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Sociedad Espaola de Bioqumica Clnica y Patologa Molecular Comit Cientfico Comisin de Magnitudes Biolgicas relacionadas con la Urgencia Mdica Documento H. Fase 3. Versin 5 Preparado por: X. Navarro Segarra, J. L. Marn Soria, A. Buo Soto, R. Daz Garca, A. Galn Ortega, P. Guevara Ramrez, E. Guilln Campuzano, M. Muoz Prez, P. Oliver Sez, N. del Ro Barcenilla.
NDICE
1. Introduccin 2. Objeto y campo de aplicacin 3. Consideraciones preanalticas y fuentes de error
3.1. Contenedores 3.2. Anticoagulantes 3.2.1. Tipo 3.2.2. Proporcin 3.2.3. Errores atribuibles al anticoagulante 3.3. Muestra: obtencin y tipos 3.3.1. Sangre venosa 3.3.2. Sangre arterial 3.3.3. Sangre capilar arterializada 3.3.4. Errores durante el procedimiento de obtencin 3.4. Manejo y conservacin de la muestra 3.4.1. Errores derivados de la conservacin y transporte 4. Recomendaciones 5. Bibliografa
Por otro lado, las variaciones de la ventilacin pulmonar y del proceso de la respiracin determinan variaciones en la presin parcial de los gases sanguneos (pO2 y pCO2) que llevan implcitos cambios en el equilibrio cido-base. Existen diversos procesos nosolgicos cuyo manejo puede beneficiarse de la medicin del pH, pO2 y pCO2. En general, esta prctica est justificada cuando se desea evaluar la capacidad de oxigenacin del paciente, el buen funcionamiento de los procesos de ventilacin pulmonar y respiracin (intercambio de gases), el equilibrio cido-base y controlar la oxigenoterapia. Dado que la medicin de estas magnitudes puede estar asociada a procesos patolgicos que pueden comprometer de manera importante la vida del paciente y que en funcin de este resultado pueden iniciarse maniobras diagnsticas o teraputicas invasivas para l, la calidad del resultado entregado es especialmente importante y por ello conviene conocer las causas potenciales de un resultado inexacto.
1. INTRODUCCIN
Un aspecto crtico de la fisiologa humana es la capacidad del organismo para preservar la homeostasis o equilibrio fisiolgico. La importancia de la homeostasis de la concentracin de hidrogeniones (H+) radica, entre otros procesos fundamentales para la vida, en su implicacin directa o indirecta en mltiples reacciones celulares, en la conformacin de las protenas y en el intercambio de iones a travs de las membranas celulares. Tanto una excesiva alcalinidad como una excesiva acidez son incompatibles con la vida por lo que el pH debe mantenerse en un estrecho margen (6,8 a 7,8), an ms estrecho cuando se trata de los valores considerados fisiolgicos (7,35 a 7,45). No es fcil medir la concentracin de hidrogeniones en los tejidos, pero los cambios que tienen lugar en stos pueden interpretarse a travs de las variaciones de pH que se producen en la sangre. El pH del medio interno se mantiene estable gracias a los tampones o sistemas amortiguadores que existen en dicho medio, el ms importante de todos ellos es el sistema formado por el cido carbnico y el bicarbonato, ya que mediante la modificacin de la ventilacin pulmonar o de la reabsorcin tubular renal pueden modificarse la pCO2 y la concentracin de bicarbonato respectivamente.
preanalticos que la afectan de modo directo, como por ejemplo una anticoagulacin inadecuada, la posible dilucin por la heparina, la puncin venosa en lugar de arterial, un lavado deficiente de la va del catter, contaminacin con aire o la conservacin incorrecta.
3.2.2. Proporcin
El volumen de heparina utilizado debe ser alrededor del 5% del volumen total de la muestra y nunca superior al 10%. Se ha demostrado que 200 L de heparina sdica o de litio (1.000 UI/ mL) evitan la coagulacin de 5 mL de sangre (alcanzando una concentracin final de 40 UI/mL) sin afectar la medicin de pH, pO2, pCO2 (18-21). En el caso del uso de jeringas convencionales donde la heparinizacin deba realizarla el usuario, puede ser recomendable lavar la jeringa con un chorro de heparina sdica o de litio (1.000 IU/mL) y vaciarla luego (lo que deja aproximadamente un volumen residual de 0,1 mL en una jeringa estndar de 2 mL). Esto permite la anticoagulacin adecuada de una muestra de 2 a 4 mL de sangre y asegura que el anticoagulante no sea aadido en exceso pudiendo alterar el resultado (4, 7).
