Manual Técnico Da Microbiologia para Lodos Ativados - Cetesb

NORMA TCNICA
L1.025
Dez/1985 43 PGINAS
Manual tcnico da microbiologia para sistemas de lodos ativados operando com esgotos domsticos
Companhia Ambiental do Estado de So Paulo Avenida Professor Frederico Hermann Jr., 345 Alto de Pinheiros CEP 05459-900 So Paulo SP Tel.: (11) 3133 3000 Fax.: (11) 3133 3402 http: // W W W . c e t e s b . s p . g o v . b r
MICROBIOLOGIA OPERANDO
PARA COM HANUAL
SISTEMAS ESGOTOS
DE LODOS DOM~STICOS
ATIVADOS
LI-025
DEZ/85
- TCNICO
1. Introduo 1.1. 1.2. 1.3. Nutrio Respirao Crescimento Bacteriano no Processo Microrganismos de Lodos Ativados de Lodos Ativados
2. Microrganismos 2.1. Principais Bacterias Fungos Microfauna
do Proceso
2.1.1. 2.1.2. 2.1.3.
3. Metodologia 3.1. 3.2. 3.3. 3.4. Coleta
de Trabalho e Preservao de Amostras
Calibrao Tcnica Aplicao
do Microscpio em Cmara de Contagem Sedgwick - Rafter - S.R. em Cima
de Contagens da Tecnica para
de Microfauna Ativados.
ra de S.R., 3.5. Tcnica
Amostras
de Lodos
de Contagem
e Medida
de Filamentos
e Flocos
Anexo
2 - Esquemas tes
dos
Organismos Ativados.
da Microfauna
Mais
Freque~ 30
em Lodos
MANUAL
TCNICO ATIVADOS
DA
MICROBIOLOGIA COM
PARA ESGOTOS
SISTEMAS DOMSTICOS
DE
LODOS
OPERANDO
1. Os
INTRODUO rios possuem capacidade biologica dos despejos auto depuradora, realizada da matria atravs organi
da estabilizao ca proveniente O mecanismo rias, tos
(biodegradao) neles lanados.
envolvido
na biodegradao, celular das Na que promove
realizada oxidao complexas
por dos
bact compo~
a respiraao com
orgnicos mais
quebra
molculas
em molculas como ace~ o
menores, tor dos
estveis.
respirao, na quebra com
utilizado, da matria
eltrons
liberados na
orgnica, produo Essa
oxignio e dioxido armazenada fosfato) No caso
dissolvido de carbono
agua,
consequente de energia. de ATP reaes
de gua e tri-
e liberao sob
energia
pelas e usada
clulas
a forma nas de
(adenosina celulares. "in natura"
posteriormente contnuo ocorrer
de lanamento pode
despejos
num dis organi
corpo
receptor, como
o esgotamento da estabilizao Com isso,
do oxignio da matria ocorre morte uso
solvido, ca,
consequncia
criando dos
condies organismos o corpo
anaerobias. aquticos receptor potvel
o desapar~ dos como peixes fonte
cimento etc,
originais, invivel e como para
tornando
de abastecimento h interesse em que
de gua
recreaao. como sanitria a ponto
Portanto, e de so atin o trata d'gua. repr~ que oco~ de
tanto os
de ordem no
ecnomica, afetem pode
cial, gir
despejos
o mesmo ser
condies dos
anaerobias. antes
Isso de
conseguido nos
com
mento
despejos
seu
lanamento despejos
corpos
O tratamento duzindo
biolgico
:aerado
dos
realizado
artificialmente que passara
o mecanismo a funcionar ambiente. de um
de biodegradao apenas como
re no rio, despejos Um dos
dispersor
tratados, processos lodos com
no meio mais
utilizados que
tratamento processo que
biologico fermentativo
ae ae num
rado robio
o de
ativados, reciclo
contnuo
de biomassa,
se constitui
inoculo
permanente
e aclimatado.
abordados . resp~raao
a segu~r,
sucintamente, alguns . b . 1,2 e cresc~mento acter~ano ,
aspectos
de nutrio,
Os do
seres com
vivos
classificam-se e fonte
em
dois
grandes utilizada utilizam
grupos para
de
acor e or org~
o substrato Os
de energ~a no
a vida
crescimentoo
seres
autotrficos
compostos
nicos nosa
a partir de CO2 e H 0, 2 (fotos sntese) ou de Os organismos como dos fonte heterotrficos primria necessitam sendo, de
lumi
miossntese). postos to,
com
orgnicos
de energia para
portan de
dependentes
organismos
autotrficos
obteno
alimento. ~ apresentado vivos, segundo a seguir a forma um esquema de de classificao alimento. dos
de obteno
Seres
Autotrficos inorganicos~ CO 2
Fotossintetizantes: plantas, algas, al (energia luminosa) guns protozorios e bactrias. Quimiossintetizantes: bactrias (energia qumica)
(compostos e H 0)
2
Seres
Heterotrficos
.Holozicos: protozorios,seres superi~

