Unidad: Microbiologa Bsica clase 2 Prueba II [12-05-09] Docente: TM LIC Mg Joselyne Gahona R.

Muestra de secrecin Nasal

Este es un exmen que se solicita solo a personal hospitalario y a manipuladores de alimentos, o a menos que un Mdico sospeche que esa persona es portador de S. aureus. Procedimiento: Muestra solicitada en pesquisa de portadores de S. aureus. Tener buena iluminacin directa de las fosas nasales. Paciente sentado con cabeza hacia atrs. Con el pulgar izquierdo levantar el tabique nasal e introducir una trula humedecida con suero fisiolgico en las fosas nasales y rotar suavemente por la paredes. Si la trula se introduce sin estar mojada o humedecida se puede provocar dolor y estornudos al paciente. Introducir en medio de transporte Amies, Stuart y enviarla al lab. Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre y Agar Chocolate. Incubar por 18-24hrs a 37C. Al da siguiente lo que nosotros buscamos son colonias beta hemolticas, medianas, con pigmento dorado que correspondan a S. aureus; cualquier otra cosa que no sea S. aureus no se informa, porque puede ser flora normal del paciente. En el caso de la muestra la trula no se debe introducir en la parte anterior de la cavidad nasal por que ah podramos sacar todo lo que es flora normal; hay que introducir la trula hasta arriba, cuando el paciente se queje de molestia esa el la mejor zona donde hay que tomar la muestra por que ah debe de estar alojado S. aureus siempre y cuando la persona lo tenga como M.O. portador. FLORA DE NORMAL: Grandes cantidades de: Corynebacterium sp., Neisseria no patgena, Streptococcus a y g

Toma de Muestras
La Toma de Muestra es el elemento principal que condiciona el buen resultado de un Examen de Laboratorio. Si se llega a tomar mal la muestra nosotros no vamos a poder llegar a un buen diagnstico; por lo tanto muchas veces es el Tecnlogo la persona que tiene que capacitar a las enfermeras o a los paramdicos para que tomen correctamente un exmen. Recomendaciones para la toma de muestras bacteriolgicas: o Tomarlas antes de la terapia antimicrobiana. Preguntar al paciente si ha tomado algn antibitico o antifngico, si su respuesta es S se le pide que vuelva 7 das despus que halla tomado la ltima pastilla o de lo contrario el examen sale negativo. o La muestra debe estar bien tomada y no debe contener flora normal. o Debe recogerse en recipientes apropiados, limpios y estriles. Por que si no es estril el diagnstico va a estar mal hecho por nosotros. o Deben etiquetarse con datos del paciente y examen solicitado. (por ej si en la orden Mdica dice UROCULTIVO y en la nota de la muestra no dice urocultivo eso no se procesa y se solicita segunda muestra, por que esta muestra que vamos a ver tiene que tener ciertas condiciones adecuadas que si no estn somos nosotros los que nos vamos a equivocar en el diagnstico.) o Enviarla al Laboratorio en tiempo mnimo o usar medios de transporte, antes de las 2 primeras horas despus de haber tomado la muestra. En caso de que el centro hospitalario est muy lejos del laboratorio hay que usar medios de transporte.

hemoltico, S. anaerobios, etc.

epidermidis,

Por lo tanto solamente tenemos que enfocarnos en esta muestra a la bsqueda de S. aureus, todo el resto se considera flora normal, a menos que se solicite dentro de un centro hospitalario la pesquisa de Neisseria meningitidis y ah nosotros tendramos que incorporar una placa especial que se llama THAYER MARTIN para la bsqueda de este M.O.

Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre, Agar Chocolate y Agar Mc Conkey. Incubar por 18-24hrs a 37C. Todas las placas que se siembran en agar chocolate se deben incubar en tarro con vela, con 5-10% de CO2, para que los Streptococcus o alguna bacteria fastidiosa pueda crecer mejor. FLORA DE CONJUNTIVA: FLORA NORMAL: la flora normal es escaza, apenas aparecen un par de colonias. Regular cantidad: Staphylococcus epidermidis Neisseria sp. Corynebacterium sp. Escasa cantidad: Haemophilus influenzae Streptococcus pneumoniae Streptococcus pyogenes Staphylococcus aureus Etc. PATGENA: aqu va a predominar un tipo de M.O. y es ms abundante. Neisseria gonorrhoeae: produce Exoftalmia Neonatal. En esta imagen se aprecia un recin nacido con infeccin ocular por N. gonorrhoeae; por eso a todos los recin nacidos le agregan una gota de Cloranfenicol o Gentamicina para prevenir una infeccin al momento que nace. Chlamydia trachomatis: produce Tracoma, enfermedad que puede producir ceguera. Y esto tambin se puede trasmitir al momento del parto, ya que la Chlamydia es una bacteria que es

Secrecin Ocular
En el caso de cuando alguien tiene conjuntivitis lo primero que hay que preguntar es que si se ha estado echando algunas gotas con antibiticos, si dice que Si hay que mandarlo a la casa y esperar que pasen 7 das como mnimo. Procedimiento: Tomar muestra para cultivo (antes de aplicacin de antibiticos). Es necesario inmovilizar la cabeza con ayuda de otra persona, tomar muestra con extremo cuidado. Obtener secrecin con trula estril del fondo del saco inferior en el ngulo interno del ojo o del extremo interior del prpado. Para eso se baja el parpado y con una trula bien delgada se saca toda la secrecin, si se saca la secrecin que la persona empieza a eliminar a travs de el lagrimal probablemente ah vayan polimorfonucleares con bacterias muertas por eso no nos sirve ese tipo de muestra, sino que hay que mover el parpado y sacar la secrecin que est dentro del fondo del parpado. Rotar la trula suavemente para que el algodn se empape de la secrecin purulenta. Transporte la trula en medio Amies o Stuart a T ambiente.

parasito intracelular de la pared del crvix uterino por lo tanto el bebe cuando nace se puede infectar. Staphylococcus aureus Moraxella lacunata Pseudomonas Aeruginosa. Las personas qu usan lentes de contacto tienden a infectarse por esta bacteria o por bacillos gram negativos, si no tienen un buen aseo de los lentes, si no le cambian regularmente el liquido. Haemophilus influenzae. En el caso de los nios es recurrente que se produzca conjuntivitis por esta bacteria que es flora normal. Etc.

En cambio cuando se trata de una otitis media la Muestra de fluido de odo medio se obtiene por timpanocentesis (se punciona el tmpano y a travs de una jeringa se extrae el fluido), es tomada por mdico otorrinolaringlogo (no es rutinario). En el caso de la timpanocentesis se enva la jeringa completa al laboratorio, con un tapn de goma en la punta por si hay algn M.O. anaerobio no tome contacto con el O2 y se muera.

