VII.

- DISCUSIONES

Segn: (DORAN, 1995) Es evidente que la grfica no existe fase de adaptacin o latencia, ya que las clulas de una poblacin no mueren todas a la vez, si no que la desactivacin del cultivo se produce durante un periodo finito de tiempo que depende del nmero inicial de clulas viables y de la severidad de las condiciones impuestas (debido a que por falta de tiempo no se logr obtener los puntos de dicha fase) Como la ecuacin Ln(x) = u.t + ln(xo) se aplica nicamente cuando u es constante, es decir, durante la fase de crecimiento exponencial, en primer instancia deben calcularse los puntos que pertenecen a dicha fase. Segn la Figura 1 los 3 primeros puntos pertenecen a la fase exponencial.

Tiempo vs X (Conc. Celular)

1.4
1.2

X (g/l)

0.8
0.6

0.4 0.2 0
0 2 4 6 8 10

Tiempo (hr)

Figura 1: Concentracin Celular

Tabla N 03: Concentracin de Nutrientes para un medio de fermentacin Nutriente extracto de levadura Sacarosa (NH4)2SO4 KH2PO4 MgSO4. 7H2O Solucin de sales Concentracin(g/l) 1.8 13.40 0.8486 0.2632 0.1216 10 ml/l Pesos(g) 0.18 1.340 0.08486 0.02632 0.01216 1ml

Tampn Citrato pH 4.2 = 100 ml/l Se debe tener un pHoptimo=4.2 (sino se debe ajustar con Tampn citrato)

Segn: Kurman (1988), citado por Gomes et al. (1998) y Leveau et al. (2000). En el medio de cultivo el extracto de levadura fermentativa y la inclusin de factores (temperatura y agitacin) tuvo un efecto estimulante sobre el crecimiento porque hubo una mayor actividad fermentativa y la inclusin de factores (temperatura y agitacin) de crecimiento en puesto que tambin los medios

utilizados en el cultivo del microorganismo contiene todos los elementos en cantidades adecuadas para la sntesis del material celular y para la produccin de metabolitos o enzimas (por Ej. mejor degradacin de azcares).

 Segn: BERRY D. R., BROWN C. El cambio de color que se produjo en el DNS se debe a la reaccin del cido 3,5dinitrosalicilico con los aldehdos del azcar convirtiendo en grupos carboxlicos en medio alcalino (Despus del calentamiento de los tubos se empieza a presenciar una tonalidad ladrillo). BERRY D. R., BROWN C.

Concentracin 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0

Absorbancia 0.821 0.773

Absrobancia 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 -0.2 0 1

X vs ABS
y = 0.2145x - 0.0055 R = 0.9939

0.672 0.52 0.407 0.304 0.212 0

Concentracion

Segn: (Pelczar J. Michael, 1982)

Los errores en la calibracin de la sacarosa son mnimos ya que nuestra absorbancia es menor que uno(es decir el rango de linealidad se da a valores de

absorbancia de 0,01 a 0.9 y te permite determinar valores ms exactos, ya que si la absorbancia es mayor el error es mayor).
Fig. Consumo de Sustrato

Tiempo vs So (g/l)
2 1.9

So (g/l)

1.8 1.7
1.6 1.5

1.4
0 2 4 6 8 10

Tiempo

Segn: WATSON K., 1980 El sustrato consumido por el microorganismo tiene como finalidad el crecimiento celular, mantenimiento de las actividades vitales y la generacin de producto, para el caso donde la formacin de producto no est asociada de forma directa al metabolismo energtico. la cintica de consumo de la fuente de carbono tuvo el comportamiento esperado, ya que tericamente conforme pase el tiempo en la fermentacin el consumo de la fuente de carbono es progresivo dependiendo de la velocidad de reaccin.

WATSON K., 1980. In: Menbrane fluidity: Biophysical tachniques and cellular regulation. M. KATES, A. KUKSIS. Humana Press. P. 349. Chifton. New Jersey.

Tiempo vs X(G/L) - So(g/l)

1.4 1.2 1 X (g/l) 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 2 4 6 8 10 Tiempo 2 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 1.4 1.3 1.2 Concentracin Celular (g/L) Concentracin Sustrato (g/L)

Segn Owen P:
Los carbohidratos son fuente fundamental de carbono y energa para el crecimiento microbiano. Aproximadamente el 96% de fermentacin de se lleva a cabo mediante cepas de levadura o especies relacionadas. Estos

microorganismos consumen toda la fuente de nutriente disponible, hasta encontrar el nutriente limitante. Adems los nutrientes disminuyen inversamente al crecimiento de microorganismos. Como se puede observas en la grafa de la prctica realizada, esto no se pudo comprobar, debido a la existencia de diversos factores que pudieron influir, tales como: diluciones mal realizadas, lectura mal realizada en le espectrofotmetro, por la inhibicin de sustrato. BERRY D. R., BROWN C. 1987

BERRY D. R., BROWN C. 1987. Physiology of yeast growth. In: BERRY D.R., RUSSELL I., STEWART G. G:; Yeast Biotechnology, p. 159, Allen et Unwin, London.

VIII.- CONCLUSIONES

Terminada la prctica se concluye lo siguiente: La Saccharomyces Cerevisiae ATCC 4126, es una levadura fermentativa que necesita de azcares para poder obtener la energa suficiente para sus procesos vitales, pero necesitando incluso de otros sustratos para su anabolismo como son N, P, C, S, K y Mg. Adems de las vitaminas,

protenas y aminocidos (proporcionadas por el extracto de levadura), y de sales. Nuestro medio de cultivo se dise para una biomasa de 5 g/l, pero en la prctica experimental solo se obtuvo 1.1538 g/l de biomasa. Los parmetros obtenidos experimentalmente para nuestra cintica de crecimiento son: Yx/s = 0.44 g/g para la sacarosa mx=0.39h-1 y Qx=0.112 g/hr. En la curva de crecimiento de la Saccharomyces cerevisiae ATCC 4126 para un cultivo por lote, no hubo tiempo para la fase de latencia, para la fase exponencial fue de 2 horas, a partir de aqu se produjo la mantencin para luego a las 6 horas siguientes dar inicios de muerte.