Tpicos Actuales en Biologa Oral

Csar Rivera
Cirujano Dentista, Universidad de Talca Departamento de Ciencias Bsicas Biomdicas, Unidad de Histologa y Embriologa Programa de Magster en Ciencias Biomdicas mencin Patologa Oral www.drcesarrivera.com

Simposio Morfofisiologa Aplicada a la Odontologa, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Sbado 2 de Noviembre de 2013

CONADEO, TALCA, 2007

Biologa Oral?

rea cientfica tremendamente diversa, que abarca las disciplinas de biologa molecular y gentica, microbiologa, inmunologa, bioqumica, biofsica, biologa y desarrollo craneofacial, la farmacologa y fisiologa. El campo de la biologa oral combina disciplinas cientficas fundamentales de una forma nica y fascinante para curar o prevenir enfermedades y defectos del desarrollo.
University of Florida, College of Dentistry http://dental.ufl.edu/departments/oral-biology/

En muchas escuelas, esta disciplina se ensea como parte de los cursos tradicionales de ciencias bsicas de la salud: anatoma, bioqumica, fisiologa, microbiologa, farmacologa, inmunologa y patologa.

The American Association of Oral Biologists Curricular Guidelines for Oral Biology http://www.stonybrookmedicalcenter.org/aaob/guidelines

Cursos e investigacin avanzada en biomateriales y biomecnica, biologa epitelial, carcinognesis, microbiologa e inmunologa, neurociencia, biologa sea, el desarrollo craneofacial y la ingeniera tisular

University of Minnesota's Graduate School Graduate Program in Oral Biology http://www.dentistry.umn.edu/programs-admissions/advanced-programs/oralbiology/index.htm

Exponer bases tericas para la compresin de los avances actuales en ingeniera tisular bucodental y desarrollo de la vacuna anticaries. Presentar el proceso de transformacin maligna del cncer oral, oportunidades de tratamiento y prevencin.

Ingeniera Tisular Bucodental

 Construccin de tejidos biolgicos artificiales y su utilizacin teraputica para restaurar, sustituir o incrementar las actividades funcionales de los propios tejidos orgnicos.

Transferencia celular Aislado, cultivo e inyeccin. Por induccin Factores de crecimiento, clulas secretoras, matriz extracelular, biomateriales. Elaboracin de constructos

Biorreactor: clulas, biomaterial y factores de crecimiento.

 Cultivo Celular. Biomateriales. Ensamblaje y asociacin de los componentes tisulares.

Trends Cell Biol. 2010; 20-206(12-6): 715722.

Un diente humilde
No son esenciales para la vida y por lo tanto no se consideran un objetivo importante para la investigacin en medicina regenerativa. Peligro no vital. No requiere ciruga mayor. Existencia de poblaciones de clulas madre altamente proliferativas. Formacin de races posnatal.
Trends Cell Biol. 2010; 20-206(12-6): 715722.

Clulas Madre Dentales

Dental pulp stem cells (DPSCs) nueva regeneracin pulpar1. Stem cells isolated from the pulp of human exfoliated deciduous (children's milk) teeth (SHED) hueso, dentina2, odontoblastos, endotelio3, neuronas dopaminergicas4. Stem cells from human periodontal ligament (PDLSC) cementoblastos, adipositos, tejido conectivo rico en COLI5. Stem cells from the root apical papilla (SCAP) odontoblastos y adipositos6.

J Can Dent Assoc. 2013;79:d1.

1. Tissue Eng Part A. 2010; 16(2):605-15. / 2. Orthod. Craniofac. Res. 2005;8:191199 / 3. J Dent Res. 2010; 89(8):791-6. 4/ Stem Cells Dev. 2010; 19(9):1375-83 / 5. Trends Cell Biol. 2010; 20-206(12-6): 715722. / 6. PLoS One. 2006 Dec 20; 1():e79.

Tissue Eng Part A. 2010; 16(2):605-15

Trends Cell Biol. 2010; 20-206(12-6): 715722.

J Endod. 2011;37(2):265-8.

Vacuna Anticaries

1
Pac regin AP Glucosiltransferasas regin CAT y GLU

S. mutans deficientes en PAc no pueden agregarse en presencia de saliva completa o aglutinina salival

El glucano es producto de la interaccin de las GTF con hidrolizados como la sacarosa

1. Journal of Health Sciences 2011;1(1):1-7. / 2. Archives of Oral Biology 1996 Mar;41(3):291-8.

La respuesta inmune mucosa acta como la primera lnea de defensa contra la caries 1. Sistema inmune de las mucosas (CMS).