Secrecin tica
Ac tenemos 2 tipos de otitis:

1. Otitis Externa: en donde la persona empieza a secretar hacia afuera del canal auditivo la secrecin. Corre pus desde de afuera del odo hacia la piel. 2. Otitis Media: es la infeccin del tmpano, y no drena secrecin hacia afuera
Procedimiento: La otitis externa es de la cual nosotros podemos tomar la muestra y para eso se introduce una trula que toma toda la secrecin que hay en el odo externo. Secrecin del conducto auditivo externo. Hacer un cuidadoso aseo de la piel. Se toma con trula fina hasta cerca del tmpano. Se dirige la trula en sentido oblicuo de atrs hacia delante y de abajo hacia arriba. Transporte. En medio Amies o Stuart y para cultivo anaerobio en medios comerciales.

Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre, Agar Chocolate y Agar Mc Conkey. Incubar por 18-24hrs a 37C. En el caso para cultivar anaerobios la muestra debe ser sembrada en un caldo TIOGLICOLATO para que halla reduccin de O2 y de esa manera el M.O. pueda crecer mejor en el caso de ser anaerobio. Siempre en el caso de los anaerobios a las mismas placas se le agrega un Tioglicolato por que a veces no crece ninguna ya que van en la estufa normal, pero nos crece en el Tioglicolato y eso nos hace suponer que es un anaerobio y hay que sembrarlo en placas especiales, en la jarra gaspa??. PATGENOS: Streptococcus pneumoniae: principal patgeno que produce otitis en todos los nios y adultos tambin. Haemophilus influenzae Staphylococcus aureus En adultos tienden a tener infecciones por Bacterias Gram del tipo Enterobacterias. Cuando las personas se rascan el odo ya sea con una tapa de lpiz por ej all se estn sacando la cera protectora, la cera que est recubriendo el odo protege de cualquier M.O., lo que hay que limpiar es la cera que sale fuera del odo. Etc.

Secrecin de Heridas
Procedimiento: Tomar la muestra Mediante tcnica asptica obtener: Tejido desde biopsia (porcin de tej) Pus: por aspiracin con aguja y jeringa Tomar entre 1 -5 ml de muestra. Transportar en tubo o frasco estril de tapa rosca. Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre, Agar Chocolate y Agar Mc Conkey. Incubar por 18-24hrs a 37C. FLORA NORMAL DE UNA HERIDA: Podra ser cualquier bacteria de la piel y lo que ms hay es: Staphylococcus epidermidis. En el caso de los Abscesos cerrados la muestra tambin se debe puncionar y se tiene que mandar en jeringa con un tapn de goma para evitar que si hay anaerobios se mueran. PATGENOS: Staphylococcus aureus. Tanto en infecciones intrahospitalarias como en infecciones de la comida Enterobacterias E. coli Enterobacter sp. Serratia sp. Klebsiella sp. Pseudomonas Aeruginosa. Muy frecuente y resistente a los antibiticos. Acinetobacter baumannii Bacteroides fragilis. Infecciones en personas diabticas o heridas profundas (bacteria anaerobia). Etc.

En el caso de que no se tuviera jeringa, y tampoco se pueda tomar una biopsia, la muestra se debe tomar con trula y la muestra ms apropiada para el cultivo se debe de tomar o sacar de la zona ms enrojecida de la piel y pasar la trula fuerte hasta que al paciente le duela por que ah nosotros sabemos que est el proceso infeccioso vivo, si se toma desde el centro de la herida el cultivo sale negativo por el pus. Pus: macrfagos con clulas muertas, si saco una muestra con pus nos dara un cultivo negativo.

Muestra de Orina
Es la muestra ms frecuente. En el caso de la microbiologa nosotros hacemos el exmen que se llama Urocultivo y para ello necesitamos de una serie de materiales. Materiales: Rin o bandeja. Trulas de algodn o gasa. esterilizadas Jabn o solucin desinfectante. Suero fisiolgico o agua. Frasco estril para tomar la muestra. De tapa ancha y rosca. Dispositivo para desechos. Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre y Mc Conkey. Incubar por 18-24hrs a 37C. PROCEDIMIENTO En mujeres: Sentar a la paciente cmodamente en una camilla ginecolgica con las piernas separadas. Aseo prolijo de la zona. Lavar con esponja o gasa y jabn la zona genital, con suavidad, limpiando desde adelante hacia atrs entre los pliegues de la piel (3 a 4 veces).

 Enjuagar con agua estril tibia usando otra esponja o gasa por una sola vez. Taponar vagina. En el caso de que la mujer este menstruando se debe de hacer un tapn de algodn y taponar la zona para evitar contaminacin. Pedir a la paciente que orine una pequea cantidad en el bao y despus recolectar la orina restante en el tubo o frasco estril. La persona orina y la enfermera tiene que estar atenta de tomar el segundo chorro que es el que viene propiamente de la vejiga, el primer chorro arrastra todo lo que es flora normal de la uretra por lo tanto si se cultiva eso nos va a salir contaminado. Cerrar evitando cualquier contacto. Ese frasco estril se debe de enviar al laboratorio sin refrigeracin por que los M.O. pueden morir. En hombres: Lavarse las manos con agua y jabn, enjuagar y secar. Realizar Lavado al paciente: retraer el prepucio, lavar con esponja y jabn. Enjuagar con esponja y agua caliente. Pedirle al paciente que orine un primer chorro que se elimina y se recoge la muestra restante en el tubo o frasco estril (segundo chorro). Cerrar adecuadamente el tubo o frasco. Rotular Frasco: Nombre del paciente, ficha, fecha, tipo de exmen, etc. En algunos laboratorios no se instruye al paciente que se realice todo este aseo por lo tanto cuando los Tecnlogos hacen el urocultivo este sale negativo por la contaminacin y se tiene que pedir segunda muestra. EN NIOS: Uso de recolector: En pacientes seniles y los nios pequeos, los requerimientos para una miccin limpia supera su capacidad de comprensin.

Por ello, se usan bolsas de plstico estriles, con una zona adhesiva, que se pega a los genitales externos previamente lavados y secados, para evitar que bacterias de la flora normal de la piel lleguen al recolector. Debe cambiarse la bolsa cada 30 a 45 minutos, limpiando de nuevo la zona. PUNCIN SUPRAPBICA : Esta la hace un mdico acompaado de una Ecotomografa donde ubican a travs del ecgrafo la vejiga, para eso la persona tiene que tener retencin como mnimo 4 horas de orina; las personas que se hacen el urocultivo normal lo ideal es que retengan la orina de toda la noche para que las bacterias se concentren y nosotros podamos pesquisarla ms fcilmente. En el caso de la puncin supra-pbica idealmente la persona tiene que tener orina para que la vejiga este ms agrandada y sea ms fcil de puncionar, ah lo que se hace es una limpieza con antisptico en la zona en donde se va a puncionar y a travs de una jeringa se punciona la vejiga y se extrae la orina; como eso fue hecho con tcnica estril cualquier bacteria que aparezca puede ser causante de una infeccin urinaria. TRANSPORTE DE LA MUESTRA: Una vez obtenida la muestra de orina, se enva rpidamente al laboratorio y con informacin completa. Se debe conocer: Diagnstico clnico. Sospecha de una ITU. Mtodo de recoleccin de la muestra. Hora de obtencin de la muestra. Administracin de drogas antimicrobianas. Nombre y edad del paciente. Sedimento Urinario: Esa muestra cuando llega al laboratorio se siembra en los medios anteriormente mencionados y a parte en un tubo Cnico se pone 10 ml de orina y se Centrifuga a 3000 rpm por 10 minutos.

