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CARACTERIZACIN E INTERVENCIN AMBIENTAL DE LA QUEBRADA LA TOSCANA EN LA CIUDAD DE MEDELLN

JIMENA GALVIS GARCA JUAN DAVID JARAMILLO OSORIO ALEJANDRO MARTNEZ HERNNDEZ DANILO OCAMPO MIRA BRIAM PREZ HUESO

INSTITUCIN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA PARA LA CIENCIA Y LA INNOVACIN. MEDELLN 2013

CARACTERIZACIN E INTERVENCIN AMBIENTAL DE LA QUEBRADA LA TOSCANA EN LA CIUDAD DE MEDELLN

JIMENA GALVIS GARCA JUAN DAVID JARAMILLO OSORIO ALEJANDRO MARTNEZ HERNNDEZ DANILO OCAMPO MIRA BRIAM PREZ HUESO

DOCENTE ASESOR ROBINSON SALAZAR DAZ

INSTITUCIN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA PARA LA CIENCIA Y LA INNOVACIN. MEDELLN 2013

INFORMACIN GENERAL DEL PROYECTO Ttulo del proyecto: Caracterizacin e Intervencin Ambiental de la Quebrada La Toscana en la ciudad de Medelln Nombre de investigadores los Roles Direccin electrnica

Alejandro Hernndez

Martnez Lder

alemaher12@gmail.com

Danilo Ocampo Mira Briam Prez Hueso

Comunicador Dinamizador

daniloo.coloyo@gmail.com briamhueso@gmail.com juandavidjaraoso@gmail.c om jimeloyola@gmail.com

Juan David Jaramillo Osorio Utilero

Jimena Galvis Garca

Relatora

- Nombre del profesor asesor: Robinson Salazar Daz

CATEGORA

LNEA DE INVESTIGACIN Biotecnologa

REA TEMTICA

Investigacin cientfica

Servicios pblicos y medio ambiente

- Tutor (asesor externo- adulto responsable administrativo para el manejo de recursos financieros y fsicos): Robinson Salazar Daz

Duracin proyecto 3 aos

del Valor del proyecto

Aporte externo

Aporte Institucional

450.000 $

- El proyecto es continuacin de una propuesta presentada anteriormente?: SI x NO

Cul es la innovacin? Es la primera caracterizacin de la quebrada La Toscana tanto en aspectos biolgicos como fsico-qumicos, con el fin de impulsar propuestas de intervencin ambiental a travs de gestin social y saneamiento de la misma.

CONTENIDO DEL PROYECTO DE INVESTIGACIN TTULO DE LA INVESTIGACIN Caracterizacin e Intervencin Ambiental de la Quebrada La Toscana en la Ciudad de Medelln. RESUMEN La quebrada La toscana, ya hace varios aos ha presentado fuertes olores, animales como mosquitos y roedores que generan incomodidades a los habitantes de la zona, en la quebrada no se ha realizado una evaluacin ni biolgica, ni qumica, para este estudio se utilizaron parmetros fsico-qumicos que permitan determinar el grado de contaminacin en la quebrada La toscana y su posible repercusin en la salud de los habitantes aledaos a ella. Entre los parmetros fisicoqumicos se encuentran anlisis de PH, Temperatura, humedad, DBO, DQO, entre otros. Aparte anlisis biolgico que nos permitan llegar a procesos de intervencin con la comunidad para proponer soluciones de saneamiento. PALABRAS CLAVE Intervencin, quebrada, comunidad, saneamiento

Medelln,

caracterizacin,

qumicos,

biolgicos,

JUSTIFICACIN DEL PROYECTO Resultados encontrados en estudios previos en la quebrada La Toscana durante los aos 2011-2012 por el grupo de investigacin Blue Fluid, en los cuales se midieron algunos parmetros fisicoqumicos y biolgicos, indicaron cierto grado de contaminacin generado posiblemente por sus habitantes y algunos de las industrias cercanas. Teniendo en cuenta lo anterior, se propone realizar un diagnstico a profundidad que permita generar criterios slidos para llevar a cabo procesos de intervencin ambiental en los cuales se involucre a la comunidad, Como una medida de solucin al problema, implementando campaas de concientizacin ambiental dirigida a las juntas de accin comunal e instituciones educativas cercanas, que permita formular e implementar acciones dirigidas a mitigar la contaminacin y los efectos nocivos que se puedan generar en esta comunidad.

PLANTEAMIENTO DE PROBLEMA - Antecedentes del Problema Durante los ltimos aos la alcalda de Medelln junto al rea Metropolitana han resaltado la importancia de ejecutar planes de saneamiento y control de vertimientos de las aguas residuales afluentes al ro Medelln CALIDAD DEL RO MEDELLN MEJORA DESPACIO: VA ENTRE MALA Y REGULAR, EL COLOMBIANO 8 DE SEPTIEMBRE DE 2013. Las iniciativas se han tomado desde los posteriores estudios hechos al ro Medelln, al evaluar la importancia de su afluentes. Sin embargo, con el gran presupuesto aportado a las quebradas, estos planes no han intervenido a la quebrada La Toscana, DIRECCIN AGUAS GERENCIA METROPOLITANA AGUAS PLAN SANEAMIENTO RO MEDELLN Y QUEBRADAS AFLUENTES MARZO DE 2011 una de las ms afectadas en el noroccidente de Medelln, as como lo afirman sus habitantes los cuales protestan desde el ao 2010 por la falta de canalizacin URGE CANALIZACIN EN LA TOSCANA, EL MUNDO 4 DE ENERO DE 2010 y cuyos trmites no se han generado Licitacin Pblica No. 70002410 de 2007, Intervencin En Quebradas con nmero de radicacin 2004050010276 de 28/10/2004 Actualizada diciembre 2006.. La quebrada La Toscana tampoco cuenta con estudios de caracterizacin, apenas se saben anlisis antrpicos, y su intervencin ambiental no ha sido resaltada por los diferentes planes hechos por las diferentes instituciones. PREGUNTA DE INVESTIGACIN Cual es el grado de contaminacin que presenta la quebrada La Toscana en la ciudad de Medelln, teniendo en cuenta parmetros fisicoqumicos y biolgicos?.

OBJETIVOS Objetivo general Realizar un diagnstico del estado actual de la quebrada La Toscana a travs de una caracterizacin fsico-qumica y biolgica, que permita a su vez realizar procesos de intervencin ambiental. Objetivos especficos - Caracterizar el entorno natural de la quebrada.

-Determinar el grado de contaminacin del agua por medio del anlisis de parmetros biolgicos (bioindicadores). -Determinar el grado de contaminacin del agua por medio del anlisis de parmetros fsico-qumicos -Brindar informacin a la comunidad acerca del estado actual de la quebrada. -Creacin de propuestas para la gestin ambiental, plan de seguimiento y mantenimiento, - - -Formulacin de acciones para su saneamiento, recuperacin, proteccin y conservacin del recurso hdrico.

MARCO TERICO O CONCEPTUAL El agua es un recurso natural necesario para el desarrollo de un gran nmero de actividades humanas. Su creciente degradacin por disminucin de su calidad implica la reduccin del nmero de usos que se le da; es por ello, lo que se hace necesario la realizacin de estudios que permitan determinar la calidad del agua. Los anlisis que se pueden realizar al agua para controlar su calidad son: fsicos, qumicos y microbiolgicos. Los parmetros biolgicos en las aguas potables son de mucho inters, los microorganismos que puede haber en el agua son virus, bacterias, hongos, algas y protozoos. Se ha propuesto el uso de indicadores microbianos que se puedan identificar mediante el uso de mtodos sencillos, rpidos y econmicos. El diagnstico y posterior recuperacin de las fuentes de agua naturales contaminadas, debe hacerse adems, teniendo en cuenta las implicaciones que en trminos ecolgicos y sanitarios representa la degradacin del recurso. Bioindicadores Los bioindicadores como su nombre lo indica son Indicadores Biolgicos, necesarios para realizar caracterizaciones, dado a que estos nos pueden dar un primer indicio del estado del sitio de estudio, muy apropiados para el estudio de La Quebrada La Toscana. Se sac el siguiente fragmento del libro ESTUDIO DE LOS BIOINDICADORES DEL RIO MEDELLN con el fin de tener un base apropiada de cmo utilizarlos en este proyecto. -La utilizacin de bioindicadores de calidad de agua teniendo en cuenta sus hbitats y la estructura de la comunidad reflejan las condiciones y los cambios

ecolgicos en las corrientes acuticas, causados por las acciones antrpicas y por fenmenos naturales. Los organismos acuticos tienen ciertos lmites frente a la alteracin de su ambiente, estos varan y estn catalogados como los organismos estenoicos sensibles no soportan las nuevas condiciones comportndose como intolerantes, mientras que los euronoicos tolerantes no se afectan. En la metodologa fue utilizado el estudio de los macroinvertebrados, dado que sus caractersticas los hacen idneos para vigilancia rutinaria para las cuencas hidrogrficas. Henao se refiere a varios aspectos del rio como su ubicacin geogrfica, descripcin de las cuencas del rio, reas de drenaje, pendiente del ro, geologa, climatologa, uso del suelo, entre otros. Los bioindicadores que podramos encontrar podra ser en su mayora algunos macroinvertebrados como Nematodos (Gusanos), Insectos (Tales como Mosquitos o Zancudos). Anlisis de microorganismos Estos anlisis se pueden realizar con muestras de aguas directas de la quebrada con el fin de detectar las clases de residuos, protozoarios y/o algn otro tipo de microorganismo presente. Ms los medios de cultivo, los cuales tienen como objetivo el proporcionar los nutrientes necesarios a las bacterias (agregadas al medio a travs de un frotis de las muestras de agua) fomentando la formacin de colonias para ser ms fcilmente clasificadas luego de su extraccin y aplicacin de la tcnica de tincin Gram. Los Microorganismos En El Agua Los microorganismos son organismos (como bacterias, virus y protozoos) que son demasiado pequeos para que se puedan ver sin la ayuda de un microscopio. Aunque la mayora son microorganismos inofensivos, los hay tambin infecciosos. stos se pueden multiplicar en el cuerpo y causar enfermedades o dolencias. En nuestro medio ambiente, hay niveles bajos de microorganismos infecciosos y en pocas ocasiones provocan enfermedades en personas sanas. La ingestin de agua contaminada es tan slo una de las posibles fuentes de microorganismos infecciosos.