res (predao de seres vivos)
.Saprbicos
(utilizaoo de matria orgnica morta)
(matria orgnica particula da) -
seres superi~ res, etc.
saprofticoS{ bactrias, (matria or gnica diSsolvida) -
fungos, etc.
As bactrias totrficos
e os protozorios como heterotrficos.
podem
ser,
portanto,
tanto
au
1.Z. RESPIRAO
A respirao para Esse
o processo
vitais, se realiza srie de
pelo a partir atravs
qual de de um ciclo bioqumico O ciclo se que ~n~ enz~ do
as reaes processo uma
envolve c~a mas com
reaes
de oxi-reduo. do
a desidrogenao
da molcula retirado
substrato
pelas ao de fim
celulares.
O hidrognio final
transferido que no caso com
ciclo, mos
ao aceptor
de hidrognio A energia sob a forma
organi~
aerbios,
o oxignio.
liberada de
a oxidao qumicas
do substrato, de alta
armazenada para uso
ligaes clula. A
energia, ligaes em que
posterior
pela
formao ox~ conver composto
dessas dativa, tida em
o processo a coenzima
conhecido
como
fosforilao (ADP) e
adenosina-difosfato (ATP), sendo
adenosina-trifosfato
o ATP
O processo te descrito: lculas cido Quando clise), rendimento Nas reaes
respiratrio degradao piruvico
completo de uma
pode molcula
ser
assim,
sucintamen a duas ou ciclo (6 ATP). ( gli um mo de
de glicose de Krebs
de cido
(Z ATP);
ciclo
tricarboxlico o processo entao
(30 ATP) incompleto,
e cadeia na
respiratriw
ausencia
de oxignio apresentando
o processo
dito
anaerbio,
de apenas celulares
Z ATP. que requerem novamente energ~a, em ADP, o ATP perde um ass~m
fosfato, uma
transformando-se fosfrica aerbias,
liberando
ligao
altamente
energtica. o oxignio como aceptor geral de
As bactrias final
que-.utilizam apresentam
de hidrognio,
a seguinte
equao
respiraao: energia
/.
Existem utilizam
bactrias a energia os
que, de
ao
invs de
de decompor compostos celulares
matria
organica, para de COZo
ligao
inorgnicos a partir de obter chamado
sintetizar so
compostos
orgnicos
denominadas de
autotrficas, qumicas
e o processo inorganicas,
energia quimio~
a partir
ligaes
sIntese. vados, trito,
Como temos segundo
exemplo
dessas
bact~rias, que
presentes
em
lodos ou o
ati ni
as nitrificantes, as equaes
utilizam
a amnia
a seguir:
energ~a
energ~a
Os microrganismos curva de 3 ra I .
em
cultura descrita
pura, por
se desenvolvem Monod
segundo na
a fig~
crescimento
e representada
I
J
2
~
J'
o 'o ~
gl =f
t!1 ~I :J I ~I I ~I
I I ,~I
g
I
...,
)(
O Ao
~...,
~~
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... ~
~j
~i
~ ~
!li Lt; --
ai ul
ClI
~I I ..."
u
i u -3
o ..J
c:
~t
1M' ~
Tempo
AG.1.
CURVA DE CRESCIMENTO
DE MICRORGANiSMos EM CLl.TURA
PURA
E DESCONTINUA
Embora ras sua
a curva para
de
crescimento de
tenha lodos
sido
descrita (culturas
para
cultu
puras,
sistema e bastante
ativados
mistas)
utilizao curva, no ha
frequente. de aclimatao ocorre fase de uma dos fase de microrganismos, acelerao exponencial de crescimento fator que fase de com di li se en e
Nessa em que
aps
a fase
crescimento, pela
crescimento, intenso minui mitante iguale dgena, a celula ma para na
seguida de de
crescimento
consumo fase (por
substrato.
A velocidade
retardo
devido
ausencia
oxigenio,
de algum etc), ate Na
exemplo,
substrato, de morte de morte reservas num
velocidade
a velocidade consome as
(fase
estacionria). que a de
e maior
crescimento, protopla~
armazenadas processo de
no proprio autoxidao. biolgica a ser
a sobrevivncia, de de lodos
No processo no tanque
ativados, alimentado
a depurao com
ocorre tratado ao meio l
aerao O lodo
o despejo
(afluente). quido. mista mente sistema Essa Em
biolgico parte, agregadas o nome
encontra-se o lodo sob
misturado por uma
sua
maior
e formado a forma de
populao biologic~ do 24. s~n ex ou na
de bacterias ativos, de
flocos Um na
de onde
lodos
ativados. e mostrado no est em
esquema figura
lodos
ativados
completo
populao
mista que
de bacterias uma parte das
crescimento esta na fase
cronizado, ponencial tra parte fase
sendo de na
bactrias
crescimento fase
(portanto
de renovao terceira
celular), parte ainda
estacionaria,
e uma
endgena. das condi~es maior fase de operaao de bacterias do na sistema, fase e possvel
Dependendo manter uma
parcela da
endgena. principal havendo para trat~
A importncia mente
endogena
no processo, devido lodo
deve-se
a diminuio menor
da biomassa de
autooxidao,
descartado da biomassa para
portanto mento
quantidade (digesto) lodo
a ser
posterior do ser
e tendncia
flocular. que a bio ao