Se bota el sobrenadante y se pone una gota del Sedimento entre porta u cubre Observar a 40x diafragma cerrado y condensador abajo.

QU SE OBSERVA EN UN SEDIMENTO URINARIO? o Clulas epiteliales. o Piocitos. o Eritrocitos. o Fibras de mucus. o Bacterias o Otros (cilindros, cristales, a veces trichomonas, hifas, etc.) En el caso de las clulas epiteliales lo normal es que no hayan ms de 3-5 clulas por campo, cuando ya hay muchas clulas y la muestra es de una mujer uno supone que se contamin con flujo vaginal y hay que pedir segunda muestra (tambin en flujo se pueden observar Lactobacilos). Cuando la muestra tenga las clulas adecuadas, ah recin la muestra est representativa y se tienen que observar varios campos, sacar un promedio de los piocitos que hay por campo, de los G.R. por campo, y de la cantidad de bacterias que es lo ms importante; si est el campo lleno de bacterias lgicamente que al da siguiente se tiene que tener un cultivo, pero si se observa un montn de bacterias y los cultivos me dan negativos es por que algo pasa con el M.O. o es muy exigente y no crece en los medios en los cuales se puso o paso algn problema con la elaboracin de los medios de cultivo. Si es que aparecen bacterias escazas no es por que halla una infeccin urinaria es por que se pudo haber contaminado con flujo, o la persona toma muchos cidos, Vit C o la muestra estuvo mal tomada. Por ej en esta imagen se puede observar una muestra de orina la cual est contaminada, est lleno de clulas grandes, irregulares que son compatibles con el tipo de clulas a nivel vaginal. Se pueden observar los piocitos, y despus en el laboratorio se tiene que diferenciar entre los

G.BL y los piocitos y eso se informa diferenciado; los globulos blancos se ven con el nucleo bien formado y el citoplasma bien claro, los piocitos son generalmente de menor tamao y estn llenos de puntitos. Los G.R. tambin tenemos que ser capaces de diferenciarlos estan los de misin creciente que se ven bien refringentes y bonitos y eso por lo tanto nos dice que hay sangre en la orina; hay otros G.R. que se ven como fantasmas, o se apenas se ve el contorno de la membrana y eso es por que los G.R. ya llevan tiempo y ah hay otra patologa a nivel renal, o se pueden ver dismrficos, aplanados o de forma extraa o hay otros que se llaman crenados, todo esto se debe informar al mdico por que el asi se puede orientar a las distintas patologas renales que hay. Lo otro que se puede ver son los distintos tipos de cilindros. Lo normal es que puedan aparecer un par de cilindros hialinos, y estos aparecen cuando hay ejercicio fsico; cuando ya la infeccin fue a nivel de rin aparecen los cilindros leucocitarios, plasmticos de G.R.

Cmo nosotros tenemos que sembrar la orina?

La orina se puede sembrar de 2 formas: 1. Recuento semicuantitativo: esta es la forma en la cual nosotros aislamos normalmente; es decir en estras. 2. Cultivo Cuantitativo: aqu a la placa de agar sangre o agar Mc Conkey se hace una estra vertical y tengo que hacer estras en forma horizontal; al da siguiente se tienen que contar cuantas colonias me crecieron y hacer un recuento. La calibracin de la argolla tiene que ser de 1 microlitro; y hay asas que vienen calibradas con 10 microlitros por lo tanto al sacar el clculo por ml de orina; cada colonia que a nosotros nos crece si usamos esta nos representa 1 colonia= 1000 UFC/ml de orina, entonces si se cuentan por ej 10 colonias en toda la placa significa que mi recuento son 10.000 UFC, este recuento se llama ndice de Kass y se realiz para todo lo que son los bacilos gram negativos, pero hoy en da los mdicos tambin lo piden para las Cocceas.

ver que hay ms de 100.000 UFC/ML y por lo tanto mi recuento va hacer informado como: >100.000 UFC/ml. Con ambas tcnicas se tiene que calcular el recuento igual, es decir se tienen que contar todas las colonias. En algunos laboratorios con el fin de optimizar la tcnica siembran unas placas que se llaman cromo agar o Urocult que vienen incorporadas con enzimas y dependiendo del color de la colonia es la bacteria, pero igualmente se tienen que hacer pruebas bioqumicas para asegurarnos. Colonia rosada: E. coli por lo tanto a o menos hay que hacer la prueba del Indol para ver que efectivamente sea una coli. Colonia azul: Enterococcus hacer un gram y chequear que sean cocos en cadenas. Entonces no es 100% fiable por que hay bacterias que de repente mutan o no tienen las enzimas y no dan de color. En otros laboratorios se pueden hacer al mismo tiempo los anlisis qumicos de la orina, y se hace con las tiras reactivas que se introducen en orina y cambian de color y despus se lee. CULES SON LAS BACTERIAS MS FRECUENTES ?

No significativo: Recuento < 10.000 UFC/ml, lo que significan 10 colonias en toda la placa; significa que eso es contaminacin o el paciente est tomando antibiticos y minti o no es significativo, a menos que sea una puncin suprapbica ya que all hay que hacer antibiograma y hay que tratarlo igual. Dudoso: 10.000-100.000 UFC/ml, ah el medico evala los sntomas del paciente y de acuerdo a ello da el tratamiento o no. Significativo: > 100.000 UFC/ml, cuando aparece esta cantidad es por que hay una ITU o infeccin del tracto urinaria; eso significa que en las placas se tienen que contar ms de 100 colonias. En la sta imagen se puede apreciar una placa de agar sangre donde fue sembrado un cultivo y est lleno, y sin tener que contar se puede

Principalmente la E.coli, otras Enterobacterias como los Proteus, las Klebsiellas, Enterobacter, Citrobacter; cualquier bacteria entrica puede producir ITU. Enterococcus, Pseudomonas tambin aparecen

frecuentemente, y en el caso de mujeres aparece el Staphylococcus saprophyticus (ITU en mujeres), en mujeres embarazadas se incrementa la cifra.

