Processo Biotecnolgico Biotecnologia: aplicao- tecnologia-micro organismos vivos- produo de substancias- produtos comercializveis. Aplicaes Ind.

(qumica, petro, alimentos, frmacos), Sade, Agri/Pec, Preservao do m. a. Biorreatores: reatores-reaes qumicas catalisadas-biocatalizadores. Biocatalizadores Enzimas (P. enzimtico), Cel. Vivas (P. fermentativo) P. enzimtico: agentes das transformaes-reator-enzimas (compostos produzidos pelas clulas), clulas mortas ou inativas. Vantagem s/ reaes competitivas, produto especfico. Ex: sacarose frutose+ glicose P. fermentativo: agentes das transformaes-reator-microorg. vivos-reaes-atividade vital- clulas microbianas.Vantagem srie de reaes. Ex: sacharomisse sereviase sacarose lcool Produo Economic. Vivel: meio baixo$, recipientes extr. grandes processo eficiente, larga escala. Microbiologia indurstrial: Origem: Idade mdia- fermentao alcolica Ex: cerveja e vinho. desenvolveu 1 G.M.- produtos farmacuticos. Ex: antibio., aditivos alimentares. Todos esses processos-otimizaes- reaes metabol.- realizadas por micro orgs. objetivo: superproduo do composto -Biocatlise: reaes realizadas- microorgs.- micro bio ind./ Principais orgs. fungos( leveduras e bolores) e bactrias/ Principal fonte de linhagens: natureza - Atualmente: nova era-biotecnologia microbiana . Micro orgs. se desenvolvem conservados em lab. e em colees (ATCC) EUA. quando processo biocataltico patenteado. Caracter. de um micro org. ind.: crescer rapidamente-produzir substncia de interesse em larga escalacurto perodo de tempo- crescer meio lquido-baixo custo- no ser patognico- fcil manipulao. -Suplementos do meio de cult: rejeitos de C gua( moagem de milho), soro de leite. Obs: C,N e O so add ao meio, microorg cresce, se multiplica, sintetiza enzimas e produz o produto de interesse. -Bioconverso: clulas utilizadas na converso de uma subst. Especfica de uma forma para outra. Fases de crescimento microbiano: quando introduzido a um meio de cultura rico e fresco os microorgs, vo apresentar 4 fases de crescimento: -fase lag: aumento apenas do tamanho- so sintetizadas novas enzimas p/ clulas se adaptarem ao meio -fase log: se dividem na velocidade mais rpida- polupao dobra a cada tempo de gerao -fase estacionria: acmulo de produtos metabol.e txicos- cels vivas constante - fase de morte: condies do meio desfavorveis- cels vivas decresce exponencialmente Crescimento e formao de produtos em biocatlise: Fermentao refere-se a qualquer processo microbiano em larga escala correspondendo ou no ao processo anaerbico. -Processo aerbico: gliclise 2 Pi + 2 NADH + 4 ATP/ Ciclo de Krebs 6 NADH + 2 FADH + 2ATP / Cadeia Respiratria converso de NADH e FADH em ATP, saldo final: 38 ou 36 por utilizar 2ATP na entrada do PI na mitocndria. - Processo anaerbico se falta O2 na cadeia respiratria no acontece ciclo de Krebs, com isso a fermentao faz uma oxidao incompleta da gliclise produz apenas 2 ATP / Gliclise 2 NADH+ 2ATP Metablicos Microbianos: Existem 2 tipos: - Metablicos Primrios: aqueles sintetizados durante a fase de crescimento do micro org. (produtos fase log) /Caractersiticas: a colnia deve ser mantida nutrida, retirar o volume excedente e retirar o produto final. Ex: lcool formado por leveduras. Por estarem associados ao metab. prim. no so superproduzidos - Metablicos Secundrios: aqueles sintetizados prximo ou na fase estacionria. (produtos fase est.) / Caractersticas: a colnia deve ser mantida em condies de escassez e retirar o produto de interesse.Ex: Penicilina produzida pelo filamentoso Penicillium chrysogenum. possvel obter uma dramtica superproduo. So produzidos como um grupo de estruturas intimamente relacionadas. Caractersticas da ferment. em larga escala: -Fermentador: tanque que realizado o processo ind. Apresentam diversos tamanhos: 5 a 10 litro (escala lab. /pequeno), 500.000 litos ( escala ind./ grande). Os fermentadores ind. so divididos em 2 classes: . Fermentadores anaer. : utilizados em processos anaer./ Poucos equipamentos, exceto o responsvel pela remoo do calor gerado durante o processo (servem para aquecer) , custo< . . Fermentadores aer. : utiizados em processos aer./ Equipamentos elaborados p/ garantir a homogenizao e aerao adequadas, custo>. No geral os fermentadores so grande cilindros-ao inoxidvel-fechado nas pores superior e inferior-no interior conjunto de tubulaes e vlvulas. Controle de Temperatura: . Camisa de resfriamento: externa- vapor ou gua de resfriamento vo fluir . Serpentinas internas: vapor ou gua so bombeados- utilizados junto com a camisa de resfriamento.

