Manual de Apuntes QPN 2014

Manual de Apuntes de Qumica de Productos Naturales 4 Edicin, Enero 2014 Dra.
Sonia Yesenia Silva Belmares _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Manual de teora de Qumica de Productos naturales
Contenido
Unidad 1
Tema Pgina Diferenciacin entre metabolito primario y secundario..4 Vas generales del metabolismo en las plantas...5 El porqu de la fitoqumica....7 Funcin metablica. Clasificacin de los productos basada en la estructura qumica.....16 Clasificacin de los productos naturales basada en la taxonoma17 Quimiotaxonoma ..18 Clasificacin biosinttica de los metabolitos vegetales...19 Tcnicas de muestreo, identificacin.......25 Terminologa en la descripcin de una planta...27 Estructura anatmica de limbo de una hoja..29 Familias principales por sus principios activos.30 Pigmentos vegetales.32 Pigmentos en alimentos.....33 Carotenoides...35 Formacin de fitoeno y retinal.36 Carotenoides...38 Antocianinas.40 Betalanas ..42 Flavonoides .43 Estudio de Quinonas..46 Usos......49 Tcnica de obtencin.....49 Extraccin de una benzoquinona....50 Extraccin de una naftaquinona..50 Extraccin de una antraquinona......51 Reacciones coloridas..51 Cromatografa en papel....52 Espectros de absorcin.52 Terpenos y aceites esenciales. Ruta biogentica.59 Clasificacin, estructuras, nomenclatura...60 Obtencin de aceites esenciales.....63 Pruebas para identificacin...64 Pruebas de identificacin de sesquiterpenlactonas..65 Saponinas y sapogeninas, saponinas esteroidales.67 Hidrlisis .....68 Nomenclatura.....69 Ensayo de hemlisis ....70 Caractersticas espectrales...71 2
Manual de Apuntes de Qumica de Productos Naturales 4 Edicin, Enero 2014 Dra. Sonia Yesenia Silva Belmares _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________
Regla de Klyne ...74 Mtodo de Hakomori....75 Distribucin natural........77 Importancia farmacutica de saponinas esteroides.....77 Alcaloides Generalidades.81 Funcin de los alcaloides en las plantas .....84 Propiedades fisicoqumicas....85 Ensayos de reconocimiento.85 Extraccin de alcaloides del opio...86 Clasificacin de los alcaloides.91 Biosntesis de alcaloides .92 Actividad biolgica....99 Tipos de alcaloides .................................104 Clasificacin de alcaloides ....122 Usos medicinales de los alcaloides .....128 Metabolitos derivados del cido shikimico..130 Biognesis del cido cinmico..132 Fenilpropanoides.....133 Plantas que contienen compuestos fenil propanos.......138 Lignanos..145 Algunas plantas que contienen lignanos.139 Biosntesis de Coumarinas ..148 Tcnicas de extraccin de cumarinas 155
Unidad 1.- Diferenciacin entre metabolito primario y secundario
Los compuestos qumicos de las plantas se clasifican de forma general en aquellos llamados metabolitos primarios y metabolitos secundarios, los cuales provienen del metabolismo primario y secundario respectivamente. El metabolismo primario Compromete aquellos procesos qumicos que cada planta debe llevar a cabo cada da para sobrevivir y reproducir su actuacin.
Figura 1.- Metabolismo primario en plantas
Los metabolitos primarios en vegetales se caracterizan por: Tener una funcin metablica directa Ser compuestos esenciales intermedios en las vas catablica (degradacin) y anablica (biosntesis) Encontrarse en todas las plantas Tratarse de carbohidratos, lpidos, protenas, cidos nuclicos o clorofilas
Metabolismo secundario Compromete aquellos procesos qumicos que son nicos para una planta dada, y no son universales.
Figura 2.- Metabolismo secundario
Es la qumica que conduce a la formacin de un producto natural. Los precursores qumicos comunes pueden conducir a resultados diferentes, por lo tanto la qumica de productos naturales es usualmente diferente de una planta a otra. Los metabolitos secundarios no parecen ser necesarios para la supervivencia de las plantas, pero pueden suponer una ventaja competitiva considerable. Caractersticas, de los metabolitos secundarios No tener funciones metablicas directas aparentes. Ser importantes para la supervivencia e interaccin con el entorno. Presentar diferente distribucin en el reino vegetal. Ser clasificados como secundarios basndose en su estructura, ruta biogentica o tipo de distribucin.
A lo largo de la historia, los metabolitos secundarios de las plantas han sido utilizados por la humanidad y existen cuatro clases de ellos que son significativos para el ser humano: Terpenoides Alcaloides y compuestos nitrogenados relacionados Fenilpropanoides y compuestos fenlicos relacionados
Flavonoides Importancia de los productos farmacuticos derivados de plantas
Producto Ajmalicina Artemisinina Ajmalina Acinitina Berberina Camptotecina Capsaicina Castanospermina Codeina Colchicina Digoxina Diosgenina Elipticina Emetina Forskolina Ginsenosidas Morfina Podofilotoxina Quinina Sanguinarina
Uso Antihipertensivo Antipaldico Enfermedad Intestinal Antitumoral
Especies de planta Cath. Roseus Artemisia annua Ra. Serpentina Acotinum spp. C. japonica
Costo US $ por Kg 37,000 400 75,000 n/a 3250 432,000 750 n/a 17,000 35,000 3000 1000 240,000 1500 n/a n/a 340,000 n/a 500 4,800 6
Camptotheca acuminata Contrairritante Ca. Frutescens Inhibidor de Castanospermum glucosa australe Sedante P. somniferum Antitumoral Colchium autumnale Estimulante para Di. Lanata el corazn Precursor de Dioscorea esteroides deltoidea Antitumoral Orchrosia elliptica Cephaclis ipecaccuanha Asma bronquial Coleus forskolii Tnico para la Panax ginseng salud Sedante P. somniferum Antitumoral Podophyllum petalum Antipaldico Cinchon ledgeriana Antiplaca Sanquinaria canadensis
P. somniferum Shiconina Antibacterial L. erythrorhizon 4500 Taxol Anticancergeno Taxus brevifolia 600,000 Vincristina Antileucmica Cath. Roseus 2,000,000 Vinblastina Antileucmica Cath. Roseus 1,000,000 n/a no est disponible. Adaptado de Ravishankar y Ramachandra Rao (2000)
1.1 El porqu de la fitoqumica. Fitoqumica: Permite aislar e identificar los principios activos de numerosas plantas con importante actividad biolgica. Fitoqumicos: Son sustancias biolgicamente activas que se encuentran en los alimentos de origen vegetal (frutas, vegetales, legumbres, granos enteros, nueces semillas, hongos, hierbas y especias), no son nutrientes esenciales para la vida, pero tiene efectos positivos en la salud.
Importancia de la fitoqumica Por el potencial que representan los metabolitos de origen vegetal, las investigaciones no solo se han dirigido a la elucidacin de estructuras qumicas y evaluacin de su actividad biolgica mediante bioensayos, sino hacia la obtencin por cultivo in vitro.
Productos Naturales aplicados a la cosmetologa
Porcentajes de productos naturales y derivados con aplicacin medica De los 520 nuevos frmacos aprobados para su uso entre 1983 y 1994, 39%. El 60-80% de los antibiticos y los productos anticancergenos. Productos naturales como frmacos De los 870 frmacos aprobados entre 1981 y 2002, 44% son productos naturales o derivados.