CMS se divide en sitios inductivos y sitios efectores 2.

Las clulas M en sitios epiteliales inductivos, como la mucosa nasal. Toman el antgeno a travs de endocitosis o fagocitosis, y entregarlo por transcitosis a las clulas dendrticas subyacentes que lo procesan y presentan a las clulas T, que a su vez, estimulan a clulas B comprometidas para secrecin del anticuerpo inmunoglobulina A (IgA), que migran a los sitios efectores, como las glndulas salivales, donde ocurre la diferenciacin terminal en clulas plasmticas secretoras de IgA antgeno especficas 3.

En las mucosas, la IgA se encuentra en forma secretora. La IgA secretora salival (S-IgA) es considerada el tipo de anticuerpo ms importante para la respuesta inmune contra la caries 1.

1. Vaccine 2010;28(32):5370-6. / 2. Cellular and molecular life sciences : CMLS 2000;57(2):10. / 3. BioDrugs 2001;15(8):501-8.

DNA plasmid vector vaccines

Journal of Health Sciences 2011; 1(1): 1-7

Advances in Animal and Veterinary Sciences 2013; 1(6): 9-20.

A strategy of directing antigen directly to antigen-presenting cells (APCs) by cytotoxic T lymphocyte antigen-4 (CTLA4) molecule, which binds to B7expressing cells.

LT

CD40L

CD40

CB

CD5

CD72

CD2

LFA-3

CD4

TCR

MHC

LFA-1

ICAM-1

CD28

B7

CTLA4
Dr. Rodrigo Moore Carrasco. Depto. de Bioqumica Clnica e Inmunohematologa. Universidad de Talca, 2012

Cncer oral

 El cncer oral es considerado como una enfermedad prevenible, con posibilidades de deteccin temprana y tratamiento (1). El carcinoma de clulas escamosas de la cavidad oral (CCECO) representa el 95% de todas las formas de cncer de cabeza y cuello, y durante la dcada pasada su incidencia aument en un 50% (2, 3). Pese a la oferta teraputica la tasa de supervivencia a 5 aos es slo de un 53% (3).

1. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol 113: 518-525, 2012. 2. Eur J Cancer 38: 99-166, 2002. 3. CA: a cancer journal for clinicians 55: 74, 2005.

CCECO de borde lateral de lengua. Tomado de Jerjes et al., 2010.

Head Neck Oncol 2: 9, 2010.

Grados de diferenciacin (GD) tumoral (OMS) de CCECO. (H&E, 25X). Tomado y modificado de Jerjes et al., 2010

Head Neck Oncol 2: 9, 2010.

Diferentes patrones de invasin (PI) en el frente de invasin tumoral. Tomado y modificado de Dissanayaka et al., 2012.

Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol 113: 518-525, 2012.

Proceso de Transformacin Maligna.

Historia natural y alteraciones genticas de la carcinognesis oral. Tomado y modificado de Tanaka & Ishigamori 2011.

Tanaka, T., & Ishigamori, R. (2011). Understanding carcinogenesis for fighting oral cancer. Journal of oncology, 2011.

Lesiones inducidas por 4NQO. Tomado de Rivera, 2012.

Int. J. Morphol 30.1 (2012): 309-314.

 La desregulacin del ciclo celular y la proliferacin de las clulas tumorales malignas implican la prdida de mecanismos de control que aseguran el funcionamiento normal tisular. Previamente se han investigado algunas protenas implicadas en estos mecanismos moleculares, mostrando una preocupacin permanente hacia la identificacin de biomarcadores en CCECO con potencial predictivo.

Clin Cancer Res 2006;12:6716-6722.

Clin Cancer Res 2006;12:6716-6722.

Head Neck, 2007; 29: 7176.

Tabaco Alcohol

p53 p53 p16 Ki67 p16

ColIV

ColIV

SMA

SMA

Parmetros clnicos, histopatolgicos e inmunohistoqumicos en la superviviencia de pacientes con carcinoma de clulas escamosas de la cavidad oral y orofaringe.
Clinical, histopathologic and immunohistochemical parameters in survival of oral and oropharinx squamous cell carcinoma.