Muestra de Secrecin Vaginal

En este caso hay 2 muestras que pueden pedir en el laboratorio: 1. La muestra de secrecin vaginal 2. La muestra de Flujo vaginal Para ambas se sigue el mismo procedimiento. Procedimiento: Se pide a la paciente que se acueste en la camilla ginecolgica con los pies en los estribos. Se introduce un espculo estril en la vagina. Eso para separar las paredes y poder exponer bien el tipo de secrecin. En el caso de la secrecin vaginal se introduce un hisopo o trula de algodn estril humedecido en suero fisiolgico y se toma dos muestras de la secrecin. Y se transporta en un medio Amies o Stuart. Se retira el hisopo y luego el espculo. Una trula se coloca en un tubo con suero fisiolgico para el examen microscpico y la otra trula para cultivo. Realizar un frotis en un portaobjetos al lado del paciente. Esa es la muestra para la secrecin vaginal, pero hay casos como en el centro de ETS donde exigen flujo para la bsqueda de la Trichomonas y en ese caso en vez de introducir una trula lo hay que agregar es 10 ml de suero fisiolgico con una jeringa y una cnula y se hace un lavado, es decir se aspira y se bota varias veces para

sacar toda la secrecin. Ese lquido se aspira y se hecha en un tubo largo y eso va al laboratorio acompaado de una trula para el cultivo. En el caso de la secrecin vaginal es solo la trula para el cultivo; y en ambos casos la persona que toma la muestra hace un frotis al lado del paciente.

Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre, Agar Chocolate, Agar Sabouraud (para la pesquisa de levaduras) y Agar Mc Conkey (por que muchas veces hay infeccin por bacilos gram negativos). Incubar por 18-24hrs a 37C. En el caso del Papanicolaou no se toma con trula sino que con una varilla de madera y lo que el gineclogo hace es raspar el interior del canal uterino, y esa muestra de tejido y clulas la pasa por un portaobjeto y eso se fija.

En el caso de la secrecin vaginal el cultivo corriente se siembra en el agar sangre y en el chocolate por que crecen todos lo M.O. tanto flora normal como patgenos, se incorpora el Mc Conkey por que salen

muchas infecciones por bacilos gram negativos y el Sabouraud por que hay mucha infeccin por hongo; despus al da siguiente se hacen pruebas bioqumicas para diagnstica al patgeno ms predominante. En el caso de la observacin microscpica ya sea del flujo o se puede poner la trula en suero fisiolgico, se agita y tambin se puede observar el sedimento a travs de la trula. Lo que se busca es la cantidad de clulas epiteliales, piocitos, hongos y trichomonas, estos 4 parmetros son los que se buscan en el caso de la observacin microscpica. Lo mismo que en el sedimento urinario se tiene que centrifugar a 3000 G por 10 min, se bota el sobrenadante y el sedimento se pone entre lmina y laminilla y se observa. Para la lectura de sedimento no se especifica que es lo que se encontr sino que se pone si es positivo o negativo. A parte con la trula una vez que ya se sembr en todos los medios nosotros le agregamos una gotita de un reactivo que se llama KOH 10%, se le agrega la gota a la trula y se tiene que sentir el olor que se emana de la trula; hay una patologa que es producida por una bacteria que se llama Gardnerella vaginalis este M.O acta en combinacin con anaerobios, lo que hacen es elevar el pH de la mucosa vaginal de 4 a 5, lo suben a 5,5-6 o ms por lo tanto los Lactobacillus mueren y se empiezan a desarrollar los anaerobios junto con las Gardnerellas y esto descomponen las protenas y producen aminas aromticas y una de esas aminas reaccionan con el KOH al 10% y sale un olor a pescado, y eso es la prueba del KOH al 10%; si hay un olor fuerte a aminas es positivo, si no hay ningn tipo de olor es negativo.

Mycoplasma sp. Levaduras Anaerobios. Etc.

Un frotis de secrecin vaginal debera ser de esta forma, con clulas epiteliales rosadas, llenas de bacilos gram positivos que pueden estar en cadenas cortas o aisladas. Patolgico es encontrar otro tipo de M.O. que sean productores de vaginitis.

Vaginitis
Enfermedad infecciosa e inflamatoria que afecta la mucosa bulbar y vaginal. Etiologa: Candida albicans Trichomonas vaginalis(se detectan por el exmen del sedimento) Streptococcus agalactiae Listeria monocytogenes Estas ultimas 2 bacterias tienen gran importancia a las 37 semanas de embarazo por que ambos producen meninigitis neonatal, y es a las 37 semanas por que a esa fecha los bebes estan listos para salir. Entonces cuando las guaguas nacen por parto normal aspiran estas secreciones con estas 2 bacterias y la bacteria migra rpidamente al SNC y mueren, por eso si a las 37 semanas se pesquisa cualquiera de estas 2 bacterias hay que tratar con antibiticos y volver hacer un cultivo para estar 100% seguro de que el patgeno no est, en el caso de que la persona siga con las bacterias el Mdico opta por hacer cesaria. Escherichia coli

FLORA NORMAL UROGENITALES : Lactobacillus sp.(principalmente en la secrecin vaginal) Corynebacterium sp. Streptococcus sp. *Enterococcus sp. (algunas personas, otras pueden tener E.coli como flora normal en escaza cantidad) Staphylococcus epidermidis Neisseria sp.

 Staphylococcus aureus Enterococcus sp. Las especies de Enterococcus ms patgenas son: E. faecalis E. faecium Estos son los 2 ms frecuentes que son patgenos por que son los que ms predominan. Producen un montn de infecciones y las otras aparecen como flora normal o son patgenos de animales. La E. coli tambin es frecuente, que por el corto trayecto que hay desde la regin anal a la vaginal puede pasar fcilmente y producir la infeccin. PATGENOS : En el caso de los tipos de muestras son distintas y eso puede orientar al gineclogo, a la matrona o al tecnlogo a saber cual es el patgeno; Candidiasis Candida albicans: en el caso de las infecciones por Candida el tipo de secrecin que la mujer bota es igual que la leche cortada, son grumos que se forman y eso es lo que la mujer bota como secrecin, entonces cuando la mujer bota eso como leche cortada sabe que puede tener una infeccin por hongos. Vaginosis bacteriana Gardnerella vaginalis: en este caso la infeccin es distinta, es una secrecin gris, homognea que se pega a las paredes ya sea de la vagina o se pega a las paredes de los labios menores; y la persona que tiene Gardnerella sin tener que hacer el test del KOH ya siente el olor a pescado; por que es un olor muy fuerte que se incrementa en la menstruacin. Trichomonas vaginalis: en el caso de esta infeccin el flujo sale espumoso, principalmente por que la Trichomonas estn en constante movimiento y eso genera espuma, y de esa forma la persona que toma la muestra al ver el tipo de secrecin sabe que patgeno puede aparecer.