Posibles fuentes naturales de nuevos frmacos 6000 especies de bacterias 1.5 millones de hongos (estimado) 10 millones de macrofauna marina 40,000 especies de algas 30 millones de insectos
REINO VEGETAL Existen entre 200,000 y 500,000 plantas superiores y 200,000 plantas inferiores en el mundo . Cerca del 90% de toda esta flora no ha sido objeto de estudios biolgicos fitoqumicos ni farmacolgicos. En la actualidad se conocen alrededor de 350,000
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Plantas como fuentes de nuevos frmacos nicamente entre el 5-15% de todas las plantas (200-750,000) han sido estudiadas en cuanto a su produccin de metabolitos bioactivos. Existen aproximadamente 35,000 especies de plantas medicinales consideradas como posibles fuentes de nuevos frmacos. Se estiman 1 milln de diferentes metabolitos esperando ser aislados. Nueve de los 20 frmacos no-proteicos mas vendidos en 1999 son productos naturales o derivados de ellos, con un volumen de ventas de 16,000 millones USD. El mercado internacional de plantas usadas en medicina tradicional es de 1,500 millones USD. Taxol ha sido el ltimo producto natural vegetal patentado como frmaco y en produccin comercial (90s). Fue descubierto en los 60s e identificado en 1971.
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El total de la flora fanergama de Mxico se calcula en forma aproximada en 22,000 especies 220 familias 2,410 gneros BIODIVERSIDAD EN MXICO Mxico cuenta con aproximadamente 3000 especies consideradas como plantas medicinales. Diversos factores econmicos y sociales estn llevando a la destruccin de estos recursos. El estudio de estos recursos puede contribuir a la proteccin de los ecosistemas.
Algunos beneficios de los fitoqumicos para la salud Proteccin contra el cncer: Detoxificacin de drogas, toxinas, carcingenos y mutgenos, neutralizan radicales libres, inhiben enzimas que activan carcingenos e inducen a enzimas detoxificadoras de los mismos. Proteccin cardiovascular: evitan oxidacin de LDL (protegindolas), reducen la sntesis y utilizacin de colesterol y afectan la presin sangunea y coagulablidad. Otros beneficios: retardo del envejecimiento y sus enfermedades asociadas.
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Adems, confieren color, aroma y sabor a los alimentos. Los productos naturales son compuestos formados esencialmente por carbono, obtenidos de fuentes naturales (flora, fauna, tierra, etc.) y que generalmente poseen muy diversas e interesantes propiedades. Algunas de las aplicaciones ms relevantes de los Productos Naturales Orgnicos son su utilizacin como:
Figura 3.- Combustibles, plsticos, grasas, jabones, azcares obtenidos a partir de productos vegetales.
Frmacos: Producto que se administra con fines curativos. Por ejemplo: sedantes, antiinflamatorios, diurticos, antivirales, hepatoprotectores, etc...
Reguladores: Dopana que se usa como frmaco para la enfermedad de Parkison, slo el LDopa es activo.
Antibiticos: Producto qumico capaz microorganismos dainos. de inhibir el crecimiento e incluso destruir
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Analgsicos: Frmaco que alivia el dolor sin producir prdida de conciencia. Los analgsicos forman un gran grupo: 2 3 4 5 Derivados del opio (obtenido"Papaver sommiferum" con un 25% de alcaloides) Morfina (potente analgsico, muy txico y produce dependencia) Codena (Hipntico y antitusgeno, no produce hbito) Herona (derivado sinttico obtenido por acetilacin de la morfina, buen analgsico con menos depresin que la morfina pero con mayor adiccin)
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No opiceos Aspirina, que deriva de la Slicilina (glicsido de la corteza del sauce usado antiguamente como analgsico). Especie de la cual se obtiene Salix alba Paracetamol Ibuprofeno
Analgsicos de aplicacin general y tpica Hidrocortisona y derivados
hidrocortisona
prednisolona
prednisona
Anestsicos generales y locales en bajas dosis.
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Unidad 2 Funcin metablica Clasificacin de los productos naturales basada en la estructura qumica Se trata de una clasificacin formal basada en el tipo de esqueleto molecular:
Compuestos grasos o alifticos de cadena abierta: cidos grasos, azcares y gran cantidad de aminocidos. Compuestos alicclicos o cicloalifticos: terpenoides, esteroides y algunos alcaloides. Compuestos aromticos o benzoicos: fenoles, quinonas, etc. Compuestos heterocclicos: alcaloides, flavonoides, bases de cidos nuclicos
Muchos productos naturales estrechamente relacionados pertenecern a ms de una clase.
Clasificacin de los productos naturales basada en la actividad fisiolgica Entre las variaciones estructurales encontradas en esteroides, los que exhiben actividad cardiotnica se caracterizan en primer lugar por una unin cis entre los
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ciclos, en segundo lugar por la presencia de un resto de azcar en C-3 y, en tercer lugar, por la existencia de una lactona.
Clasificacin de los productos naturales basada en la taxonoma Esta clasificacin se basa en estudios morfolgicos de plantas, o sea en la taxonoma vegetal. Muchos constituyentes de plantas tales como alcaloides e isoprenoides han sido aislados a partir de especies, gneros, o familias especficas de plantas. Por ejemplo, el opium de Papaver somniferum contiene veintitantos alcaloides biosintetizados a partir del precursor 1-bencilisoquinolina por acoplamiento oxidativo.
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QUIMIOTAXONOMA O QUIMIOSISTEMTICA Tambin llamada quimiosistemtica, es la rama de la ciencia que usa los constituyentes fitoqumicos como marcadores para conocer la evolucin y la clasificacin de los seres vivos. Ventajas del conocimiento quimiotaxonmico Elegir plantas interesantes para su estudio Seleccionar mtodos de trabajo Elaborar hiptesis sobre posibles compuestos Fuentes de materias primas Caminos de sntesis
Posicin de la quimiotaxonoma Los estudios qumicos de los vegetales se realizan cada vez con mayor precisin y rapidez en especial cuando se enfocan hacia un tipo particular de sustancias.
Problemas enfrentados por la quimiotaxonoma 1.- Los caracteres qumicos varan entre los miembros de un mismo grupo (aparecen en 20-60%) 2.- Presencia o ausencia de ciertos caracteres qumicos 3.- Variacin rgano rgano 4.- Variacin intraespecfica de sus componentes 5.- Edad del material vegetal
Metabolitos secundarios de inters quimiotaxonmico Aminocidos no proticos (ms de 100) ej.. Canavalina (similar a la Larginina) Betalanas: pigmentos nitrogenados ej.. Betacianinas Alcaloides: sustancias bsicas nitrogenadas fisiolgicamente activas ej. narcotina Terpenoides: hidrocarburos compuestos oxigenados derivados del cido mevalnico: ej. aceites esenciales (fam. pinaceae), esteroides (saponinas) pueden estudiarse con precisin en cantidades de mg, extensa distribucin en vegetales superiores.
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Clasificacin biosinttica
Clasificacin biosinttica Los metabolitos secundarios de las plantas se dividen en 3 grandes grupos: 1) Terpenoides Todos los terpenoides, del metabolismo primario as como los ms de 25,000 metabolitos secundarios, son derivados del compuesto IPP (Isopentenil difosfato o "5-carbono isopentenil difosfato") que se forman en la va del cido mevalnico. Ej: aceites esenciales. Terpenoides
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2) Compuestos fenlicos como los fenilpropanoides y sus derivados. Los ms de 8,000 compuestos fenlicos que se conocen estn formados por la va del cido shikmico o por la va del malonato/acetato.
3) Compuestos nitrogenados o alcaloides. Los alrededor de 12,000 alcaloides que se conocen, que contienen uno o ms tomos de nitrgeno, son biosintetizados principalmente a partir de aminocidos. Ejemplos: cocana, la morfina, la atropina, la colchicina, la quinina, y la estricnina.
