Tcnicas de estudio

Tcnica histolgica (Laboratorio)

El primer paso de toda tcnica histolgica es la obtencin de la muestra. Aqu observamos un segmento de intestino, quede claro que no procesaremos toda la muestra. Deberemos seleccionar un fragmento representativo, que en la imagen se aprecia en el extremo inferior derecho Este es el procesador automtico de tejidos. Aqu se pueden quedar las muestras ya encapsuladas de un da para otro, con lo que se ahorra mucho trabajo Este acercamiento nos muestra el detalle de la canastilla y ahora podemos distinguir claramente las numerosas cpsulas de inclusin que contiene El personal tcnico presiona suavemente, con lo que se libera la parafina lquida El microtomo es el dispositivo que permite fijar el bloque y obtener secciones cuyo espesor se mide en milsimas de milmetro Con el debido cuidado, el tcnico separa la tira de cortes de parafina de la superficie de la cuchilla

Las muestras representativas seleccionadas se ponen en las cpsulas de inclusin. Estos dispositivos con numerosos huecos permiten la entrada de las soluciones de procesamiento Aqu se observa el momento en que el procesador automtico de tejidos levanta la canastilla con cpsulas en las que se encuentran las muestras para procesamiento histolgico

Esta imagen muestra el centro incluidor de tejidos

Estos son los bloques de parafina. Note que la sombra del tejido se aprecia a simple vista

Aqu se aprecia el bloque de parafina montado y sobre la cuchilla, la tira de cortes de parafina Se le agrega alcohol a la tira de cortes que se encuentra sobre el portaobjetos, con el fin de que se extiendan las secciones Los cortes extendidos, son capturados por medio de un portaobjetos de la superficie del bao de flotacin El tcnico va pasando la canastilla con cortes en blanco a lo largo de la batera

Los cortes se extienden an ms en la superficie del bao de flotacin

Esta es una cestilla portamuestras. Observe que con este dispositivo el tcnico puede manejar hasta 50 laminillas

Nuestros cortes pasan a la famossima hematoxilina

El tcnico agrega una gota de resina y posteriormente aplica la lmina cubreobjetos Este es el criostato. Se trata de un microtomo rotativo comn que se encuentra en el interior de una cmara fra. Con este instrumento se realizan los cortes congelados para estudios transoperatorios

Aqu vemos dos canastillas con cortes ya teidos con hematoxilina y eosina. Se encuentran en recipientes con xilol, esperando el ltimo paso: el montaje

Tcnica ordinaria
Este es el aspecto de un corte de rin que fue adecuadamente fijado. Note los ncleos celulares como pequeas estructuras redondeadas y obscuras. Los citoplasmas muestran un tinte rosado. Observe el detalle y compare con la imagen siguiente Este es el aspecto de un corte de rin que NO se someti adecuadamente al proceso de fijacin. Note que la coloracin general es menos viva que en la imagen anterior, adems de que no se aprecia el detalle de los ncleos celulares En este corte de piel humana las clulas de la epidermis muestran citoplasmas levemente basfilos. El tejido conjuntivo de la dermis es mucho ms plido, levemente rosado (acidfilo) Las clulas plasmticas (de Cajal) muestran citoplasmas intensamente basfilos con una zona clara perinuclear. Se trata de la imagen negativa de Golgi. De nuevo, el aspecto con H y E permite afirmar que estas clulas son anablicamente activas El tejido adiposo unilocular tiene clulas cuyo citoplasma est ocupado en su mayor parte por una gran gota de grasa. El procesamiento histolgico elimina del tejido la mayor parte de las sustancias grasas. Por esta razn, donde haba grasa vemos un gran hueco blanco El tejido con buena fijacin y tincin con hematoxilina y eosina, permite diferenciar claramente los ncleos del citoplasma. Note que los eritrocitos adquieren un color rojo brillante. Adems en el centro de la foto, un hepatocito binucleado le est haciendo ojitos La superficie interna del estmago tiene un revestimiento epitelial cuyas clulas producen moco. Note usted que en este caso, la zona del citoplasma con moco es levemente acidfila esto sugiere un comportamiento alcalino A grandes aumentos, el detalle celular es impresionante. Se distinguen zonas dentro del ncleo y en el citoplasma. Los ncleos son basfilos y los citoplasmas son acidfilos El corte de pncreas muestra un detalle muy interesante. No debemos tener problema para identificar los ncleos intensamente basfilos. Note que los citoplasmas tienen una zona basfila y otra acidfila. Este detalle histolgico permite afirmar que estas clulas son anablicamente activas Aqu mostramos un corte de grasa multilocular (parda), que permite apreciar clulas con vacuolas grasas en el citoplasma. Recuerde, no es que la grasa se tie de blanco; se trata de que la grasa se perdi en el procesamiento y el hueco se ve blanco

Las clulas de la corteza suprarrenal sintetizan y almacenan grandes cantidades de hormonas de tipo lipdico. Por esta razn con H y E, su citoplasma se aprecia claro y multivacuolado

El epitelio del intestino delgado tiene clulas productoras de moco que se conocen como caliciformes. Note usted que el moco no se tie muy bien con H y E

Este corte de vagina nos muestra en el epitelio una de las limitantes de la tcnica histolgica ordinaria: algunos tipos de molculas no se aprecian adecuadamente. En este caso, note que las clulas del epitelio vaginal tienen citoplasmas claros como si no tuvieran citoplasma-; esto se debe a que contienen grandes cantidades de glucgeno

Tricrmicos
Corte de lengua que muestra el contraste con tricrmico de Masson. El epitelio de membrana y glandular, as como el msculo se observan en rojo brillante, mientras que el tejido conjuntivo con colgena se identifica en azul Esfago con Masson. Contraste claro entre colgena y estructuras citoplsmicas varias Los tendones estn constituidos por abundantes fibras de colgena dispuestas en paralelo. Aqu se ven en azul con Masson Este es el contraste obtenido en un corte de piel gruesa con tricrmico de Gallego El tricrmico de Gallego en piel delgada, permite una clara diferenciacin entre la dermis papilar y la dermis reticular

Las clulas del msculo esqueltico muestran claramente sus estriaciones citoplsmicas. Las estructuras en azul corresponden a colgena

NO, no se trata de un atardecer ranchero. Es un corte de piel gruesa teido con Masson. Epidermis en rojo y dermis en azul Los tendones estn constituidos por abundantes fibras de colgena dispuestas en paralelo. Aqu se ven en verde con tricrmico de Gallego La unin mio-tendinosa teida con tricrmico de Gallego, muestra la colgena en verde y el msculo en amarillo Otro corte de piel delgada con Gallego. Note el contraste de la epidermis, la dermis y el msculo erector del pelo

Romanovsky
La tcnica ms comn para el estudio de frotis de sangre es la de Wright. Aqu se aprecia el aspecto de los eritrocitos Observamos las diferencias entre los eritrocitos y un leucocito neutrfilo, con la tcnica de Wright Frotis de mdula sea con Giemsa. En el centro se identifica una clula enorme que se conoce como megacariocito

Este es otro frotis de mdula sea teido con Giemsa

La tcnica de Wright nos permite identificar a las plaquetas

Otra tcnica de Romanovsky es la de Giemsa. Se usa frecuentemente para el estudio de frotis de mdula sea, como el que aqu se muestra

Papanicolau
Este frotis vaginal teido con Papanicolaou muestra clulas con material grumoso en el citoplasma, corresponde a glucgeno La tincin de Papanicolaou se emplea frecuentemente en los hospitales para el estudio citolgico del cervix y vagina. Esto permite la deteccin oportuna del cncer. En el centro de la imagen se observan clulas endocervicales rodeadas de clulas exocervicales

Azul de Toluidina
El fenmeno de metacromasia permite que en cortes histolgicos teidos con azul de toluidina se identifiquen los grnulos de las clulas cebadas Otra aplicacin importante de la tincin con azul de toluidina es el estudio de los cortes semifinos. Este muestra el detalle de un glomrulo renal y sus tbulos

Histoqumica Carbohidratos
La tcnica ms comnmente empleada para la demostracin de carbohidratos en general es la de P.A.S. Aqu vemos un corte de intestino delgado con clulas mucoproductoras (clulas caliciformes), que a diferencia de lo que se aprecia con H y E, se muestran como estructuras redondeadas rojo brillante Corte de hgado de rata recin alimentada teido con Carmn de Best. El glucgeno aparece como grnulos rojos diminutos en el citoplasma de los hepatocitos. Compare con la imagen anterior La tcnica de mucicarmn de Mayer permite diferenciar unidades mucosas, serosas y conductos. Corte de glndula submaxilar Cuando necesitamos identificar especficamente el glucgeno (polmero de glucosa), empleamos la tcnica de Carmn de Best. Este es un corte de hgado de rata en ayuno teido con esta tcnica. Compare el aspecto con el de la siguiente imagen que corresponde a un hgado de rata bien alimentada teido con Carmn de Best A grandes aumentos, la tcnica de P.A.S. permite identificar las clulas caliciformes y las clulas de la base de las criptas (clulas de Paneth) Observe el notable contraste de las clulas caliciformes del intestino delgado con la tcnica de mucicarmn de Mayer

Histoqumica ADN
La tcnica de Feulgen demuestra especficamente la presencia de cido desoxiribonuclico (ADN) en los tejidos. Este es un corte de raz de lirio que muestra clulas vegetales, algunas de las cuales se encuentran en divisin celular La tcnica de Feulgen demuestra especficamente la presencia de cido desoxiribonuclico (ADN) en los tejidos. Este es un corte de raiz de lirio que muestra clulas vegetales. La del centro se encuentra en anafase

Aqu observamos cromosomas humanos en un extendido que se ha teido con la tcnica de Feulgen

Aqu observamos cromosomas humanos en un extendido que se ha teido con la tcnica de Feulgen

Histoqumica Lpidos
Dado que el procesamiento histolgico rutinario elimina las grasas del tejido, cuando queremos demostrarlas, necesitamos cortes por congelacin. En este caso el contraste se llev a cabo con osmio Corte por congelacin. Se muestran como estructuras redondeadas los adipocitos en negro. Osmio

Histoqumica enzimtica
Corte de hgado procesado con la tcnica histoqumica enzimtica para la demostracin de la enzima ATPasa. Los canalculos biliares quedan marcados como lneas negras Epidermis de cobayo procesada con la tcnica histoqumica enzimtica para la demostracin de la enzima ATPasa. Las clulas dendrticas procesadoras de antgenos (clulas de Langerhans) se aprecian con numerosas prolongaciones citoplsmicas