A floculao massa possa
importante
no processo, tratado
separada
do efluente
e retornada
REDE
COLETORA
LINHA DE PRODUCo
EFLUENTE TRATAP;4ENTO TERCIARIO
CORPO RECEPTOR(rios, por elt.)
.TRATAMENTO PRIMRIO
DESCARTE DE DIGESTAO OU OUTRO LODO PROCESSO
I ..
aqutico, mesmos processo
os organismos
presentes
no
sao, doces.
necessariamente,os Isto porque o
de ambientes apresenta
naturais
de guas
caractersticas
especficas,
corno turbuln
Verifica-se sos, po~s
que
apenas
microfauna no permite
encontrada
nesses
proce~ de org~ devido
a turbulncia As algas
o desenvolvimento a se desenvolvem,
nismos
maiores.
tampouco
bactrias as vezes, probicos
entre fungos
elas
as
filamentosas
formando so
a biomassa organismos
e, sa
e leveduras. primrios sua no mas
As bactrias que degradam
consumidores
a matria As
orgnl fi de
ca do despejo, lamentasas, gradam lado
promovendo
estabilizao~ floco seu na
bactrias tambm
presentes
tanto
corno livres, deve do
a materia pode
orgnica, causar
crecimento decantao so
pois
problemas
ser contro 10d06. tanto
Corno representantes tozorios, A presena mento simples
da microfauna,
encontrados
corno micrometazorios. de microfauna um de indcio importante de funciona-
do processo,
e, sendo
identificao utilizada
relati~am~nte corno indicador em g~ o de es
ao observador
experiente,
biolgico. ral, que mais
A identificao lento e oneroso, utilizao simples,
de bactrias em relao
e um processo a de protozorios,
dificulta devem de
sua ser
corno indicadoras. para poderem ser
Os metodos utilizados nas
anlise taes
tratamento. qualitativa h anos e quantitativa no controle da microfauna, de ainda probl~ dos fato, fixam e dados
A observao sendo
realizada embora,
de processos de diagnstico,
ativados ja pouco mas
corno instrumento po~s, de
desenvolvida
na prtica e de das
se apresentam
de amostragem, devido
contagem
aproveitamento interaes. primrias) em qualidade De
obtidos, pulaes substrato
complexidade
de bactrias complexo, e~
(decompositoras geral varivel
dade. na s~ de
A partir
desses
organismos
decompositores, sujeitos de
v~ve
uma
fau
consumidores
primrios As
tambem
predao
entre de
(protozoarios). so muito
interaoes
tanto 7. na
competiao
como
predao, Outro copio,
diversificadas a considerar da concentrao quase
fator
importante
observao
ao
m~cros fila nos nao lodos pode de de
e a avaliao Estes porem alem
de microrganismos sempre presentes aos ocorram flocos,
mentosos. ativados, aumentar cantaao, O aspecto da seguinte
encontram-se sua quantidade ponto,
relativa sem que
de certo
problemas
6 como j referido, devido ao intumescimento filamentoso do 10d: . do lodo forma: que desses ao microscopio, as bacterias congregam fixam-se em geral pode ser descrito flocos Na
se agregam bacterias
formando filamentosas.
biolgicos, superfcie ciliados vem
tambem
flocos,
os protozorios H protozorios
ses~eis, que vi
pedunculados ligao sempre ligados
ou peritriquias. com os flocos, a eles,
em estreita
alimentando-se porem sem estar
destes fisica te nos l do Os loco
e mantendo-se mente mos os a eles
em
torno
(ciliados
hipotriquias). que se movem
Finalmente, livremente estes
ciliados entre podendo como no os
livre-natantes, flocos, os
espaos timos floco,
flagelados
e as amebas, tanto na
estar espao
preferencialmente entre eles,
superfcie
dependendo vermes) os
da especie. tambem se
micrometazoarios movem
(rotferos
e pequenos espao todas as entre
preferenc~almente precisa
no de num
flocos
8,9
e dif
A determinao cil de ser
especies de
presentes,
realizada
trabalho
controle,
utiliza-se,po~ arranjadas em
tanto, classes
contagens ou grandes
simplificadas grupos. presente
de microfauna
A natureza o tempo funo fletido
da fauna
e funo do lodo nvel
da no
idade reator.
do
lodo,
que
e e r~
mediode tambem pelas com da
permanencia saprobicidade, que
Alem
disso,
de qualidade a comunidade
da gua
especies a materia
constituem
presente, em
de acordo
orgnica
biodegradavel
expressa
DBO ' Assim, uma determinada comunidade S saprobico que prevalece em determinado po Nos necessario tratamentos o meio ao seu desenvolvimentoo de despejos, de aerao
e indicadora ambiente
do nvel o tem
durante
aerados no
como pode
o processo variar,
de
lodos a
ativados,
tanque
segundo
saprobicidade de depurao probica, dia vel em torno de
de oligosaprobica (com 5 condies DB0 media em torno de
condies de 2,5
excelentes a polis~ DB0 5 de me n sao (DB0