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Clasificacin biosinttica Segn su va biosinttica y estructura qumica se pueden dividir en: Betalanas
Pigmentos rojos y amarillos que estn presentes solamente en los Caryophyllales excepto Caryophyllaceae y Molluginaceae. Cumplen funciones de atraccin de polinizadores y dispersores, y probablemente tienen funciones adicionales, como absorcin de luz ultravioleta y proteccin contra el herbivorismo.
Glucosinolatos
De ellos se derivan los aceites de mostaza, al ser hidrolizados por las enzimas myrosinasas. Qumicamente son glucsidos que contienen J-D-Thioglucosa.
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Glucsidos cianogenticos
Cumplen funciones de defensa, ya que al ser hidrolizados por algunas enzimas liberan cido cianhdrico, proceso llamado cianognesis. Ejemplos: Glucsidos cianogenticos ciclopenteroides, glucsidos cianogenticos derivados de la leucina y tirosina.
Poliacetilenos
Grupo grande de metabolitos no nitrogenados, formados por la unin de unidades de acetato por la va de los cidos grasos. Se encuentran en algunos grupos emparentados de familias de astridas.
Antocianinas y otros flavonoides. Son compuestos fenlicos, hidrosolubles, presentes en las vacuolas celulares de las plantas, que se sintetizan a partir de fenilalanina y malonilCoA. Todos los flavonoides comparten la va biosinttica central, pero los productos finales son muy variados entre especies de plantas. Se encuentran en todas las embriofitas. Tienen funciones de proteccin contra la luz ultravioleta, defensa ante el herbivorismo, pigmentacin, entre otros.
Antocianinas
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Flavonoides ms conocidos, pigmentos de las flores y hojas de muchas plantas (rojos y azules), muy solubles en agua. Son heterosidos y derivan de las agliconas llamadas antocianidinas, derivadas de 2 fenilbenzopirilo. Los azucares que forman parte de su estructura son: glucosa, ramnosa, galactosa, arabinosa, xilosa. Puede haber antocianidinas aciladas con algun OH de los azucares esterificados por cido actico o cidos derivados del cinmico. Puede haber mono, di, tri heterosidos, etc.
Flavonoide Proviene del latn flavus, "amarillo, es el trmino genrico con que se identifica a una serie de metabolitos secundarios de las plantas. Son sintetizados a partir de una molcula de fenilalanina y 3 de malonil-CoA, a travs de lo que se conoce como "va biosinttica de los flavonoides", cuyo producto, la estructura base, se cicla gracias a una enzima isomerasa. La estructura base, un esqueleto C6-C3-C6, puede sufrir posteriormente muchas modificaciones y adiciones de grupos funcionales, por lo que los flavonoides son una familia muy diversa de compuestos, aunque todos los productos finales se caracterizan por ser polifenlicos y solubles en agua Flavonoides
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La estructura base de los flavonoides tiene el esqueleto de una chalcona, y la accin de la enzima isomerasa la convierte en una flavanona. Flavonoides
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UNIDAD 3. TECNICAS DE MUESTREO DE PLANTAS Existen varias tcnicas de muestreo de vegetacin que utilizan la medida de la distancia entre plantas o la distancia entre plantas y un punto elegido al azar para conocer la distribucin espacial de las plantas y su abundancia en un rea. La ventaja principal de estimar nmeros de individuos por su distancia media, en vez de contarlos en cuadrados o bandas, es que no se necesita delimitar zonas, lo cual, sobre todo en los estratos arbreos puede resultar muy costoso por el tiempo requerido. Una de las tcnicas ms utilizadas con base en las medidas de la distancia es el mtodo de los Cuadrantes Centrados en un Punto. Esta es til para muestrear comunidades en las que los individuos se encuentran relativamente espaciados (generalmente comunidades en las que dominan rboles o arbustos).
PROCEDIMIENTO En el procedimiento se localizan puntos al azar dentro del rea de muestreo. Sin embargo, en muchos casos es conveniente escoger puntos a lo largo de una serie de lneas transecto que crucen el rea que se describe, utilizando para esto la cinta mtrica para establecer puntos equidistantes. Cada lnea transecto ser la directriz. El punto localizado se seala con una estaca. La zona que rodea al punto de muestreo se divide en 4 partes iguales o cuadrantes. Estos no tienen lmites. Se asigna a cada punto de muestreo y cuadrantes nmeros y letras respectivamente, de manera que pueda formar series identificables en los clculos. En cada cuadrante se busca el rbol ms cercano al punto central, se identifica la especie y se mide la Distancia entre este y el punto. Se mide tambin el Dimetro del tronco en cm a la altura del pecho (DAP o tambin conocido como dimetro normal) con la cinta diamtrica; si son varios tallos se suman sus medidas. Esto significa que se est midiendo el rea Basal (A.B.), dato del individuo para conocer su Dominancia espacial en la comunidad. Una vez obtenidos los valores se pueden calcular los siguientes parmetros:
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Distancia total = suma de las distancias de todos los individuos. Distancia media= promedio de las distancias de todos los individuos. rea media = (distancia total / nmero de individuos muestreados)2 Densidad absoluta total (# de rboles por unidad de rea) = Unidad de rea deseada a estimar / Distancia media 2 Dominancia absoluta = A.B. media de la especie x Nmero de rboles de la especie donde A.B. = rea basal = Dimetro del tronco (D.A.P.) Frecuencia absoluta = (Nmero de puntos con la especie / Total de puntos muestreados) x 100 Densidad relativa = (Nmero de individuos de la especie / Nmero de individuos de todas las especies) x 100 Dominancia relativa = (Dominancia absoluta de la especie / Dominancia absoluta de todas las especies) x 100 Frecuencia relativa = (Frecuencia absoluta de la especie / Frecuencia absoluta de todas las especies) x 100 Valor de importancia (V.I.) = Densidad relativa + Dominancia relativa + frecuencia relativa. IDENTIFICACIN DE PLANTAS La identificacin de un vegetal es indispensable en todo trabajo Qumico al respecto. Para llevar a cabo la identificacin se siguen los siguientes pasos: Se examina ordenadamente las caractersticas morfolgicas ms sobresalientes a medida que se va descendiendo en la escala de clasificacin. Se observan los detalles ms minuciosos pasando a caracteres microscpicos y fisiolgicos, hasta llegar a la especie en que todos los miembros son prcticamente iguales. Si se estudia cuidadosamente se vern variantes que deben tomarse en cuenta, los subdividen aun ms hasta llegar a individuo.
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JERARQUAS TAXONMICAS
En seguida se menciona el botnico que clasific la planta, Linneo, Bonpland. La unidad bsica de toda clasificacin es la especie, sin embargo, por ser un sistema artificial, se le ha dividido en subespecie-variedad
TERMINOLOGA EN LA DESCRIPCIN DE UNA PLANTA Tallos: De aspecto muy variado en tamao (herbceo, arbusto, rbol) Estructura: (estolones, rizomas, tubrculos, cortificados y bulbos) Hojas: en la mayora de los tallos las hojas salen de los nodos, segn la forma y arreglo caracterstico de cada especie (simples y compuestas), formadas por varios foliolos(Pirul). Por su arreglo en el nodo pueden se alternas, una por nodo; si en pares por nodo opuestas; si hay 3 o ms hojas en el nodo, verticiliadas. Las partes principales de una hoja son: Base foliar en contacto con tallo y rama, el peciolo (rabillo de la hoja y la lmina o limbo). Detrs del peciolo debe haber laminillas (estipulas).
