403 Cnovas S, et al. Aspectos moleculares de la fecundacin: unin y fusin de gametos.

Rev Invest Clin 2008; 60 (5): 403-413 Revista de Investigacin Clnica / Vol. 60, Nm. 5 / Septiembre-Octubre, 2008 / pp 403-413
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Aspectos moleculares de la fecundacin:
unin y fusin de gametos
Sebastin Cnovas,* Pilar Coy*
*Departamento de Fisiologa. Facultad de Veterinaria. Universidad de Murcia, Espaa.
ARTCULO DE REVISIN
Mol ecul ar feactur es of fer ti l i zati on:
gamete bi ndi ng and fusi on
ABSTRACT
Ferti li zati on i s a complex and fasci nati ng bi ologi cal process.
The i nteracti ons between gametes transform two di fferenti at-
ed cells on a toti potent zygote. A few cell surface protei ns i n
both gametes have been i denti fi ed as essenti al for bi ndi ng and
fusi on of gametes. At the zona pelluci da level the bi ndi ng i s
i ni ti ated by speci es-restri cted bi ndi ng of the sperm to the zona
pelluci da and i s faci li tated by the protei n SED1 and or by the
bi ndi ng of sperm surface beta1/4-galactosyltransferase I
(GaI T-I ) to glycosi de chai ns of the ZP3. Thi s bi ndi ng tri ggers
the acrosome reacti on. Among the molecules that parti ci pate
on bi ndi ng and fusi on of gametes are i ncluded di si ntegri ns on
the sperm (ADAM1 and ADAM2) whi ch i nteract wi th i nte-
gri ns (6/-1, CD9, GPI -pr otei n) i n the egg plasma membrane,
whi le cystei ne-ri ch secretory protei ns (CRI SP) and the pro-
tei ns named as I zumo parti ci pate i n the fusi on. The knowl -
edge of the mol ecul es and mechani sms i nvol ved i n these
processes wi l l al l ow us not onl y a better understandi ng of the
events underl yi ng mammal i an sperm-egg i nteracti on, but
al so the devel opment of new methods for both ferti l i ty regu-
l ati on and di agnosi s and cl i ni c treatment of human and ani -
mal i nferti l i ty.
Key wor ds. Ferti li zati on. Spermatozoa. Oocyte. Acrosome
reacti on. Ferti li ty.
RESUMEN
La fecundaci n es un compl ejo y fasci nante pr oceso bi ol gi co.
Las i nter acci ones entr e gametos tr ansfor man dos cl ul as di fe-
r enci adas en un ci goto toti potente. Di fer entes pr ote nas de l a
super fi ci e cel ul ar de ambos gametos han si do i denti fi cadas por
su par ti ci paci n en l a uni n y fusi n de gametos. La i nter ac-
ci n se i ni ci a con l a adhesi n del esper matozoi de a l a zona pe-
l ci da. Esta uni n pr esenta r estr i cci ones segn l as especi es y
es medi ada por l a pr ote na SED1 y/o l a uni n de l a gal actosi l -
tr ansfer asa (Gal T-I ) a l as cadenas de gl ci dos de l a zona pel -
ci da (ZP3), desencadenando l a r eacci n acr osmi ca. Entr e l as
mol cul as que par ti ci pan en l a uni n y fusi n de gametos se
i ncl uyen l as desi ntegr i nas del esper matozoi de (ADAM1 y
ADAM2), l as cual es i nter actan con l as i ntegr i nas (6/-1,
CD9 o pr ote nas ancl adas a GPI ) del ool ema, mi entr as que en
l a fusi n par ti ci pan l as pr ote nas secr etor as r i cas en ci ste na
(CRI SP) y l as pr ote nas I zumo. El conoci mi ento de l as mol -
cul as y l os mecani smos i mpl i cados en estos pr ocesos nos per -
mi ti r un mejor entendi mi ento de l as i nter acci ones
esper matozoi de-ovoci to, y el desar r ol l o de nuevos mtodos,
tanto par a l a r egul aci n de l a fer ti l i dad, como par a el di agns-
ti co y tr atami ento cl ni co de l os pr obl emas de i nfer ti l i dad en
mam fer os, i ncl ui da l a especi e humana.
Palabras clave. Fecundaci n. Esper matozoi de. Ovoci to.
Reacci n acr osmi ca. Fer ti l i dad.
I NTRODUCCI N
La fecundaci n es uno de l os pr ocesos bi ol gi cos
descr i tos ms fasci nantes y a l a vez ms compl ejos.
Comi enza con el tr anspor te de gametos en el tr acto
r epr oductor y concl uye con l a for maci n de l os pr o-
ncl eos y l a si ngami a de l os mi smos, par a dar paso
al desar r ol l o embr i onar i o. Esta i nter acci n entr e c-
l ul as al tamente especi al i zadas pr opor ci ona un ejem-
pl o ni co de numer osos pr ocesos cel ul ar es, que con-
vi er te dos cl ul as total mente di fer enci adas en un ci -
goto toti potente.
1
Adems, l a i nter acci n esper matozoi de-ovoci to es
el fundamento de un gran nmero de ensayos de fun-
ci onal i dad esper mti ca uti l i zados a ni vel cl ni co en
l a especi e humana y en especi es ani mal es, cuyo obje-
ti vo es pr edeci r el xi to de l a fecundaci n, por l o que
un mayor conoci mi ento de l os mi smos supondr me-
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jor as en su apl i caci n en l as cl ni cas y l abor ator i os
de r epr oducci n asi sti da. Teni endo en cuenta que
l os pr obl emas de fer ti l i dad afectan a una gr an pr o-
por ci n de par ejas (entr e 10 y 20% de l a pobl aci n
mundi al ),
2,3
el nmer o de potenci al es paci entes so-
meti dos a tr atami entos de fer ti l i dad y que se pueden
benefi ci ar de l os avances pr oduci dos en este campo
osci l a entr e 40 y 80 mi l l ones de per sonas.
2
En esta revisin repasaremos los mecanismos de inte-
r acci n del esper matozoi de con l a zona pel ci da, el
pr oceso de r eacci n acr osmi ca, y l a uni n y fusi n
pr opi amente dicha de los gametos con el objetivo de que
sirva de referente para una mejor comprensin y actuali-
zacin de los conocimientos sobre los mecanismos de in-
teraccin ovocito-espermatozoide. Sin embargo, no se
tr atar el pr oceso de capaci taci n y el paso a tr avs
del cumulus oophorus, que consideramos anteriores a
la interaccin entre gametos, en sentido estricto.