10
mg/l),
(com
inferiores As
depurao
de 50 mg/l). de
condies que podem
intermedirias se apresentar e a-mesosaprobica aera d'os
qualidade
efluente media
B-mesosaprbica media
sao
(DB05 de
de 5 mg/l) As condies
em
torno
10 mg/l). em
B a a-mesosaprobicas, de despejos
. as ma~s
f requentes
tratamentos
As ou
espcies
reagem
aos
fatores
de
seleo
do me~o de
( sua
trficos prpria de dif indica portan instala
fsico-qumicos),
capacidade. todos ce~s dor to,
individualmente, da microfauna e de sofrer em
atravs a ao condies
fato
simultnea de vida um
os parmetros que restringem
subsistir de
o numero
espcies,
torna-a
extremamente do conjunto uma

-.
sensvel.
A microfauna de
e indicadora, das
de parmetros que sua

11
funcionamento com
oes,
.
vez
natureza
varia
o nvel
de depurao, de substn
a concentraao c~as tox~cas,
de oxignio
etc ....
dissolvido,
a presena
co, anlises traes
pretende-se de lodo
est~belecer ao microscopio;
urna
sistemtica entre dos de as
de concen
relaes
relativas
da microfauna
e o desempenho medio
processos; filamentos, do
e determinar com o objetivo
concentrao de controlar
e comprimento
o intumescimento
filamentoso
lodo.
As
bactrias de
unicelulares ramigera, pela
mais
frequentes por
nos
lodos
ativados, corno a generos
alem nica
Zoogloea
considerada
muito aos
tempo
responsvel
floculao,
pertencem
Achromobacterium, monas. so
Chromobacterium
(Flavobacterium com ao
) e
Pseudo-
bastonetes forma massas
gram-negativos, gelatinosas,
proteoltica. ao microsc
A Zoogloea pio pelas
reonhecveis
estruturas
dendrticas. filamentosas, Sphaerotilus natans e a
Dentre
as bacterias
de bainha mente rias os que
e ramificao septos podem celulares estar
falsa. no
so so
filamentos visveis. H
finos outras
gera! bact
presentes alem de
no processo filamentos
como ainda nao
Triotrix, identifi
Beggiatoa, cados. Um super
e Nocardia,
crescimento do lodo,
de bactrias causando do um
filamentosas estado Por conhecido
dificulta como
a intu um
decantao mescimento controle ao
filamentoso constante da
lodo.
isso, de
necessrio como para
concentrao se no
filamentos a tempo,
preve~ levar
de um problema de slidos em
que,
cuidado pelo
perda
suspenso
efluente.
Os fungos
nao
sao
muito
frequentes so
em
lodos
ativados (Fungos
e,
qua~
do presentes, tos). Com maior trichum. sveis
em geral
Deuteromicetos
Imperfei
frequricia Quando
sao
encontradas
especies
do genero so
Geo pa~
se desenvolvem intumescimento se verifique
em excesso do queda lodo.
tambem Podem
de provocar em que
predominar
em processo
de pH
acentuada.
so ros,
frequentemente que podem ser
encontrados agrupados de
organlsmos acordo com
de
diversos 1
a Tabela
GRANDES Classe
a.
GRUPOS Ciliata livre natantes
GfNEROS
FREQUENTES
ciliados
Pararneciurn, Litonotus, Arnphileptus,
Colpidiurn, Trachelophyllurn, Chilodonella Opercularia, Charchesiurn Acineta e e
b ciliados
pedunculados
Vorticella, Epistylis, as suctrias
Podophrya c. ciliados do floco livres predadores Aspidisca, Stylonychia, Euplotes, Oxytricha,
Classe
Hastigophora
Bodo,
Cercobodo, sp,
Mona ---
sp, sp,
flagelados
Oicornona
Euglena Peranerna
Ce r,cornona sp, Classe arnebas Sarcodina Arnoeba, phrys,
Arcella, Vahlkarnpfi,
ActinoAstraCochlio
rnoeba, Difflugia, podiurn. Classe Rotfera Philodina, phanes Rhabditis Rotaria,
Epi-
rotferos Classe Nernatoda
nernatides Filo Anelida Aelosorna
an,eldeos
Como
no
e possvel de
contar so
todos
os organlsmos
de uma
amostra, de
os metodos grandeza contados
contagem
estatsticos do nmero cuidado na
e sujeitos de campos
a erros ou
variavel,
dependendo e do
faixas
ao microscpio,
execuo
da analise.
A amostra luda
coletada com
no
tanque
de
aerao, de
prximo em nos
sada,
suspensao protozoarios
di e
de acordo
a concentrao para evitar
slidos
analisada por Na
rapidamente,
alteraes
ausncia coleta,
de oxignio. pode-se usar frasco de polietileno, polipropileno
ou vidro,
cheio
ate
a metade. entre a coleta (ate de No da amostra hora), e a contagem, ul
intervalo ser
de tempo o menor 2 horas. so
devera
possvel O volume
meia
evitando-se e
trapassar 5 a 10 m{ amostra,
amostra
necessrio haver seja
pequeno, da
suficientes. que o resultado
e possvel
preservao
sem
da analise
significativamen-
te alterado.
3.2. Para
CALIBRAO que
DO MICROSCOPIO de organismos possa ser realizada,
a contagem a calibrao utiliza-se
damental Para
do microscpio. um retculo na num iguais, em ocular disco (ou ocular regulavel de vidro que um micrometrica) do microscpio. de Es
tanto
Whipple,
que
e colocado e traado
te retculo te em trais 100
e dividido dos
precisame~ cen do
quadrados
sendo
quadrados Na calibrao da
subdividido de Whipple delimita, em escala
25 quadrados
