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CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003
28
Vantagens:
simples e prtica, sendo ideal para anlises
de rotina em que a exatido no um fator
importante.
independe do volume injetado.
independe da estabilidade do aparelho.
no necessria a utilizao de padres.
Limitaes:
essa tcnica no serve para amostras mais
complexas.
exige o registro de todos os componentes da
amostra.
no adequada para a anlise de traos.
normalmente a exatido baixa.
E.3.2. NORMALIZAO DE REAS
Na normalizao interna levou-se em considerao que a resposta do detector sempre a
mesma para qualquer substncia, ou seja, k o mesmo para todos os componentes da amostra. Se
isso fosse verdade, a substncia B teria a mesma rea das substncias A e C se essas trs substncias
estivessem na mesma concentrao. Isso representaria que o detector teria a mesma sensibilidade
para todos os componentes dessa amostra. O que normalmente acontece que o detector pode
responder de maneira diferente para cada substncia e, para uma mesma quantidade em massa de
substncias diferentes, fornecer, como resultado, reas completamente dspares. Quando isso ocorre,
o que a maioria dos casos, a rea obtida precisa ser corrigida. Essa correo feita pela
determinao do valor da constante de proporcionalidade k para cada um dos componentes da
amostra, que conhecida como fator de correo ou fator de resposta (f), a partir do cromatograma
obtido de padres das substncias que compem a amostra.
O procedimento adotado para determinar os fatores de resposta :
Preparar uma soluo padro contendo todos os componentes da amostra, de preferncia, na
mesma concentrao.
Injetar essa soluo e determinar as reas dos picos.
Considerar uma das substncias como referncia no cromatograma.
Determinar os demais fatores a partir da relao entre as reas da substncia desejada e da
substncia escolhida como referncia no cromatograma do padro.
Por exemplo, para calcular os fatores de resposta das substncias A, B e C de uma amostra
contendo somente essas trs substncias pode-se, a partir das reas dos picos no cromatograma da
soluo padro, empregar as seguintes expresses:
3
A tcnica de adio-padro no ser discutida neste texto.
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S
A
= k
A
x C
A
x V
inj
/At S
B
= k
B
x C
B
x V
inj
/At S
C
= k
C
x C
C
x V
inj
/At
Onde segue-se a mesma notao do tem anterior. Nesse caso, se a substncia B for
escolhida como referncia o seu fator ( f
B
= K
B
/K
B
) ser 1 j que:
S
S
k C V At
k C V At
A
B
A A inj
B B inj
=
/
/
S
S
k C V At
k C V At
B
B
B B inj
B B inj
=
/
/
S
S
k C V At
k C V At
C
B
C C inj
B B inj
=
/
/
E tem-se, ento: f
A
= S
A
/ S
B
; f
B
= S
B
/ S
B
= 1 ; f
C
= S
C
/ S
B
admitindo que, no padro, C
A
= C
B
= C
C
.
Depois de determinar os fatores de resposta das substncias a partir dos padres, deve-se
corrigir cada rea no cromatograma da amostra, e o clculo da concentrao similar ao clculo
percentual da normalizao interna, s que neste caso utiliza-se as reas corrigidas
4
. Assim, o
clculo percentual de uma amostra contendo as substncias A, B e C fica:
( )
%A =
A
A
A
A
B
B
C
C
S
f
S
f
S
f
S
f
+ +
100
( )
%B =
B
B
A
A
B
B
C
C
S
f
S
f
S
f
S
f
+ +
100
( )
%C =
C
C
A
A
B
B
C
C
S
f
S
f
S
f
S
f
+ +
100
As vantagens e limitaes da tcnica de normalizao de reas so, praticamente, as
mesmas da normalizao interna exceto que o resultado obtido mais exato devido correo das
reas (dependendo fundamentalmente da pureza dos padres). uma tcnica um pouco mais
laboriosa e necessita da utilizao de vrios padres, por isso, normalmente s utilizada para
amostras com poucos componentes.
