UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud Licenciatura en Qumica Farmacutica Biolgica Laboratorio G-304 PRCTICA No.

1 SECCION 1: SECCION 2: Planeacin: Introduccin al curso, aspectos de seguridad y manejo de equipos. BPL I- Determinacin de punto de fusin. II- Recristalizacin. Fecha: __________________________

OBJETIVO GENERAL I. Conocer y aplicar las normas de seguridad y proteccin en el laboratorio. DETERMINACIN DE PUNTO DE FUSIN

OBJETIVOS Realizar la calibracin del termmetro del aparato Fisher-Johns. Determinar los puntos de fusin de sustancias desconocidas, empleando el aparato de FisherJohns. Conocer la utilidad del punto de fusin como criterio de identidad y pureza.

INFORMACIN El punto de fusin de un compuesto se define como el cambio de estado de agregacin de slido a lquido. El punto de fusin normalmente es un intervalo corto de temperatura. Por esta razn se debe de reportar como tal, por ejemplo el cido succnico posee un punto de fusin de 184-186 C. En general, los puntos de fusin se dan por dos razones: a) Determinacin de la pureza: Si se toma el punto de fusin de un compuesto y comienza a fundir a 95 C y no termina hasta 135 C, se puede sospechar que algo anda mal. Un punto de fusin con un rango superior a 2 C por lo general indica que el compuesto es impuro (como todas las reglas, hay sus excepciones como por ejemplo la benzoina 134-138 C). b) Identificacin de compuestos: Si tenemos un slido desconocido, debemos determinar su punto de fusin para saber de qu compuesto se trata, aunque muchos libros contienen tablas de punto de fusin y dichos compuestos deben tener un punto de fusin particular. Si el punto de fusin de nuestro compuesto desconocido est dentro de 50 puntos de fusin de sustancias conocidas cul se elegira? Es un tanto difcil determinar qu compuesto es el nuestro slo con el punto de fusin, por ello se necesitaran otras herramientas para determinar nuestro compuesto.

Sin embargo, el punto de fusin mixto o punto de fusin de una mezcla es una tcnica importante ya que si dos compuestos orgnicos puros son idnticos, se puede determinar el punto de fusin de una mezcla de ellos, si se observa que: La muestra funde a una temperatura ms baja y con un amplio rango, entonces estos compuestos son diferentes. La muestra funde a la misma temperatura y su rango casi no vara, entonces existe una gran probabilidad de que se trate del mismo compuesto. Algunas mezclas pueden no presentar la disminucin del punto de fusin o disminuir muy poco la temperatura de fusin debido a la formacin de una mezcla eutctica.

Debido a la gran sensibilidad que presenta el punto de fusin ante las impurezas es muy usado como criterio de pureza de un compuesto slido. ANTECEDENTES 1) Qu es punto de fusin? 2) Factores que determinan el punto de fusin. 3) Puntos de fusin de sustancias puras e impuras. 4) Mezclas eutcticas. 5) Punto de fusin de mezclas o mixto. 6) Mtodos y equipos para determinar el punto de fusin. Por ejemplo Tubo de Thiele, Fisher-Johns, Thomas-Hoover, Bchi, etc. 7) Tcnicas de calibracin de un termmetro. DESARROLLO EXPERIMENTAL MATERIAL MATERIAL 1 Termmetro (0 -300 C) Cubreobjetos MONTAJES A REALIZAR Determinacin de p.f. con instrumento Fisher

1 Vidrio de reloj 1 Agitador vidrio 1 Esptula

SUSTANCIAS Y REACTIVOS Se utilizarn sustancias slidas cuyos puntos de fusin estn comprendidos dentro de la escala del termmetro. Acetona-metanol (1:1) para lavar los cubreobjetos. PROCEDIMIENTO I.1. CALIBRACIN DEL APARATO DE FISHER-JOHNS

Se proporcionan cuatro sustancias estndar de punto de fusin conocido, para que se determine su punto de fusin en el aparato de Fisher-Johns. Para tener mejor exactitud de la calibracin del aparato y con base en el punto de fusin conocido de cada estndar, se calcula la velocidad ptima de calentamiento que debe aplicar en el restato del Fisher-Johns, a travs de la frmula: = p. f. 3 0.8

La calibracin se comienza con el estndar de menor punto de fusin, y se contina de esta forma hasta terminar dicha calibracin. Los resultados se anotan en la siguiente tabla:
Tabla 1 Puntos de fusin de los estndares usados en la calibracin.