Desde el ao 1951 se conoce que par a que l os es-
per matozoi des de mam fer o puedan fecundar deben
sufr i r el pr oceso de capaci taci n,
4,5
dur ante el cual
se pr oducen cambi os bi oqu mi cos en l a membr ana
pl asmti ca
6
que dan l ugar a una r emodel aci n de l as
mol cul as de l a super fi ci e cel ul ar , per mi ti endo al es-
per matozoi de r esponder al est mul o pr ovocado por
l os l i gandos de l a zona pel ci da (ZP) y sufr i r l a r e-
accin acrosmica (RA). Sin embargo, an no se cono-
cen con exacti tud todos l os mecani smos mol ecul ar es
i mpl i cados en di cho pr oceso.
I n vivo, l os esper matozoi des capaci tados que al -
canzan l a porci n ampul ar del ovi ducto deben contac-
tar con l as cl ul as del cumulus oophorus (CO) que
rodean al ovoci to. I ni ci al mente se propuso que el CO,
formado por l as cl ul as de l a granul osa y una matri z
de ci do hi al ur ni co, pod a ser atr avesado gr aci as a
l a moti l i dad espermti ca y l a presenci a de l a prote na
PH-20.
7
Posteri ormente se demostr l a exi stenci a de
l a pr ote na Hyal5 con acti vi dad hi al ur oni dasa que
permi ti r a l a penetraci n a travs del CO medi ante l a
di gesti n de l a matr i z de ci do hi al ur ni co, cuesti o-
nndose l a funci n de l a prote na PH-20.
8
Una vez super adas l as cl ul as del CO, el esper ma-
tozoi de i nter acci ona con el ovoci to. Este pr oceso de
i nter acci n se pr oduce a tr es ni vel es: l a ZP, que i n-
duce l a exoci tosi s del conteni do acr osomal ; l a mem-
br ana pl asmti ca del ovoci to, con l a que se fusi ona y
fi nal mente el ci topl asma, donde se pr oduce l a des-
condensaci n del ncl eo espermti co.
UNI N ESPERMATOZOI DE-ZONA PELCI DA
Aunque cl si camente l a i nter acci n entr e esper -
matozoi de y ZP se ha consi der ado como uno de l os
pr i nci pal es r esponsabl es del bl oqueo de l a fecunda-
ci n i nter espec fi ca,
9,10
actual mente se sabe que
di cha i nter acci n pr esenta r estr i cci ones por especi e,
pero no es espec fi ca en senti do estri cto.
11
Numerosos
estudi os han evi denci ado que l a uni n del esper ma-
tozoi de a l a ZP es un pr oceso medi ado por car bohi -
dr atos,
12-14
per o l os ol i gosacr i dos pr eci sos a l os que
se une el esper matozoi de per manecen bajo debate y
pueden vari ar segn l a especi e.
La ZP est for mada por un nmer o var i abl e, se-
gn l a especi e, de gl i coprote nas denomi nadas de for-
ma genr i ca ZP1, ZP2 y ZP3, habi ndose descr i to l a
ZP4 en l a especi e humana,
15
en r ata
10
y en hmster
(Genbank bankit821091, DQ838550).
16
Sus pr i nci -
pal es funci ones son l a uni n del esper matozoi de,
prevenci n de l a pol i spermi a, protecci n del embri n
hasta l a i mpl antaci n y el bl oqueo de l a fecundaci n
heter oespec fi ca.
17-19
Si n embar go, exi sten r efer en-
ci as que demuestran que no si empre esa especi fi ci dad
funci ona de forma estri cta.
20,21
Modelos de unin espermatozoide-ZP
A pesar de l as numer osas i nvesti gaci ones l l evadas
a cabo, no exi ste un ni co model o de uni n esper ma-
tozoi de-ZP gl obal mente aceptado par a l os mam fe-
r os.
22,23
Mi entr as que en el r atn, se asume que l os
ol i gosacr i dos de l a ZP3 (ZPC) son l os r esponsabl es
de l a uni n del esper matozoi de, en otr os ani mal es
como el cer do y l a vaca hay evi denci as de que l a
ZP3 o ZP4 (ZPB), se unen al esper matozoi de.
24
Los model os que postul an l a par ti ci paci n de de-
ter mi nados gl ci dos del ti po O-uni dos y N-uni dos
como r eceptor es esper mti cos, i mpl i can a l as gl uco-
si dasas de l os gr nul os cor ti cal es como r esponsa-
bl es de l a el i mi naci n de esos gl ci dos tr as l a
fecundaci n. En r atn, se ha pr opuesto que l os es-
per matozoi des se unen a gl ci dos del ti po O-uni dos
de l a ZP3 y que stos son el i mi nados despus de l a
fecundaci n.
25
Si n embar go, otr os estudi os evi den-
ci an el papel de l as cadenas de ol i gosacr i dos N-
uni dos en l a uni n del esper matozoi de en ganado
bovi no y por ci no.
24,26
En l a especi e bovi na se ha
descr i to l a par ti ci paci n de r esi duos de manosa
27
y
l a i mpl i caci n del ci do si l i co, tal y como demos-
tr r eci entemente nuestr o gr upo.
28
Actual mente se cuesti onan l os model os descr i tos
en l a especi e mur i na que pr oponen a l os ol i gosacr i -
dos como r esponsabl es de l a uni n del esper matozoi -
de a l a ZP, pr oponi ndose que l a funci n de l os
ol i gosacr i dos en el pr oceso de uni n esper matozoi -
de-ZP quedar a r estr i ngi da al establ eci mi ento de l a
especi fi ci dad de especi e.
29
405 Cnovas S, et al. Aspectos moleculares de la fecundacin: unin y fusin de gametos. Rev Invest Clin 2008; 60 (5): 403-413
El model o descr i to por el gr upo del Dr . Dean pr o-
pone que es l a estr uctur a supr amol ecul ar de l as pr o-
te nas l a que deter mi na l a uni n del esper matozoi de
a l a ZP, l a cual es modi fi cada por una pr oteasa l i be-
r ada desde l os gr nul os cor ti cal es. El menci onado
model o se pr opuso a r a z de l os r esul tados obteni dos
uti l i zando ani mal es tr ansgni cos, en l os que se ha-
b an i ntr oduci do l os genes de ZP2 y ZP3 humana
ZP2h y ZP3h y que for mar on una zona pel ci da con
ZP1 de r atn con una mor fol og a nor mal .
