CARACTERIZACIN GENTICA DE UNA RAZA CAPRINA EN PELIGRO DE EXTINCIN: MALLORQUINA

GENETIC CHARACTERIZATION OF THE ENDANGERED MALLORQUINA GOAT BREED Avellanet, R.1, C. Rodellar1, I. Martn-Burriel1, R. Osta1, A. Pons2 y P. Zaragoza1
Laboratorio de Gentica Bioqumica (LAGENBIO). Universidad de Zaragoza. C/ Miguel Servet, 177. 50013 Zaragoza. Espaa. http://www.unizar.es/lagenbio. Autor correspondencia: rosaat@unizar.es 2 Instituto de Biologa Animal (IBAB). Gobierno Balear. Esperanto, 8. Son Ferriol. 07198 Palma de Mallorca. Espaa.
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PALABRAS

CLAVE ADICIONALES

ADDITIONAL KEYWORDS
Microsatellite. Conservation.

Microsatlite. Conservacin.

RESUMEN
La raza caprina Mallorquina, localizada en la isla de Mallorca, actualmente se encuentra en peligro de extincin. Dada la importancia de conservar este patrimonio animal irreemplazable, el objetivo del presente estudio es su caracterizacin gentica mediante 31 marcadores moleculares de ADN de tipo microsatlite. Los resultados indican que la poblacin es estable genticamente y con cierto nivel de consanguinidad, lo que acenta la necesidad de continuar trabajando en su programa de conservacin. consanguinity, which increases the need to continue working in the breed conservation programme.

INTRODUCCIN

SUMMARY
The Mallorquina goat breed, located at the Mallorca Island, actually it is considered in danger of extinction. Because of the importance of conserve this irreplaceable animal inheritance, the aim of the present work was to carry out the genetic characterization of the Mallorquina breed, through 31 DNA microsatellite markers. The results indicated that this population is genetically stable and with a medium level of genetic variability. Moreover, it was found a medium level of

En un informe reciente, la FAO advierte de que en los ltimos aos han desaparecido ms de 700 razas de animales domsticos y, lo que es ms preocupante, unas 1400 razas en la actualidad se encuentran en peligro de extincin. La regresin de la ganadera en los pases desarrollados, el cese de la actividad agrcola en las zonas rurales o la despoblacin de las regiones ms desfavorecidas son algunos de los factores que estn acrecentando la prdida de recursos genticos animales a nivel mundial. Existen mltiples razones para conservar estas razas, pero una de las ms relevantes es la importancia del potenArch. Zootec. 56 (Sup.1): 379-382. 2007.

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cial gentico que representan, de su diversidad gentica, como se seal en la cumbre de las ONU celebrada en Ro de Janeiro en 1992. En el presente trabajo se pretende estudiar la raza caprina Mallorquina, que se localiza en Mallorca, en la Sierra de Tramuntana y en las Pennsulas de Formentor, Alcudia y Art. Es una raza de talla media, con perfil convexo y un claro dimorfismo sexual que afecta al tamao, capa, encornadura y presencia de barba . El censo de esta poblacin caprina es muy reducido y distribuido en unos pocos rebaos, por lo que est catalogada como raza en peligro de extincin. Adems, el aislamiento geogrfico de esta poblacin es una barrera que dificulta en gran medida su recuperacin, por lo que es necesaria la realizacin de un estudio gentico que ponga de manifiesto su sitacin y sirva de base para la instauracin de un programa de conservacin. Para este fin, se han utilizado marcadores moleculares de ADN de tipo microsatlite, ya que stos han sido ampliamente utilizados en estudios que tenan como objetivo ltimo la conservacin de razas amenazadas. Estos marcadores sirven como indicadores de la diversidad gentica de la poblacin, permiten determinar si se encuentran en situacin de equilibrio gentico, informan sobre los niveles de consanguinidad poblacional, etc.
MATERIAL Y MTODOS

