CONOCIMIENTO DE TCNICAS ANALTICAS PARTE I: FUNDAMENTOS DE

ESPECTROFOTOMETRA.

I. OBJETIVO GENERAL Conocer y aplicar los fundamentos de la

ESPECTROFOTOMETRA
para la determinacin de concentraciones en soluciones.
II. OBJETIVOS PARTICULARES

a. Conocer los fundamentos de la espectrofotometra y las variables

involucradas en la ley de Lambert-Beer-Bourger. b. Seleccionar la longitud de onda apropiada para DETERMINACIN de absorbancia. c. Construir una curva patrn de la solucin de YODO-YODURADO (serie tipo) a diferentes concentraciones .

III. PROBLEMA A partir del espectro de absorcin de una solucin acuosa de yodo-yoduro de potasio seleccionar la longitud de onda apropiada para determinar el coeficiente de absortividad molar de soluciones acuosas de yodo por medio de una curva patrn.

I2

I0.2

I32X10-3

0.002

Introduccin

Espectro

Espectro de radiacin electromagntica

Foto

Luz visible

Metra

Medicin

ESPECTRO ELECTROMAGNTICO

Tipos de Espectrofotometra
La espectrofotometra de Absorcin de infrarrojos ABSORCIN DE UV-VISIBLE Resonancia magntica nuclear (RMN) Fluorescencia Emisin atmica Absorcin atmica de masas Fluorescencia de Rayos X

Espectroscopia UV y Visible
Estudia el fenmeno de adsorcin de la radiacin UV-Visible de molculas orgnicas e inorgnicas. La regin UV del espectro electromagntico se encuentra entre 0.6 y 380 nm.

UV lejano 0.6 190 nm

UV cercano 190 380 nm

Visible 380 780 nm

UV cercano o de cuarzo. Regin en la que el aire y el cuarzo son transparentes) UV lejano o de vaco . intervalo 0.6 a 190 nm. El UV lejano requiere tcnicas especiales, ya que el aire que se encuentra en el trayecto ptico absorbe intensamente en esta regin, no es til desde un punto de vista prctico. La regin visible, a la que es sensible el ojo humano, se localiza entre los 380 y 780 nm.

La absorcin de la radiacin UV o Visible por molculas , generalmente se produce por la excitacin de los electrones de enlace. La longitud de onda de los mximos de absorcin se puede relacionar con los enlaces de las especies absorbentes.

Espectrofotometra
Es el mtodo de anlisis ptico ms usado en el rea de investigacin. Es la medida de la cantidad de energa radiante absorbida por las molculas de una muestra en funcin de las longitudes de onda especficas.

Los mtodos espectroscpicos se basan en la capacidad de las sustancias de ABSORBER o EMITIR radiacin electromagntica, y tales mtodos se pueden emplear para determinar la concentracin de un reactivo o producto durante una reaccin.

Pantalla de lecturas Compartimento de celda Selector de medida

Encendido y ajuste Del cero de T

Ajuste de cero de Absorbancia

El aparato detecta la cantidad de luz transmitida y/o absorbida a travs de la solucin en la celda y la compara con la que se transmite o absorbe a travs de una solucin de referencia o blanco.

A diferencia de la transmitancia, P la absorbancia de una solucin T = Transmitancia aumentaP a medida que aumenta P0 P la atenuacin del haz de luz
0

Qu establece la ley de Lambert-Beer-Bourger?

P A = log P0

P A = log = bc P0

P0 A = log T = log P

P A = log = bc A = bc P0
.- Es la cte. de proporcionalidad llamada coeficiente de absorcin molar, de absortividad o coeficiente de extincin. b.- Es el paso ptico, anchura de la celda que contiene la muestra (cm). c.- Es la concentracin de la especie de la cual se esta midiendo la absorbancia (M). La ecuacin mencionada es el fundamento de la espectrofotometra, y se cumple para una radiacin monocromtica que atraviesa una disolucin diluida ( 0.01M), cuando la especie absorbente no participa en un equilibrio que dependa de su concentracin.

CALIBRACIN DEL ESPECTROFOTMETRO Y BARRIDO DEL ESPECTRO DE ABSORCIN

1.- Encender el espectrofotmetro. 2.- Esperar 15 minutos. 3.- Calibracin: oprimir la tecla MODE, hasta que la luz roja se encuentre en A (absorbancia). 4.- Seleccionar la longitud de onda girando la perilla. 5.- Introducir la celda con el blanco (con un volumen por arriba de la mitad; nunca llena) en la porta-celda, oprime la tecla (0A/100%T) y esperar a que se ponga en ceros la absorbancia. 6.- Tomar la lectura de absorbancia de la solucin propuesta a una longitud de onda baja ( nm). utilizar como blanco agua destilada. 7.- Repetir el procedimiento desde el punto 4 dando incrementos regulares a la longitud de onda. Registrar los datos en la tabla 1

1 ERA PARTE

A5. ORGANIZACIN DE DATOS,

Temperatura:
Registrar los datos experimentales del espectro de absorcin de yodo (2*10-4M) en la tabla 1. Tabla 1. Absorbancia de la solucin de I2 a diferentes longitudes de onda.

EVENTO

(nm)

ABSORBANCIA

EVENTO

(nm)

ABSORBANCIA

1 2 3 4 5 6 7 8

380 390 400 410 420 430 440 450

9 10 11 12 13 14

460 470 480 490 500

Espectro Yodo 0.0002M

1.8 1.6 1.4 1.2 Abs 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 300 320 340 360 380 400 420 440 460 480 500 520

l (nm)

Seleccionar una de esta zona

2 DA PARTE

Curva Patrn
1.- Preparar soluciones de distinta concentracin a partir de la solucin de referencia I2 KI (0.0002M - 0.2M) (Serie tipo). 2.- Seleccionar una longitud de onda adecuada para hacer las lecturas de Absorbancia para las soluciones de la serie tipo. 3.- Introducir la celda con el blanco (agua destilada), con un volumen por arriba de la mitad; nunca llena, en la porta-celda, oprimir la tecla (0A/100%T) y esperar a que se ponga en ceros la absorbancia. 4.- Tomar la lectura de absorbancia propuestas para la serie tipo, a la seleccionada ( nm). de las soluciones longitud de onda

5.- Registrar las lecturas de absorbancia y concentracin de la serie tipo en la tabla 2

TABLA 2. Absorbancia a diferentes concentraciones molares de I2

Mezcla I2 (0.002 M) (ml) 1 2 3 4 5 6 5 4 3 2 4 5 6 7 8 H2O (ml)

I2 mol/L

Abs

CIV1=C2V2

TABLA 2. Absorbancia a diferentes concentraciones molares de I2

Mezcl a 1 2 3 4 5 I2 (0.002 M) (ml) 10 8 6 4 2 0 2 4 6 8 0.002 0.0016 0.0012 0.0008 0.00045 1.61 1.290 0.950 0.625 0.311 H2O (ml) I2 mol/L Abs

Curva Patrn de soln de yodo ( Abs/ nm) 1.8 1.6 1.4 1.2 Abs 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 0.0005 0.001 0.0015 0.002 0.0025 I2 (mol/L)

y = mx + b

A = bc