NORMAL

Cuando uno observa el sedimento del flujo vaginal esto es lo que se tiene que ver: un fondo claro y transparente, se pueden ver las bacterias, Lactobacillus, piocitos, G.R., y se tienen que ver clulas epiteliales grandes limpias, eso es normal. Patolgico es ver como una arenita que ensucia el fondo del frotis, clulas epiteliales llenas de una arenita, y eso es caracterstico de una infeccin por Gardnerella vaginalis, esas clulas epiteliales que estan llenas de cocobacilos gram o gram variables se llaman CLULAS CLUE o clulas sealizadores, y cuando aparecen ya sea en el sedimento o en el frotis eso ya es caracterstico de infeccin por Gardnerella. Este frotis de aqu tambin es normal y NORMAL estan las clulas y los Lactobacillus. En cambio este PATOLGICO otro es completamente distinto, ya que est lleno de cocobacilos gram + y estn sobre las clulas epiteliales, estan son las clulas Clue, clulas epiteliales cubiertas de cocobacilos gram variables, e indican Gardnerella vaginalis.

LEVADURAS: En el caso del sedimento se observan refringentes, ovaladas y con las yema en crecimiento o podemos ver hifas en el sedimento y la cantidad de hifas es proporcional al tipo de insercin que tienen, mientras ms hifas hay es por que la infeccin est activa.

En el frotis podemos ver las clulas epiteliales de color rosadas y se observan hifas de distinto tamao y adems se observan levaduras, entonces esto nosotros lo tenemos que informar.

Secrecin uretral
Esta secrecin se pide fundamentalmente en hombres, por que en las mujeres es poco probable que le de una uretritis. En el caso de las mujeres es infeccin vaginal o urinaria. En los hombres se puede producir uretritis. Procedimiento: Tomar la muestra con trula muy delgada que se llama trula de Dacrom por que las Trulas normales tienen un dimetro de 5mm o ms, y cuando un hombre tiene uretritis la uretra esta enrojecida y est inflamada por lo tanto intentar introducir una trula normal no entra, por eso se usa sta trula delgada que mide 2mm de dimetro. Entonces desde el inicio de uretra se introduce la trula 2 cms, y se gira para que se embeba completamente en la secrecin y despus se retira. Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre, Agar Chocolate, Agar Thayer Martin, Agar Sabouraud. Debe sembrarse en un Thayer Martin y se tiene que hacer un frotis al lado del paciente y esa placa se manda en un tarro con vela al laboratorio. Lo que sobra de la trula se introduce en el Stuart y eso se manda al laboratorio y all se siembran los agar sangre, agar chocolate, agar Sabouraud. A veces se puede incorporar un Mc Conkey pero no es necesario segn el ISP por que no aparecen bacilos gram -. Incubar por 18-24hrs a 37C. Adems de la siembra con la trula pequea se tiene que hacer una tincin de Gram que se denomina GONOSCOPIA, y ah lo que buscamos son gonococos, cocos en diplo gram que pueden estar intracelular o extracelular. Y adems se hace un frotis y se hace INMUNOFLORESCENCIA. Entonces va a depender de lo que el medico sospeche que tiene el paciente, y ah nos dir que exmenes hacer. En el caso de la inmunoflorescencia se hace para detectar la Chlamydia trachomatis que produce Uretritis en el hombre.

buscar los diplococcus gram -, la disposicin intra o extracelular orienta al medico para saber la evolucin del cuadro clnico, si estn todos intracelulares significa que es un proceso reciente, que el cuerpo se est defendiendo y est fagocitando al M.O.. Por el contario si se encuentran afuera y adentro significa que a ese entonces sigue siendo agudo pero lleva ms tiempo de evolucin por que hay todava bacterias que no son fagocitadas. Y cuando estn mas afuera que adentro significa que el cuadro ya lleva mucho tiempo y que es crnico. Inmunofluorescencia: Aqu todas las clulas epiteliales se tien de rojo y lo que se observa de color verde manzana son las Chlamydias, estas no tienen forma de bacterias sino que son unos cuerpos de inclusin que muy pequeitos, que tienen 2 formas son: Cuerpos elementales o Cuerpos Reticulares. FLORA PATGENA:

- En el caso de la siembra: hay laboratorios que siembran un medio especial que se llama Caldo SP4 o tienen algn test colorimtrico para la bsqueda de Micoplasma o Ureaplasma. Son 2 bacterias que no son cultivables por que los Microplasmas no tienen pared por lo tanto no forman colonias en medios slidos sino que forman en medios que son difsicos o sea tienen una parte de agar una parte de liquido y ah recin crecen, adems que son pequeos. - En el caso del Thayer Martin es un medio selectivo para las Neisserias, por que tiene varios antibiticos que sirven para eliminar la contaminante; la Vancomicina mata todo lo que sea gram +, el Colistin mata los gram -, el Sulfa trimetoprim mata los Proteus que pueden estar contaminando y las Nistatinas matan a los hongos, por lo tanto esa mezcla de antibiticos es propicia para que solamente se desarrollen las Neisserias patgenas, adems que es muy enriquecido. Gonoscopa: Esto es lo que nosotros vemos en la Gonoscopa, es decir lleno de polimorfonucleares y nosotros tenemos que

Uretritis gonoccica que es la ms predominante, producida por la Neisseria Gonorrhoeae Uretritis no Gonoccica que son la producidas por las Chlamydia trachomatis, Mycoplasma hominis, y Ureaplasma urealyticum.

Estas Uretritis se diferencian en el tipo de secrecin: Uretritis gonoccica secrecin abundante y de color amarillo verdoso. Uretritis no gonoccica secrecin es un liquido tranparente que puede confundirse con el liquido pre-seminal, por lo tanto los hombres no se dan cuenta de que estan infectados, por que es asintomtico.

En algunos lugares est normado por el ISP que se haga enriquecimiento: o caldo Selenito que se siembra por 12 hrs, y una vez pasado el tiempo se pasa a un agar SS, para optimizar la bsqueda de Salmonellas. o caldo APA o agua peptonada alcalina. Se siembra por 6-8 hrs, una vez pasado el tiempo se traspasa a un TCBS, para optimizar la bsqueda de Vibrios. PATGENOS: Salmonella sp. S. typhi, S. enteritidis, S. paratyphi A, B, C (solo se pueden diferenciar a travs de pruebas bioqumicas o por serologa) Shigella sp. S. sonnei, S. dysenteriae (ms patgena), S. flexneri, S. boydii Escherichia coli. Las E. coli Enteropatgena que se tienen que diferenciar de las E. coli normal que produce infecciones urinarias, no son las mismas. Para estas hay que hacer serologa y que tiene que dar positivo de lo contrario puede ser la tpica E. coli intestinal. ECETE. coli Enterotoxignica, que produce la diarrea del viajero. ECEP E. coli Enteropatgena, que afecta a los menores de 2 aos. ECEH E. coli Enterohemorrgica, que afecta al ganado vacuno y si las carnes estan mal cocidas produce diarrea. ECEI E. coli Entero Invasora, se diferencia del resto de las E. coli por que es inmvil, es la nica que da movilidad y da el Lia K/A, es lisina todas las otras son lisina +. ECEA E. coli entero adherente, es menos frecuente. ECEAg E. coli enteroagregativa, tambin es poco frecuente. Y que junto con la anterior son productoras de diarreas crnicas, por que se pegan en las microvellosidades. Campylobacter jejuni. Se encuentra principalmente en aves, entonces cuando se cosen mal los pollos a las personas les puede

