1

1.

INTRODUCCIN El fsforo (P) es uno de los elementos presentes en los residuos animales. En

todos los seres vivos juega un papel muy importante tanto en la estructura como en la funcin de las clulas. Es parte integral de los cidos nuclecos, nucletidos, fosfolpidos y protenas, y es un componente primordial de muchas coen imas. Estos compuestos funcionan en la divisin y crecimiento celular, en el transporte y meta!olismo de grasas y en la a!sorcin y utili acin de car!ohidratos, cidos grasos y protenas ("arris et al. #$$%). &a preocupacin am!iental demanda inters en estudios so!re la contaminacin por P ocasionada por la e'crecin e'cesiva de ste elemento en el estircol de!ido al uso inadecuado del P en las raciones para ganado lechero (Eli ondo, (%%)). Esta preocupacin am!iental esta primariamente relacionada con la

contaminacin de aguas superficiales (corrientes, lagos y ros). Esta contaminacin puede ser causada por el escurrimiento de P cuando su aplicacin en la tierra est por encima de las necesidades del cultivo. El aumento de especiali acin y concentracin de ganado y cultivos para la produccin ha dado lugar la e'portacin neta de nutrientes de las principales onas productoras de cultivos del pas a las onas con una alta concentracin de agricultura animal. &a concentracin de la agricultura animal ha sido identificada como una fuente de contaminacin por P de las aguas superficiales (*no+lton et al., (%%,) El manejo del estircol es un punto crtico en la agricultura. &a concentracin de P en estircol puede limitar la cantidad de ste aplicado a las tierras de agricultura, dado

-ue el P no es voltil ni es fcilmente li'i!ia!le. (.alen et al. #$$/). 0am!in desde el punto de vista econmico, el P tiene importancia en la alimentacin animal, ya -ue es el elemento ms costoso utili ado en me clas minerales dado -ue los rumiantes pueden utili ar el P contenido en forma de fitatos (1oares, #$$)) la suplementacin de ste mineral puede no ser tan crtica como previamente se ha!a credo. El P consumido en e'ceso de los re-uerimientos es e'cretado principalmente por heces. En estudios reali ados en Estados 2nidos se ha reportado una e'crecin de P por heces de un 3$4, orina del #4 y leche del 5%4 (6hase, #$$/). 7dems del pro!lema de contaminacin am!iental con el uso de cantidades e'cesivas de P en la dieta, tam!in el costo de la racin es incrementado, ya -ue el P contri!uye con ms del )%4 del costo de una me cla tpica de vitaminas y minerales.

(.

PLANTEAMIENTO DEL PROBLEMA

&a contaminacin por fsforo en residuos de la produccin animal es uno de los pro!lemas medioam!ientales ms frecuentes de la ganadera. &os animales no pueden normalmente digerir el fsforo orgnico de los alimentos y a menudo se les complementa la dieta con fsforo inorgnico para un crecimiento ptimo. 0odo este fsforo, tanto el asimilado como el no asimilado va a parar a las heces y orinas y de ah a las aguas, a las -ue contamina, produciendo el efecto de eutrofi acin, por el -ue se fomenta el crecimiento de algas y microorganismos y se aca!a agotando el o'geno de las aguas.

El presente tra!ajo tiene como propsito evaluar si el uso del nutriente fsforo (P) es adecuado en la alimentacin de vacas productoras de leche y determinar si e'iste una e'crecin e'cesiva, evaluar los efectos negativos -ue el e'ceso de fsforo e'cretado en heces puede ocasionar en el am!iente y reconocer la alternativa ms via!le y econmica -ue permita disminuir la e'crecin de este elemento en los sistemas ganaderos de leche.

3.

JUSTIFICACIN

En esta investigacin se pretende determinar la cantidad del nutriente fsforo (P) -ue es e'cretado en heces por vacas productoras de leche. E'iste !astante evidencia -ue

los re-uerimientos de algunos nutrientes de diferentes especies de animales de granja han sido so!restimados o en algunas ocasiones su!estimados por los diferentes comits de 8utricin 7nimal. 7l formular dietas con cantidades e'cesivas de fsforo, adems del gasto econmico innecesario -ue se ocasiona, tam!in se contri!uye a la contaminacin por fsforo del agua y suelo. El o!jetivo es determinar la concentracin de fsforo e'cretado en heces por el ganado lechero en e'plotacin intensiva en el Estado de 7guascalientes. Esto se lograr a travs de la toma de muestra de heces, orina y mediante el anlisis de la dieta -ue lleva el ganado lechero en diversos esta!los en e'plotacin intensiva en el Estado de 7guascalientes. &a determinacin de fsforo se llevar a ca!o mediante el anlisis de heces, orina y de la dieta para determinar el contenido de fsforo inorgnico, esto se llevo a ca!o en las instalaciones del &a!oratorio de 1anidad 9itopecuaria del :0E&.

4.

OBJETIVOS

4.1. Objetivo ge e!"#

;eterminar la concentracin de fsforo en estircol de ganado lechero en e'plotacin intensiva en el Estado de 7guascalientes.

4.$. Objetivo% e%&e'()i'o%

;eterminar y evaluar la concentracin de fsforo en la orina e'cretada de ganado lechero.

Evaluar la concentracin de fsforo en la dieta de ganado lechero. Estimar el porcentaje de P e'cretado en e'ceso en estircol por ganado lechero de!ido a la dieta.

6omparar la e'crecin de P en las diferentes etapas de lactancia en los diferentes ranchos muestreados.

*.

REVISIN DE LITERATURA

*.1. E# )+%)o!o e e# o!g" i%,o

El fsforo no se encuentra en forma elemental en los sistemas !iolgicos, pero est presente en sales de fosfato o de fosfato unido de forma covalente a los compuestos orgnicos. ;e!ido a las m<ltiples formas !iolgicas de P, es menos am!iguo descri!ir los re-uerimientos de P como forma elemental. El fsforo es importante en muchas funciones !iolgicas como un elemento estructural, un elemento clave en las transacciones de energa, un !uffer, un componente crtico en la regulacin de la funcin celular y un esta!ili ador de los polmeros del 7=8 y 7;8 (>lair?@est et al., #$$(, citado por 9erguson y 1Alan, (%%)). En el cuerpo, apro'imadamente el /)4 de P se encuentra en los huesos y los dientes, el #,4 en los tejidos !landos y un #4 en el l-uido e'tracelular (>lair?@est et al., #$$(, citado por 9erguson y 1Alan, (%%)). En las vacas lecheras, del /%4 al $%4 del P en el cuerpo se encuentra en tejido seo y los dientes (8=6, (%%#). El fsforo en el hueso est presente como fosfato de calcio (6a5 (PB,)() y cristales de hidro'ilo?apatita 6a#% ((PB,)3(B")(). El contenido de 6a y P de los huesos es dinmico y en funcin de la edad, estado fisiolgico y ceni as del es-ueleto. El hueso normalmente tiene una relacin de 6aCP, de (.(C# en peso (.anong, #$$$, citado por 9erguson y 1Alan, (%%)). El contenido de ceni a en el hueso normal est por encima del ,%4 de los cuales el #D4 a #/4 es P (0ernouth, #$/$E 0ernouth et al., #$$3). 2na vaca de 3)% Ag puede tener de D a

