Sinalizao biolgica

1. Definies
Mecanismos moleculares pelos quais as clulas reconhecem um sinal qumico ou fsico e o traduz em um processo bioqumico celular

Luz (fton)

Odorante

Sinal

Hormnio Antgeno

Informao:

Transduo de sinal

Morte Diviso Sntese Degradao

Cncer Doena auto-imune Diabete

Diviso + Falha de Reconhecimento Celular Falha de Reconhecimento Celular Falha de Receptor ou do Sinalizador

Sinalizao biolgica
1. Definies
Sinal

Especificidade

Amplificao

Enzima 1

Enzima 2

Efeito

Enzima 3

Desensibilizao/Adaptao

Integrao Sinal 1 Sinal 2

Resposta 1

Resposta 2

Soma: Resposta 3

Sinalizao biolgica
1. Definies

Hormnio secretado no sangue

Clula secretora

Meio extracelular Vaso sangneo

Sinalizadores e receptores na mesma clula

Clula-alvo

Clula-alvo adjacente

Endcrina

Parcrina

Autcrina

Sinalizao biolgica
1. Definies
Receptores acoplados a protenas-G Ligante extracelular (S) ativa protena-G que regula enzimas que geram um segundo mensageiro intracelular

Receptores enzimticos ou ligados enzimas Receptores tirosina kinase Ligante induz atividade de tirosinakinase por auto-fosforilao Receptores guanilato-ciclase Ligante extracelular induz formao de cGMP no domnio enzimtico intracelular

Receptores de adeso (integrinas) Ligao com molculas na matriz extracelular muda sua conformao, alterando interaes com citoesqueleto

Membrana plasmtica

Efetor citoplasmtico (2 mensageiro)

Cascata de fosforilao Fator de transcrio

Canais inicos Abertura ou fechamento induzido por ligante ou potencial de membrana

Membrana nuclear DNA mRNA Protena Receptores nucleares Ativados por molculas lipoflicas (ex. esterides) atua como fator de transcrio

Mecanismos de sinalizao: altamente conservados na escala evolutiva - milhares de sinais biolgicos, diferentes classes de biomolculas sinalizadoras - mecanismos regulados e interrelao: respostas mltiplas - maquinaria celular de transduo de sinal: cerca de 10 tipos bsicos de protenas

Sinalizao biolgica
2. Receptores acoplados a protenas-G (Heptahlices ou Serpentinas)

Domnio de interao com ligante Domnios intermembrana Domnio de interao com protena-G Amino-trmino

Membrana

Domnio de interao com protena-G Carboxi-trmino

Sinalizao biolgica
2. Receptores acoplados a protenas-G (Heptahlices ou Serpentinas)
2.1 cAMP Ligante ativa o receptor AC

Protena G- Subunidade ativada ativa adenilato ciclase

Receptor ativado causa a troca de GDP na protena-G heterotrimrica por GTP

Subunidade ligada ao GTP transloca pela face interna da membrana

Adenilato ciclase produz AMP cclico (cAMP)

cAMP ativa Protena Kinase A (PKA)

Fosfodiesterase degrada cAMP

Subunidade da Protena G hidrolisa GTP e re-associa com subunidades e (forma inativa)

Sinalizao biolgica
2. Receptores acoplados a protenas-G (Heptahlices ou Serpentinas)
2.1 cAMP
Epinefrina 1 molcula

ATP
Adenilato ciclase

cAMP
20 molculas

PKA inativa

PKA ativa
10 molculas

Fosforilase b kinase inativa Glicognio fosforilase b inativa Glicognio

Fosforilase a kinase ativa

100 molculas

Subunidade cataltica dissociada (ativa)

PKA inativa

Subunidade cataltica dissociada (ativa)

Glicognio fosforilase a ativa

1000 molculas

Glicose-1-fosfato
10 000 molculas

Diversos passos

Glicose

10 000 molculas de glicose no sangue

Sinalizao biolgica
2. Receptores acoplados a protenas-G (Heptahlices ou Serpentinas)
2.1 cAMP

Adenilato ciclase: pode ser modulada de diferentes maneiras por protenas-G

Adenilato Ciclase

Gs

Gi

Ativa

Inibe

cAMP
Protena Gs (estimulatria): estimula a sntese de cAMP (ativa a Adenilato Ciclase) Protena Gi (inibitria): inibe a sntese de cAMP (inibe a Adenilato Ciclase)
O mesmo receptor (cadeia polipeptdica que reconhece o ligante) pode interagir com diferentes tipos de protenas-G ou O mesmo agonista ativa diferentes subtipos de receptores associados a diferentes tipos de protenas-G

Sinalizao biolgica
2. Receptores acoplados a protenas-G (Heptahlices ou Serpentinas)
2.2 Fosfolipase C (PLC)
Diacilglicerol atua na ativao da PKC na membrana

Espao extracelular

Membrana celular Diacilglicerol

Fosfolipase C (PLC) PLC ativa cliva PI-4,5 BP em IP3 e diacilglicerol

PKC PKC ativa fosforila diversas protenas Ca2+ ativa PKC e outras protenas Ca2+

GTP
Subunidade da GDP protena Gq ativada ativa PLC GTP

IP3 liga em receptor na membrana do RE, liberando Ca2+

H
Sinal liga ao receptor

IP3

Citosol Gq
GDP Receptor ativado induz troca GDP-GTP Reticulo endoplasmtico

Canal de Ca2+

Ca2+

Sinalizao biolgica
2. Receptores acoplados a protenas-G (Heptahlices ou Serpentinas)
2.3 Desensibilizao (Desensitizao) 1. Receptor ativado causa dissociao da subunidade das subunidades da protena G 2. Livres da subunidade , as subunidades da protena G associam-se com protena ARK, a qual fosforila serinas na extremidade carboxi-terminal do receptor