E.3.3. PADRONIZAO EXTERNA
5
Como foi visto anteriormente, ambas as tcnicas de normalizao no servem para amostras
mais complexas. Observe a figura 14:
Cromatograma 1 Cromatograma 2
t
R
(min)
t
R
(min)
Fig. 14 - Cromatograma 1 - injeo de amostra, Cromatograma 2 - injeo de padro
4
rea corrigida = rea calculada / fator de resposta relativo.
5
Tambm conhecida como calibrao absoluta.
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No cromatograma 1, relativo uma amostra complexa, so registrados doze sinais. O
cromatograma 2 corresponde a uma soluo padro da substncia que gerou o pico n
o
11.
Supondo que o problema em questo fosse quantificar nessa amostra, um determinado
componente X que gerou o pico n
o
11, voc seria capaz de listar os motivos pelos quais no
possvel lanar mo da tcnica de normalizao nesse caso?
Uma soluo plausvel para casos como esse a tcnica da padronizao externa, onde
preparada uma soluo padro contendo somente a(s) substncia(s) de interesse na amostra. A
comparao com um padro externo possvel, baseando-se no pressuposto de que uma substncia
X ter o mesmo fator de resposta quando presente na amostra ou em uma soluo padro. Pode-se
considerar as relaes matemticas a seguir:
S f C
V
At
x x x
inj
=
no cromatograma 1
S f C
V
A t
x x x
i n j
' '
'
'
=
no cromatograma 2
Onde S
x
e S
x
so, respectivamente, as reas que a substncia X gerou nos cromatogramas
da amostra e do padro; C
x
e C
x
se referem, respectivamente, s concentraes de X nas solues
amostra e padro, f
x
o fator de resposta da substncia X frente ao detector utilizado, V
inj
e
V'
inj
os volumes injetados de amostra e de padro e At e At so as atenuaes de trabalho em cada
cromatograma. f
X
e C'
x
so as incgnitas que podem ser determinadas pelas duas equaes.
Para melhorar a preciso do mtodo e tambm verificar a faixa de linearidade pode-se
construir uma curva de calibrao (rea concentrao). Os volumes injetados e a atenuao a
diferentes concentraes dos padres da substncia de interesse devero ser os mesmos
6
.
O procedimento adotado para fazer a curva de calibrao simples:
a) Prepara-se padres da substncia a ser analisada.
b) Injeta-se os padres, um a um, e determina-se as reas pertinentes substncia de interesse.
6
Obviamente, alguns outros parmetros que podem alterar a rea ou a sensibilidade analtica como a temperatura do
forno do detector, corrente de alimentao para o DCT, vazo do gs de arraste, etc. devero ser constantes. A
atenuao de trabalho e o volume injetado fazem parte da constante no grfico.
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Observando-se o exemplo da figura 15 e considerando C
1
< C
2
< C
3
< C
4
< C
n
, tem-se que:
Curva de calibrao - Padronizao Externa
Concentrao
rea
Fig. 15 - Curva de calibrao na padronizao externa.
Como outros mtodos analticos, a determinao da concentrao desconhecida na soluo
injetada, a partir da curva de calibrao, feita por interpolao grfica da rea no cromatograma da
amostra ou pela equao da reta determinada por regresso linear. Como sempre, h incerteza
quanto ao volume injetado, principalmente, quando so utilizadas microsseringas
7
.
Vantagens :
basta determinar a(s) rea(s) do(s) pico(s)
de interesse.
independe da deteco de todos os picos.
serve para amostras mais complexas.
possvel usar essa tcnica quantitativa na
anlise de traos.
pode-se trabalhar com curva de calibrao.
Limitaes :
depende do volume injetado.
depende da estabilidade do cromatgrafo e do
detector.
7
A utilizao de vlvulas de injeo com volumes fixos acarreta menor erro de injeo.
