MICROBIOLOGIA

Prof. Esp. Anglica Heilmann Steffen E-mail angelica.hsteffen@gmail.com ULBRA - Cara inho

Introduo

A infeco no pode ser compreendida quando no se sabe MICROBIOLOGIA Um dos principais mecanismos causadores de doena a INFECO, que pode afetar qua quer tecido e !r"o do corpo#

Introduo

Os micror"anismos de$em ser estudados A%&'A( porque so pre)udiciais * espcie +umana,,

Efeitos malficos- I'.&C/0&( Benefcios: 1esen$o $imento de antibi!ticos, processos fermentati$os para processamento de a imentos

Introduo

Qual a contribuio dos micror anismos !ara a manuteno do e"uilbrio da biosfera##

mantm o equi 2brio em diferentes sistemas eco !"icos 3 de"radao de matria or"4nica, fi5ao de '6 no so o, etc###7# o or"anismo +umano co oni8ado por bactriasMICROBIO9A 'ORMAL 3desequi 2brio desta microbiota : 1O&'/A7#

$i%idindo&se estas 'reas !ara estudo:

BAC9&RIOLOGIA ;IROLOGIA MICOLOGIA %ARA(I9OLOGIA

O que MICROBIOLOGIA,

( o ramo da biolo ia "ue estuda os )E*E) +I+O) ,IC*O)C-.ICO) nos se uintes as!ectos:

MOR.OLOGIA .I(IOLOGIA R&%RO1U/<O G&'=9ICA 9A>O'OMIA I'9&RA/<O COM OU9RO( (&R&( I'9&RA/<O COM M&IO AMBI&'9&

,icrosco!ia /!tica 0 ,icrosco!ia eletr1nica222

,icrosco!ia /!tica- um sistema de entes manipu a fei5e de u8 e c+e"a ao o +o do obser$ador ???AUMENTO de at 2.000x@ ,icrosco!ia eletr1nica - a u8 substitu2da por um fei5e de e trons e as entes por um sistema de campo ma"ntico??? AUMENTO de 400.000 x#

3ist/rico da classificao dos seres %i%os:

ABCC Reino Protista de DaecEe - bactrias, a "as, fun"os e proto8oFrios 3seres unice u ares7@

AGCG (istema dos cinco Reinos de HittaEerPlantae, Animalia, Fungi, Protista e Monera 3baseado na or"ani8ao ce u ar e tambm na forma de obter ener"ia e a imento7@

AGIG- Hoese propJs no$a c assificao de acordo com simi aridades e diferenas do R'A ribossJmico

Reino Ar ui!a"trias, Reino Eu!a"tria, Reino Eu"arioto 3inc uindo p antas, animais, fun"os, proto8oFrios e a "as7#

Or ani4ao intracelular:

As c u as de todos os seres $i$os so di$ididas em

PRO#AR$ONTE% K c u as bacterianas EU#AR$ONTE% K c u as de todos os outros or"anismos $i$os 3 animais, p antas, fun"os, a "as7#

#lassi&i"a'(o

&studos e$o uti$os sobre as propriedades das bactrias, dos fun"os, dos proto8oFrios e das a "as e5i"iu uma re$iso desta c assificao e sur"iu ento 2 su)er reinos*

PRO#AR$OTO% K bactrias e a "as a8uisK es$erdeadas EU#AR$OTO% K proto8oFrios, a "as, fun"os, animais e p antas

.rinci!al diferena entre )ro"ariontes e eu"ariontes:

AusLncia de nMc eo distinto nos !rocariontes

1'A em forma de um Mnico cromossomo circu ar , no estF contido por uma membrana nuclear2

'os eucariontes:

o 1'A transportado em $Frios cromossomos , contidos em um nMc eo e separados do citop asma por uma membrana nuclear#

+A#T,R$A% - PRO#AR$OTO%

%or isso apresentam as se"uintes diferenas dos outros seres $i$os

1'A de dup a fita e circu ar, sem membrana nuc ear@ %resena de pequenos ribossomos i$res no citop asma, no +F ret2cu o endop asmFtico@ AusLncia de mitocJndrias ou outras or"ane as en$o tas por membranas@ %resena de membrana ce u ar comp e5a formada por peptideo" icano e prote2na#

Caractersticas das bactrias:

TA.ONOM$A +A#TER$ANA

Nuanto * di$ersidade bacteriana so con+ecidas mais de O#PPP espcies A ta5onomia abran"e trLs n2$eis