Impregnaciones metlicas
Corteza cerebral humana con impregnacin metlica clsica. Se aprecia el detalle de las neuronas piramidales Impregnacin metlica clsica. Se aprecia el aspecto de una clula de Purkinje de la corteza cerebelosa Impregnacin metlica clsica. Numerosos astrocitos asociados con capilares La tcnica de metenamina de plata permite contrastar las membranas basales. Aqu se observan en un corte de rin La tcnica de Wilder se emplea frecuentemente para demostrar las fibras reticulares. Corte de hgado Corte de intestino delgado. Algunas clulas tienen grnulos argentafines (en negro) que se demuestran con la tcnica de FontanaMasson

Impregnacin metlica clsica. Astrocitos asociados con capilares Impregnacin metlica clsica. En este corte de hgado, se demuestran claramente como lneas negras, las fibras reticulares Corteza renal contrastada con metenamina de plata. Se aprecian las membranas basales en negro alrededor de los tbulos urinferos La tcnica de FontanaMasson permite identificar estructuras argentafines como es el caso de la melanina. Corte de piel

Inmunolgicas

Fibroblasto en cultivo. Inmunofluorescencia con anticuerpos anti-tubulina

Fibroblasto en cultivo. Inmunofluorescencia con anticuerpos anti-actina

Biopsia renal. Glomrulo con depsitos granulares de anticuerpos observados con inmunofluorescencia

Corte de pncreas procesado con inmunohistoqumica enzimtica con anticuerpos primarios anti-glucagon. Se identifican en rojo las clulas alfa Corte de piel procesada con inmunohistoqumica enzimtica con anticuerpos primarios anti-vimentina. En tonos pardos se demuestran las clulas endoteliales de numerosos capilares de la dermis Corte de piel procesada con inmunohsitoqumica enzimtica con anticuerpos primarios anti-protena S100. Las clulas dendrticas de Langerhans se aprecian claramente

Corte de pncreas procesado con inmunohistoqumica enzimtica con anticuerpos primarios anti-insulina. Se demuestran en rojo las clulas productoras de esta hormona Corte de cerebro procesado con inmunohistoqumica enzimtica con anticuerpos primarios anti-protena cida fibrilar glial. Se demuestran los astrocitos fibrilares Corte de intestino delgado procesado con inmunohistoqumica enzimtica con anticuerpos primarios anticromogranina A. En tinte pardo se aprecian las clulas del sistema neuroendocrino epitelial difuso Corte de piel procesada con inmunohistoqumica enzimtica con anticuerpos primarios anti-protena S100. A grandes aumentos es posible apreciar el carcter dendrtico de las clulas de Langerhans

Microscopio
Fotnico
Frotis sanguneo en fresco, observado con el sistema de interferencia diferencial segn Nomarski. Observe el aspecto de relieve y note que algunos eritrocitos estn muy plegados. Se trata de reticulocitos que normalmente se mueven en el preparado en fresco El microscopio estereoscpico, o de diseccin, nos permite observar el detalle de tejidos en fresco, como esta superficie interna intestinal. Las pequeas salientes se llaman vellosidades Estas son clulas de descamacin de la mucosa oral. Cuesta trabajo identificar el detalle del citoplasma y de los ncleos. Compare con las siguientes imgenes Clulas de descamacin de mucosa oral observadas con interferencia diferencial segn Jamin-Lebedeff Frotis sanguneo observado con interferencia diferencial segn Nomarski. Se identifican eritrocitos y dos leucocitos. Observe que uno tiene grnulos gruesos y ncleo bilobulado (eosinfilo), mientras que otro tiene grnulos finos (neutrfilo)

Aqu observamos a mayor aumento el detalle de las vellosidades intestinales con el microscopio estereoscpico

Frotis sanguneo en fresco observado con contraste de fases. No olvide el halo o brillo claro. Estos son eritrocitos Clulas de descamacin de mucosa oral observadas con interferencia diferencial segn Jamin-Lebedeff

Ahora vemos clulas de descamacin de mucosa oral y la imagen nos permite apreciar claramente contraste de ncleo y citoplasma. Note que la imagen recuerda el aspecto de un relieve. Este sistema de contraste ptico se conoce como interferencia diferencial segn Nomarski

Aqu observamos las mismas clulas de descamacin de la mucosa oral de la imagen anterior. Comprelas. Note que ahora identificamos claramente los lmites celulares, detalles del citoplasma y del ncleo. Este sistema de contraste ptico se conoce como contraste de fases. Observe que las imgenes obtenidas con este sistema se caracterizan por un halo brillante

Un microscopio es un instrumento que permite observar estructuras pequeas. Aqu vemos el aspecto de una pulga y notamos detalles de las patas. Observe que las zonas ms gruesas (cuerpo y dorso) se ven obscuras; esto se debe a que para formar una imagen, la luz debe atravesar el cuerpo Un sistema de interferencia diferencial que en su tiempo fue muy empleado, es el de JaminLebedeff. En esta y las siguientes imgenes vemos las mismas clulas de descamacin de mucosa oral con colores brillantes que van cambiando El mtodo ms antiguo y fcil de realizar es el llamado sistema de campo obscuro. Estas son clulas de descamacin de mucosa oral. Observe que sus componentes se ven blancos, mientras que el fondo es completamente negro Este es otro hueso en el que se identifican las osteonas. Note el intenso brillo en diversos colores. En realidad en esta imagen tomada con luz polarizada, el Dr. Joaqun Carrillo agreg colores de difraccin El microscopio de fluorescencia equipado con un sistema ptico especial es indispensable para la observacin de las tcnicas de inmunofluorescencia

Este es un corte de lengua teido con tricrmico de Gomori. Para observar contraste de estructuras, con el microscopio fotnico de iluminacin comn usamos generalmente colorantes

El mtodo ms antiguo y fcil de realizar es el llamado sistema de campo obscuro. Estas son clulas de descamacin de mucosa oral. Observe que sus componentes se ven blancos, mientras que el fondo es completamente negro Esta imagen es parecida al campo oscuro en cuanto que el fondo se ve negro. Pero note que las zonas brillantes pueden tomar varios colores, no slo el blanco. Este sistema se conoce como luz polarizada. Aqu observamos un fragmento de hueso Este es un corte de msculo esqueltico, previamente teido y observado con luz polarizada. Observe el intenso brillo de las bandas transversales (anistropas)

Estos son macrfagos observados con el sistema de contraste de fases. El halo claro brillante es evidente

Electrnico
El microscopio electrnico de transmisin nos muestra imgenes planas, de cortes muy delgados, con detalles de las estructuras ms finas de las clulas Este es el famossimo aparato de Golgi como se aprecia gracias al microscopio electrnico de transmisin El microscopio electrnico de transmisin nos permite identificar en este caso algunas mitocondrias, filamentos y retculo endoplsmico rugoso Aqu observamos la barrera de filtracin de los glomrulos renales. Los podocitos tienen numerosas prolongaciones citoplsmicas que abrazan a los capilares Ahora nos encontramos en el interior del globo ocular. Observamos los procesos ciliares, el iris y el gran hueco obscuro de la parte superior corresponde a la pupila Probablemente el organelo ms fcil de identificar es la mitocondria. Aqu se observan varias nadando en el citoplasma En este caso, el microscopio electrnico de transmisin nos muestra el detalle de un cuerpo multivesicular El microscopio electrnico de barrido nos permite apreciar una impresionante imagen en tres dimensiones. Estas son clulas de cncer en cultivo Nuestro viaje con el microscopio electrnico de barrido nos lleva ahora a los pulmones. Aqu se aprecia el aspecto tridimensional de los alvolos Ahora nos acercamos a la patita de un escarabajo. Bueno en realidad se llama quelcero

Biologa celular
Membrana y especializaciones
La observacin de lmites celulares como se aprecian en este epitelio, sugiri a los estudiosos de la clula, la existencia de una membrana citoplsmica En condiciones ideales de procesamiento, el microscopio electrnico de transmisin nos muestra que la membrana citoplsmica est conformada por tres lineas: obscura-claraobscura. A este aspecto se le conoce como unidad de membrana Esta representacin esquemtica nos muestra el modelo de la membrana citoplsmica en tres dimensiones. En amarillo los fosfolpidos y en rojo, las protenas El glucocliz se aprecia como un material grumoso en contacto con prolongaciones de citoplasma y membrana que se conocen como microvellosidades Esta es una representacin esquemtica simple del modelo de la membrana citoplsmica. En amarillo tenemos los fosfolpidos, en rojo las protenas y en morado, con letrero, el componente carbohidrato que constituye el glucocliz El detalle estructural de la membrana citoplsmica slo es apreciable por medio del microscopio electrnico de transmisin. Aqu observamos la notable flexibilidad de la membrana citoplsmica

Corte de rin. La superficie celular muestra una gran cantidad de microvellosidades Cuando se cortan en sentido transversal, las microvellosidades intestinales se aprecian como cuerpo redondeados. En su porcin central se identifican los filamentos. Hacia la periferia hay una pelusita; corresponde al glucocliz Las microvellosidades pueden identificarse con microscopio fotnico. Observe que la superficie de las clulas intestinales muestra numerosas microvellosidades que dan el aspecto de borde estriado En esta micrografa electrnica de transmisin se aprecia el detalle de las microvellosidades rectas del intestino delgado, as como del glucocliz en la superficie El microscopio electrnico de barrido nos muestra el aspecto comparativo de las microvellosidades (prolongaciones cortas en la superficie celular) y el de los cilios (prolongaciones alargadas) A mayores aumentos se logra identificar la imagen en unidad de membrana, adems del glucocliz y los filamentos de la porcin central de las microvellosidades intestinales Corte de trquea en el que se pueden contar los numerosos cilios de la superficie del epitelio respiratorio Corte de trquea humana. La superficie epitelial muestra estructuras alargadas parecidas a diminutas pestaas. Se trata de los cilios El corte transversal de los cilios nos muestra el arreglo interno de los microtbulos

En esta micrografa electrnica de transmisin es mucho ms evidente el aspecto de unidad de membrana La constitucin de tipo carbohidrato del glucocliz se pone de manifiesto con la tcnica de P.A.S. Observe que la superficie del epitelio intestinal muestra una lnea roja que corresponde a esta zona de la membrana citoplsmica Este es otro corte de intestino en el que se puede identificar el aspecto de borde estriado. Corresponde a numerossimas vellosidades en paralelo En el rin, las microvellosidades son particularmente grandes. Aqu se observan en rosa. Note que en algunos casos la longitud de la microvellosidad es equivalente a la altura de la clula A grandes aumentos podemos apreciar claramente los nueve dobletes perifricos de microtbulos y el par de singletes centrales. Se pueden identificar adems, las prolongaciones que corresponden a la dinena En esta micrografa electrnica de transmisin observamos varios cilios en corte longitudinal. En la cara citoplsmica se encuentran los cuerpos basales El microscopio electrnico de transmisin nos permite apreciar la estructura interna de los cilios Aqu observamos un cilio en corte longitudinal. Se identifica el cuerpo basal y los elementos del citoesqueleto que constituyen la raicilla ciliar Dibujo semiesquemtico en que se muestran los componentes del axonema ciliar en gran detalle