3.1. Contenedores
Se han evaluado y recomendado muchos tipos de recipientes. Uno de los primeros fue la jeringa de vidrio, que probablemente debe considerarse un recipiente de referencia con el que comparar la exactitud de otro tipo de recipientes (jeringas de plstico regulares, jeringas de plstico especializadas y los tubos capilares). El vidrio es un material inerte e impermeable a los gases, lo que convertira a las jeringas de vidrio en el dispositivo ptimo para la obtencin de la muestra si no fuera por sus diversas desventajas. Entre stas destacan la necesidad de esterilizarlas adecuadamente si van a reutilizarse, la posibilidad de rotura y un coste inicial relativamente alto. Los dispositivos usados mayoritariamente son las jeringas estndar de plstico (polipropileno) de 1 a 5 mL y las jeringas de plstico diseadas especficamente para contener una muestra destinada a la medicin de gases en sangre. Todas ellas eliminan la necesidad de esterilizar el dispositivo, son ms baratas y relativamente irrompibles. Su principal desventaja tcnica es el intercambio de gases a travs del plstico (pues se trata de un material permeable) que puede representar un problema importante segn el tipo de plstico, las presiones parciales de los gases del espcimen, la temperatura y el tiempo de conservacin. Cuanto mayor es la diferencia existente entre la pO2 y pCO2 de la sangre y la del aire ambiental, mayor es la posibilidad de intercambio entre ambos medios (1,2). Las jeringas de plstico diseadas especialmente para el anlisis de gases incorporan ventajas tcnicas como el mbolo elevable, que se desplaza debido a la presin arterial y la heparinizacin previa del dispositivo, muchas veces con heparina cristalina que minimiza los errores por dilucin pudindose obtener muestras de pequeo volmen de de manera fcil. Otro tipo de recipiente aceptable para recoger y transportar la muestra son los tubos capilares especiales de vidrio heparinizados, siempre que se sellen convenientemente. Sin embargo, la variable proporcin de sangre capilar que pueden contener, adems de la dificultad que ofrecen para una ptima homogeneizacin (3), pueden conducir a errores de difcil estimacin.
3.2. Anticoagulantes
3.2.1. Tipo
La medicin de pH, pO2 y pCO2 debe efectuarse en sangre homogeneizada tratada con heparina (sdica o de litio) liofilizada o lquida, a una concentracin de 1.000 UI/mL, al ser ste el anticoagulante de eleccin. Los oxalatos, citratos y el EDTA no son aceptables para estos fines. La heparina de mayor concentracin (5.000 10.000 UI/mL) no debera usarse ya que puede alterar el pH (dado su carcter cido) y el calcio inico (por su efecto quelante) (4). El pH de la heparina sdica estar aproximadamente entre 6 y 8 (5). En el caso de la heparina lquida la pCO2 y la pO2 suelen tener valores cercanos al aire ambiente (pCO2=7,5 mm Hg y pO2=160 mm Hg). Las jeringas que contienen heparina liofilizada (congelada y desecada) presentan notables ventajas: a) ahorro de tiempo, ya que no es necesario humidificar previamente el cuerpo de la jeringa con heparina lquida y b) no se plantean problemas de dilucin por el exceso de anticoagulante.
durante la extraccin, la posibilidad de aparicin de dolor pulstil en el caso de la puncin arterial, as como la necesidad de respirar normalmente (1,3,8). El paciente debe estar en un estado de equilibrio ventilatorio antes y durante la extraccin para asegurar que la muestra es representativa del estado del paciente. Debe evitarse, por tanto, la ansiedad y el dolor. El paciente que respira espontneamente debe mantenerse en reposo durante 15 min. y en caso de respiracin asistida u oxigenoterapia no deben introducirse cambios al menos 30 minutos antes de la extraccin. Debe escogerse el decbito supino que asegura una correcta y homognea ventilacin pulmonar.
