MORFOLOGA DEL POLEN Y LA ULTRAESTRUCTURA DE LAS ESPECIES SELECCIONADAS DE ANNONACEAE

INTEGRANTES: LINDAYS ALFONSO ALFONSO DIANA AMEZQUITA ALEXANDRA BALAGUERA ADRIANA BERMDEZ OSCAR LEONARDO ESTEPA 201220301 201222620 201220391 201220294 201220311

UNIVERSIDAD PEDAGGICA Y TECNOLGICA DE COLOMBIA ESCUELA DE INGENIERA AGRONMICA BOTNICA TAXONMICA 2013

1. PREGUNTA DE INVESTIGACIN Que caracteres morfolgicos pueden ser utilizados para identificar la diversidad del polen en la familia Annonaceae y cul ha sido su evolucin? 2. HIPOTESIS El polen es una de las ms valiosas fuentes de evidencia para el anlisis filogentico, la comparacin de caracteres del polen en la familia de las Annonaceae como la variabilidad en cuanto a la forma: los granos de polen son elpticos con un surco o bisurcados, regulares, lisos, rugosos; el tipo de abertura: Algunos son globosos sin abertura visible o cualquier otra indicacin de polo; El tectum es generalmente continuo y del mismo espesor de la zona cercana a la apertura del grano, El infratectum puede ser granular, o columelas y grnulos entremezclados. Y la ubicacin y la estructura de la intina: La intina es doble capa y consta de una entexina con muchos componentes vesiculares-fibrilares con extensiones tubulares, y una endintina ms homognea. La endexina es distinta y delgada, que vara ligeramente en espesor en algunas especies. Se plantea la posibilidad de inferir que a partir del polen se puedan ver sus caractersticas morfolgicas y la estructura y por ende la evolucin de la familia annoanaceae. 3. MATERIALES Material fresco: Nueve especies, una que incluye dos variedades, que representan a siete gneros de Annonaceae. Colecciones vivas en el sur de China Botanical Garden o en el medio silvestre. Granos de polen fresco: estambres maduros de preanthetic. SEM (Microscopa electrnica de barrido) JFC-1600 Coater fina automtica (JEOL Tapones de latn sin tratamiento, oro, y SEM JSM 6360LV-(JEOL). TEM (Microscopa electrnica de transmisin): 1% de glutaraldehdo, tetrxido de osmio al 1%., acetona (30-100%), resina epoxi, microtomo Leica Ultracut, acetato de uranilo (1%), citrato de plomo y TEM JEM-l00CXII.

4. METODO POLEN PARA SEM: Se coloc directamente en Tapones de latn sin tratamiento, recubiertos con oro utilizando un JFC-1600 Coater fina automtica (JEOL, Tokio, Japn) y se observaron con un SEM JSM 6360LV-(JEOL) operado a 10-15 kV. POLEN PARA TEM: Los granos de polen se prefija con 1% de glutaraldehdo durante 24 h, y se fijaron posteriormente con tetrxido de osmio al 1%. El polen se deshidrataron en una serie de acetona (30-100%), embebido en resina epoxi, se seccionaron a un intervalo de 80 nm en-S 2 un microtomo Leica Ultracut, y se tieron con acetato de uranilo (1%) durante 15 min seguido de citrato de plomo para3 min. Las secciones fueron examinadas con un TEM JEM-l00CXII. 5. RESULTADOS La LA (longitud del eje ms largo) de granos de polen analizados es 26-90 lm y el menor eje ecuatorial es 19-56 lm. UNIDADES DE POLEN: El polen de la mayora especies examinadas se desprende como granos individuales o mnadas. Las dadas se observaron slo en Cananga. FORMA DE LOS GRANOS DE POLEN: son de forma elptica con un surco en la cara distal (monosulcados) en A Alphansea y A hexapetalus. Granos de polen Disulcados slo se observaron en Polyalthia suberosa. Otros son esferoidales sin apertura visible o indicacin de un poste en D chinensis, F oldhamii, F retusum, U gandiflora y U microcarpa. LA ORNAMENTACIN DE LA PARED DE POLEN: Es variable: PSILADA, La superficie distal es lisa y microperforada en Cananga odorata y C. odorata var. Fruticosa; MICRORREGULADA en Alphonsea monogyna (localmente liso), hexapetalus Artabotrys y Fissistigma retusum; EQUINADA en Chinensis Desmos; MICROVERRUGADA: se encontr en Polyalthia suberosa; ESCRABIDA en Uvaria microcarpa y GRUESO RUGULADA se observ en Fissistigma oldhamii y Uvaria grandiflora. PARED DEL POLEN: Se compone tpicamente de dos capas: UNA EXINA EXTERIOR, generalmente esculpida; La exina consta de dos capas: La ectexina (capa externa de la exina), que a su vez se divide en tres capas:

* Tectum: es continuo y del mismo espesor sobre el grano entero excepto la zona de la abertura, hacia la cual los elementos exina se reducen y son difciles de distinguir. * Infratectum: puede ser de textura granular o de una estructura mixta con columelas y grnulos. * y la capa de pie: La forma de la capa de pie es muy variable de una a cuatro foliaciones suavemente onduladas (A. monogyna, P. suberosa), ms de dos y no foliaciones muy retorcidas (A. hexapetalus), ms de dos foliaciones retorcidas (F. oldhamii, U . microcarpa), y una capa masiva sin foliaciones (C. odorata var. fruti-cosa). En chinensis D. La endexina (Capa interna de la exina), Bajo la capa de pie, es distinta y delgada, y vara ligeramente en espesor, a veces es visible con propiedades de tincin diferentes (A. monogyna, A. hexa-petalus, D. chinensis, P. y suberosa), mientras es vagamente distinguible en C. odorata var. Fruticosa y U. micro carpa. INTINA, LA CAPA INTERIOR:En esta pueden distinguirse dos capas con diferentes densidades de electrones: La exintine, La capa externa, posee muchas vesculas fibrilares, componentes con extensiones tubulares. La capa interna, la endintina, es ms homogneo.

La intina es dos a tres veces ms gruesa que la exina (por ejemplo Alphonsea monogyna, D. barbilla-ensis, P. suberosa) o es casi igual a la exina en espesor (por ejemplo U. microcarpa, F. retusum). A veces, el intina se espesa en la zona apertural (por ejemplo Alphonsea monogyna, Artabotrys hexapetalus, D. chinensis, P. suberosa) 6. DISCUCIN DE RESULTADOS Tres tipos de apertura se han observado en Annonaceae: monosurcados, inaperturados y disurcados los cuales corresponden a una interrupcin total de la exina, de estos hasta ahora reportados en Sapranthus, Polyalthia algunos, y algunos gneros endmicos de Australia en el clado miliusoid (Waha y Morawetz 1988; Mols et al 2004; Xue et al. 2011). En Annonaceae la mayora de los surcos corresponden con una interrupcin total de la exina. Cualquiera que sea la naturaleza de la estructura exina (Le Thomas 1980). En general la exina carece de endexina y est compuesto en su totalidad por un ectexine debido a que hay variacin en el grosor de la exina o intina alrededor del grano (Le Thomas y Lugardon 1972, 1976; Lugardon y Le Thomas 1974). y por lo tanto es muy difcil distinguir una zona de germinacin. En el presente estudio, una capa de electrones de alta densidad y distinta, que se encuentra en todas las especies examinadas por debajo de la capa de pie se interpreta como endexine, excepto F. oldhamii yF. retusum, en las que no se detect. Esta capa se encuentra en lminas y no est limitada a la regin de germinacin, o es delgada y no siempre continua.

La existencia de una endexina en las primeras angiospermas divergentes fue y sigue siendo un tema de discusin (Doyle et al, 1975;. Walker 1976; Gabarayeva 1995, Xu y Kirchoff 2008). En Annona-ceae, pocas especies se informa, tienen un endexine (Hesse et al, 1985;. Gabarayeva 1995, este estudio). El trabajo adicional es necesaria para determinar si la endexine es ancestral o representa un retroceso en Annonaceae. En este estudio, la capa de pie se utiliza en lugar de la capa basal, despus de la interpretacin por Lugardon y Le Thomas (Lugardon y Le Thomas 1974; Le Thomas y Lugardon 1976;. Le Thomas et al 1994), y Punt et al. (2007). En las especies examinadas de Uvaria y Fissistigma, la capa de pie est foliada, mientras que en A. hexape-astrgalo, C. odorata var. fruticosa, D. y P. chinensis Sube-rosa, la capa de pie es homogneo, muy delgado o masiva. En cualquier caso, la capa de pie tiene la misma densidad de electrones como el ectexine. La capa de base masiva de C. odorata var. fruticosa es muy similar a la de Magnoliaceae (Xu y Kirchoff 2008). De acuerdo con Doyle y Le Thomas (2012), la condicin primitiva en Annonaceae no es una ausencia de foliaciones, sino ms bien la presencia de uno o dos foliaciones generalmente discontinuas, como en Anaxagorea. La intina es de dos capas en la mayora de Magnoliales, y por lo general de tres capas en Magnoliaceae y Himantandra-ceae (Sampson 2000; Xu y Kirchoff 2008). En Annonaceae, la intina es homognea o dos capas (ocasionalmente tres capas).La intina es variable en espesor, a menudo ms grueso de la exina, a veces tres o cuatro veces la exina (P. suberosa). La intina juega un papel esencial en la caracterizacin de apertura, especialmente en los tipos de polen sin diferenciacin exina (Waha y Hesse, 1988). En F. oldhamii, una abertura no se observ en las imgenes SEM (Fig. 1e), pero slo una zona con la presente intina y sin exina podra ayudar a elucidar la presencia de una zona de germinacin posible. 7. CONCLUSIONES El presente estudio confirma la diversidad de tipos de apertura, la arquitectura pared polen y los tipos de unidades de polen que ocurren dentro del Annonaceae. Los granos de polen son di surcados, mono surcados o no tienen abertura visible. El infratectum puede ser granular, o columelas y grnulos se mezclan juntos. Una posible endexina est presente y no est restringiendo a la regin de germinacin. Tambin se observ una endexina laminosa. La capa de pie es foliada u homognea. El trabajo adicional es necesaria para determinar si la presencia de un endexina es ancestral o representa una inversin de Annonaceae.