar. En el rendimiento de la hidrlisis enzimtica, el proceso hmedo presenta el mejor rendimiento de glucosa, con una conversin del 93.1%, mientras que el proceso seco produjo el 69.6%, y el control <20%. En la bsqueda de mecanismos simples y econmicos para el pretratamiento de material lignocelulosico, que permita aumentar las eficiencias de produccin de bioetanol, Oleskowicz-Popiel et al. (2011) estudiaron el ensilado de muestras de biomasa hmeda envuelta en fardos de plstico como un almacenamiento hmedo para la produccin de bioetanol a partir de tres muestras de biomasa lignocelulsica, hierba del maz, centeno y trbol. Tras el tratamiento de ensilaje, pruebas enzimticas de convertibilidad mostraron que el 51.5%, 36.5% y 41.9% de la celulosa fue convertida por las enzimas. Adems, las pruebas de SSF (sacarificacin y fermentacin simultneas) se realizaron mediante hidrlisis enzimtica y fermentacin combinada con dos diferentes microorganismos Saccharomyces cerevisiae y Kluyveromyces marxianus. La produccin de etanol fue de 33.0%, 27.5%, 36.9% con K. marxianus y 29.0%, 28.1%, 34.5% con S. cerevisiae, el rendimiento aument significativamente despus del pretratamiento hidrotermal: 77.7%, 72.8%, 79,5% (K. marxianus) y 72.0%, 80.7%, 75.7% (S. cerevisiae) del terico basado en el contenido de azcar C6 en el maz, centeno y trbol, respectivamente. Koo et al. (2011) estudiaron un proceso libre de cido organosolv para superar los problemas causados por el catalizador cido en el proceso de organosolv, para la produccin de etanol a partir de Liriodendron tulipifera. Aunque los contenidos relativos de lignina fueron superiores al 20%, la conversin enzimtica aument significativamente a 65% en todas las condiciones, y por lo tanto una correlacin entre la lignina y conversin enzimtica no puede explicarse con el contenido de lignina relativa. La conversin enzimtica aument significativamente por encima del 65%, independientemente de la temperatura, lo que sugiere que el tratamiento organosolv con hidrxido de sodio se puede realizar a una temperatura ms baja. Son mltiples las materias primas lignocelulosicas utilizadas para la produccin de bioetanol, entre ellas Shen et al. (2011) estudiaron al bagazo de sorgo dulce (SSB) y el abeto Douglas (DF) previamente pretratado con vapor empleando SHF y SSF para evaluar los efectos de la suplementacin de xilanasa y deslignificacin en la produccin de etanol. Los resultados indicaron que la concentracin final de etanol
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en la SHF lleg a 28.4 g L-1 (SSB) y 20.4 g L-1 (DF) con la suplementacin de xilanasa con un aumento de 46% y 61% en comparacin con los controles. La deslignificacin puede mejorar considerablemente la concentracin final de etanol a 31.2 g L-1 (SSB) y 30.2 g L-1 (DF) con el aumento del 61% y 138%. Otra materia prima estudiada por Baba et al. (2011) es el Cedro japons (Cryptomeria japonica), el cual tiene alrededor del 60% de las plantaciones forestales en Japn, y existe una creciente demanda. Sin embargo, la madera blanda es una de las especies de madera ms recalcitrantes a los pretratamientos hidrotrmicos y termoqumico para la posterior sacarificacin enzimtica. En este trabajo, fueron aplicados pretratamientos combinados por solvolisis y cultivo de hongos de pudricin blanca para desarrollar el sistema de pretratamiento. El tratamiento de la madera de conferas con el hongo Ceriporiopsis subvermispora FP-90031 y un nuevo aislado fngico Phellinus sp. SKM2102 durante 8 semanas aument el rendimiento en azcar en 35.7 y 40.8%, respectivamente. Las mejores condiciones de pretratamiento en trminos de produccin total de azcar como una fraccin soluble fueron obtenidos despus del tratamiento con Phellinus sp. SKM2102, resultando en la produccin de 42.2 g de azcares reductores totales por cada 100 g de la biomasa. Finalmente, Macarie et al. (2011) estudiaron dos mtodos diferentes, a saber, la sacarificacin y fermentacin simultnea y dos etapas de hidrlisis y fermentacin, para la conversin de la celulosa en bioetanol. Condiciones aerbicas y anaerbicas fueron empleados con el fin de utilizar dos tipos de microorganismos, Trichoderma reesei y Zymomonas mobilis que se utilizan para la produccin de celulasas. El objetivo de este trabajo fue investigar tambin la eficacia de un consorcio de microorganismos en la etapa de la fermentacin y la accin del consorcio con diferentes concentraciones de celulosa, con el fin de determinar los parmetros ptimos del proceso. Se obtuvieron buenos rendimientos (45% - 70%) de la degradacin de la celulosa en azcares fermentables.