En esta micrografa electrnica de transmisin observamos un cilio con su tallo, su cuerpo basal y el segundo centrolo que se encuentra en ngulo recto Aqu tenemos una convencin de centrolos. Cuente los tripletes de microtbulos perifricos

Este es el aspecto del axonema de un centrolo. Observe que est constituido por nueve tripletes perifricos de microtbulos El microscopio electrnico de barrido nos muestra el aspecto de la nica clula flagelada humana

Con microscopio fotnico, el aspecto de los espermatozoides es muy caracterstico Aqu observamos con microscopio electrnico de transmisin, parte del citoplasma de un macrfago. Note que se encuentran numerosas estructuras redondeadas que contienen material de forma irregular. Estos son los fagosomas A mayores aumentos notamos el aspecto de los fagosomas y el material que se encuentra en su interior (fagocitado) Microscopio electrnico de transmisin. Numerosos desmosomas. Se identifica la membrana y un material con aspecto de pelusa a los lados. Corresponde a numerosos filamentos intermedios de tipo queratina que aqu se conocen como tonofilamentos Otra imagen con microscopio electrnico de transmisin de los demosomas (uniones intercelulares de tipo mcula adherente) Dibujo semiesquemtico que muestra un modelo de la estructura de las uniones ocluyentes

Otra clula endotelial con numerosas vesculas de pinocitosis

Dibujo semiesquemtico que muestra un modelo de la estructura de los demosomas y en el extremo derecho, el aspecto esperado con microscopio electrnico de transmisin

Este es el aspecto de una clula endotelial con numerosas vesculas de pinocitosis Algunas molculas son endocitadas por un mecanismo especializado. En la endocitosis mediada por receptores la superficie citoplsmica de la vescula tiene una cubierta de clatrina. Aqu observamos un pozo con cubierta a punto de pasar a ser una vescula con cubierta El detalle ultraestructural apreciable en esta micrografa electrnica de transmisin es espectacular. Desmosomas en piel Representacin tridimensional de uniones de tipo ocluyente Este es el aspecto del llamado complejo de unin. Este trmino se refiere a la coexistencia de tres tipos especficos de uniones intercelulares: MA (mcula adherente), ZA (znula adherente) y ZO (znula ocluyente). ZOZAMA

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Aspecto de una unin ocluyente con el microscopio electrnico de transmisin

Ncleo en interfase
El ncleo celular encierra el material gentico. En este dibujo semiesquemtico se representan los niveles de complejidad del mismo, desde la doble cadena de ADN, pasando por la asociacin con histonas formando nucleosomas, de aqu a los sistemas plegados conocidos como solenoides, hasta llegar a un cromosoma Otro sitio donde normalmente encontramos clulas binucleadas es el estmago. Aqu mostramos a grandes aumentos un acercamiento a las glndulas gstricas. En el centro se observa una clula productora de cido clorhdrico (clula parietal) que claramente muestra dos ncleos, cada uno con su nuclolo correspondiente Este dibujo semiesquemtico tiene el mismo principio que el anterior. Aqu se muestra el equivalente a un ncleo de cromatina condensada Este es otro tipo de clula binucleada menos comn que los anteriores. Se trata de una neurona ganglionar del sistema nervioso perifrico. Observe que los ncleos tienen un predominio de cromatina extendida. (Ncleos de cara abierta) El ejemplo de clula multinucleada (sincitio) normal ms fcil de identificar es el rabdomiocito esqueltico o clula del msculo esqueltico. Los ncleos alargados se encuentran a la periferia de la clula que tiene forma de cilindro Las formas de los ncleos pueden ser muy variadas. Aqu observamos un leucocito neutrfilo. Observe su ncleo multilobulado y de cromatina condensada. Si observa con cuidado, notar que se trata de una nia. Pase el cursor sobre el ncleo y busque el zapatito rosa Un corte histolgico de hgado resulta muy adecuado para observar los detalles del ncleo y del citoplasma. Observe que el interior de los ncleos redondeados muestra zonas obscuras (heterocromatina), alternando con zonas claras (eucromatina). Note que hay varias clulas binucleadas En este dibujo semiesquemtico se representa a la cromatina (ADN + protenas) como filamentos con pequeas bolitas que equivalen a los nucleosomas. El dibujo de la izquierda muestra zonas donde la cromatina est enrollada y otras donde est extendida. El dibujo de la derecha muestra el aspecto que veramos con microscopio fotnico. Note que donde la cromatina est extendida (eucromatina) se aprecia un espacio claro, mientras que donde est enrollada vemos grumos basfilos de heterocromatina Estas son neuronas de la mdula espinal. Note que los ncleos son de cromatina extendida con nuclolo prominente (en ojo de lechuza) Esta clula no tiene dos ncleos. Tiene cerca de cuarenta. Se trata de una clula gigante de reaccin a cuerpo extrao. Es una clula reactiva que participa en los mecanismos de defensa del cuerpo humano Esta es una clula normal con un ncleo gigante, multilobulado y poliploide. Se trata del precursor inmediato de las plaquetas, el megacariocito. Observe que el ncleo de este gigante es mucho mayor que varias de las clulas que le rodean juntas Observe esta neurona. El ncleo es de cromatina extendida con un nuclolo prominente (se conoce como ncleo en ojo de lechuza). Note que el nuclolo tiene una pequea saliente redondeada. En efecto, se trata del cuerpo de Barr

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A mayores aumentos el detalle de las zonas con eucromatina y heterocromatina es mucho ms evidente. Es posible adems identificar los nuclolos. En este campo cuando menos hay dos clulas binucleadas El microscopio electrnico de transmisin nos muestra con mucho mayor detalle las caractersticas de un ncleo celular. Observe los grumos gruesos de heterocromatina y el aspecto de polvo fino de las zonas con eucromatina En esta imagen podemos apreciar el detalle ultraestructural del nuclolo. Note que tiene zonas obscuras alternando con zonas claras Por medio del microscopio electrnico de transmisin, en esta imagen debemos identificar las membranas de la envoltura nuclear, un poro nuclear en el centro del campo y una barra obscura (electrodensa) en la cara interna del ncleo que corresponde a la lmina nuclear interna Dibujo semiesquemtico que muestra en tres dimensiones, la relacin existente entre la membrana externa de la envoltura nuclear y el retculo endoplsmico rugoso, aqu representado en azul

El linfocito es un leucocito encargado de diversas funciones de defensa del organismo. Como se aprecia aqu, tiene un ncleo redondeado de cromatina condensada. Por cierto, en estos casos no se acepta; ncleo de cara cerrada En esta imagen podemos apreciar el detalle del nuclolo, las localizaciones de la cromatina y la doble membrana que constituye la envoltura nuclear. Si usted sigue el contorno de la misma, podr identificar varios poros nucleares En esta micrografa electrnica de transmisin se observa en la parte central la continuidad entre la membrana externa de la envoltura nuclear y el retculo endoplsmico rugoso En esta imagen podemos identificar tres poros nucleares. Observe que la membrana citoplsmica de la envoltura nuclear tiene pequeas estructuras redondeadas; son ribosomas. De aqu que una de las funciones del ncleo sea la sntesis de protenas de exportacin Esta micrografa electrnica de transmisin muestra la distribucin de la cromatina: alrededor de la envoltura nuclear (cromatina perifrica), asociada al nuclolo y libre en el jugo nuclear

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R ER
Ya se ha comentado que la membrana externa de la envoltura nuclear se contina con un sistema de membranas en el citoplasma, constituyendo el retculo endoplsmico. Este dibujo semiesquemtico muestra en tres dimensiones el concepto Este es el aspecto del retculo endoplsmico rugoso con el microscopio electrnico de transmisin. Note que se trata de sistemas de membrana en paralelo con pequeas estructuras redondeadas electrodensas que corresponden a los ribosomas Estas con clulas plasmticas. Note la intensa basofilia citoplsmica que corresponde a retculo endoplsmico rugoso. Observe una zona clara perinuclear que corresponde al aparato de Golgi. Imagen negativa de Golgi Este corte de pncreas humano con H y E nos muestra que el citoplasma de las clulas secretoras tiene una zona basfila que corresponde al retculo endoplsmico rugoso y otra acidfila que corresponde a los grnulos secretorios

Observe en el extremo superior izquierdo al ncleo celular. En el citoplasma se encuentran varias cisternas de retculo endoplsmico rugoso (ReR) y algunas mitocondrias En algunas neuronas el retculo endoplsmico rugoso se encuentra en subunidades dispersas en el citoplasma que se aprecian como grumos gruesos basfilos. Esta es la sustancia de Nissl

A grandes aumentos con el microscopio electrnico de transmisin apreciamos el detalle de las cisternas de retculo endoplsmico rugoso y sus ribosomas asociados Si bien el microscopio fotnico no nos permite apreciar el detalle ultraestructural del retculo endoplsmico rugoso, la tincin basfila del citoplasma con H y E nos permite identificar su presencia. Pncreas

El microscopio electrnico Aqu tenemos otra neurona de transmisin nos con grumos de Nissl. Note muestra el caracterstico el ncleo voluminoso de aspecto del retculo cromatina extendida con endoplsmico rugoso nuclolo prominente (Rer) Como ocurre con otros organelos, Los cortes de lo que ahora conocemos como pncreas obtenidos retculo endoplsmico rugoso fue de animales que identificado por los antiguos fueron sometidos a histlogos. De hecho, se asoci fijacin por perfusin con trabajo celular, por lo que se le intravascular, dio el nombre de ergastoplasma de permiten apreciar Garnier. Aqu lo observamos como con mayor claridad la estructuras irregulares azules en el zona basfila y la citoplasma de los hepatocitos acidfila Los estudios con microscopio electrnico de transmisin permitieron identificar dos zonas en el retculo endoplsmico. Una con ribosomas (organelos encargados de la sntesis de protenas) denominada retculo endoplsmico rugoso o granular, y otra sin ribosomas, que se conoce como retculo endoplsmico liso. Este dibujo semiesquemtico muestra una representacin tridimensional del retculo endoplsmico con sus dos componentes