22
Segn
este model o, l a ZP for mada por ZP2 y ZP3 con una
di sposi ci n tri di mensi onal espec fi ca, ser a responsa-
bl e de l a uni n del esper matozoi de. Tr as l a uni n de
un esper matozoi de y l a extr usi n de l os gr nul os
cor ti cal es, se pr oduci r a una modi fi caci n de l a ZP2
que ocasi onar a un cambi o de l a confor maci n espa-
ci al , i mpi di endo que se puedan uni r ms esper mato-
zoi des. En este model o, aunque no se descar ta l a
par ti ci paci n de l os car bohi dr atos, no ser a necesa-
r i a su modi fi caci n tr as l a fecundaci n.
Receptores del
espermatozoide que se unen a la ZP
Se han estudi ado un gr an nmer o de r eceptor es
esper mti cos par a pr ote nas de l a zona pel ci da. En
el r atn se ha demostr ado l a exi stenci a de una mol -
cul a denomi nada sp56 con afi ni dad por l as cadenas
de ol i gosacr i dos de l a ZP.

Adems se han descr i to
otr as mol cul as denomi nadas zona adhesi nas, pr o-
acr osi na, sp38, P47, I AM38 y un gr upo de pr ote nas
l l amadas esper madhesi nas i nvol ucr adas en l a uni n
pr i mar i a y secundar i a a l a ZP, aunque l os l i gandos
de zona espec fi cos par a este gr upo de mol cul as no
se conocen.
30,31
A ni vel del esper matozoi de una de l as mol cul as
ms estudi adas como r eceptor de l os l i gandos de l a
ZP ha si do l a -1,4 Gal actosi l tr ansfer asa (Gal T-I ).
Gal T-I , como mol cul a de l a membr ana pl asmti ca,
puede actuar como un r eceptor espec fi co de gl i co-
prote nas i ncl uyendo l a ZP3.
25,32
Todos l os l i gandos conoci dos par a Gal T-I ti enen
r esi duos ter mi nal es N-aceti l gl ucosami na. Si n em-
bar go, esto no es sufi ci ente par a que una gl i copr o-
te na se una como l i gando. Por ejempl o, ZP1 y ZP2
ti enen r esi duos N-aceti l gl ucosami na como ter mi na-
l es no r educi dos, per o no son l i gandos par a l a
Gal T-I .
25
La i mpor tanci a bi ol gi ca de l a Gal T-I y l a adhe-
si n a l a ZP3 ha si do compr obada medi ante ensayos
in vitro. En exper i mentos uti l i zando ZP sol ubi l i za-
da se compr ob que sta i nhi be l a acti vi dad del en-
zi ma N-aceti l gl ucosami ni dasa, sugi r i endo que l a
ZP es r econoci da por este enzi ma.
33
Cuando l os r e-
si duos N-aceti l gl ucosami na son bl oqueados o el i mi -
nados de l a ZP3 sol ubi l i zada, sta pi er de su
capaci dad par a uni r esper matozoi des.
25
Estos r esul -
tados sugi er en que l a i nter acci n entr e Gal T-I y
ZP3 es necesar i a par a l a uni n entr e gametos. Si n
embar go, par ece no ser total mente i mpr esci ndi bl e,
al haber se demostr ado que esper matozoi des pr oce-
dentes de r atones tr ansgni cos si n Gal T-I pod an
uni r se a l a ZP aunque el nmer o de esper matozoi -
des uni dos fue menor . Por el l o, se sugi er e que en l a
ZP de ovoci tos ovul ados exi ste otr o l i gando i nde-
pendi ente de Gal T-I que per mi te l a uni n del esper -
matozoi de a l a ZP, per o que no par ti ci pa en l a
exoci tosi s del acr osoma.
34
Con el objeti vo de encontr ar otr o r eceptor esper -
mti co, di sti nto a Gal T-I , que expl i car a l a uni n a
ZP de l os esper matozoi des que no expr esan esta pr o-
te na, se estudi una pr ote na de super fi ci e par ti cu-
l ar mente atr acti va, pr esente en esper matozoi des de
cer do que tambi n par ti ci pa en l a uni n del esper -
matozoi de a l a ZP, denomi nada SED1
35,36
y que pr e-
vi amente hab a si do ai sl ada medi ante cr omatogr af a
de afi ni dad en col umnas de ZP.
37
Se ha demostr ado que l a pr ote na SED1 es capaz
de uni r se sel ecti vamente a l a ZP de ovoci tos no fe-
cundados. Adems, medi ante ensayos competi ti vos
usando SED1 r ecombi nante, di fer entes domi ni os de
SED1 y anti cuer pos contr a l a mi sma, se demostr l a
par ti ci paci n de esta pr ote na en l a adhesi n del es-
per matozoi de al ovoci to. Estos r esul tados fuer on
confi r mados cuando se uti l i zar on r atones tr ansgni -
cos que no expr esan SED1 y medi ante cr uzami ento
se obser v una r educi da fer ti l i dad en fecundaci n in
vivo. Adems l os esper matozoi des fuer on i ncapaces
de uni r se a l a ZP a pesar de no obser var se apar entes
defectos en su mor fol og a, concentr aci n, estado del
acrosoma o moti l i dad.
32,34-36
Estos mi smos autor es
35
estudi ar on si l a supr e-
si n del gen r esponsabl e de l a expr esi n de l a pr ote -
na SED1, podr a haber pr ovocado un efecto
i nesper ado sobr e l a expr esi n o funci n de l a Gal T-I ,
compr obndose que sta no se ve a afectada, de
modo que ambas son i ndependi entes.
Reci entemente
36
se ha pr opuesto que SED1 es ne-
cesari a para l a adhesi n i ni ci al entre espermatozoi de
y ZP, faci l i tando en esta adhesi n i ni ci al que l os ol i -
gosacr i dos de ZP3 establ ezcan un estr echo contac-
to con su r eceptor esper mti co, entr e l os cual es se
encontr ar a Gal T-I . La uni n de ZP3, segn este
model o, consi gue l a acti vaci n de una pr ote na-G y
l a aper tur a de canal es i ni cos que fi nal mente desen-
cadenar an l a RA.
Cnovas S, et al. Aspectos moleculares de la fecundacin: unin y fusin de gametos. Rev Invest Clin 2008; 60 (5): 403-413 406
REACCI N ACROSMI CA
En mam fer os, par a el xi to de l a fecundaci n es
necesar i o que el esper matozoi de sufr a el pr oceso de
capaci taci n y a conti nuaci n l a r eacci n acr osmi -
ca, l o cual l e per mi ti r l a penetr aci n a tr avs de l a
zona pel ci da y l a uni n al ovoci to.