TIPOS DE MICROORGANISMOS. Protozoarios Son organismos microscpicos, unicelulares, hetertrofos, que viven en medios lquidos (Tales como el agua) y que se reproducen por biparticin. Las clases en los que se dividen estos son: Rizpodos: (Rhizopoda). Estos protozoos, al igual que las amebas se desplazan por medio de pseudpodos, que adems les sirve para capturar el alimento Ciliados: (Ciliophora). Aparecen rodeados de Cilios y presentan una estructura interna compleja. Un representante de estos sera el Paramecio (Paramecium). Flagelados: (Mastigophora). Se distinguen por la posesin de uno o ms flagelos. Las formas unicelulares desnudas (sin pared celular), dotadas de dos flagelos, representan la forma original de la que derivan todos los eucariontes. Esporozoos: (Sporozoa). Parsitos con una fase de esporulacin (divisin mltiple). Hay por lo menos cuatro grupos distintos sin relacin entre s, y ni siquiera son todos protistas, sino que tambin hay animales y hongos. El ejemplo ms conocido es el plasmodio (gnero Plasmodium), causante de la malaria. Rotferos: Son organismos microscpicos, acuticos y semiacuticos, ms conocidos en la limnologia por ser componentes del plancton (microplancton) aunque estn muy bien representados en las comunidades litorales y tambin forman parte del zoomicrobentos. La mayora es de vida libre, hay pocos parsitos, generalmente son solitarios, pero hay especies que forman colonias de variable tamao. La gran mayora ocupa aguas continentales ya que son comparativamente muy pocas las especies marinas. Colonizan ambientes con distinto grado de salinidad, pH y temperatura, tolerando muchos de ellos concentraciones muy bajas de oxgeno. Bacterias

Las bacterias son organismos unicelulares microscpicos, sin ncleo ni clorofila, que pueden presentarse desnudas o con una cpsula gelatinosa, aisladas o en grupos y que pueden tener cilios o flagelos. La bacteria es el ms simple y abundante de los organismos y puede vivir en tierra, agua, materia orgnica o en plantas y animales. Las bacterias no solo pueden provocar enfermedades cuando entran en el cuerpo humano a travs de los alimentos, las aguas superficiales tambin pueden ser una fuente importante de infecciones bacterianas. En la siguiente tabla puede ver varias bacterias que se pueden encontrar en aguas superficiales, y las enfermedades que causan cuando son ingeridas en grandes cantidades, junto con los sntomas. Se dividen en Gram Positivas y Gram Negativas. Adems se encuentran en formas de Bacilos, Cocos, Bacilo-cocos, Espirilos y Vibrios. Microalgas Las microalgas son microorganismos fotosintticos que pueden crecer de manera auttrofa o hetertrofa. En general son altamente eficientes en la fijacin de CO2 y utilizacin de la energa para producir biomasa. Estn presentes en todos los cuerpos de agua, como lagos, mares y ros, pero no estn supeditados solo al agua. Las pueden utilizarse para tratar aguas residuales y efluentes gaseosos tanto hogareos como agroindustriales. La mayora de las bacterias que actan en la descomposicin de los desechos hogareos, consumen oxgeno para vivir y producen dixido de carbono, uno de los gases invernadero ms peligroso para l. Las algas, por el contrario, utilizan dixido de carbono para crecer que luego transforman en oxgeno. Ah ya tenemos una ventaja para utilizarlas en las aguas residuales, ya que forman una simbiosis con las bacterias, tan necesarias para eliminar los contaminantes orgnicos. Las algas, aparte, necesitan de luz y otros nutrientes para la fotosntesis, entre ellos el nitrgeno y el fsforo, compuestos presentes en las aguas residuales, y que tambin es necesario eliminar. Las especies de microalgas que por requerimiento de los investigadores se han trabajado hasta la fecha son: Chaetoceros gracilis (mullierii) Ch. calcitrans Isochrysis galbana

Nannochloropsis oculata Tetraselmis suecica Pavlova lutherii (Monochrysis lutherii) Phaeodactylum tricornotum Thalassiosira pseudonana

DATOS ACERCA DEL AGUA Purificacin del agua Las impurezas suspendidas y disueltas en el agua natural impiden que sta sea adecuada para numerosos fines. Los materiales indeseables, orgnicos e inorgnicos, se extraen por mtodos de criba y sedimentacin que eliminan los materiales suspendidos. Otro mtodo es el tratamiento con ciertos compuestos, como el carbn activado, que eliminan los sabores y olores desagradables. Tambin se Puede purificar el agua por filtracin, o por cloracin o irradiacin que matan los microorganismos infecciosos. Contaminacin del agua La contaminacin del agua es cualquier cambio qumico, fsico o biolgico en la calidad del agua que tiene un efecto daino en cualquier cosa viva que consuma ese agua. Cuando los seres Humanos beben el agua contaminada tienen a menudo problemas de salud. La contaminacin del agua puede tambin puede hacer a esta inadecuada para el uso deseado. Contaminantes del agua Agentes patgenos.- Bacterias, virus, protozoarios, parsitos que entran al agua provenientes de desechos orgnicos. Desechos que requieren oxgeno.- Los desechos orgnicos pueden ser descompuestos por bacterias que usan oxgeno para biodegradarlos. Si hay poblaciones grandes de estas bacterias, pueden agotar el oxgeno del agua, matando as las formas de vida acuticas. Sustancias qumicas inorgnicas.- Acidos, compuestos de metales txicos (Mercurio, Plomo), envenenan el agua.

Los nutrientes vegetales pueden ocasionar el crecimiento excesivo de plantas acuticas que despus mueren y se descomponen, agotando el oxgeno del agua y de este modo causan la muerte de las especies marinas (zona muerta). Sustancias qumicas orgnicas.- Petrleo, plsticos, plaguicidas, detergentes que amenazan la vida. Sedimentos o materia suspendida.- Partculas insolubles de suelo que enturbian el agua, y que son la mayor fuente de contaminacin. Sustancias radiactivas que pueden causar defectos congnitos y cncer. Calor.- Ingresos de agua caliente que disminuyen el contenido de oxgeno y hace a los organismos acuticos muy vulnerables. PROCEDIMIENTOS DEL ESTUDIO Toma de muestras La toma u obtencin de muestras es el procedimiento que consiste en recoger partes, porciones o elementos representativos de un terreno, a partir de las cuales se realizar un reconocimiento geotcnico del mismo. Las muestras son porciones representativas del terreno que se extraen para la realizacin de ensayos de laboratorio. Segn la forma de obtencin, pueden clasificarse de forma general en dos tipos: Muestras alteradas: conservan slo algunas de las propiedades del terreno en su estado natural. Muestras inalteradas: conservan, al menos tericamente, las mismas propiedades que tiene el terreno "in situ". Toma de datos Consiste en obtener valores sobre un parmetro de una poblacin o lugar, normalmente mediante una muestra de la que se ha especificado anteriormente el tamao y mtodo de recogida de estos valores, para su posterior anlisis y sacar conclusiones sobre el parmetro estudiado. Ubicacin de la quebrada: La Quebrada la Toscana se encuentra localizada al sur de Bello, Al Norte de Medelln. Coordenadas del primer punto de visible de la quebrada despus de la canalizacin: 618'16.34" N 7533'53.24" O

Coordenadas de el punto de desembocadura de la quebrada la Toscana al rio Medelln: 618'12.46" N 7533'26.10" O Extensin total del rea para investigar: 830 metros aproximadamente La quebrada la Toscana est ubicada (Como su nombre lo indica) en el barrio la Toscana, y si bien no es una zona turstica esta presenta una gran variedad de basuras y otros factores contaminantes. Por la gran cantidad de material orgnico e inorgnico que est situado en la quebrada se hace perfecta para el cultivo de bacterias las cuales se consumen parte del material orgnico en descomposicin y el oxigeno del agua, generando as malos olores que concentrados se transforman en un gas conocido como acido sulfhdrico, tambin a la vez generando un ambiente propicio para mosquitos y algunos macro-invertebrados, si bien la quebrada est en su gran parte canalizada de igual forma posee zonas donde se destapa, las cuales estn muy prximas a las comunidades y por todos estos factores y algunos ms, es un ambiente riesgoso en cuestiones de salud. Parmetros Fsico-Qumicos Las aguas sin contaminar poseen bajas concentraciones de materia orgnica y posee ciertas caractersticas especficas. Estos parmetros son utilizados para determinar la calidad del agua y la cantidad de materia presente en esta con el fin de determinar su estado. Niveles de oxgeno disuelto: Es la cantidad de oxgeno que est disuelta en el agua. Es un indicador de cmo de contaminada est el agua o de lo bien que puede dar soporte esta agua a la vida vegetal y animal. Niveles de pH: Es la sigla para potencial de Hidrgeno, esto nos permite clasificarla en aguas puras, aguas cidas y aguas alcalinas. Temperatura: Es una medida de calor o de energa trmica, nos permite saber el estado en el agua y los posibles cambios que puede tener, Humedad relativa: Es la cantidad de humedad que hay el aire comparado con el mximo que podrahaber para esa presin y temperatura. Intensidad Lumnica: Es la cantidad de flujo luminoso que emite una fuente por unidad de ngulo slido. Alcalinidad Total: Capacidad del agua para neutralizar cidos o aceptar protones. Cloro Libre: Cantidad de cloro disponible que se encuentra para mezclarse con los contaminantes y desinfectar y esterilizar el agua.

Cloraminas: compuesto qumico que se utilizan como desinfectantes. Demanda de cido: Cantidad de sustancias cidas presentes en el agua Demanda de lcali: Cantidad de sustancias alcalinas presentes. Dureza del agua: Concentracin de los

cationes metlicos no alcalinos

presentes. DQO (Demanda Qumica de Oxgeno): La DQO expresa la cantidad de oxgeno equivalente necesario para oxidar las sustancias presentes en las aguas residuales, mediante un agente qumico fuertemente oxidante, como el permanganato potsico (KMnO4), utilizado en aguas limpias y el dicromato potsico (K2Cr2O7), utilizado en aguas residuales, ya que el uso de permanganato potsico en aguas residuales produce unos errores por defecto muy importantes. Por lo tanto, la DQO, medir tanto la materia orgnica biodegradable por los microorganismos, como la materia orgnica no biodegradable y la materia inorgnica, oxidable por ese agente qumico. Esta medida de la DQO, es una estimacin de las materias oxidables presentes en el agua y es funcin de las caractersticas de los componentes presentes, de sus proporciones respectivas, de las posibilidades de oxidacin y de la temperatura y otros. DBO (Demanda biolgica de Oxgeno): La demanda bioqumica de oxgeno (DBO) es una prueba usada para la determinacin de los requerimientos de oxgeno para la degradacin bioqumica de la materia orgnica en las aguas municipales, industriales y en general residual; su aplicacin permite calcular los efectos de las descargas de los efluentes domsticos e industriales sobre la calidad de las aguas de los cuerpos receptores. Los datos de la prueba de la DBO se utilizan en ingeniera para disear las plantas de tratamiento de aguas residuales. Slidos totales: residuo de material que queda en el recipiente despus de la evaporacin de la muestra y su secado posterior en horno a una temperatura definida. Los slidos totales incluyen "slidos totales suspendidos", que es la porcin de slidos totales retenidos por un filtro y los slidos totales disueltos, que es la porcin que pasa a travs del filtro. Conductividad: Es la conductividad elctrica que se puede usar para monitorear la calidad de aguas de superficie, aguas de proceso en plantas de suministro y tratamiento de agua y aguas residuales.