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INFLORESCENCIAS Pueden ser en forma de: Espiga Racimno Pancula Cabeza Umbela Corimbo Racimo
HOJAS Suele ser caracterstica de las especies, aunque con grandes variaciones. Las formas tpicas de hoja de las plantas vasculares son: Hoja acicular. Es la hoja linear, puntiaguda y por lo comn, persistente, como las del pino (en la imagen, letra b). Hoja aserrada. Aqulla cuyo borde tiene dientes inclinados hacia su punta, como las de la violeta (en la imagen, letra n).
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ESTRUCTURA ANATMICA DEL LIMBO DE UNA HOJA
PARTES DE UNA FLOR
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FRUTO Ovario desarrollado y maduro. Los frutos tpicos constan de un epicarpo, mesocarpo y endocarpo.
FAMILIAS PRINCIPALES POR SUS COMPUESTOS ACTIVOS Las familias vegetales ms estudiadas, pertenecen a las plantas vasculares, Fanergamas, embriofitas, Siphonogamas, segn Engler, traqueofitas, segn Tippo, stas se dividen en 2 clases: a) Gimnospermas: grupos de rboles o plantas leosas semidesnudas. b) Angiospermas: plantas leosas y herbceas; trepadoras semiencapsuladas. Los de mayor importancia son las angiospermas, que se dividen en 2 grupos las monocotiledneas y las dicotiledneas.
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OBSERVACIN AL COLECTAR EJEMPLARES a) Tomar fotografas b) Anotaciones sobre localidad, kilometraje, sealando latitud, longitud y altitud. c) Indicar si es rbol, arbusto o hierba d) El aspecto de las hojas e) La distribucin de las flores f) Caractersticas ecolgicas de las plantas g) Caractersticas cuantitativas Ejemplo
Notas de campo Fecha:________________ Colecta No.________ Catlogo No.________ Localidad: Altitud: Tipo climtico: Precipitacin: Caractersticas topogrficas y del suelo: Tipo de vegetacin: Plantas dominantes: Plantas colectadas: Colectores: Otras notas:
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UNIDAD 4. PIGMENTOS VEGETALES El color es una propiedad de la materia relacionada con el espectro de la luz y que puede ser medida fsicamente en trminos de su energa radiante o intensidad y por su longitud de onda.
Color la parte de energa radiante que el humano percibe mediante las sensaciones visuales que se generan por la estimulacin de la retina del ojo (Badui, 1993). Pigmentos sustancias qumicas que imparten color a otros materiales por el efecto ptico de la refraccin de la luz del sol. sustancia en polvo que cuando se mezcla con un lquido vehculo imparte color a una superficie (Wani y col., 2004). Pigmentos en alimentos Respecto a Mxico la demanda de alimentos es favorecida en aquellos con color: amarillo 55%, rojo 25% y colorres restantes (blanco, verde, azul, negro, etc) Tafoya y col, 1999 Clasificacin
Pigmentos
Sintticos
Naturales
Orgnicos
Inorgnicos
Orgnicos
Minerales
Animales
Vegetales
Microbianos
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Pigmentos en alimentos -Pigmentos vegetales: CLOROFILA CAROTENOIDES: carotenos, xantofilas ANTOCIANINAS BETALEINAS
*Clorofila Pigmento verde, distribuido en todas las plantas este pigmento es responsable del proceso de fotosntesis. En la naturaleza los ms comnmente encontrados son las clorofila a y b.
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Espectro de la clorofila
Estructura porfiridinica con un anillo pirrol con un tomo de magnesio, que puede ser removido por hidrlisis cida para dar faeofilina. Contiene una cadena de 20 carbonos de fitol, un alcohol responsable de la hidrofobicidad de la molcula.
CH2 CH3
H3C N H3C
CH3 N O CH3 CH3 CH3 H3C
Mg
N O O H3C O O CH3 H3C
*Carotenoides
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Biognesis de carotenoides: Son tetraterpenos originados por las vas de mevalonato o de la desoxyxilulosa fosfato y la biognesis de los diferentes tipos de ello se hace a travs de un complejo esquema general. La primera etapa en la va que conduce a los carotenoides es la formacin de fitoeno por la enzima fitoeno sintetasa y a partir de aqu, a travs de otros intermedios, que son isomerizados hasta llegar al todo-trans licopeno. Desde este carotenoide todo abierto, se producen ciclaciones y funcionalizaciones que conducen a otros carotenoides como alfa, y delta-caroteno, lutena, crocetina, etc. La formacin de retinal, vitamina A, responsable del proceso de visin, tiene lugar a partir los carotenoides por intervencin de una beta-caroteno monooxigenasa que divide a la molcula de 40 carbonos mediante una oxidacin central. Carotenos
Formacin de fitoeno
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Formacin de Retinal
Isoprenoide= Terpenoide
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Carotenoides El ms abundante es el -caroteno, va en tonalidades de amartillo, naranja y rojo, adems de ser el precursor de la vitamina A, Tiene actividad antioxidante, ayuda en la prevencin del cncer y otras enfermedades. Es usado en alimentos funcionales y bebidas nutracuticas.
Estructura del -caroteno

H3C CH3 H3C H3C CH3 CH3 CH3 CH3 H3C H H
H3C
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Licopeno Antioxidante
H3C H3C CH3 H3C H3C H3C H3C CH3
CH3 CH3
Xantofilas
-Luteina
Metabolitos de carotenoides 38
Ioninas
*Antocianinas Compuestos hidrosolubles, glucsidos, antiocianidina (aglucona), un azcar Carbohidratos: glucosa, ramnosa, galactosa, xilosa, arabinosa y ocasionalmente la gentiobiosa, rutinosa y la soforosa.
R3
-
OH HO O
+
R5 O azcar
-
OH
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Contenido de antocianinas Alimento Grosella negra chokeberry Berenjena Naranja Mora vaccinium Arndano Cereza redcurrant Uvas rojas Vino tinto Estructura Antocianinas (mg/ 100 g) 190-270 200-1000 750 ~200 ~115 80-420 10-60 350-400 80-420 30-750 24-35
Anthocyanidin Aurantinidin Cyanidin Delphinidin Europinidin Luteolinidin Pelargonidin Malvidin Peonidin Petunidin Rosinidin
R1 -H -OH -OH -OCH3 -OH -H -OCH3 -OCH3 -OH -OCH3
R2 -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH
R3 -H -H -OH -OH -H -H -OCH3 -H -OCH3 -H
R4 -OH -OH -OH -OH -H -OH -OH -OH -OH -OH
R5 -OH -OH -OH -OCH3 -OH -OH -OH -OH -OH -OH
R6 -OH -H -H -H -H -H -H -H -H -H
R7 -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OH -OCH3 40
-Biosntesis Fenilalanina cido cinmico
Alcohol coniferlico
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*Betalainas Estos pigmentos son divididos en dos grupos: betacianinas y betaxantinas; encontradas enel betabel. Estos pigmentos son estables a pH de 46; poco sensibles al oxgeno y relativamente lbiles al calor, sensibles a la luz, y usados en alimentos ricos en fibra y protenas. Betacianina: pigmento rojo obtenido a partir del betabel (Beta vulgaris), es el mayor de los pigmentos encontrado en este alimento.
O-glucosa
HOOC
OH N
+
HOOC
N H
COOH
Betaxantina: Es un pigmento amarillo, obtenido a partir del betabel amarillo ( Beta vulgaris var. lutea). El mayor componente es la vulgaxantina I y II.