menores. mede
retculo que ele
verifica-se colocando-se
quanto
a area
imagem uma em
na platina de 1 mm
do microscpio em 10 ou
lmina 100 ~m;
micrometrica a imagem diviso vezes. do
subdividido
superpondo-se mede de 100 cada
da escala retculoo
ao retculo, O aumento
observautilizado
se quanto deve ser
a 200
3.3.
T~CNICA
DE
CONTAGEM
EM
CMARA
DE
SEDGWICK-RAFTER-S.R.7,12.
de protozorios menses de SOmm maior
e filamentos. x 20mm. que No
Tem pode
capacidade ser utilizada da
de
1,0 com
mi, com di
objetivas Para au
de aumento mentos
16 vezes,
sem
quebra
lamnula.
maiores, na
existem
objetivas
apropriadas. de completar uma pipeta que o volume e o ar da
esquema com
figura
3, mostra lquida, um lado da na
o modo
camara zindo sair mentar
a amostra por
utilizando cmara camara, da de
introdu possa
a amostra pelo outro.
forma ser
A amostra, antes do
deve
deixada
S minutos
incio
contagem.
FIG.3-
CMARA DE CONTAGEM DE SED. GWIQ(- RAFTER ,MOSTRANDO A MANE IRA DE COlOCAR A AMOS-
TRA
A contagem corresponde do a faixa largura
pode
ser
efetuada do retculo
por
campos,
sendo
que
cada faixas,
campo ten e a
rea
50 mm
de Whipple, por 1 mm
ou por
de comprimento de Whipple.
de profundidade
do retculo
plfurujdqlvprv pdlv prv fdpsrv
,32 rx pdov dohdwulrv.
sru
fdpsrv-0 gd
vlr
frqwdgrv gh
32
rx
ghshqghqgr Pv
frqfhqwudlr vlr hvfroklgrv
rujdql gh prgr sru idhq r id
h gd suhflvlr
ghvhmdgd0 gdv rewlgr
fdpsrv
d glvwduhp plololwur gr/vh wru gh
7 d 9 pp srgh vhu
erugdv0
P uhvxowdgr grv fdpsrv
hp rujdqlvprv frqwdgrv. vh rewhp
d sduwlu
r fdofxor fruuhr
shod
vhjxlqwh
iupxod.
gh rqgh
surixqglgdgh gh xp fdpsr ,surixqglgdgh Sdiwhu. hp phgld 3 pp-. pp
TbP fpdud
gh
Thgjzlfn/
P ydoru
rewlgr
qd
iupxod idwru gh
dflpd
dlqgd rx
ghyh
vhu
dmxvwdgr shor
pxowl idwru
solfdqgr/vh
shor
gloxllr.
glylglqgr/vh
gh frqfhqwudr0 B frqwdjhp furujdqlvprv P qphur pxod sru idl{dv
hihwxdgd
txdqgr
d frqfhqwudlr
gh
po
h edl{d0 sru plololwur
gh rujdqlvprv
o rewlgr
d sduwlu
gd
iu
dedl{r0
frpsulphqwr
gh
fdgd pp xpd pp
idl{d
,frpsulphqwr
gd fdpdud
Thgjzlfn/Sdiwhu-. surixqglgdgh gh
idl{d
,surixqglgdgh
gd
fdpdud
T h gjzfn/Sdi wh u-. odujxud Zklssoh-. T qphur gh gh xpd pp idl{dv
idl{d
,odujxud
gd
opdjhp
gr uhwfxor
frqwdgdv
o valor
luio Para
obtido ou
na
formula pela
deve
ser
ainda
multiplicado
pela
di
dividido
concentrao resultados condies:
da amostra. obtidos recomendvel a
melhor
qualidade das
nos
utilizao 1. Uso
seguintes microscopio
do mesmo
e do mesmo de mesma
aumento
para
todas
as
contagens 2. Definir gem,
de uma para
amostra
origem; de amostras a serem de mesma contados; o tipo de amos va 2 orl
todas de faixa
as contagens ou campos
o nmero uma
faixas de
3. Definir tra rlar para
diluio
adequada que
para se for
analisada. a diluio concentrar
Sugere-se, definida, ou diluir 1: 10 1: 5 1:20 ser bem
tambm, isto por
necessrio fator de
seja
feito
por
exemplo
diluio diluio diluio 4. A amostra alquota
definida mnima mxima deve para
homogeneizada e para anlise.
antes
de
se retirar
diluio
3.4.
APLICAAO DE S.R~,
DA TCNICA PARA AMOSTRAS
DE
CONTAGEM DE LODOS
DE MICROFAUNA ATIVADOS7,12
EM
CMARA
As
anlises
podem
ser
de
dois
tipos:
qualitativas qualitativa, anotar de outros que
e quantitaobservandodos flo
tivas.
Deve-se em
iniciar
pela
anlise
se a amostra cos, presena
lmina/lamnula, livres Somente
para ou
o estado
de bactrias etc.
elementos,ide~ se proceder
tificar contagem
os organismos dos organismos,
apos,
se desejado.
Os
organismos
so
contados
em um numero rea
pr-determinado e ento, o numero por ml,
de atra observa
campos ves
de microscopio srie de
ou outra fatores um numero em
conhecida
de uma
multiplicativos, ou quantidade
do projetado etc., conforme
para
descrito
3.3.
rem,
em geral,
a concentrao sem diluio.
de
salidos
sua
realizao
Filamentos, tadas Na como
colnias unidades, de campos
e outras bem como
associaes as clulas os
de clulas simples
sao
con
isoladas. que tocam as de
contagem
aleatarios, de cima ou
organismos
linhas Whipple, rias
demarcatrias devem ser ou da
da esquerda tocam ser as
do retculo linhas
contados; direita, em
os que devem
demarcata-
de baixo
ignorados. localizados de suas bordas. na
Sugere-se regio Ver
a contagem da
10 campos a cerca
aleatarios, de 6 a 7 mm
central 4.
cmara
figura
'///
/////,
-; T - - ~;'A -~~ -l~ =
---t
~
CONTAGEM __ 1________ .JI __
DE
FIG. 4 - CONTAGEM NA CMARA SEDGWICK- RAFTER
POR
CAMPOS
Quando mento
a contagem total da
e realizada (dimenso linhas figura
por
faixas
utiliza-se A contagem no
o pode da
compri ser fa
cmara
maior).
cilitada, ra, como
marcando-se mostrado na
de 5.
referncia
fundo
,
I I I I I I I I I I I I I I I
l
I
I
.
~
I I
I
I
I I
I
" FIG.~- CONTAGEM NA CAMARA