O O2 pouco solvel em H2O- num grande fermentador- enorme demanda de O2 para cultura. Dispositivo para aerao: . Pulverizador: ar penetra na forma de pequenas bolhas- oxignio transferido por difuso . Impulsor: agita o fermentador A agitao: mistura bolhas gasosas- homogeneza os orgs ao longo do lquido-acesso unifrome das cls microb aos nutrientes. Controle e monitoramento da fermentao: Deve ser monitorada em tempo real para que o processo seja adequado. Fatores ambientais controlados: T, pH, [O2], massa celular, [produto]. A media que ocorre-pode ser necessrio a manuteno dos fatores ou add nutrientes- taxa equilibre o crescimento. Escalonamento ind. da fermentao: processo de converso gradual de uma fermentao industrial a partir de escala laboratorial- chegando escala de produo. A aerao e homogeneizao- aspectos crticos a ser monitorado- durante estudos de escalonamento Biorreatores e processos fermentativos Biorreatores: reatores-reaes qumicas catalisadas-biocatalizadores. Classificados em 2 grandes grupos: Grupo 1: reaes ocorrem na ausncia de clulas vivas (processo enzimtico). Grupo 2: reaes ocorrem na presena de clulas vivas (processo fermentativo). I-Reatores fase aquosa(fermentao submersa): reatores empregados no processo de ferment. submersa. Podem ser: Cls/Enzimas livres; Cls/Enzimas imobiliz. em suporte; Cls/Enzimas confinadas entre menbranas. Agitao: movimentao- lquidos- em tanques- impulsores giratrios. Op. Unitria comum. Reatores agitados mecanicamente (STR): Ferment. sub. c/ cls/enzimas livres. Conhecidos tambm como reatores de mistura. Tanque cilndrico 2:1 e 3:1 - agitador ao longo no eixo central c/ srie de turbinas de ps planas- equipado com chicanas: inibidores de vrtice( 4 tiras verticais que interferem no fluxo rotacional s/ interferir no fluxo radial e tangencial. Reatores de fluxo pistonado: Ferment. sub. c/ cls/enzimas livres. Meio e inculo misturado na entrada- cultura flui com velocidade constante e sem mistura longitudinal- variao [nutrientes] comprimento do reator. Comparado processo contnuo em mltiplos estgios c/ elevado nmero de reatores ligados em srie. Reatores agitados pneumaticamente: Ferment. sub. c/ cls/enzimas livres. Ausncia de agitador mecnico- agitao por borbulhamento- menores tenses de cisalhamento o que torna atraente p/ cultivo de cls animais e vegetais. So 2 tipos: . Reatores coluna de bolhas (ou tipo torre): movimento aleatrio do lquido no reator. . Reatores air-lift: movimentao cclica do fluido bem definida. Reatores de fermentao submersa/ Ferment. sub. c/ cls/enzimas imobiliz. em suporte: Biocatalizadores imobilizados em suporte inerte. Manuteno de elevadas [celulares] atingindo elevadas produtividades no processo. Dependendo da movimentao das partculas distinguem-se: . Reatores de leito fixo: movimentao praticamente inexistente . Reatores de leito fluidizado: movimentao intensa das partculas- fluidizao provocada pela injeo de ar/gs inerte/ corrente de recirculao de lquido no reator. Reatores de fermentao submersa/ Ferment. sub. c/ cls/enzimas confinadas entre membranas: Possuem lminas de fibras planas ou ocas- mantm as cls. confinadas entre membranas semipermeveispermite o fluxo de lquido mas no a passagem de cls. Este reator separa fluxo de nutrientes e produtos metablicos- permite uma primeira separao do produto desejado- contribui p/ simplificao das etapas de purificao do produto. II- Reatores em fase no aquosa (fermentao semi-slida): Caracterizam-se ausncia de H2O livre Teor de umidade: 30 a 80% dependendo das caract. de reteno de H 2O do substrato slido empregado. Tipos: Reatores estticos (com bandejas), com agitao (tambor rotativo), c/ leito fixo, c/ leito fluidizado gs-slido. Formas de conduo de um processo fermentativo: So formas de se conduzir um reator biolgico que vai depender das caractersticas do microorgs., meio de cultivo e dos objetivos que se pretende executar. 1-Processo descontnuo(batelada): Meio esterelizado add ao reator- add inculo e inicia o cultivo- ao longo do cultivo so feitas as manutenes necessrias- terminado o cultivo, esvazia-se o biorreator e o meio segue p/etapa de extrao e purificao dos produtos- biorreator esterilizado e carregado. 2- Processo descontnuo com recirculao de cls: Ao fim da batelada- clulas separadas por centrifugao- envia-se o lquido fermentado p/ preparao do produto.Obs: evita o preparo de um novo inoculo a cada batelada, reduzindo$ , tempo p/ obteno de altas [celulares].

3- Processo Contnuo: Volume de meio de cultura mantido constante atravs da retirada contnua do meio cultivado. Biorreator atinge condio estacionria no qual as variveis permanecem constantes.Obs: o processo contnuo tem incio num cultivo em batelada por conta da entrada e retirada do meio. Possui vrias possibilidades de operao: . Contnuo em um nico estgio (nico reator) c/ ou s/ reciclo de clulas . Contnuo em mltiplos estgios (n reatores em srie): c/ nica alimentao (c/ ou s/ reciclo de clulas) ou c/ mltiplas alimentaes (c/ ou s/ reciclo de clulas). Vantagens: aumento da produtividade, menor mo de obra, possibilidade de associao c/ outras operaes contnuas de produo. Desvantagens: > investimento inicial da planta, > ocorrncia de contaminaes, dificuldade de operao no estado estacionrio 4-Processo Descontnuo Alimentado (fed batch): Introduz-se o inculo ocupando de 10 a 20%inicia-se a alimentao do meio de cultura s/ retirar o lquido processado- operao prolonga at o preenchimento do volume til- at a retirada do caldo processado p/recuperao do produto. Obs: utilizado no reaproveitamento de clulas. 5- Processo Semicontinuo: Recebe esse nome pela interrupo de t em t tanto do fluxo de entrada do meio quanto do de sada de material cultivado. Uma vez colocado o meio de cultura e o inoculo- aguardase o trmino do cultivo- retira-se parte do meio cultivado- add um volume igual do meio que foi retirado.