O R
-OOC N
+
-OOC N H COO-
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*Flavonoides (antocianinas) Pigmentos vegetales con esqueleto carbonado C6-C-8-C6 Se encuentran ampliamente distribuidos en las plantas, tanto libres como glicsidos, contribuyen a dar color a las flores, frutos y hojas. Flavonas localizadas en alas de mariposa por ingestin de material vegetal. Ejemplos: Flavona, aurona, chalcona, flavona, flavononol, flavonol, flavandiol-3,4 (leucoantocianidina), antocianidina, catequina, isoflavona y neoflavona.
Otras fuentes de pigmentos Pigmentos animales Pigmento producido por la hembra de un insecto (cochinilla) Dactylopius coccus, que es un parasito de cactaceas, este produce un pigmento rojo intenso antraquinona, el principal pigmento usado es el cido carminico. Es empleado para colorear confitera, dulces, salsas, etc.
CH 2OH HO HO OH HO OH O O OH O CH 3 COOH OH
Pigmentos Microbianos Monascus spp. Producido en fermentacin de arroz en oriente y usado como aditivo en alimentos
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Levaduras Phaffia rhodozyma Produccin de un pigmento rojo la astaxantina, AstaXin, comercializada por Igene Biotechnology Inc., Columbia, Maryland; Astaxanthin of Mera Pharmaceuticals Inc.
Extraccin de flavonoides -Extraccin con metanol y cromatografa -Extraccin con etanol y separacin con brax -Extraccin y separacin con sales de plomo -Extraccin con etanol
Espectros de absorcin de flavonoides Los flavonoides poseen absorciones caractersticas al UV, sujetas a desplazamientos pronosticables cuando se les aaden soluciones de cido brico tricloruro de aluminio, acetato de sodio, etc.
Bandas de absorcin ultra violeta Flavonoides 200-270nm Flavononas 250-300nm Flavonas y flavonoles 330-375nm Leucoantocianinasy catequinas 280nm Isoflavonas 250-290 nm Absorcin de Flavonoides al infrarrojo Hidroxilos fenlicos absorben a 3,300-4,140 cm-1. Grupos carbonilo 1,660-1,650 en flavonas, flavonoles e isoflavonas 1,640 en flavononas Antocianinas dan seales intensas a 3,200-3,100 y 1,720-1,700, y ancha a 1,0201,080 cm-1. Espectros de resonancia Son muy distintos y la comparacin de un flavonoide con los reportados simplifica su identificacin. Espectros de masa Ofrecen una fragmentacin muy caracterstica que ayuda a su identificacin. 44
Degradacin de flavonoides Hidrlisis con metanol-H2SO4 (6:1) Degradacin de flavonoides y limonoides en zumos ctricos por naringinasa y limonoato deshidrogenasa inmovilizadas. Incidencia en las caractersticas antioxidantes en los zumos Separacin de flavonoides Cromatografa en papel whatman No.3, whatman No.1 revelados con cido frmico-HCl 2N (1:1) y CH3COOH-HCl-H2O (30:3:10) respectivamente. Separacin de pigmentos vegetales: -Mtodo de cromatografa sobre papel Los cloroplastos poseen una mezcla de pigmentos con diferentes colores: clorofila-a (verde intenso) clorofila-b (verde) carotenos (amarillo claro) xantofilas (amarillo anaranjado) en diferentes proporciones Aplicaciones en la industria Los isoflavonoides pueden actuar como fitoestrgenos, lo cual ha generado un gran inters en el uso de estos compuestos para tratar desrdenes hormonales en humanos.
45
UNIDAD 5. QUINONAS Diacetonas insaturadas, que por reduccin, se convierten en polifenoles , los que fcilmente las regeneran por oxidacin. Contribuyen a la pigmentacin de numerosos vegetales y de algunos animales. Ejemplos: vitamina K, ubiquinona (coenzima Q) y plastopquinonas. Localizacin En todos los seres vivos Angiospermas Hongos Vegetales unicelulares Clasificacin Por el sistema aromtico que dan al reducirse, se les puede dividir en benzoquinonas (a), naftoquinonas (b), antraquinonas(c), fenantroquinonas (d). Si los grupos cetnicos estn continuos se les llama orto Si estn separados por un grupo vinilo para. (-C=C-) o-benzoquinona(color rojo) p-benzoquinona(color amarillo)
Se han encontrado con frecuencia en hongos a Timoquinona

O H3C CH O CH 3
O O
b Lawsona
O OH
c Alizarina
O OH OH
d Denticulatol
CH 3
CH 3 O OH O
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Rubia tinctorum utilizada para teir fibras Lawsonia alba (hojas de hena) lawsona y alizarina Ruibarbo antraquinonas con principio purgante Hongos benzoquinona Penicililum spinulosum espinulosina
O HO H3 C O CH3 OH
Amanita muscaria muscarufina

O HO H3 C O CH3 OH
Pereza adnata perezona (cido pipitzaico) antiparasitario

O CH 3 CH H3C O H3C CH 2
OH CH 2 HC CH 3
Embelia ribes embelina antiparasitario

O HO C11 H23 OH O
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Cloroplastos plastoquinonas difieren en longitud de su cadena isoprenoide

O H3 C CH3 H3 C O (CH 2CH=CCH2)nH n=6,7,8,9
Mitocondrias ubiquiononas
O H3CO H3CO O CH3 CH 3 (CH 2CH=C CH 2)nH n=6,7,8,9
Myrisinaceae hidroxibenzoquinonas Erizos de mar naftoquinonas (colorean de amarillo o rojo diversos tejidos)
Usos *Tintoreas *Purgantes
b Lawsona
O OH
c Alizarina
O OH OH
Ubiquinona
El lapacol (l), coloreade amarillo algunas maderas (Tecoma sp) y otras bignonceas. La alkannina (m), se extrae de las races de Alkanna tinctoria. La plumbagina (n), (comn en Plumbago y Drosera sp.) y la juglona (o), en 48
ocasiones, se encuentran como glicsidos de su forma reducida. La dunonina (p), extrada de las hojas, tallo y flores del Streptocarpus dunnii es un ejemplo de una orto naftoquinona.
O OH CH 3 CH 2 CH O (l) lapacol CH 3
OH
OH CH 2 CH C
O CH3
OH
H3C
CH 3
(m) alkannina
OH O (n) plumbagina
O
O
O CH 3 CH 3 O
OH
CH 3 (p) duniona
(n) junglona
Antraquinonas Grupo ms numeroso de quinonas Estn hidroxiladas en C1 y C2 y con frecuencia estn presentes en forma de glucsidos, los que se hidrolizan durante su aislamiento. Ejemplo: Alizarina, se encuentra como un cido 2-primversido (c. rubertrico) Biosntesis Ha sido estudiada y se les considera como acetogeninas, en particular las antraquinonas y naftaquinonas. Las benzoquinonas pueden a veces provenir del cido shikimico, unido en ocasiones al cido mevalnico. Tecnicas de Obtencin (Aislamiento) Las p-benzoquinonas no hidroxiladas y algunas naftaquinonas pueden arrastrarse con vapor o extraerse con ter, benceno, o disolventes no polares. Las hidroxiladas se extraen con soluciones acuosas de bicarbonato o carbonato de sodio. Las bases fuertes en presencia de aire favorecen su descomposicin oxidativa. 49
Las o-benzoquinonas no son arrastrables con vapor. Las antraquinonas pueden extraerse con solventes con polares, pero cuando estn como glucsidos con agua, etanol o mezclas de ambos. Al separar antronas o antranoles debe evitarse el contacto de sus soluciones con aire, especialmente en soluciones alcalinas pues fcilmente se convierten en antraquinonas, diantronas y poliantronas. Los extractos con glucsidos se concentran a presin reducida. Los cristales obtenidos se purifican con cristalizaciones repetidas en acetonaagua. Los glicsidos se pueden hidrolizar al calentarlos 1-2 horas a 70C con cido actico diludo o HCl al 5% en etanol. Concluida la hidrlisis, se aade una mezcla de etanol-benceno 1:1 y luego se diluye con HCl al 5%. Las agliconas se pasan a la fase de benceno. Se separan y purifican por cromatografa en disolventes dbiles, xido de magnesio, fosfato de calcio policaprolactama o por extracciones y cristalizaciones selectivas. Perezona (benzoquinona) Se extraen a reflujo con hexano, de la raz seca y molida de Perezia cueranacana. Al concentrar se separa la perezona, se recoge y se recristaliza con acetato de etilo-hexano, (cristales anaranjados, pf 102-103). Extraccin de una benzoquinona Se extraen con benceno de rizomas secos y triturados de Ardidia sieboldi. El benceno se destila. El residuo se disuelve en solucin helada de NaOH al 5 %. La solucin alcalina se extrae con ter y se destila el extracto etreo. El residuo se separa por ccd por lo que se mezcla con hexano y se percola en una columna de fosfato de calcio (CaHPO4). Al eluir hexano-benceno se obtiene embelina, pf 138-140 . El benceno eluye la 2-hidroxi-5-metoxi-3-pentadecenil,tridecil)-benzoquinona, pf 66-67. Extraccin de una naftaquinona Se extraen con hexano en soxhlet, se pueden extraer de la raz seca de Plumbago pulchella. La solucin se concentra y luego se deja en un refrigerador. Los cristales amarillos se recogen y se recristalizan en metanol-agua. La plumbagina funde an75-76.
