Tema 6 (II). La revolucin gentica.

1. El ADN.
Es la molcula que contiene la informacin gentica y se encuentra encerrada en el ncleo. Est formado por nucletidos que se unen entre s a modo de eslabones en una cadena. Cada nucletido est formado por: o Azcar de cinco carbonos. Desoxirribosa. o cido fosfrico. o Base nitrogenada. Adenina. A. Guanina. G. Citosina. C. Timina. T. Dibujo. Estructura de un nucletido.

La cadena se forma por una sucesin de azcar y fosfatos quedando las bases nitrogenadas situadas lateralmente. Dibujo. Representacin de una cadena de ADN.

En 1953 Watson y Crick publican su modelo para explicar la estructura de esta molcula. Tal modelo fue llamado doble hlice. El ADN est formado por dos cadenas que se mantienen unidas debido a la complementariedad entre las bases y gracias a unos enlaces llamados puentes de hidrgeno. A y T se unen mediante dos puentes de hidrgeno. G y C mediante tres. Las cadenas se disponen helicoidalmente quedando los pares complementarios hacia el interior de la espiral. Dibujo. Estructura del ADN.

Algunos datos relevantes de la molcula son: o o o o Su dimetro es de 2 nm. Cada vuelta de hlice ocupa 3,4 nm. Los pares de nucletidos estn separados por 0,34 nm. Se disponen 10 pares por cada vuelta.

Las cadenas son antiparalelas. Si una comienza por el extremo 5 (con fosfato) la otra lo har por el 3 (con OH). 5 ACGTTAC 3 3 TGCAATG 5

Esta estructura permite explicar tres caractersticas: o Secuenciacin. La molcula contiene una secuencia de nucletidos que es distinta segn la informacin gentica codificada. o Replicacin. La molcula puede duplicarse. Las cadenas se van separando y cada una de ellas sirve de molde para formar una molcula completa creando la cadena complementaria. o Transcripcin. Un fragmento de ADN puede ser copiado hasta ARNm para llevar parte de la informacin fuera del ncleo. Dibujo. Representar las tres propiedades.

2. El ARN.
Molcula formada por una sola cadena, es por tanto unicatenaria. Sus nucletidos se forman de: o Ribosa. o cido fosfrico. o Base nitrogenada. A, G, C, y U (no hay timina). Existen tres tipos y todos intervienen en la sntesis de protenas. o ARN mensajero (ARN m). Copia la informacin de un fragmento de ADN para trasladarla del ncleo al citoplasma. o ARN ribosmico (ARN r). Forma la estructura bsica del ribosoma. o ARN transferente (ARN t). Traslada las aminocidos hasta el lugar de la sntesis proteica. Dibujo. Los distintos ARN.

Ejercicios: Cuestiones 1-5.

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3. La expresin de la informacin gentica.

Tal informacin est codificada en el ADN y estructurada en genes. Cada gen contiene informacin para sintetizar una protena. Cuando sta lleva a cabo su funcin el organismo manifiesta o expresa un determinado carcter. Veamos algunos ejemplos: o La insulina normal permite la entrada de glucosa en las clulas para ser metabolizada. Si la insulina es defectuosa no funciona bien y el individuo que la posee es diabtico. o La melanina es el pigmento que da color a la piel y al pelo. Un individuo que no produzca melanina ser albino. Est claro que para tener pigmentacin debe fabricarse melanina. Las instrucciones para ello estn codificadas en el gen melanina que estar situado en un determinado cromosoma.

Dibujo. Relacin entre gen-protena e informacin-funcin. Las protenas son polmeros cuyas cadenas se forman de 20 monmeros distintos llamados aminocidos. Los mecanismos que explican cmo se expresa la informacin contenida en el ADN se resumen en el llamado dogma central de la biologa molecular que muestra como fluye del ADN a la protena con la intervencin de los tres tipos de ARN. El traslado de informacin o sntesis proteica ocurre en dos pasos:

1. Transcripcin.
o El gen que va a expresarse es copiado en ARNm y trasladado fuera del ncleo. o El ARNm se forma por complementariedad utilizando U en lugar de T. o La cadena que se copia es la que posee sentido 3--- 5 ya que el primer extremo de ARNm que se forma es el 5. o La enzima que lleva a cabo el proceso es la ARN polimerasa. o Una vez sintetizado el ARNm es modificado para hacer posible su salida del ncleo en un proceso llamado maduracin en el que:

Se eliminan unas secuencias llamadas intrones. Se le aade un GTP al extremo 5. Se incorpora un poli-A al extremo 3.