lactato) (2,4,9). Es preferible, por lo tanto, la extraccin de muestras capilares y arteriales para obtener resultados sistmicos del equilibrio cido-base y de las presiones parciales de los gases en sangre. Si se usan catteres permanentes o cnulas para la toma de muestras, debe ponerse especial atencin en que el fluido o las soluciones de lavado se eliminen completamente del sistema. La contaminacin de la muestra con lquido procedente de una perfusin determinar la disminucin de los valores de la pCO2 y la obtencin de valores de pO2 cercanos a los 150 mm Hg al equilibrarse los gases de la muestra con los del lquido en perfusin, cuyas presiones son cercanas al aire ambiental (10). La sangre debe recogerse en condiciones anaerobias para impedir el intercambio de gases con el aire circundante y debe sellarse el contenedor para asegurar el mantenimiento de la anaerobiosis. En ningn caso la muestra debe quedar sellada por una aguja sino por un tapn o mecanismo diseado especficamente para sellar la muestra, mantener la anaerobiosis y evitar cualquier riesgo biolgico potencial. Puesto que el aire ambiente contiene una pCO2 prcticamente nula y una pO2 de alrededor de 150 mm Hg, la presencia de aire en la muestra tender a reducir la pCO2 (produciendo un aumento en el pH) y a aumentar o disminuir la pO2 equilibrando la muestra con el aire ambiente (10). Por lo tanto, sea cual sea el origen de la muestra, deber impedirse la formacin de burbujas que representan una fuente de error en la medicin de los gases sanguneos al alterar las presiones parciales de stos en la muestra. Este efecto es mayor cuanto mayor es la superficie de contacto aire/sangre (burbujas pequeas y mltiples) y se manifiesta sobre todo en la pO2 (11). Cuando se toman muestras capilares arterializadas, la primera gota se debe eliminar pues sta es rica en fluido extracelular y puede ser una causa de mediciones errneas al alterar la concentracin de ciertos electrolitos como el potasio o producir interferencias por dilucin. Adems, debe dejarse fluir la sangre siguiente en un capilar heparinizado sin exprimir, pues de hacerlo se produce un vertido de productos a partir del componente intra y extracelular que pueden alterar el valor de diversas magnitudes.
Debera utilizarse la jeringa de vidrio conservada en agua-hielo cuando el paciente presente leucocitosis o trombocitosis, ya que para ralentizar el consumo de oxgeno por estas clulas, debe enfriarse la muestra con los condicionantes explicados en el primer punto. De no existir la posibilidad de jeringa de vidrio puede usarse la de plstico analizando la muestra inmediatamente. Para la medicin de la pO2, pCO2 y del equilibrio cido-base, es necesario que las muestras sean homogeneizadas cuidadosamente antes de las mediciones para evitar la sedimentacin. La homogeneizacin debe ser ms intensa cuando la muestra se ha sometido a enfriamiento. Las muestras en capilares de vidrio debern volver a mezclarse moviendo la barrita de metal desde un extremo a otro del tubo durante unos 10 segundos. Las jeringas de vidrio o plstico debern invertirse 10 veces y luego agitarse mediante giros sobre los dos ejes del recipiente de la muestra durante 60 segundos. Durante el mezclado no debera formarse ninguna burbuja o espacio muerto (4). Para detectar y evitar la presencia de cogulos deben despreciarse de 100 a 200 L de la jeringa. La existencia de cogulos puede dar lugar a mediciones inexactas al interferir sobre el electrodo directamente. Adems, al despreciar estas primeras gotas se purga la sangre en la jeringa evitando la introduccin de burbujas de aire en el instrumento.
1) Contenedor Se recomienda el uso de jeringas de plstico especficamente diseadas para gasometras tratadas con heparina seca equilibrada con electrolitos. 2) Anticoagulante Se recomienda heparina seca equilibrada con electrolitos con el fin de evitar errores por dilucin. La dosificacin de heparina deber prevenir la coagulacin y evitar efectos de dilucin, por ello cuando se use heparina lquida la dosis ser de 40 L de heparina sdica o de litio (1.000 UI/mL) por cada mililitro de sangre (alcanzando una concentracin final de 40 UI/mL). 3) Muestra La muestra debe representar el estado de ventilacin del paciente, por lo tanto el paciente que respira espontneamente debe hallarse estable y no deben introducirse cambios en la media hora que precede a la extraccin en el que est sometido a ventilacin asistida o en tratamiento con oxigenoterapia. La sangre arterial es el espcimen preferido para el estudio de los gases sanguneos. Las muestras de sangre venosa slo se recomiendan para valorar el estado del equilibrio cido-base del paciente y no son vlidas para conocer el estado de oxigenacin. La sangre capilar arterializada es vlida para la valoracin del equilibrio cido-base y presiones parciales de los gases y puede utilizarse cuando la extraccin arterial es difcil o est contraindicada. 4) Estado de la muestra: burbujas y cogulos La muestra debe conservarse en anaerobiosis, para ello deben extraerse las burbujas que se hayan generado durante la extraccin y sellar convenientemente el contenedor. Se recomienda rechazar la muestra ante la presencia de burbujas o cogulos visibles. 5) Conservacin: tiempo y temperatura Contenedores de plstico: deben analizarse lo antes posible. La demora en el anlisis no debe exceder los 30 minutos tras la extraccin, conservndose a temperatura ambiente. Cuando se esperan pO2 elevadas o en estudios especiales (gradiente alveolo-arterial o shunt) deben analizarse antes de cinco minutos. Contenedores de vidrio: deben analizarse antes de 30 minutos tras la extraccin. Si no fuera posible, se conservarn a 0-4 C en agua-hielo no ms de una hora. Cuando se esperan pO2 elevadas o en estudios especiales (gradiente alveolo-arterial o shunt) deben analizarse antes de cinco minutos. 6) Preparacin de la muestra: homogeneizacin y purga de la jeringa La alcuota de la muestra que se transferir al analizador debe ser homognea y representativa de la muestra. Para ello debe homogeneizarse adecuadamente la muestra y despreciar las primeras gotas para asegurar la ausencia de cogulos y eliminar cualquier burbuja residual.