/ Ag de P en hueso. El P y 6a en el hueso estn disponi!les para apoyar el dficit cuando la demanda es alta y el consumo es !ajo, como ocurre en la lactancia temprana. 2n dficit acumulado total de 3%% a #,%%%g de P puede ser suministrado por los almacenes seos (8=6, (%%#). El papel central de P en las transacciones de energa y la regulacin del transporte de iones a travs de 70P y el campo ha sido ampliamente descritas (.anong, #$$$, citado por
9erguson

y 1Alan, (%%)). En los rumiantes, P salivales, como fosfato, tiene un papel importante para

contri!uir a la amortiguacin del rumen y el suministro de P a los microorganismos del rumen. El fsforo tiene un papel importante en la esta!ili acin de 7;8 y el 7=8 y la fosforilacin de residuos de serina en casena y ayudar a la formacin de complejos de casena en la leche (9erguson

y 1Alan, (%%)).

*.$. Re-.e!i,ie to% /e )+%)o!o e #" /iet" /e g" "/o #e'0e!o

Entre los factores -ue influyen en los re-uerimientos de P estnC especie, se'o, ra a, edad, peso corporal, estado fisiolgico y nivel de produccin del animal (Fc;o+ell, #$DD). 0radicionalmente, los productores so!realimentan P a las vacas lecheras (%,)) a %,3%4 de P en la dieta) como una prctica para aumentar la produccin y mejorar el desempeGo reproductivo. Esto, sin em!argo, no ha sido soportado por investigaciones recientes. Harios estudios (>rintrup et al., #$$5E HalA y 1e!eA, #$$$E @u y 1atter, (%%%E

@u et al., (%%%, (%%#) mostraron -ue niveles de P en la dieta por encima de %,534 no son necesarios. El tipo de dieta afecta en gran medida la cantidad de P ingerido y de P e'cretado por vacas lecheras. 6on un mtodo simplificado de clculo del !alance de P de una vaca lechera, -ue incluye la ingestin de P, la retencin de P con la leche y la e'crecin de P con las heces, se pueden hacer algunos clculos apro'imados para demostrar la sensi!ilidad de la eficiencia en la utili acin de P para la sntesis de leche y de la e'crecin de P por cam!ios en la dieta. Estos clculos se hicieron suponiendo -ue no se aGade P a la dieta con las preme clas, y -ue la e'crecin de P por la orina, as como la movili acin o la deposicin de P en el hueso y otros depsitos del organismo (incluyendo la deposicin P en el <tero de las hem!ras preGadas), es insignificante (>anniniA et al., (%#%). &os re-uisitos de fsforo son ms altos durante la lactancia, crecimiento inicial, y para
la reproduccin.

&as vacas de alta produccin necesitan mucho ms fsforo -ue las vacas media productoras y !ajas productoras. &as vacas secas o las vacas -ue no son productoras de leche necesitan menos fsforo -ue las vacas lactantes, de!ido al alto contenido de fsforo en la leche. &a leche contiene apro'imadamente el %,#(4 de calcio y %,%$)4 de fsforo. 2na vaca produce #%% li!ras de leche por da re-uiere #%% g (%.((% li!ras) de fsforo y secretan ,5 g (%.%$) li!ras) de fsforo en la leche. ;e!ido al alto nivel de fsforo en la leche, se
necesita de un suministro continuo en la racin para permitir altos niveles de produccin de leche ("arris et al., #$$%).

En el cuadro #, se presentan los re-uerimientos de P a!sor!i!le para vacas adultas, no gestantes, produciendo diferentes cantidades de leche y con diferentes consumos de materia seca, y las concentraciones de fsforo total necesarias en la dieta para llenar esos re-uerimientos (Eli ondo, (%%)).

C."/!o 1. =e-uerimientos de fsforo a!sor!i!le y total para vacas lecheras con diferentes niveles de produccin y diferentes niveles de consumo de materia seca (8=6, (%%#). Produccin lctea (AgIda)
/ #% #( #, #3 #/ (% (( (, (3 (/ 5% 5( 5, 53 5/ ,% ,) )%

6onsumo de F1 (AgIda) #,.$) #).3% #3.(3 #3.$# #D.)D #/.(( #/.// #$.)5 (%.#/ (%./, (#.,$ ((.#) ((./% (5.,3 (,.## (,.DD ().,( (D.%3 (/.3$

=e-uerimientos de P*
7!sor!i!le (gIda) 0otal 4 de la dieta

((.#) (3.3% (D.%3 (D.3# 5#.$D 5,.,( 53.// 5$.55 ,#.D/ ,,.(, ,3.3$ ,$.#) )#.3% ),.%3 )3.)# )/.$D 3#.,( 3D.)3 D5.3$

%.(# %.(( %.(5 %.(, %.() %.(3 %.(D %.(/ %.($ %.5% %.5# %.5( %.55 %.5, %.5) %.53 %.5D %.5/ %.5$

J Para estimar la cantidad de fsforo total en la dieta se utili el factor %,D%

&as raciones para vacas lecheras en lactacin estn formuladas para tener una determinada cantidad o porcentaje de fsforo a fin de cumplir los re-uerimientos para el nutriente especfico.

10

&as vacas secas son a-uellas -ue no producen leche despus de ha!er completado
una lactancia.

&as vacas secas en etapa final o a punto de parir se manejan con ms cuidado ya -ue estn en el <ltimo mes de gestacin cuando el feto est creciendo a un ritmo acelerado, estas necesitan ms fsforo -ue las vacas secas en etapa inicial . &os terneros
re-uieren una cantidad mayor de fsforo, las necesidades de fsforo en va-uillas aumenta gradualmente, seg<n los animales se vuelven ms maduros ("arris et al., #$$%).