Dibujo. Representacin de la transcripcin y la maduracin.

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2. Traduccin.
o Es la formacin de una cadena de aas a partir de la secuencia de nucletidos del ARNm. o Proceso llevado a cabo por los ribosomas que leen el ARNm haciendo corresponder a cada triplete de nucletidos un aa. o Por qu un triplete? Si 1 nucletido codificara 1 aa slo tendramos 4 posibilidades. Si 2 nucletidos codificaran 1 aa slo podramos formar 16. Si 3 nucletidos codifican 1 aa tenemos 64 posibilidades con lo cual tenemos para los 20 y an nos sobra. El nmero de variaciones con repeticin se obtiene a partir de la frmula VRnm = nm donde n es el nmero de nucletidos, es decir 4, y m el nmero en qu los agrupamos. o La correspondencia entre tripletes y aas viene determinada por el cdigo gentico. o Tal cdigo posee dos caractersticas: Es universal y por tanto idntico para todos los organismos. Est degenerado pues existen aas codificados por ms de un triplete. o El inicio de la traduccin es el primer triplete AUG comenzando por el extremo 5 por lo que todas las protenas comienzan con el aa metionina (Met). o Tambin existen tripletes stop o final de mensaje que marcan el final de la sntesis proteica. Estos son: UAA, UAG y UGA.

o Cada triplete es llamado codn y se une a un ARNt cuyo anticodn es complementario. o As se aportan los distintos aas a la sntesis de una protena determinada. o El ribosoma acta acoplando entre s todas las molculas y manteniendo la cadena polipeptdica en formacin. o Al detectar un triplete de finalizacin las subunidades se separan y se libera la cadena proteica.

Ejercicios. 1) Representa con un dibujo la primera fase de la sntesis proteica en clulas eucariotas. 2) Investiga el nombra de los 20 aas proteicos a partir de las abreviaturas que aparecen en el cdigo gentico. Sigue el orden del mismo de izquierda a derecha y de arriba abajo. 3) Completa la siguiente tabla utilizando el cdigo gentico. __ __ __ T __ __ __ __ __ __ __ __ C A A __ __ __ ADN 5 ADN 3 ARNm Anticodn ARNt Aminocido 3 5

__ __ __ __ __ __ __ __ __ __ G U

__ __ U __ __ __ A U U

__ __ __ __ __ __ __ __ __ Met

__ __ __ __ __ __ __ __ __

4) Qu ARNm habr permitido formar el tetrapptido Met-Ala-Asp-Pro? Cuestiones 6-15.

4. Biotecnologa e ingeniera gentica.

La biotecnologa es la aplicacin de los descubrimientos realizados por la Biologa al campo de la industria, la sanidad, la alimentacin, la agricultura, la ganadera, etc. Su finalidad es: o Solucionar problemas de distintas medioambientales, etc. ). o Obtener productos de valor comercial. Distinguimos dos mbitos:

naturaleza

(sanitarios,

o Biotecnologa tradicional. Usa como herramientas productos de origen biolgico

como enzimas que aceleran ciertas reacciones qumicas. Utiliza microorganismos con fines industriales como levaduras para fabricar pan o bebidas alcohlicas o bacterias para obtener yogur o vinagre (fermentaciones).

o Biotecnologa actual. Basada en la manipulacin del ADN para obtener artificialmente organismos modificados genticamente (transgnicos, clnicos, etc.). Utiliza clulas y microorganismos modificados o sin alterar (bacterias, virus, clulas madres, etc.). La ingeniera gentica engloba el conjunto de tcnicas que permiten manipular el ADN. Otras tcnicas muy importantes para la biotecnologa actual son los cultivos celulares y la obtencin de anticuerpos monoclonales.