METODOLOGA Caracterizacin del entorno de la quebrada Se realiz una caracterizacin mediante un anlisis descriptivo, donde se hizo un registro fotogrfico del entorno, para lo cual la informacin se registr en la siguiente tabla: DATOS BSICOS

NOMBRE:____________________________________ SECTOR:____________________________

LOCALIZACIN EXACTA:____________________________________________________________

RECOLECTORES:__________________________________________________________________ _________________________________________________________________________________

PARMETROS DEL AGUA

COLOR DEL AGUA:

Clara:_______ Marrn:______ Negra:______ Gris:______ Verde:___________

Sucia:_______ Aceitosa:________ Lechosa:_______ Espumosa:________

COLOR DEL SUSTRATO

Anaranjado/rojo:______ Amarillo:_______ Negro:________ Marrn:__________

Gris:______ Ninguno:______ Otro:________

OLOR DEL SEDIMENTO:

Normal:______ Aguas negras:_______ petrleo:_______ Qumicos:________

Cloro:______ Ninguno:_______ Otro:______

CUBIERTA DE DOSEL

Abierto (0-25% de la quebrada en sombra):_____________________ Poco abierto (25-50% en la sombra):______________________ Medianamente cubierto (50-75% cubierto):_____________________ Totalmente cubierto (75-100% cubierto):_____________________

Hiptesis El ambiente fsico-qumico propicia el crecimiento de microorganismos que podran estar relacionados con el grado de contaminacin de la quebrada La Toscana. MTODOS Y TCNICAS DE INVESTIGACIN 1. rea de estudio La quebrada La toscana tiene su curso en los barrios: Santander, Tejelo, Boyaca las brisas, Toscana,Plaza coln, se encuentra en la carrera 64D por la calle 109 aledaa a la planta de produccin ZEN en la comuna 5 de la ciudad de Medelln. La Quebrada la Toscana se encuentra localizada al sur de Bello, Al Norte de Medelln. Coordenadas del primer punto de visible de la quebrada despus de la canalizacin: 618'16.34" N 7533'53.24" O Coordenadas del punto de desembocadura de la quebrada la Toscana al ro Medelln: 618'12.46" N 7533'26.10" O Extensin total del rea para investigar: 830 metros aproximadamente 1.1 Puntos de muestreo: despus de realizar el reconocimiento del rea de estudio en un mapa se plante buscar la ubicacin de la quebrada y los puntos de muestreo de ella, para lo cual se tuvo en cuenta los siguientes puntos de muestreo: ZONAS DE MUESTREO Coordenadas de cada uno de los puntos de muestreo - Punto 1 618'13.24" N 7533'29.01" O - Punto 2 618'14.01" N 7533'36.23" O - Punto 3 618'15.03" N 7533'43.32" O -Punto 4 618'15.83" N

7533'52.43 O

2. Caracterizacin del entorno de la quebrada Se realizar una caracterizacin mediante un anlisis descriptivo, donde se har un registro fotogrfico del entorno. Para lo cual la informacin ser registrada en las siguientes tablas .

EVALUACIN ASPECTOS FISICOQUMICOS Recoleccin de muestras: Se realizarn unas recolecciones de muestras en los puntos marcados estratgicamente en 4 zonas de la quebrada. Se recorrer la fuente y se irn poco a poco tomando las muestras de esta, para ello necesitaremos del uso de tapabocas, guantes y opcionalmente bata. Anlisis de muestras: despus de tomar las muestras, se va a hacer un estudio a cada una de ellas tanto biolgico y fisicoQumico teniendo en cuenta los siguientes aspectos

Analisis pH MTODO ELECTROMTRICO Principio: El principio bsico de la medicin electromtrica del pH es la determinacin de la actividad de los iones hidrgeno por medicin potencio mtrica, utilizando un electrodo de hidrgeno estndar y un electrodo de referencia. El electrodo de hidrgeno consta de un electrodo de platino a travs del cual se burbujea hidrgeno a una presin de 101 kPa. Debido a la dificultad para su utilizacin y el potencial de contaminacin del electrodo de hidrgeno, la fuerza electromotriz (FEM) producida en el sistema del electrodo de vidrio vara linealmente con el pH. Esta relacin lineal se describe graficando la FEM contra el pH de diferentes soluciones reguladoras. El pH de la muestra se determina por extrapolacin. Puesto que no se pueden medir actividades de iones aislados, tales como H+, el pH se define operacionalmente en una escala potencio mtrica INTERFERENCIAS El electrodo de vidrio est relativamente libre de interferencias de color, turbiedad, materia coloidal, oxidantes, reductores, o alta salinidad, excepto un error en sodio a un pH >10. Este error se reduce utilizando electrodos especiales con "bajo error en sodio".

Las mediciones de pH se ven afectadas de dos formas por la temperatura: por los efectos mecnicos debidos a los cambios en las propiedades de los electrodos, y por los efectos qumicos causados por los cambios del equilibrio. En primer lugar, la pendiente Nernstian aumenta con el ascenso de temperatura y los electrodos toman algn tiempo para lograr el equilibrio trmico. Esto puede ocasionar desviacin a largo plazo en el pH. Debido a que el equilibrio trmico afecta el pH, las soluciones reguladoras estndar de pH tienen un pH especfico a temperaturas indicadas. Es necesario reportar siempre la temperatura a la cual se mide el pH. EQUIPOS a) Medidor de pH, que consta de un potencimetro, un electrodo de vidrio, un electrodo de referencia y un dispositivo compensador de temperatura. El circuito se completa a travs del potencimetro cuando los electrodos se sumergen en la solucin de ensayo. Muchos medidores de pH tienen capacidad para leer pH o milivoltios y algunos tienen una expansin de escala, que permite leer hasta 0,001 unidades de pH, pero la mayora de instrumentos no son tan precisos. Para el trabajo de rutina se usa un medidor de pH preciso y reproducible a 0,1 unidad de pH, en un intervalo de 0 a 14, con modificacin por ajuste de temperatura. Electrodo de referencia. Consta de una semi-celda que proporciona un potencial constante de electrodo. Comnmente se usan calomel y plata: electrodos de cloruro de plata. Se encuentra disponible con varios tipos de uniones lquidas. La unin lquida del electrodo de referencia es crtica, ya que en este punto el electrodo forma un puente salino con la muestra o con el regulador y se genera un potencial de unin lquida que a su vez afecta el potencial producido por el electrodo de referencia. Las uniones del electrodo de referencia pueden ser de anillo cermico, cuarzo o fibra de asbesto, o de tipo manguito. El de tipo cuarzo es el que se utiliza ms comnmente. El tipo de fibra de asbesto no se recomienda para soluciones bsicas fuertes. Se deben seguir las recomendaciones del fabricante acerca del uso y cuidado del electrodo de referencia. Los electrodos no sellados se rellenan hasta el nivel apropiado con el electrolito correcto y se asegura que la unin est debidamente humedecida. b) Electrodo de vidrio. El electrodo sensor es un bulbo de un vidrio especial, que contiene una concentracin fija de HCl o una solucin de cloruro regulada que

est en contacto con un electrodo interno de referencia. Cuando se sumerge un nuevo electrodo en una solucin, la superficie externa del bulbo se hidrata e intercambia iones sodio por iones hidrgeno, para formar una capa superficial de iones hidrgeno. Esto, junto con el rechazo de los aniones por parte de los silicatos fijos cargados negativamente, produce en la interfaz vidrio-solucin, un potencial que es una funcin de la actividad del in hidrgeno en la solucin. Se encuentran disponibles varios tipos de electrodos de vidrio. La combinacin de electrodos incorporan, los electrodos de vidrio y de referencia en una sola sonda. Para la medicin de pH mayor de 10 se utiliza un electrodo con "bajo error de sodio" que pueda operar a altas temperaturas, debido a que los electrodos de vidrio estndar producen errneamente valores bajos. Para la medicin de pH inferior a 1, los electrodos estndar de vidrio producen errneamente valores altos: en su lugar, se utilizan electrodos de membrana lquida. c) Vasos de precipitado. De preferencia se utilizan vasos de polietileno o de TFE (tetrafluoetileno). d) Agitador. Se puede utilizar un agitador magntico recubierto de TFE o uno mecnico con un impulsor recubierto de plstico inerte. e) Cmara de flujo. Se utiliza para mediciones de flujo continuas o para soluciones poco reguladas. Temperatura Normalmente, las mediciones de temperatura se pueden realizar con un buen termmetro de mercurio graduado en Celsius. Como mnimo, el termmetro debe tener una escala marcada cada 0,1 C, grabada en el tubo capilar. El termmetro debe tener una capacidad trmica mnima que permita un rpido equilibrio. El termmetro se debe confrontar peridicamente con un termmetro de precisin certificado por un Laboratorio acreditado para tal efecto. Se debe utilizar, con su certificado de calibracin y grfico de correccin. Para operaciones en campo, se usa un termmetro con un estuche metlico para evitar su rotura. El termmetro se calibra mediante inmersin total o parcial. Un termmetro calibrado por inmersin total debe estar completamente inmerso hasta la escala grabada, exactamente antes del nivel de la escala.

Humedad relativa Medir la humedad relativa y la temperatura de roco de un recinto no es tarea fcil. La forma ms sencilla es medir lo que se conoce como temperatura de bulbo seco y temperatura de bulbo hmedo. La temperatura de bulbo seco, corresponde a la temperatura ambiente, la que se mide habitualmente con un termmetro de mercurio. Para medir la temperatura de bulbo hmedo se usa el mismo tipo de termmetro pero se realiza la siguiente operacin. Se rodea el bulbo del termmetro con una tela humedecida. El aire circulante en la atmsfera choca con el algodn humedecido y evapora parte del agua. Al evaporarse el agua se absorbe calor latente y esto se logra quitando calor al bulbo del termmetro. Entonces la temperatura del termmetro desciende continuamente hasta que el aire de los alrededores se satura, es decir, no admite ms agua. As la temperatura permanece en un valor fijo que se denomina temperatura del bulbo hmedo. El instrumento que mide ambas temperaturas se denomina psicrmetro Slidos totales la norma relaciona los siguientes mtodos: determinacin de slidos totales mediante secado de 103 C A 105 C slidos totales disueltos secados a 180 c, slidos totales en suspensin secados 103 c a 105 c, slidos fijos y voltiles incinerados a 500 c, slidos sedimentables slidos totales, fijos y voltiles en muestras slidas y semislidas. Alcalinidad total Se realizara por medio del kit de parmetros fsico qumicos y las intruccionesdel mismo. (Ideal 80 - 125 p.p.m) 1. Llenar el tubo grande hasta la linea inferior. 2. Agregar una gota del reactivo N4 y agitar. 3. Agregar una gotadel reactivo N5 y agitar. 4. Agregar el reactivo N 3 gota por gota y agitar despues decada gota. cuente el nmero de gotas agregadas hasta que el color cambie a anaranjado 5. El nmemro de gotas gastadas del reactivo N 3 multiplicado por 10 es igual a la alcalinidad total en p.p.m

Cloro libre Los reactivos sern tomados del Kit de parmetros Fisicoqumicos (Ideal 1.0 - 1.5 p.p.m) 1. Llenar el tubo pequeo hasta la lnea superior 2. Agregar una pastilla de DPD N1 3. Agitar el tubo varias veces hasta su disolucin 4. Comparar el color con los colores, del extremo izquierdo el cual indicar el nivel del cloro. Cloraminas Los reactivos se sacaran de el Kit de parmetros fisicoqumicos al igual que los envases donde sern depositados (Mximo 0.3 p.p.m) 1. tomar la misma muestra de la determinacin N1 2. Agregar una pastilla de DPD N3 e invertir el tubo varias veces hasta disolverlo. 3. Si el cloro rosado se oscurece hay cloraminas presentes. Comparar el color con los colores tipo cloro 4. restar de la lectura obtenida (cloro total) la lectura N 1 para obtenerlas cloraminas en p.p.m Demanda de cido Los reactivos se tomarn del Kit antes mencionado. (si el pH est arriba de 7.6) 1. Use la muestra de la determinacin N2 (pH) 2. Agrega al reactivo N3 gota por gota. invertir el tubo despus de cada gota para mezclar. 3. Cuando el color se torne igual al que indica el pH entre 7.4 y 7.6, refirase a la tabla de dosificacin de cido para determinar la cantidad de ACIDET que debe agregar. Demanda de lcali Al igual que los anteriores, se utilizar el Kit. (Si el pH esta abajo de 7.4) 1. Use la muestra de la determinacin N2 (ph9). 2. Agregar el reactivo N 3b gota por gota, invertir el tubo despus de cada gota para mezclar.

