INTRODUO O mecanismo da colorao de Gram se refere composio da parede celular, sendo que as Gram-positivas possuem uma espessa camada

a de peptideoglicano e cido teicico, e as Gram-negativas, uma fina camada de peptideoglicano, sobre a qual se encontra uma camada composta por lipoprotenas, fosfolipdeos, protenas e lipopolissacardeos. Durante o processo de colorao, o tratamento com lcoolacetona extrai os lipdeos, da resultando uma porosidade ou permeabilidade aumentada da parede celular das bactrias Gram-negativas. Assim, o complexo cristal violeta-iodo (CVI) pode ser retirado e as bactrias Gramnegativas so descoradas. A parede celular das bactrias gram-positivas, em virtude de sua composio diferente, torna-se desidratada durante o tratamento com lcoolacetona, a porosidade diminui, a permeabilidade reduzida e o complexo CVI no pode ser extrado. Outra explicao baseia-se tambm em diferenas de permeabilidade entre os dois grupos de bactrias. Nas Gram-positivas, o complexo CVI retido na parede aps tratamento pelo lcool-acetona, o que causa, provavelmente, uma diminuio do dimetro dos poros da camada de glicopeptdeo ou peptideoglicano da parede celular. A parede das bactrias Gram-negativas permanece com porosidade suficientemente grande, mesmo depois do tratamento com lcool acetona, possibilitando a extrao do complexo CV-l.

Colorao Primria Recobrir um esfregao por calor por um corante bsico prpura (violeta genciana); Lava-se o esfregao e recobri-lo com um mordente (Iodo). Pois todas as bactrias (Gram positivas e negativas se coram em violeta escuro ou prpura); Lava-se a lmina com lcool-acetona (Agente descolorante); Lava-se o lcool e cora-se com safranina, o contra-corante (corante bsico vermelho) Lave-se o esfregao e seque-o; As gram-negativas so perdem ao corante prpura aps a lavagem com lcool e so sensveis a safranina. E as gram-positivas no perdem essa colorao e assim no so afetadas pela safranina. Isto ocorre porque as bactrias gram-positivas possuem uma parede mais espessa de peptideoglicano do que as gram-negativas que possuem uma camada de lipopolisacardeos. Assim o complexo violeta-iodo (CV-I) formado dentro da parede celular, pois o violeta de genciana no pode mais sair de l, devido o seu tamanho. Contudo j nas bactrias gram-negativas por haver a camanda de lipopolisacardeos, este rompido pela lavem com lcool e assim o CV-I removido

da camada delgada de peptideoglicana, permanecendo assim incolor. Por isso que se faz necessrio o contra-corante de safranina. O mtodo de colorao Gram til para a clnica mdica, pois as bactrias grampositivas tendem a serem mais susceptveis a antibiticos como penicilinas e cefalosporina. J as bactrias gram-negativas tendem a ser mais resistente a antibiticos, pois no conseguem atravessar devido a sua camada de lipopolisacardeos.