5.3. F.e te% 1 /i%&o ibi#i/"/ /e# )+%)o!o

&as fuentes de P se pueden clasificar en orgnicas e inorgnicas. ;entro de las orgnicas pueden ser animales o vegetales. En el cuadro ( se o!servan la concentracin de 6a y P encontrada en los alimentos para rumiantes, y su !iodisponi!ilidad relativa.

4.1.1.

O!g2 i'"%

&as fuentes orgnicas se clasifican de acuerdo a su procedencia enC

F.e te% " i,"#e%C ;entro de las fuentes animales, podemos diferenciar entre rumiantes y no rumiantes.

11

;entro de las primeras, y seg<n la <ltima resolucin de la 8orma Bficial Fe'icana 8BF?%3#?KBB?#$$$, la cual proh!e todo tipo de protenas, y a la ve fuentes de P, de origen rumiante (para la alimentacin de rumiantes), se descartan las harinas de sangre, carne, hueso y sus variantes. &a <nica -ue todava est permitida es la ceni a de hueso, siempre y cuando cumpla con el tratamiento trmico -ue asegure la eliminacin de toda la protena, seg<n lo mencionado en dicha resolucin, y tenga la correspondiente certificacin. En rigor esta sera una fuente inorgnica de P de!ido a -ue no de!e tener restos orgnicos, aun-ue se la clasifica dentro de este grupo por su origen. Es frecuente encontrarse con variaciones en la concentracin de 6a y P, de!ido -ue la misma depender de la materia prima utili ada a tales efectos. Por ello es recomenda!le tam!in un frecuente anlisis de esta fuente de P. ;e las no rumiantes se encontr mayormente la harina de pescado. 6omo el aporte -ue reali a es muy !ajo, y de!ido a su alto costo, la hacen inaccesi!le como fuente de P.

F.e te% veget"#e%3 ;entro de las fuentes vegetales, los forrajes de alta calidad tienden a ser en general !uenas fuentes de 6a y relativamente !ajos en P en especial las leguminosas, no as algunos granos y su!productos. En general se utili an los valores de ta!las para formular las dietas de los animales. En los forrajes, en el caso particular de los minerales, es conveniente utili ar

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datos de anlisis de los alimentos, de!ido a -ue son muchos los factores -ue pueden afectar la concentracin de 6a y P. &a concentracin en el suelo de dichos nutrientes es un factor muy importante -ue puede hacer variar de una ona a otra el contenido de los vegetales. Btro factor -ue afecta el carcter de los minerales en el forraje es la madure del mismo. En general el contenido de 6a y P de los forrajes disminuye con la madure y por las inclemencias del clima. ;el cuadro ( surge -ue si se utili a alfalfa como <nico alimento, como es ha!itual en algunas cuencas lecheras durante la primavera?verano, especial atencin se de!era prestar para suplementar a los animales con una me cla mineral -ue provea un adecuado !alance de 6a y P. &os suplementos proteicos en general son !uenas fuentes de P, como as tam!in algunos granos y su!productosC salvado de trigo, harina de soja y semilla de algodn.

4.1.$.

:norgnicas

Por <ltimo encontramos las fuentes de P inorgnicas propiamente dichas o fosfatos. Por lo general se utili an ortofosfatos de calcio. ;e acuerdo a la cantidad de tomos de 6a en la molcula, se los clasifica en Fono, ;i o 0riclcico. &os fosfatos

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Fono?;iclcicos son com!inaciones de los dos primeros, aprovechando las ventajas de am!os.

C."/!o $3 6oncentracin de 6a y P de distintas fuentes y su disponi!ilidad relativa. BDR 4561 A#t" 41$76 Me/i" A#t" 41776 Me/i" B"j" 48976 F.e te /e P 9. FonoclcicoI Fono;iclcico 9. ;iclcico 9. ;efluorinado 6eni a de huesos "arina de Pescado Fo!!"je% C 7lfalfa, "eno 7lfalfa, Past. 7lgodn, 1emilla .ramneas, "eno Fa , .rano Fa , 1ilaje 1oja, "arina sorgo, .rano 0rigo, 1alvado
1

C" 5 #)?#/ (( 5( 5( 3 #.() #.$% %.(# %.5/ %.%5 %.(% %.5% %.%, %.#5

P5 (#?(( #/ #/ #3 5.) %.(5 %.(D %.3, %.#( %.(, %.#$ %.3/ %.5, %.$%

C" 3 P %.D%? %./% #.5% #.D% (.%% (.%% )./% 3LD %.55 5.(% %.#( #.%% %.,, %.#( %.#5

Para estimar la cantidad de fsforo total en la dieta se utili el factor %,D%

2n punto muy importante a considerar en los fosfatos es el contenido de fl<or (9), -ue es t'ico para el ganado en e'ceso, ya -ue un fosfato grado alimenticio (9eed .rade) de!e poseer una relacin PC9 inferior a #%%C#. Por ello los fosfatos grado fertili antes (por ej. fosfato diamnico) no de!en ser utili ados en la alimentacin animal. Btro punto -ue de!e ser cuidado es el de metales pesados como cadmio y arsnico, cuyos valores de!ern ser inferiores a #% ppm, adems de plomo (M5% ppm) y mercurio (M%.# ppm).

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&a utili acin de fosfatos alimenticios en las raciones permite gran fle'i!ilidad para !alancear la relacin 6aCP, una disponi!ilidad superior de P, utili ar productos li!res de posi!le contaminacin micro!iana y de malos olores y adems contar con un aporte de P predeci!le y constante. 7nte deficiencias agudas de P es posi!le utili ar productos inyecta!les en forma de sales inorgnicas cuyas forma -umica y concentracin de P aseguren la eficacia del producto (por ejemploC hipofosfitos de Fg o 8a), aun-ue este tipo de productos no siempre est disponi!le en el mercado y por lo tanto la suplementacin oral es la mejor alternativa en profila'is de deficiencia de fsforo. (7u a, #$/D).

4.$. >iodisponi!ilidad de las /i%ti t"% ).e te%

&a mayor parte del P de origen vegetal est ligado a un complejo -umico llamado NfitatoO. ;icha fuente de P es escasamente aprovechado por los no rumiantes (aves, cerdos, conejos, etc.) pero es !astante disponi!le para los rumiantes. &as !acterias ruminales producen una en ima llamada fitasa -ue degrada este compuesto complejo. 6omo resultado el P es li!erado y esta disponi!le para ser a!sor!ido y utili ado. 7s cerca de un $$4 del fitato se degrada al ser incu!ado durante (, horas en el rumen (Forse, #$/$, citado por "ernnde ?Hieyra, (%%,).

