Esterilizacin (microbiologa) De Wikipedia, la enciclopedia libre Saltar a: navegacin, bsqueda Para otros usos de este trmino, vase Esterilizacin.

Se denomina esterilizacin al proceso validado por medio del cual se obtiene un producto libre de microorganismos viables. El proceso de esterilizacin debe ser diseado, validado y llevado a cabo de modo de asegurar que es capaz de eliminar la carga microbiana del producto o un desafo ms resistente. Los mtodos trmicos de esterilizacin son comnmente los ms utilizados para eliminar los microorganismos, incluyendo las formas ms resistentes como lo son las endoesporas. Terminologa referente al control del crecimiento microbiano Terminologa Definicin Esterilizacin comercial Desinfeccin Antisepsia Eliminacin de grmenes Sanitizacin Tratamiento de calor para matar endoesporas de Clostridium botulinum en comida enlatada Destruccin de patgenos vegetativos Destruccin de patgenos vegetativos en tejidos vivos Comentarios Las endoesporas ms resistentes de las bacterias termoflicas pueden sobrevivir, pero no van a crecer ni germinar bajo las condiciones normales de almacenamiento Puede hacerse por mtodos fsicos o qumicos El tratamiento regularmente es com mtodos qumicos antimicrobiales

Remover los microbios de un rea limitada, como la Por lo general se hace mecnicamente removiendo con alcohol piel alrededor de un sitio para inyectar Tratamiento para disminuir la cuenta microbiana en Se puede hacer con un bao a altas temperaturas o introducindolo a utensilios de comida y bebidas para mantener los un desinfectante qumico niveles de salud pblica

Calor seco: Comprende a su vez varias fases: el calor directo, el flameado y la esterilizacin al horno. Calor hmedo: Comprende varias modalidades, ebullicin, pasteurizacin y empleo del autoclave.

Tasa de muerte microbian Cuando una poblacin bacteriana es tratada con qumicos o con calor, usualmente stas mueren a una tasa constante. Por ejemplo, si suponemos que tenemos una poblacin de 2 millones de microorganismos que han sido tratados por un minuto, y 90% de la poblacin ha muerto. Ahora nos quedan con 200,000 microorganismos. Si la poblacin es tratada por otro minuto, 90% del remanente de la poblacin ser exterminada, resultando en 20,000 mocroorganismos. Si la curva de mortandad es trazada logartmicamente, la tasa de muerte es constante. Factores que influyen en la efectividad de los tratamientos antimicrobianos El nmero de microorganismos: A mayor nmero de microorganismos que se tengan al inicio, mayor tiempo para eliminar la poblacin entera. Influencias ambientales: La presencia de materia orgnica regularmente inhibe la accin de antimicrobianos qumicos. Microorganismos localizados en biopelculas, son difciles de matar por biosidas, porque la actividad de ste es dependiente de la temperatura de la reaccin qumica; los desinfectantes funcionan un poco mejor bajo temperaturas altas. Tiempo de exposicin: Los qumicos antimicrobianos suelen requerir un mayor tiempo de exposicin para microorganismos ms resistentes o endoesporas, esto con el fin de que sea efectivo. Caractersticas microbianas: Dependiendo las caractersticas del microorganismo se van a tener que usar diferentes mtodos para poder eliminarlo. Acciones de los agentes antimicrobianos Alteracin de la permeabilidad de la membrana: La membrana plasmtica de los microorganismos, localizada en la pared celular, es el objetivo de muchos agentes antimicrobianos. Esta membrana regula activamente el paso de nutrientes a la clula y la eliminacin de desechos

de la misma. El dao a los lpidos o protenas de la membrana plasmtica por agentes antimicrobianos causa que el contenido celular salga al medio y esto interfiere con el crecimiento de la clula. Dao a las protenas y cidos nucleicos: Para que una protena sea funcional se necesita que se encuentre en su estructura terciaria por lo menos, sta se encuentra constituida por puentes de hidrogeno los cuales son susceptibles a romperse con calor o ciertos qumicos; la rotura de estos puentes nos da como resultado la desnaturalizacin de la protena. Del mismo los enlaces covalentes aunque son ms resistentes tambin son objetivos de agentes antimicrobianos. Los cidos nucleicos ADN y ARN son los que llevan la informacin gentica de la clula. El dao a estos por calor, radiacin, o qumicos es frecuentemente letal para la clula. La clula no se puede replicar y tampoco puede tener sus funciones metablicas normales como la sntesis de enzimas. Las altas temperaturas a las que funcionan los autoclaves eliminan todo tipo de microbios y bacterias, incluyendo las esporas. Mtodos de esterilizacin

Mtodos fsicos o Calor hmedo (en autoclave de vapor) o Calor seco (en horno de esterilizacin) Flama directa o Incineracin o Aire caliente o Pasteurizacin o Ebullicin o Vapor o Tyndalizacin o Radiacin Radiacin ionizante Radiacin no ionizante: (p. ej:Radiacin infrarroja y Radiacin ultravioleta) Mtodos qumicos o Alcoholes Etanol Alcohol isoproplico o Aldehdos Formol Glutaraldehdo o Fenoles Fenol (cido carblico) Xilenol o xido de etileno o Perxido de hidrgeno