El pr oceso de RA consi ste en l a exoci tosi s del con-
teni do del acr osoma como consecuenci a de l a fusi n,
en di fer entes puntos, entr e l a membr ana pl asmti ca
del esper matozoi de y l a membr ana acr osomal exter -
na, quedando expuesta l a membr ana acr osomal i n-
ter na.
17,38
El pr oceso de RA est medi ado por una
compl eja i nter acci n de seal es cel ul ar es que i ncl u-
yen acti vaci n de pr ote nas ci nasas y su poster i or
fosfor i l aci n, acti vaci n de canal es i ni cos y otr os
pr ocesos an por defi ni r .
39
La exoci tosi s del acr osoma puede ser desencade-
nada por var i os agoni stas natur al es entr e l os cual es
destaca l a ZP como pr i nci pal i nductor . Bajo condi -
ci ones in vitro, l a ZP sol ubi l i zada, l a pr ogester ona o
el i onforo de cal ci o tambi n pueden i nduci r l a RA.
40
Si n embar go, r eci entemente
41
se ha demostr ado en
r atn que l a mer a uni n del esper matozoi de a l a
zona no es sufi ci ente par a i nduci r l a RA, pr oponi en-
do que es necesar i a l a penetr aci n del esper matozoi -
de en l a matr i z de l a ZP par a que se desencadene l a
exoci tosi s.
Aunque i ni ci al mente se consi der l a RA como un
evento ai sl ado, poster i or mente se ha compr obado
que es un pr oceso conti nuo que se i ni ci a con l a capa-
ci taci n y que se ve dr amti camente acel er ado tr as
el contacto con l a zona pel ci da.
42
Al i gual que en otr os pr ocesos de secr eci n, en l a
RA el Ca
2+
juega un papel fundamental , ya que es
necesar i o par a l a acti vaci n de l as enzi mas que par -
ti ci pan en l a fusi n de membr anas.
43
Adems, este
i n tambi n r egul a el pr oceso de hi per acti vaci n, l a
qui mi otaxi s y par ti ci pa en l a capaci taci n.
44
Aunque
no se conoce total mente l a cascada de seal es que
cul mi na con l a RA, se sabe que l a i nducci n de l a RA
por l a ZP y otr os agoni stas como l a pr ogester ona,
desencadenan di cha r eacci n por el efecto que ejer -
cen sobr e el fl ujo de i ones, pr i nci pal mente sobr e el
Ca
2+
, el metabol i smo de l os fosfol pi dos, l os ni vel es
de AMPc y l a fosfor i l aci n de pr ote nas.
45
Los esper matozoi des son capaces de movi l i zar
Ca
2+
tanto del medi o extr acel ul ar como de l os dep-
si tos i ntr acel ul ar es
46
y di fer entes autor es han de-
mostr ado en humanos
47
y r atn
39
que el acr osoma
puede actuar como depsi to i ntr acel ul ar de cal ci o.
En r atn el r eceptor que i nter acci ona con l a ZP3
est l ocal i zado sobr e l a r egi n anter i or de l a cabeza
del espermatozoi de, mi entras que en humanos, a ni -
vel de l a membr ana pl asmti ca del esper matozoi de
exi sten al menos dos receptores di sti ntos que se unen
a l a ZP, uno es un r eceptor acopl ado a una pr ote na
G y el otro es un receptor ti rosi na ci nasa acopl ado a
fosfol i pasa C.
48
Resul tados de di fer entes l abor ator i os concl uyen
que dur ante l a RA hay al menos dos fases de fl ujo de
Ca
2+
haci a el ci tosol
44
y que estn i mpl i cados di sti n-
tos ti pos de canal es de Ca
2+
.
45
Di fer entes mar cado-
r es han mostr ado que el aumento de l os ni vel es de
Ca
2+
se i ni ci a en l a cabeza del esper matozoi de y ms
espec fi camente en el segmento ecuatori al , si bi en no
necesar i amente esto si gni fi ca que sea en este punto
donde se i ni ci an l as seal es tr as l a i nter acci n
con ZP3 o donde se abr en l os pr i mer os canal es de
Ca
2+
.
49
En pr i mer l ugar se pr oduce una r espuesta tem-
prana de l os canal es dependi entes de vol taje que pro-
vocan un aumento de cal ci o i ni ci al , dur ante un
br eve per i odo, el cual es segui do de una el evaci n
pr ol ongada que se manti ene a l o l ar go del ti empo.
49
Si n embar go, el pr oceso que acta como nexo de
uni n entr e l as dos fases de fl ujo de Ca
2+
per manece
si n escl ar ecer se total mente, aunque se ha pr opuesto
que es el acr osoma el r esponsabl e de l a l i ber aci n
del cal ci o que se pr oduce entr e l os dos eventos y que
di cho cal ci o es acumul ado a ni vel del acr osoma du-
r ante el pr oceso de capaci taci n.
39
I ni ci al mente se sugi r i que el aumento sosteni do
de Ca
2+
era debi do a un fl ujo extracel ul ar del mi smo a
tr avs de l os canal es Ca
v1
(ti po-L), aunque estudi os
ms reci entes proponen que l a ci nti ca de l a entrada
que se produce i ni ci al mente es compati bl e con l os ca-
nal es Ca
v3
(ti po-T) y adems l a RA se i nhi be por va-
r i os antagoni stas de canal es Ca
v3
. Con base a el l o,
al gunas mol cul as como urocori na o fenval erato han
demostrado que pueden i nhi bi r l os canal es ti po-T en
cl ul as esper matogni cas y se ha pr opuesto que po-
dr an tener apl i caci ones anti concepti vas.
50,51
Un model o bsi co que i ntenta expl i car l os di feren-
tes mecani smos i mpl i cados en el aumento de cal ci o
i ntr acel ul ar que se pr oduce en el esper matozoi de
como consecuenci a de su uni n a l a ZP y que conl l e-
va l a exoci tosi s del acr osoma es el pr opuesto por
Br ei tbar t, et al.
52
(Fi gur a 1). Si n embar go, este mo-
del o no al canza a expl i car todas l as evi denci as obte-
ni das a ni vel exper i mental , por l o que tambi n
r evi sar emos al gunas de l as pr opuestas hechas ms
r eci entemente por otr os autor es sobr e l os mecani s-
mos i mpl i cados.