NOMEN#/ATURA #/A%%$F$#A01O $2ENT$F$#A01O 3es)"ie4

Nomen"latura*

9A>O'OMIA Bacteriana descrita 3AGGA7 pe o QC!di"o Internaciona para a 'omenc atura das BactriasQ# %ARA &(CR&;&R O 'OM& 1& UMA BAC9=RIA a )rimeira letra do )rimeiro nome de$er ser ,5I6)C785@ o restante e a es)"ie em ,IN6)C785@ co ocar em itlico ou sub in+ado#

Nomen"latura*

E0em!los:

Escherichia coli ou E. coli; Streptococcus pneumoniae ou S. pneumoniae; Enterobacter aerogenes ou E. aerogenes; Proteus vulgaris ou P. vulgaris; Micobacterium tuberculosis ou M. tuberculosis

Nomen"latura*

GR'&RO S &(%=CI& de$em combinar quanto ao "Lnero mascu ino e feminino

&5emp o- QU%Q

Staphylococcus?? substanti$o@ aureus?? ad)eti$o@

5,BO) $E O*I9E, 85:IN5 E $O 9;NE*O ,5)C78INO

#Nomen"latura*

9odos os seres $i$os, inc usi$e 9O1A( A( BAC9=RIA(, possuem dois nomes-

%RIM&IRO a denominao "enrica56NERO- e5- Staphylococcus (&GU'1O o nome espec2fico-

E%P,#$E -

e5-

aureus

Nomen"latura*

A "uns acrscimos especiais a este esquema uni$ersa 3"Lnero Sespcie7 podem inc uirum 9&RC&IRO nome para distin"uir muitas $ariedades de uma espcie

e5- Acinetobacter calcoaceticus $ar anitratus

7m nome <ist/rico comum no cientfico:

Gonococo 3 Neisseria gonorroeae7 Menin"ococo 3 Neisseria meningitidis7 %neumococo 3Streptococcus pneumoniae)

7ma desi nao !ara o ru!o sorol/ ico:

e5- Streptococcus pyogenes pode ser tambm c+amado Qestreptococo do "rupo AQ#

C85))IFIC5O:

PR$ME$RAMENTE os seres $i$os foram di$ididos em 6 reinos 5nimal +e etal

OB)E*+5O:

Os %rus no so includos !or"ue no a!resentam as caractersticas essenciais dos or anismos %i%os ca!acidade de re!licao e sobre%i%=ncia de modo inde!endente222

Estruturas bacterianas e suas fun>es:

A# ,embrana cito!lasm'tica

separa meio interno e e5terno@ composta de prote2nas imersas em dup a camada ip2dica@ rea i8a transporte de so utos, produo de ener"ia,dup icao do 1'A e secreo@ possui in$a"inaTes denominadas mesossomos que atuam na di$iso ce u ar#

6# .arede celular

contro a a presso osm!tica@ mantm a forma bacteriana 3coco ou baci o7@ atua na di$iso ce u ar, dando ori"em ao septo que separa as duas no$as c u as oriundas da di$iso ce u ar@ composta de peptideo" icano que confere ri"ide8 * c u a#

U# C'!sula- uma camada que fica i"ada * parede ce u ar como um re$estimento e5terno# 9em como principais funTes

reser$at!rio de F"ua e nutrientes@ aumentam a capacidade in$asi$a de bactrias pato"Lnicas@ aderLncia@ aumento da resistLncia microbiana#

P$/$ ou F7M+R$A%:

&struturas seme +antes a fios de cabe o, podem ser de 6 tipos

pi i se5uais K permitem a transferLncia de 1'A por con)u"ao@ pi i comuns 3mais curtos7 K au5i iam na aderLncia *s c u as do +ospedeiro, so antifa"oc2ticos e podem e$itar a resposta de anticorpos do +ospedeiro 3atra$s da pilina7#

Fla elos:

(o mais compridos que os pi i e conferem MOT$/$2A2E *s bactrias#

Com!onentes cito!lasm'ticos

Ribossomos- rea i8am a s2ntese proteica@ r!nulos- atuam como subst4ncias de reser$a@ "ac#olos gasosos- somente em microor"anismos f utuantes@ Esporos- um tipo de diferenciao ce u ar que ocorre como resposta a uma situao desfa$orF$e do meio ambiente 3carLncia de F"ua ou nutrientes essenciais7#