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Golgi y grnulos secretorios

Corte de cerebelo procesado con impregnacin metlica clsica. Note en la porcin central una clula de Purkinje cuyo soma tiene forma de higo. Observe unos corpsculos obscuros que forman una especie de red. Don Camilo Golgi llam a estas estructuras aparato reticular interno. Ahora le conocemos como aparato de Golgi Ganglio nervioso a mayor aumento con tcnica de Da Fano. Observe el citoplasma redondeado de las neuronas. Fondo caf claro con pequeos grumitos obscuros. Corresponden al aparato de Golgi. Note que los ncleos no se impregnan, quedan huecos blancos. Es la imagen negativa del ncleo El dibujo semiesquemtico nos muestra la representacin tridimensional de los componentes bsicos del aparato anablico. En azul, tenemos el retculo endoplsmico rugoso, en amarillo y rosa, el aparato de Golgi, y separndose del mismo, tambin en rosa, los grnulos secretorios que liberan su contenido al exterior de la clula Otra impregnacin metlica clsica es la tcnica de Da Fano. Aqu se observan neuronas ganglionares con soma redondeado. Note que el fondo del citoplasma es caf amarillento y contiene estructuras de forma irregular obscuras. Corresponden al aparato de Golgi

Clula plasmtica de Cajal con citoplasma intensamente basfilo (Retculo endoplsmico rugoso) y una amplia imagen negativa de Golgi Esta micrografa electrnica de transmisin nos muestra el aparato de Golgi. Adems usted ahora debe ser capaz de identificar el ncleo celular, un centrolo y algunas mitocondrias Esta impresionante micrografa electrnica de transmisin muestra con tal detalle la estructura del aparato de Golgi, que pareciera que fue dibujada. Note las caras cis y trans Esta micrografa electrnica de transmisin resume varios de los puntos hasta aqu tratados. Identifique el retculo endoplsmico rugoso, vea que se encuentra adyacente al aparato de Golgi, que a su vez se asocia con grnulos secretorios Intestino delgado. Observe que las clulas de la izquierda tienen en el citoplasma numerosos grnulos secretorios obscuros. Estas son las clulas de la base de las criptas intestinales tambin conocidas como clulas de Paneth Grnulos secretorios con microscopio electrnico de transmisin

A grandes aumentos, la tcnica de Da Fano nos muestra el aspecto irregular del complejo de Golgi en neuronas ganglionares El microscopio electrnico de transmisin nos muestra en el centro de la imagen, el aspecto de los sculos del aparato de Golgi. Observe que en la porcin superior de la imagen se identifican cisternas de Rer Pncreas de rata prefundida. Note la basofilia citoplsmica (Rer) y la zona acidfila con numerosos grnulos secretorios El microscopio electrnico de transmisin nos muestra el detalle de grnulos secretorios. Observe que estn limitados por membrana y que su contenido es electrodenso. Note en el extremo inferior derecho un fragmento del ncleo celular En las clulas de tipo neuroendocrino es caracterstico que los grnulos secretorios se observen con microscopio electrnico de transmisin, como estructuras redondeadas separadas de la membrana que les limita

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Lisosonas y melanosomas
Del aparato de Golgi se derivan tres tipos especficos de organelos con membrana: los grnulos secretorios, los lisosomas y los melanosomas. Esto significa que las protenas que contienen, se sintetizan en el Rer El microscopio electrnico de transmisin nos muestra el aspecto de un lisosoma primario. Note que la membrana que le limita tiene el aspecto de unidad de membrana. El material grumoso corresponde a las enzimas hidrolticas cidas En el encfalo se encuentra un conglomerado de somas de neuronas conocido como locus nger. Aqu, las neuronas note el ncleo en ojo de lechuza-, tienen en su citoplasma grandes cantidades de melanosomas. En esta imagen la melanina se ve negra porque el corte se ti con Luxol Fast Blue Esta micrografa electrnica de transmisin muestra un fragmento del ncleo celular, as como un lisosoma primario y un lisosoma secundario de tipo cuerpo residual con arreglos paralelos de fosfolpidos que se conocen como cuerpo mielnico

Aqu observamos otro gran cuerpo residual. Usted debe ser capaz ahora de indentificar dos fragmentos de ncleo celular, algunas mitocondrias y cisternas dilatadas de retculo endoplsmico rugoso Ocasionalmente los lisosomas muestran un contenido grumoso muy electrodenso, como el que aqu se observa En el centro de la imagen se identifica un cuerpo residual voluminoso. Note las lminas paralelas de material lipdico. Rodeando al cuerpo residual se aprecia una gran cantidad de sistemas de membrana tubulares y vesiculares que corresponden al retculo endoplsmico liso Algunas clulas en condiciones normales, al paso de los aos, acumulan en su citoplasma grandes cantidades de lipofuscina, como se observa en estas neuronas ganglionares. A lipofuscina es un pigmento pardo, aqu lo vemos como grnulos rojos porque el corte se ha teido con la tcnica de P.A.S El sistema ptico de interferencia diferencial segn Nomarski nos permite apreciar con detalle el aspecto de los lisosomas en dos leucocitos Los melanosomas son organelos con membrana que derivan del aparato de Golgi. Las clulas que contienen melanosomas tienen en comn el derivarse del tubo neural. Los melanocitos, como el que aqu se muestra con una impregnacin metlica, se encuentran en la porcin basal de la epidermis Con grandes aumentos, notamos el aspecto de los numerosos grnulos de melanina en los queratinocitos basales de la epidermis humana Queratinocitos basales de epidermis humana con numerosos grnulos de melanina citoplsmica. La tincin es H y E

Aunque clsicamente se describe a los lisosomas primarios como organelos redondeados, en ocasiones muestran perfiles irregulares y polimrficos, como los que aqu se aprecian Los cuerpos multivesiculares como el que aqu se muestra se relacionan con el metabolismo de vesculas de pinocitosis En condiciones normales los cuerpos residuales se acumulan en regiones especficas del citoplasma formando un complejo macromolecular rico en lpidos que corresponde al llamado pigmento de desgaste, conocido tambin como lipofuscina Los leucocitos neutrfilos, como el que se observa en el centro de esta imagen, son clulas relacionadas con fagocitosis como mecanismo de defensa. Su citoplasma contiene grandes cantidades de lisosomas que se pueden apreciar con el microscopio fotnico como grumos finos rosados Este es un leucocito eosinfilo. Observe que el citoplasma contiene grandes cantidades de lisosomas que se aprecian como grnulos gruesos rojos La melanina es un pigmento pardo, contenido en los melanosomas. Los melanocitos inyectan los melanosomas en el citoplasma de las clulas epiteliales de la epidermis, que se conocen como queratinocitos. En este corte de piel humana observamos una hilera de queratinocitos basales con abundante melanina Con grandes aumentos, notamos el aspecto de los numerosos grnulos de melanina en los queratinocitos basales de la epidermis humana Cuando empleamos la tcnica de FontanaMasson, la melanina expresa argentafinidad, por lo que ahora los grnulos se ven negros

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En esta micrografa electrnica de transmisin observamos una prolongacin citoplsmica de un melanocito que contiene grandes cantidades de melanosomas Con el microscopio Con grandes aumentos electrnico de transmisin, podemos ver el detalle de los melanosomas se los numerosos aprecian como estructuras melanosomas en el redondeadas u ovoides citoplasma de esta con un material neurona del Locus Nger intensamente electrodenso Este dibujo semiesquemtico representa en tres dimensiones el ciclo del lisosoma. Observe la fagocitosis de una bacteria peluda; al fagosoma se unen lisosomas derivados del Golgi descargando sus enzimas hidrolticas. Si el contenido se puede destruir, es sujeto de exocitosis, en caso contrario queda como cuerpo residual. Los organelos viejosson autofagocitados. El autofagosoma sigue una suerte similar a la ya descrita para el fagosoma Corte tangencial de un folculo piloso teido con la tcnica de FontanaMasson. Los melanosomas son tan claros que se pueden contar

REL, Mitocondrias, peroxisomas

El retculo endoplsmico liso es un organelo membranoso constituido por una serie de tbulos anastomosados que se comunican directamente con el retculo endoplsmico rugoso Este corte ultrafino de tejido muscular, nos permite apreciar varias mitocondrias con sus crestas transversales. Los grumos gruesos y electrodensos corresponden a glucgeno Corte de rin contrastado con la tcnica de Cain. Los tmulos en corte transversal muestran numerosas mitocondrias en rojo brillante Las clulas esteroidognicas tienen mitocondrias con crestas tubulares. Estas se aprecian con el microscopio electrnico de transmisin como pequeas estructuras redondeadas dentro del organelo En el incansable msculo cardaco, las mitocondrias son muy numerosas y cada una tiene ms crestas que en otros tejidos. Esto probablemente se relaciona con un mayor requerimiento energtico. Note que la mitocondria del centro del campo pareciera estar sufriendo una biparticin, como ocurre con El organelo membranoso ms conocido sin duda es la mitocondria. Aqu observamos sus caractersticas estructurales en una representacin tridimensional El microscopio electrnico de transmisin nos muestra el detalle de las membranas mitocondriales. Las caractersticas crestas se encuentran en plano transversal al eje largo del organelo Los distintos planos de corte nos pueden mostrar perfiles mitocondriales alargados o redondeados, como en esta micrografa electrnica de transmisin Un sitio muy rico en mitocondrias es el rin. Observamos numerosas mitocondrias, algunas redondeadas y otras alargadas con numerosas crestas. En este caso, la matriz mitocondrial es ms electrodensa que en las anteriores El retculo endoplsmico liso slo puede apreciarse con el microscopio electrnico de transmisin. Note en el citoplasma de esta clula una gran cantidad de estructuras limitadas por membrana, en su mayor parte redondeadas; son cortes en distintos planos del retculo endoplsmico liso

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Corte de msculo cardaco contrastado con la tcnica de Cain para demostrar mitocondrias. La cantidad de estos organelos en el corazn es tan grande que cuesta trabajo identificar los grnulos rojos La tcnica de Cain contrasta especficamente a las mitocondrias impartindoles un color rojo brillante. Este es un corte de rin. Observe los numerosos tubitos cuyas clulas tienen en su citoplasma granulitos rojos que corresponden a mitocondrias Estos son tbulos renales contrastados con la tcnica de Cain. Note que algunas mitocondrias tiene forma redondeada y otras alargada

Una manera indirecta de identificar peroxisomas es con la tcnica de histoqumica enzimtica para demostrar la actividad de la enzima peroxidasa, que aqu se realiz en un frotis sanguneo. La clula del centro es un leucocito neutrfilo Los cortes semifinos permiten identificar numerosos detalles celulares. Las clulas tubulares de rin aqu presentadas, muestran en su citoplasma una gran cantidad de estructuras alargadas que corresponden a mitocondrias Corte de rin con tmulos cortados en plano longitudinal. Tcnica de Cain para demostrar mitocondrias en rojo brillante