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E.3.4. PADRONIZAO INTERNA
Como visto anteriormente, na tcnica de padronizao externa corre-se o risco de no se
analisar a amostra exatamente nas mesmas condies dos padres. Isso pode acarretar erros nos
clculos das concentraes, principalmente com os erros do volume injetado. Por outro lado, isso
no problema na normalizao, j que os clculos (percentual em rea e fator de resposta
relativo) so feitos a partir da relao entre as reas de dois picos num mesmo cromatograma.
Assim, alteraes que ocorram na sensibilidade do detector e, principalmente, no volume injetado,
afetaro os dois picos de modo igual, no interferindo dessa forma no clculo quantitativo final.
A padronizao interna uma tcnica na qual um padro injetado concomitantemente
amostra desconhecida, isto , ele dissolvido na prpria amostra e servir de base para os clculos
quantitativos da substncia a ser analisada a partir de uma relao de reas. A tcnica similar
padronizao externa, porm, como veremos adiante, o volume injetado agora um parmetro que
pouco afeta a anlise. O grande problema escolher um padro interno
8
adequado para a amostra a
ser analisada pois este deve atender aos seguintes requisitos:
No pode estar presente na amostra.
Deve ter comportamento cromatogrfico similar ao da substncia a ser analisada.
Estar numa concentrao conhecida.
Ser estvel termicamente.
No ficar adsorvido permanentemente na fase estacionria.
8
Essa tcnica restrita a solues lquidas, dada a dificuldade em adicionar, com preciso, padres internos gasosos
em amostras gasosas.
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Observando-se o exemplo a seguir:
- Cromatograma 2 - Soluo padro do componente X.
- Cromatograma 3 - Soluo padro de uma substncia PI.
- Cromatograma 4 - Amostra complexa + PI.
- Cromatograma 5 - Soluo padro de X + PI.
Fig. 16 - Cromatograma 1 - Amostra complexa contendo o componente de interesse X,
com concentrao desconhecida.
bvio, observando os cromatogramas da figura 16, que a substncia escolhida como
padro um bom padro interno (PI) para essa amostra, pois no est presente originalmente no
cromatograma 1 (no h nenhum pico proveniente da amostra com o mesmo tempo de reteno do
PI), alm disso, o PI tem um comportamento cromatogrfico similar ao do componente X. Fazendo
a relao da rea do componente X (S
X
) com a rea do padro interno (S
PI
), pode-se calcular a
concentrao do componente X na amostra, utilizando a equao final do desenvolvimento a seguir:
S
S
K
K
C V At
C V At
x
PI
x
PI
x inj
PI inj
= Como:
K
K
x
PI
= f
X/PI
A equao fica:
S
S
x
PI
= f
X/PI
C V At
C V At
x inj
PI inj
Como o volume injetado e a atenuao so iguais para o X e para o PI para um mesmo
cromatograma, tem-se a equao simplificada, que vlida tanto para o cromatograma dos
padres de X mais PI quanto para o cromatograma da amostra mais o PI :
S
S
x
PI
=
f
X/PI
C
C
x
PI
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No cromatograma do padro (cromatograma 5), pode-se determinar o fator de resposta
relativo de X em funo de PI ( f
X/PI
) j que ambos tm concentraes e reas conhecidas. Como
o fator de resposta relativo ( f
X/PI
) o mesmo para os cromatogramas da amostra (+ PI) e dos
padres (X + PI), utiliza-se a mesma equao, relacionando as reas da amostra mais PI (crom. 4) e,
como se conhece a concentrao do padro, calcula-se a concentrao de X na amostra.
Assim como na padronizao externa, essa anlise pode ser realizada mediante a construo
de uma curva de calibrao. Essa curva de calibrao feita da seguinte forma:
Preparam-se vrios padres com vrias concentraes conhecidas da substncia a ser analisada.
Em cada um desses padres adicionada uma quantidade tal de padro interno, de modo que a
rea de X no fique muito maior do que a rea do PI ou vice-versa
9
.
Cada um desses padres injetado em condies semelhantes e so medidas as reas da
substncia que se quer analisar e do padro interno.
