UNIVERSIDADE FEDERAL DE SERGIPE DEPARTAMENTO DE FISIOLOGIA DISCIPLINA: BIOQUMICA

ENZIMAS

Prof. Msc. Ant n!o S"ntos D!"s

POR QUE ESTUDAR AS ENZIMAS#

MALTASE

ENZIMAS

So, na grande maioria, protenas catalisadoras que aumentam a velocidade das reaes sem sofrerem alteraes no processo global.

ENZIMAS

NOMENCLATURA Existem 3 mtodos para nomenclatura en im!tica No%& R&co%&n'"'o: "ais curto e utili ado no dia a dia de quem trabal#a com en imas$ %tili a o sufixo &ase& para caracteri ar a en ima.

$.

Ex' Urease, Hexoquinase, Peptidase.

ENZIMAS

NOMENCLATURA

(. No%& S!st&%)t!co: "ais complexo, nos d! informaes precisas sobre a funo metab(lica da en ima. )essa designao elas so divididas em * c+"ss&s ,r!nc!,"!s, cada uma com numerosos subgrupos.

ENZIMAS

NOMENCLATURA

-. No%& Us."+ : *onsagrados pelo uso$ Ex' +ripsina, ,epsina, ,tialina. /. Co%!ss0o '& En1!%"s 2EC3

- cada en ima so atribudos . n/meros para a classificao e um nome sistem!tico que identifica a reao que ela catalisa. Ex.' 0.1.2.2 3 4-+, glicose fosfotransferase5 0 3 indica o nome da classe 4+ransferase5 1 3 indica a subclasse 46osfotransferase5 2 3 corresponde a uma fosfotransferase com um grupo 78 como receptor 2 3 o quarto n/mero representa a 9:glicose como receptor da fosforila

ENZIMAS
/. Co%!ss0o '& En1!%"s 2EC3

- %nio ;nternacional de <ioqumicos e <iologia "olecular contm uma lista completa e descrio de mil#ares de en imas 4===.c#em.qmul.ac.u>?iubmb?en @me5.

ENZIMAS4 S5O PROTENAS#

ACONITASE

ENZIMAS S5O PROTENAS#

E6c&70o: R!8o1!%"s 9 ,&:.&no ;r.,o '& %o+<c.+"s '& RNA c"t"+=t!co.

ENZIMAS E OUTROS GRUPOS QUMICOS

-lgumas en imas no requerem outros grupos qumicos, alm dos seus resduos de amino!cidos para a atividade.

ENZIMAS E OUTROS GRUPOS QUMICOS

7utras en imas requerem um componente qumico adicional 4Gr.,o ,rost<t!co5. Co>f"tor 3 um ou mais grupos inorgAnicos como 6e0B, "g0B, "n0B ou Cn0B Co&n1!%" 3 molcula orgAnica ou metalorgAnica.

ENZIMAS 9 GRUPOS PROST?TICOS

PROPRIEDADES DAS ENZIMAS

S=t!os "t!@os 3 regio especfica, em forma de fenda ou cavidade. *ontm cadeias laterais de aa que participam da ligao com o substrato e da cat!lise.

INTERAA5O ENZIMA>SUBSTRATO
Deaes qumicas : covalentes transitrias : entre substratos e grupos funcionais da en ima 4cadeias laterais de aa especficos, ons met!licos e coen imas5$

Erupos funcionais podem ser transferidos transitoriamente do substrato para a en ima$

INTERAA5O ENZIMA>SUBSTRATO

"aioria dessas reaes esto restritas ao stio ativo da en ima$

9iminue a energia de ativao e fornece uma alternativa de camin#o para a reao de energia menor.

INTERAA5O ENZIMA>SUBSTRATO
Int&r"7B&s n0o>co@"+&nt&s' pontes de #idrogFnio, interaes #idrof(bicas e iGnicas. *ada interao fraca do complexo ES acompan#ada pela liberao de uma pequena quantidade de &n&r;!" +!@r& que fornece um grau de estabilidade para a interao.

En&r;!" '& +!;"70o' principal fonte de energia livre usada pelas en imas para diminuir as energias de ativao das reaes.

INTERAA5O ENZIMA>SUBSTRATO

- energia de ligao contribui tanto para a especificidade, bem como para a cat!lise$

-s interaes fracas entre a en ima e o substrato so otimi adas no estado de transio$

INTERAA5O ENZIMA>SUBSTRATO 7s stios ativos so complementares no ao substrato em si, mas aos estados de transio por meio dos quais os substratos passam quando so convertidos aos produtos durante uma reao en im!tica.

ESPECIFICIDADE DE SUBSTRATO > ES 2HI. 3 E%!+ F!scC&r' En imas so complementares aos seus substratos. ;deia da cC"@&>f&cC"'.r". 8ip(tese mal entendida quando aplicada J cat!lise en im!tica$

ESPECIFICIDADE DE SUBSTRATO > ES "oderna noo de cat!lise en im!tica, primeiro proposta por M!cC"&+ Po+"nD! 42I025 e E"+'"n& 42I3K5 foi elaborada por Linus ,auling em 2I.M.