Csar Rivera1,2, Wilfredo A. Gonzlez-Arriagada3,4, Ricardo Della Coletta4, Oslei Paes de Almeida4, Daniel R. Gonzlez1, Bernardo Venegas5,6
1 Departamento de Ciencias Bsicas Biomdicas, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Talca, Talca, Chile. 2 Programa de Magster en Ciencias Biomdicas, Mencin Patologa Oral, Universidad de Talca, Talca, Chile. 3 Escuela de Odontologa, Universidad de Valparaso, Valparaso, Chile. 4 Departamento de Diagnstico Oral, Semiologa y Patologa Oral, Escuela Dental de Piracicaba, Universidad Estadual de Campinas (UNICAMP), Piracicaba, So Paulo, Brasil. 5 Departamento de Estomatologa, Facultad de Ciencias de la Salud, Universidad de Talca, Talca, Chile. 6 Hospital Carlos Van Bren, Valparaso, Chile.

Tabla. Caractersticas clnico-patolgicas de pacientes con OSCC (n=35).

Variables
Clnicas Edad 62(n=19) 62 (n=16) Sexo Mujer (n=12) Hombre (n=23) Localizacin Cavidad oral (n=16) Orofaringe y otras (n=19) Tumor primario (T) T1+T2 (n=18) T3+T4 (n=17) Linfonodos regionales (N) N0 (n=14) N+ (n=21) Etapa clnica I+II (n=7) III+IV (n=28) Histopatolgicas Grado de diferenciacin G1 (n=5) G2+G3 (n=30) Patrn de invasin (PI) Cohesivo (n=13) Infiltrante (n=22)

Nmero de pacientes (%)

19 (53,3) 16 (46,7) 12 (34,3) 23 (65,7)

16 (46,7) 19 (53,3)
18 (51,4) 17 (48,6) 14 (40) 21 (60) 7 (20) 28 (80)

5 (14,3) 30 (85,7) 13 (37,1) 22 (62,9)

Clinical, histopathologic and immunohistochemical parameters in survival of oral and oropharinx squamous cell carcinoma. Csar Rivera, Wilfredo A. Gonzlez-Arriagada, Ricardo Della Coletta, Oslei Paes de Almeida, Daniel R. Gonzlez, Bernardo Venegas. DATOS SIN PUBLICAR

Figura. Tinciones realizadas para cada antgeno en estudio Se muestra diferentes campos de anlisis para p53 (A), ki-67 (B), HOXA1 (C), HOXB7 (D), -SMA (E), COLIV (F) y H&E (G).

Clinical, histopathologic and immunohistochemical parameters in survival of oral and oropharinx squamous cell carcinoma. Csar Rivera, Wilfredo A. Gonzlez-Arriagada, Ricardo Della Coletta, Oslei Paes de Almeida, Daniel R. Gonzlez, Bernardo Venegas. DATOS SIN PUBLICAR

Tabla. ndice de tincin de cada antgeno. Antgeno p53 ki67 HOXA1 HOXB7 ColIV -SMA Promedio 25,743 42,857 33,771 41,571 DE 28,2044 11,5100 13,6965 13,4805 ndice de tincin (LI) Mediana Mnimo Mximo 6 0 81,0 43,000 0 65 35,000 0 55,0 42,000 0 69

RIQ 54,0 14,0 14,0 15

Moda

D+A N+E

Clinical, histopathologic and immunohistochemical parameters in survival of oral and oropharinx squamous cell carcinoma. Csar Rivera, Wilfredo A. Gonzlez-Arriagada, Ricardo Della Coletta, Oslei Paes de Almeida, Daniel R. Gonzlez, Bernardo Venegas. DATOS SIN PUBLICAR

Tabla. Supervivencia de pacientes con cncer oral y de orofaringe. n (%) Estado Supervivencia en aos 1 3 29 (82,9) 19 (54,3) 6 (17,1) 16 (45,7)

Vivo Fallecido

4 13 (45,7) 22 (54,3)

Clinical, histopathologic and immunohistochemical parameters in survival of oral and oropharinx squamous cell carcinoma. Csar Rivera, Wilfredo A. Gonzlez-Arriagada, Ricardo Della Coletta, Oslei Paes de Almeida, Daniel R. Gonzlez, Bernardo Venegas. DATOS SIN PUBLICAR

Tabla. Asociacin entre el estado de supervivencia y parmetros clnicos, patolgicos e inmunohistoqumicos de pacientes con OSCC. n (%).
Caracterstica Estado Vivo* 13 (37,1) Fallecido# 22 (62,9) RV valor P

Porcentaje de los que permanecen vivos hasta fin del periodo de seguimiento con la caracterstica especificada . # Porcentaje de los que han fallecido con la caracterstica especificada. RV cociente de verosimilitud, cuanto mayor sea el nmero, ms potente es el marcador.