Se estudiaron 50 animales procedentes de seis ganaderas. En cada ganadera se seleccionaron de 5 a 10 animales, representativos de la raza y
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elegidos al azar a los que se realiz una extraccin sangunea mediante puncin en vena yugular. Se extrajo el ADN de cada muestra mediante un kit comercial de Amersham Biosciences (GFXTM Genomic Blood DNA Purification Kit Amersham Biosciences). Se analizaron 31 loci microsatlite localizados en 16 cromosomas por muestra, correspondientes a los utilizados en el Proyecto Europeo Econogene (http://lasig.epfl.ch/projets/econogene/), que fueron tratados y visualizados mediante electroforesis capilar en un secuenciador automtico ABI PRISM 3130. Para definir los alelos se utiliz el marcador interno de tamao LYZ250 y el software GENEMAPPER v.3.7. El clculo de las frecuencias allicas para cada locus se realiz mediante el programa GENEPOP (Raymond y Rousset, 1995), que tambin sirvi para analizar el equilibrio de HardyWeinberg y comprobar as la posible existencia de diferencias estadsticamente significativas entre los heterocigotos observados y los esperados en la poblacin. El nmero medio de alelos por locus , las heterocigosidades medias observada y esperada y el porcentaje de loci polimrficos se calcularon mediante el programa BIOSYS-2 (Swofford y Selander, 1999). La riqueza allica y el coeficiente de consanguinidad se obtuvieron con el programa FSTAT (Goudet, 2000). Se evalu la posible reduccin drstica de la poblacin, tambin denominada cuello de botella, a travs del programa BOTTLENECK (Cornuet y Luikart, 1997), segn el modelo recomendado por Di Rienzo et al. (1994)

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para el anlisis de microsatlites. Adems, este programa tambin sirvi para estudiar la existencia de forma significativa de loci con exceso o defecto de heterocigotos observados respecto a los esperados, segn el Wilcoxon signrank test (Luikart, 1997).
RESULTADOS Y DISCUSIN

Tabla I. Marcadores microsatlite, cromosoma al que pertenecen, nmero de alelos detectados y equilibrio gentico en la raza caprina Mallorquina. (Microsatellite markers
used, chromosome localization, number of detected alleles and genetic equilibrium in the Mallorquina goat breed). Locus Cr. N Equilibrio Alelos Hardy-Weinberg 5 6 8 9 3 9 6 6 4 3 5 5 2 8 8 6 8 8 6 7 7 9 10 11 6 6 19 10 3 6 9 0,095 NS 0,104 NS 0,366 NS 0,096 NS 0,268 NS 0,004** 0,179 NS 0,072 NS 0,004** 0,213 NS 0,230 NS 0,000*** 0,082 NS 0,006** 0,951 NS 0,984 NS 0,010** 0,053 NS 0,399 NS 0,180 NS 0,381 NS 0,399 NS 0,639 NS 0,211 NS 0,144 NS 0,164 NS 0,186 NS 0,500 NS 1,000 NS 0,722 NS 0,275 NS

En la raza Mallorquina se detect un total de 218 alelos, con un rango comprendido entre 2 (MAF209) y 19 (BM6444) alelos por locus (tabla I). En general, las frecuencias gnicas resultaron bajas, pero algunos alelos presentaron valores ms elevados, siendo recomendables en caso de asignacin de nuevos individuos a esta poblacin (datos no mostrados). Para este fin cabe destacar varios loci: ILSTS05, ILSTS11, INRABERN185, SRCRSP05, ILSTS87, ILSTS19, SRCRSP08, TGLA53, SRCRSP03 y SRCRSP15. De los 31 loci microsatlite analizados todos ellos excepto cinco (MAF65, INRA63, MAF70, SRCRSP24 y SRCRSP07) se encontraron en equilibrio gentico de Hardy-Weinberg, por lo que puede decirse que la poblacin es estable genticamente (tabla I). La heterocigosidad media observada en la raza Mallorquina no fue muy elevada (Ho= 0,588), mientras que el nmero medio de alelos por locus y la riqueza allica presentaron valores elevados (tabla II). Todos estos parmetros indican que dicha poblacin caprina todava presenta cierto grado de variabilidad. Por otro lado, el nivel de consanguinidad en la raza fue medio, debido probablemente al escaso tamao po-