5. La clonacin.
Es la obtencin de elementos clnicos o clones. Tradicionalmente un clon es un conjunto de clulas obtenidas por la reproduccin mittica de una clula inicial. Todas son idnticas entre s e iguales al progenitor. Para la biologa molecular un clon es una copia genticamente exacta de una molcula, una clula, un tejido o un organismo. Clonar equivale pues a copiar genticamente. As clonar un gen es obtener muchas copias del mismo, clonar una clula es obtener un cultivo y clonar un organismo conseguir una copia idntica. La clonacin puede ser reproductiva si genera organismos idnticos o terapetica si produce molculas o clulas iguales con fines curativos. Potencialmente podemos realizar clonacin reproductiva en mamferos de dos formas: o Divisin del embrin. El cigoto y cualquiera de las clulas que se producen en los primeros das del desarrollo embrionario son clulas totipotentes pues pueden formar un individuo completo. Si en estos das el embrin se divide en dos grupos celulares se forman gemelos univitelinos. Si transferimos a diferentes teros varias de estas clulas totipotentes a partir de embriones obtenidos por

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fecundacin idnticos.

in

vitro

deberamos

obtener

individuos

o Transferencia nuclear. Eliminamos el ncleo de un vulo. Le introducimos el ncleo de una clula del individuo que queremos clonar. Hemos obtenido un cigoto potencial que desarrollamos hasta embrin en un medio de cultivo. Insertamos en un tero y obtendremos un individuo igual al que cedi el ncleo.

6. Las clulas madres.

Tambin llamadas clulas troncales. Se multiplican ilimitadamente y generan distintos tipos de clulas especializadas. Su divisin genera otra clula troncal y una que se especializa. Existen dos tipos: embrionarias y adultas.

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Embrionarias.
Se obtienen de la masa celular interna o blastocisto de embriones tempranos creados por fecundacin in vitro y que han sobrado tras el proceso de implantacin en el tero materno. Tambin pueden conseguirse de clulas germinales de fetos abortados. Estas clulas se mantienen indefinidamente en cultivos.

Pueden formar cada uno de los 200 tipos celulares. Son por tanto clulas pluripotentes.

Qu pueden hacer?

diferenciacin Clulas madre embrionarias

PLURIPOTENTES

Todos los tipos posibles de clulas especializadas

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Si las usamos para implantarlas y reparar un tejido daado en un paciente suelen producir rechazo ya que no son sus propias clulas. Pero podramos obtener embriones somticos por transferencia nuclear a partir de clulas de nuestro paciente y no implantarlos en ningn tero sino mantenerlos como productores de clulas madre embrionarias como las suyas con lo que no habra ningn tipo de rechazo. Sin embrago eso equivaldra a clonar al paciente y la clonacin est prohibida en seres humanos. Todo esto puede resultar ilegal o cuestionable pues qu se hace con los embriones?, estamos jugando con vidas potenciales?

Adultas.
Aparecen en tejidos adultos sometidos a un fuerte desgaste natural como la piel, la mucosa intestinal o la mdula sea roja. Pueden formar algunos tipos celulares pero no todos. Son por tanto clulas multipotentes.

Qu pueden hacer?
clula madre de la sangre diferenciacin se encuentra en la mdula sea

MULTIPOTENTES

solamente tipos especializados de clulas: glbulos rojos, glbulos blancos, plaquetas

Las clulas madre mesenquimales se encuentran en algunos tipos de tejdio conjuntivo y debidamente estimuladas pueden regenerar los tejidos seo, cartilaginoso, muscular e incluso nervioso. Estas clulas pueden proceder del paciente y no producen rechazo ni plantean problemas ticos. Sin embargo no pueden mantenerse en cultivo y son muy difciles de aislar.

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Son muy tiles las que proceden de la sangre del cordn umbilical pues: o Son compatibles con el recin nacido y adaptables a otros miembros de la familia. o Se recolectan fcilmente y apenas producen rechazo. o Son similares a las de la medula sea roja. o Se conservan mediante crionizacin. o Pueden ser la clave para curar muchas enfermedades degenerativas.

Actualmente las principales lneas de investigacin utilizan clulas adultas reprogramadas, normalmente fibroblastos procedentes del tejido conjuntivo. Estas clulas son modificadas aadindoles ciertos genes y se comportan igual que las clulas madre embrionarias.

Clulas madre pluripotentes inducidas (iPS)

reprogramacin gentica = aadir ciertos genes a la clula clula del cuerpo clula madre pluripotente inducida (clula iPS) se comporta como una clula madre embrionaria

diferenciacin cultivo de clulas iPS en el laboratorio

Ventajas: no se necesitan embriones! no hay rechazo! se obtienen todos los tipos celulares!