5. BIBLIOGRAFA
1. 2. 3. 4. NCCLS. Procedures for the collection of arterial blood specimens; Approved Standard. 4th Edition. H11-A4. 2004 Preanalytical aspects in STAT analysis. Mller-Plathe O. Blood gas news 1998, vol. 7, n 1 NCCLS. Procedures and devices for the collection of diagnostic capillary blood specimens; Approved Standard. 5th Edition. H4-A5. 2004 NCCLS. Blood gas and pH analysis and related measurements; Approved Guideline. C46-A. 2001
4. RECOMENDACIONES
Se resumen los principales factores a tener en cuenta en el anlisis de las muestras destinadas a la medicin del equilibrio cido-base y gases en sangre.
5. Approved IFCC recommendations on whole blood sampling, transport, and storage for simultaneous determination of pH, blood gases, and electrolytes. Burnett RW, Covington AK, Fogh-Andersen N, Klpmann WR, Maas AHJ, Mller-Plathe O, Siggaard-Andersen O, van Kessel AL, Wimberley PD, Zijlstra WG. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1995; 33: 247 53 6. NCCLS. Blood gas pre-analytical considerations: specimen collection, calibration and controls. C27-A. 1993 7. Qumica clnica, tcnicas de laboratorio-fisiopatologa-mtodos de anlisis; teora, anlisis y correlacin. Kaplan L.A., Pesce A.J. Buenos Aires, Argentina. Edit. Mdica Panamericana; 1988 8. Recommendations for collection of skin puncture blood from children, with special reference to production of reference values. Alstrm T, Dahl M, Grsbeck R, Hagenfeldt L, Hertz H, Hjelm M, Jrvenp AL, Kantero R, Larsson A, Leskinen EE. Scand J Clin Lab Invest 1987; 47: 199-205 9. NCCLS. Procedures for the collection of diagnostic blood specimens by venipuncture; approved standard. H3-A5. 5th Ed. 2003 10. Clinical application of blood gases. Shapiro, B.A.; Harrison, R.A.; Walton, J.R. 2 ed. Year Book Medical Publisher, Chicago, 1977 11. Clark CG, Rayfield JM, Clague AE, Preanalytical errors in simultaneous blood gas, electrolyte and metabolite analysis. Blood Gas News 1998; 7: 125 12. Obtencin de muestras sanguneas de calidad analtica. Mejora continua de la etapa preanaltica. Luis Morn Villatoro. Edit. Panamericana, 2001
13. Effects of syringe material, sample storage time and temperature on blood gases and oxygen saturation in arterialised human blood samples. Knowles TP, Mullin RA, Hunter JA, Douce FH. Respiratory care. 2006; 51: 732-6 14. Changes in oxygen measurements when whole blood is stored in iced plastic or glass syringes. Mahoney JJ, Harvey JA, Wong RJ, Van Kessel AL. Clin Chem 1991; 37: 1244-8 15. Stability of pO2, pCO2 and pH in heparinized whole blood samples: influence of storage temperature with regard to leukocyte count and syringe material. Schmidt C, Mller-Plathe O. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1992; 30:767-73 16. www.radiometer.es. Diciembre 2007 17. www.deep-picture.com/Preanalytical. Diciembre 2007 18. Sampling and storing of blood for determination of acid-base status. Siggaard-Andersen O. Scand J Clin & Lab Invest. 1961; 13: 196-204 19. Hamilton RD, Crockett RJ, Alpers JH. Arterial blood-gas analysis: potential errors due to the addition of heparin. Anaesth Intensive care. 1978; 6: 251-5 20. Dake MD, Peters J, Teague R. The effect of heparin dilution on arterial blood-gas analysis. Western J Med. 1984; 140: 792-3 21. Hutchison AS, Ralston SH, Dryburgh FJ, Small M, Fogelman I. Too much heparin: possible source of error in blood-gas analysis. BMJ. 1983; 287: 1131-2