38,45,53
El ci tado model o pr opone que el esper matozoi de
se une a l a ZP3 medi ante ol i gosacr i dos, al menos a
407 Cnovas S, et al. Aspectos moleculares de la fecundacin: unin y fusin de gametos. Rev Invest Clin 2008; 60 (5): 403-413
tr avs de dos r eceptor es di fer entes R y TK; (Fi gur a
1) a ni vel de su membr ana pl asmti ca. Los r ecepto-
r es (R) estn acopl ados a una pr ote na-G, l a cual ac-
ti va l a fosfol i pasa C
1
(PLC
1
) y podr an r egul ar l a
acti vi dad de l a adeni l ato ci cl asa (AC) par a pr oduci r
AMPc y acti var l a pr ote na ci nasa A (PKA). Esta
PKA acti va a su vez un canal dependi ente de cal ci o
a ni vel de l a membr ana acr osomal exter na, que l i be-
r ar a Ca
2+
desde el i nter i or del acr osoma haci a el ci -
tosol del esper matozoi de, pr ovocando el pr i mer
aumento de Ca
2+
i ntr acel ul ar , r el ati vamente peque-
o, el cual per mi te l a acti vaci n de l a fosfol i pasa C
(PLC).
Segn Dar szon, et al.
45
l a uni n de l a ZP3 a su
r eceptor acti va una pr ote na Gi que est i nvol ucr ada
en el cambi o de pH i ntr acel ul ar , medi ado por l os
tr anspor tador es de Na
+
y H
+
; adems causa despo-
l ar i zaci n de membr ana, l a cual abr e l os canal es Ca
v
pr ovocando l a entr ada i ni ci al de Ca
2+
.
En cualquier caso, para la hidrlisis de PI P
2
(fosfa-
tidil inositol bifosfato) y la produccin de DAG (diacil-
gl i cerol ) e I P3 (i nosi tol tri fosfato) es necesari o que se
produzca una el evaci n del Ca
2+
i ntracel ul ar. Segn
al gunos autores,
57
l a acti vaci n de l as fosfol i pasas
PLC
1
(mediante la protena G acoplada al receptor R)
y l a PLC (medi ante el l i gero aumento de cal ci o por
movi l i zaci n desde el acrosoma), genera l a hi drl i si s
del PI P
2
para formar I P
3
y DAG. La PKA y el I P
3
acti-
van los canales de Ca
2+
en la membrana acrosomal ex-
terna provocando el aumento de cal ci o i ntracel ul ar
mediante movilizacin desde el acrosoma.
El DAG es capaz de acti var l a pr ote na ci nasa C
(PKC) y l a fosfol i pasa A2, adems de tener un efecto
de r etr oal i mentaci n posi ti va sobr e l a PLC.
53
La
PKC pr ovoca l a aper tur a de l os canal es de cal ci o en
l a membr ana pl asmti ca del esper matozoi de, per mi -
ti endo l a entr ada de Ca
2+
extr acel ul ar al ci tosol .
La sal i da del Ca
2+
desde l os al macenes i ntracel ul a-
r es dar a l ugar a un aumento de l a concentr aci n de
Ca
2+
i ntr acel ul ar , mi entr as que l a concentr aci n
acr osomal di smi nuye, pr ovocando l a acti vaci n de
l os canal es de Ca
2+
i mpl i cados en el al macenami ento
(SOC, store opens channels), que se si tan a ni vel
de membrana pl asmti ca, desencadenando l a entrada
capaci tati va de Ca
2+
que supone un aumento soste-
ni do de l a concentr aci n de Ca
2+
ci tosl i co.
El fenmeno de entr ada capaci tati va de cal ci o se
pr oduce en un gr an nmer o de cl ul as y se basa en
l a aper tur a de un canal de cal ci o si tuado en l a mem-
br ana pl asmti ca como consecuenci a de l a r educci n
de cal ci o en l as r eser vas i nter nas.
54
Se ha pr opuesto que l os r eceptor es que medi an
esta entr ada sosteni da de cal ci o per tenecen a l a fa-
mi l i a de canal es i ni cos denomi nada TRP (transient
receptor potential).
45,53
En r atn se ha demostr ado
l a i mpl i caci n del TRPC2 en l a i nducci n de l a RA
por ZP3
55
y l a pr esenci a al menos de TRPC1, 2 y
5,
45
canal es de l a fami l i a TRP.
En el espermatozoi de, l a sucesi n de estos dos me-
cani smos (sal i da de Ca
2+
desde l os al macenes i ntr a-
cel ul ar es y el fl ujo de entr ada desde el medi o
extr acel ul ar ) est en concor danci a con l os hal l azgos
Figura 1. Representacin
esquemtica de los mecanismos
implicados en la RA. (Modifica-
do de Breitbart, et al. 1997).
ZP3: glicoprotena 3 de la zona
pelcida; R: receptor; TK: tiro-
sn quinasa; GI: protena-Gi;
PLC: fosfolipasa C; PK (A,C):
proten quinasa (A,C); PIP
2
:
fosfoinositol fosfato; DAG: dia-
cilglicerol; IP
3
: inositol trifosfa-
to; AC: acetilcolina.
Ovocito
Membrana
plasmtica
ZP3
Ca
2+
H
+
H
+
Ca
2+
II R TK
PPIP
2
DAG
3Na
+
Ca
2+
Na
+
Na
+
ATP ADP+PI
ATP ADP+PI
Ca
2+
Acrosoma
Membrana
Acrosomal externa
Ca
2+
Ca
2+
AC
PKA
IP
3
I
Cnovas S, et al. Aspectos moleculares de la fecundacin: unin y fusin de gametos. Rev Invest Clin 2008; 60 (5): 403-413 408
que demuestr an que l os eventos i ni ci al es de l a r eac-
ci n acr osmi ca r equi er en bajas concentr aci ones
(del or den de mi cr omol es) de Ca
2+
, mi entr as que l os
eventos poster i or es, i ncl ui da l a fusi n de membr a-
nas, requi eren mayores ni vel es (del orden de mi l i mo-
l ar ) de Ca
2+
.
53
Si n embar go, este model o no expl i ca cul ser a el
papel de l a pr ogester ona, cuyo efecto ha si do demos-
tr ado en l a exoci tosi s del acr osoma.
56
Otr as pr o-
puestas sugi er en que l a pr ogester ona podr a actuar
sobr e un r eceptor si tuado a ni vel de membr ana pl as-
mti ca y acti var l a PLC
45
o que l a PLC par ti ci pa en
l a exoci tosi s del acr osoma i nduci da por pr ogester o-
na, teni endo en cuenta que l a esti mul aci n con di -
cha hor mona pr oduce un aumento en l a for maci n
de DAG.
53
Respecto a l os r eceptor es sobr e l os cual es actua-
r a l a pr ogester ona exi sten al gunas contr over si as.
