CROMATOGRAFA Qumica Orgnica II Semestre RESUMEN.

En la siguiente prctica de laboratorio se aprender a usar un mtodo de separacin el cual se haba escuchado mucho de este, pero con poca frecuencia se haba utilizado en una prctica de laboratorio, este mtodo se llama cromatografa. Este mtodo de separacin es comnmente utilizado en la separacin de pigmentos de muestras vegetales, las cuales, se tienen que machacar en presencia de cloroformo para crear una solucin que contenga todo el pigmento de las hojas sometidas al procedimiento. Para la separacin de los pigmentos tambin se utilizan pequeos vidrios llamados portaobjetos, los cuales son enjuagados, lavados, y sumergidos en una solucin de silica gel, la cual al secarse la parte liquida de la solucin (la cual es ter) queda una delgada pelcula muy absorbente la cual es usada para depositar una gota de la muestra del pigmento. INTRODUCCION Es comn quieres separar una mezcla y no saber cual es el mtodo mas apropiado para hacerlo, ya que necesitas conservar las dos o mas sustancias que se encuentran en la mescla, es por eso que hoy trataremos un nuevo mtodo de separacin el cual una mescla se separa en dos faces sin que se pierda ninguno de sus componentes. Este mtodo se llama cromatografa. Este mtodo consiste en separar una mescla en dos sustancia, las cuales se ven en dos fases una estacionaria y una mvil las cuales se desplazan con ayuda de un solvente voltil en una placa de vidrio recubierta con una solucin seca. En la cual se pueda identificar las diferentes fases de la separacin. OBJETIVO GENERAL Reconocer la cromatografa como mtodo de separacin de los pigmentos de una planta

OBJETIVOS ESPECIFICOS Manejar correctamente este proceso Separar los pigmentos de una planta utilizando cromatografa de capa delgada Obtener los resultados requeridos por una investigacin previa Separar los varios compuestos componentes en una mezcla

MARCO TEORICO CONCEPTO DE CROMATOGRAFIA La cromatografa se define como la separacin de una mezcla de dos o ms compuestos por distribucin entre dos fases, una de las cuales es estacionaria

y la otra una fase mvil. Varios tipos de cromatografa son posibles, dependiendo de la naturaleza de las dos fases involucradas: slido-liquido (capa fina, papel o columna), liquido-liquido y gasesliquido (fase vapor). Todas las tcnicas cromatografas dependen de la distribucin de los componentes de la mezcla entre dos fases inmiscibles: una fase mvil, llamada tambin activa, que transporta las sustancias que se separan y que progresa en relacin con la otra, denominada fase estacionaria. La fase mvil puede ser un lquido o un gas y la estacionaria puede ser un slido o un lquido. CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA En este caso se utiliza una placa recubierta con fase estacionaria manteniendo un pequeo espesor constante a lo largo de la placa. El eluyente ascender, por la placa y arrastrar los componentes a lo largo de sta produciendo manchas" de los componentes. En la cromatografa en capa fina (ccf), el grado de elucin de las sustancias depende tanto de su propia polaridad como de la polaridad del eluyente utilizado' El adsorbente se coloca en forma de una capa delgada adherida sobre un soporte rgido, qu pueden ser placas de vidrio, aluminio o polister. Los tamaos de la placa para ccf convencional son: 20 x 20; 10 x20 y 5x2 cm. Hay adsorbentes que contienen un indicador de fluorescencia para facilitar la

identificacin de muestras. Si no se usa indicador y los componentes no son coloridos, se requerirn otras tcnicas de revelado. REVELADORES MS PARA CROMATOGRAFA FINA COMUNES EN CAPA

Las manchas de color son, por supuesto, inmediatamente visibles; las incoloras pueden revelarse mediante: a) Luz UV: si la sustancia absorbe luz ultravioleta, se puede usar una fase estacionaria impregnada con un indicador fluorescente (F25a F366), el nmero que aparece como subndice nos indica Ia longitud de onda de excitacin del indicador utilizado" b) La introduccin vapores de yodo de la placa en

c) El roco con una solucin de agualH2SOa 1:1 (dentro de un compartimiento especialmente protegido y bajo una campana de extraccin de gases). Despus calentar intensamente, por ejemplo, con un mechero. Hasta carbonizar los compuestos. ADSORBENTES MS PARA CROMATOGRAFA FINA. COMUNES EN CAPA

Gel de slice (se utiliza en el 80% de las separaciones) Oxido de Aluminio Almina (cida, neutra bsica) Celulosa (Nativa o microcristalina) Poliamidas

