Laboratorio de Citogentica

Pilar Carrasco Salas R4 Anlisis Clnicos Hospital General de Ciudad Real

Introduccin

Alrededor 20.000 anomalas cromosmicas

Raras, pero contribuyen a la morbilidad y

mortalidad humanas

Son la causa:
Gran proporcin de abortos espontneos (50%)
Discapacidad en la infancia (0,5-1%) Gnesis de un nmero importante de cnceres

Introduccin
Indicaciones para el estudio cromosmico:
Anomalas

congnitas mltiples Dificultades de aprendizaje. Ambigedad sexual Trastornos del desarrollo sexual Infertilidad Aborto recurrente.

Introduccin
1.

Cules son cromosmicas?

las

alteraciones

2. 3.

Cmo podemos detectarla?

Casos clnicos

1.

Cules son las alteraciones cromosmicas ms frecuentes?

Anomalas numricas
Aneuploidas (trisomas,
monosomas)

Anomalas estructurales
Translocaciones Inversiones Deleciones Inserciones Isocromosomas Cromosomas en anillo
o paracntricas
robertsonianas o recprocas pericntricas

Poliploidas

Sndromes de microdelecin
Reestructuraciones subtelomricas

Alteraciones numricas
Aneuploidas : trisomas, monosomas

Poliploidas:

- Raras, casi siempre incompatibles con la vida - En abortos, son frecuentes las triploidas - Slo algunos casos de triploides vivos

Alteraciones numricas

Origen: no disyuncin

1.

Cules son las alteraciones cromosmicas ms frecuentes?

Anomalas numricas
Aneuploidas (trisomas,
monosomas)

Anomalas estructurales
Translocaciones Inversiones Deleciones Inserciones Isocromosomas Cromosomas en anillo
o paracntricas
robertsonianas o recprocas pericntricas

Poliploidas

Sndromes de microdelecin
Reestructuraciones subtelomricas

Alteraciones estructurales
Translocaciones recprocas
- En la meiosis, forman un tetravalente de paquiteno - Pueden dar lugar a translocaciones en desbalance - Importante detectar potadores de translocaciones

La segregacin alternante en el tetravalente del paquiteno produce gametos normales o gametos con la translocacin, pero equilibribrados

La segregacin adyacente en el tetravalente del paquiteno produce gametos con la translocacin en desequilibrio.

t (8;14)

Alteraciones estructurales
Inversiones
- Afectan a un solo cromosoma - Pueden ser pericntrica o paracntrica

- Dan lugar a gametos desequilibrados ->importante

para la descendencia

El portador de una inversin pericntrica puede dar lugar a gametos normales, gametos con la misma inversin que el portador, o gametos con duplicacin o monosoma distal del cromosoma ivertido

El portador de una inversin paracntrica puede dar lugar a gametos normales o a gametos inviables

Alteraciones estructurales
Deleciones

Prdida de parte de un cromosoma monosoma para ese segmento del cromosoma. Si > 5Mb se pueden ver al microcospio (Ej. sndrome del maullido de gato o el sndrome de Wolf-Hirschhorn)

Sin embargo, otros sndromes se deben a una delecin submicroscpica o microdelecin hay que recurrir a otras tcnicas Se conocen como sndromes de microdelecin

1.

Cules son las alteraciones cromosmicas ms frecuentes?

Anomalas numricas
Aneuploidas (trisomas,
monosomas)

Anomalas estructurales
Translocaciones Inversiones Deleciones Inserciones Isocromosomas Cromosomas en anillo
o paracntricas
robertsonianas o recprocas pericntricas

Poliploidas

Sndromes de microdelecin
Reestructuraciones subtelomricas

Sndromes de microdelecin

Sndromes clnicamente reconocibles Se producen por entrecruzamientos errneos entre secuencias de ADN de cromtidas hermanas

Sndromes de microdelecin

SNDROME DE WILLIAMS

SNDROME DE PRADER WILLI/ANGELMANN

SNDROME DE SMITH MAGENIS

1.

Cules son las alteraciones cromosmicas ms frecuentes?