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Extraccin de una antraquinona Se extraen en un soxhlet, con ter de petrleo, benceno, metanol, se pueden obtener de la raz de Galium verum. La solucin en ter de petrleo, se sacude 12 veces con porciones de 200 ml de NaCO3 2 N, la solucin alcalina se acidula con HCl 2 N, el precipitado anaranjado, se purifica por cromatografa en gel de slice, dando alizarina, pf 290-291 y purpurina, pf 263-264. La solucin en ter de petrleo se extrae, en atmsfera de N 2, con NaOH 1N (2x150ml). Al acidular se obtienen cristales anaranjados. La fase en ter de petrleo se evapora y el residuo disuelto en cloroformo se separa por cromatografa en capa preparativa y se obtiene 2-metoxiantraquinona, pf 196-197, 1-etoxi-2-metil antraquinona, pf 154-160. Reacciones coloridas p-benzoquinonas y algunas 1,4-naftaquinonas dan colores azules o violetas en acetato de etilo y amoniaco, y tambin con una gota de solucin etanlica al 0.2% p-nitrofenilacetonitrilo y 1 gota de NaOH 0.1N. Las soluciones bencnicas de las 1,4-naftaquinonas son amarillas, colorean de rojo las soluciones alcalinas. Las soluciones bencnicas de las de las 1,2 naftaquinonas son rojas y pasan a las soluciones alcalinas con un color azul violceo. Las naftoquinonas que carecen de OH en C2 dan colores rojo-azul con el oaminotiofenol en metanol seguido por una gota de HCl concentrado. Si hay OH no reaccionan con este reactivo pero dan colores similares al tratarse con o-fenilendiamina. Las hidroxiantraquinonas dan colores diferentes al calentarse 5 min con la solucin metanlica al 0.5 % de acetato de magnesio. Las quinonas dan colores rojos o purpuras con alcalis concentrados y con H 2SO4 lo que puede usarse para identificarlas. La presencia de antraquinonas y naftaquinonas se puede averiguar con la reaccin de Bontrger, en ella se hierve unos 10 min, un poco del material con KOH 2-5 %. Se enfra la solucin, se acidula y se extrae con benceno. La capa de benceno se separa y se sacude un poco con la solucin de KOH. Si la fase de benceno se decolora y la alcalina se pone roja hay quinonas.
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Cuando hay derivados de antrona, la fase alcalina puede quedar amarillenta con fluorescencia verde, para que se enrojezca se le aade un poco de perxido del 23% Las soluciones al 5% de hidrosulfito de sodio (ditionito de sodio) decoloran la solucin o suspensin, el color se regenera con unas gotas de H2O2 al 30 %. Cromatografa en papel En el estudio de las plastoquinonas se usa papel whatman No. 1, invertido con una solucin al 5% de vaselina en ter de petrleo, fase mvil es dimetilformidaagua 97:3. Las quinonas mostraron fluorescencia violeta al verlas con luz ultravioleta. Las hidroxiantraquinonas usando como disolvente ter de petrleo (p. eb 45-70) saturado con metanol al 97 %. Para hacerlas visibles se us una solucin metanlica al 5% de acetato de magnesio, calentndose el papel a 90 durante 5 min. Cuando los hidroxilos estn meta en la coloracin anaranjada, en para es prpura y en orto, violeta. Para ccd de alquil p-benzoquinonas se han usado placas de slica gel G impregnadas con solucin acuosa al 3 % de cido oxlico, corriendo con bencenoacetato de etilo (101:2) o benceno y amoniaco como agente cromognico. Tambin se ha usado hexano-acetato de etilo (85:15). Rociando las placas con solucin de peuco azul de metileno (10 mg de azul de metileno en 10 ml de etanol + 0.1 ml de acido actico + 0.1 g de polvo zinc, sacudir. Las benzo y naftaquinonas dan manchas azules en 5 min todo se pone azul. Espectros de absorcin La diversidad de las quinonas naturales se refleja en sus espectros de absorcin en el ultravioleta. Absorcin en ultravioleta Las benzoquinonas Absorcin intensa 240-290nm (=12000-2000) Absorcin dbil entre 380-400nm. Las naftaquinonas, antraquinonas y homlogos muestran espectros con varias absorciones, las primeras dan seales a 240-290nm (=12000-18000), a 400-500 nm (=500-5000) Las antraquinonas absorben a 240-300nm (= 9000-3000), 300-350 nm (= 30006000) y 400-500nm (=2000-9000). Los hidroxilos tiene un efecto batocrmico inducido por el alcali o el HCl, puede usarse como criterio de identificacin. La presencia de grupos hidroxilos en posiciones 1, 4, 5 y 8 del ncleo antraquinnico, puede detectarse en el espectro UV, ya que al aadir AlCl3 en 52
MetOH a la solucin alcohlica de la antraquinona, se observa un notable desplazamiento batocrmico del espectro, el cual se mantiene an despus de aadir un cido mineral. El desplazamiento batocrmico es debido a la formacin de un quelato estable tal como se ilustra en la siguiente figura.
Formacin de quelatos con cloruro de aluminio, de grupos hidroxilo peri y orto-dihidroxilos de antraquinonas
Espectroscopa infrarrojo Absorciones intensas desde 1695 a 1650, 1640 a 1595 cm-1 originadas por el grupo dicarbonilo insaturado. Antraquinonas Absorcin en 1695-1650 y 1640-1595 cm-1, debidas al grupo dicarbonilo a,insaturado. Los grupos carbonilos vecinos a hidroxilos peri (en 1, 4, 5 u 8), estos absorben alrededor de 1630 cm-1 Los grupos carbonilos no vecinos a hidroxilos peri absorben alrededor de 1660 cm1 . La siguiente figura muestra el espectro infrarrojo de la alona.