Esta micrografa electrnica de transmisin fue revisada al hablar de los cuerpos residuales. En efecto, en el centro del campo usted identifica uno muy voluminoso. Ahora ponga atencin en el citoplasma que rodea al cuerpo residual, deber notar que se encuentra una gran cantidad de estructuras tubulovesiculares limitadas por membrana. Correcto, se trata de perfiles de retculo endoplsmico liso

Citoesqueleto
Las clulas musculares, especializadas en la contraccin, contienen grandes cantidades de filamentos contrctiles: delgados conocidos como de actina, y gruesos, conocidos como de miosina. En esta imagen, el microscopio electrnico de transmisin nos muestra el arreglo de los filamentos contrctiles en una clula de msculo esqueltico Los filamentos contrctiles tambin pueden hacerse evidentes por medio de tcnicas inmunolgicas. Este es un fibroblasto en cultivo que muestra el arreglo de los filamentos de actina gracias a la inmunofluorescencia En cortes de parafina, los elementos del citoesqueleto pueden hacerse evidentes por medio de inmunohistoqumica enzimtica. En este caso, el anticuerpo primario va dirigido contra actina especfica de msculo, lo que permite contrastar claramente en tinte pardo los leiomiocitos de vasos sanguneos Los estudios con microscopio electrnico de transmisin permitieron identificar filamentos cuyo dimetro es ms delgado que el de los filamentos gruesos y ms grueso que el de los filamentos delgados. De aqu proviene la denominacin de filamentos intermedios Este acercamiento nos muestra lo especfico de la reaccin de inmunohistoqumica. Slo se marcan las clulas musculares. Anticuerpos primarios anti-actina especfica de msculo

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En algunos tipos celulares como los epitelios la microscopa electrnica de transmisin muestra filamentos intermedios en haces paralelos

El material filamentoso que se asocia con los desmosomas corresponde a filamentos intermedios del tipo de las queratinas. Aqu se conocen como tonofilamentos En este corte ultrafino de tejido nervioso, observamos en el centro del campo una gran cantidad de filamentos intermedios. Aqu se conocen como neurofilamentos

El microscopio electrnico de transmisin muestra numerosos haces entrelazados de filamentos intermedios de tipo queratina (tonofilamentos) La inmunohistoqumica enzimtica con anticuerpos primarios antineurofilamentos, hace evidentes en esta imagen a los filamentos intermedios propios de las neuronas

Ribosomas libres
Los organelos sin membrana encargados de la sntesis de protenas se conocen como ribosomas. Pueden encontrarse libres en el citoplasma como muestra esta micrografa electrnica de transmisin, o asociados al Rer

Los ribosomas libres se relacionan con la sntesis de protenas que se quedan en el citoplasma

Estas son clulas precursoras de los eritrocitos. Durante su maduracin se encargan de la sntesis de hemoglobina, protena que se queda en el citoplasma. Por lo tanto, la basofilia observada corresponde a ribosomas libres. Eritroblastos basfilos

Inclusiones citoplsmicas
La grasa se almacena en varios tipos celulares como una inclusin citoplsmica. El ejemplo ms caracterstico se observa en el tejido adiposo unilocular. Recuerde que los huecos se ven blancos debido a que el procesamiento histolgico rutinario elimin la grasa del tejido El microscopio electrnico de transmisin nos muestra al glucgeno (inclusin citoplsmica) como grumos electrodensos similares a palomitas de maz Este es un corte por congelacin de glndula suprarrenal. Se ha teido con rojo oleoso, por lo que los depsitos de esteroides (grasos) se aprecian como granos rojos Los macrfagos son clulas de defensa especializadas en la fagocitosis. Las partculas de carbn suspendidas en el aire como contaminante, llegan a los ganglios linfticos del sistema respiratorio donde son fagocitadas por los macrfagos. Dado que estos no pueden destruir el carbn, el contaminante queda en el citoplasma como inclusin. A este fenmeno se le conoce como antracosis Hgado teido con la tcnica de Carmn de Best, que demuestra especficamente los depsitos de glucgeno en el citoplasma de los hepatocitos Corte de ganglio linftico traqueal con antracosis. Depsito de carbn en el citoplasma de los macrfagos como inclusin exgena

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Divisin celular

El primer cambio apreciable con tcnicas rutinarias en una clula que entra en divisin, es un empaquetamiento especial de la cromatina, de modo que se formen pequeas estructuras alargadas conocidas como cromosomas El cido desoxirribonuclico (ADN), macromolcula que porta la informacin gentica se encuentra en el ncleo celular. Se asocia con protenas conformando un complejo supramacromolecular conocido como cromatina. Cuando las clulas se encuentran en interfase, la cromatina se aprecia como un filamento muy delgado que puede estar extendido (eucromatina) o enrollado (heterocromatina9 Raz de lirio teida con la tcnica de Feulgen que contrasta especficamente el ADN. En el centro se aprecia el detalle de una PROFASE En la METAFASE los cromosomas se alinean en el plano ecuatorial de la clula. Observe que la clula del centro muestra claramente el huso acromtico En la ANAFASE, los cromosomas se separan dejando hueca la porcin central de la clula y se dirigen hacia los polos de la misma El sistema de interferencia diferencial segn Nomarski, nos muestra en forma espectacular el detalle de una clula vegetal en ANAFASE En la prctica mdica resulta importante la identificacin de figuras de mitosis en tejidos humanos. Un buen lugar para familiarizarse con su aspecto es el intestino delgado Cuando la clula est iniciando la TELOFASE, los cromosomas que se encuentran en cada polo inician un proceso de rearreglo estructural de modo que vuelven a adoptar la conformacin propia de la INTERFASE. Note que los deditos parecen estarse fusionando. Observe adems los microtbulos y filamentos que formarn el cuerpo medio

En algunos casos, la METAFASE no es tan clara. Esto se debe al movimiento de los cromosomas. Note que los deditos no dejan hueco el centro de la clula. Si pone atencin podr identificar otra clula que se encuentra en PROFASE Las clulas vegetales son un buen modelo para estudiar las figuras de la mitosis. Recuerde: PRO METi ANA TELefonear (profase, metafase, anafase y telofase). En la clula del centro se observa donde estara el ncleo, una serie de estructuras digitiformes (como deditos) que corresponden a cromosomas. Note que parecen mantener la forma redondeada del ncleo. Compare con los otros naceos. Se trata de una PROFASE Aqu tenemos a mayor aumento dos clulas vegetales que se encuentran en PROFASE Este es el aspecto que tiene un cromosoma gigante de la mosca Drosophila melanogaster. En este caso se aprecia una serie de bandas transversales que recorren el cromosoma Estudie con detenimiento esta imagen. Usted debe identificar clulas en PROFASE, en ANAFASE y en TELOFASE Raz de lirio teida con tcnica de Feulgen para demostrar especficamente el ADN. Se observa una clula en ANAFASE

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Corte de intestino delgado teido con H y E en el que se observan figuras de mitosis

Corte de epidermis humana irritada. Las clulas que le conforman, llamadas queratinocitos, responden a la lesin reproducindose, con lo que el epitelio se hace ms grueso. El reconocimiento de este tipo de figuras de mitosis es importante en medicina en el estudio de tumores malignos

Aqu tenemos otra imagen de un extendido de cromosomas humanos. Si pone atencin podr identificar cromosomas metacntricos, submetacntricos y acrocntricos La base de los estudios citogenticas es la obtencin de material cromosmico. Este es el aspecto de los cromosomas teidos con la tcnica de Feulgen

Esta clula vegetal se encuentra en ANAFASE. Note que entre los grupos de cromosomas que se dirigen hacia los polos, se observan estructuras filamentosas. Corresponden a microtbulos y filamentos No podamos dejar de disfrutar del aspecto de los cromosomas humanos con el sistema de interferencia diferencial segn Nomarski

Aqu observamos el aspecto de un tumor maligno epitelial (carcinoma). Visite la galera de epitelios y busque el epitelio plano estratificado con estrato crneo. Comprelo con esta imagen y seguramente notara grandes diferencias. En la prctica mdica, el reportar la cantidad de figuras de mitosis en varios tipos de cncer tiene gran relevancia en el tratamiento y pronstico de los pacientes

Epitelios
Plano simple y plano estratificado
En este corte histolgico teido con H y E, observamos el aspecto de un capilar sanguneo. Note que las clulas endoteliales apenas logran identificarse por sus ncleos planos, alargados y de cromatina condensada Este es un corte longitudinal de una arteria pequea. Se aprecia la luz vascular, las clulas de msculo liso (leiomiocitos) y las endoteliales Aqu observamos la porcin ms externa del intestino de un cobayo. Se identifican leiomiocitos y hacia la parte media de la imagen, una cubierta de clulas epiteliales planas que corresponde al mesotelio Corte transversal de arteria mediana. Se aprecia la luz vascular con algunos eritrocitos y las clulas endoteliales con escaso citoplasma y ncleos alargados de cromatina condensada Las clulas endoteliales derivan del mesnquima, lo que se relaciona con el hecho de que expresen abundantes cantidades de filamentos intermedios del tipo vimentina. Este corte se proces con inmunohistoqumica enzimtica con anticuerpos primarios anti-vimentina. La marca se aprecia en tono pardo A grandes aumentos con microscopio electrnico de transmisin se aprecia que el citoplasma de las clulas endoteliales es rico en vesculas de pinocitosis A grandes aumentos, podemos apreciar el detalle del epitelio plano simple de la cpsula de Bowman, as como las clulas endoteliales de los capilares glomerulares

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El campo microscpico est atravesado por un vaso capilar sanguneo. Note la gran cantidad de eritrocitos en su luz. Es posible identificar numerosas clulas endoteliales

El microscopio electrnico de transmisin nos muestra el detalle de una clula endotelial en un capilar del corazn

Intestino delgado de cobayo en su porcin externa. Se observa el mesotelio como epitelio plano simple