Constri-se um grfico em que a abcissa (x) a razo da concentrao (ou massa) da substncia
em anlise pela concentrao (ou massa) do padro interno e a ordenada (y) a relao entre as
reas da substncia X e do padro interno.
Para a anlise da amostra desconhecida introduz-se, de preferncia, a mesma quantidade de
padro interno utilizada no preparo dos padres.
Injeta-se a mistura, calculam-se as reas da substncia X e do PI e as relaes entre elas e
interpola-se no grfico obtido anteriormente, de modo a se obter a relao de concentrao. E, a
partir do resultado obtido, calcula-se a concentrao de X na amostra desconhecida.
Pode-se expressar o eixo X somente como C
x
, se a concentrao do PI for mantida constante
para todos os padres e amostra.
Curva de calibrao -
Padronizao Interna
0
10
20
30
40
0 0,1 0,2 0,3 0,4
Cx/Cpi
S
x
/
S
p
i
Vantagens :
So as mesmas da padronizao externa,
acrescentando-se o fato de que o volume injetado
e a estabilidade do cromatgrafo deixam de ser um
fator limitante.
No so necessrios vrios padres, como
acontece na normalizao de reas.
Limitaes :
Dificuldade na escolha de um padro interno que
atenda a todos os requisitos necessrios.
9
Se possvel, interessante manter a concentrao do padro interno fixa enquanto a de X varia.
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EXERCCIOS
1)Uma amostra de trs substncias A, B e C foi analisada cromatograficamente e foram obtidos 3
picos distintos. O papel que registrou estes picos foi recortado no formato de cada um deles, de
modo que cada pico foi pesado numa balana analtica e obteve-se 0,5710 g, 0,2230 g e 0,1240 g
para A, B e C, respectivamente. Supondo que o papel tenha peso uniforme, calcule a % de B na
amostra, levando em conta que o fator de resposta do detector igual para as trs substncias.
2)H possibilidade de se fazer uma anlise por cromatografia gasosa se a constante k for diferente
para cada componente da amostra? Justifique, descrevendo o procedimento a ser efetuado.
3)O cromatograma A corresponde a uma alquota de 1,5 mL de uma amostra contendo somente as
substncias A, B, C, D e E, e o cromatograma B a uma alquota de 1,0 mL de uma mistura padro
(em %p/p) de A (32%), B (38%) e C (30%).
Considerando que B tem o mesmo fator de resposta que E e que C tem o mesmo que D,
determine os valores de rea por triangulao e o teor de A na amostra.
REAS
4) Uma amostra de 3 substncias A, B e C foi analisada cromatograficamente, obtendo-se trs picos
distintos. Estes picos apresentaram reas iguais a 57,10 mm
2
, 22,30 mm
2
e 12,40 mm
2
respectivamente. Calcule a porcentagem de B na amostra, levando em conta que A, B e C tm
fatores de resposta iguais a 1,0; 1,5 e 2,0 respectivamente.
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5) 1,0 mL de uma mistura de 0,537 g de n-butanol e 0,497 g de dioxano foi injetada em uma coluna
carbowax em um cromatgrafo gs com atenuao na posio (50), obtendo-se reas de 104
mm
2
para o n-butanol e 127 mm
2
para o dioxano. 1,0 mL de uma mistura desconhecida das mesmas
substncias forneceu em atenuao (10) as reas de 400 mm
2
e 228 mm
2
, respectivamente.
Determine a concentrao % v/v de cada solvente na mistura desconhecida.
Dados de densidade (g/mL) : n-butanol= 0,810; dioxano= 1,034.