1.2.-Realice un anlisis de amenazas y oportunidades. AMENAZAS. Las amenazas al inicio del proyecto se mantienen. El gran inters a nivel mundial para desarrollar la industria del bioetanol lignocelulsico exige gran rapidez de respuesta, las universidades a veces no tiene la capacidad de respuesta que requiere el mercado, no hay tiempo que perder en la bsqueda de nuevas y mejores tecnologas que permitan aumentar los rendimientos de bioetanol a partir del complejo material lignocelulsico. La figura 1 muestra el aumento exponencial de publicaciones cientficas relacionadas con el bioetanol (r2=0,98), bioetanol lignocelulsico (r2=0,96), y pretratamiento del material lignocelulsico para bioetanol (r2=0,94) entre los aos 2000 y 2011.
Fuente: Elaboracin propia a partir de www.sciencedirect.com Figura 1. Aumento del nmero de publicaciones cientficas relacionadas al bioetanol entre los aos 2000 y diciembre del 2011. 9
OPORTUNIDADES. Las oportunidades al inicio del proyecto se mantienen. Desafo tecnolgico. An existe a nivel mundial, el desafo tecnolgico de mejorar la tecnologa usada para producir etanol celulsico. El pretratamiento sigue siendo la etapa crtica del proceso que permita producir bioetanol a partir de una matriz lignocelulsica. Altas rotaciones. Los hbridos de lamos, con rotaciones de 2 a 3 aos, siguen siendo en Chile, una de las mejores materias primas para producir bioetanol lignocelulsico a gran escala. Bioetanol para aviones. "La aplicacin del sistema de flexin en el motor de aviones de pistn es otro paso importante hacia la popularizacin de etanol en los mercados de alta tecnologa", observ el consultor de emisiones y tecnologa del Sindicato de la Industria de Caa (UNICA), Alfred Szwarc. El uso de etanol en la aviacin se inici en Brasil con el lanzamiento del modelo Ipanema, un avin fumigador en plena produccin por la Empresa Brasileira de Aeronutica (Embraer), cuyo motor de gasolina del motor fue adaptado para el uso de la aviacin 100% de etanol. Seis aos despus de su lanzamiento al mercado, Embraer ha vendido ms de 1.100 aviones Ipanema, marca lder en ventas en el segmento y representa alrededor del 75% de todas las aeronaves agrcolas en operacin en Brasil (23 febrero 2011). (http://energiasrenovables.com/energias/renovables/index/pag/Fuel/botid/1/tip/articulo/tag/Fuel/p agid/14246/title/Etanol%20y%20sistema%20flexfuel%20para%20peque%C3%B1as %20aeronaves/). Brasil, segundo pas detrs de Estados Unidos en aviacin ligera, posee una flota de 14.000 aviones, de los que 12.000 podran ser equipados para ser propulsados a etanol (http://www.elmundoalinstante.com/contenido/titulares/en-brasil-ya-hayun-avion-que-vuela-con-etanol-es-el-ipanema-200/).