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GRUPO FUNCIONAL OH (enlace hidrgeno) OH (sin enlace hidrgeno) Cetonas Aldehdos Aldehdos y cetonas ,-insaturados de de
NUMERO DE ONDA (cm-1) 3100-3200 3600 1725-1700 1740-1720 1715-1660
GRUPO FUNCIONAL -C C-C N -N=C=O -N=C=S C=C=C
NUMERO DE ONDA (cm-1) 2300-2100 ~ 2250 ~ 2270 ~ 2150 ~ 1950
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Ciclopentanonas Ciclobutanonas cidos carboxlicos Esteres Esteres ,-insaturados -Lactonas -lactonas Amidas -COCl Anhidridos RMN
1750-1740 1780-1760 1725-1700 1750-1735 1750-1715 1750-1735 1780-1760 1690-1630 1815-1785 1850-1740(2)
NH C=NNO2 S=O sulfonas Sulfonamidas sulfonatos C-F C-Cl C-Br C-I y
3500-3300 1690-1480 1650-1500 1400-1250 1070-1010 1350-1300 1150-1100 1370-1300 1180-1140 1400-1000 780-580 800-560 600-500
Las quinonas exhiben seales caractersticas cuando estn parcialmente sustituidas, los protones del sistema insaturado Seales de 6.40-6.50 Los protones del CH3 unidos al sistema carbonilo insaturado. Seales de 2-2.1 d, si aparecen como dobletes es que hay protn allico. Los protones enlicos (HOC=C) dan seales a 7-7.10 d. Las naftoquinonas pueden exhibir seales en la regin aromtica. Las antraquinonas y fenantraquinonas solo pueden mostrar seales de protones aromticos y sus constituyentes. En RMN protnica de las antraquinonas libres, se observan las seales caractersticas de protones aromticos (6-8 ppm), alifticos (MeO-Ar 3.8-4.1 ppm; Me-Ar 2.2-2.5 ppm, etc.) y de grupos Ar-CH2-OH, Ar-COOH y Ar-CHO.
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Espectro de masas Existe una seal intensa correspondiente al in molecular, adems hay seales intensas en el M-28 y M-56, correspondiente a la prdida de una o dos molculas de monxido de carbono. Las benzoquinonas y naftaquinonas tienden a perder una molcula de acetileno o su derivado ms sustituido. Los ejemplos tpicos de alquil benzoquinoinas muestran fragmentacin I. En tanto que las hidroxibenzoquinonas hay fragmentacin en los enlaces 1,2 y 4.5 enseguida de una transposicin de hidrgeno, en la que interviene el hidroxilo fragmentacin II.
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Fragmentacin I O R R
2
R
1
+
M-2CO-R-C=C-R-
R O
Fragmentacin II O OH -CO R O -CO

+
O H R -CO OH R
+ +
+
O
O=C-CH=C=O
Los patrones de fragmentacin de las 1,4-naftaquinonas incluyen un in a m/e 76. Cuando hay cadenas muy largas insaturadas como la vitamina K puede perderse solo parte de la cadena. En las antraquinonas hay prdida de dos grupos carbonilo (M-28-28) si hay hidroxilos en los anillos aromticos, pueden observarse seales a M-17 y otras adicionales de M-28.
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Degradacin qumica Las antraquinonas pueden someterse a degradacin mediante tratamientos oxidantes reductores con el fin de complementar o confirmar su caracterizacin qumica. En el caso de la oxidacin, al tratar una antraquinona con CrO 3, se rompe la estructura quinoide originando un fragmento tipo cido ftlico
El tipo de derivado de cido ftlico se puede identificar por su punto de fusin, el cual es caracterstico dependiendo de los sustituyentes del anillo aromtico, por ejemplo el cido 4-hidroxiftlico tiene un punto de fusin de 203-204C, el cido 3,4-dimetoxiftlico tiene PF 172-173C. Las antraquinonas son una clase de metabolitos secundarios vegetales con una funcionalidad p-quinoide en un ncleo antracnico, cuyos carbonos se enumeran tal como se muestra en la siguiente figura.
Nomenclatura A estos productos naturales se les denomina comnmente con nombres vulgares con la terminacin "INA" en el caso de las agliconas, u "OSIDO" en el caso de los glicsidos. La IUPAC establece para el nombramiento de estas sustancias que se debe asignar la palabra terminal "ANTRAQUINONA", precedida de los correspondientes sustituyentes, y siguiendo la enumeracin dada en la Ilustracin 1. De acuerdo con esto, el nombre IUPAC para la Alo-emodina ser: 1,8-Dihidroxi-3-hidroximetilnantraquinona Para la endocrocina, el nombre IUPAC es: 4,5,7-trihidroxi-3-carboxi-2-metilantraquinona 58
UNIDAD 6. TERPENOS Y ACEITES ESENCIALES Los terpenos son una amplia y variada clase de hidrocarburos, producida principalmente por una amplia variedad de plantas, particularmente conferas, aunque tambin algunos insectos como las mariposas, secretan terpenos de su osmeterio. Los terpenoides son derivados de los terpenos, por oxidacin o rearreglos de sus carbonos. Terpenos y terpenoides son los constituyentes de los aceites esenciales empleados como aditivos alimentarios, en perfumera y en aromoterapia. BIOSNTESIS DE LOS TERPENOS Derivan del isopreno a isopentenil pirofosfato o dimetilalil pirofosfato formados de acetil CoA va cido mevalnico por la ruta HMG-CoA (3hidroxi-3-metilglutaril-CoA) Una ruta alterna en bacterias y plantas es por la ruta MEP(2-Metil-D-eritriol4-fosfato)
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Clasificacin de los terpenos De acuerdo a su tamao se clasifican en: hemiterpenos, monoterpenos, sesquiterpenos, diterpenos, sesterterpenos, triterpenos y tetraterpenos. Hemiterpenos Consisten de un solo isopreno. El isopreno se considera el nico hemiterpeno, pero los derivados que contienen oxgeno, tales como el prenol y el cido isovalrico son hemiterpenoides 60
Isopreno
Monoterpenos Consisten de dos unidades de isopreno y tienen la frmula C10H16. Ejemplos de monoterpenos: geraniol y limoneno. 380 800
Sesquiterpenos Consisten de tres isoprenos y su frmula molecular es C15H24. Ejemplo: farnesol. El prefijo sesqui significa un monoterpenoide y medio (15 unidades de carbono)
Estn presentes en los aceites esenciales. Muchos actan como fitoalexinas Como antibiticos producidos por las plantas en respuesta a la aparicin de microbios Como inhibidores de la alimentacin de herbvoros oportunistas. 61
La hormona de las plantas llamada cido abscsico es estructuralmente un sesquiterpeno, su precursor de 15 carbonos, la xantosina, no es sintetizada directamente de 3 unidades isopreno sino producida por un a hendidura asimtrica de un carotenoide de 40 unidades. Diterpenos C20H32. Derivan del geranil pirofosfato. Ejemplos: cafestol, kahweol, cembreno and taxadieno (precursor de taxol). Los diterpenos son la base de compuestos biolgicamente importantes, tales como retinol, retinal y fitol. Ejemplos: Fitol, que es el lado hidrofbico de la clorofila Hormonas giberelinas cidos de las resinas de las conferas y las especies de legumbres Fitoalexinas, y una serie de metabolitos farmacolgicamente importantes, incluyendo el taxol Forskolina, un compuesto usado para tratar el glaucoma. Algunas giberelinas tienen 19 tomos de carbono por lo que no son consideradas diterpenoides porque perdieron un tomo de carbono durante una reaccin de hendidura". Sesterterpenos Terpenos que tienen 25 carbonos y 5 unidades isopreno son raros en relacin a otros tamaos. Triterpenos C30H48. El triterpeno esqualeno, el mayor constituyente del aceite de hgado tiburn, se deriva del acoplamiento reductor de dos molculas de farnesil pirofosfato. El esqualeno es procesado biosintticamente para producir lanosterol o cicloartenol, los precursores estructurales de todos los esteroides.