Nm 1 2 3 4

Sustancia estndar

p.f. terico (C)

p.f. exp (C)

Se traza una grfica de calibracin del termmetro del aparato Fisher-Johns (Figura 1), colocando en las abscisas los puntos de fusin tericos conocidos y en las ordenadas los puntos de fusin obtenidos experimentalmente. Esta grfica se utiliza para corregir los puntos de fusin experimentales, localizando primero en las ordenadas el valor experimental y extrapolando hacia las abscisas para encontrar el punto de fusin corregido.
4 300

p.f. teorico (C)

D
3

C
2

A
1

p.f. exp (C)

300 Z

Figura 1 Grfica para la calibracin del termmetro del aparato de Fisher-Johns.

I.2. PROBLEMA Y PUNTO DE FUSIN MIXTO a) PUNTO DE FUSIN DE UNA SUSTANCIA DESCONOCIDA O IMPURA A partir de las sustancias recristalizadas en la Seccin 2 de la prctica. Para cada muestra se realizan dos determinaciones. Se colocan las tres muestras slidas con la mnima cantidad de cada una de ellas en un cubreobjetos (Figura 2) y se cubren con otro de ellos. La primera determinacin permite conocer el punto de fusin aproximado, que se conoce como punto de fusin estimado, por lo cual, el restato del aparato de Fisher-Johns se debe colocar a una velocidad de calentamiento de 50, que es una velocidad de calentamiento intermedia.

Figura 2 Determinacin preliminar a una velocidad de calentamiento de 50.

La segunda determinacin permitir conocer el punto de fusin ms exactamente, la muestra se coloca individualmente en el cubreobjetos a la velocidad de calentamiento ptima, que para este caso est dada por la frmula: = p. f. 3 0.8

Usando la grfica de calibracin se corrigen los puntos de fusin obtenidos en esta segunda determinacin y se anotan en la siguiente tabla (recordando anotar los dos valores, de inicio y de trmino).
Tabla 2 Punto de fusin de las sustancias problema

Sustancia p.f. estimado (C) a una V=50 experimental (C) a la Vptima corregido (C)con ayuda de la grfica

Una vez obtenido el punto de fusin de las muestras, se deben realizar determinaciones de punto de fusin mixto con aquellas que pudieran ser iguales para confirmar su identidad.

b) PUNTO DE FUSIN MIXTO Con las sustancias que pueden ser iguales se prepara una pequea mezcla en proporcin 1:1, se homogeniza en el vidrio de reloj y se coloca en el cubreobjetos. De igual forma se prepara una mezcla en una pequea porcin de las muestras que son diferentes en proporcin 1:1 se homogeniza y se coloca en el mismo cubreobjetos, como se indica en la Figura 3. Es muy importante anotar los dos valores del intervalo en cada punto de fusin, puesto que la informacin que proporciona este intervalo es muy importante.

Figura 3 Punto de fusin mixto.

CUESTIONARIO PREVIO 1. Cules son las normas de seguridad aplicables en sta prctica? 2. Explique brevemente el funcionamiento general del aparato Fisher-Jhons

3. Cul es el p.f. terico de las sustancias que se emplearn en la prctica: cido benzoico y Acetanilida. Dibuje las estructuras de cada una. 4. Investigue la toxicidad de las sustancias utilizadas y cules de ellas pueden se pueden desechar sin peligro. Cul es la disposicin adecuada de los residuos de la prctica? CUESTIONARIO REPORTE FINAL 1. Qu es punto de fusin? 2. De la siguiente tabla de compuestos, explique por qu razn son puros o impuros? Compuesto pf Observado (C) pf Reportado (C) cido acetilsaliclico 125-134 134-136 cido 2-(4-clorobenzoil)benzoico 88-99 149-150 Ferroceno 171-173 172-174 cido 4-(metiltio)benzoico 192-195 192-196 4-Aminobenzoato de etilo 87-89 88-90 N-(4-Hidroxifenil)etanamida 158-169 168-172 cido (R,S)-2-(4- isobutilfenil)propinico 60-69 77-78 3. Por qu debe calibrarse el termmetro del aparato de Fisher-Johns? 4. Explique si la grfica de calibracin de un aparato de Fisher-Johns puede utilizarse para trabajar en otros aparatos similares, s?, no?, por qu? 5. Qu utilidad tiene al grfica de calibracin? 6. Por qu fue necesario realizar la mezcla de sus muestras problema? 7. Cules son los parmetros estructurales que influyen en el valor de un punto de fusin? 8. Por qu no deben eliminarse por el drenaje las mezclas de las sustancias utilizadas como estndar? II. RECRISTALIZACIONES DE SLIDOS EN MEDIO ACUOSO Y DISOLVENTES ORGNICOS