Contar el nmero de gotas agregadas. 3. Cuando el color se torne igual al que indica el pH entre 7.4 y 7.6, refirase a la tabla de dosificacin de alcalinidad para determinar la cantidad de ALKALIN que se debe agregar. Dureza del agua Con el Kit anteriormente mencionado (Ideal 150 a 250 p.p.m) 1. Llenar el tubo grande hasta la linea inferior. 2. Agregar 5 gotas del reactivo N6 y mezclar. 3. Agregar el reactivo N7 gota por gota y agitardespuesde cada gota. Cuente el nmero de gotas agregadas hasta que el color cambie a azul. 4. El Nmero de gotas gastadas del reactivo N7 multiplicado por50 es igual a la durezqa en p.p.m Analisis DQO La determinacin ms general para la DQO, es con dicromato potsico en exceso en medio cido, con la ayuda de catalizadores en presencia de sulfato de plata (Ag2SO4) que acta como agente catalizador, y de sulfato mercrico (HgSO 4) adicionado para remover la interferencia de los cloruros. El dicromato oxida la materia orgnica y la inorgnica presentes en la muestra, reducindose de Cr+6 a Cr+3. El ensayo se realiza a 150 C, a reflujo total durante 2 horas. Despus de la digestin, el exceso de dicromato potsico se valora con Sal de Mohr, utilizando como indicador la ferroina, pasando la disolucin de color verde a rojo. REACTIVOS a) Agua destilada. b) Dicromato Potsico (K2Cr2O7). c) Sulfato de Plata (Ag2SO4). d) Sulfato Mercrico (HgSO4) e) Ferroina. f) Sal de Mohr ([Fe(NH4)6H2O](SO4)2). g) Solucin estndar de dicromato potsico, 0,0417M. Disolver 12,259 g de K2Cr2O7, grado estndar primario, previamente secado durante 2 h a 103C, en agua destilada y diluir a 1000 ml.

h) Reactivo de cido sulfrico. Agregar con cuidado Ag2SO4 grado reactivo o tcnico, en cristales o en polvo, sobre H2SO4 concentrado en proporcin de 5,5 g de Ag2SO4/Kg de H2SO4 y 1 g de HgSO4, por cada 5,0 ml del reactivo de cido sulfrico. Dejar en reposo 1 o 2 das para la disolucin del Ag2SO4. i) Disolucin de Sal de Mohr (sulfato ferroso de amonio), 0,25 M. Disolver unos 98 g de Fe(NH4)2(SO4)26H2O en agua destilada; agregar 20 ml de H2SO4 concentrado, enfriar y diluir a 1000 mL. Estandarizar esta solucin diariamente con una solucin estndar de K2Cr2O7 as: Diluir 10,0 ml de la solucin estndar de K2Cr2O7 a aproximadamente 100 ml; agregar 30 ml de H2SO4 concentrado y enfriar. Titular con Sal de Mohr, en presencia de 0,10 a 0,15 ml (2 o 3 gotas) de indicador de ferroina. M de la Sal de Mohr = V K2Cr2O7 (ml) /V de la Sal de Mohr (ml) 0.25 INTERFERENCIAS Los compuestos alifticos voltiles de cadena lineal no se oxidan en cantidad apreciable, en parte debido a que estn presentes en la fase de vapor y no entran en contacto con el lquido oxidante; tales compuestos se oxidan ms efectivamente cuando se agrega Ag2SO4 como catalizador. Sin embargo, ste reacciona con los iones cloruro, bromuro y yoduro produciendo precipitados que son oxidados parcialmente. La interferencia ms comn son los cloruros, pues reaccionan con el dicromato potsico dando un error en la determinacin y por otra parte tambin reaccionan con el sulfato de plata, perdindose as catalizador en la reaccin. Para ello se aade a la disolucin sulfato mercrico (HgSO4) en exceso, que por acomplejamiento antes del proceso de reflujo con sulfato de mercurio (HgSO4), forma el cloruro mercrico, muy poco soluble en medio acuoso y elimina la interferencia. La tcnica no se debe usar para muestras que contengan ms de 2 000 mg de Cl/L; existen otros procedimientos diseados para determinar la DQO en aguas salinas. Tambin puede haber interferencias de nitritos a concentraciones elevadas y algunas especies inorgnicas reducidas. APARATOS. a)Estufa. b) Agitador magntico.

PROCEDIMIENTO El agua residual se analiza a temperatura ambiente, por lo que hay que dejarla un tiempo una vez sacada del refrigerador y agitarla para que sea una suspensin homognea y no haya errores en la medida. El agua residual se filtra en filtros de 0.45 mm antes de su determinacin. Una vez que el agua residual est filtrada, se aaden a los tubos, a los que se les ha introducido un ncleo de agitacin, 10 ml de muestra, 5 ml de la disolucin de dicromato potsico y 15 ml de la disolucin de reactivo de cido sulfrico. Tambin se hacen diluciones de la muestra con un volumen conocido, al igual que un blanco, aadindose despus los dems reactivos. Estos tubos se homogeinizan y se cierran con el tapn con cierre de tefln, introducindose en una estufa a 150 C, durante dos horas. Una vez terminada la reaccin, los tubos se dejan enfriar y se les aade unas dos gotas de ferroina y se valora el exceso de dicromato potsico con Sal de Mohr, hasta el cambio de color de verde a rojo. Para las muestras sin dilucin, los clculos se pueden determinar por esta frmula: DQO (mgO2/l) = (A-B) x M x 8000/ml de Muestra donde: A = ml Sal de Mohr usados para el blanco. B = ml Sal de Mohr usados para la muestra. M = molaridad de Sal de Mohr. Este mtodo puede tener hasta un 5% de error. Anlisis DBO LIMITACIONES E INTERFERENCIAS 1. Existen numerosos factores que afectan la prueba de la DBO, entre ellos la relacin de la materia orgnica soluble a la materia orgnica suspendida, los slidos sedimentables, los flotables, la presencia de hierro en su forma oxidada o reducida, la presencia de compuestos azufrados y las aguas no bien mezcladas. Al momento no existe una forma de corregir o ajustar los efectos de estos factores. 2. DBO carboncea contra nitrogencea. La oxidacin de las formas reducidas del nitrgeno como amoniaco y nitrgeno orgnico, mediada por los microorganismos, ejercen una demanda nitrogencea, que ha sido considerada como una interferencia en la prueba; sin embargo, esta puede ser eliminada con la adicin de inhibidores qumicos. Cuando se inhiba la

demanda nitrogencea de oxgeno, reportar los resultados como demanda bioqumica de oxgeno carboncea (DBOC5); cuando no se inhiba, reportar los resultados como DBO5. 1. Requerimientos de dilucin. Si el agua de dilucin es de baja calidad, su DBO aparecer como DBO de la muestra, efecto que ser amplificado por el factor de dilucin, y el resultado tendr una desviacin positiva. El mtodo de anlisis debe incluir agua de dilucin de verificacin y agua de dilucin como blanco para establecer su calidad, mediante la medicin del consumo de oxgeno con una mezcla orgnica conocida, generalmente glucosa y cido glutmico. La fuente del agua de dilucin puede ser: destilada a partir del agua de grifo, o agua libre de sustancias orgnicas biodegradables o bioinhibitorias tales como cloro o metales pesados. El agua destilada puede contener amonaco o compuestos orgnicos voltiles; el agua desionizada tambin puede estar contaminada con compuestos orgnicos solubles lixiviados del lecho de la resina; el uso de destiladores con conductos o accesorios de cobre en las lneas de agua destilada pueden producir agua con cantidades excesivas de cobre, que acta como biocida.

TOMA Y PRESERVACIN DE MUESTRAS 1. Las muestras para determinacin de la DBO se deben analizar con prontitud; si no es posible, refrigerarlas a una temperatura cercana al punto de congelacin, ya que se pueden degradar durante el almacenamiento, dando como resultado valores bajos. Sin embargo, es necesario mantenerlas el mnimo tiempo posible en almacenamiento, incluso si se llevan a bajas temperaturas. Antes del anlisis calentarlas a 20C. 1. Muestras simples. Si el anlisis se emprende en el intervalo de 2 h despus de la reco-leccin no es necesario refrigerarlas; de lo contrario, guardar la muestra a 4C o menos; reportar junto con los resultados el tiempo y la temperatura de almacenamiento. Bajo ningn concepto iniciar el anlisis despus de 24 h de haber tomado la muestra; las muestras empleadas en la evaluacin de las tasas retributivas o en otros instrumentos normativos, deben ser analizadas antes de que transcurran 6 h a partir del momento de la toma. 2. Muestras compuestas. Mantener las muestras a 4C o menos durante el proceso de composicin, que se debe limitar a 24 h. Aplicar los mismos criterios que para las muestras sencillas, contando el tiempo transcurrido

desde el final del perodo de composicin. Especificar el tiempo y las condiciones de almacenamiento como parte de los resultados. APARATOS 1. Botellas de incubacin para la DBO, de 250 a 300 mL de capacidad. Lavarlas con detergente, enjuagarlas varias veces, y escurrirlas antes de su uso. Para evitar la entrada de aire en la botella de dilucin durante la incubacin, se debe utilizar un sello de agua, que se puede lograr satisfactoriamente invirtiendo las botellas en un bao de agua o adicionando agua en el reborde cncavo de la boca de las botellas especiales para la DBO. Colocar una copa de papel o plstica o un capuchn metlico sobre la boca de la botella para reducir la evaporacin del sello de agua durante la incubacin. 2. Incubadora de aire o bao de agua, controlada termostticamente a 20 1C; excluir cualquier fuente luminosa para eliminar el proceso de produccin fotosinttica de OD. REACTIVOS 1. Solucin tampn de fosfato: Disolver 8,5 g de KH2PO4, 21,75 g de K2HPO4, 33,4 g de Na2HPO4.7H2O, y 1,7 g de NH4Cl en aproximadamente 500 mL de agua destilada y diluir a 1 L. El pH debe ser 7,2 sin posteriores ajustes. Si se presenta alguna seal de crecimiento biolgico, descartar este o cualquiera de los otros reactivos. 2. Solucin de sulfato de magnesio: Disolver 22,5 g de MgSO4.7H2O en agua destilada y diluir a 1 L. 3. Solucin de cloruro de calcio: Disolver 27,5 g de CaCl 2 en agua destilada y diluir a 1L. 4. Solucin de cloruro frrico: Disolver 0,25g de FeCl3.6H2O en agua destilada, diluir a 1L 5. Soluciones cida y alcalina, 1 N, para neutralizacin de muestras custicas o cidas. 1) Acido. A un volumen apropiado de agua destilada agregar muy lentamente y mientras se agita, 28 mL de cido sulfrico concentrado; diluir a 1 L. 2) Alcali. Disolver 40 g de hidrxido de sodio en agua destilada y diluir a 1 L. 1. Solucin de sulfito de sodio: Disolver 1,575 g de Na2SO3 en 1000 mL de agua destilada. Esta solucin no es estable y se debe preparar diariamente.