48
Mi entr as que al gunos autor es pr oponen que exi sten
dos r eceptor es acopl ados a un canal de Cl
-
(uno es
un r eceptor ti po GABA y el otr o es un r eceptor de
gl i ci na), otr os sugi er en que exi ste sl o un r eceptor
que pr ovoca ambos efectos si mul tneamente. En
cual qui er caso, estos r eceptor es par a neur otr ansmi -
sor es pr ovocar an una sal i da de i ones Cl
-
que cau-
san una despol ar i zaci n de l a membr ana, necesar i a
par a l a acti vaci n de l os canal es de Ca
2+
i nvol ucr a-
dos en el aumento i ni ci al de este i n.
45
Fi nal mente, par a que l a exoci tosi s tenga l ugar es
necesar i o que se pr oduzca l a fusi n de membr anas y
l a sal i da del conteni do del acr osoma. Se ha demos-
tr ado que l a mezcl a o fusi n de dos membr anas es
un pr oceso que ocur r e de for ma espontnea, y l a r e-
pul si n entr e l as car gas de l os fosfol pi dos pr evi ene
l a i nter acci n i ni ci al .
38
A pesar de el l o, en el esper matozoi de l a membr a-
na acr osomal exter na y l a membr ana pl asmti ca se
manti enen separ adas medi ante una estr uctur a de fi -
l amentos de F-acti na for mada dur ante l a capaci ta-
ci n y dependi ente de l a acti vaci n de l a pr ote na
ci nasa A, l a fosfor i l aci n en ti r osi na de al gunas pr o-
te nas y l a acti vaci n de l a fosfol i pasa D (PLD).
57
Dur ante l a RA es necesar i o que se pr oduzca l a
despolimerizacin de la F-actina, lo que provoca la des-
estabi l i zaci n de l a estr uctur a de fi l amentos par a
dar l ugar a que l a membr ana acr osomal exter na y l a
parte i nterna de l a membrana pl asmti ca puedan po-
nerse en contacto nti mamente.
Los al tos ni vel es de Ca
2+
i ntr acel ul ar (sobr e
500nM) que se pr oducen como consecuenci a de l a i n-
ducci n de l a RA, pr ovocan l a acti vaci n de pr ote -
nas cortadoras de acti na, que i nducen l a r uptur a de
l os fi l amentos de acti na y el desmantel ami ento de l a
estr uctur a de sostn entr e ambas membr anas que
l as manten a separadas.
57
La exoci tosi s del acr osoma que ti ene l ugar dur an-
te l a RA, i mpl i ca entr e otr os pr ocesos, el aumento
del Ca
2+
i ntr acel ul ar y l a for maci n de compl ejos
de protenas SNARE para que se produzca la fusin de
membr anas,
54,58
tal y como ocur r e, por ejempl o, en
l a exoci tosi s de ves cul as si npti cas.
Las prote nas SNARE son una fami l i a de prote nas
que forman compl ejos establ es y que han si do i nvol u-
cradas en l a fusi n de membranas. Adems, al gunas
de el l as han si do i denti fi cadas en espermatozoi des de
mamferos y se ha determinado que anticuerpos contra
di chas pr ote nas i nhi ben l a exoci tosi s del acr oso-
ma.
58
En concr eto l as pr ote nas denomi nadas syn-
taxins1 y 2, SNAP25 y VAMP2 se cree que parti ci pan
en l a exoci tosi s, a par ti r de l os r esul tados que de-
muestr an que l as neur otoxi nas botul ni cas que pr o-
ducen l a r otur a de estas pr ote nas ti enen un efecto
i nhi bi dor sobre l a RA.
59
Si n embar go, este model o que i mpl i ca l a actua-
ci n de l as prote nas SNARE tampoco expl i ca de for-
ma gl obal l a fusi n de membr anas que ocur r e
dur ante l a RA, al no consi der ar el papel de l as fosfo-
l i pasas, pr ote nas ci nasas, pr ote nas fosfatasas o i n-
cl uso l a funci n del ci toesquel eto de acti na que ha
si do demostr ado par ti ci pan en l a RA. Por l o tanto,
son necesar i os nuevos estudi os que tengan en
cuenta de for ma gl obal todos l os mecani smos des-
cr i tos que pueden estar i mpl i cados, par a tener un
conoci mi ento compl eto del pr oceso de exoci tosi s del
acr osoma.
I NTERACCI N DEL
ESPERMATOZOI DE CON EL OOLEMA
Una vez que el esper matozoi de atr avi esa l a ZP y
ha sufr i do l a RA, el si gui ente evento es contactar
con el ovoci to. Tr as l a RA se pr ovoca una r emodel a-
ci n de l a super fi ci e del esper matozoi de, quedando
expuesta l a membr ana acr osomal i nter na, que con-
tactar con l as mi cr ovel l osi dades del ovoci to, segn
se ha demostr ado en di fer entes estudi os en r oedo-
r es.
49
La i nter acci n se i ni ci a con una pr i mer a
uni n l bi l y a conti nuaci n ti ene l ugar l a adhesi n
cel ul ar pr opi amente di cha entr e l os dos gametos,
par a cul mi nar con l a fusi n de l as dos membr a-
nas.
60,61
Numer osos estudi os i mpl i can a var i as mol cul as
a ni vel del esper matozoi de y del ovoci to como r es-
ponsabl es de l a i nter acci n. Dur ante l os l ti mos
aos, se ha desar r ol l ado un model o que sugi er e que
l a uni n esper matozoi de-ool ema es el r esul tado de l a
409 Cnovas S, et al. Aspectos moleculares de la fecundacin: unin y fusin de gametos. Rev Invest Clin 2008; 60 (5): 403-413
adhesi n entr e l as i ntegr i nas del ool ema y sus l i gan-
dos pr esentes en l a membr ana del esper matozoi de.
La i denti fi caci n de l as pr ote nas i mpl i cadas es
uno de l os pr i nci pal es objeti vos de numer osos pr o-
yectos de i nvesti gaci n.
Las pr ote nas esper mti cas que par ti ci pan en este
pr oceso pr esentan homol og a con l as desi ntegr i nas,
una fami l i a de mol cul as, conoci da como ADAM en-
tr e l as que destacan l a pr ote na 1 secr etor a r i ca en
ci ste na CRI SP1, fer ti l i na ADAM1; fer ti l i na
ADAM2 y ci r i testi na ADAM3. Adems se ha descr i to
l a exi stenci a de una fami l i a de pr ote nas ti po i nmu-
nogl obul i nas, denomi nadas I zumo que son necesa-
r i as par a que se pr oduzca l a fusi n.