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Fuchos otros factores afectan la disponi!ilidad de dicha fuente de P para el animal. 6omo por ejemplo la unin de las fi!ras de la pared celular y los o'alatos. El rpido trnsito intestinal de los forrajes, con !ajo contenido de materia seca, ya sea hier!a o ensilado, en particular de leguminosas y de estados vegetativos de las plantas, resulta desfavora!le para la eficacia de a!sorcin. Es por ello -ue la disponi!ilidad del P a partir de forrajes verdes o conservados (henos o ensilajes) es en general inferior a la o!tenida de fuentes inorgnicas de calidad. 1in em!argo no todas las fuentes inorgnicas son iguales en lo -ue respecta a la disponi!ilidad del P para el animal y a-u se incluye la ceni a de huesos. 1eg<n .ueguen (#$D/) los fosfatos solu!les en agua se a!sor!en en alta proporcin, alrededor del /%4. Entre los solu!les en agua se encuentran los fosfatos Fonoclcico y Fono?;iclcico. &as fuentes insolu!les, como el fosfato ;efluorinado y la ceni a de hueso, tienen una disponi!ilidad mucho menor, del orden de )%?3%4. El fosfato ;iclcico estara en una situacin intermedia. Para evaluar la calidad de los fosfatos alimenticios el 6onsejo de la :ndustria Pumica Europea (6E9:6), 1ector 9osfatos :norgnicos para alimentacin, utili a la las prue!as de solu!ilidad en 7cido 6trico al (4 y en 6itrato de 7monio. Estas prue!as proveen una indicacin del nivel de disponi!ilidad de P y de la naturale a de la fuente (Fonoclcico y ;iclcico), respectivamente.

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&a solu!ilidad de un fosfato en cido ctrico al (4, sumada a la solu!ilidad en agua tiene una alta correlacin con el valor de >iodisponi!ilidad =elativa (>;=) ("ernnde ?Hieyra, (%%,).

*.4.

Ab%o!'i+ /e P

&a a!sorcin de fsforo se produce en el intestino delgado. &a cantidad de fsforo a!sor!ido por el animal depende de la fuente de fsforo, la cantidad de producto, el calcio, fsforo, p" intestinal, enfermedades y parsitos, medio am!iente, la edad de los animales, la dieta y los niveles de calcio, hierro, aluminio, manganeso, potasio, magnesio y grasa. Fuchos de estos factores son importantes cuando los nutrientes en la dieta son !ajos o deficientes. &a regulacin de la a!sorcin de fosfato est mediada por la vitamina ; (#,()?dihidro'ivitamina ;5). 6uando los niveles de fosfato en el suero son anormalmente !ajos, se estimula la formacin de la #,()?dihidro'ivitamina ;5 en el t<!ulo renal de los riGones, lo -ue mejora la a!sorcin de fosfato en el intestino. &os rumiantes reciclan grandes cantidades de fsforo como fosfato inorgnico en la saliva, en la -ue la secrecin parece estar regulada por la hormona paratiroidea. 7dems, la hormona paratiroidea, junto con la vitamina ; est implicada en la movili acin del calcio y fsforo de los huesos ("arris et al, #$$%).

17

*.*. Pe!/i/" /e F+%)o!o

En los rumiantes, el fsforo se ingiere con la alimentacin y una proporcin varia!le se e'creta en las heces. &a proporcin -ue no se e'creta en las heces se denomina P disponi!le. Fediante la correccin de la e'crecin fecal de P de origen endgeno, la disponi!ilidad real de P puede ser estimada. Por mucho, la fuente endgena de P ms importante es la saliva, -ue en el ganado ovino, en funcin de la actividad de la rumia, se demostr -ue varan de una a seis veces la cantidad consumida con la alimentacin (Qano et al., #$$#, citado por 0amminga, #$$3). &a secrecin diaria oscila entre ) y #%g de P en el ganado ovino y entre 5% y 3%g en el ganado !ovino (>reves y 1chroRder, #$$#, citado por 0amminga, #$$3). 2na cantidad de 3%g de P proporcionara la cantidad suficiente para cu!rir el mantenimiento y la produccin de (% Ag de leche. 2na segunda fuente importante de P endgeno es !ilis. El meta!olismo de P en los rumiantes es complicado por el hecho de -ue una cantidad significativa de P se incorpora a la !iomasa micro!iana como un componente de cidos nuclecos y fosfolpidos. El reciclaje de P a travs de la saliva es importante en los rumiantes y la e'crecin fecal podr ser superior a ) L o duplicarse a #% (1ymonds y 9or!es, #$$,). ;epende del p", P en la saliva se presenta como "(PB,?, "PB,(?, o PB,5?. Por lo tanto

18

uno puede asumir la incorporacin de P en los micro!ios es ms fcil del P en la saliva -ue del P de los piensos. En el inicio de la lactancia el P es ms es necesario para la e'crecin en la leche -ue procede de la dieta y movili ar las reservas corporales del animal, -ue se completa ms adelante en la lactancia (0amminga, #$$3). &os animales e'cretan el P en las heces por una de tres ra ones posi!lesC

#.

2na fraccin de la P contenido en los alimentos pueden estar presente en un

enlace -umico -ue no puede ser a!sor!ido. 6omo consecuencia de ello, de!ido a la naturale a de la alimentacin, esta fraccin tiene -ue ser e'cretadas. Esta fraccin puede ser sustancial en los no rumiantes, pero es prcticamente insignificante en los rumiantes, de!ido a la descomposicin micro!iana de los fitatos en el rumen.

(.

7lgo de P se pierde inevita!lemente en las heces independientemente del P

ingerido. Esta prdida resulta inevita!le de!ido al meta!olismo del animal o de los microorganismos en el tracto digestivo y es o!ligatorio para las funciones !asales normales del animal. 5. 1i la ingesta de P a!sor!i!le es superior a la necesaria para las inevita!les

prdidas y las necesidades del crecimiento, la reproduccin o la lactancia, este e'ceso de P se e'creta para mantener la homeostasis. 8ormalmente, en la mayora de los rumiantes este e'cedente se elimina con las heces, mientras -ue en los no rumiantes, la e'crecin renal predomina.