,ara catalisar as reaes, uma en ima deve ser complementar ao estado de transio da reao$

Nual a importAncia do Stio -tivoO

PROPRIEDADES DAS ENZIMAS

Ef!c!Fnc!" c"t"+=t!c" 2@"r!" &ntr& "s &n1!%"s3 3 ocorre em torno de 2K3 at 2KH mais rapidamente que as no catalisadas.

R&no@"70o 2turnover3 o. Kcat 4parAmetro utili ado para avaliar a eficiFncia en im!tica5 n/mero de molculas de substrato convertidas em molculas de produto por molcula de en ima em um segundo.

PROPRIEDADES DAS ENZIMAS

Es,&c!f!c!'"'& 3 as en imas interagem com um ou alguns poucos substratos e catalisam apenas um tipo de reao qumica.

Not"' 7 conPunto de en imas produ idas por uma determinada

FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA ATIVIDADE ENZIMGTICA

CONCENTRAA5O DE SUBSTRATO HSI - @&+oc!'"'& de uma reao 4v5 corresponde ao nJ '& %o+<c.+"s '& s.8str"to con@&rt!'"s &% ,ro'.to ,or .n!'"'& '& t&%,o.

- 4Q5 expressa como Rmol de produto formado por minuto. VK L%o+ '& ,ro'.toM%!n

- velocidade de uma reao catalisada por en ima, aumenta com a SST, at uma velocidade m!xima 4Qm!x5 ser atingida.

FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA ATIVIDADE ENZIMGTICA

FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA ATIVIDADE ENZIMGTICA

TEMPERATURA

FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA ATIVIDADE ENZIMGTICA

,E

lique para editar os estilos do texto mestre egundo nvel Terceiro nvel Quarto nvel Quinto nvel

FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA ATIVIDADE ENZIMGTICA

,E

Ef&!to 'o ,E so8r& " !on!1"70o 'o s=t!o "t!@o 3 a S8BT afeta a 4Q5 de v!rias maneiras.

E6.' - atividade cataltica pode exigir que um grupo amino da en ima estePa na forma protonada 4)83B5. Em p8 alcalino, esse grupo no est! protonado e, assim a 4Q5 da reao diminui.

FATORES QUE AFETAM A VELOCIDADE DA ATIVIDADE ENZIMGTICA

,E

Ef&!to 'o ,E so8r& " '&sn"t.r"70o '" &n1!%" 3 valores extremos de p8 podem levar J desnaturao. - estrutura da molcula proteica catalicamente ativa depende do car!ter iGnico das cadeias laterais dos aa.

CIN?TICA ENZIMGTICA
Estuda os mecanismos en im!ticos que determinam a velocidade da reao en im!tica, como ela se altera em resposta a modificaes experimentais.

LEONOR>MICEAELIS E MOUD MENTEN4 $N$- 3 propuseram um modelo simples que explica maioria das reaes en im!ticas.

)esse modelo, a en ima combina:se reversivelmente com o substrato, formando o co%,+&6o ES, que subsequentemente, gera o produto, regenerando a en ima livre.

CIN?TICA ENZIMGTICA

CIN?TICA ENZIMGTICA

*lique para editar os estilos do texto mestre Segundo nvel +erceiro nvel Nuarto nvel Nuinto nvel

OM 9 < HSI :.& '&t&r%!n" P '" V%)6

CIN?TICA ENZIMGTICA

OM 9 const"nt& '& Michaelis-Menten 3 indica a afinidade que uma en ima apresenta pelo seu substrato. Ex'

EEQOQUINASE

SUBSTRATOS

P '& V%)6 K S4$R %M

P '& V%)6 K $4R %M G+!cos& Fr.tos&

DOSAGEM ENZIMGTICA
Co%o < o8t!'" " 'os";&% '& .%" &n1!%"#

Atr"@<s '" %&'!'" '& s." "t!@!'"'&.

DOSAGEM ENZIMGTICA
En1!%"s c.T"s conc&ntr"7B&s ,+"s%)t!c"s s0o "+t&r"'"s &% '&t&r%!n"'"s con'!7B&s ,"to+U;!c"s

DOSAGEM ENZIMGTICA
R&s.+t"'os '& &6"%&s +"8or"tor!"!s '& 'os";&ns '& &n1!%"s ,+"s%)t!c"s &% 'o!s !n'!@='.os 2A & B3

Os r&s.+t"'os 'os &6"%&s 'o !n'!@='.o A s0o co%,"t=@&!s co% .% :."'ro '& C&,"t!t& @!r"+ ";.'" & os 'o !n'!@='.o B4 co% c"rc!no%" '& ,rUst"t".

U% ;r)f!co co% os @"+or&s !n@&rsos '& VS & HSI ,oss!8!+!t" " '&t&r%!n"70o '& V%)6 & OM

6ormulao algbrica de L!n&V&"@&r & B.rO

U obtida atravs do inverso da equao de MichaelisMenten.