Es!oros:

Consistem em 1'A bacteriano concentrado, en$o to por uma capa protetora e5tremamente r2"ida# A c u a metabo icamente inerte e sobre$i$e * dessecao, ao ca or e * maioria dos a"entes qu2micos por meses, anos ou mais# &5- $lostridium e %acillus sp#

,orfolo ia e estrutura da clula bacteriana:

A# Forma

esfricas ou cocos@ ci 2ndricas ou bacilos@ cocos- aos pares 3 dip ococos7 em cadeias curtas ou on"as em cac+os baci os podem $ariar a apresentao 3coK cobaci os, anas7 , mas a!arecem isolados#

6# 5rran?o

5s bactrias so classificadas !or %'rios critrios:

.ORMA COLORA/<O CA%ACI1A1& 1& CR&(C&R COM OU (&M O>IGR'IO 1IM&'(<O

CARAC9&RV(9ICA( 1& CR&(CIM&'9O CO'9&W1O & DOMOLOGIA 1& 1'A 3 conteMdo de G S C 7#

%ara $isua i8ao dos microor"anismos em microscopia, uma $e8 que e es so transparentes, so empre"ados mtodos de co orao Mtodos mais usados

co orao de 5ram e 8ie9l-Neelsen@

O mtodo de co orao de 5ram permite di$idir as bactrias em dois "randes "rupos

gram-)ositi:as 3ro5as7 e gram-negati:as 3cor de rosa7

A co orao de "ram consiste no tratamento sucessi$o de um esfre"ao bacteriano, fi5ado pe o ca or, com os se"uintes rea"entes crista $io eta u"o F coo fucsina As bactrias gram-)ositi:as n(o se des"oram )elo ;l"ool e permanecem ro5as como o crista $io eta, enquanto que as gram-negati:as se des"oram tornandoKse a$erme +adas 3rosadas7#

$I,EN)O E E):*7:7*5:

Bactrias )atog<ni"as $ariam bastante sua dimenso micop asmas- P,6KP,B um de di4metro@ bastonetes "ram ne"ati$os entricosP,X Y C,P um@ bactrias "ram S e "ram Y- diferem quanto * composio da parede ce u ar, mas apresentam mesma estrutura interna 3procariotos7#

=uanto > estrutura u?mi"a* as paredes de

bactrias GS e GK apresentam diferenas marcantes

Bactrias 9& possuem uma parede composta de :;rias "amadas que diferem na sua composio qu2mica e, consequentemente, mais comp e5a que a parede das 5@ que, apesar de mais espessa, apresenta um Ani"o ti)o de ma"romol"ula.

O con+ecimento das diferenas entre as paredes de bactrias GS e GK & da mais alta rele:Bn"ia )ara o estudo do me"anismo de a'(o de anti!iCti"os , de )atogeni"idade e de outros assuntos que se re acionem com estrutura qu2mica e parede ce u ar#

Com!onentes caractersticos da !arede celular de bactrias 9*5, .O)I:I+5):

@A B da parede composta por peptideo" icano O que PEPT$2EO5/$#ANO,,

!olmero com!le0o de lon as cadeias de aCcar r idoD resistenteD !oroso e insolC%el2 5s cadeias de !olissacardeos consistem de dois aCcares: N&acetil licosamina EN59F e N& acetilmurGmico EN5,F & determinam a forma da c u a#

D"idos tei"Ci"os

faci itam a re"u ao da entrada de cFtions na c u a@ re"u am a ati$idade de auto isinas 3en8imas que atuam no rompimento das cadeias de peptideo" icano no momento de di$iso ce u ar7, impedindo a ise ce u ar@ ser$em de s2tio de i"ao com o epit io do +ospedeiro#

&5- (# pZo"enes- faci ita a i"ao da bactria * mucosa respirat!ria

Com!onentes caractersticos da !arede celular de bactrias 9*5, NE95:I+5):

A parede GK mais comp e5a- formada por uma ou )ou"as "amadas de )e)tideogli"ano e )or uma mem!rana externaE O espao que separa a membrana citop asmFtica da membrana e5terna o es)a'o )eri)lasm;ti"o