PARA LA SELECCIN DEL ADSORBENTE DEBER TOMAR LAS SIGUIENTES CONSIDERACIONES:

Polaridad Tamao de partcula Dimetro rea Superficial Homogeneidad Pureza

PROCEDIMIENTO 1. Se preparo una mescla de silica gel y se cubri la placa de vidrio hasta 4/5 de si longitud

FACTORES QUE INFLUYEN EN UNA SEPARACIN POR CROMATOGRAFA DE CAPA FINA. a) Temperatura: a menor temperatura las sustancias se adsorben ms en la fase estacionaria. b) La cromatografa debe llevarse a cabo en un rea sin corrientes de aire. c) Limpieza de las placas. Muchas placas estn contaminadas con grasa o agentes plastificantes o adhesivos. Para el trabajo a pequea escala, stas deben limpiarse corriendo primero una mezcla de cloroformo y metanol y despus dejar secar completamente antes de aplicar la muestra. d) Pureza de los disolventes.

2. se tomaron las hojas de matarratn se maceraron en un mortero con un poco de metanol, esta primera mescla se desecho, luego se agreg mas metanol y se prosigui macerando hasta retirar la mayor cantidad de clorofila.

MATERIALES Estufa de 110C Placas de vidrio Gotero Capilares Mortero con mazo Hoja de papel filtro Matarraton Ampolla de decantacin Erlenmeyer Frasco cloroformo Silica Metanol

3. Esta de decanto dos veces asta que estuviera pura la sustancia pura.

pigmento en un beaker con ter, se empez a separar el punto quedando dos manchones, uno amarillo y otro verde. Adems de la observacin anterior, tambin notamos que hay que ser sumamente rpido cuando se est tratando con ter ya que si al momento de dejar caer la gota de pigmento sobre la capa de silica gel nos demorbamos, el pigmento se quedaba dentro del capilar y este ya quedaba inservible para nuestro propsito. CONCLUSIONES La tcnica de cromatografa en capa fina (CCF) tiene numerosas ventajas, aparte de ser rpida, sencilla, barata... tiene tambin la ventaja de utilizar poca cantidad de muestra. PREGUNTAS 1. Analizar y explicar los resultados de sus cronogramas. Dibujar las placas y la posicin de las manchas antes y despus de la cromatografa.

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luego esta mescla se inserto en un erlenmeyer y se calent hasta que quedo solamente la clorofila, como quedo muy pura hubo necesidad de agregarle un poco mas de metanol.

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Posteriormente se tomo un capilar y con ayuda de este se coloco la clorofila en la placa de vidrio recubierta con silica gel en la parte inferior, posteriormente se coloco en un frasco con cloroformo y se tapo esperamos 5 minutos y la retiramos para observar los resultados.

Los resultados fueron los esperados, vimos como la fase mvil se desplazo hacia arriba mientras que la fase estacionaria permaneci en su lugar. DISCUSIN DE RESULTADOS. De acuerdo a nuestras observaciones, la planta escogida tenia solo dos clases de pigmentos, ya que al someter la placa con la capa de silica gel y el punto de 2. En la cromatografa de capa delgada cual es la fase estacionaria y cual la fase mvil? La fase mvil es aquella que se desplaza hacia arriba de la placa por accin del

disolvente voltil, y la fase mvil es aquella que permanece esttica en su mismo lugar 3. Explique como y por qu se separan los componentes de la mezcla de pigmentos? Se separan por que la mescla de pigmento tiene componentes que son capases de ser arrastrados por el disolvente voltil (cloroformo) por lo cola se desplaza hacia arriba pero sin disolverse en este 4. Si posee un compuesto impuro y quisiera saber cuntas sustancias estn contaminando su compuesto. Explique como lo hara usando cromatografa de capa delgada? Se puede identificar algunas sustancias conocidas en la mezcal por su comparacin con un patrn de la sustancia pura, midiendo el grado de pureza de una muestra, si existen varias manchas en el cromatograma, es seal de que existen varios componentes en la muestra y colocando la misma cantidad en los puntos de la placa cromatografica, cuanto mayor sea la mancha obtenida en el cromatograma, la concentracin de la sustancia es mayor. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS Ballesteros, P y otros ,1989; Curso experimental de Qumica Orgnica; UNED. Brewster, RQ y otros, 1978; Curso de qumica orgnica experimental; Ed. Alhambra. Tomado la fecha 05/09/2012 de la pagina http://organica1.org/1311/1311_6. pdf