Clnica Edad 62 62 Sexo Mujer Hombre Localizacin Cavidad oral Orofaringe y otras Tumor primario (T) T1+T2 T3+T4 Linfonodos regionales (N) N0 N+ Etapa clnica I+II III+IV Histopatolgica Grado de diferenciacin G1 G2+G3 Patrn de invasin (PI) Cohesivo Infiltrante

0,173 7 (50) 7(50) 6 (42,9) 8 (57,1) 8 (57,1) 6 (42,9) 11 (78,6) 3 (21,4) 5 (35,7) 9 (64,3) 3 (21,4) 11 (78,6) 12 (57,1) 9 (42,9) 0,755 6 (28,6) 15 (71,4) 1,231 8 (38,1) 13 (61,9) 7,210 7 (33,3) 14 (66,7) 0,179 9 (42,9) 12 (57,1) 0,030 4 (19) 17 (81) 0 2 (14,3) 12 (85,7) 8 (57,1) 6 (42,9) 3 (14,3) 18 (85,7) 4,006 5 (23,8) 16 (76,2)

0,678

0,385

0,267

0,007**

0,672

0,863

1,000

0,045*

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Tabla. Asociacin entre el estado de supervivencia y parmetros clnicos, patolgicos e inmunohistoqumicos de pacientes con OSCC. n (%).
Caracterstica Estado Vivo* 13 (37,1)

Fallecido# 22 (62,9)

RV

valor P

Inmunohistoqumica p53 6 6 Ki67 43 43 HOXA1 35 35 HOXB7 42 42 ColIV C D +A -SMA N+E Abundante

7,210 11 (78,6) 3 (21,4) 7 (33,3) 14 (66,7) 1,560

0,007**

0,212

9 (64) 5 (35,7) 7 (50,0) 7 (50,0) 8 (57,1) 6 (42,9) 0

14 (100) 10 (71,4) 4 (28,6)

9 (42,9) 12 (57,1)
0,019 0,890

11 (52,4) 10 (47,6)
0,077 0,782

11 (52,4) 10 (47,6)
1,041 0,308

1 (4,8)
20 (95,2) 0,342 13 (61,9) 8 (38,1) 0,559

Figura. Curvas Kaplan-Meier para el anlisis de tumor primario (A), patrn de invasin (B), expresin de p53 (C) y Caracterstica Operativa del Receptor (Curva ROC, D). ABC rea bajo la curva.

Clinical, histopathologic and immunohistochemical parameters in survival of oral and oropharinx squamous cell carcinoma. Csar Rivera, Wilfredo A. Gonzlez-Arriagada, Ricardo Della Coletta, Oslei Paes de Almeida, Daniel R. Gonzlez, Bernardo Venegas. DATOS SIN PUBLICAR

Tabla 5. Variable en el modelo de regresin final para supervivencia.

Tumor primario

B -1,106

SE 0,475

df 1

Significancia 0,02

Exp(B) 0,331

Clinical, histopathologic and immunohistochemical parameters in survival of oral and oropharinx squamous cell carcinoma. Csar Rivera, Wilfredo A. Gonzlez-Arriagada, Ricardo Della Coletta, Oslei Paes de Almeida, Daniel R. Gonzlez, Bernardo Venegas. DATOS SIN PUBLICAR

El dimetro del tumor primario, el patrn de invasin, y la expresin de la protena p53 se asociaron con el estado de supervivencia (vivo/fallecido). Sin embargo, slo el tamao del tumor demostr ser un factor pronstico independiente, lo que es relevante para la evaluacin clnica de tratamiento de pacientes con CCECO.

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Tpicos Actuales en Biologa Oral

Csar Rivera
Cirujano Dentista, Universidad de Talca Departamento de Ciencias Bsicas Biomdicas, Unidad de Histologa y Embriologa Programa de Magster en Ciencias Biomdicas mencin Patologa Oral www.drcesarrivera.com

Simposio Morfofisiologa Aplicada a la Odontologa, Universidad Austral de Chile, Valdivia, Sbado 2 de Noviembre de 2013