Todos los tipos posibles de clulas especializadas

7. Las enzimas de restriccin.

Son enzimas que cortan el ADN por lugares especficos determinados por ciertas secuencias palindrmicas: o Iguales en ambas cadenas pero con distinta orientacin. o Complementarias respecto a un eje. Son secuencias pequeas, no ms seis u ocho pares de bases.

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Cada restrictasa slo reconoce una secuencia y corta en un lugar concreto. Son una herramienta bsica en ingeniera gentica pues producen fragmentos con extremos cohesivos complementarios entre si.

8. El ADN recombinante.
Se obtiene al mezclar fragmentos de ADN de seres distintos que han sido tratados con el mismo enzima de restriccin. La adicin de ADN ligasa permite unir los fragmentos de las molculas resultantes.

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9. La electroforesis.
Las molculas de ADN tienen cargas elctricas negativas en los grupos fosfatos. Si la situamos en un campo elctrico sern atradas por el polo positivo. Esta tcnica permite separar mezclas de molculas en una matriz slida, que puede ser papel o gel, aplicando electricidad y en funcin de las cargas que estas posean. Si tratamos un ADN con una enzima de restriccin los fragmentos generados se desplazan en el gel en funcin de su tamao, a mayor tamao menor velocidad, generando un patrn de bandas caracterstico. Para ver la posicin de las distintas bandas de fragmentos aadimos bromuro de etidio, que unido al ADN es fluorescente al iluminar con luz ultravioleta. La posicin de cada banda indica el nmero de pares de bases que posee el fragmento.

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10.

La huella gentica o prueba del ADN.

Conjunto de fragmentos de ADN que caracterizan a un individuo y lo diferencian de los dems. El proceso para obtenerla es el siguiente: o Obtencin de muestra. Sangre, saliva, semen, pelo, etc. o Amplificacin mediante PCR. o Tratamiento con restrictasa. o Electroforesis en gel. o Patrn de bandas especfico. Las principales aplicaciones en medicina legal son: o Prueba de paternidad. Se requiere un porcentaje de semejanza entre padre e hijo. o Autora de un delito. Se comparan las huellas de los sospechosos con muestras obtenidas en el lugar del suceso y usando la misma enzima de restriccin (pelo, clulas epidrmicas, mancha de sangre, semen extrado, etc.).

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11.

La PCR.

Es una reaccin en cadena de la polimerasa y permite obtener muchas copias de una muestra o de un fragmento de ADN. Se realiza a alta temperatura para que el ADN est desnaturalizado y se copie ms fcilmente. Las enzimas son protenas y tambin se desnaturalizan mediante el calor por ello se usa la polimerasa de una bacteria termfila llamada Thermus acuaticus. La reaccin amplifica la muestra produciendo cantidades aptas para aplicar otras tcnicas. El material de partida puede ser una cantidad nfima extrada de un pelo, restos de clulas epiteliales, etc.

12.

La hibridacin de cidos nucleicos.

El ADN se desnaturaliza totalmente cuando en disolucin acuosa se somete a temperaturas superiores a 80 C. Cuando la temperatura disminuye las hebras se reasocian y el ADN se renaturaliza. La hibridacin se produce entre dos molculas cualesquiera de cidos nucleicos que posean cierto grado de complementariedad.

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Cuanto mayor sea el porcentaje de hibridacin entre dos especies distintas menor ser su distancia evolutiva.

13.

Las sondas radioactivas.

Una sonda es un fragmento monocatenario de ADN aislado, purificado, con secuencia conocida y marcado radioactivamente para poder ser detectado. Mediante hibridacin permite localizar genes entre los miles que forman el genoma de un individuo.

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El proceso de obtencin de la sonda puede ser: o o o o o Clulas sintetizando una protena, por ejemplo insulina. Aislamiento de ARNM. Obtencin de ADN con la enzima retrotranscriptasa. PCR en presencia de fsforo radioactivo. Sonda del gen de la insulina.

14.

Los vehculos de clonacin.

Permiten introducir fragmentos de ADN en bacterias u otro tipo de clulas. Una vez que el gen forneo est en la bacteria se originan millones de stas que portan una copia del mismo. As clonamos un gen. Los principales vehculos de clonacin son los plsmidos y los virus.