Muestra de Heces (Coprocultivo)

Tambin es una muestra bastante frecuente. Procedimiento: Trula de algodn o sonda rectal. La trula debe humedecerse en medio de transporte Cary Blair y se introduce en el ano 2 cm, hacindola girar suavemente. En caso de sonda, usar sonda nelaton fina y se aspira con jeringa. Recoleccin de deposicin emitida. El paciente debe emitir la deposicin en un recipiente limpio, del cual se recolecta la fraccin de deposicin que muestre mayor alteracin (sangre, pus, mucosidad) y se deposita en frasco estril. Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre, Agar Mc Conkey, Agar SS y Agar TCBS. *Enriquecimiento C. Selenito y APA. Incubar por 18-24hrs a 37C. Finalidad de siembra en agar sangre: la Hemolisis. En este caso no es indispensable que se siembre la placa entera sino que puede ser 1/4 o 1/8 y es para buscar Beta Hemolisis; principalmente de Aeromonas, estas son bacterias beta hemolticas que tienen gran cantidad de beta hemolisis y que se distinguen de otros que tambin son hemolticos pero menos frecuentes que son los Vibrios. Mc Conkey: se hizo para la pesquisa de bacilos gram negativos, los que mas se detectan son la E. coli y las Shigellas. SS: se pesquisan las Salmonellas. TCBS: se pesquisan los Vibrios.

dar diarrea por Campylobacter. Esta bacteria no crece en un Coprocultivo normal hay que sembrarla en medio especializado como el Agar Skirrow a 42C por que es termfila. Esta bacteria al gram se ve como alas de gaviotas, ya que son bacilos cortos, curvos y gram -. Vibrio sp. V. cholerae, V. parahaemolyticus. No todos los vibrios Cholerae que aparecen son toxignico y producen pandemia, por eso hay que hacer serologa y hay que tipificar el tipo de Vibrio Cholerae que es. Aeromonas sp. A. hydrophila, A. sobria, A. caviae (esta no tiene Beta hemolisis o tiene muy poca). Yersinia enterocolitica. Es una colonia muy pequea y es patgena de los cerdos. Esta bacteria es lenta en el crecimiento a 37 C por lo tanto las bateras se dejan a 25C, a 25C esta bacteria es mvil y a 37C es inmvil, por eso a T ambiente crece mas rpido. El ISP norma que dependiendo de la edad los menores de 2 aos, se tienen que tomar 3 colonias Lactosa + distintas, y hacerles batera a cada una de ellas. En el caso de los adultos se toman 3 colonias Lactosa distintas para tener una mayor amplitud y poder pesquisar si es que hay alguno de los patgenos. CANTIDAD A RECOLECTAR: Deposicin lquida, se toman entre 1-5 ml. Con trula, tratar que sta se impregne en la deposicin. Deposicin slida, tomar entre 2 - 3 gr. Hay laboratorios que son ms especficos que pueden buscar toxinas del Clostridium Difficile. En la pesquisa de C. difficile, tomar 5 10 gr. Se deben tomar 2 - 3 muestras diferidas. En estudio de portadores, se toman 2 - 3 muestras seriadas en das diferentes.

Muestra de Secrecin Farngea

Procedimiento: Buena iluminacin directa y exposicin de la faringe del paciente. Se pide al paciente que abra la boca y se deprime la lengua con baja lengua. Con trula se toca la pared de la faringe y amgdalas, cualquier exudado. Evitar tocar la lengua, vula y pared de la boca. Colocar en medio de transporte y enviar al Laboratorio. Realizar un frotis en portaobjetos. Antes de tomar la muestra ojala que el paciente no este tomando ningn antibitico. Se debe transportar en Stuart o Amies y se manda al laboratorio. Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre, Agar Chocolate, y a veces en un Mc Conkey. Se tiene que hacer un frotis. Incubar por 18-24hrs a 37C. FLORA DE NASOFARINGE: Grandes cantidades de: Difteroides, Neisseria no patgena, Streptococcus a y g hemoltico, S. epidermidis, anaerobios, etc. Pequeas cantidades de: levaduras, S. aureus, Haemophilus influenzae, Streptococcus pneumoniae, bacilos Gram (-), Neisseria meningitidis, etc. PATGENOS: o Streptococcus pyogenes. Que produce amigdalitis o faringitis purulenta. o Arcanobacterium haemolyticum (bacilos gram + en letra china). Produce el mismo cuadro clnico que el Streptococcus pyogenes; y es sensible a la penicilina por lo tanto pasa mal diagnosticado como S. pyogenes. o Streptococcus C-G (se pueden tipificar solo a travs de serologa)

Neisseria gonorrhoeae Corynebacterium diphtheriae M. pneumoniae C. pneumoniae (todos estos 4 ltimos patgenos que no son frecuentes y se piden en ciertos casos)

Muestra de Expectoracin
Procedimiento: Indicada en neumona, tuberculosis y en infecciones bronquiales crnicas. Paciente debe lavarse los dientes, enjuagar con agua para limpiar cavidad oral y de esa manera disminuir la carga bacteriana de la cavidad oral. Mediante tos espontnea o provocada eliminar el esputo en un frasco de boca ancha o placa estril. El mdico, kinesilogo o enfermera debe asistir al paciente durante la obtencin de la muestra. Depositar la muestra en frasco estril. Esto se debe enviar inmediatamente al laboratorio, no se puede poner en medio de transporte. Siembra y Cultivo: Sembrar en Placa de Agar Sangre, Agar Chocolate, caldo Tioglicolato (por si hay anaerobio) y Agar Mc Conkey. Incubar por 18-24hrs a 37C. Adems tambin hay que hacer un frotis directo de muestra. La expectoracin es la muestra que llega ms frecuentemente de este tipo, pero a veces pueden llegar otras muestras que pueden ser tomadas por el medico, tales como:

En el caso de las expectoraciones a veces orientan en el diagnstico. Cuando hay expectoraciones que son cafs y se llaman HEMTICAS O HEMUMBROSAS por que se oxido la sangre pueden ser generalmente productivas por Streptococcus Pneumoniae que es lo ms frecuente. Cuando aparecen expectoraciones de color jalea de frambuesa puede ser indicativo de Klebsiella Pneumoniae. Cuando la expectoracin es de color verde azulada puede ser indicativo de Pseudomona aeruginosa y eso es por que esta tiene pigmento. Aqu se muestra un frotis de una expectoracin normal, en donde tienen que haber poca cantidad de clulas epiteliales y encontramos las bacterias y hay que describir exactamente lo que se ve, si por ej se ven diplos en abundancia se informa abundante diplococcus gram +. Interpretacin de expectoracin: Cuantificar el n de clulas escamosas en 10 campos. Ver la calidad de la muestra Informar si hay presencia de microorganismo predominante. Antes de cultivar hay que hacer el frotis y hay que hacer una cuantificacin de la calidad de la muestra y eso se hace cuantificando el nmero de clulas epiteliales en 10 campos y los polimorfos en 10 campos, se cuentan y se saca un promedio; y segn el promedio se siembra o se pide nueva muestra. En el caso de las muestras que se tienen que sembrar son todas aquellas en las que hay ms de 35 polimorfonucleares por campo y entre 10-25 clulas epiteliales por campo. Si se ven muchas clulas epiteliales es por que se contamin con flora oral o si se ven pocos leucocitos tambin puede ser que era pura saliva y no sea expectoracin.

esta con TBC o que estuvo con TBC y la puede tener en latencia en el cuerpo, las personas que no estn vacunadas dan negativa la prueba y deberan vacunarse. MUESTRAS: MUESTRAS MUCOSAS (son las expectoraciones). o Porcin purulenta o Presionarla entre 2 portaobjetos o Extender con batido bajo calor o Ocupar 2/3

Tuberculosis
DIAGNOSTICO: Baciloscopa: Tincin Ziehl Nielsen PPD (puncin en el antebrazo) Cultivo TEST PIEL: TUBERCULINA (PPD)

MUESTRAS LQUIDAS: (puede ser liquido alveolar, bronquial u orina) o Centrifugar 3000 rpm 10 o 2 gotas sedimento en portaobjetos o Secar a 37C o a TA hasta el da sgte. MUESTRAS DE TEJIDO: (tej seo, tej uterino, tej intestinal o cualquier tej que se quiera procesar). o Macerar en mortero estril o Agregar agua estril o 2 gotas en portaobjetos o Secar a 37C o a TA hasta el da sgte. Fijacin de la Muestra: poner 2 gotas Alcohol ter y encenderlo hasta que se evapore.

En este caso se le inyecta Mycobacterium bovis a nivel de piel, que en realidad es purificado proteico derivado de Mycobacterium bovis, y ese antgeno se inyecta en el antebrazo 0,1 ml y se esperar 48-72 hrs para ver la evolucin de la roncha que se tiene qu observar. Positivo es cuando hay un crecimiento menor a 5 UT (unidades de inyeccin) y el milmetro tiene que ser mayor a 10 mm; todos los que fuimos vacunados deberamos dar una roncha pero menor a 10 mm, si alguien tiene una roncha de 15 mm significa que no fue vacunado y

Baciloscopa
Muestra: - Expectoracin 2 muestras (2 ml) - Orina: 6 muestras (50 ml)

Contenido Gstrico: 12 hrs. ayuno Biopsia de endometrio. Liq. Pleural, articular Liq. Cefalorraqudeo: 2 ml Biopsia ganglionar Tejido seo

Se hace una primera lectura entre las 48-72 hrs para ver crecimiento de contaminantes, a los 30 das se informa lo positivo y a los 60 das se informa el exmen final.

Transporte: Cierre hermtico protegido de luz y calor Tincin: Fucsina fenicada calentando hasta emisin de vapores blancos. Repetir 3 veces. Duracin 5. Decolorar con alcohol cido. Coloracin de fondo: azul de metileno, mnimo 30 segundos. Lectura: Se deben leer como mnimo 100 campos de la Baciloscopa y hay que contar cuantos bacilos Fucsias aparecieron. Ausencia de BAAR: 0 en 100 campos BAAR + : <1 promedio * campo en 100 campos. (< de 10 BAAR totales) BAAR ++ : 1 a 10 promedio * campo en 50 campos. BAAR +++ : ms de 10 promedio * campo en 20 campos. 1-3 BAAR en ms de 100 campos: o Hacer otro frotis si no hay nada informar negativo y cultivar. o Solicitar nueva muestra. Para el cultivo la muestra tienen que ser procesada y el proceso es una descontaminacin que se hace con NaOH 3,5 % eso es para matar la flora normal que hay a nivel de la cavidad normal. Una vez que se descontamina se siembra en un medio que se llama Loewestein Jensen que es especifico por que es altamente enriquecido para los Mycobacterium tuberculosis, y se tiene que incubar por 60 das, por eso es lento el diagnstico de la tuberculosis.

Este es el medio Loewestein Jensen que es un tubo largo con agar de color verde agua por que tiene verde de malaquita y las colonias del Mycobacterium tuberculosis son asi (imagen), cerebrosas de color marfil o amarillo claro. Y uno tiene que cuantificar la cantidad de colonias que crecieron en el tubo, si son pocas las

colonias se pone el nmero exacto, ahora si son muchas uno pone colonias confluentes o dependiendo de la cantidad que tengan.

En el caso de la muestra bacteriolgica el examen es el Hemocultivo, cultivo de la sangre y se hace en unos frascos comerciales que vienen con un medio muy enriquecido.

Hemocultivo Recomendaciones: o Fiebre >38C o Hipotermia <36C o Leucocitosis >10.000 o Granulocitopenia <1.000 En estos casos se toma el Hemocultivo.
Siembra: o Desinfectar tapa del matraz o Pinchar la tapa e inocular la sangre o Agregar la muestra en una proporcin 1/10, 1 volumen de sangre con un volumen total de 10 en el frasco. o Medio Columbia, BHI o Castaeda (agar bifsico) o Cultivar a 37C. La sangre como es estril cualquier M.O. puede ser patgeno si va acompaado de otros exmenes. Si sale por ej un Staphylococcus

Muestra de Sangre
Procedimiento: Elegir vena perifrica de ms fcil acceso. Lavar la extremidad elegida con agua y jabn. Aplicar con trula de algodn, alcohol 70% en forma concntrica desde el lugar donde se va a puncionar hacia la periferia. Aplicar solucin de povidona yodada. Puncionar la vena y aspirar la sangre con una tcnica asptica (usar mascarilla y guantes). Existen mtodos comerciales que son muchos ms rpidos que son el venochet o sistema Vacutainer que es un sistema de llenado al vacio de los tubos; es ms fcil por que se punciona con la guja se pone el capacho que viene con otra aguja que da mirando hacia el tubo y si la persona es cuidadosa no debera sentirse el movimiento en poner y sacar los tubos y es mucho ms rpido y menos riesgo que se hemolise la sangre.