2. Inhibidor de nitrificacin: 2-cloro-6-(triclorometil)piridina. 3. Solucin de glucosa-cido glutmico: Secar a 103C por 1 h glucosa y cido glutmico grado reactivo. Disolver 150 mg de glucosa y 150 mg de cido glutmico en agua destilada y diluir a 1 L. Preparar inmediatamente antes de su uso. Solucin de cloruro de amonio: Disolver 1,15 g de NH4Cl en 500 mL de agua destilada, ajustar el pH a 7,2 con solucin de NaOH, y diluir a 1 L. La solucin contiene 0,3 mg de N/mL. PROCEDIMIENTO 1. Preparacin del agua de dilucin. Colocar la cantidad de agua necesaria en una botella y agregar por cada litro, 1 mL de cada una de las siguientes soluciones: tampn fosfato, MgSO4, CaCl2, y FeCl3. El agua de dilucin se puede inocular como se describe en 6.4; chequear y guardar como se describe en 6.2 y 6.3, de tal manera que siempre se tenga disponible. Llevar el agua de dilucin a una temperatura de 20C antes de su uso; saturarla con OD por agitacin en una botella parcialmente llena, por burbujeo de aire filtrado libre de materia orgnica, o guardarla en botellas lo suficientemente grandes con tapn de algodn, para permitir su saturacin. Emplear material de vidrio bien limpio para proteger la calidad del agua. Verificacin del agua de dilucin. Aplicar este procedimiento como una forma de verificacin bsica de la calidad del agua de dilucin. Si el agua consume ms de 0,2 mg de oxgeno/L se debe mejorar su purificacin o emplear agua de otra fuente; si se usa el procedimiento de inhibicin de la nitrificacin, el agua de dilucin inolculada, se debe guardar en un sitio oscuro a temperatura ambiente hasta que el consumo de oxgeno se reduzca lo suficiente para cumplir el criterio de verificacin. Confirmar la calidad del agua de dilucin almacenada que est en uso, pero no agregar semilla para mejorar su calidad. El almacenamiento no es recomendable cuando se va a determinar la DBO sin inhibicin de nitrificacin, ya que los organismos nitrificantes se pueden desarrollar en este perodo. Revisar el agua de dilucin para determinar la concentracin de amonio, y si es suficiente despus del almacenamiento; de lo contrario, agregar solucin de cloruro de amonio para asegurar un total de 0,45 mg de amonio como nitrgeno/L. Si el agua de dilucin no ha sido almacenada para mejorar su calidad, agregar la cantidad suficiente de semilla para producir un consumo de OD de 0,05 a

0,1 mg/L en cinco das a 20C. Llenar una botella de DBO con agua de dilucin, determinar el OD inicial, incubar a 20C por 5 das y determinar el OD final como se describe en 6.8 y 6.10. El OD consumido en este lapso no debe ser mayor de 0,2 mg/L y preferiblemente menor de 0,1 mg/L. Chequeo con glucosa-cido glutmico. Debido a que la prueba de la DBO es un bioensayo, sus resultados pueden estar muy influenciados por la presencia de sustancias txicas o por el uso de semillas de mala calidad. Muchas veces el agua destilada puede estar contaminada con cobre, o algunos inculos de aguas residuales pueden ser relativamente inactivos, y si se emplean tales aguas o inculos siempre se van a obtener bajos resultados. Controlar peridicamente la calidad del agua de dilucin, la efectividad de las semillas y la tcnica analtica, por mediciones de la DBO para compuestos orgnicos puros y muestras con adiciones conocidas. En general, para determinaciones de la DBO que no requieran una semilla adaptada, usar como solucin estndar de chequeo una mezcla de 150 mg de glucosa/L y 150 mg de cido glutmico/L. La glucosa tiene una velocidad de oxidacin excepcionalmente alta y variable, pero cuando es empleada con cido glutmico se estabiliza, y es similar a la obtenida con aguas residuales municipales. Si un agua residual contiene un constituyente mayoritario identificable, que contribuye a la DBO, usar este compuesto en remplazo de la mezcla de glucosa-cido glutmico. Determinar la DBO5 a 20C de una dilucin al 2% de la solucin estndar de chequeo glucosa-cido glutmico mediante las tcnicas descritas en los numerales 6.4 a 6.10. Evaluar los datos como se describe en la seccin de Precisin. Inoculacin. 1. 1. Origen de las semillas o inculo. Es necesario que en la muestra est presente una poblacin de microorganismos capaces de oxidar la materia orgnica biodegradable. Las aguas residuales domsticas no cloradas, los efluentes no desinfectados de plantas de tratamiento biolgico, y las aguas superficiales que reciben descargas residuales contienen poblaciones satisfactorias de microorganismos. Algunas muestras no contienen una poblacin microbiana suficiente (por ejemplo, efluentes industriales sin tratamiento, aguas desinfectadas, efluentes con elevada temperatura o con valores extremos de pH), por tanto deben inocularse por adicin de una poblacin adecuada de microorganismos. La semilla o inculo preferible es

el efluente de un sistema de tratamiento biolgico, en su defecto, el sobrenadante de aguas residuales domsticas despus de dejarlas decantar a temperatura ambiente por lo menos 1 h pero no ms de 36 h. Cuando se emplee el efluente de un proceso de tratamiento biolgico, se recomienda aplicar el procedimiento de inhibicin de la nitrificacin. Algunas muestras pueden contener materiales no degradables a las tasas normales de trabajo de los microorganismos; inocular tales muestras con una poblacin microbiana adaptada, obtenida a partir de efluentes sin desinfectar de un proceso de tratamiento biolgico de aguas residuales. Tambin se puede obtener la semilla en el cuerpo de agua receptor del vertimiento, preferiblemente de 3 a 8 Km despus del punto de descarga. Cuando no se disponga de ninguna de dichas fuentes del inculo, desarrollar en el laboratorio una semilla adaptada, por aireamiento continuo de una muestra clarificada de agua residual domstica y adicin de pequeos incrementos diarios de aguas residuales. Para obtener la poblacin microbiana inicial, usar una suspensin de suelo, un lodo activado, o una preparacin a partir de semilla comercial. Ensayar el rendimiento de la semilla haciendo pruebas de la DBO en las muestras hasta obtener una poblacin satisfactoria. Si los valores de la DBO aumentan con el tiempo hasta un valor constante, se consideran como un indicio de la adaptacin sucesiva de la semilla o inculo. 1. Control de inculos. Determinar la DBO del material inoculante como si se tratara de una muestra. De este valor y del conocimiento del dato del agua de dilucin determinar el OD consumido. Hacer las diluciones necesarias hasta obtener una disminucin de por lo menos el 50% del OD. La grfica de la disminucin de OD expresada en miligramos por litro contra los mililitros de inculo, origina una recta cuya pendiente debe interpretarse como la disminucin de OD por mililitro de inculo. La intercepcin de la recta con el eje de los valores de reduccin del OD representa la disminucin del oxgeno provocada por el agua de dilucin, valor que debe ser inferior a 0,1 mg/L (ver 6.8). Con el objeto de corregir el valor de OD consumido por una muestra, se debe restar a ste el consumido por el inculo. El consumo de OD del agua de dilucin ms el inculo puede estar en el intervalo de 0,6 a 1,0 mg/L. En el numeral 6.6 se describen las tcnicas para adicin de material inoculante al agua de dilucin, para dos mtodos de dilucin de muestras.

Blanco de agua de dilucin. Con el objeto de verificar la calidad del agua de dilucin sin inculo y la limpieza de los materiales, usar una porcin de la misma y llevarla junto con las muestras a travs de todo el procedimiento. El OD consumido por el agua de dilucin debe ser menor de 0,2 mg/L y preferiblemente no mayor de 0,1 mg/L. Pretratamiento de la muestra. 1. Muestras con alcalinidad custica o acidez. Neutralizar las muestras a pH entre 6,5 y 7,5 con una solucin de cido sulfrico (H2SO4) o hidrxido de sodio (NaOH) de concentracin tal que la cantidad de reactivo no diluya la muestra en ms de 0,5%. La menor dilucin de muestra no debe afectar el pH dado por el agua de dilucin inoculada. 2. Muestras con compuestos residuales de cloro. Evitar las muestras que contengan cloro residual; tomarlas antes del proceso de cloracin; si la muestra ha sido clorada pero no presenta cloro residual detectable, inocular el agua de dilucin; si hay cloro residual, declorar la muestra e inocular el agua de dilucin (ver 6.7). No ensayar las muestras que han sido decloradas, sin inocular el agua de dilucin. En algunas muestras, el cloro se elimina si se dejan 1 o 2 h a la luz, lo cual puede suceder durante el transporte y manejo de la muestra. Para muestras en las cuales el cloro residual no se disipa en un tiempo razonablemente corto, eliminar el cloro residual por adicin de solucin de Na2SO3. El volumen de Na2SO3 requerido se determina en una porcin de 100 a 1 000 mL de la muestra, previamente neutralizada, por la adicin de 10 mL de cido actico 1 + 1 o H2SO4 1 + 50, 10 mL de solucin de yoduro de potasio (10 g KI/100 mL), por cada 1000 mL de muestra; el volumen resultante se titula con solucin de Na2SO3 hasta su punto final, determinado por el indicador almidn-yodo. Se agrega a la muestra neutralizada, el volumen relativo de solucin de Na2SO3 determinado, se mezcla bien y se deja en reposo cerca de 10 a 20 minutos. Ensayar la muestra para determinar el cloro residual. (NOTA: Un exceso de Na2SO3 en la muestra, consume oxgeno y reacciona con ciertas cloraminas orgnicas que pueden estar presentes en muestras tratadas). 3. Muestras contaminadas con sustancias txicas. Las muestras de aguas residuales provenientes de industrias, por ejemplo electroqumicas, contienen metales txicos. Estas muestras requieren de estudios especiales y deben ser tratadas antes de medirles la DBO.