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8o hay posi!ilidad de cuantificar por separado la e'crecin fecal de P entre estas tres posi!les ra ones para su e'crecin. Este es un reto para los nutricionistas en el desarrollo de la comprensin ms completa del meta!olismo y e'crecin de P de los rumiantes (Pfeffer et al., (%%)).

*.:. I,&"'to e'o +,i'o /e #" !e/.''i+ &<!/i/"% &o! e# %i%te," /e g!" j"%

/e #" e;'!e'i+

/e )+%)o!o 1 #"%

El impacto en el ingreso agrcola neto por la reduccin de la so!realimentacin por P depende de las condiciones de reglamentacin -ue afectan a los agricultores. 1i el agricultor no est en un manejo de nutrientes !asados en P, y aplica el estircol sin tener en cuenta su contenido de P, el <nico impacto de la alimentacin e'cesiva con P ser un incremento en su factura de alimento (1inA et al., (%%%). Para el agricultor, en virtud del manejo o!ligatorio de nutrientes !asados en P, los costos de los suplementacin e'cesiva de P y la e'crecin de P son mucho mayores -ue solo el aumento en la factura de los piensos. En estos costos adicionales incluyen los costos de e'portacin de estircol en e'ceso de lo -ue se puede aplicar a la tierra, y el costo de los fertili antes de 8 comprados para cu!rir las necesidades restantes de 8 de los cultivos (*no+lton et al., (%%,).

*.=. E# &!ob#e," /e# )+%)o!o e e# ",bie te

20

El fsforo de!ido a -ue es un elemento muy importante para el crecimiento y desarrollo de las plantas, es esencial en la produccin moderna. Suega una serie de funciones crticas. En sistemas de e'plotaciones en confinamiento, su suplementacin es esencial para el desarrollo de los huesos y un desempeGo ptimo del animal. El fsforo se almacena en el suelo principalmente adherido a los minerales del suelo (hierro, aluminio y calcio) o en materia orgnica (!acterias del suelo, residuos de cosecha y materia orgnica en descomposicin). Este elemento se mueve con el agua de escorrenta, pero la erosin es el principal mecanismo de transporte del fsforo hacia las aguas superficiales. El agua en el suelo tam!in contiene pe-ueGas cantidades de fsforo disuelto, esencial para ser tomado por las plantas. ;e!ido a -ue el !alance entre los diferentes reservorios est fuertemente a favor de la forma orgnica y forma mineral del suelo, la li'iviacin raramente se da. 7l igual -ue en suelos de !aja fertilidad, el fsforo es usualmente el nutriente limitante en los sistemas acuticos. ;iferente a los suelos, los sistemas acuticos tienen una !aja capacidad N!ufferO por lo -ue no pueden almacenar este elemento. 1i el fsforo se aplica a una fuente de agua donde es limitante, el crecimiento de algas y otros microorganismos acuticos se estimular rpidamente. Ese crecimiento acelerado re-uiere de o'geno. El crecimiento continuar hasta -ue el fsforo o el o'geno sean limitantes. 1i el o'geno escasea o se aca!a, todos los organismos aer!icos del ecosistema se vern afectados. 1i la tasa de

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mortalidad de estos organismos aumenta, la demanda de o'geno en el sistema aumentar a<n ms. Fayores tasas de mortalidad resultarn en re-uerimientos mayores de o'geno para descomposicin, hasta -ue se vuelva limitante. 6uando esto sucede, el sistema pasa a ser un sistema anaer!ico (E!eling et al. (%%(E @alAer (%%%, citado por Eli ondo, (%%)). >ajo condiciones anaer!icas, ocurren a<n ms cam!ios y se producen malos olores. El agua se vuelve tur!ia y las especies desea!les empie an a desaparecer. El proceso anteriormente descrito se conoce como eutrificacin o eutrofi acin. &a eutrificacin es uno de los aspectos ms importantes -ue enfrenta un gran n<mero de pases en cuanto a lagos y reservas acuferas se refiere. Btros pro!lemas comunes asociados con cuerpos de agua eutrificados incluye un uso recreacional restringido o menos desea!le, agua de !e!ida no palata!le y un incremento en la dificultad y costo para el tratamiento de las aguas. &as aguas superficiales eutrificadas pueden tam!in e'perimentar el crecimiento masivo de ciano!acterias, -ue pueden matar animales y e'poner a los seres humanos a riegos de salud (Eli ondo, (%%)).

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:.

METODOLO>?A :.1. L.g"! /e e%t./io

El presente estudio se desarrollar en su fase de campo en ) esta!los de ganado lechero con e'plotacin intensiva en la regin del Estado de 7guascalientes, -ue se encuentra locali ada en el centro de F'icoE colinda al norte, noreste y oeste con KacatecasE al sureste y sur con Salisco, con una u!icacin geografa al norte ((T (DU, al sur (#T5/U de latitud norteE al este #%#T)5V, al oeste #%(T)(V de longitud oeste, una altitud media de (,%)5 metros so!re el nivel del mar. &a temperatura media anual en el estado es de #3.DT6, la media anual m'ima es de (%.(T6, y la media anual mnima es de #5.(T6 y la precipitacin media anual es de ,D)mm de lluvia.

&a fase e'perimental se llevar a ca!o en el &a!oratorio de 1anidad 9itopecuaria del :nstituto 0ecnolgico El &lano, u!icado en el *m. #/ de la carretera 7gs.? 1&P.

:.$. Di%e@o /e# t!"b"jo

1e reali ar un estudio de tipo e'perimental en ) esta!los lecheros de e'plotacin intensiva en el Estado de 7guascalientes. 1e tomarn muestras de heces, orina y dieta

23

de vacas altas productoras, vacas frescas y vacas secas. 1e determinar el fsforo contenido en heces, orina y la dieta, mediante el mtodo colorimtrico de 9isAe y 1u!!aro+ (#$()) modificado por "arris (#$D%). 7dems se determinar el contenido de nitrgeno por medio del Ftodo de ;umas (&E6B) en la dieta, en heces y en la leche como nitrgeno ureico proteico.

:.A. Se#e''i+ /e #o% E%t"b#o%.

1e seleccionarn los esta!los de acuerdo a los siguientes re-uerimientosC Pue se encuentren en la regin de Estado de 7guascalientes. Pue maneje una e'plotacin intensiva del ganado lechero Pue cuenten con una po!lacin de por lo menos 5%% animales Pue tengan separados a los animales en secciones de vacas altas productoras, frescas y secas. Pue por lo menos un esta!lo cuente con asesora tcnica por parte de un 8utrilogo Pue permitan la toma de muestra del tipo de dieta empleada para alimentar al ganado

:.4. Obte 'i+ /e /"to%

24

7ntes de comen ar el estudio se o!tendr informacin del manejo del ganado y los aspectos -ue nos interesan como sonC tipo de dieta -ue se lleva en el esta!lo, separacin del ganado y si se cuenta con asesora especiali ada.