A membrana e5terna GK formada por du)la "amada li)?di"a 3"ar;ter 9idrC&o!o4, ipopo issacar2deos e prote2nas@ A 9idro&o!i"idade da dup a camada ip2dica da membrana e5terna garante alguma resist<n"ia aos antibi!ticos e aos sais bi iares@ 1e$ido * menor "on"entra'(o de )e)tideogli"ano, a parede das bactrias GK s(o mais sus"et?:eis > ue!ras, se "om)aradas >s 5@E

.arede celular de ,ICOB5C:(*I5)

(o microor"anismos ;l"ool-;"ido resistentes, cu)a parede ce u ar composta de +idrocarbonetos de on"as cadeias comp e5os com aMcares# &(9A COB&R9URA impede que corantes se)am remo$idos pe os Fcidos e garante resist<n"ia a muitos desin&etantes e anti!iCti"os. 9AMB=M redu8 a entrada de nutrientes#

ENE*9I5D N7:*IO E C*E)CI,EN:O B5C:E*I5NO

Fontes de ener ia e !rocessos:

Bactrias uti i8am F &ontes de energia

R&A/0&( NUVMICA( 3quimiotrofia7@ LU[ 3fototrofia7@ C=LULA DO(%&1&IRA 3paratrofia7#

%odem ser OR5ANOTRGF$#A%

quando a produo de ener"ia ocorre a partir de compostos or"4nicos@ quando a produo de ener"ia ocorre a partir da uti i8ao de compostos inor"4nicos#

%odem ser /$TOTRGF$#A(

Nutrio:

C u a BAC9&RIA'A

cerca de IP \ de F"ua K indicando que suas reaTes esto preparadas para ocorrer em meio a uoso.

%resena de parede ce u ar r2"ida que en$o $e toda a membrana ce u ar as bactrias se nutrem apenas de materia em so uo ?? pe a impossibi idade de tomar a imento por outro processo# &5# fa"ocitose#

Os nutrientes !odem ser

Ma"ronutrientes* requeridos em "randes

quantidades

usados como #OM+U%T7HE/ - so formados por carbono , +idro"Lnio, o5i"Lnio, nitro"Lnio e en5ofre 3#ION%7 tota i8am J0K da composio ce u ar@

Mi"ronutrientes: so compostos inor"4nicos K

)ot;ssio, ";l"io, &erro, mangan<s

L0K da constituio ce u ar#

7tili4ao de Carbono:

AU9O9R].ICA(

quando uti i8am carbono inor"4nico do meio ambiente, na forma de carbonatos ou CO6 , COMO W'ICA .O'9& 1& CARBO'O#

D&9&RO9R].ICA(

requerem fonte or"4nica de Carbono#

Condi>es de culti%o:

*e"uisitos b'sicos obri at/rios !ara culti%o: Inocu ar em meio de cu tura adequado@ Incubar em condiTes ambientais adequadas#

$NG#U/O- UMA AMO(9RA de materia que contm geralmente uma pequena quantidade de micror"anismos#

Os microor"anismos contidos no in!cu o MUL9I%LICAMK(&, aumentando em nMmero e massa#

,eios de cultura:

Mistura de nutrientes : crescimento microbiano# A formu ao de um meio de cu tura de$e e$ar em conta

o tipo nutriti$o ao qua o micror"anismo pertence, "onsiderando-se a &onte de energia 3luM ou su!stBn"ia u?mi"a4 e a &onte de "ar!ono 3orgBni"a ou inorgBni"a4.

:i!os de ,eios de Cultura:

%intti"os

preparados a partir de subst4ncias qu2micas puras e em quantidades con+ecidas#

#om)lexos

a partir de e5tratos desidratados de di$ersos !r"os de diferentes animais ou p antas, onde no se con+ece e5atamente a composio qua itati$a e quantitati$a do meio

:i!os de meios de cultura:

/? uidos* so uo aquosa de nutrientes %Clidos* quando a so uo nutriente "e ificada

por um po issacar2deo e5tra2do de a "as Y ' ar

%eleti:os* contm uma subst4ncia que inibe o

crescimento de um determinado "rupo de micror"anismos, permitindo o desen$o $imento de outros# &5 Mac ConEei 3meio inibit!rio para GS7

2i&eren"iais* permitem a distino de co Jnias

de micror"anismos diferentes # &5 F"arKsan"ue proporciona $isua i8ao de bactrias +emo 2ticas#