INIBIA5O ENZIMGTICA 9 D."s c"t&;or!"s 2'&,&n'& 'o t!,o '& +!;"70o3

IRREVERSVEL 9 !n"t!@"70o ,r"t!c"%&nt& '&f!n!t!@" Co%,ostos or;"nofosfor"'os 6ormam ligaes covalentes com o grupo OE de resduos de Ser. *ompostos como !o'o"c&t"%!'" ou !o'o"c&t"to podem reagir com o grupo SH de resduos de Cis.

INIBIA5O ENZIMGTICA

INIBIA5O ENZIMGTICA

In!8!'or !rr&@&rs=@&+ com propriedades terapFuticas 4antiinflamat(rio, antipirtico e analgsico5 3 aspirina (cido acetilsalislico

INIBIA5O ENZIMGTICA R&@&rs=@&+

*lique para editar os estilos do texto mestre Segundo nvel +erceiro nvel Nuarto nvel Nuinto nvel

INIBIA5O ENZIMGTICA

R&@&rs=@&+
*lique para editar os estilos do texto mestre Segundo nvel +erceiro nvel Nuarto nvel Nuinto nvel

INIBIA5O ENZIMGTICA

In!8!'or&s n0o>co%,&t!t!@os 3 no guardam qualquer semel#ana estrutural com o substrato da reao que inibem. Seu efeito provocado por ligao a radicais que no pertencem ao stio ativo$ esta ligao altera a estrutura en im!tica a tal ponto que inviabili a a cat!lise.

INIBIA5O ENZIMGTICA

In!8!'or&s n0o>co%,&t!t!@os 3 no guardam qualquer semel#ana estrutural com o substrato da reao que inibem. 7 ponto de ligao o grupo OE de serina ou o grupo SE da cistena, por exemplo.

INIBIA5O ENZIMGTICA

In!8!'or&s n0o>co%,&t!t!@os: M&t"!s ,&s"'os como 8g0B, ,b0B e -gB 4reagem com os grupos S8 das protenas5. An)+o;os '& s.8str"tos 2"nt!%&t"8U+!tos3 3 VvenenosW naturais ou medicamentos.

+Fm f(rmula estrutural semel#ante J de substratos naturais, ligam:se ao centro ativo e, ao contr!rio dos inibidores competitivos, geram ,ro'.tos.

INIBIA5O ENZIMGTICA

In!8!'or&s n0o>co%,&t!t!@os: An)+o;os '& s.8str"tos 2"nt!%&t"8U+!tos3 3 VvenenosW naturais ou medicamentos Esses produtos no prosseguem na sequFncia metab(lica normal, por no serem aceitos como substratos pela en ima seguinte, ou por serem inst!veis.

Cons&:.Fnc!": a via metab(lica sobre a qual interferem fica

An)+o;os '& s.8str"tos 2"nt!%&t"8U+!tos3 3 VvenenosW naturais

So, na maioria das ve es, mecanismos de defesa de vegetais contra a ingesto de suas fol#as e sementes por insetos, p!ssaros e mamferos.

REGULAA5O ENZIMGTICA

$.

In!8!70o ,or r&tro"+!%&nt"70o 3 - formao do produto final no fim de uma via metab(lica, diminui toda a via.

0. Mo'!f!c"70o co@"+&nt& r&@&rs=@&+ 3 Erupos modificantes como fosfor!+", adenila, metila, entre outros$ so ligados ou removidos de en imas reguladoras por en imas separadas. 0.2 - fosfor!+"70o o mais comum' de um tero J metade de todas as protenas na clula eucari(tica so fosforiladas. Ex.' Q.!n"s&s 3 fosforilam. Fosf"t"s&s 3 removem os grupos

R&;.+"70o &n1!%)t!c" > Fosfor!+"70o & '&sfosfor!+"70o

REGULAA5O ENZIMGTICA

Proc&ssos '& r&;.+"70o &n1!%)t!c" ,or c+!@";&% ,rot&o+=t!c" Z!%o;Fn!o: precursores en im!ticos inativos. Local de ao' extracelular. P&,s!no;Fn!o

En1!%" ,rot&o+=t!c"

R&%o70o '& /( r&s='.os '& aa so8 " "70o '& =ons EW P&,s!n"

REGULAA5O ENZIMGTICA

Proc&ssos '& r&;.+"70o &n1!%)t!c" ,or c+!@";&% ,rot&o+=t!c" Z!%o;Fn!o: precursores en im!ticos inativos. Local de ao' extracelular.

Tr!,s!no;Fn!o

Ent&ro:.!n"s&

Tr!,s!n"

Q.!%!otr!,s!no;Fn!o

Tr!,s!n"

Q.!%!otr!,s!n"

REGULAA5O ENZIMGTICA

Iso&n1!%"s' en imas que catalisam a mesma reao, mas apresentam estruturas diversas, dependendo do tecido ou organela onde ocorrem em um organismo.

Desultam de combinaes diferentes de subunidades comuns

LDE4 Lactato desidrogenase

REGULAA5O ENZIMGTICA 9 Iso&n1!%"

LDE : *ontm . subunidades' 0 8 4heart, corao em inglFs5 e " 4de m/sculo5 que podem se associar de diversas maneiras.

6ormas EEEE e EEEM 3 abundantes no corao.

6orma MMMM predomina em m/sculos esquelticos e fgado.

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