:.*. E%t./io e;&e!i,e t"#

Para -ue se pueda llevar a ca!o la parte e'perimental es necesario reali ar lo siguienteC 1e elegirn al a ar #% vacas de cada esta!lo por cada caracterstica desea!leE vacas altas productoras, vacas frescas y vacas secas. 1e tomaran muestras de heces y orina frescas. 1e tomarn muestras de las dietas empleadas en dichos esta!los. 1e tomarn muestras de leche para determinar el nitrgeno ureico contenido en dicha muestra. 1e enviara a un la!oratorio particular. 1e determinar la concentracin de P y 8 en muestras de la dieta de los diferentes esta!los. 2sando la tcnica colorimtrica de 9isAe y 1u!!aro+ (#$()) modificado por "arris (#$D%) para fsforo y el mtodo ;umas (&eco) para nitrgeno. 1e determinar la concentracin de P y 8 en heces y orina y se calcular la e'crecin de estos elementos, y de esta manera se determinar si e'isten diferencias en la concentracin y e'crecin total de P entre varia!les. 1e colectaran ( muestras de heces y orina por rancho elegido. &a muestras fecales y las de orina se tomarn frescas.

25

1e determinar la Fateria 1eca Parcial de las muestras de heces y dieta por el mtodo de 1ecado en "orno.

1e tomarn muestras de leche de los tan-ues de almacenamiento de cada uno se los esta!los muestreados para determinar nitrgeno ureico.

:.:. A 2#i%i% /e #"bo!"to!io

El anlisis de la!oratorio consistir en lo siguienteC

:.1.1.

Dete!,i "'i+ /e )+%)o!o &o! e# ,<to/o /e Fi%Be 1 S.bb"!oC 419$*6 ,o/i)i'"/o &o! D"!!i% 419=76.

P!o'e/i,e to Obte 'i+ /e ,"te!i" %e'" #. Ponga a secar en la estufa a #%)o6, por una hora, cpsulas de aluminioE posteriormente s-uelas de la estufa usando pin as y col-uelas en un desecador

26

por (% minutos hasta -ue se enfrenE luego pselas en la !alan a analtica, usando pin as de metal, (identifi-ue las cpsulas). (. Pese en las cpsulas ( gramos de forraje molido, en la !alan a analtica, -ue sea representativo de la muestra y pngalo a la estufa por #( horas a #%) o6, (o por ) horas como mnimo). 5. 7l transcurrir este perodo se toman las cpsulas con pin as y se pasan a un desecador por (% minutos y luego se procede a pesarlas en la !alan a analtica. ,. B!tngase la materia seca total por diferencia entre el paso dos y tres.

Obte 'i+ /e 'e iE"%3 #. Hirtase la muestra seca de forraje del paso tres a un crisol de porcelana identificado e introd< case a la mufla a incinerar a 3%% o6, durante toda la noche o hasta -ue las ceni as sean !lancas, li!res de car!n. (. Hirtase las ceni as del crisol a un vaso de precipitado de #%% m& (raspando el crisol con una !rocha para o!tener en el vaso todas las ceni as). 5. 7gregue ) m& de "6l concentrado y (% m& de agua destilada y ponga el vaso en una placa de calentamiento elctrica a #%% o6, y evapore el l-uido hasta #% m&. ,. 7gregue #% m& de agua destilada y caliente a unos $% o6, enfre la solucin y fltrela en matra volumtrico de aforacin de #%% m&, usando un em!udo de cristal de espiga larga y papel filtro agua destilada, de manera -ue el

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enjuagado caiga tam!in al matra hasta la aforacin. (1e o!tuvo en este paso la solucin de ceni as). ). 6onserve la solucin para la determinacin de calcio, magnesio y fsforo.

P!e&"!"'i+ /e !e"'tivo%3 #. 1olucin normal de fsforo. %.# mg de fsforo por m&. ;isuelva %.,5$, gramos de *"(PB, (fosfato monopotsico) puro y seco en 5%% m& de agua destilada y (%% m& de cido sulf<rico #8 y afrese a #%%% m& con agua destilada. Para o!tener soluciones normales dil<yase como sea necesario. (. Wcido 1ulf<rico #8 . ;epostese en una matra de un litro 5%% m& de agua destilada y agregue lentamente (D.) m& de " (1B, concentrado, agitando con una varilla y posteriormente llvese a volumen el matra con agua destilada. 5. 1olucin de Wcido 1ulf<rico #% 8. Hace unos )%% m& de agua destilada en un matra de #%%% m& y agregue con cuidado agitando suavemente (/% m& de "(1B, concentrado y posteriormente afrese el matra a volumen con agua destilada. ,. 1olucin Foli!dato de 7monio. ;isuelva #(.) gramos de moli!dato de amonio en #%% m& de agua destilada y virtala a un matra de )%% m& y agregue #)% m& de cido sulf<rico #% 8 y llvese a volumen el matra con agua destilada. ). 1olucin de >isulfito de 1odio al #)4. ;isuelva #) gramos de !isulfito de 1odio en )% m& de agua y luego llvese a volumen de #%% m&.

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3. 1olucin de 1ulfito de 1odio al (%4. ;isuelva #% gramos de 1ulfito de 1odio anhidro en agua y llvese a volumen )% m&. D. =eactivo de cido #?amino?(?naftol?,?sulfnico (7817). Pese e'actamente %.() gramos de cido #?aminoL( naftol?,?sulfnico puro grado reactivo y vacelo a un vaso de precipitacin de )%% m&. 7Gada $D.) m& de la solucin de !isulfito de 1odio al #)4 y (.) m& de la solucin de sulfito de 1odio al (%4. 1i todo el cido 7817 no se disuelve inmediatamente pngale ms solucin de sulfito de sodio al (%4 en cantidad de %.) m& (no ms de tres veces). ;eje la solucin en reposo durante la noche y luego fltrela usando para ello papel filtro @hatman 8o. ,# o su e-uivalente. 7lmacnela en una !otella color pardo o c<!rala con el oscuro.