6) Deseja-se quantificar, por CG, uma determinada amostra, para tanto pesou-se 4,28 g da amostra
e diluiu-se com solvente adequado a 250,00 mL. Injetou-se 1,5 mL e obteve-se reas de 23678 para
A, 18245 para B e 3228 para C. Sabendo-se que os fatores de resposta, determinados a partir do
cromatograma de uma soluo com pesos conhecidos de A, B e C, so f
A
=1,60; f
B
=1,00 e f
C
=1,23,
responda os tens abaixo, considerando que a amostra contem somente A, B e C.
a) O teor de A na amostra ____________%.
b) A massa de B presente na amostra __________g.
c) Em uma soluo padro com concentraes iguais de A, B e C, a rea maior dever ser a da
substncia _________.
7) Para analisar uma mistura de benzeno e acetona, misturaram-se massas iguais de cada substncia
e 1,50 mL desse padro foram injetados num cromatgrafo a gs, obtendo-se dois picos distintos nas
condies utilizadas. Em seguida foram injetados 3,00 mL da amostra a ser analisada. As reas
obtidas foram:
amostra (cm
2
) padro (cm
2
)
benzeno 20,32 12,50
acetona 35,62 15,00
a) Qual a concentrao em % p/p de acetona na amostra?
b) Refaa os clculos usando a padronizao externa, ou seja, considerando apenas os dados
reverentes acetona.
c) Por que nesse caso, a tcnica de normalizao de reas melhor do que a padronizao externa ?
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8) Um frasco de metanol foi contaminado com gua. A fim de
utilizar esta mistura para fins analticos, um qumico decidiu analisar
por cromatografia gasosa o teor de gua no MeOH. Para tanto,
realizou 2 injees com o cromatgrafo nas mesmas condies. O
cromatograma (A) foi a amostra e o cromatograma (B) foi uma
mistura padro de 5,00 g de gua destilada com 5,00 g de metanol
PA, contendo 1,50% de gua. Considerando a coluna polar, pede-se:
Cromatograma A
Cromatograma B
a) A identificao dos picos da amostra. Justifique.
b) Qual o teor de gua no metanol ?
9) Numa anlise cromatogrfica, foram obtidos os seguintes resultados em percentual em rea a
partir do integrador eletrnico:
% em rea
A B C
Padro 1:1:1 em massa 32 40 28
Amostra 36 40 24
Sabendo-se que o volume injetado em ambos os casos foi de 1,0 mL e a amostra composta
somente por A, B e C, a concentrao percentual corrigida de C na amostra _______________%.
Se o volume injetado fosse 2,0 mL para a amostra e 3,0 mL para o padro, a concentrao
percentual de A seria __________________ %.
10) Deseja-se determinar o teor de cnfora e de carvona, monoterpenos encontrados em leos
essenciais. Para tal, 2,90 g do leo contendo cnfora e carvona foram dissolvidos e diludos em
100,00 mL de clorofrmio PA (sol. A). Uma alquota de 5,00 mL da sol. A foi transferida para um
balo volumtrico de 100,00 mL e diluda com clorofrmio PA at o trao de aferio (sol. B). 2,00
mL da sol. B foram injetados em um cromatgrafo com DIC e a rea obtida no integrador pertinente
cnfora foi de 55420 e de 18020 relativa carvona.
Uma soluo padro de cnfora e de carvona contendo 3,58 g e 4,05 g de cada substncia,
foi preparada diluindo-as em b.v. de 100,00 mL em clorofrmio PA (sol. C). Em seguida, uma
alquota de 10,00 mL da sol. C foi transferida para um b.v. de 100,00 mL e avolumada em
clorofrmio PA (sol. D). Depois misturou-se 20,00 mL da sol. D e 50,00 mL de clorofrmio PA
(sol. E). Injetou-se 1,00 mL da soluo E e as reas de cnfora e de carvona foram 40877 e 43001.
Determine o teor de cnfora e de carvona no leo essencial.