3. Protena -arrestina reconhece e liga-se nas serinas fosforiladas do receptor

4. Complexo receptor--arrestina internalizado por endocitose 5. No interior da vescula endoctica a arrestina dissocia, o receptor defosforilado e em seguida ambas protenas retornam aos seus compartimentos celulares

4
5

Sinalizao biolgica
3. Receptores enzimticos ou receptores-enzima
3.1 Receptores tirosina-kinase Domnio IgG-like Domnio rico em cistena

Domnio rico em leucina

Domnio Ligante
Exterior Interior

Domnio Tirosinakinase

Fosforilao: introduz grupamento com carga negativa por ligao covalente Mudana conformacional (inativa ativa) reversvel: fosfatases

Sinalizao biolgica
3. Receptores enzimticos ou receptores-enzima
3.1 Receptores tirosina-kinase
Insulina

1. Insulina (ligante) liga na subunidade do receptor e induz fosforilao de uma subunidade pela outra, ativando domnio tirosina kinase

2. Domnio tirosina kinase do receptor fosforila protena IRS-1

Citoplasma

3. Protenas contendo domnios SH2 so ativadas por protenas contendo tirosinas fosforiladas
Recruta e ativa outras protenas

Tyr
Ncleo

SH2

SH3

4. Ativao seqencial de protenas contendo domnios SH2-SH3 dispara cascata de ativao por fosforilao (Raf-1 MEK ERK)

Sntese protica

5. Protena efetora migra para o ncleo e ativa fatores de transcrio moduladores da ativao ou represso de genes

Sinalizao biolgica
3. Receptores enzimticos ou receptores-enzima
3.2 Receptores tirosina-kinase: Domnios SH2 e PTB
Grupamento Fosfato ligado a uma Tyr

82 protenas SH2-SH3 no genoma humano

Domnio SH2

AAs da protena P-Tyr

Interao SH2/P-Tyr muda conformao de protenas: exposio de domnios SH3 (interao com outras protenas)

24 protenas domnios PTB (Phospho-Tyr-Binding): Reconhecem P-Tyr

Sinalizao biolgica
3. Receptores enzimticos ou receptores-enzima
3.3 Receptores tirosina-kinase: PI-3K e PKB (Akt)

PDK-1

Ativa

Fosforilao de outras protenas

Sinalizao biolgica
Multivalncia: protenas envolvidas em processos de sinalizao podem interagir de variadas formas com diversas protenas diferentes Protenas fosforiladas possibilitam stios de ancoragem (ex. domnios SH2, PTB) Combinaes de domnios fosforilados numa mesma protena e diferenas sutis entre domnios homlogos em diferentes protenas permitem a especificidade de interaes Associaes fsicas entre protenas de uma mesma rota de sinalizao: especificidade e velocidade de resposta Mltiplos domnios de ligao: permitem associaes entre grupos especficos de protenas por combinaes de domnios

Protenas associadas fosforilam umas s outras (ex: Ras-MEK-ERK)

Rafts e cavelas: segregao espacial de complexos de sinalizao

Sinalizao biolgica
4. Canais inicos
4.1 Canais operados por ligantes: receptor de acetilcolina
Ca2+, Na+ Stios de ligao da acetilcolina Acetilcolina

4.2 Canais operados por voltagem: canais de sdio

Exterior

K+

+-+Despolarizao da membrana

+-+Membrana despolarizada, canal aberto

Membrana polarizada, canal fechado

Interior

+-+Sensor de voltagem

+-+-

Sinalizao biolgica
5. Receptores esterides

Hormnio esteride ligado em protena plasmtica

Superfamlia de receptores esterides/tireide/vitamina D: Ativadores de natureza lipdica Hormnios carregados na circulao por protenas carreadoras Ativam receptores especficos dentro da clula Receptores ativam ou atuam como fatores de transcrio no ncleo

Membrana Plasmtica Receptor esteride (Rec) ativado migra para o ncleo

Ncleo

Funo celular alterada

Novas protenas

Produo de novas protenas

Hormnios sexuais Vitamina A (cido retinico) T1, T3, T4

Sntese protica

Sinalizao biolgica
Bactrias
Receptor Histidina Kinase (Componente 1)

Quimioatrativo (glicose, aminocido) Componente 2 fosforilado reverte a direo do motor do flagelo

Membrana

Regulador de resposta (Componente 2)

Motor de rotao (controle do flagelo)

-Sistema de dois componentes - receptor para um quimioatrativo e protena reguladora do movimento do flagelo

-Molculas de interesse (hexoses, aminocidos) aumentam a rotao do flagelo, enquanto que molculas potencialmente danosas causam a inverso do movimento de rotao
-Oxignio, extremos de temperatura

Sinalizao biolgica
Cross-talking: integrao entre diferentes rotas
EPO Receptor Rota RasRaf-MAPK

Rota JAKSTAT

Sinalizao biolgica
Cross-talking: integrao entre diferentes rotas

-adrenrgico

Reforo da sinalizao de outros receptores heptahlicos

Internalizao do receptor adrenrgico

Expresso gnica