Otro sitio donde encontramos ejemplos de epitelio plano simple, es el pulmn. Este dibujo semiesquemtico nos muestra el aspecto tridimensional de los alvolos; en rosa vemos el epitelio alveolar y en azul los capilares con su endotelio El pulmn a grandes aumentos nos muestra el detalle de los septos alveolares. Note sus finsimos lmites que corresponden al endotelio y al epitelio plano simple alveolar El rin es un rgano que permite estudiar varios ejemplos de membranas epiteliales; estas conforman tubos pequeitos en los que se procesa el lquido que finalmente sale como orina. Los tubitos cortados transversalmente muestran perfiles redondeados. Aqu observamos numerosas porciones delgadas de asa de Henle. El principiante debe tener en cuenta que podra confundir este aspecto con el del tejido adiposo unilocular El padre de la Histologa, Xavier Bichat, describi en detalle las membranas serosas. Estas cubren cavidades corporales como el peritoneo, aqu representado en un dibujo semiesquemtico. Aunque no es muy exacto, el histlogo clsico considera que las membranas serosas se constituyen por clulas de epitelio plano simple, al que aplica el trmino de mesotelio Corte de vagina humana teida con H y E. Observe las papilas de tejido conjuntivo y la variacin en la forma de las clulas que forman esta membrana epitelial Corte de lengua humana teido con tricrmico de Masson. A la izquierda de la imagen se aprecia el aspecto clsico de los epitelios planos estratificados, en este caso, sin estrato crneo. Note la interfase ondulada entre el epitelio y el tejido conjuntivo subyacente

Corte de pulmn de cobayo perfundido. A medianos aumentos se aprecia una gran cantidad de huecos que corresponden a los espacios alveolares. Entre ellos, se encuentran septos muy delgados con epitelio alveolar y capilares El microscopio electrnico de transmisin nos permite identificar a grandes aumentos el detalle de los componentes de la barrera alvolo-capilar Este corte muestra la seccin transversal de tbulos de la mdula renal. En el centro de la imagen se encuentran porciones delgadas del asa de Henle en estrecha relacin con vasos capilares note que stos tienen eritrocitos verdes (No, no son marcianos, es un tricrmico de Gallego). Hacia la periferia de la imagen se aprecian otros tbulos con clulas ms altas que bien pueden llamarse epitelio cbico simple En este corte de rin, se muestra en el centro de la imagen un conglomerado de vasos capilares conocido como glomrulo. Note que alrededor de dicha estructura se encuentra una cubierta con clulas de epitelio plano simple (cpsula de Bowman). Adems se encuentran a la periferia numerosos conductos renales con epitelio cbico simple Extendido de membrana peritoneal sometido a impregnacin metlica. Slo se contrastan los lmites celulares. Observe cmo las clulas mesoteliales se encuentran estrechamente relacionadas entre s Los epitelios planos estratificados sin estrato crneo se encuentran revistiendo cavidades hmedas; forman parte de las membranas mucosas y se asocian con proteccin mecnica. Esfago humano teido con tricrmico de Masson

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Con mayores aumentos, podemos notar que en los epitelios planos estratificados, slo las clulas ms superficiales tienen forma aplanada. Esfago humano teido con H y E Con grandes aumentos podemos observar la forma de las clulas del estrato basal, formando una hilera que algunos autores describen como empalizada. Note que las clulas de estratos superiores aumentan de tamao Observe con detenimiento las caractersticas de la clula sealada con la flecha. Es binucleada, con ncleos grandes y con un notorio halo claro perinuclear. Se trata de un coilocito. Este es el aspecto morfolgico de las clulas infectadas por el virus del papiloma humano (VPH). La deteccin temprana de este tipo de alteraciones por medio de la citologa exfoliativa ha condicionado una notable disminucin en las muertes por cncer del crvix uterino Este es otro ejemplo de transicin de epitelios. Aqu observamos un corte de la unin gastroesofgica de un cobayo. A la derecha se encuentran las glndulas gstricas y a la izquierda un epitelio plano estratificado con estrato crneo. En el humano, este epitelio no tiene estrato crneo Los conglomerados fasciculares de filamentos intermedios de tipo queratina, son caractersticos de los epitelios escamosos (planos estratificados). Aqu se muestran los llamados tonofilamentos en queratinocitos epidrmicos Con grandes aumentos notamos los cambios en la forma de los queratinocitos, el estrato lcido en continuidad con el crneo. Note adems los capilares del tejido conjuntivo subyacente El tricrmico de Masson nos muestra con grandes aumentos el detalle de la interfase dermoepidrmica

Corte de lengua teido con tricrmico de Masson. Note la variacin en la forma de las clulas, desde la base hasta la porcin ms superficial Un detalle comn en el epitelio vaginal es la glucogenizacin de los queratinocitos. Note que los citoplasmas de los estratos ms superficiales tiene un aspecto vaco. Los anatomopatlogos le llaman a este aspecto: clulas claras Los epitelios planos estratificados sin estrato crneo, suelen asociarse con zonas en las que se observa un cambio brusco de un tipo de membrana epitelial a otro; a estas zonas se les conoce como transicin de epitelios. Este es un corte de la unin ano-rectal humana teido con H y E. Observe la estrecha relacin entre el epitelio escamoso y el de tipo intestinal con clulas caliciformes Esta es la transicin de epitelios ms importante y famosa en la medicina. A la izquierda observamos el epitelio del endocrvix que bruscamente cambia hacia la derecha, al del exocrvix. Esta zona es blanco primario del virus del papiloma humano (VPH), que se relaciona con la gnesis del carcinoma crvicouterino Corte de piel humana con epidermis gruesa teido con la tcnica de van Gieson. Note el patrn ondulatorio de la interfase epitelio:conjuntivo. El estrato crneo en este corte, es tan grueso que no sale completo en la imagen Este corte de piel con epidermis gruesa se ti con tricrmico de Gomori. Empleando luz polarizada se logra un efecto peculiar de brillantez en el estrato crneo

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Corte de piel con epidermis gruesa teido con tricrmico de Gallego

Los sistemas de contraste Este es el aspecto de las ptico, como el campo clulas ms superficiales obscuro o el contraste de de un epitelio plano fases, permiten al estratificado sin estrato gineclogo entrenado el crneo. Esta imagen no estudio de las muestras muestra un corte, se trata que obtiene de su paciente de un extendido de clulas en el consultorio, de forma obtenidas por raspado de rpida, sencilla y eficiente. la superficie de la mucosa Uno de los grandes cervical humana. El maestros de la estudio de estas clulas y Ginecologa en Mxico, el sus alteraciones (citologa) Dr. Nicols Casanova, permite identificar en realiza rutinariamente este etapas tempranas las proceso en su consultorio lesiones precursoras del privado cncer del crvix uterino En este extendido de mucosa cervical, se Este dibujo aprecia el aspecto de las semiesquemtico nos clulas superficiales e muestra el detalle de los intermedias del epitelio cambios que sufren los plano estratificado sin queratinocitos conforme estrato crneo. Nota maduran desde la porcin usted la presencia de unos basal del epitelio, hasta la pequeos bastoncitos azul superficial. Usted debe ser verdosos?, son capaz de identificar los procariontes, bacterias estratos basal, espinoso, asociadas a un proceso granular, lcido y crneo irritativo cervical, que fue el motivo de la consulta Aunque el contraste Como se menciona en el obtenido con los captulo de piel, los tricrmicos resulta epitelios planos espectacular, el contraste estratificados con estrato rutinario con H y E, nos crneo, normalmente permite identificar casi tienen una poblacin de todos los detalles propios clulas de defensa que del epitelio plano incluyen linfocitos y clulas estratificado con estrato de Langerhans crneo Los epitelios planos simples se encuentran en zonas en las que se requiere de una separacin muy delgada entre compartimientos. Aqu observamos en un dibujo semiesquemtico, los componentes esenciales de un vaso sanguneo: ntima, media y adventicia. El epitelio plano simple que reviste vasos sanguneos o linfticos recibe el nombre de ENDOTELIO. Si observa con cuidado podr identificar el aspecto tridimesional y al corte

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Cbico simple y cbico estratificado

El parnquima renal est constituido por una gran cantidad de tbulos que se encuentran limitados en su mayor parte por un epitelio cbico simple. Rin humano contrastado con metenamina de plata Corte de tiroides teido con H y E, con grandes aumentos. Note las hileras de clulas de tipo epitelio cbico simple que limitan los folculos En este corte de mdula renal podemos comparar el aspecto de tbulos constituidos por epitelio plano simple y tbulos constituidos por epitelio cbico simple Con grandes aumentos podemos observar la forma de las clulas del epitelio cbico simple de los plexos coroides. Note que por debajo de este epitelio, se encuentra un capilar con clulas endoteliales y abundantes eritrocitos Con grandes aumentos y tincin rutinaria de H y E, podemos apreciar el detalle de las clulas cbicas que conforman uno de los tbulos renales En algunos planos de corte como el que aqu se muestra, el tejido conjuntivo es tan escaso que sobresale notablemente el epitelio cbico simple. Plexos coroides teidos con H y E

La glndula tiroides est constituida por estructuras esferoidales que al corte muestran un perfil circular. Los lmites estn constituidos por clulas que en algunas condiciones adoptan el aspecto de un epitelio cbico simple

En el cerebro se encuentran estructuras especializadas en la filtracin de lquido tisular que se conoce como lquido cfalo-raqudeo. Se trata de los plexos coroides. En este corte teido con H y E, se puede identificar el epitelio cbico simple apoyado sobre tejido conjuntivo laxo rico en capilares

En esta imagen se muestra el aspecto de un conducto glandular que est revestido por un epitelio cbico estratificado

Cilndrico simple y cilndrico estratificado

Un buen lugar para buscar epitelio cilindrico simple es un conducto glandular. En esta imagen observamos 3 planos de corte de conductos glandulares que estn revestidos por este tipo de epitelio Corte de mdula renal teido con la tcnica de PAS. En la porcin central se aprecia un tbulo colector constituido por epitelio cilndrico simple. Hacia la porcin superior de la imagen, usted debe identificar conductos con epitelio plano simple. Algunos son segmentos delgados del asa de Henle y otros son vasos capilares Este es un corte de la pared del intestino grueso. Hacia la izquierda de la imagen se aprecian las capas musculares. Hacia la derecha, el epitelio de tipo intestinal que en este caso tiene muchas ms clulas caliciformes que las que encontramos en el intestino delgado La vescula biliar es otra regin que se encuentra limitada por un epitelio cilndrico simple. Note que la superficie de las clulas cilndricas es roma Corte de estmago que muestra el epitelio superficial de tipo cilndrico simple mucoproductor. Tincin H y E En este corte teido con H y E, observamos con claridad el detalle del epitelio cilndrico simple mucoproductor. Note que slo la porcin ms superior de la clula tiene moco que adopta un leve tinte acidfilo En el tracto digestivo encontramos varias regiones con epitelio cilndrico simple. Este corte teido con la tcnica de hematoxilina fluoxina safranina corresponde a la proximidad del mpula de Vater. Observe una clula caliciforme aislada aproximadamente al centro del campo En algunas regiones el epitelio cilndrico simple tiene apellidos que se relacionan con caractersticas morfolgicas que les son propias. El epitelio superficial del estmago que se muestra hacia la izquierda de la imagen est constituido por un epitelio cilndrico simple mucoproductor Conductos glandulares limitados por epitelio cilndrico simple. Note que las clulas son ms altas que anchas Corte transversal de un conducto glandular que se aprecia limitado por un epitelio cilndrico estratificado