Plsmidos.
Son pequeas molculas circulares de ADN que contiene genes propios no vitales para la bacteria. Las bacterias pueden intercambiar ADN mediante tres procesos: transformacin, conjugacin y transduccin. Veamos como ejemplo como clonamos el gen de la insulina humana en la bacteria E. coli. o Usaremos un plsmido que porta un gen de resistencia al antibitico ampicilina. (Amp +). o Tratamos el plsmido y el ADN humano con la misma restrictasa. o Localizamos en los fragmentos humanos el que incluye el gen de la insulina usando una sonda radioactiva. o Mezclar tal fragmento con el plsmido para obtener el ADN recombinante. o Transfectamos las bacterias con el plsmido y este entrar en algunas mediante transformacin. o Aadimos ampicilina al cultivo y las que sobreviven son las que portan el gen de la insulina. o Tras varias generaciones obtenemos un clon bacteriano capaz de sintetizar insulina humana.

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Virus.
o Sometemos el virus a alta temperatura para descomponer la cpsida proteica y aislar el ADN. o Obtenemos ADN recombinante a partir del ADN vrico y el que queremos introducir.

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o Aadimos las protenas de la cpsida para producir el autoensamblaje. o Aadimos los virus a las clulas. o El ADN recombinante se incorpora al genoma celular y se expresan los genes transportados.

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Cuestiones 16 - 30. 15.

Los cultivos celulares.

Son tcnicas que permiten la conservacin de clulas in vitro con la mxima conservacin de sus propiedades fisiolgicas, bioqumicas y genticas. Los cultivos bacterianos los podemos tener en medio lquido o en medio slido usando placas de Petri donde se pueden aislar colonias. A nivel industrial se utilizan fermentadores en los que se controlan las distintas variables. Los cultivos de organismos unicelulares eucariotas se tratan igual que los bacterianos. Los seres ms empleados son las levaduras. Las clulas de organismos superiores se cultivan disgregando el rgano o el tejido de partida por accin mecnica o enzimtica y obteniendo una monocapa en placa a partir de la suspensin. Estas ltimas se emplean en numerosos campos: o Reproduccin in vitro de clones de plantas de inters comercial. o Investigacin contra el cncer. o Produccin de protenas mediante clulas.

16.

Los anticuerpos monoclonales (AcMo).

Son un conjunto de molculas de anticuerpos idnticas, con la misma especificidad y producidas por un nico clon de linfocitos B. Se obtuvieron por primera vez en 1975 mediante la tcnica de los hibridomas: o Obtencin de linfocitos B de ratn al que inyectamos el antgeno. o Fusin con clulas tumorales procedentes de un mieloma humano y capaces de proliferar de forma indefinida. o Obtencin de hibridoma el cual produce el anticuerpo especfico y se reproduce constantemente. o Clonacin del hibridoma. o Obtencin de grandes cantidades del anticuerpo. Tienen mltiples aplicaciones: o Deteccin de molculas en los fluidos biolgicos. o Determinar los grupos sanguneos.

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o Unirlos a frmacos y transportarlos hasta clulas o tejidos daados que poseen el antgeno.

17.

La secuenciacin del ADN.

Secuenciar un ADN es conocer la sucesin de pares de nucletidos que le caracteriza, o en sentido figurado, leer la disposicin de sus bases nitrogenadas. Las primeras tcnicas se llevaron a cabo entre 1977 y 1980 por Sanger y Gilbert y eran proceso bioqumicos muy laboriosos. Las mejoras introducidas en estos mtodos permitieron la automatizacin e informatizacin del proceso que ahora se hace de manera rutinaria en aparatos llamados secuenciadores. Se ha conseguido secuenciar completo el material gentico de diversos organismos surgiendo as dos ramas de la biologa molecular: la genmica y la protemica. La genmica estudia el genoma (conjunto de genes) de los seres vivos y entre sus objeticos se encuentran: o Catalogar todos los genes de un organismo. o Determinar su localizacin, estructura y funcin. o Conocer la forma en que interaccionan. La protemica estudia el conjunto de protenas expresadas por un genoma, una clula o un tejido (proteoma).

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El proteoma presenta gran variabilidad pues depende del individuo, de su estado de desarrollo, del tejido estudiado, de las condiciones ambientales, etc. Es de gran inters en medicina para la identificacin de marcadores que permiten diagnosticar enfermedades.

18.

El Proyecto Genoma Humano.