OBJETIVOS Conocer las caractersticas que debe tener un disolvente ideal para ser utilizado en una cristalizacin. Saber cundo se debe utilizar un adsorbente como el carbn activado. Observar la utilidad de la solubilidad de un compuesto en diferentes disolventes y seleccionar la mejor opcin para una cristalizacin. Realizar la purificacin de un slido mediante una cristalizacin simple.

INFORMACIN Los productos slidos que se obtienen en una reaccin suelen estar acompaados de impurezas que hay que eliminar para poder disponer del producto deseado en el mayor grado de pureza posible. El mtodo ms adecuado para la eliminacin de las impurezas que contaminan un slido es por cristalizaciones sucesivas bien en un disolvente puro, o bien en una mezcla de disolventes. Al procedimiento se le da el nombre genrico de recristalizacin. El procedimiento consiste en: 1. Disolucin del producto cristalino impuro en un disolvente adecuado a la temperatura de ebullicin o en sus proximidades.

2. Filtrar la solucin obtenida en caliente para eliminar las partculas insolubles como el polvo u otras impurezas. 3. Dejar enfriar la disolucin lentamente hasta que la cristalizacin del producto purificado sea lo ms completa posible. 4. Separar los cristales obtenidos del lquido sobrenadante (aguas madres) por filtracin. 5. Secado del slido obtenido. 6. Comprobacin de la pureza del slido obtenido a travs de sus constantes fsicas (punto de fusin y datos espectroscpicos). El punto crucial en el proceso de cristalizacin es la eleccin adecuada del disolvente que debe cumplir las siguientes propiedades: Alto poder de disolucin de la sustancia que se va a purificar a elevadas temperaturas. Baja capacidad de disolucin de las impurezas que contaminan al producto en cualquier intervalo de temperatura. Generar buenos cristales del producto que se va a purificar. Fcil de eliminar.

Un factor muy importante a tener en cuenta es si el disolvente es acuoso u orgnico. En caso de usar disolventes orgnicos es necesario siempre calentar la mezcla con el montaje de reflujo. Si no se hace de esta manera se generan vapores inflamables que pasan a la atmsfera y que en contacto con llamas o focos de calor conducen a un serio riesgo de incendios y explosiones. ANTECEDENTES 1) Disolvente ideal: a) Solubilidad como fenmeno fsico. b) Relacin entre solubilidad y estructura molecular. c) Disolventes orgnicos. d) Propiedades fsicas de los disolventes. e) Solubilidad, polaridad y orden de polaridad de los disolventes. f) Solvatacin e hidratacin. 2) Cristalizacin: a) Fundamentos de cristalizacin. b) Seleccin de disolvente ideal. c) Secuencia para realizar una cristalizacin simple con o sin carbn activado. d) Mtodos para inducir una cristalizacin. e) Tipos de adsorbentes y fenmeno de adsorcin.