62,63
Respecto al ool ema, l as pr ote nas que se consi -
der an i mpl i cadas en esta i nter acci n son denomi -
nadas i ntegr i nas (
6

1
y otr as) y tetr aspani nas
CD9.
60,64
Adems se han obteni do evi denci as de l a
par ti ci paci n de una segunda tetr aspani na CD81
en l a fusi n de l os gametos, l a cual est estr echa-
mente r el aci onada con CD9 en su estr uctur a y
funci ones.
65
Uti l i zando r atones knock-out par a l a
mol cul a CD81, obser var on una r educci n de l a
fer ti l i dad en l os r atones obteni dos en l a cuar ta o
qui nta gener aci n.
Una de l as pr i nci pal es bar r er as par a l a i denti fi ca-
ci n de l as mol cul as r esponsabl es del pr oceso de
uni n y fusi n de gametos es l a fal ta de un ensayo
in vitro de uni n esper matozoi de-ovoci to que si mul e
fi el mente l as condi ci ones fi si ol gi cas en que se pr o-
duce esta i nteracci n.
66
El proceso de fusi n de membranas puede ser di vi -
di do en tr es eventos cl aves:
El pri mero consi ste en el reconoci mi ento de mem-
br anas o adhesi n y se tr ata de un contacto i ni -
ci al entr e l as dos membr anas medi ado por
uni ones pr ote na-pr ote na o por uni ones pr ote -
na-carbohi drato.
El segundo consi ste en l a aposi ci n de l as mem-
br anas; l a acti vi dad fusogni ca de l as pr ote nas
conl l eva que l as dos membr anas tengan un con-
tacto nti mo y se pr oduzca l a adhesi n uni ndose
f si camente l as dos membr anas (a tr avs de i nte-
r acci ones pr ote na-l pi do o pr ote na-pr ote na), l o
cual i nduce un cambi o de confor maci n i r r ever si -
bl e de modo que l as pr ote nas se dobl an sobr e s
mi smas.
El ter cer evento cor r esponde a l a mezcl a de l pi -
dos; una vez que l as membr anas estn en contac-
to, se pr oduce l a mezcl a de l pi dos dando como
r esul tado una bi capa que per mi te l a conti nui dad
ci topl asmti ca entr e l as dos cl ul as.
67
La fusi n queda r estr i ngi da a una r egi n espec fi -
ca de cada gameto. En el esper matozoi de exi ste una
por ci n de membr ana pl asmti ca, denomi nada r e-
gi n o segmento ecuator i al , que cubr e par te del
acr osoma, per o no se fusi ona con l a membr ana acr o-
somal exter na dur ante l a RA (Fi gur a 2). En esta r e-
gi n es donde se pr oduce el contacto con el ool ema y
se i ni ci a el pr oceso de fusi n entr e ambos gametos.
68
En el ovoci to, l a fusi n se pr oduce a ni vel de l as mi -
cr ovel l osi dades pr esentes en l a mayor par te del ool e-
ma; si n embar go, en r oedor es, se ha obser vado que
l a par te del ool ema ms cer cana a l a pl aca metafsi -
ca no pr esenta estas mi cr ovel l osi dades y l a fusi n
r ar amente ocur r e a este ni vel , no exi sti endo mol cu-
l as de CD9, ni i ntegr i nas en di cha r ea. Se ha pr o-
puesto
69
que l as mi cr ovel l osi dades actan como una
pl atafor ma don de se con cen tr an l as pr ote n as
que par ti ci pan en l a adhesi n y fusi n, una estr ate-
gi a uti l i zada ampl i amente en l os si stemas bi ol gi cos
par a aumentar l a super fi ci e. I ncl uso l as mi cr ovel l o-
Figura 2. Representacin
esquemtica de las interacciones
espermatozoide ovocito. (Modifi-
cado de Kaji y Kudo, 2004). (a)
El espermatozoide atraviesa el
CO y se une a la ZP. (b) Tras
la unin a la ZP se produce la
RA. (c) El espermatozoide atra-
viesa la ZP y se une al oolema.
(c) Detalle de la unin del esper-
matozoide al oolema. (d) La fu-
sin se inicia a nivel del
segmento ecuatorial. (e) Tras la
fusin el oolema va englobando
al espermatozoide.
Membrana acrosomal interna
Segmento ecuatorial
Cumulus oophorus
Acrosoma Microvellosidades
Espacio perivitelino
ZP
Placa metafsica
*
*
(b)
(a)
(c)
(d)
(e)
(c)
Cnovas S, et al. Aspectos moleculares de la fecundacin: unin y fusin de gametos. Rev Invest Clin 2008; 60 (5): 403-413 410
si dades actan como una pr ofusi n de l a membr ana
con un bajo r adi o de cur vatur a, l o que puede faci l i -
tar que se pr oduzca un contacto nti mo entr e el es-
permatozoi de y el ool ema.
Molculas implicadas en el
proceso de unin y adhesin entre
el espermatozoide y el ovocito
A ni vel esper mti co, el pr i mer hal l azgo sobr e l as
desi ntegri nas como mol cul as i mpl i cadas en l a adhe-
si n al ovoci to fue l a pr ote na PH-30 o fer ti l i na, ca-
paz de i nhi bi r l a fusi n en un al to por centaje.
70
El
anti cuer po anti PH-30 i nmunopr eci pi taba una pr o-
te na for mada por un heter od mer o con dos subuni -
dades, ferti l i na ADAM1 y ferti l i na ADAM2.
Estas dos subuni dades se han i denti fi cado en di fe-
r entes especi es de mam fer os, como el r atn, aunque
al gunas especi es pueden no expr esar l a subuni dad a
de l a fer ti l i na. Segn al gunos autor es,
71
l os esper -
matozoi des humanos no expresan una prote na ferti -
l i na funci onal , l o cual pone en duda su funci n
pr opuesta en l a fecundaci n. Estos autor es cuesti o-
nan l a exi stenci a del compl ejo ferti l i na en huma-
nos, ya que no han si do capaces de i denti fi car l o en
macacos.
Medi ante ensayos en l os que se uti l i zar on secuen-
ci as de ppti dos de l a fer ti l i na de hmster se obser -
v una i mpor tante r educci n de l a fusi n entr e
esper matozoi des y ovoci tos,
72
por l o que se l e ha
atr i bui do una funci n en el mecani smo de fusi n.