Su finalidad es conocer la secuencia y ubicacin de todos los genes contenidos en los 23 cromosomas humanos. Para coordinarlo se cre en 1988 la HUGO (Organizacin del Genoma Humano). El proyecto se inici en 1990 y en junio de 2000 se present el primer borrador. En 2003 ya contbamos con un mapa gentico completo. Sus conclusiones son: o Nuestra secuencia cuenta con ms de 3000 millones de pares de bases que originan unos 35.000 genes. o Alrededor del 50% del genoma est constituido por secuencias repetitivas de funcin desconocida (ADN basura) o La diferencia entre dos seres humanos es slo del 01%. Sus principales aplicaciones son: o Estudiar la base gentica de las ms d e400 enfermedades congnitas conocidas (mutaciones, fallos en la regulacin, bloqueo de productos, etc.). o Mejor comprensin del desarrollo embrionario y la diferenciacin celular. o Conocimiento de los mecanismos evolutivos y establecimiento de relaciones filogenticas.

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19.

Aplicaciones de la ingeniera gentica.

Obtencin de sustancias teraputicas.

o Clonacin de genes humanos en plsmidos de E. coli. Interfern. Producido por clulas humanas en muy poca cantidad. Tratamiento contra infecciones vricas y cncer. Insulina. Utilizamos la producida d esta forma desde 1982. Previamente se usaba la de origen porcino o bovino. Hormona del crecimiento. o Obtencin de vacas transgnicas y aislamiento del producto de la leche. Factor de coagulacin VII. Utilizado para tratar la hemoflia. Inyectar virus con el gen adecuado en glndulas mamarias (slo una generacin). Insercin del virus vector en clulas embrionarias e implantacin del embrin en un tero (heredable).

Terapia gnica.

o Tratar una enfermedad introduciendo genes funcionalmente correctos que sustituyen, contrarrestan o bloquean el gen defectuoso. o Surge en 1990 para tratar inmunodeficiencias a nios burbujas. o Sus linfocitos no funcionan porque no producen la enzima adenosn desaminasa (ADA). Se extrajeron linfocitos. Se corrigen y se reprograman usando un retrovirus como vector. Se implantan en la mdula sea donde se multiplican de forma natural. Curacin por tratamiento ex vivo. o Actualmente existen programas de investigacin muy avanzados pero se plantean las siguientes dificultades: Encontrar la forma de actuar slo en clulas dianas. Lograr la integracin estable del gen correcto.
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Que dicho gen se exprese correctamente.

o En 2006 se realiz por primera vez un tratamiento in vivo con 12 enfermos de Parkinson. Se les introdujo un adenovirus portador de un gen que estimula la produccin de un neurotransmisor. Con una cnula perforaron el crneo (anestesia local). Mejor sensiblemente el control de los movimientos. o En 2008 se realiz otro ensayo in vivo para tratar un tipo de ceguera. Se inyectaron directamente el ojo de los pacientes virus de resfriado que contenan el gen correcto y la visin mejor. o Algunos creen que la terapia gnica no da resultados y otros que an es una tcnica incipiente. o El actual reto es introducir en un paciente con cncer un virus portador de un gen que autodestruya las clulas cancergenas, las cuales tienen igual tipo de diana pero pueden estar diseminadas por todo el cuerpo. De esta forma sera posible vencer al cncer.

Diagnstico prenatal.
o Se realiza antes de nacer y permite detectar la presencia de enfermedades congnitas en el nuevo individuo. o Se utiliza ante la sospecha de que pueda padecerla por antecedentes familiares y permite seleccionar embriones sanos obtenidos por fecundacin in vitro. o El proceso es el siguiente: Construccin de una sonda fluorescente complementaria del ADN errneo que d lugar a la enfermedad. Realizar amniocentesis (conseguir mediante laparoscopia clulas que flotan en el lquido amnitico) u obtener clulas embrionarias. Amplificar, tratar con restrictasa y realizar electroforesis. Hibridar con la sonda. Si es + el individuo probablemente desarrollar la enfermedad. Si es seguramente ser sano. Decisin de continuidad.

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Animales clnicos.
o La eficiencia de la tcnica de transferencia nuclear es muy baja. o Se han clonado vacas, cabras, cerdos, conejos, ratones e incluso un gato. o Sin embargo la eficacia en la obtencin y supervivencia de estos organismos es mnima. El xito constituye la excepcin. o En USA no existe ningn etiquetado especial para la carne de animales clnicos pero desde 2008 la UE prohbe la venta de productos derivados de este tipo de animales.