4. Muestras sobresaturadas con OD. En muestras procedentes de aguas muy fras o de aguas en que la produccin primaria es alta, los valores de OD a 20C suelen ser mayores de 9 mg de OD/L. Para prevenir prdidas de oxgeno durante la incubacin, llevar la temperatura de la muestra a 20C en una botella parcialmente llena, mientras se sacude fuertemente o se burbujea aire comprimido filtrado y limpio. 5. Ajuste de temperatura de la muestra. Llevar las muestras a 20 1C antes de hacer las diluciones. 6. Inhibicin de la nitrificacin. A las muestras contenidas en botellas de 300 mL se agregan 3 mg de 2-cloro-6-(triclorometil)-piridina (TCMP) o se puede agregar directamente al agua de dilucin para lograr una concentracin final de aproximadamente 10 mg de TCMP/L. (NOTA: Es posible que la TCMP se disuelva lentamente y permanezca flotando en la superficie de la muestra; algunas formulaciones comerciales se disuelven ms fcilmente pero no son 100% puras, por lo que se debe ajustar la dosificacin). Las muestras que requieren el procedimiento de inhibicin de la nitrificacin incluyen: efluentes tratados biolgicamente, muestras inoculadas con efluentes tratados biolgicamente, y aguas de ro, pero no se limitan necesariamente a estas. En el reporte de los resultados registrar el uso del procedimiento de inhibicin de la nitrificacin. Tcnica de dilucin. Los resultados ms acertados se obtienen con diluciones de muestra en las que los valores de OD residual son por lo menos 1 mg/L y un consumo de OD de por lo menos 2 mg/L despus de los 5 das de incubacin. La experiencia con muestras de diferente origen permiten optimizar el nmero de diluciones requeridas; la correlacin de la DQO con la DBO puede constituir una gua efectiva para la seleccin de las diluciones ms convenientes. Si no se dispone de esta metodologa, se pueden emplear las diluciones de 0,0 a 1,0 % para efluentes lquidos industriales, 1 a 5 % para efluentes industriales no tratados y decantados, 5 a 25 % para efluentes con tratamiento secundario o biolgico, y 25 a 100 % para corrientes contaminadas. Las diluciones se efectan en probetas y luego se transfieren a las botellas de DBO, o se preparan directamente en las botellas. Cualquiera de los dos mtodos de dilucin puede combinarse con cualquier tcnica para medicin de OD. El nmero de botellas a ser preparadas para cada dilucin depende de la tcnica de anlisis del OD y del nmero de rplicas

deseadas. Cuando sea necesaria la inoculacin, agregar la semilla directamente al agua de dilucin o a cada probeta o botella de DBO antes de la dilucin. La inoculacin en las probetas evita la disminucin de la relacin semilla:muestra cuando se hace un incremento en las diluciones. 1. Diluciones preparadas en probeta. Si se emplea el mtodo modificado de la azida para la medicin de OD, trasvasar cuidadosamente el agua de dilucin -inoculada si es necesario-, hasta llenar la mitad de una probeta de 1 a 2 L de capacidad por medio de sifn para evitar la entrada de aire. Agregar la cantidad deseada de muestra cuidadosamente mezclada y diluir al nivel apropiado con agua de dilucin; mezclar bien con una varilla tipo mbolo y evitar la entrada de aire. Trasvasar la dilucin a dos botellas de DBO por medio de sifn. Determinar el OD inicial en una de estas botellas. Tapar hermticamente la segunda botella, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. Si se determina el OD por el mtodo de electrodo de membrana, transvasar la mezcla de dilucin a una botella DBO por medio de sifn. Determinar el OD inicial en esta botella, descartar el residuo y llenar nuevamente la botella con la muestra diluida. Tapar hermticamente la botella, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. 2. Diluciones preparadas directamente en botellas DBO. Con una pipeta de boca ancha agregar el volumen de muestra deseado a diferentes botellas para DBO de volumen conocido. Agregar, a cada botella o al agua de dilucin, las cantidades apropiadas de semilla; llenar las botellas con suficiente agua de dilucin, inoculada si es necesario, de tal manera que al insertar el tapn se desplace todo el aire, sin dejar burbujas. Para diluciones mayores de 1:100 hacer una dilucin preliminar en una probeta antes de hacer la dilucin final. Preparar dos botellas de cada dilucin cuando se empleen los mtodos y odomtricos de volumetra para la medicin del OD; determinar el OD inicial en una de las dos botellas, tapar hermticamente la segunda botella, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. Si se emplea el mtodo de electrodo de membrana para la medicin de OD, preparar solamente una botella de DBO por cada dilucin; determinar el OD inicial en esta botella y reemplazar cualquier contenido desplazado con agua de dilucin para llenar la botella. Tapar hermticamente, con sello de agua, e incubar por 5 d a 20C. Enjuagar el electrodo de OD entre determinaciones para prevenir la contaminacin cruzada de las muestras.

Determinacin del OD inicial. Si la muestra contiene sustancias que reaccionan fcilmente con el OD, es necesario determinar el OD antes de llenar la botella de DBO con la muestra diluida. Si el consumo de OD inicial es insignificante, el perodo entre la preparacin de la dilucin y la medida del OD inicial no es crtico. Emplear el mtodo modificado de la azida (mtodo yodomtrico) o el mtodo de electrodo de membrana, para determinar el OD inicial en todas las muestras diluidas, testigos y, si se considera necesario, en los controles de semilla. Incubacin. Incubar a 20 1C las botellas que contienen las diluciones, los controles de semilla, los blancos de agua de dilucin y los patrones de glucosa-cido glutmico. Hacer un sello de agua como se describe en 6.7. Determinacin del OD final. Determinar el OD en las muestras diluidas, los blancos y los patrones despus de 5 das de incubacin como se describe en 6.8. CLCULOS 1. Cuando el agua de dilucin no ha sido inoculada: DBO5, mg/lt = (D1-D2)/P 1. Cuando el agua de dilucin ha sido inoculada: DB)5, mg/lt = {(D1-D2)-(B1-B2)*f }/P donde: D1 = OD de la muestra diluida inmediatamente despus de la preparacin, mg/L, D2 = OD de la muestra diluida despus de 5 d de incubacin a 20C, mg/L, P = fraccin volumtrica decimal de la muestra empleada, B1 = OD del control de semilla antes de la incubacin, mg/L (seccin 6.1.4), B2 = OD del control de semilla despus de la incubacin, mg/L (seccin 6.1.4), y f= proporcin de semilla en la muestra diluida a la semilla en el control de semilla = (% de semilla en la muestra diluida)/(% de semilla en el control de semilla). 1. Si el material inoculante se agrega directamente a la muestra o a las botellas de control: f=(volumen de semilla en la muestra diluida)/(volumen de semilla en el control de semilla) 1. Si se ha inhibido la nitrificacin, reportar los resultados como DBO5.

1. Los resultados obtenidos para las diferentes diluciones pueden ser promediados si se cumple con los requisitos de valores de OD residual de mnimo 1 mg/L y un consumo de OD de por lo menos 2 mg/L. Este promedio se puede hacer si no hay evidencia de toxicidad en las muestras menos diluidas o de alguna alteracin detectable. En estos clculos no se hace correccin por el OD consumido por el blanco de agua de dilucin durante la incubacin. Esta correccin no es necesaria si el agua de dilucin cumple el criterio de blanco estipulado en el procedimiento. Si el agua de dilucin no cumple este criterio, la correccin es difcil y los resultados sern cuestionables. PRECISIN 1. No existe un procedimiento aceptable para establecer la precisin y exactitud de la prueba de la DBO. El control de glucosa-cido glutmico prescrito est proyectado como un punto de referencia para la evaluacin de la calidad del agua de dilucin, la efectividad de la semilla, y la tcnica analtica.

EVALUACIN DE PARMETROS BIOLGICOS. Proceso de preparacin y anlisis de medios de cultivo. Extraccin de la Muestra se ir al sitio de estudio donde all se tomarn 3 muestras por punto de muestreo dando en total 12 muestras, estas son almacenadas en frascos de pequeos dentro de una nevera de icopor con hielo seco para tratar de mantener la temperatura ,despus son llevadas al laboratorio para meterlas en una nevera lo cual ayudar a estar en una temperatura constante. Medios de Cultivo - Un dia antes de ir a recoger las muestras a la quebrada se realizan los medios de cultivos nutritivos para los microorganismos, este medio se realiza: primero se coge el medio de cultivo(se recomienda utilizarlo en una concentracin de 20 gramos por 1000 mililitros) se pesan 4,8 gramos en la balanza sobre un papel de aluminio, despus en un erlenmeyer se adicionan 240 mililitros de agua desionizada , al tomarla la combinamos con el agar nutritivo en el mismo erlenmeyer, se lleva a un calentador donde se le adiciona un imn que ayude a revolver la mezcla. Luego de pasado 20 minutos de calentarse a una temperatura de 70 y antes de estar a punto de ebullicin se coge el erlenmeyer y se baja, se deja un momento para que la temperatura baje un poco alrededor de los 30,cuando la temperatura baja se lleva tapada con papel aluminio en la parte superior donde se encuentra la boquilla, acabado este proceso se lleva a la autoclave junto a las cajas de petri ya empacadas en papel craf para que se esterilice al 100% rea de trabajo Luego se puede disponer a servir en las cajas de petri,luego de programar la autoclave alrededor de unos 40 minutos ,mientras tanto se organiza el rea de trabajo, siempre asegurando de que est muy limpia y ordenado el lugar donde se trabajar. Se colocan dos mecheros a lado y lado, se riega alcohol en la parte donde har la siembra y por ltimo las personas que hacen la siembra deben de tener su respectiva bata, tapabocas y guantes para evitar el contacto con algn tipo de microorganismo.

Siembra en los Medios de Cultivo. Al terminar el autoclave de hacer su proceso de esterilizacin, se cogen las cajas de petri y la mezcla realizada anteriormente y se llevan al sitio de trabajo donde son colocadas de forma ordena, al instante de organizarlas se le quita el papel craf a las cajas de petri y se prenden los mecheros, la mezcla debe quedar tapado hasta el momento en el cual se vaya a regar el medio semislido en las cajas de petri, debe permanecer la boquilla del medio junto a la flama del mechero para que no se le introduzca ningn tipo de microorganismo, y se realiza as hasta terminar las 12 cajas de petri. Incubar Terminado el proceso de siembra, pasamos a meter las cajas de petri en la incubadora a una temperatura de 37, despus de varios das de estar en la incubadora se sacan y se observa las colonias y se hace el conteo(si tiene ms de 15 coleas formadoras significa a simple vista que est contaminada).Se coloca un asa microbiolgica a calentar en los mecheros para eliminar algn agente infeccioso que es presente y tambin para extraer un poco de las colonias presentes en las cajas de petri,cuando se coge el pedazo de colonia se frota en una placa con agua desionizada tratando de que quede lo mejor esparcida posible, luego se pasa suavemente por el mechero para que la muestra quede lo mejor fijada posible y se marca respectivamente con el nombre de la muestra. Cuando ya tenemos todas las muestras fijadas se le procede a realizarle un proceso llamado TINCIN DE GRAM,que lo que consiste es que nos va a colorear las placas de color rosado o gamas de rojo que nos va a indicar que las bacterias presentes son GRAM -, y cuando se pintan de colores como el morado o gamas de azules que nos indican que lo que se encuentra en la muestra es GRAM +, luego de todo esto se llevan a los microscopios donde ya son analizados por el ojo humano y se da una mejor clasificacin de las bacterias y su clasificacin. Clasificacin El proceso de clasificacin de protozoos consiste en coger la muestra de agua y con ayuda de un asa de laboratorio se calienta y se frota en una placa, luego de todo esto se lleva a los microscopios, siempre se tiene que tener en cuenta que la muestra no puede pasar de ms de un dia de sacada de la quebrada, porque si la dejamos mucho tiempo fuera de su ambiente los protozoarios se pueden morir y por siguiente perderemos el muestreo.