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La compaa Magneti Marelli, especializada en tecnologa de motores de automviles, espera iniciar en el 2013 vuelos experimentales con sistemas flex (motores que funcionan a partir de etanol, gasolina o la mezcla de los dos carburantes) en pequeas aeronaves en Brasil. La tecnologa promete aplicar en la industria de la aviacin la misma utilizada en los vehculos ligeros. En Espaa, los ministerios de Fomento, Medio Ambiente e Industria impulsarn la produccin de biocombustibles para la aviacin, a travs de un proyecto de colaboracin pblico privada que ser desarrollado ntegramente en el pas, desde la produccin de materias primas sostenibles hasta la distribucin y comercializacin. Contar con la participacin de 13 empresas de los sectores areo y energtico. El proyecto de colaboracin pblico privada ser desarrollado ntegramente en el pas, desde la produccin de materias primas sostenibles hasta la distribucin y comercializacin del biocombustible. Con este objetivo, las instituciones pblicas y privadas implicadas firmaron un convenio cuya primera fase contempla analizar y explotar el potencial de generacin de riqueza y empleo de esta cadena de produccin y consumo, fortaleciendo y posicionando tanto al sector areo espaol, como a las industrias implicadas en todo el ciclo productivo. La implantacin de esta cadena ayudara a cumplir los objetivos de diversificacin energtica en un pas netamente importador de petrleo. Las 13 empresas que se han adherido al Acuerdo voluntario de participacin de entidades asociadas a la iniciativa espaola para la produccin y consumo de bioqueroseno en aviacin son Airbus, Camelina Company Espaa, Cepsa, Ciemat, Clh, Rsb (Epfl), Iberia, Residuos y Refinados Iberia SL, Pullmantur Air, Repsol Comercial de Productos Petrolferos S.A., Tecnologa y Biomasa Sostenible S.L. (Tecbio), Tecnalia y Uop LLC. La presidenta de SENASA, Eugenia Llorns, resalt que el uso de biocombustibles en aviacin jugar en un futuro prximo un papel fundamental en el reto de conseguir un crecimiento sostenible del transporte areo, entendiendo como sostenible un transporte seguro y viable econmicamente, que permita mantener el liderazgo de la aviacin, al mismo tiempo que una progresiva reduccin de sus emisiones de gases de efecto invernadero. HOSTELTUR (7 nov 2011; http://biodiesel.com.ar/6424/espana-producira-biocombustible-para-aviones#more6424).
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1.3.- Referencias Baba, Y., Tanabe, T., Shirai, N., Watanabe, T., Honda, Y., Watanabe, T. Pretreatment of Japanese cedar wood by white rot fungi and ethanolysis for bioethanol production. Biomass and Bioenergy. (2011). 35:320-324 Chen, W.-H., Tu, Y.-J., Sheen, H.-K. Disruption of sugarcane bagasse lignocellulosic structure by means of dilute sulfuric acid pretreatment with microwave-assisted heating. Applied Energy. (2011). 88: 27262734 Chiaramonti, D., Rizzo, A.M., Prussi, M., Tedeschi, S., Zimbardi, F., Braccio, G., Viola, E., Pardelli, P.T. 2nd generation lignocellulosic bioethanol: is torrefaction a possible approach to biomass pretreatment?. Biomass Conv. Bioref. (2011) 1:915 Fornell, R. and Berntsson, T., Process integration study of a kraft pulp mill converted to an ethanol production plant-Part A: Potential for heat integration of thermal separation units, Applied Thermal Engineering 35 (2012) 81-90. Koo, B.-W., Kim, H.-Y., Park, N., Lee, S.-M., Yeo, H., Choi, I.-G. Organosolv pretreatment of Liriodendron tulipifera and simultaneous saccharification and fermentation for bioethanol production. Biomass and Bioenergy. (2011). 35:1833-1840 Kuila, A., Mukhopadhyay, M., Tuli, D.K., Banerjee, R. Production of ethanol from lignocellulosics: an enzymatic venture. EXCLI Journal. (2011). 10:85-96 Lu, X., Xi, B., Zhang, Y., Angelidaki, I. Microwave pretreatment of rape straw for bioethanol production: Focus on energy efficiency. Bioresource Technology. (2011). 102:79377940 Macarie, C.A., Segneanu, A.-E., Balcu, I., Pop, R., Burtica, G., Gherman, V.-D. Comparative Study on Microorganisms Used for the Bioethanol Production. Low Carbon Economy. (2011). 2: 224-229 Monavari, S., Galbe, M., Zacchi, G. Influence of impregnation with lactic acid on sugar yields from steam pretreatment of sugarcane bagasse and spruce, for bioethanol production. Biomass and Bioenergy. (2011b). 35:3115-3122. Monavari, S., Galbe, M., Zacchi, G. The influence of ferrous sulfate utilization on the sugar yields from dilute-acid pretreatment of softwood for bioethanol production. Bioresource Technology. (2011a) 102:11031108