f) Soluciones saturadas y sobresaturadas. g) Diversos tipos de filtracin. h) Secado de productos cristalizados. DESARROLLO EXPERIMENTAL MATERIAL 1 Vidrio de reloj 1 Agitador de vidrio 1 Esptula 1 Embudo Bchner 1 Embudo cnico 1 Pipeta 10 mL 2 Vaso de precipitados Papel filtro 1 Probeta de 25 mL 1 Pinza metlica 1 Matraz Kitasato con manguera 1 Parrilla con agitacin magntica SUSTANCIAS Y REACTIVOS 1 g cido benzoico Acetanilida Muestra problema Ncleos de ebullicin Agua destilada Metanol Etanol PROCEDIMIENTO II.1. CRISTALIZACIN SIMPLE La muestra a ser cristalizada se pesa y se coloca en un matraz Erlenmeyer, es importante agregar cuerpos de ebullicin. En otro matraz Erlenmeyer se calienta el disolvente ideal con cuerpos de ebullicin y se calienta (aproximadamente 30 mL). Se agrega poco a poco el disolvente ideal caliente al matraz con la muestra agitando constantemente hasta obtener una disolucin total de la muestra (entre 15-20 mL de disolvente ideal) y si es necesario se continua agregando disolvente caliente hasta la disolucin completa. Si la muestra contiene impurezas coloridas o resinosas, se retira el matraz de la fuente de calentamiento, se deja enfriar un poco (NUNCA SE AGREGA EL CARBN ACTIVADO CON LA SOLUCIN HIRVIENDO O MUY CALIENTE!) y se agrega la cantidad necesaria de carbn activado, se adicionan cuerpos de ebullicin y se calienta nuevamente a ebullicin con agitacin constante. El matraz se calienta por 3 minutos, cuidando de mantener constante el volumen de disolvente. Para eliminar las impurezas insolubles y el carbn activado (si se us), entonces, se filtra en caliente (filtracin rpida). El embudo de vidrio y el matraz en el que se recibir el filtrado se deben calentar previamente (algunas ocasiones, el filtrado queda con restos de carbn activado como polvo muy fino, en este caso, es necesario calentar nuevamente la solucin y se filtra con una capa de celita). Este paso debe hacerse rpidamente, para evitar que el producto cristalice en el embudo de vidrio. Para filtrar en caliente, se dobla el papel filtro como se observa en la Figura 4. MONTAJES A REALIZAR Determinacin de p.f. con instrumento Fisher Filtracin a gravedad Filtracin por succin

Figura 4 Doblado de papel filtro para filtracin rpida.

El embudo se coloca sobre el matraz dejando un hueco entre ambos para que respire (Figura 5). El papel filtro se humedece con un poco con el disolvente ideal caliente y se filtra rpidamente. El matraz y el papel filtro se enjuagan con un poco del disolvente caliente (2 a 3 mL). Se deja enfriar el filtrado a temperatura ambiente y luego en un bao de hielo-agua para que se formen los cristales, si esto no ocurre, se debe inducir la cristalizacin.

Figura 5 Maneras para crear un espacio entre el embudo y el matraz para que respire el

Para inducir la cristalizacin: Enfriando la solucin. Se deja que la solucin se enfre un poco y posteriormente se coloca despus en un bao de hielo-agua. Raspado de paredes. Se talla con una esptula o una varilla de vidrio las paredes del matraz (en la interface solucin aire) y enfriando el matraz en un bao de hielo-agua. Evaporando el exceso de disolvente. Si no cristaliza, posiblemente se deba a que hay un exceso de disolvente; en tal caso, se agregan cuerpos de ebullicin y se evapora parte del disolvente. Nuevamente se retira de la fuente de calentamiento y se tallan las paredes con una esptula. Sembrado de cristales. Algunas veces, es necesario adicionar a la solucin algunos cristales de la sustancia pura, y repetir el procedimiento de tallar y enfriar. Una vez formados los cristales, se separan de las aguas madres por filtracin al vaco. Para esto, se sujeta el matraz Kitasato con unas pinzas (para evitar que se caiga) y se conecta a la llave de vaco con una manguera. Dentro del embudo Bchner se coloca un crculo de papel filtro, cuidando que ajuste