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11) A fim de analisar o teor de acetaldedo em vinho, um analista fez 2 injees em um
cromatgrafo a gs operando com DCT. A primeira era constituda de uma mistura de 16,00 g de
vinho com 0,0200 g de propanol (substncia que o vinho no contm). A segunda injeo era
constituda de uma soluo aquosa de n-propanol a 0,058% e acetaldedo a 0,062%. As condies
foram:
Programa de temperatura :
Picos:
1- ar
2- gua
3- acetaldedo
Coluna : porapak Q 4- etanol
Atenuao : x 50 5- n-propanol
Volume de amostra : 1,0 mL 6- provavelmente, um lcool
Velocidade do papel : 0,25 pol./min superior
Os cromatogramas obtidos foram:
Baseado nestes dados, calcule o teor de acetaldedo em vinho. Para melhorar esta anlise
poderia mudar-se o tipo de detector utilizado. Explique.
12)Determinou-se o teor de benzeno em tolueno comercial (toluol) por cromatografia gasosa a
partir do seguinte procedimento:
1. Injetou-se uma alquota de 2,00 mL da amostra em um cromatgrafo com DIC e atenuao ( 30)
e obteve-se o cromatograma abaixo, donde verificou-se que o sinal n
o
2 corresponde ao benzeno.
2. Preparou-se seis padres em bales volumtricos de 25,00 mL, a partir de uma soluo estoque
de benzeno em tolueno a 0,100 g/L feita recentemente a partir dos solventes
cromatograficamente puros, conforme a tabela abaixo.
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3. Injetou-se, com auxlio de uma vlvula de injeo, 2,00 mL de cada padro no mesmo
cromatgrafo, com atenuao (50).
4. Calculou-se a rea correspondente ao benzeno em cada cromatograma por triangulao.
Os volumes de alquotas da soluo estoque usada para preparar os padres, medidos em
bureta, e as reas encontradas para o benzeno encontram-se na tabela abaixo:
rea (cm
2
)
0,51
0,41
0,32
0,21
0,13
0,055
Volume de alquota da
soluo estoque (mL)
15,00
12,00
10,00
6,00
4,00
1,50
Curva de calibrao do benzeno
Padronizao externa
y = 8,4x + 0,0
0,00
0,10
0,20
0,30
0,40
0,50
0,60
0 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06
Conc. (g/L)
r
e
a
a) Faa uma tabela de valores para a curva de calibrao e determine a rea do benzeno na amostra
por triangulao.
b) Por interpolao grfica, determine a concentrao em ppm de benzeno no toluol.
c) Por que, neste caso, a metodologia de normalizao de reas no adequada para determinar a
concentrao de benzeno no toluol? Cite pelo menos trs motivos e justifique.
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13) Um analista deseja determinar a concentrao de gua residual em THF (tetraidrofurano)
comercial por cromatografia gasosa. O cromatograma A relativo amostra de THF comercial,
onde est assinalado o pico correspondente gua. A fim de escolher um padro interno adequado,
foram coinjetadas vrias substncias com a amostra e obtiveram-se os cromatogramas B (coinjeo
de metanol), C (coinjeo de acetona), D (coinjeo de glicerol) e E (coinjeo de etanol).
Aps optar pelo EtOH como padro interno, o analista preparou vrios padres contendo
EtOH e H
2
O diludos em THF anidro e obteve os cromatogramas F, G, H , I e J.
a) A partir dos dados contidos na tabela abaixo e da curva de calibrao, determine a concentrao
de gua no THF comercial em ppm.
b) Justifique a escolha do EtOH como padro interno.