Interfer=ncias ambientais no crescimento bacteriano em meios de cultura

Tem)eratura- cada tipo de bactria apresenta uma temperatura !tima de crescimento@ as bactrias de interesse mdico crescem entre 6B e UI "raus 3ideal HI raus7@ )I- de$e estar em torno da neutra idade para que ocorra a absoro de a imentos para a "rande maioria das bactrias@ Oxig<nio* pode ser indispensF$e , eta ou in!cuo para as bactrias#

:E,.E*5:7*5:

CA1A tipo de bactria apresenta TEMPERATURA GT$MA para crescimento

(e u trapassar LIMI9& (U%&RIOR ? desnaturao ce u ar ? ,O*:E bacteriana@ (e esti$er abai5o de LIMI9&( I'.&RIOR&( ? desacelerao metab/lica ?diminuio da mu tip icao 3 atLncia,,7 ? A morte s! ocorre ap!s muito tempo###

:E,.E*5:7*5:

.)IC*-FI85)- A6 K AI "raus C ,E)-FI85) - 6BKUI "raus C : interesse mdi"oNNN :E*,-FI85)- XI K BI "raus C

Quanto J necessidade de OK as bactrias !odem ser:

AerC!ias*

aerC!ias estritas- e5i"em a presena de O6# &5- Acinetobacter mi"roaerC&ilas- necessitam de bai5os teores de O6# &5- CampZ obacter )e)uni &a"ultati:as- apresentam mecanismos que as capacitam uti i8ar O6 quando dispon2$e , mas podem desen$o $erKse tambm na sua ausLncia# &5- &sc+eric+ia co i e outras enterobactrias aerotolerantes- suportam a presena de O6, apesar de no o uti i8arem# &5- (treptococcus faeca is e Lactobaci us#

Quanto J necessidade de OK222

AnaerC!ias

anaerC!ias estritas- '<O 9OL&RAM O6# &5- $lostridium tetani e $lostridium botulinum so bactrias produtoras de potentes to5inas, que s! se desen$o $em , respecti$amente, em tecidos necrosados e a imentos proteicos en atados, ambos carentes de O6#

Re)rodu'(o:

O per2odo de dup icao ou tempo de "erao corresponde ao inter$a o de tempo entre as di$isTes bacterianas OOO F$%%1O +$NDR$A. 2i:is(o !in;ria um mtodo de reproduo asse5uada, onde uma Mnica c u a bacteriana se di$ide em duas, ap!s desen$o $er uma parede ce u ar trans$ersa , que parte das camadas mais e5ternas#

,etabolismo:

Rede comp e5a de reaTes qu2micas que or"ani8am nas c u as os )ro"essos de o!ten'(o, armaMenamento e utiliMa'(o de energia. As bactrias apresentam enorme $ariao no que se refere a $ias metab! icas de$ido * sua grande :aria!ilidade genti"a.

FE*,EN:5O:

.ermentao : Respirao anaer!bia O bai5o rendimento ener"tico da .&RM&'9A/<O re$e ado pe a bai5a $e ocidade de crescimento### Mi"rorganismos FERMENTAT$HO% desen$o $emKse muito mais L&'9AM&'9& do que bactrias aer!bias###

FE*,EN:5O:

Exem)los*

uti i8ao de aMcar como substrato

&ermenta'(o l;"ti"a O o!ten'(o de iogurtes@ o!ten'(o de ;"ido l;ti"o )ara medi"amentos## #lostridium !otulinum em carnes contaminadas ? a disponibi idade de substrato fermentF$e e a anaerobiose tornam o ambiente fa$orF$e ao desen$o $imento da bactria que produ8 a TO.$NA +OTU/7N$#A

uti i8ao de aminoFcidos como substrato

,udanas enticas nas bactrias

As bactrias so 9a)lCides, n(o 9; tro"a genti"a por meiose, nem formao de 8i"oto, como nos eucariotos# A MU2AN0A 5EN,T$#A o"orre )or muta'Pes aleatCrias

podem e$ar a mudanas na co orao das co Jnias, perda de ati$idade bioqu2mica ou resistLncia a um antibi!tico@

%odem ocorrer trocas "enticas

Trans&orma'(o, Transdu'(o, #onQuga'(o 3)lasm?deo4

P/A%M72EO +A#TER$ANO

pequenos fra"mentos de 1'A circu ar contendo A#PPP a 6X#PPP pares de bases carreiam informaTes "enticas muito importantes ? in"lusi:e RE%$%T6N#$A AO% AT+.