Leccin 10

REACCIONES ANTGENO ANTICUERPO

APLICACIONES AL DIAGNSTICO DE LAS ENFERMEDADES INFECCIOSAS.

REACCIONES DE INMUNOPRECIPITACION

CARACTERISTICAS: * Ag solubles * Ac de clase IgG * Reaccin poco sensible * Reaccin muy especfica * Intervienen Ac policlonales frente a Ag polivalentes

REACCIONES DE INMUNOPRECIPITACION

MODALIDADES:
* INMUNOPRECIPITACION SIMPLE EN TUBO * INMUNODIFUSION O INMUNOPRECIPITACION EN MEDIO SOLIDO - Inmunodifusion simple: En tubo (Oudin) En placa o radial (Mancini) - Inmunodifusin doble en placa (Ouchterlony) - Inmunoelectroforesis (Grabar y Williams) - Contrainmunoelectroforesis - Inmunoelectroforesis en "cohete" (Rocket y Laurel) - Inmunoelectroforesis bidimensional

Ag Suero pac.

Ag Suero pac.

Diagnstico serolgico de las infecciones fngicas.

Contrainmunoelectroforesis frente Ag somtico Candida albicans.

Ag hidatdico

Suero paciente

Diagnstico serolgico hidatidosis.

Inmunoelectroforesis frente a Ag hidatdico.

REACCIONES DE AGLUTINACION

CARACTERISTICAS: * Ag particulados generalmente poliantignicos * Ac de clase IgM e IgG * Reaccin con Ag superficiales * Reaccin bastante sensible * Reaccin relativamente especfica (depende de comunidad Ag) - Reacciones cruzadas * Intervienen Ac policlonales frente a Ag polivalentes

REACCIONES DE AGLUTINACION
MODALIDADES: * AGLUTINACION DIRECTA - Cualitativa / Cuantitativa - En tubo / En porta * AGLUTINACION CRUZADA * AGLUTINACION PASIVA - Prueba de Coombs directa e indirecta. Ac no aglutinantes - Hemaglutinacin pasiva o indirecta - Pruebas de ltex, bentonita, carbn, etc - Pruebas de coaglutinacin

Dilucin

1/20

1/40 1/80 1/160 1/320 1/640 1/1280

Testigo

Pacientes
20/05/07 04/06/07 06/06/07 12/06/07 17/01/07 23/01/07 25/01/07 13/04/07

Diagnstico serolgico de tularemia.

Microaglutinacin de Francisella tularensis. Evolucin serolgica de dos pacientes

Pacientes A B C D E F G
Dilucin Testigo 1/20 1/40 1/80 1/160

K L

Diagnstico serolgico de hidatidosis.

Aglutinacin pasiva de hemates de cordero revestidos con Ag hidatdico.

1/320 1/640 1/1280 1/2560

REACCION DE FIJACION DEL COMPLEMENTO

REACCION POSITIVA Ag y Ac se corresponden se consume el complemento Hemolisina + hematies No lisis por no haber C

REACCION NEGATIVA Ag y Ac NO se corresponden NO se consume el C Hemolisina + hematies LISIS al unir el C no consumido

REACCIONES Ag-Ac
Inmunofluorescencia, enzimoinmunoensayo, radioinmunoensayo IF CONJUGADO DETECTOR SENSIBILIDAD ESPECIFICIDAD MODALIDADES
Fluorocromo Microscopio Fluorescencia

EIA
Enzima + sustrato Espectrofot. Colormetro Fluormetro

RIA
Radioisotopo (I125) Contador gamma

++ ++
Directa (Ag) Indirecta (Ac)

++++ +++++
(depende Ag) Directo (Ag muestras) Indirecto (Ac) Sandwich (Ag) Captura (Ac)

+++++ +++++
(depende Ag) Directo (Ag muestras) Indirecto (Ac) Sandwich (Ag) Captura (Ac

IF-EIA-RIA DIRECTO

EIA-RIA CAPTURA

IF-EIA-RIA INDIRECTO
1 INCUBACION

EIA RIA SANDWICH

2 INCUBACION

REVELADO (EIA)

 ANTGENOS RECOMBINANTES:
Concepto Caractersticas Utilidad en el diagnstico

ANTICUERPOS MONOCLONALES
Concepto Caractersticas Utilidad en el diagnstico

TECNICAS SEROLGICAS
UTILIDAD:
* Investigacin de anticuerpos - Contacto previo con un Ag (IgG, A, M, E) - Inmunidad protectora (IgG) - Diagnstico de enfermedad actual o reciente (IgM) * Investigacin de antgenos - Serotipado microbiano - Deteccin de Ag microbianos en productos patolgicos (Diagnstico directo) - Deteccin de productos microbianos en cultivos (Vgr cultivos vricos) (Diagnstico directo) - Investigacin bsica y en Biologa Molecular - Medicina Forense - Alimentacin
etc.