epidermidis, Bacillus o un Corynebacterium, estos pueden significar en poca cantidad que la puncin venosa no fue en las optimas condiciones y eso es contaminante. En los sistemas manuales se inocula la muestra 10 ml por cada 90 ml de medio y nosotros tenemos que observar a partir de las 24 hrs el frasco para ver si hay algn cambio. Y esos cambios pueden ser hemolisis, coagulos, gas, turbidez, todo esto es seal de crecimiento bacteriano y cuando eso pasa nosotros tenemos que hacer una resiembra que se hace a las 24 hrs y al 7 da, y uno saca una gotita del frasco me halla cambiado o no por eso se llama ciego, hay que ver si crecen M.O. y hacer gram y observarlos. El medio de cultivo debe contener 0,025 a 0,05% de polianetol sulfonato de sodio (SPS) como anticoagulante. Este inhibe la actividad bactericida del suero contra muchas bacterias y la fagocitosis, adems inactiva el complemento, neutraliza lisozimas y algunos antibiticos del grupo de aminoglicsidos. Peptostreptococcus, Gardnerella y algunas cepas de Neisseria spp. son inhibidas por el SPS, este efecto puede ser neutralizado suplementando el medio con gelatina 1- 2% (para evitar que el anticoagulante me mate las bacterias fastidiosas). El caldo del hemocultivo debe ser capaz de permitir el crecimiento de cualquier bacteria de importancia clnica. En los sistemas manuales la eleccin del medio de cultivo, la temperatura y atmsfera de incubacin es decisin del microbilogo basado en el diagnstico clnico.

Una desventaja de este sistema con relacin al automatizado es el mayor riesgo de contaminacin por la manipulacin de las botellas al realizar los procedimientos de tincin y traspasos. la nica diferencia es que las maquinas cultivan las botellas y a travs de un mtodo espectofotmetro en el fondo del tubo cambia de color por la acidificacin por que cuando crecen las bacterias hay glucosa se acidifica el medio y cambia el color del fondo del tubo y la maquina tira una alarma, nosotros lo que tenemos que hacer es sacar el frasco de la maquina, cultivarlo en agar sangre y chocolate, y hacer una tincin de gram para saber cual es el M.O. que creci. La ventaja es que el mtodo automatizado es ms rpido a las 8-10 hrs ya puede detectar el cambio de acidificacin del medio y avisar, en cambio en el mtodo manual tenemos que cada 24 hrs estar observando si hay algn crecimiento o no. Volumen de muestra: Adultos: 10 ml Recin nacidos: 1-2 ml, lactantes: 2-3 ml, Nios: 2-5 ml Nmero de muestras: 2-3 adultos y 1-2 nios. Volumen dilucin muestra: 1:10 Punciones: de distinta procedencia (puncin de distintos lugares), espaciados 30-90 (esto por que el sistema circulatorio va dando vuelta las bacterias por lo tanto si nosotros tomamos de 1 sola va puede que salga negativo por eso se pesquisa de 3 puntos distintos del cuerpo). Y antes del pic febril por que la

fiebre es un signo de que hay bacterias y el cuerpo se est defendiendo y manda a todos los polimorfonucleares y por eso sube la fiebre, si nosotros la tomamos despus de pic febril es poco probable que el Hemocultivo de negativo.

Muestra de LCR
De mayor urgencia Tcnica asptica por un mdico Puncin L3-4 Tomar 3-5 ml. Si se saca ms puede generar problemas al paciente. Recolectar en 2 o 3 frascos estriles PATGENOS: o Haemophilus influenzae tipo b o Neisseria meningitidis o Streptococcus pneumoniae Streptococcus agalactiae Listeria monocytogenes Escherichia coli K1

Tiempo de incubacin: Cultivo corriente: 7 das. EBSA (Endocarditis bacteriana sub aguda): producidas por Streptococcus principalmente del grupo Viridans hay que hemocultivos mnimo por tener 14 das. HACEK: que son un montn de bacterias fastidiosas hay que cultivarlo por 14 das. Son bacilos gram H: Haemophilus aphrophilus A: Actinobacillus C: Cardiobacterium E: Eikenella K: Kingella Son bacterias productoras de infecciones al corazn, muy fastidiosas y que cuesta identificarlas. Brucella (producen la fiebre ondulante): hay que tener el cultivo por mnimo 21 das. Hongos: 30 das.

Se buscan en recin nacidos.

En microbiologa se solicita el 2 0 3 tubo por que en el primero hay mayor probabilidad que salga muestra de alguna normal de piel por eso el tubo 1 se va a qumica o hematologa. Nosotros tenemos que calificar el aspecto del liquido, si es claro como agua de roca, hay que centrifugarlo 3000 rpm 15, en el caso de haber sobrenadante se le hace una reaccin de antgeno capsular para el Haemophilus influenzae tipo b, Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae. Y del sedimento se toma la muestra para el cultivo y se siembra en las placas de Agar sangre, Chocolate, Thayer Martin, Tioglicolato y un Mc Conkey y adems se tiene que

hacer el gram, que es el de mayor urgencia por que tiene que verse a los 30 min e informarlo. Por que el medico tiene que dar un tratamiento que se llama emprico, dependiendo del gram que a nosotros nos de. Si por ej nosotros decimos un coco en diplo gram + el medico se va a orientar a un antibitico que ataque pared, que llegue al liquido cfalo raqudeo. Si nosotros decimos un bacilo negativo el tratamiento va hacer distinto, entonces ese tratamiento despus el medico lo cambia con el resultado del antibiograma. En el caso de que el aspecto del liquido sea turbio se siembra directamente por que ya viene con harta carga bacteriana y se siembra en los distintos medios y se hace la tincin de gram directa, se espera hasta 72 hrs para darlo por negativo; este procedimiento es el mismo que se utiliza con cualquier otro liquido estril, liq articular, sinovial, pleural, etc. Adems de tipificar el aspecto se hace una tcnica que se llama PANDY para detectar inmunoglobulinas. Se miden las protenas, la glucosa, cloruros para ver como est las condiciones del medio y

En lo bacteriano la glucosa est baja por que es lo primero que consume la bacteria para crecer. Las protenas estan aumentadas por los distintos desechos que la bacteria vierte al lquido. Y el aspecto es turbio. Cuando se extrae el LCR este sale lentamente, es decir de a gotas ya que de otra forma la persona se puede descompensar y por eso el medico que toma la muestra empieza a calcular gota a gota cuanto hace 1 ml y cambia el tubo por que si le sacan mucho a la persona se puede descompensar y lo otro que se hace es medir la presin.

tambin en hematologa se cuantifican las clulas, el predominio celular es importante. Si es un predominio polimorfo significa que hay bacterias produciendo el cuadro, si hay un predominio mononuclear significa que es viral o algn otro tipo de patgenos.