Anomalas numricas
Aneuploidas (trisomas,
monosomas)

Anomalas estructurales
Translocaciones Inversiones Deleciones Inserciones Isocromosomas Cromosomas en anillo
o paracntricas
robertsonianas o recprocas pericntricas

Poliploidas

Sndromes de microdelecin
Reestructuraciones subtelomricas

Reestructuraciones subtelmericas

Las alteraciones estructurales son frecuentes en las regiones subtelomricas Contienen secuencias muy similares sufren alteraciones como resultado de apareamientos y recombinaciones entre cromosomas no homlogos.

Son regiones ricas en genes pequeas alteraciones de material gentico en esta zona pueden traer consecuencias fenotpicas severas Son las causa del retraso mental idioptico (RMI) en un 5 a un 7%

Reestructuraciones subtelmericas

A nivel citogentico, los extremos de los cromosomas se caracterizan por la ausencia de bandas G difciles de detectar Alteraciones estructurales que ms frecuentemente afectan a las regiones subtelomricas: Translocaciones (56% de los casos) Deleciones (44%).

Cmo podemos detectar en el laboratorio estas alteraciones cromosmicas?

Cariotipo FISH MLPA Arrays

Cariotipo
1 Cultivo 2 Tincin
- Bandas C (Tripsina+ Leishman) - Bandas G - Ag-Nor

3 Microscopio

Cariotipo Bandas C

MLPA
Se basa en la reaccin de PCR Utiliza hasta 45 sondas distintas Se amplifican estas sondas (no el ADN) Deteccin del producto de PCR: electroforesis

Detecta deleciones y duplicaciones NO detecta translocaciones balancaeadas

FISH
Hibridacin de ADN problema con sonda complementaria marcada con fluorocromo Varios tipos de sondas:
Sondas centrmericas Sondas especficas de Locus Sondas subtelomricas -

Casos clnicos

Caso n 1
Nio de 8 meses, con cardiopata congnita compleja. Tiene un fenotipo peculiar: microretrognatia, orejas de implantacin baja, nariz gruesa. Se solicita cariotipo:

Caso n 1

Deleccin 22q11.2
Sndrome de DiGeorge Sndrome Velocardiofacial Caractersticas clnicas: - Cardiopata congnita - Problemas de aprendizaje - Anormalidades en el paladar - Inmunodeficiencia - Hipocalcemia en el perodo neonatal - Problemas de audicin Alteraciones cromosmicas - Deleccin de la regin 22q11.2 (95%) - Mutacin puntual o pequea deleccin de la regin 22q11.2 (< 5%) - Reordenamientos cromosmicos de la regin 22q11.2 con otros cromosomas (<1%)

Caso n 1

Caso n 1

Conclusin: Se trata de un cromosoma 6 derivado de una translocacin (6;22). En el reordenamiento se ha perdido la regin del Catch (22q11.2), lo que explica la cardiopata. FISH de los padres: Normal Translocacin de novo por un error meitico

Caso n 1
Consejo gentico:

El riesgo de que se vuelva a repetir es mnimo, pero mayor que en poblacin general, porque no se puede descartar que exista un mosaicismo germinal El paciente slo tiene un 25% de posibilidades de tener descendencia sana.

Caso n 2
Nio de 2 aos, que acude a consulta por retraso en el desarrollo, hipotona y convulsiones frecuentes. Se solicita: - Cariotipo - MLPA: TGR y anomalas subtelomricas Delecin 1p36

MLPA subtelomricas

Delecin 1p36
Caractersticas clnicas - Fenotipo caracterstico: filtrum largo, cejas rectas, barbilla puntiaguda - Cardiopatas - Alteraciones de la visin - Alteraciones renales - Prdidas de audicin - Hipotona - Retraso mental

Alteraciones cromosmicas:
Delecin de novo (80%) Reordenamientos cromosmicos (12%) Derivados de cromosomas 1 (7%)

Caso n 2
- Se reevala el cariotipo - FISH con sondas subtelomricas 1p para comprobar resultado del cariotipo - FISH a los padres

Caso n 2
Consejo gentico:
El riesgo de que se vuelva a repetir es mnimo, pero mayor que en poblacin general, porque no se puede descartar que exista un mosaicismo germinal

No se conoce ningn paciente con delecin 1p36 que haya tenido descendencia