Par a pr ofundi zar en el estudi o del mecani smo de
uni n y fusi n de gametos se han obteni do r atones
knock-out con ausenci a de fer ti l i na , ADAM3 o am-
bas. Los esper matozoi des de cada una de l as l neas
de r atones mostr ar on una dr amti ca r educci n en l a
uni n a ovoci tos si n ZP en tor no al 90%.
73
Si n em-
bar go, se obser v que estos r atones knock-out par a
fer ti l i na o ADAM3, pr esentaban una r educci n en
l a expr esi n de otr as desi ntegr i nas y que se podr an
afectar otr as pr ote nas no i denti fi cadas y r esponsa-
bl es de l a uni n del espermatozoi de. Reci entemente
74
se ha obser vado tambi n que l os r atones knock-out
par a ADAM1 son fr ti l es, per o poseen una sever a
r educci n de l a expr esi n de ADAM2 en l a super fi ci e
de l os espermatozoi des.
Molculas implicadas en el
proceso de fusin espermatozoide-ovocito
Sol amente unas pocas prote nas espermti cas que
son candi datas a tener un papel en l a fusi n esper -
matozoi de-ovoci to se han estudi ado con detal l e. Es-
tudi os en el r atn atr i buyen un papel en l a fusi n a
l a pr ote na DE o CRI SP1 y CRI SP2
75
y equatori-
na
76
. Adems, estos ensayos tambi n i ndi can que
fer ti l i na y ADAM3 son necesar i as par a l a fusi n,
aunque cuando se uti l i zar on r atones knock-out par a
estas dos mol cul as se obser v sol amente una l i ger a
i nhi bi ci n de l a fusi n.
73
En cuanto al ovoci to, l a mol cul a CD9 es uno de
l os mi embr os de l a fami l i a de l as tetr aspani nas que
se encuentr a di str i bui do por toda l a super fi ci e del
ool ema, con l a excepci n de l a r egi n ms cer cana a
l a pl aca metafsi ca en el caso de r oedor es, donde r a-
r amente se pr oduce l a fusi n.
77
Kaji et al. demostr a-
r on que l os esper matozoi des er an capaces de uni r se
a ovoci tos de r atn defi ci entes en CD9 de modo si -
mi l ar al ti po sal vaje, per o que si n embar go r ar amen-
te se pr oduc a l a fusi n in vivo e in vitro. Adems,
r eci entemente
78
se ha demostr ado que l a mol cul a
CD9 contr ol a l a for maci n de r eas que conti enen
otr as tetr aspani nas e i ntegr i nas, l as cual es estn i n-
vol ucr adas en l a fusi n de gametos en l a especi e hu-
mana y mur i na.
El mecani smo de acci n en el pr oceso de fusi n de
CD9 no se conoce en detal l e, per o se postul a que ac-
ta en col abor aci n con otr as pr ote nas de super fi -
ci e del ool ema. Al gunos estudi os sugi er en que CD9
funci ona a tr avs de un gr an pl i egue o bucl e (EC2) y
que una secuenci a determi nada de ami noci dos a ese
ni vel i nter vi ene en l a fusi n.
79
Al gunos

autor es
66
afi rman que adems del CD9 como mol cul a esenci al
en este pr oceso, par ti ci pan tambi n al guna(s) de l as
denomi nadas prote nas ancl adas a GPI (gl i cosi l fosfa-
ti di l i nosi tol ). Hasta el momento, no ha si do defi ni ti -
vamente i denti fi cada cul de el l as es i mpor tante
par a l a fecundaci n, per o se ha demostr ado que al -
guna, como l a CD55, no es esenci al par a l a fusi n de
gametos.
A ni vel esper mti co se ha descr i to l a exi stenci a de
una fami l i a de pr ote nas denomi nadas I zumo que
son r esponsabl es de l a fusi n del esper matozoi de en
r atn.
62
Ratones con una del ecci n del gen I zumo
pr oducen esper matozoi des con moti l i dad, mi gr aci n
y r eacci n acr osmi ca con par metr os dentr o de l a
nor mal i dad, per o in vivo no pr odujer on descenden-
ci a mi entr as que in vitro se obser v penetr aci n de
l a ZP, per maneci endo l os esper matozoi des en el es-
paci o per i vi tel i no, si n que se pr odujer a l a fusi n con
el ool ema. Uti l i zando l a tcni ca de I CSI se obtuvo
descendenci a en ni vel es si mi l ar es al gr upo contr ol .
En l a fi gur a 3 se r epr esentan al gunas de l as mo-
l cul as i mpl i cadas en l a uni n y/o fusi n de l os es-
per matozoi des al ovoci to. A ni vel del ovoci to l as
i ntegr i nas par ecen tener al guna funci n en l a
411 Cnovas S, et al. Aspectos moleculares de la fecundacin: unin y fusin de gametos. Rev Invest Clin 2008; 60 (5): 403-413
uni n, actuando como r eceptor es de l as pr ote nas
esper mti cas ADAM, mi entr as que en l a fusi n
par ti ci pa el CD9 en cooper aci n con pr ote nas GPI .
A ni vel del esper matozoi de, l as pr ote nas de l a fami -
l i a ADAM par ti ci pan en el pr oceso de uni n, mi en-
tr as que l as i mpl i cadas en el pr oceso de fusi n son
pr ote nas ti po I zumo
62
y pr ote nas epi di di mal es
ti po CRI SP.
75
CONCLUSI ONES
En concl usi n podemos afi r mar que dur ante l os
l ti mos 30 aos se han i denti fi cado al gunas de l as
mol cul as que par ti ci pan en el pr oceso de i nter ac-
ci n ovoci to-esper matozoi de; si n embar go, di cho
pr oceso an no se conoce en su total i dad. Debi do a
que l os eventos i mpl i cados ti enen una i mpor tanci a
mayscul a par a el di agnsti co de pr obl emas de i n-
fer ti l i dad y desar r ol l o de nuevos mtodos de tr ata-
mi ento o r egul aci n de l a r epr oducci n, l as
i nvesti gaci ones en este campo en l os pr xi mos aos
ser n cr uci al es par a l a sol uci n de l os pr obl emas
i ndi cados.
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Unin
Fusin
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Espermatozoide
ADAMS
Fertilina
Fertilina Cirystetina

DE
Protena-GPI
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Reimpresos:
Dr. Sebastin Cnovas-Bernab
Departamento de Fisiologa. Facultad de Veterinaria.
30071 Campus de Espinardo.
Murcia. Espaa
Tel.: +3496 836-4789
Fax: +3496 836-4147
Correo electrnico: scber@um.es
Recibido el 14 de noviembre de 2007.
Aceptado el 11 de agosto de 2008.