El anlisis biolgico se basar principalmente en microorganismos y bioindicadores presentes en las aguas.

la

clasificacin

de

Bioindicadores I, II, III En el recorrido de la quebrada se dividen 4 puntos de muestreos en los cuales el grupo de investigacin se bas para hacer el anlisis de la quebrada la tosca. En cada punto de muestreo se hacen pruebas fisico-quimicas de: agua, temperatura, luz, ph, oxgeno disuelto, entre otras. Estos parametros fisico-quimicos ayudarn a complementar y a deducir el grado de contaminacin de la quebrada La toscana Microorganismos en los puntos de muestreo Punto N1 Protozoarios, Algas (Verdes, transparentes y largas), Pulga de agua, Paramecio, Diatomea, Nematodos, Platenmito Punto N 2 No se encontr microorganismos, solo algunos residuos organicos Punto N3 Paramecios, Alga, Nematodos, Pulga de agua Punto N4 No Datos Puntos Punto N1 Punto N2 Punto N3 Punto N4 Muestra .1 Gram + Gram Gram Gram Muestra .2 No se encontro Gram Gram Gram Muestra .3 Gram Gram Gram Gram -

Mtodo de la membrana filtrante para el anlisis microbiolgico del agua PROCEDIMIENTO Se envi una muestra de agua de cada uno de los puntos de muestreo al Laboratorio de anlisis de aguas de la Institucin Universitaria Colegio Mayor de Antioquia. Se solicit la identificacin de coliformes totales y fecales en las muestras de agua. Donde el anlisis se realiz por el mtodo de filtracin por membrana que consiste en lo siguiente: 1. Colocar una membrana filtrante estril, bajo condiciones aspticas, sobre el centro del portafiltro, usando pinzas estriles, con la superficie cuadriculada hacia arriba. 2. Ensamblar el equipo, colocando el dispositivo de filtracin y asegurando con una pinza.

3. Verter 100 mL de la muestra de agua, en el portafiltro y proceder a filtrar. 4. Lavar el embudo con aproximadamente 100 mL de agua peptonada al 0,1%. 5. Remover la parte superior del portafiltro, y con una pinza estril transferir la membrana a la placa de Petri que contiene el medio de cultivo correspondiente al microorganismo que se va a identificar: Coliformes en agar endo, bacterias aerobias mesfilas en agar para recuento en placas, mohos y levaduras en agar Sabouraud y Pseudomonas aeruginosa en agar cetrimide. 6. Al colocar la membrana, evitar la formacin de burbujas entre sta y el medio de cultivo.

7. Esperar aproximadamente 20 minutos, para permitir la adhesin de la membrana al medio. 8. Con excepcin de las placas de agar Sabouraud, incubar las placas en forma invertida, a las diferentes temperaturas y tiempos, de acuerdo al microorganismo investigado:

1. Coliformes: Agar ENDO Incubacin 35C 2C x 24-48 h 2. Mohos y Levaduras: Agar Sabouraud Incubacin 25C 2C x 5-7 das 3. Bacterias aerobias Agar Recuento Incubacin 35C 2C x 24-48 h mesfilas en Placas 4. Pseudomonas aeruginosa Agar cetrimide Incubacin 35C 2C x 24-48 h

Tincin de gran PROCEDIMIENTO Recoger muestras.

Realizar la aplicacin de la muestra en las placas,asegurndose de dejar un espacio para coger las muestras. Dejar secar a temperatura ambiente o fijarlas utilizando un mechero.

Fijar la muestra con metanol durante un minuto o al calor (flameado 3 veces aprox.) Agregar azul violeta (cristal violeta o violeta de genciana) y esperar 1 minuto. Todas las clulas gram positivas se tien de color azul-prpura. Enjuagar con agua. Agregar lugol y esperar entre 1 minuto. Enjuagar con agua.

Agregar alcohol acetona y esperar 30 segundos (parte crtica de la coloracin). Enjuagar con agua.

Tincin de contraste agregando safranina o fucsina bsica y esperar 1 minuto. Este tinte dejar de color rosado-rojizo las bacterias Gram negativas.

Prueba confirmatoria en Agar EMB Para confirmar los resultados obtenidos desde el Colegio Mayor se realizaron agares EMB; este medio combina las frmulas de Holt-Harris y Teague con la de Levine, para obtener un mejor rendimiento en el aislamiento selectivo de enterobacterias y otras especies de bacilos Gram negativos. La diferenciacin entre organismos capaces de utilizar la lactosa y/o sacarosa, y aquellos que son incapaces de hacerlo, est dada por los indicadores eosina y azul de metileno; stos ejercen un efecto inhibitorio sobre muchas bacterias Gram positivas. PROTOCOLO Suspender 36 g del polvo en un litro de agua destilada. Reposar 5 minutos; mezclar, calentando a ebullicin durante 1 o 2 minutos hasta su disolucin. Esterilizar en autoclave a no ms de 121C durante 15 minutos. Enfriar a 45C y distribuir agitando suavemente. SIEMBRA En superficie, por estriado a partir de un inculo poco denso, para obtener colonias aisladas. En profundidad, para favorecer el desarrollo de clamidosporas. INCUBACIN De 24 a 48 horas a 35-37 C, en aerobiosis. RESULTADOS Microorganismos Escherichia coli ATCC 25922 Tipo de Colonia Verdosas con brillo metlico y centro negro azulado Mucosas, confluentes Incoloras Incoloras, pequeas, puntiformes Incoloras rosa prpura,

Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 Proteus mirabilis ATCC 43071 Enterococcus faecalis ATCC 29212 Shigella flexneri ATCC 12022

Salmonella typhimurium ATCC 14028

Incoloras

INTERVENCIN AMBIENTAL Gestin social Se busca brindar informacin a la comunidad por medio de charlas educativas y material de apoyo acerca del estado de la quebrada. Estas se piensan mostrar ante la accin comunal y Algunas Instituciones Educativas de la zona, todo esto con material de apoyo que supone ser Videos, video Juegos, Carteles y posters. Saneamiento. En base a los datos de la caracterizacin se darn medidas a travs de la biorremediacin para recuperar la fuente. Una de las medidas estaran cercanas a ser la implementacin de microalgas y/o utilizar el mismo proceso de depuracin del agua.

RESULTADOS OBTENIDOS, ANLISIS E INTERPRETACIN

rea de estudio La quebrada La toscana tiene su curso en los barrios: Santander, Tejelo, Boyac las brisas, Toscana, Plaza coln, se encuentra en la carrera 64D por la calle 109 aledaa a la planta de produccin ZEN en la comuna 5 de la ciudad de Medelln. La Quebrada la Toscana se encuentra localizada al sur de Bello, Al Norte de Medelln. Coordenadas del primer punto de visible de la quebrada despus de la canalizacin: 618'16.34" N 7533'53.24" O Coordenadas del punto de desembocadura de la quebrada la Toscana al ro Medelln: 618'12.46" N 7533'26.10" O Extensin total del rea investigada: 830 metros aproximadamente Puntos de muestreo: despus de realizar el reconocimiento del rea de estudio en un mapa se plante buscar la ubicacin de la quebrada y los puntos de muestreo. Los cuales quedaron definidos de la siguiente forma: ZONAS DE MUESTREO Coordenadas de cada uno de los puntos de muestreo Punto 1 618'13.24" N 7533'29.01" O Punto 2 618'14.01" N 7533'36.23" O Punto 3 618'15.03" N 7533'43.32" O Punto 4 618'15.83" N 7533'52.43 O

Seguimiento Ambiental y estado Actual de la quebrada En los ltimos aos, se le ha hecho un seguimiento a la quebrada la Toscana, desde la zona que termina la canalizacin en el barrio las Brisas hasta su desembocadura en el rio Medelln cerca del barrio Toscana. En ese espacio se pueden evidenciar los daos que le ha causado la contaminacin a la fuente, muchos de estos por causa del hombre. Contaminacin de la quebrada La quebrada evidencia un alto grado de contaminacin, lo cual ha provocado que gran parte de la vida que esta alguna vez tuvo haya desaparecido y slo queden algunos organismos en esta. Muchos de los factores que contaminan la quebrada son residuos slidos en general, adems de aguas negras que son desechadas all; todo esto influye a que la fuente se deteriore cada vez ms rpido Apropiacin de la quebrada por los habitantes A la fuente se le aplic una canalizacin que cubre una gran extensin de la misma, en la que debido a la degradacin de materia orgnica que se encuentra en el agua genera gases de alcantarilla. Si bien la quebrada no es una zona que se puede prestar para uso turstico o conocido popularmente como tirar charco, el rea presenta muchas basuras de las que se desconoce cmo pudieron llegar all Causas y efectos La contaminacin en la quebrada se debe al uso que le dan los habitantes aledaos a esta, los cuales arrojan aguas negras y basuras de todo tipo, causando que se generen varios organismos, los cuales pueden hacer algn dao a las personas. Los residuos orgnicos que se arrojan al agua crean un ambiente apropiado para el desarrollo de microorganismos los cuales ayudan a descomponer la misma materia orgnica creando malos olores que se van acumulando en gases de alcantarilla y an ms concentrados cido Sulfhdrico (H2Saq), el cual es txico, incoloro e inflamable.

Muchos residuos slidos que obstaculizan el paso del agua lo cual hace que esta ANLISIS DE PARMETROS BIOLGICOS Luego de la toma de muestras en cada uno de los puntos se procedi al anlisis de estas encontrndose lo siguiente: Punto N1 Protozoarios, Algas (Verdes, transparentes y largas), Pulga de agua, Paramecio, Diatomea, Nematodos, Platelminto. Bacterias Gram -.

PUNTO 1

Punto N 2 Se encontraron diferentes tipos de protozoarios como paramecios. Solo algunos residuos orgnicos. Bacterias Gram PUNTO 2

Punto N3 Paramecios, Alga, Nematodos, Pulga de agua. Bacterias Gram PUNTO 3

Punto N4 Protozoarios como paramecios. Bacterias Gram -. PUNTO 4

Se mandaron 2 muestras de agua de 100ml cada una a la Institucin Universitaria Colegio Mayor para comprobar la existencia de Coliformes totales y fecales. Los resultados de los anlisis de agua dio positivo para la presencia de tales microorganismos (ver documento anexo) en cada uno de los puntos de muestreo. Indicando que el agua de la quebrada presenta un alto grado de contaminacin y que no es apta para el uso de la comunidad en ninguna de sus actividades. Estos datos se corroboraron realizando cultivo en Agar EMB encontrndose las siguientes enterobacterias:

Tipo de Microorganismo Escherichia coli ATCC 25922 (Verdosas con brillo metlico y centro negro azulado Klebsiella pneumoniae ATCC 700603 (Mucosas, rosa prpura, confluentes) Proteus mirabilis 43071 (Incoloras) ATCC

Tipo de colonia

Enterococcus faecalis ATCC 29212 (Incoloras, pequeas, puntiformes) Shigella flexneri 12022 (Incoloras) ATCC

Salmonella typhimurium ATCC 14028 (Incoloras)

CULTIVOS EMB MEDIOS CARACTERIZACIO MICROORGANISMO FOTOS DE N S CULTIVO MEDIO UFC azules con - Escherichia 1(.1.2.3) forma indefinida, coli moradas con - Klebsiella forma granulada, pneumoniae rosadas en crculos y - Proteus translucidas mirabilis indefinidas, en - Enterococcus algunas se faecalis presenta un color metalizado y en - Shigella un medio (1.3) se flexneri present un - Salmonella hongo typhimurium MEDIO 2(.1.2.3) UFC mayormente moradas y rosadas circulares ms un color metalizado y algunas colonias incoloras indefinidas Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Enterococcus faecalis Shigella flexneri Salmonella typhimurium