SEDGWICK - RAFTER FAIXAS ,
DE
POR
o nGmero
la relao xas
de organismos entre
encontrados total da
nas
faixas,
multiplicado das por
p~ fai
a largura fornece
cmara
e a largura
analisadas,
a concentrao
de organismos
ml.
3.5.
TCNICA
DE CONTAGEM de medida tanque de
E MEDIDA filamentos
DE FILAMENTOS e flocos 1/500 bequer 1 minuto
E FLOCOS7,9,12 efetuada em com a agua e homoge rpm a fim de bas da
A contagem amostra do
de aerao
diluIda num
a 1/2000 de
destilada. neizada num
A diluio aparelho
e realizada jar-test
1,5 l a 100 no
durante
de reproduzir aerao to
condies ser
similares por
s existentes agitao uma manual
tanque com um
ou pode
realizada um minuto.
de vidro
durante
Tomar
alIquota
adequada
amostra (8 mm), coso
do
tanque
de
aerao calibrada,
com
uma
pipeta a no
de ponta danificar da amostra os
larga flo dilui
devidamente a mesma
de modo transferir
Usar
pipeta
para
1 m~
da para Contar rido, 10 seu 1os: 100 que tes
cmara
de contagem
de Sedgwick-Rafter. com Os reticulo flocos de Whipple so medidos afe p~
2 a 4 faixas em aumento de
ao microscpio 100 a 200 vezes.
dimetro
mximo,
e assinalados
nos
seguintes
interva 5O ma~ores segu~~ ]Jm, 50 a
O ,5 a 2 ]Jm , 2 a 1O ]J m , 1O a 25 ]J m , 25 a 5O ]J m, ]Jm, 100 800 a 200 ]Jm, 200 a 400 so ]Jm, 400 a 800 ]JID, e pelas
]Jm. Os de
filamentos tamanho:
contados
e medidos
faixas
O a 10 ]Jm, 10 a 25 a 400 ]Jm, 400 que 800
]Jm, 25 a 50 a 800 m sao e flocos ]Jm, e
a 100 que
]Jm, 100 ]Jm. Os
a 200 ]Jm, 200 filamentos As medidas de modo para no livres.
ma~ores
800
maiores de que uma
considerados so efetua de tamanho fila de
individualmente. das simultaneamente seja
filamentos o numero faixa
e comprimento de
mentos flocos. dos dos
assinalado
especifica so
Os filamentos filamentos dois
ligados
a flocos
medidos so
e conta conta meca
como como
Filamentos uma vez que
ramificados exercem
filamentos,
influncia
4. COMO
INTERPRETAR regular indicar em
AS ANLISES de analises ao operador
AO MICROSCGPIO microscpicas as tendncias de
7,12 de um lodo em de
A realizao aeraao, lodos pode
do processo
ativados da e da de
termos
da eficincia do lodo, de
remoo
de matria em ocor de sistema ou
organica, pregada rncia tras de As
sedimentao eventual
da adequao compostos
da aeraao ou
presena organicas
txicos
sobrecargas
sugerindo na
a realizao operao do
medidas forma
fsico-qumicas que seu
e mudana seja prximo breve
tal
desempenho em ponto
mantido. a sada do tanque de ae
amostras devem analises
coletadas ser
rao Para ve-se
analisadas
o mais
possvel. primeiramente, a forma, slidos tamanho dispersos). e sua dis de e
qualitativas o aspecto de dos
ou quantitativas, flocos quanto de
observar
estrutura Deve-se tribuio As figuras
(grau observar, entre de
agregao tambm,
e presena de
a presena
filamentos
os
flocos. aspectos de deve 125 do lodo encontrados ao
7 a 12 ilustram sob aumento ao lodo
exame
microscpico,
vezes. de acordo com
A microfauna os grandes
associada grupos
ser observada
anteriormente
citados.
FIG.
7 - LODO
COM
BOAS
CARCTERSTICAS LIVRES
ONDE
SE
OBSERVAM
CILIADOS (8 C
E UM CILIADO
PEDUNCULADO
6,9
dias)
FIG.
8 - LODO
COM
BOAS
CARACTERSTICAS NO
ONDE
SE
OBSERVA ESQUERDO PO. (8 C
UM MICROMETAZORIO INFERIOR E NO
CANTO DO CAM
CENTRO
6,9
dias)
FIG. 9: LODO COM BOAS CARACTERSTICAS, CILIADOS ZORIO PEDUNCULADOS (8 C COLONIAIS
ONDE SE OBSERVA E UM MICROMETA
(ROTFERO).
= 6,9 dias)
FIG. 10: LODO COM BOAS CARACTERSTICAS, VA UMA COLNIA DE CILIADOS
ONDE SE OBSE!
PEDUNCULADOS.
FIG.
12:
LODO
DISPERSO
("PINT-POINT",
Pv hvtxhpdv lghqwlilfdr Fvwxgrv
dsuhvhqwdgrv ghwdokdgd shod
qr grv
dqh{r
4 ghyhp
rujdqlvprv frp qd
xwlomdgrv hqfrqwudgrvC0 grphvwlfrv. 4. xwloldqgr Drpsohwd. 6
vhu
sdud
uhdoldgrv
DFUFTC0
hvjrwrv wdehod
fxmdv vlvwh frp vre
fdudfwhuvwlfdv pd gh orgrv
hvwr
ghvfulwdv frp uhdwruhv
dwlydgrv
gh Nlvwxud hp
sduwlphqwrv dv frqglhv wr frp
h : frpsduwlphqwrv dsuhvhqwdgdv qd
dhudgrv wdehod ghvfulwr
vhulh. xp
rshudqgr
5. prvwudp qd wdehod
frpsruwph
uhodr
d plfuridxqd.
1(
Gdl{dv grv
gh yduld42
gdv
fdudfwhuvwlfdv xwloldgrv0
sulqflsdlv
hvjrwrv
grphvwlfrv
QBSNFUSPT ERP
GBJ]B
522
882 pj
dEE-e
ECP
332 81 38
532 pj /3.m 3;2 pj1l 59 pj i.m 9.2 pj ,.m
TT
OSU
4.7
Gdl{dv dwlydgrv
) gh rshuddr
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gh
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QBSIFUSP Uhpsr Jgdgh Shprr TTWUB JWM sI Uhpshudwxud PE gh ghwhqr gr orgr gh ERP
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GBJ]B klguxolfr
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4 d 34 krudv 5 d 37 gldv :2 d ;7' 3222 72