P!e&"!"'i+ /e #" '.!v" e%t2 /"! #. 0mese alcuotas de %.(%, %.,%, %.3%, %./%, #.%%, #.)%, (.%%, (.)% m& de la solucin normal de fsforo de %.# mg de fsforo por m& (6uadro 5) en matraces individuales de )% m&, agrguese a cada uno de ellos ) m& de la solucin de moli!dato de amonio, agite y agregue ( m& de solucin del cido #?amino?(? naftol?,?sulfnico y llvese a volumen con agua destilada, m clese !ien y repose en la oscuridad por (% minutos. (. &ase inmediatamente en el colormetro en filtro rojo y o!tngase los valores de a!sor!ancia y realice la curva.

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C."/!o A. Halores de las soluciones de P para reali ar la curva estndar. 1olucin normal de P (m&) %.(% %.,% %.3% %./% #.%% #.)% (.%% (.)% 7!sor!ancia 7!sor!ancia 6oncentracin de P(mg de PI)%m&) %.%( %.%, %.%3 %.%/ %.#% %.#) %.(% %.()

6oncentracin de P(mg de PI)%m&)

P!e&"!"'i+ /e #" ,.e%t!" #. 0ome una alcuota de la solucin de ceni as -ue contenga de %.%# mg a %.%( mg de fsforo (tomar 5 m& de la solucin de ceni as). (. Hace esta solucin de ceni as a un matra de )% m& aGada () m& de agua destilada y ) m& de la solucin de de moli!dato de amonio. 7gite y agregue ( m& de la solucin de cido #?amino?(?naftol?,?sulfnico y afrese a volumen el matra con agua destilada y se tapa y se me cla !ien.

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5. &ea los valores de a!sor!ancia en el colormetro en filtro rojo e'actamente a los (% minutos de ha!er agregado el cido #?amino?(?naftol?,?sulfnico. ,. 6ompare los valores de a!sor!ancia del !lanco con los de la muestra nada ms -ue en lugar de solucin de ceni as se usa agua destilada. ). &ea la concentracin de fsforo, comparando la a!sor!ancia o!tenida contra la curva normal de fsforo estndar.

2tili ando la curva dentro de la grfica, se o!tiene la concentracin (e'presada en mgI)% m&.) de cada una de las muestras, luego lo dividimos entre tresE ya -ue tomamos 5 m& de la solucin de ceni as, y as nos da los mgIm& de solucin de ceni asE luego lo multiplicamos por los m& a los -ue aforamos la solucin de ceni as (#%% m&). Posteriormente se divide este resultado entre el peso de la muestra de materia seca utili ando (# gramo mediante %.$(% en F.1.0.). 9inalmente lo multiplicamos por #%% para e'presarlos en mgI#%% m& o sea mg4.

T!" %)o!,"'io e%3 a) Para transformar mgI4 a ppm solo se recorre el punto una cifra a la derecha. EjemploC #%% mg I 4 X #%%% ppm .

!) Para transformar ppm a 4 se recorre el punto cuatro cifras a la i -uierda. EjemploC )D(% ppm X %.)D 4.

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:.1.$.

Dete!,i "'i+ /e it!+ge o 1 &!ote( " '!./" &o! e# ,<to/o /e D.,"% 4LECO6

FaterialesC 7parato digestor y de destilacin macroAjeldahl. Fatraces !aln de /%% m& Fatraces Erlenmeyer de )%% m& >ureta de )% #%% m&

=eactivosC 1olucin de Wcido clorhdrico al %.# 8. 1olucin de "idr'ido de 1odio al ,%4 1olucin de Wcido !rico al ) 4 Wcido sulf<rico concentrado, grado reactivo

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1olucin indicadora (%.#4 de rojo de metilo y %.(4 de verde de !romocresol en alcohol de $)4)

Fe cla catali adora ($5 gramos de sulfato de sodio anhidro y Dg de sulfato de co!re cristalino fino).

Perlas de vidrio.

ProcedimentoC #. Pesar # gramo de muestra secada parcialmente y depositarla en un matra !aln de /%% m& envuelta en papel filtro. (. 7dicionar apro'imadamente #% g de la me cla catali adora y unas 3 perlas de vidrio. 5. 7gregar () m& de cido sulf<rico concentrado. ,. 6olocar el matra en la parrilla encendida del digestor y ensam!larlo a ste. Poner a funcionar el e'tractor de aire. ). 6alentar hasta 5% minutos despus -ue la solucin ad-uiera una tonalidad clara E apagar las parrillas y enfriar. 3. 7dicionar lentamente y por las paredes del matra 5%% m& de agua destilada antes -ue la solucin de solidifi-ueE en caso -ue esto haya pasado, calentar un poco para desolidificar y luego agregar el agua agitando el contenido. D. &uego agregar #%% m& de la solucin de hidr'ido de sodio al ,%4 teniendo cuidado -ue sea muy lento y por las paredes del matra , para evitar una e'plosin. :nmediatamente tapar el matra y ensam!larlo al aparato destilador.

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/. Por otro lado en un matra Erlenmeyer de )%% m& depositar 3) m& de cido !rico al )4 y agregarle 5 gotas de la solucin indicadora y colocarlo de!ajo del destilador con el tu!o o manguera colectora sumergida en la solucin del cido !rico para evitar fugas de nitrgeno. $. 7!rir la llave del agua del refrigerante y encender las parrillas para iniciar la destilacin. #%. ;estilar apro'imadamente ()% m& de la solucin. ##. =etirar el matra Erlenmeyer antes de apagar la parrilla para evitar sifoneos. #(. 0itular la solucin con el cido clorhdrico %.# 8, hasta -ue apare ca un color rosa ligero.

6lculosC 4 8itrogeno X (H#?H()' 8"6l'Fe- 8 Pm ;ondeC H#X Holumen (m&) de "6l usado en la titulacin de la muestra H(X Holumen (m&) de "6l usado en la titulacin del >lanco 8"6lX 8ormalidad del "6l Fe- 8 X Filie-uivalentes de 8itrogeno

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El resultado se reporta en !ase parcialmente seca, y luego se hacen las operaciones correspondientes para reportarlo en !ase materia seca total.

4 de Protena cruda X 4 de 8itrgeno ' 3.()

&as muestras de leche para la determinacin de nitrgeno ureico sern enviadas a un la!oratorio particular.

:.=. A 2#i%i% E%t"/(%ti'o

&os datos o!tenidos de la investigacin se procesarn por anlisis de varian a utili ando los procedimientos del modelo linear general del 171 (#$$)) y por contrastes ortogonales para la comparacin de medias

35

=.

