PRACTICA NO.

5 IDENTIFICACIN DE METABOLITOS SECUNDARIOS: ALCALOIDES

OBJETIVO Capacitar al estudiante de Farmacognosia en la identificacin de drogas que contienen alcaloides MARCO TERICO El reconocimiento de metabolitos secundarios se realiza por medio de pruebas fitoqumicas preliminares, las cuales son una prueba qumica de caracterizacin consistente en una reaccin qumica que produce alteracin rpida en la estructura molecular de un compuesto, por ejemplo, la modificacin de un grupo funcional, la apertura de un sistema anular, la formacin de un aducto o un complejo, lo cual da por resultado una manifestacin sensible como el cambio de un color, la formacin de un precipitado o el desprendimiento de un gas, dndonos indicios de la presencia o ausencia de un metabolito secundario en particular. Los alcaloides son sustancias bsicas que contienen nitrgeno en un anillo heterocclico, son derivados de aminocidos, presentan distribucin taxonmica limitada y se encuentran en plantas superiores como sales de un cido orgnico. Atendiendo a su solubilidad, propiedad empleada para extraerlos y purificarlos, la base del alcaloide es soluble en solventes orgnicos y pueden formar sales solubles en solventes polares cuando se encuentra en cidos minerales diluidos. METODOLOGA Ensayos microqumicos: Tome pequeas cantidades (mg) de cada uno de los siguientes alcaloides purificados: cinconina, cafena y brucina, previa disolucin en agua o en su defecto en acido (adiciones a cada una gotas de cido clorhdrico o sulfrico segn su capacidad de disolucin) a continuacin adicione una o dos gotas de los siguientes reactivos: Mayer, Wagner, Soneschenin, acido tnicos, pcrico, Draguendorff, Marme y Reinekato de amonio. Observe en menor y mayor aumento en el microscopio y haga anotaciones a manera de cuadro. Haga un montaje microscpico utilizando Hidrato de clorar, como medio clarificante con las drogas. Observe con menor y mayor aumento, haga anotaciones de sus caracteres botnicos. Reconocimiento de alcaloides: Sobre el extracto de la planta seleccionada, el estudiante realizara pruebas qumicas de coloracin y/o precipitacin, para determinar la presencia de alcaloides. a. Los alcaloides son bases nitrogenadas, las cuales pueden convertirse en sus respectivas sales mediante la adicin de un cido diluido y formar precipitados al adicionar los llamados reactivos para alcaloides. En esta prctica utilizaremos los reactivos de: Mayer y Wagner, haciendo la aclaracin de que existen otros reactivos para realizar esta prueba.

Tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco (o seco en polvo), macerar en un mortero, pasar a un beaker o erlenmeyer, adicionar un volumen suficiente de cido clorhdrico al 5% (25 mL) que cubra la muestra; calentar al bao mara durante 10 minutos, enfriar y filtrar. Colocar en dos tubos de ensayo aproximadamente 0.5 mL del filtrado cido, agregar a cada uno de los tubos previamente rotulados con el respectivo nombre del reactivo, 2 gotas de los reactivos de: Wagner y Mayer. Si se observa turbidez o precipitado en los dos tubos se considera que la muestra contiene alcaloides (Prueba presuntiva). En dos tubos colocar 0.5 mL del filtrado y adicionar 2 gotas del reactivo de Dragendorff y Bouchardt, ser prueba positiva al observar la formacin de un precipitado rojo naranja y marrn, respectivamente. b. Tomar aproximadamente 5 g del material vegetal fresco (o seco en polvo), macerar en un mortero, pasar a un beaker o erlenmeyer, adicionar un volumen suficiente de cido clorhdrico al 5% que cubra la muestra; calentar al bao mara durante 10 minutos, enfriar y filtrar. Al filtrado aada suficiente NH4OH al 28% hasta alcalinidad evidente, solucin NAOH al 1% hasta alcanzar PH 8-9. Transferir la solucin alcalina a un embudo de separacin pequeo y extraer dos veces con porciones de cloroformo de 5 mL cada una. Combinar ambos extractos clorofrmicos; evaporar el cloroformo al bao de mara bajo campana. Al residuo aadir 2.5 mL de HCL 2N y agitar al bao de mara por unos minutos, filtre y divida el contenido en dos tubos, permitiendo que se enfren a temperatura ambiente. A cada tubo aada gotas e SR de Mayer y Wagner. Si no hay precipitados, floculacin o turbidez en cualquiera de los tubos, se asume la ausencia de alcaloides. PREGUNTAS Qu otros reactivos para la identificaciones de alcaloides estn disponibles? Cul es la importancia de los alcaloides en medicina? Cul es la composicin qumica de los reactivos utilizados para la identificacin de alcaloides? Explique cada una de los resultados obtenidos y reactivos utilizados en las pruebas de identificacin de alcaloides en el presente laboratorio? BIBLIOGRAFA Dominguez X.A. Mtodos de investigacin fitoqumica. Ed.Limusa. Mxico. 1.973. Trease and Evans.Farmacognosia. 13 Edicin. Bailliere Tindall.Mexico.1989. Manual de Prcticas de Laboratorio de Farmacognosia. 2009. Luz Mariela Sorza Z. / Gloria Amparo Valencia P