perfectamente y se coloca sobre el Kitasato con ayuda de un adaptador de hule. Se humedece el papel filtro con un poco del disolvente ideal fro, se abre la llave del vaco suavemente, slo a que se fije el papel y se vierte el contenido del matraz de cristalizacin (primero se agita un poco el matraz Erlenmeyer y se vierte la solucin de forma rpida para pasar la mayor cantidad de cristales). Para terminar de bajar los cristales, se puede utilizar una pequea cantidad del mismo disolvente ideal fro (mximo 3 mL), con ayuda de la esptula. Para secar los cristales, se deja que termine de filtrar la mayor parte del disolvente, una vez que deje de gotear, se cierra la llave del vaco y se retira el embudo Bchner; el lquido filtrado del Kitasato (aguas madre) se pasa a un matraz Erlenmeyer y se vuelve a colocar el embudo y esta vez se abre toda la llave del vaco, para permitir que los cristales se sequen, colocando el vidrio de reloj encima del embudo Bchner para que este proceso sea ms rpido. Cuando las aguas madre contienen an bastante material, se realiza una segunda cosecha, el filtrado se concentra por ebullicin, eliminando as el disolvente en exceso y volviendo a inducir la cristalizacin. Esta segunda cosecha generalmente es menos pura que la primera y no se deben mezclar, pero si se toma en cuenta para calcular el rendimiento. Se pesa el material obtenido y se le determina el punto de fusin. II.2. RECRISTALIZACIN DE CIDO BENZOICO EN AGUA: Pesar 1 g de cido benzoico, transferirlo a un vaso de precipitado. Aadir aproximadamente 20 ml de agua destilada y calentar la mezcla hasta ebullicin. Aadir poco a poco porciones de agua caliente, agitando hasta total disolucin. Quitar el erlenmeyer de la fuente de calor, filtrar en caliente con un filtro de pliegues y un embudo y permitir el enfriamiento del filtrado a temperatura ambiente durante un mnimo de 20 minutos. Separar los cristales obtenidos filtrando por succin. Secar el slido y pesar una vez seco. II.3. RECRISTALIZACIN DE ACETANILIDA EN AGUA Pesar 1 g de acetanilida, transferirla a un erlenmeyer. Aadir 20 ml de agua y calentar suavemente. Se observa la aparicin de un aceite en la solucin que termina de disolverse con la adicin de diversas porciones de agua caliente. Si se obtiene una solucin coloreada aadir una pequea porcin de carbn activo (aproximadamente 0.3 g). Filtrar en la solucin en caliente con un filtro de pliegues y un embudo cnico. Dejar enfriar la mezcla durante 30 minutos y separar los cristales filtrando por succin. Secar el slido y pesar. IMPORTANTE: Determinar los puntos de fusin antes y despus del proceso de recristalizacin. NOTA: Los equipos 1 y 5 realizarn la recristalizacin del cido benzoico sustituyendo el agua por 15 mL de Metanol y lavando el filtrado (cristales) con una mezcla 1:1 de metanol:agua. Los equipos 1, 2 y 3 entregarn una parte de su producto recristalizado a la profesora para preparar a partir de all las muestras problema.

CUESTIONARIO PREVIO 1. Cules son las normas de seguridad aplicables en sta prctica? 2. Explique brevemente el procedimiento para obtener cristales de una sustancia utilizando agua o un disolvente orgnico. 3. Cul es el objeto de determinar el p.f. antes y despus de cristalizar un slido? 4. Investigue la toxicidad de las sustancias y disolventes utilizados y cules de ellas pueden se pueden desechar sin peligro. Cul es la disposicin adecuada de los residuos de la prctica? CUESTIONARIO REPORTE FINAL 1. Cundo un disolvente es ideal para efectuar una cristalizacin? 2. Un slido soluble en fro, Podr rescristalizarse del disolvente en que se encuentra? Fundamente su respuesta. 3. Qu cualidades debe cumplir un disolvente ideal para ser utilizado en una cristalizacin? 4. Para qu se adicionan los cuerpos de ebullicin? 5. Por qu razn deben de calentarse el embudo de vidrio y el matraz donde se recibe el filtrado? 6. Qu funcin cumple el carbn activado en una cristalizacin? 7. El yoduro de etilo (CH3CH2I) es relativamente polar, pero al contrario de lo que pasa con el alcohol etlico (CH3CH2OH), es inmiscible en agua. Explique sta diferencia de solubilidad. Bibliografa 1. Mayo D., Dike R., Forbes D., Microscale Organic Laboratory: with Multistep and Multiscale Syntheses, 5 ed., USA, Wiley, 2011. 2. Brewster R. Q., van der Wert C. A., McEwen W. E., Curso Prctico de Qumica Orgnica, 2 ed., Madrid, Alhambra, 1979. 3. Williamson K., Masters K., Macroscale and Microscale Organic Experiments, 6 ed., USA, Brooks and Cole, 2010. 4. Fessenden R. J., Fessenden J. S., Organic Laboratory Techniques, 3 ed., Brooks and Cole, USA, 2001. 5. Gilbert J. C., Martin S. F., Experimental Organic Chemistry A Miniscale and Microscale, 5 ed., Brooks and Cole, USA, 2010. 6. Vogel A. I., Practical Organic Chemistry, 5 ed., Longman Scientific & Technical, London, 1989. 7. Qumica Orgnica. Experimentos con un enfoque biolgico. Jos G. vila Zrraga, et. al., UNAM, Mxico, 2009.