soluo
analisada
rea dos picos (mm
2
)
EtOH H
2
O
C (ppm)
EtOH
C (ppm)
H
2
O
vol. inj. (mL) cromatograma
amostra 22,9 23,2 25 ? 1,0 E
padro 1 23,0 3,0 25 5,0 1,0 F
padro 2 23,0 8,2 25 10 1,0 G
padro 3 22,5 20,3 25 25 1,0 H
padro 4 22,7 28,7 25 35 1,0 I
padro 5 23,4 41,5 25 50 1,0 J
Curva de calibrao de gua em THF
Padronizao interna
0,00
0,50
1,00
1,50
2,00
0 10 20 30 40 50
Conc. de gua (ppm)
S
g
u
a
/
S
e
t
a
n
o
l
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14) Desejando determinar o teor de cido lurico (C
12
H
24
O
2
) em leo de milho, um analista optou
pela tcnica de cromatografia gasosa. Procedeu ao tratamento da amostra, pesando 1,250 g do leo
de milho e dissolvendo-o em CHCl
3
, completando o volume a 100,00 mL em balo volumtrico
(sol. A). Em seguida, uma alquota de 2,00 mL foi tratada com excesso de diazometano
9
, misturada
com 2,00 mL de uma soluo a 0,0500 g/L de amilato de metila (substncia que o leo de milho
no contm) e diluda em balo volumtrico at 100,00 mL com CHCl
3
(sol. B). Injetou-se 1,5 mL
da soluo B no cromatgrafo, obtendo um cromatograma complexo, onde a rea correspondente ao
laurato de metila foi 15900 e ao amilato de metila foi 15850. Injetou-se, tambm, 1,0 mL de uma
soluo padro contendo 2,30 ppm de laurato de metila e 1,00 ppm de amilato de metila, obtendo-se
reas de 10950 e 11720, respectivamente.
Determine o teor de cido lurico no leo de milho.
15) Um alcolatra teve morte sbita provocada aps a injesto de whisky falsificado. O laudo
mdico deu como causa da morte intoxicao por metanol. O qumico do laboratrio tinha,
portanto, que dosar o metanol na bebida para servir de prova no processo de falsificao. Fez-se
uma soluo contendo 50,0 mg/mL de MeOH em EtOH puro ( sol. A) e outra contendo 40,0
mg/mL de benzeno em EtOH puro (sol. B). A partir dessas solues foram preparados padres em
balo volumtrico de 100,00 mL (ver os volumes de alquota correspondentes na tabela abaixo).
Pesou, ento, 10,3520 g do whisky, adicionou 20,00 mL da soluo B e avolumou a 100,00 mL com
etanol puro (sol. H). Injetou-se 1,0 mL dos padres C, D, E , F e G e da soluo H, obtendo-se as
seguintes reas pelo integrador eletrnico:
Soluo Soluo A (mL) Soluo B (mL) rea de MeOH rea de benzeno
C 10,00 20,00 4050 8114
D 20,00 20,00 6120 8120
E 30,00 20,00 8200 8105
F 40,00 20,00 10010 8100
G 50,00 20,00 12120 8090
H - 20,00 7200 8050
a) Determine graficamente o teor de metanol no whisky.
b) Por que as reas correspondentes ao benzeno em todas as solues analisadas no so exatamente
as mesmas, apesar das concentraes serem iguais? Explique, tambm, porque isso no afeta o
clculo quantitativo.
9
Diazometano (CH
2
N
2
) um reagente que transforma, quantitativamente, cidos carboxlicos nos respectivos steres
metlicos derivados. A reao : R-COOH + CH
2
N
2
RCOOCH
3
+ N
2
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003
42
G. BIBLIOGRAFIA
1-Carol, H. C., Braga, G. L.; Bonato, P. S.; Introduo a Mtodos Cromatogrficos, Ed.
UNICAMP, Campinas, 4
a
Ed., 1990
2-Ciola, R.; Introduo Cromatografia em Fase Gasosa, Ed. Edgard Blucher, So Paulo, 1973
3-Kennedy, J. H.; Analytical Chemistry - Principles, Harcourt Brace Jovanovich, Flrida, 1984
4-Willard, H.; Merritt, Jr. L.; Dean, J.; Anlise Instrumental, Fundao Calouste
Gulbenkiam, Lisboa, 2
a
Edio, 1979
5-Ohlweiler, O. A.; Fundamentos da Anlise Instrumental, L.T.C., Rio de Janeiro, 2
a
Edio, 1976
6-Ewing, G. W.; Mtodos Instrumentais de Anlise Qumica, Vol. I e II, Ed. Edgard Blucher, So
Paulo, 1972.