Mtodos qumicos Los mtodos qumicos de esterilizacin son aquellos que involucran el empleo de sustancias letales para los microorganismos, tales como el xido de etileno y el perxido de hidrgeno. El uso de este mtodo es muy limitado para la Industria Alimentaria pero muy utilizado en otras industrias como la farmacutica por ejemplo. Mtodos fsicos Los mtodos fsicos son aquellos que no involucran el empleo de sustancias letales para los microorganismos, sino procedimientos fsicos como la radiacin ionizante, el calor o la filtracin de soluciones con membranas que impiden el paso de microorganismos, incluyendo virus. El mtodo ms usado en esta categora es el calor que mata microorganismos por la desnaturalizacin de las enzimas; el cambio resultante en la forma tridimensional de las protenas las inactiva. La resistencia al calor vara entre los diferentes microorganismos; esta diferencia puede ser expresada como el punto trmico de muerte (PTM) el cual se define como la temperatura ms baja a la cual todos los microorganismos en una suspensin lquida sern eliminados en 10 minutos. ser eliminada. Mtodos trmicos Los mtodos trmicos suelen englobar todos los procedimientos que tienen entre sus fines la destruccin de los microorganismos por el calor. Los mtodos son tanto la pasteurizacin como la esterilizacin, cuya finalidad principal es la destruccin microbiana, como al escaldado y a

la coccin, procesos en los que tambin se consigue una cierta reduccin de la flora microbiana, pero que sus objetivos principales son la variacin de las propiedades fsicas. Calor hmedo Las condiciones de temperatura y presin de un proceso de esterilizacin por vapor de agua en un autoclave van de 121 C a 134 C y 40-50 psi. Para el tratamiento de residuos hospitalarios se emplean tiempos de operacin entre 20 y 30 minutos. El mtodo de esterilizacin por autoclave utiliza pruebas microbiolgicas, las cuales se ingresan dentro del ciclo de operacin y posteriormente por medio de una incubadora se busca detectar si hay crecimiento de microorganismos. Uno de los microorganismos utilizados en estas pruebas es el Bacillus stearothermophilus. Calor seco Esterilizacin por calor seco Temperatura (C) Tiempo (minutos) 121 140 150 160 170 180 360 180 150 120 60 30

Las temperaturas de esterilizacin van desde 121 C a 180 C, teniendo en cuenta los tiempos de esterilizacin para cada caso.3 Aplicaciones En investigacin de laboratorios cientficos es empleado principalmente para eliminar microorganismos de los elementos de trabajo, evitando as la contaminacin de la muestra, recipientes y material de trabajo. En la industria alimentaria se emplea para aumentar la vida til de los alimentos. Los alimentos esterilizados ms comunes son los enlatados.

Esterilizacin significa la eliminacin de toda forma de vida de un medio o material, lo que se lleva a cabo generalmente por medios fsicos, por ejemplo, filtracin, o por muerte de los organismos por calor, productos qumicos u otra va. Esta definicin excluye por lo tanto cualquier tcnica que resulte solamente en un dao a los microorganismos o atenuacin de la actividad de cualquier tipo. La palabra desinfeccin se aplica a la remocin o destruccin por cualquier va de organismos vivos que pueden causar dao particular o infeccin. No significa por lo tanto la destruccin de todos los microorganismos, sino solamente de aquellos que pueden producir un resultado no deseado. Un antisptico es un desinfectante, o sea un agente qumico usado para destruir microorganismos dainos. Se utiliza en general para agentes a ser aplicados en animales o humanos. Asepsia es la exclusin continuada de microorganismos contaminantes. As por ejemplo el cultivo de microorganismos en el laboratorio es llevado a cabo aspticamente como en muchas fermentaciones industriales. El medio de cultivo es esterilizado para remover toda forma de vida y luego inoculado con el cultivo requerido. Se dice entonces que el sistema se mantiene en condiciones aspticas.

Mtodos de esterilizacin a. b. c. Por destruccin total de microorganismos; Por muerte o inactivacin; y Por eliminacin con medios fsicos.

Por destruccin total se entiende un proceso muy violento, que casi siempre implica calentamiento apreciable del material, como ocurre con la aplicacin de una llama, que es lo que hacemos en el laboratorio cuando flameamos un ansa de platino o las bocas de tubo de ensayo o erlenmeyers. Otra manera de destruir contaminantes es con el uso de poderosos agentes oxidantes. Por supuesto sta metodologa, aunque es efectiva, est muy restringida en su empleo. La muerte o inactivacin significa la eliminacin de microorganismos sin que exista necesariamente desintegracin de las clulas. Se puede efectuar por calentamiento, seco o hmedo, por radiaciones o por agentes qumicos. El calor hmedo, generalmente en forma de vapor bajo presin, es muy til y de gran valor en la esterilizacin en el laboratorio, que se efecta en autoclave, o en la industria cuando se esterilizan los medios de cultivo y los equipos de fermentacin. En el caso de los autoclaves, se pueden alcanzar presiones de 1 a 3 atmsferas. En escala grande el equipo de produccin es esterilizado con vapor saturado bajo presin, y la presin requerida debe ser alcanzada en todas las partes del equipo y el aire debe ser purgado totalmente del sistema (como ocurre tambin en el caso de los autoclaves) porque la transferencia de calor disminuye mucho en ese caso. Despus de la esterilizacin se mantienen las condiciones aspticas, haciendo pasar vapor por las vlvulas y sellos. La eliminacin fsica est restringida a la esterilizacin de gases lquidos, y es fundamentalmente llevada a cabo por filtracin mediante filtros absolutos o filtros fibrosos. Los filtros absolutos son de materiales cermicos, de vidrio o de metal sinterizado con poros tan pequeos que la penetracin de los microorganismos no es posible. Los filtros fibrosos no son absolutos y el material filtrante puede ser lana de vidrio, amianto y esteres de celulosa, siendo las fibras de un dimetro variable de 0.5 a 15 micrones.