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Corte de intestino delgado que muestra epitelio cilndrico simple con clulas caliciformes y microvellosidades (epitelio intestinal). Una de las diferencias entre el intestino delgado y el grueso es la cantidad normal de clulas caliciformes Epitelio de intestino delgado teido con tricrmico de Masson. Note el borde estriado que corresponde a las numerosas microvellosidades y el aspecto de las clulas mucoproductoras caliciformes Aqu observamos el aspecto del epitelio del intestino delgado teido con la tcnica de PAS, para identificacin de carbohidratos Con grandes aumentos observamos el detalle estructural del epitelio del intestino grueso que tambin corresponde al tipo cilndrico simple con microvellosidades y clulas caliciformes, pero que contiene una mayor cantidad de estas ltimas

Aqu observamos un epitelio cilndrico simple con clulas caliciformes y microvellosidades. Este nombre tan largo se puede abreviar si decimos: epitelio intestinal, ya que es en esta regin del tracto digestivo donde los encontramos Epitelio intestinal (cilndrico simple con clulas caliciformes y microvellosidades. Observe que la superficie de las clulas cilndricas muestra las numerosas microvellosidades paralelas Corte de intestino delgado que permite apreciar las caractersticas del epitelio cilndrico simple con microvellosidades y clulas caliciformes Con grandes aumentos resulta ms notorio el detalle del moco acidfilo en la porcin superior de las clulas de este epitelio cilndrico simple mucoproductor

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Seudoestratificados
Este dibujo semiesquemtico nos muestra la representacin tridimensional de un epitelio cilndrico seudoestratificado ciliado con clulas caliciformes (epitelio respiratorio). Note usted que aunque las distintas alturas de los ncleos sugieren que unas clulas estn por encima de otras, en realidad no es as. Todas las clulas de esta membrana epitelial tienen su porcin basal apoyada sobre la membrana basal Con grandes aumentos el detalle de los cilios y de las clulas caliciformes es muy claro. Note que los ncleos celulares, en su mayor parte ovoideos, se encuentran a distintas alturas, lo que hace parecer que esta membrana tiene estratos (suedoestratificada) Otra imagen del epitelio seudoestratificado de las vas respiratorias. Note los cilios, las clulas caliciformes y las distintas alturas de los ncleos celulares

Este dibujo semiesquemtico nos muestra una representacin tridimensional de otro ejemplo de epitelio seudoestratificado. Se trata del que reviste las vas urinarias, de aqu que se denomine urotelio. Tambin se conoce como epitelio de transicin. No confundir con transicin de epitelios. (El orden de los factores S altera el producto

Corte de vejiga de cobayo teida con tricrmico de Gallego. Hacia la derecha de la imagen observe el urotelio como una membrana gruesa amarillenta. Note que las clulas ms superficiales tienen aspecto redondeado Este es un corte semifino teido con azul de toluidina. Note que el urotelio pareciera contar con distintos estratos celulares

Esta imagen nos muestra de nuevo el aspecto del epitelio suedoestratificado de la trquea, adems de un detalle estructural que pocas veces podemos apreciar en cortes. Observe la continuidad de la membrana epitelial con elementos glandulares propios de la trquea Aqu observamos la representacin tridimensional de la porcin ms superficial del urotelio de la vejiga urinaria, cuando se encuentra vaca. Compare con la siguiente imagen Corte de vejiga urinaria humana teido con H y E que nos muestra el aspecto caracterstico del urotelio normal

En este corte de trquea podemos identificar hacia la base una franja de cartlago hialino; un poco ms hacia arriba, elementos glandulares y en la porcin ms superior, un epitelio cilndrico seudoestratificado ciliado con clulas caliciformes (epitelio respiratorio) Cuando usted ya no aguanta ms y requiere de una inmediata escala tcnica al tocador, las clulas uroteliales de su vejiga se aplanan, como muestra este dibujo

Glandular exocrino
Uno de los aspectos histolgicos ms frecuentemente encontrado en cortes, es el de glndulas exocrinas con patrn seroso. Este corresponde a las clulas anablicamente activas. En este corte de pncreas con H y E, se aprecian claramente las unidades acinares con basofilia basal y acidofilia apical. No olvide que las zonas basfilas contienen abundante retculo endoplsmico rugoso, mientras que las acidfilas se encuentran ocupadas por grnulos secretorios La glndula salival sublingual es un buen sitio para estudiar el patrn mucoso. En este corte teido con H y E, podemos apreciar los conductos con clulas cilndricas muy acidfilas, as como la comunicacin con los componentes acinares Pncreas humano teido con H y E. Se identifican los arreglos acinares as como la basofilia basal y la acidofilia apical. Patrn seroso Trquea de cobayo prefundido. Se aprecia la comunicacin del epitelio respiratorio con los elementos glandulares. En el extremo derecho podemos ver una porcin del cartlago traqueal

Estas son glndulas exocrinas con patrn mucoso. Los ncleos se encuentran rechazados hacia la porcin basal de la clula, mientras que el resto del citoplasma se encuentra ocupado por la secrecin de tipo carbohidrato que conocemos como moco. Este es un corte de intestino delgado (duodeno) en el que se aprecia el detalle de las glndulas submucosas de Brunner En el pncreas de animales fijados por perfusin intravascular, el tejido conjuntivo es menos evidente, mientras que la separacin acinar es ms clara. Adems el contraste entre las zonas basfilas basales y las acidfilas apicales es mucho ms marcado. Patrn seroso Observe la coexistencia de unidades mucosas con unidades serosas. En la porcin inferior izquierda de la imagen se puede identificar una medialuna serosa. Tincin H y E Con grandes aumentos el detalle de las unidades secretorias mucosas es mucho ms claro. Ncleos basales y citoplasmas claros. Se aprecia adems un conducto glandular. Sublingual

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Cuando observamos glndulas con patrn mucoso teidas con H y E, podemos apreciar el arreglo acinar, los ncleos basales y los citoplasmas plidos ya que el moco no se tie bien con hematoxilina y eosina Otra de las modalidades de secrecin se encuentra en la piel. Se trata del proceso holocrino, del que las glndulas sebceas son el ejemplo clsico. En este corte de piel humana teido con H y E, se aprecia el aspecto plido, en forma de higo de las glndulas sebceas Este es otro aspecto de las glndulas sudorparas apocrinas teidas con tricrmico de Masson. Observe las luces glandulares amplias y note que la porcin ms superficial de las clulas glandulares tiene proyecciones que recuerdan el proceso de gemacin Con grandes aumentos se aprecia el detalle de las unidades secretorias apocrinas. Note que hacia la base de las clulas se identifican las mioepiteliales. La ilustre Dra. Fonseca llam a esto: clulas apocrinando La modalidad de secrecin ms comn se conoce como merocrina o ecrina. En la piel humana encontramos glndulas sudorparas merocrinas como las que aqu se muestran. Note que las luces glandulares son estrechas. Tricrmico de Masson En esta imagen se observan glndulas sudorparas apocrinas con clulas mioepiteliales alternando con glndulas sudorparas merocrinas. Por si fuera poco, en el ngulo inferior izquierdo encontramos un folculo piloso En este corte de piel de axila humana se encuentran numerosas glndulas sebceas, asociadas con folculos pilosos. Note usted que en las porciones ms profundas de la dermis es posible identificar glndulas sudorparas

Con grandes aumentos podemos identificar los cambios nucleares de muerte celular, que en el caso de las glndulas sebceas, representan un proceso normal La glndula submaxilar humana es mixta en el sentido que contiene unidades serosas (caf claro) alternando con unidades mucosas (rosas). En este corte teido con mucicarmn de Mayer, se aprecian adems los conductos en amarillo claro Esta es una imagen que en pocas ocasiones tenemos el placer de observar. Observe que el epitelio respiratorio de la parte superior, se comunica directamente con un conducto glandular que a su vez termina en las unidades secretorias acinares. Trquea de cobayo prefundido. Tincin HyE Corte de esfago humano teido con tricrmico de Masson. Note el epitelio plano estratificado sin estrato crneo y por debajo del mismo encontramos glndulas con patrn mucoso y conductos Estas son glndulas sudorparas apocrinas de piel humana teidas con tricrmico de Masson. Note que las luces glandulares son amplias. Adems en el centro del campo se observan estructuras alargadas y finas teidas de rojo intenso. Son las clulas mioepiteliales Este corte de endometrio, muestra el aspecto de las glndulas en respuesta a un estmulo progestacional. A este patrn se le conoce como secretorio. Compare con el aspecto del endometrio proliferativo Las glndulas sebceas drenan su secrecin hacia el folculo piloso. Observe que en el extremo derecho de la imagen, que corresponde a las zonas ms profundas de la dermis, se encuentran glndulas sudorparas

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En algunos casos como el endometrio, la morfologa de los elementos glandulares vara de acuerdo con estmulos hormonales. En este corte se aprecia el aspecto del endometrio proliferativo en respuesta a un estmulo estrognico

Vista panormica de un corte de piel de axila humana teido con tricrmico de Masson. Usted puede identificar la epidermis, la continuidad con folculos pilosos y con glndulas sebceas, as como las glndulas sudorparas merocrinas y apocrinas

Glndular endocrino
Uno de los arreglos histolgicos de las glndulas endocrinas es el patrn cordonal. Aqu lo apreciamos en el hgado. Observe que los hepatocitos se encuentran distribuidos en hileras que al corte parecen cordones Con grandes aumentos el patrn cordonal es muy claro en el hgado La corteza suprarrenal muestra en su capa ms gruesa (fascicular) el caracterstico patrn cordonal. En esta imagen, hacia la derecha se aprecia el patrn en conglomerados, propio de la mdula suprarrenal Corte de tiroides que muestra el patrn folicular caracterstico Observe en el centro de la imagen el patrn cordonal de la capa fascicular de la corteza suprarrenal. Las clulas se ven claras con H y E debido a su contenido de lpidos. Se aprecia adems el patrn en conglomerados de la capa glomerular y la reticular Patrn en conglomerados propio de la adenohipfisis. Note que algunas clulas tienen citoplasmas muy acidfilos mientras que otras lo tienen basfilo Las glndulas paratiroides muestran un patrn en conglomerados que se caracteriza porque en condiciones normales se asocia con una gran cantidad de tejido adiposo unilocular Paratiroides humana teida con H y E. Se aprecia el patrn en conglomerados con numerosos adipocitos uniloculares Un conglomerado celular de la adenohipfisis. Note el abundante citoplasma finamente granular y acidfilo de las clulas endocrinas