RESULTADOS

&os ranchos -ue fueron elegidos para ser muestreados de acuerdo a los criterios esta!lecidos anteriormente son los siguientesC

6uenca &echera >onaterra =ancho &os Pinos 2nidad .anadera &as ;elicias =ancho 1an .erardo =ancho 1anta =ita

7 las muestras o!tenidas en dichos ranchos se les aplico el mismo tratamientoC De'e%C 1e secaron las muestras en horno 9elisaY a temperatura de entre ))?3)Z 6 (9ig. #). ;espus se peso cada muestra y se procedi a moler en molino @ileyY (9ig.(). Fo!!"je /e #" /iet"3 Primero se peso el forraje h<medo (Peso "<medo), posteriormente se puso a secar en horno 9elisaY a una temperatura de entre )) y 3)Z 6 durante 5 das, despus de peso dicha muestra (peso seco) y por <ltimo se procedi a moler las muestras en un Folino @ileyY (9ig. (). O!i "3 1e almacenaron en congelacin dichas muestras a una temperatura de ,Z 6 hasta -ue se les realice el anlisis correspondiente.

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Fig.!" 1. Fuestras secndose en horno 9elisaY a una temperatura de entre )) y 3)Z 6.

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Fig.!" $. Folino @iley y muestras ya molidas.

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6on los pesos o!tenidos se determino Fateria 1eca Parcial de cada tipo de dieta dada en los ranchos muestreados (ta!la (), mediante la siguiente frmulaC Fateria seca parcial X peso fresco ' #%% Peso h<medo

1e reali aron ( muestreos de cada rancho y se aplicaron los tratamientos mencionados a cada una de las muestras o!tenidas (forraje y heces) las muestras despus del procedimiento de secado y se presentan en los siguientes cuadrosC

Re%.#t"/o% P!i,e! M.e%t!eo

C."/!o 4. =esultados del primer muestreo. Pesos promedio (n X #%) de heces despus del secado. R" '0o ,.e%t!e"/o 6uenca &echera >onaterra =ancho &os Pinos 2nidad .anadera &as ;elicias =ancho 1an .erardo =ancho 1anta =ita Et"&" /e #"'t" 'i" F!e%'"% 4g!6 Se'"% 4g!6 #D(.$% #)D.35 /5.D$ #)5.)$ #//.3% #$%.5/ #D(.#( #().(, #3(.%# #,5.,5 A#t"%4g!6 #,3.D$ #%/.D5 #/%.#( #55.%5 #(/.53

39

C."/!o *. =esultados del primer muestreo. Pesos de las dietas y 4 de materia seca parcial.

R" '0o ,.e%t!e"/o C.e '" Le'0e!" Bo "te!!" Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4 R" '0o Lo% Pi o% Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4 U i/"/ >" "/e!" L"% De#i'i"% Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4 R" '0o S" >e!"!/o Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4 R" '0o S" t" Rit" Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4

F!e%'"%

Se'"%

A#t"%

(,()%.%% #,%5,.#% ,).$3

#,)%%.%% 3,,.(% ,(.$)

#,$)%.%% /5,.,% ,(.D$

#,3,5.%% 3$5.3% ,(.((

(,%$#.$% #,%)%.(% )%.(%

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(,#5$.3% D)%.%% 5).%)

(,%$%.5% #,#%%.%% )(.3(

#,D)$.D% #,,%%.%% D$.)3

#,/)%.%% 3)%.%% 5).#,

#,/%%.%% 3)%.%% 53.##

(,,%%.%% /%%.%% 55.55

#,)%%.%% /$#.5% )$.,(

#,5%%.%% )#3.)% 5$.D5

#,(%%.%% 3/,.(% )D.%(

40

Re%.#t"/o% /e# Seg. /o M.e%t!eo3

C."/!o :. =esultados del segundo muestreo. Pesos promedio (n X #%) de heces despus del secado.

R" '0o ,.e%t!e"/o 6uenca &echera >onaterra =ancho &os Pinos 2nidad .anadera &as ;elicias =ancho 1an .erardo =ancho 1anta =ita

Et"&" /e #"'t" 'i" F!e%'"% 4g!6 Se'"% 4g!6 #,).3) #)3.35 #(3.%% #,/.%5 #)#.3D #D%./5 #5#.$, #5/.3D #3%.)$ #,$./(

A#t"%4g!6 #3/.)/ #,#.D5 #3%.#( #,/.,% #5,.)%

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C."/!o =. =esultados del segundo muestreo. Pesos de las dietas y 4 de materia seca parcial.

R" '0o ,.e%t!e"/o C.e '" Le'0e!" Bo "te!!" Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4 R" '0o Lo% Pi o% Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4 U i/"/ >" "/e!" L"% De#i'i"% Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4 R" '0o S" >e!"!/o Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4 R" '0o S" t" Rit" Peso 1eco (gr) Peso "<medo (gr) Fateria 1eca Parcial 4

F!e%'"%

Se'"%

A#t"%

#.,$3,)% /%%,%% )5,,3

#.53%,(% 3$),%% )#,#% U " %o#" /iet" $$D,$% )#$,(% )(,%5

#.#,5,#% 3D%,%% )/,3#

#.#%#,D% )5#,,% ,/,(5

#.#5%,$% ,%5,$% 5),D# U " %o#" Diet" #.5$,,(% 5$3,D% (/,,)

#.,%,,%% )/),D% ,#,D(

$$),#% 3%%,$% 3%,5$

)5/,/% 5,5,5% 35,D(

#.(,5,#% D($,)% )/,3/

42

F.

CRONO>RAMA DE ACTIVIDADES

Feses del 7Go # 7ctividades =evisin de &iteratura 1eleccin del Esta!lo 6olecta de Fuestras de "eces, Brina, ;ieta y &eche ;eterminacin de P en muestras ;eterminacin de 8 en alimento y "eces Escritura de 0esis [ [ [ [ [ [ [ # ( 5 , ) 3 D / $ #% [ ## [ #( [

[ [ [ [ [ [ [ [ [ [ [ [

[ [ [

Feses del 7Go ( 7ctividades =evisin de &iteratura ;eterminacin de P en muestras ;eterminacin de 8 en alimento y "eces Escritura de 0esis Presentacin de E'amen de 0itulacin # [ [ [ [ ( [ [ [ [ 5 , ) 3 D / $ #% ## #(

[ [ [ [ [ [ [ [ [ [ [ '

[ [ [ [ [ [ [

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