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Oleskowicz-Popiel, P., Thomsen, A.B., Schmidt, J.E. Ensiling e Wet-storage method for lignocellulosic biomass for bioethanol production. Biomass and Bioenergy. (2011). 35:2087- 2092 Park, J., Ike, M., Arakane, M., Shiroma, R., Li, Y., Arai-Sanoh, Y., Kondo, M., Tokuyasu, K. DiSC (direct saccharification of culms) process for bioethanol production from rice straw. Bioresource Technology. (2011). 102:65026507 Phillips, R., Jameel, H., and Clark E., Technical and economic analyisis of repurposing a kraft pulp and paper mill to the production of ethanol, in: TAPPI Press-Engineering, Pulping and Environemetal Conference, vol 4, (2008), 2722-2769. Roy, P., Tokuyasu, K., Orikasa, T., Nakamura, N., and Shiina Takeo, A technoeconomic and environmental evaluation of the life cycle of bioethanol produced from rice straw by RT-CaCCO process, Biomass and Bioenergy (2012), doi:10.1016/j.biombioe.2011.12.013 (in press). Shen, F., Kumar, L., Hu, J., Saddler, J.N. Evaluation of hemicellulose removal by xylanase and delignification on SHF and SSF for bioethanol production with steam-pretreated substrates. Bioresource Technology. (2011). 102:89458951 Srilekha Yadav, K., Naseeruddin, S., Sai Prashanthi, G., Sateesh, L., Venkateswar Rao, L.. Bioethanol fermentation of concentrated rice straw hydrolysate using co-culture of Saccharomyces cerevisiae and Pichia stipitis. Bioresource Technology. (2011). 102:64736478 Starfelt, F., Daianova, L., Yan, J., Thorin, E., and Dotzauer, E., The impact of lignocellulosic ethanol yields in polygeneration with district heating- A case study. Applied Energy 92 (2012) 791-799 Tang, Y., Danqing, Z., Carrasco, C., Jianxin, J. Simultaneous saccharification and cofermentation of lignocellulosic residues from commercial furfural production and corn kernels using different nutrient media. Biotechnology for Biofuels. (2011) 4:22. Tsoutsos, T., Bethanis, D. Optimization of the Dilute Acid Hydrolyzator for Cellulose-to-Bioethanol Saccharification. Energies. (2011). 4:1601-1623 Velmurugan, R., Muthukumar, K. Utilization of sugarcane bagasse for bioethanol production: Sono-assisted acid hydrolysis approach. Bioresource Technology. (2011). 102:71197123
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Von Schenck, A., Axelsson, E., and Berglin, N. System study of ethanol production in a pulp mill converted to a biorefinery, in: STFI-Packforsk Report, 266 (2007). Wi, S.G., Chung, B.Y., Lee, Y.G., Yang, D.J., Bae, H.-J. Enhanced enzymatic hydrolysis of rapeseed straw by popping pretreatment for bioethanol production. Bioresource Technology. (2011). 102: 57885793
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3.4.- Nuevas empresas u otros socios. 1 An no se firma el contrato con Tecsinox, empresa que disea y construye equipos con certificacin en acero inoxidable. Es 95% segura su incorporacin al proyecto, junto con aportar con ingeniera y construccin de los equipos de la planta piloto.
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3.5.- Resultados esperados. Desde el ltimo informe no hay cambios en este aspecto. Patente. Se ha avanzado con la inscripcin de una patente de invencin, cuya fecha de entrega de resultado est programada para el 30 de noviembre del 2012. La redaccin de patente est lista. Metodologa de seleccin de clones. Se ha obtenido una metodologa robusta para seleccionar material lignocelulsico para bioetanol. Este resultado es un plus para el proyecto ya que no estaba compretida.
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A.2 INFORME ANLISIS DE LAS VARIABLES QUE AFECTAN LA PRODUCCIN DE AZCAR EN LA HIDRLISIS ENZIMTICA
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1. EVALUACION DEL INFORME CyT (Esta seccin ser completada slo por el Comit de Area de FONDEF o por Evaluadores Designados para tal efecto, por favor no incluya nada aqu) Nombre Evaluador(a): Fecha de Revisin : 1-. Comentarios al Informe y Recomendaciones:
2.- Sugerencias de cambio de estado del proyecto (Marque con una X donde Corresponda): Normal Alerta Firma del (de la) Evaluador(a):
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