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3: d 5 d
+l.m
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plfureldqd frp hvjrwr
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sdud
xp
orgr
dwlydgr
grpvwlfr0
HSVQP Dloldgrv Dloldgrv Slsrghv Godjhodgrv Srwihurv

4
PSEFN olyuhv shgxqfx3dgrv
EF -,. 325 324 324 324 32. 32.
HSBOEFaB d d d d d d d 32" 32" 32" 325 325 324 324
,ruj1pl-
Ohpdwlghv Bqhoghrv
Drp
uhodr dpsod txh
dr
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grv
iorfrv.
revhuyd/vh :22
xpd/idl{d gd
edv phvpd
wdqwh irupd r
gh ydulddr. rv
hqwuh
32 h 1 322 d 32C
p1iorfr. Qdud
sdud gxdv qd
ilodphqwrv
p1pw0
lqwhusuhw dv
ghvwdv
phglgdv. 70
h lpsruwdqwh
vh revhuydu
ghvfulwdv
wdehod
Shodr h dv
hqwuh
rv
wdpdqkrv gr
gh orgr0
ilodphqwrv
h iorfrv
fdudfwhuvwlfdv
Glodphqwr ,p1pw32. d 324
Gorfrv
Ddudfwhuvwlfdv
shtxhqr glphwur 72 p-
orgr glvshuvr ,"slqw/srlqw"suryyho lqwxphvfl ) phqwr gr orgr
324 d
328
shtxhqr glphwur 72 p-
'
phglr d c/judqgh gl ) phwur )J 32Hd 522 p328 d 32C shtxhqr d phglr gl . phwur ) I. 322 p g judqgh glphwur
) J 372 pJ
orgr hp erdv frqgl ) ) rhv0
pxlwr suryyho lqwx ) phvflphqwr gr orgr0
suryyho lqwxphvfl phqwr gr orgr lqwxphvflphqwr orgr gr
32C
Ehqwuh udqgr gdv
rv plfurujdqlvprv frp hvjrwrv
hqfrqwudgrv dojxpdv gh
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dwlydgrv vr
rs
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lqglfdgrudv B wdehod
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vlvwhpd
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2" d vhjxlu gh surfhvvr
lqglfd d hohv
rv plfurujdqlvprv dvvrfldgdv0
fdudfwhuvwlfdv
Nlfurujdqlvprv uddr
lqglfdgruhv
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gh
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/ 34
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gh
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gh rshudr
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gh
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gh
floldgrv
h olyuhv
gh Bufhood frp whfd -
gh Bvslglvfd ,floldgr olyuh-
gh o)uddkhorsk~ooxp olyuhgh Wruwlfhood ,floldgr h edl{d gh s frq
dowll
floldgrv
gh dqhoghrv
h{fhvvr vroylgr
gh r{ljqlr
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Bhorvrpd gh ilodphq/
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gr
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dwlydgrv
vh
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ghshqghqgr gd
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gr hvjrwr vlvwhpd.
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gd
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gr
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gd
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gh r{ljqlr flwdgrv srghp
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rv ydoruhv fdvr0
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,42D.
7 gldv-
,
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.*)
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, pdv
rv
; uhtxhqwhv
ghvhqkrv grv surwrrulrv hp b' rgrv dwyd Srv C-25 rv juxsrv fodvvh fodvvh Dloldwd.
h pfurph
Or txh txh grv
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Tdufrglqd .
fruuhvsrqgh frpshhqgh olyuhv
h whfdphedvA fodvvh
Ndvwljrskrud frp rv
iodjhodgrvA
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h floldgrv
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B fodvvh sulqflsdlv h r ilor Skdeglwlv ghv
Srwihud.
frpsuhhqgh Srwduld jhudophqwh
Qklorglqd. Bqholgd vr
h Fslskdqhv0 uhsuhvhqwdgrv Pv
h Bhorvrpd. vr
uhvshfwlydphqwhr phwdrulrv0 vr
urwihurv.
h dqhoghrv grv
Pv hvtxhpdv dghtxdgdv0
rujdqlvprv
dsuhvhqwdgrv
vre
3 Eliioxjld 40 Eliioxjld 50 Eliioxjld 60 Eliioxjld 70 Dhqwurs~{lv 80 Qdpskdjxv
xufhrodwd ohehv reorqjd edfloolihud dfxohdwd pxwdelolv
.
,622
,422 bKp-
. 522 bKp-
,82
. 7:2 bKp267 222 ,62
. .
382 372
bKpbKp-
. 322 bKp-
320
D~skrghuld
dpsxo3d doyhr3dwd wxehufx3dwd
,82
. 422 bKp,72 ,67
oJ0 Fxj3~skd 340 Fxj3~skd 350 Uulqhpd 360 Bufhood od0 Wlvwd
. .
322 322
bKpbKp-
olqhduh yx3jdulv Txshulru glvfrlf30hv Txshulru ghqwdwd vxshulru p~ulrsrgd
,57 bKp,52
. 322 bKp-
370 Bufhood 37d0 Wlvwd
,92
482
bKp-
380 Bufh33d 38d0 Wlvwd
,;7
bKp-
390 Ihwhursku~v
420 suldflqhwdexfnhl 430 Bflqhwd 440 Qrgrsku~d 3lpqhwlv il{d .. pdjqd
,322 **+) ,:2

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,62
82 **+)
450 Tskdhursk~d 460 Qrgrsku~d
,97 **+) ,62 **+)
pr33lv
35/
Oxf3hduld
vlps3h{ uxelfxqgxv
,52 **+) ,72 . :2 **+)
490 I~d32glvfxv 4:0 Bprhed 4;0 Bprhed 520 Bprhed
surwhxv yhuuxfrvd vwuldwd udglrvd 3lpd{
,322 . 822 **+) ,322 ,47
422 **+)
'''
67 **+)
5o0 Bprhed 540 Bprhed
,52 . 342 **+) ,72
:2 **+) ,52 . 62 **+) ,:7 **+)
550 Wdps~uh33d 560 Wdjlqlfr3d
3dwhulwld wlqfwd
580 Wruwlfh33d 590 Wruwlfh33d 5:0 Wruwlfh33d 5;0 Pshufx3duld 620 arrwkdpqlxp 6o0 Pshufx3duld 640 Fslvw~3lv 650 Ddufkhvlxp 660 Q3dw~fr3d
plfurvwrpd fdpsdqx3d dhtxl3dwd frdufwdwd duexvfx3d frdufwdwd s3lfdwl3lv sr3~slqxp ghfxpehqv
,77 **+) ,322 **+) ,72 **+) ,7P xp,6 cc, ,72 **+) ,372 **+) ,3.4 pp,;2 m*+)
670 67d0 682 690 6:0 6;0 720 73/
Uudfkh3rsk~33xJ!)00 sxvl33xp Qvhxgre3hskdulvpd Tslurvwrpxp Tslurvwrpxp Tdsurglqlxp H3dxfrpd Q3djlrs~3d Bflqhuld whuhv pqxv sxwulqxp fudvvxp ,722 ,;22
,62 / 72 ,422 bK pOL0c,
bKp-
bKp-
,57 ,72 ,347
. 62 bKpbKp-
vflqwl33dqv qdvxwd lqfxuydwd
bKpbKp-
,342
750 762 770 780 790 7:0 7;0
P{~wulfkld Tw~32qlfkld Fxs32whv Bvslglvfd Qdudphflxp Qdudphflxp Qdudphflxp
id33d{ p~wl3xv
,372
bKpbKp-
,372 ,33: ,54
sdwh33d frvwdwd dxuh3ld fdxgdwxp
bKpbKpbKpbKp,497 bKpbKp-
,387 ,432
px3wlplfurqxf3hdwxp exuvduld wulfklxp ,:9 ,352
8P Qdudphflxp 83/ Qdudphflxp 840 850 860 870 Dr3srgd Dr3slglxp Uhwudk~phqd Vurqhpd
,; P bKpbKpbKp,72 ,64 ,82 ,82 bKp,:2 bKpbKpbKp-
fxfx33xv fr3srgd s~uliruplv
,322
julvhr3xp yrud{
880 Q3dw~rsku~d 890 8:0 8;0 920 932 940 Dr3hsv Elglqlxp Elglqlxp kluwxv
qdvxwxp ed3eldqll xqflqdwd fxfx33xwd 3dwhulwxp idvflr3d
372
bKp-
,TP bKp,64 oKpoKp-
Dkl3rgrqh33d Dkl3rforqh33d C3hskdulvpd
,347 ,372 ,322
. 522
362
bKp-
952 Mlwrqrwxv
oKp-
A80 Uudfkholxp A:0 A;0