MEDIO 3(.1.2.3)

UFC mayormente moradas y rosadas con morfologa indefinida y en algunos casos circulares, acompaadas de algunas colonias incoloras y un color metalizado

Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Enterococcus faecalis Shigella flexneri Salmonella typhimurium Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Proteus mirabilis Enterococcus faecalis Shigella flexneri Salmonella typhimurium

MEDIO 4(.1.2.3) UFC de mayormente moradas y rosadas de forma indefinida con algunas colonias incoloras mas otras azules y un color metalizado. -

ANLISIS PARMETROS FISICO-QUMICOS Al momento se han realizado los siguientes anlisis de los siguientes parmetros fisicoqumicos: MEDICIN DE PARMETROS FSICO-QUMICOS POR MEDIO DE COLORIMETRA ZONA 1 ZONA 2 ZONA 3 ZONA 4

PARME MUE MUE MUE MUE MUE MUE MUE TROS STRE STRE STRE STRE STRE STRE STRE O1 O2 O3 O1 O2 O3 O1 Cloro 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 Libre Clorami 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 nas pH 7.7 8 7.85 7.8 7.7

MUE MUE MUE MUE MUE STRE STRE STRE STRE STRE O2 O3 O1 O2 O3 0.05 0.05 7.8 0.05 0.05 7.7 0.1 0.05 7.6 0.1 0.05 7.4 0.09 0.5 7.6

Deman 1 da de gota cido Deman da de Alcal 14 gota Alcalini s: dad 140 Total p.p. m. 3 gota s: Dureza 150 p.p. m. OBSERV MUESTREO

2 1 gota gota s

1 1 1 1 gota gota gota gota

13 gota s: 130 p.p. m. 3 gota s: 150 p.p. m. 1:

15 gota s: 150 p.p. m. 2 gota s: 100 p.p. m. MUESTREO

14 gota s: 140 p.p. m. 3 gota s: 150 p.p. m.

17 19 gota gota s: s: 170 190 p.p. p.p. m. m. 3 3 gota gota s: s 150 150 p.p. p.p. m. m. MUESTREO

13 gota s: 130 p.p. m 3 gota s: 150 p.p. m. 2: El

16 22 gota gota s: s: 160 220 p.p. p.p. m. m. 3 3 gota gota s: s: 150 150 p.p. p.p. m. m. MUESTREO

14 gota s: 140 p.p. m. 3 gota s: 150 p.p. m. 2: El

ACIONE Disminuye S: presencia espuma.

la 1: Se nota de la presencia de espuma. MUESTREO 2: Al MUESTREO 2: Al realizar la realizar la muestra del 18 muestra del 18 de octubre no se de octubre no se pudo continuar pudo continuar debido a debido inconvenientes climaticos al crecimiento al crecimiento de la quebrada de la quebrada por las fuertes por las fuertes lluvias que se lluvias que se presentaron. presentaron.

muestreo se muestreo se realiz el 18 de realiz el 18 de Octubre. Octubre.

Se not la presencia de mosquitos y abundante espuma al final del punto.

Resultados de la primera investigacin Eva/Cavas Oxigeno Humedad Temperatura del ambiente Temperatura del agua Punto 1 Hr: 11:15 am 8.2 mg/l Hr: 11:00 am 70 Hr: 11:05 am 38 C Hr: 11:00 am Punto 2 Hr: 11:40 am 9.2 mg/l Hr: 11:43 am 64.7 Hr: 11:47 am 36 C Hr: 11:50 am 22.3 C Punto 3 Hr: 1:13 pm 10.0 mg/l Hr: 1:06 pm 56 Hr: 1:15 pm 28 C Hr: 1:00 pm 22.1 C Punto 4 Hr: 12:30 pm 8.5 mg/l Hr: 12:22 pm 53.9 Hr:12:35 pm 26 C Hr:12:20 pm 21.2

Ph Luz

Hr: 11:00 am 8.1 Hr: 11:10 am 1K

Hr: 11:50 am 8.8 Hr: 11:52 am 1385

Hr: 1:00 pm 8.0 Hr: 1:10 pm 1200

Hr: 12:20 pm 7.8 Hr: 12:27 pm 1100

Anexo I. anlisis de coliformes totales y fecales realizado a cada uno de los puntos de muestreo

CONCLUSIONES Hay sectores de la quebrada que se encuentran descuidados y dan mal uso de ella los habitantes del sector La presencia de coliformes totales y fecales en un rango mayor de 200 UFC/100 mL indica que el agua de la quebrada no es apta para el consumo y para uso en actividades domsticas. Aunque el nivel de oxgeno disuelto est por encima del mnimo para el sustento para la vida se debe realizar un seguimiento ms riguroso de este parmetro en diferentes momentos del da que permita llegar a una conclusin certera sobre los niveles en todo el trayecto de la quebrada.

PROCESAMIENTO Y ANLISIS DE LA INFORMACIN Estado Actual: Seguimiento Ambiental En los ltimos aos, se le ha hecho un seguimiento a la quebrada la Toscana, desde la zona que termina la canalizacin en el barrio las Brisas hasta su desembocadura en el rio Medelln cerca del barrio Toscana. En ese espacio se pueden evidenciar los daos que le ha causado la contaminacin a la fuente, muchos de estos por causa del hombre. Contaminacin de la quebrada La quebrada evidencia un alto grado de contaminacin, lo cual ha provocado que gran parte de la vida que esta alguna vez tuvo haya desaparecido y slo queden algunos organismos en esta. Muchos de los factores que contaminan la quebrada son residuos slidos en general, adems de aguas negras que son desechadas all; todo esto influye a que la fuente se deteriore cada vez ms rpido Apropiacin de la quebrada por los habitantes A la fuente se le aplic una canalizacin que cubre una gran extensin de la misma, en la que debido a la degradacin de materia orgnica que se encuentra en el agua genera gases de alcantarilla. Si bien la quebrada no es una zona que se puede prestar para uso turstico o conocido popularmente como tirar charco, el rea presenta muchas basuras de las que se desconoce cmo pudieron llegar all Causas y efectos La contaminacin en la quebrada se debe al uso que le dan los habitantes aledaos a esta, los cuales arrojan aguas negras y basuras de todo tipo, causando que se generen varios organismos, los cuales pueden hacer algn dao a las personas. Los residuos orgnicos que se arrojan al agua crean un ambiente apropiado para el desarrollo de microorganismos los cuales ayudan a descomponer la misma materia orgnica creando malos olores que se van acumulando en gases de alcantarilla y an ms concentrados Acido Sulfhdrico (H2Saq), el cual es txico, incoloro e inflamable.

Muchos residuos slidos que obstaculizan el paso del agua lo cual hace que esta

CRONOGRAMA Y ACTUALIZACIN DE TABLA DE RECURSOS Recursos Valor Rubro Justificacin Cantida d 7 un ita rio 20.000 Valor tot al 140.000 Entidad que financia (fuente) Ondas

Camisas

Identificacin sobre las dems personas. Para manejar el agua sin ningn riesgo. Para evitar el contacto con el agua. evitar el contacto con el agua mantener orden en las muestras. tomar apuntes del proyecto.

Guantes de ltex

5 pares

1000

10000

Ondas

Batas

25.000

125.000

Ondas

Botas

Para

5 pares

7.000

35.000

Ondas

Caja

de muestra s

Para

5.000

5.000

Ondas

Cartilla

Para

3.000

3.000

Ondas

Portaminas

Para anotar los datos y observacio nes. Para recoger los residuos del quebrada. Para guardar las muestras. Para borrar los errores tomados en la cartilla. evitar intoxicaci n.

2.000

4.000

Ondas

Cesta de basura Tubo de ensayo

3.000 10 10 2 1.000 400

30.000

Ondas

10.000 800

Ondas Ondas

Borrador

Tapa bocas

Para

1.000

5.000

Ondas

Medios de cultivo Placas de petri

Crecimiento microorgan ismos Crecimiento microorgan ismos

400000

400000

Feria

50

4000

200000

I.E. Loyola

Total financia do por la Feria CT+I

400.000

Total financia do por la instituci n educati va Total financia do por otras entidad es Total

200.000

367.800

Ondas

967.800

Cronograma Actividades JUNIO JULIO AGOSTO SEPTI EMBR E Semanas 1 2 3 4 1 x x x x 2 3 4 1 x x x x 2 3 4 1 x x x x 2 X Bsqueda de x informacin. Reconocimie nto rea de X estudio. Manejo de equipos. (Sensores, microscopios) OCTU BRE

3 4 1 x x x

2 x

3 4 x x

X X

Clase sobre microorganis X mos y medio cultivo Recoleccin de muestras. Anlisis de muestras.

X X

X X

X X

Sembrado de muestras Resultados finales. Organizacin exposicin X para la Feria zonal y clasificatoria a la feria CT+I Feria CT+I, Parque Explora. Visita de consulta X bibliogrfica, Biblioteca mi rio Asesora proyecto, antes de la feria CT+I Visita a Zenu Visita rea a el

X X

metropolitana

ASPECTOS DE SEGURIDAD Siempre utilizar guantes a la hora de utilizar las muestras. Siempre utilizar bata a la hora de analizar las muestras. Siempre utilizar los equipos adecuadamente siempre cumplir las normas de cada lugar. Siempre utilizar tapabocas para muestras de agua. Tener precaucin a la hora de ir a recorrer la quebrada. CONSIDERACIONES TICAS. - Responsabilidad social: Con este proyecto se busca caracterizar la poblacin y microorganismos en el agua de la quebrada la Toscana, Tambin la concientizacin ambiental sobre esta en los habitantes aledaos. No se afecta ningn hbitat, por el contrario se mejora su condicin ambiental y se reducen los residuos y la contaminacin visual en la quebrada la toscana.

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS Referencias bibliogrficas ALBERTO RAN CARDONA, THO MACHADO CARTAGENA, JHON JAIRO RAMREZ RESTREPO, GUSTAVO ADOLFO LENIS. El anlisis de agua: Aspecto Biolgico y ALVARO WILLIS TORO, NORA E. VILLEGAS, MARA VICTORA BLANDN, MARA CECILIA GONZLEZ. 2002. CENTRO DE INVESTIGACIONES AMBIENTADA Y INGENIERIA UDEA. Universidad de Medelln. Tomado eL 11/08/13. Fisicoqumico del ri Medelln. Instituto Mi ro. Investigadores Comit: Biolgico, Ciencias exactas y Naturales. Investigadores Comit: Fisicoqumico. LENORE S. CLESCERI WPCF, ARNOLD E. GREENBERG APHA, R.RHODES. 1992. TRUSELL. MTODOS NORMALIZADOS Para el anlisis de aguas potables y residuales. Tomado de URL Recurso: http://es.scribd.com/alejandroh_318/d/86537636-Metodos-para-. OXGENO DISUELTO DE NAVARRA. EL AGUA EN NAVARRA. Tomado de http://www.navarra.es/home_es/Temas/Medio+Ambiente/Agua/Documentacion/P arametros/OxigenoDisuelto.htm.

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