ILSTS05 ILSTS11 ILSTS87 INRA23 INRABERN185 MAF65 MCM527 SRCRSP05 SRCRSP07 ETH10 ILSTS19 INRA63 MAF209 MAF70 OARFCB48 SRCRSP08 SRCRSP24 CSRD247 ILSTS29 INRABERN172 OARFCB20 P19 SRCRSP09 TCRVB6 INRA05 TGLA53 BM6444 OARAE54 SRCRSP03 SRCRSP15 SRCRSP23

10 14 6 1 18 15 5 21 6 5 21 14 17 4 17 3 26 2q 20 12 4 12 2 25 10 -

NS: No significativo. *p<0,05; **p<0,01; ***p<0,001

Archivos de zootecnia vol. 56, Sup.1, p. 381.

AVELLANET, RODELLAR, MARTN-BURRIEL, OSTA, PONS Y ZARAGOZA

Tabla II. Variacin gentica en 31 loci microsatlite en la raza caprina Mallorquina. (Genetic variation of 31 microsatellite loci in
the Mallorquina goat breed). Heterocigosidad observada Heterocigosidad esperada* Nmero medio de alelos por locus Riqueza allica Coeficiente de consanguinidad - F *Estimador no sesgado (Nei, 1978) 0,588 0,653 7,10 6,49 0,100

Tabla III. Nmero de loci mostrando exceso o defecto de heterocigotos y probabilidad en la raza caprina Mallorquina. (Number of
loci showing heterozygote excess or defect and its probability in the Mallorquina goat breed).

.
Exceso Esperado Observado 18,20 11 Defecto Observado 20 p

0,007

blacional de la misma y a un posible efecto Wahlund (tabla II). Dada esta situacin, de cara a un posible programa de conservacin de la raza se deberan realizar apareamientos dirigidos con individuos de distintas ganaderas, a fin de ir reduciendo este factor que resulta negativo para la poblacin. Se encontr un nmero significativamente menor con respecto al esperado de loci con exceso de heterocigotos y, adems, el nmero de loci con defecto de heterocigotos fue elevado (tabla III), confirmando los resultados anteriores y reafirmando la nece-

sidad de medidas para evitar la prdida de variabilidad gentica en la raza.

AGRADECIMIENTOS

La realizacin de este estudio ha sido posible gracias al convenio de colaboracin entre el Instituto de Biologa Animal del Gobierno Balear y la Universidad de Zaragoza (OTRI 2005/ 0128), as como a la financiacin concedida por el Gobierno de Aragn al Grupo Consolidado de investigacin LAGENBIO (A-17).

BIBLIOGRAFA
Cornuet, J.M. and G. Luikart. 1997. Description and power analysis of two tests for detecting recent population bottlenecks from allele frequency data. Genetics, 144: 2001-2014. Di Rienzo, A., A.C. Peterson, J.C. Garza, A.M. Valdes, M. Slatkin and N.B. Freiner. 1994. Mutational processes of simple-sequence repeat loci in human populations. Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 91: 3166-3170. Goudet, J. 2000. FSTAT (versin 2.9.1.). http:// www2.unil.ch/popgen/softwares/fstat.htm. Acceso en 16 de junio de 2006. Luikart, G. 1997. Usefulness of molecular markers for detecting population bottlenecks and monitoring genetic change. Ph. D. Thesis. University of Montana, Missoula, USA. Raymond, M. and F. Rousset. 1995. GENEPOP (version 1.2). Population genetics software for exact test and ecumenicism. J. Hered., 86: 248-249. Swofford, S.L. and R.B. Selander. 1999. BIOSYS2. University of Illinois, Champaign, IL.

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