GABARITO
Item B:
1 O que mais interage com a fase estacionria e/ou tem menor presso de vapor.
3 C
4 sujeira na seringa ou impureza depositada na coluna.
5 A) injeo de padres e comparao de Tr.
B) Intensidade da luminosidade da chama.
Item C:
1- C
2 - A
4 Crom. A - maior atenuao
Crom. B maior velocidade do papel
Crom. C menor temperatura da coluna e/ou menor presso de vapor.
5 D
7 A) os tempos de reteno aumentariam.
B) Injetaramos padres de tolueno e benzeno nas mesmas condies e compararamos os
Trs.
C) Os tempos de reteno diminuiriam.
D) Provavelmente apareceria somente o sinal do hexano.
E) Os sinais ficariam maiores e proporcionais ao fator de atenuao.
10 A polar
B C
10
, C
11
e C
12
C aumentar a temperatura e/ou a vazo do gs de arraste.
D Co-injecao de padres.
CEFET Qumica RJ Anlise Instrumental
Apostila de Cromatografia em Fase Gasosa 2003
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11 A) As presses de vapor ficariam baixas e alguns picos poderiam ficar assimtricos ou
deformados ou at mesmo no apar4ecer no cromatograma.
B) Os sinais ficariam muito intensos e provavelmente haveria perda de resoluo devido a
limitada capacidade da coluna. Poderia tambm ser observada assimetria nos picos.
C) Haveria sangramento da fase e perda definitiva da eficincia da coluna.
D) Certamente no haveria alterao nos Trs, mas dependendo do detetor poderia haver
alterao na sua sensibilidade. Alem disso, algumas substncias de menor presso de vapor poderia
condensar no detetor, podendo causar danos ao equipamento.
E) No seria muito sensato, at porque o NaOH no voltil. O melhor seria tratar a amostra
convenientemente para injetar somente a sua frao voltil ou semi-voltil.
F) No h problemas, desde que haja a separao cromatogrfica desejada.
G) Certamente haveria vazamento, que poderia prejudicar o funcionamento do equipamento
ou perda de amostra. Lembre-se que o septo deve ser trocado periodicamente.
H) Se o ponto de ebulio dos componentes da amostra for atingido, esta tudo bem.
Entretanto, no seria conveniente exagerar na dose, pois h de convir que algumas substncias so
termo-labeis e poderiam se decompor no injetor. Alem disso, alguns tipos de septos no toleram
temperaturas muito altas, o que poderia provocar muito rudo no e sujeira no sistema.
12 Ordem de polaridade das fases: Esqualano: SE-30; DEGS; Carbowax; Glicerol.
13 A) 1 MeI; 2 III; 3 II; 4 I.
B) Permaneceu mais tempo no sistema cromatogrfico, portanto sofreu difuso.
C) S sobrariam os picos do reagente (MeI) e dos produtos (II e III) ou ento somente o
reagente e o produto dimetilado (III).
14 a) 1,7
b) etano, etanol e gua.
c) 1 15 s; 2 24 s; 3 37,5 s.
d) emtre os picos 1 e 2.
e) mudar a fase estacionaria ou diminuir a temperatura da coluna.
Item D:
4 Sim, pois o pico da gua que o mais intenso iria praticamente desaparecer, alem do mais a
deteco dos outros componentes seria melhor, pois o DIC mais sensvel para substancias
orgnicas.
5 2; 4; 1; 5; 6; 3.
6 a) maior; b) maior; c) maior; d) H
2
O.
7 E
8 D
9 C
10 A
Item E
1 24,3%
2 sim
3 9,3%
4 29%
5 n-BuOH = 74,7% e dioxano = 25,3%.
6 a) 41,5%; b) 2.19g; c) A
7 59,4%
8 b) 9,24%
9 a) 29%; b) 38%.
10 Cnfora = 47,6%; Carvona = 16,6%.
11 0,11%
12 23 mg/mL
13 28 mg/mL
14- 0.92%
15 12,7%.