AA0
ryxp dqvhu
)551 )2::
l"'(l
Elohswxv Bpsklohswxv
sp)3:1
l"'(l
fodsduhghl dslfxodwxp )231

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Uudfkhorsk~ooxp uld roru
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l"'(l
AC0 Mdfu~pd
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Fqfkho~rgrq
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)2C1
l"'(l
.-/
-gi
:50 :60
Dk3dp~grprqdv Qhudqhpd
vs
. ,47 mKp,42 ,62 ,3: ,67
wu l fkrs kruxp dfxv jorervd surwhxv
. 332 mKpmKp-
:70 Ihwhurqhpd
. . .
322
:80 Dduwhuld
:90 Elvwljpd
4: mKp332 mKp-
;60 ;70 ;80 ;90
Dkl3rprqdv Dhufrergr Plfrprqdv ( Pl=frprqdv
sdudphflxp orqjlfdxgd vrfld3lv vwhlqll whupr
,42 ,3: ,32
. .
62 58
mKpmKp-
. 37 mKp39 mKp-
.
):
,38
;:0 4lfrprqdv ;;0 3222 Nrqdv Nrqdv
. . .
; mKp37 38 mKpmKp-
dprheldqd yx3jdulv re3ltxd plqlpd
,34 ,36
32 o0 Nrqdv 3240 Nrqdv
,8 mKp,6
9 mKp-
,37 / 3;
mKpmKp-
,34 / 38
3290 Fslskdqhv 32:0 Srwduld 32;0 Qkl32glqd 3320 Fslskdqhv
vhqwd flwulqxv urvhr33d eudfklrqxv sdudgr{xv
,322 p,422 p/ ,472 / 522 p/ ,322 / 372 p/ ,422 / 622 p-
3330 Qkl32glqdyxv 3340 Bh3rvrpd 3350 Skdeglwlv
khpsulfkl vs
/ ,722 p / 4 pp-
/ ,722 p / 8 pp-
FTRVFNBT FTRVFNB FTRVFNB
329 d 333 334 335
DMBTTF GJMP DMBTTF
SPU3GFSB BOFMJEB OFNBUPEB
30 CSBODP.
T0N0 vlr
Ilgur3rjld Qdxor.
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vwxg~ Zdw0
ri edfwhuld Qr33xw0
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!,8-=7:5/827.
3;940
80 QJQFT.
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vwxgjh0
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Nlfurelr30
3:7/456.
90 ESBLJEFT. phwkrgh
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Guhkzdwhu 346: s0
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Z0U0
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;0 TFaHJO.
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E0T0 ex3nlqj0
B xqlilhg K0 Zdw0
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dfwlydwhg 584/:3.
320
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350
TUPSFS. 3;99.
U0o0
arrorjld
Hhudo0
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NORMA TCNICA

PARA COM HANUAL

2. Microrganismos 2.1. Principais Bacterias Fungos Microfauna

2.1.1. 2.1.2. 2.1.3.

3. Metodologia 3.1. 3.2. 3.3. 3.4. Coleta

de Trabalho e Preservao de Amostras

Calibrao Tcnica Aplicao

do Microscpio em Cmara de Contagem Sedgwick - Rafter - S.R. em Cima

de Contagens da Tecnica para

ra de S.R., 3.5. Tcnica

da estabilizao ca proveniente O mecanismo rias, tos

(biodegradao) neles lanados.

na biodegradao, celular das Na que promove

realizada oxidao complexas

em molculas como ace~ o

menores, tor dos

respirao, na quebra com

orgnica, produo Essa

oxignio e dioxido armazenada fosfato) No caso

consequente de energia. de ATP reaes

(adenosina celulares. "in natura"

posteriormente contnuo ocorrer

num dis organi

o esgotamento da estabilizao Com isso,

do oxignio da matria ocorre morte uso

condies organismos o corpo

anaerobias. aquticos receptor potvel

o desapar~ dos como peixes fonte

originais, invivel e como para

de abastecimento h interesse em que

recreaao. como sanitria a ponto

Portanto, e de so atin o trata d'gua. repr~ que oco~ de

ecnomica, afetem pode

artificialmente que passara

o mecanismo a funcionar ambiente. de um

de biodegradao apenas como

re no rio, despejos Um dos

tratados, processos lodos com

tratamento processo que

sucintamente, alguns . b . 1,2 e cresc~mento acter~ano ,

grandes utilizada utilizam

miossntese). postos to,

.Holozicos: protozorios,seres superi~

(utilizaoo de matria orgnica morta)

(matria orgnica particula da) -

seres superi~ res, etc.

saprofticoS{ bactrias, (matria or gnica diSsolvida) -

e os protozorios como heterotrficos.

pelo a partir atravs

qual de de um ciclo bioqumico O ciclo se que ~n~ enz~ do

as reaes processo uma

envolve c~a mas com

transferido que no caso com

de hidrognio A energia sob a forma

armazenada para uso

energia, ligaes em que

formao ox~ conver composto

dessas dativa, tida em

adenosina-difosfato (ATP), sendo

O processo te descrito: lculas cido Quando clise), rendimento Nas reaes

respiratrio degradao piruvico

sucintamen a duas ou ciclo (6 ATP). ( gli um mo de