La adenohipfisis es otro sitio donde se aprecia el patrn en conglomerados. Los grupos celulares suelen estar bien limitados por finos septos conjuntivos, no se encuentra grasa y normalmente las clulas se tien de colores diversos Este es el patrn folicular, caracterstico de la glndula tiroides. Note que los folculos contienen material levemente acidfilo que se conoce como coloide Patrn folicular de la glndula tiroides. Note que el tamao al corte de los folculos puede variar considerablemente

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Glndula paratiroides. Se aprecia el patrn en conglomerados y numerosos adipocitos uniloculares Con grandes aumentos podemos observar el detalle de los conglomerados celulares con elementos basfilos y acidfilos en estrecha relacin con capilares sanguneos

El pncreas es una glndula mixta en el sentido que contiene elementos exocrinos de tipo seroso coexistiendo con elementos endocrinos que corresponden a los islotes de Langerhans Corte de pncreas teido con tricrmico de Gallego que muestra en un mar de serosidad un islote de Langerhans endocrino

En este islote de Langerhans observamos patrn en conglomerados y cordonal. Note las unidades secretorias exocrinas serosas rodeando al islote Con grandes aumentos observamos la interfase entre el mundo exocrino y el mundo endocrino en el pncreas

Pncreas con tricrmico de Gallego. Se observan las numerosas unidades secretorias exocrinas de tipo seroso rodeando al islote de Langerhans donde las clulas adoptan el patrn en conglomerados

Conjuntivo comn
Clulas propias e inmigrantes
El tejido conjuntivo comn contiene vasos sanguneos abundantes, grandes cantidades de sustancia intercelular forme y amorfa y una gran variedad de clulas que se pueden dividir en dos grupos: a) clulas propias y b) clulas inmigrantes. Estas ltimas NO son clulas conjuntivas, pero normalmente se encuentran en los tejidos conjuntivos Este corte muestra tejido conjuntivo laxo. Note la presencia de un capilar dilatado en el centro de la imagen, en el que se aprecian las clulas endoteliales. A los lados se encuentran tanto clulas propias (fibroblastos) como clulas inmigrantes (macrfagos y clulas cebadas) Corte de tejido conjuntivo laxo mostrando los capilares y las clulas propias e inmigrantes del mismo El microscopio electrnico de transmisin nos muestra el aspecto de un fibroblasto con cisternas de retculo endoplsmico rugoso. Note las fibras de colgena asociadas al citoplasma del fibroblasto En la prctica, los fibroblastos no son clulas que se identifiquen fcilmente. Su forma es alargada con ncleos centrales igualmente alargados que suelen tener extremos aguzados; el citoplasma es basfilo. En esta imagen se observan varios fibroblastos rodeados de sustancia intercelular Las clulas cebadas pertenecen al tejido linfohematopoytico; sin embargo, en condiciones normales se les encuentra en los tejidos conjuntivos laxos en estrecha relacin con vasos de microcirculacin. En esta imagen vemos una clula cebada en mdula sea Micrografa electrnica de transmisin que muestra un fibroblasto en estrecha relacin con fibras de colgena En este caso el citoplasma del fibroblasto muestra por medio del microscopio electrnico de transmisin, una gran cantidad de cisternas de retculo endoplsmico rugoso

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Con grandes aumentos se aprecia el detalle de los grnulos metacromticos de una clula cebada Corte de tejido conjuntivo laxo teido con tcnica modificada de PAS. En la derecha se observa un vaso sanguneo, en el centro una clula cebada y en el resto del campo abundantes fibras de colgena Las clulas cianfilas de Ramn y Cajal, conocidas como clulas plasmticas o plasmocitos, derivan de una variedad de linfocitos y se encargan de la produccin de molculas de defensa que conocemos como anticuerpos. Note el citoplasma basfilo y la imagen negativa de Golgi. Mdula sea El microscopio electrnico de transmisin permite apreciar en el citoplasma de las clulas plasmticas, grandes cantidades de cisternas de retculo endoplsmico rugoso que explican su intensa basofilia Este corte muestra la lmina propia del intestino delgado. Note la gran cantidad de clulas plasmticas en esta variante de tejido conjuntivo laxo Esta es una clula gigante de reaccin a cuerpo extrao tipo Langhans. Es resultado de la fusin de numerosos macrfagos

El microscopio electrnico de barrido nos muestra el detalle de los fagosomas en este macrfago Observe la extensin de este enorme macrfago en mdula sea. Note que el citoplasma muestra un aspecto que se conoce como espumoso. Estas burbujitas corresponden a numerosos fagosomas Los macrfagos son clulas muy grandes. Calcule usted 7 micrmetros por dimetro de eritrocito y despus calcule cuntos eritrocitos caben en este macrfago: casi 5!, lo que representa un dimetro de 35 micrmetros. Este es un frotis de mdula sea Los macrfagos son otro ejemplo de clula inmigrante del tejido conjuntivo que corresponden al tejido linfohematopoytico. Aqu observamos un corte de ganglio linftico traqueal en con depsitos de carbn (antracosis) Los macrfagos emiten enormes prolongaciones citoplsmicas, como si buscaran a quin comerse. El microscopio electrnico de barrido nos muestra en forma espectacular este detalle morfofuncional

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Sustancias intercelulares
Corte de piel humana teida con tricrmico de Gallego. Note la estrecha relacin entre el epitelio y el tejido conjuntivo subyacente. Observe que las clulas en el conjuntivo se encuentran separadas por abundante sustancia intercelular En esta imagen es mucho ms aparente la diferencia entre la dermis papilar (tejido conjuntivo laxo) y la dermis reticular (tejido conjuntivo denso) Hacia la izquierda se aprecia la epidermis (epitelio plano estratificado con estrato crneo), hacia la derecha, en primer trmino, la dermis papilar (tejido conjuntivo laxo) y enseguida la dermis reticular (tejido conjuntivo denso) Dermis papilar (tejido conjuntivo laxo). Observe las clulas fusiformes que corresponden a fibroblastos y la gran cantidad de colgena que forma fibras finas

En la dermis reticular (tejido conjuntivo denso) las clulas son ms escasas, hay mucho menos capilares y las fibras de colgena son mucho ms gruesas Las fibras elsticas tienen una distribucin amplia en el organismo. Un buen sitio para observarlas es la pared de la aorta, aqu teida con la tcnica de Reyes-Gallego, que muestra las fibras elsticas en rojo Tendn teido con tricrmico de Gallego. Las gruesas fibras de colgena en color verde. Los ncleos de los fibrocitos en rojo El aspecto de las fibras de colgena con microscopio electrnico de transmisin es muy caracterstico. Observe el bandeo transversal

Membranas basales en rin demostradas con metenamina de plata. Estas importantes estructuras de matriz extracelular contienen colgena tipo IV y V En los tendones, casi no se identifican las clulas fibroblsticas inactivas que se conocen como fibrocitos. Lo que predomina en este corte teido con tricrmico de Masson, son las fibras gruesas de colgena distribuidas regularmente Aqu se observa la unin mio-tendinosa teida con tricrmico de Gallego. En este campo se identifica tejido conjuntivo laxo y tejido conjuntivo denso Fibras de colgena con microscopio electrnico de transmisin. El detalle del bandeo transversal es muy claro en esta imagen Una variedad de colgena (colgena tipo III) se caracteriza entre otras cosas por ser intensamente argirfila. En histologa clsica se habla de fibras reticulares. Aqu se demuestran con la tcnica de Wilder Corte de hgado con impregnacin metlica clsica que muestra el aspecto de las fibras reticulares Corte de hgado de cerdo. Con bajos aumentos, la distribucin de las fibras reticulares permite delimitar lo que los histlogos llamaron: lobulillo clsico El rin tiene tal cantidad de fibras reticulares rodeando a los conductos urinferos, que la arquitectura normal queda completamente cubierta Las colgenas tipos IV y V forman parte esencial de las membranas basales, que aqu se demuestran con metenamina de plata en un corte de rin Con grandes aumentos es ms claro el arreglo ondulatorio de las fibras elsticas de la pared de la aorta. Tincin de Verhoeff

El microscopio electrnico de barrido nos da una imagen impresionante de las fibras de colgena

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Con grandes aumentos notamos que estas fibras forman redes pequeas, de donde proviene su nombre de fibras reticulares. Hgado contrastado con Wilder Doble impregnacin de Po del Ro Hortega. El detalle de las fibras reticulares en este corte de hgado es impresionante En cortes delgados, la distribucin caracterstica de las fibras reticulares no es tan clara como en los cortes gruesos. Hgado con Wilder Los rganos endocrinos tienen grandes cantidades de fibras reticulares, como se aprecia en este corte de adenohipfisis contrastado con Wilder Corte de pared de aorta contrastada con la tcnica de Verhoeff. En este caso las fibras elsticas se aprecian de color negro

Otro buen sitio para observar las fibras elsticas es el ligamento amarillo. Aqu se aprecia el detalle de las fibras en corte transversal Fibras elsticas del ligamento amarillo en corte longitudinal

Detalle con grandes aumentos de las fibras elsticas en un ligamento amarillo Tejido conjuntivo laxo de tipo mesenquimal teido con tricrmico de Masson. Se observan numerosos fibroblastos y fibras colgenas finas

Tejido adiposo
Dibujo semiesquemtico que muestra el aspecto ultraestructural de un adipocito unilocular. Note que la mayor parte del citoplasma se encuentra ocupada por una gran gota de grasa Corte de tejido adiposo unilocular teido con H y E. La grasa se perdi durante el procesamiento histolgico, por lo que quedan huecos blancos En esta imagen observamos tejido adiposo multilocular cercano a un rin de cobayo Cuando realizamos cortes por congelacin, la grasa queda en la seccin, por lo que podemos teirla especficamente. En este caso se us tetraxido de osmio Con grandes aumentos apreciamos el detalle de los adipocitos uniloculares teidos con osmio en un corte por congelacin Conforme aumentamos ms la imagen, podemos apreciar que la grasa unilocular coexiste con la multilocular Cada uno de los adipocitos multiloculares tiene su citoplasma lleno de numerosas gotitas de grasa Con grandes aumentos se aprecia el detalle del citoplasma de los adipocitos multiloculares

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En este campo observamos exclusivamente adipocitos multiloculares En este campo, observamos la coexistencia de adipocitos uniloculares con adipocitos multiloculares