20. Plantas transgnicas.

Para obtener un cultivo transgnico el proceso es el siguiente: o A partir de yemas cultivamos clulas vegetales en laboratorio. o Preparamos el ADN recombinante. La tcnica ms utilizada es emplear el plsmido Ti de la bacteria Agrobacterium tumefaccium: Cuando la bacteria infecta a una planta inyecta en sus clulas dicho plsmido Ti el cual se integra en el genoma vegetal y se expresa formando tumores en la zona del cuello. Aprovechamos esta caracterstica del plsmido y lo usamos para integrar los genes deseados. Gen de mejora. Ejem. Produccin de una toxina que mata insectos y confiere resistencia a una plaga. Gen de seleccin celular. Ejem. Resistencia a un antibitico (ambos genes pueden proceder de bacterias). Gen terminator. Produce esterilidad masculina. o Aadimos el plsmido al cultivo celular y practicamos electroporacin. o Seleccionamos las clulas resistentes al antibitico y volvemos a cultivar. o Reproducimos vegetativamente in vitro hasta obtener un cultivo vegetal en suelo. o Dejamos reproducir, obtenemos semillas y ya es estable.

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Algunos ejemplos: o Maz Bt. Resistente al gusano barrenador europeo o Patata Bt. Resistente al escarabajo de la patata en ambos casos se us un gen bacteriano productor de toxina. o Algodn Bt. Resistente al gusano del algodn. o Tomate Flav Savr. Bloqueo del gen de reblandecimiento. o Tomates y lechugas con sabor ms dulce. o Algodn de color azul. o Soja con ms metionina.

Para el ao 2015 se prevn ms de 200 millones de hectreas cultivos transgnicos a lo largo de unos 40 pases.

de

Actualmente los mayores productores son EEUU, Argentina, Brasil, Canad, China, India y Sudfrica. En Espaa se produce maz Bt y soja y aunque no se consumen directamente se comercializan algunos alimentos que llevan productos derivados (harina, almidn, aceite, grasas, etc.) como galletas, margarinas, bollera, etc. Tambin se usan en la fabricacin de piensos para mascotas o ganado pero en ambos casos deben estar etiquetados como OGM. Estos cultivos muestran mltiples beneficios pero las limitaciones en su uso se deben a que el efecto a largo plazo se desconoce y hemos de plantearnos si: o Alteramos la evolucin natural de los organismos? o Modificamos el equilibrio de los ecosistemas? o Qu ocurre si se hibridan con especies silvestres?

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20.

Animales transgnicos.

Son los que contienen genes de otras especies y pueden transmitirlos a la descendencia. La finalidad de su obtencin es aumentar la productividad u obtener un producto. Para conseguirlos hemos de introducir genes en las clulas totipotentes y sto es muy difcil. El xito es mayor si inyectamos ADN lineal en un vulo recin fecundado e implantamos en un tero en estado de dos clulas. Tras el parto podremos analizar la descendencia y comprobar el resultado. Los principales resultados son: o Oncoratn, 1988. Portador de genes cancergenos humanos y muy usado en la investigacin contra esta enfermedad. o Oveja Tracy, 1992. Su leche contiene antitripsina alfa utilizada para tratar el enfisema pulmonar. o Cerda Genie, 2001. Produce factor de coagulacin humano. o Salmones, lubinas y carpas de gran tamao que han incorporado el gen de la hormona del crecimiento de otras especies.

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Para obtener estos seres se han producido muchos fracasos, normalmente no se reproducen y han de estar confinados en centros de investigacin.

21.

La biotica.

En 1947 y tras la Segunda Guerra Mundial, debido a los experimentos realizados por los nazis con seres humanos, se promulg el Cdigo de Nuremberg que impone normas y exige consentimiento en este tipo de situaciones. En 1964 la Declaracin de Helsinki define los principios de la investigacin mdica. A finales de los aos 60 surge la biotica que se define como la aplicacin de la tica a las ciencias de la vida y seala las obligaciones morales del ser humano con respecto al mundo vivo. En 1997 la UNESCO aprueba la Declaracin Universal sobre el Genoma y los Derechos Humanos. En Espaa se firm en 1997 en Convenio de Oviedo y en 2007 la Ley de Investigacin Biomdica.

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