Son por lo general generados por la unin cabeza-cabeza de dos cadenas de 15 carbonos, cada una de ellas formada por unidades de isopreno unidas cabezacola. Esta gran clase de molculas incluye a los brasinoesteroides, componentes de la membrana que son fitoesteroles, algunas fitoalexinas, varias toxinas y componentes de las ceras de la superficie de las plantas, como el cido oleanlico de las uvas. 62
Tetraterpenos Contienen ocho unidades isopreno C40H56. Los tetraterpenos biolgicamente importantes incluyen el licopeno acclico, the gamma-caroteno monocclico, y los alfa- y beta-carotenos bicclicos. Politerpenos Consisten en largas cadenas de muchas unidades isopreno. El hule natural esta constituido de poli-isopreno en el cual el doble enlace es cis. Algunas plantas producen un tipo de poli-isopreno con doble enlace trans, conocido como gutapercha. Obtencin de aceites esenciales Arrastre por vapor (cascaras de ctricos)
Extraccin con grasas (Enflorado) Disolventes orgnicos
Tcnicas de Obtencin de sesquiterpenlactonas Mtodo de extraccin con cloroformo, etanol, benceno , metanol, cloruro de metileno, ter de petrleo. Mtodo de extracciones sucesivas con ter de petrleo-etanol. Aplicaciones Son de inters farmacutico Actividad farmacolgica, pueden ser de aplicacin directa a la teraputica Son utilizados indirectamente como precursores para la obtencin de frmacos por semisntesis qumica (como los saponsidos esterodicos de diversas especies del gnero Dioscorea utilizados para la obtencin de anticonceptivos orales) Se ha descrito adems actividad antiviral, citotxica (antitumoral), espermicida, etc. Clsicamente se han utilizado como antitusivos y expectorantes, antiinflamatorios, analgsicos, venotnicos y antihemorroidales y adaptgenos. El citral obtenido del zacate de limn se utiliza para sintetizar vitamina A. 63
Entre las plantas medicinales que poseen saponsidos hay que destacar la raz de polgala por sus propiedades antitusgenas y expectorantes, la raz de regaliz como antiulcerosa y antiinflamatoria.
Timol El timol (2-isopropil-5-metil-fenol) presente en la naturaleza en los aceites esenciales del tomillo o del organo. Se usa frecuentemente como desinfectante, sin embargo en apicultura se recomienda para el control de la varroasis. Para esto se han diseado formas de aplicacin para liberacin lenta mediante elementos que encapsulan el timol. El rendimiento de esencia vara desde unas cuantas milsimas % del peso vegetal hasta 1-3 %. En los aceites esenciales se pueden encontrar variadas estructuras:
CH 3
OH
OH H3C CH 2 limoneno
mentol
El aceite esencial de la manzanilla (Matricaria recutita o M. chamomilla) supone entre un 0,4 y un 1,0% de la planta fresca; contiene sesquiterpenoides (1-alfa-bisabolol y derivados: bisabolxidos A, B y C, bisabonolxido A). Pruebas para identificacin Aceites esenciales Densidad () e ndice de refraccin () menores de 1.9 y menores de 1.47 sugieren un alto porcentaje de hidrocarburos terpnicos o compuestos alifticos. Si son mayores es posible que haya compuestos oxigenados alifticos. 64
Solubilidad a 20 C En soluciones etanol-agua depende del contenido de compuestos oxigenados. (se averigua ste en soluciones etanlicas al 95, 90, 80, 70, 60 y 50 % ). Punto de congelacin Aumenta con su contenido de slidos Determinaciones en aceites esenciales Nmero de ster En un matraz resistente a alcalis, se colocan 1.5 g de escencia, 5 ml de etanol neutro, 3 gotas de fenolftalena al 1 %. Los cidos libres se neutralizan con una solucin de 0.05 N de NaOH. Luego se aaden 10 ml de una solucin etanlica 0.5 N de NaOH, se coloca un refrigerante y se refluja 1 hr a bao mara, se deja enfriar y se titula con HCl 0.5 N No. ster = (28.05) (ml de 0.5 N consumidos NaOH)/ g muestra Porcentaje de aldehdo o cetona 1g de muestra + 35ml de clorhidrato de hidroxilamina 0.5N + HCl y se titula con NaOH N en etanol Separacin de componentes Congelacin, filtracin, centrifugacin a los componentes slidos cristalizables. Destilacin fraccionada, cromatografa en columna con slica gel y almina. Cromatografa de gases, con ste mtodo es posible separar los componentes de un aceite esencial con alto de poder de resolucin (2,000-100,000 platos tericos) Para obtener buenos resultados en GC es necesaria la seleccin de la fase estacionaria, las ms usadas son: elastmeros de silicona, Aspiezon L como fases no polares y carbowax 400. Pruebas de identificacin de sesquiterpenlactonas Forman con facilidad hidroximatos frricos de color purpura Coloracin rosa con la prueba de Legal (disolver la muestra en piridina 1 gota de nitruprusiato de sodio 0.5%, despus se aaden gota por gota, 4 gotas de NaOH 2N) 65
Espectros de Absorcin Aceites esenciales Espectro ultravioleta Absorciones a 202-210 nm y ninguna a mayor l sugiere sugiere que los componentes solo tienen insaturaciones aisladas o son saturados. Absorciones intensas entre 215-250 nm permiten suponer que hay sistemas insaturados Absorciones moderadas entre 250-2710 nm puede que haya hidrocarburos aromticos.
Espectro infrarrojo Presencia de alcoholes (3300-3600 cm-1) y la naturaleza 1,2 y 3, se deduce por los alteramientos entre 1200-950 cm-1. Los diferentes tipos de (aldehdos, cetonas, steres, saturados e insaturados). Se localizan por absorciones entre 1800-1650 cm-1. La presencia o ausencia de insaturaciones y anillos aromticos se averigua con las seales en la regin de 1670-1500 cm-1.
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UNIDAD 7. ESTEROIDES SAPONINAS Y SAPOGENINAS
SAPONINAS ESTEROIDES
Las saponinas esteroides son gliclisis esteroides con un ncleo espirostano que tienen la propiedad de hemolizar los glbulos rojos y forman espuma abundante y estable al agitar sus soluciones acuosas
BIOGENESIS La porcin esteroide de las saponinas esteroides (tambin denominada sapogenina o aglicona esteroide) se origina por la ruta de la acetilCoenzima va cido mevalnico y escualeno. La Figura 2 resume esquemticamente el proceso. Una vez formado un precursor esteroide con 27 tomos de carbono (p.ej. colesterol), este es deshidrogenado para originar 3-colestanona. La colestanona es hidroxilada en los carbonos 16, 22 y 27. Este intermedio altamente hidroxilado en la cadena lateral puede sufrir una deshidratacin entre los hidroxilos 16 y 22, lo que origina 3-furostanona; o puede sufrir adems otra deshidratacin entre los hidroxilos 22 y 27 restantes, lo que da lugar al anillo espirostano propiamente dicho. La 3-espirostanona puede ser reducida a 3-espirostanol, el cual puede sufrir procesos enzimticos de glicosilacin para originar las saponinas esteroides. 67
HIDRLISIS Como O-glicsidos, las saponinas esteroides se hidrolizan fcilmente en medio cido o enzimticamente. Ambos procesos liberan una o varias unidades de carbohidratos ligados, y la denominada SAPOGENINA ESTEROIDE. Las saponinas y sapogeninas presentan propiedades fsicas, qumicas y biolgicas diferentes. Para la hidrlisis cida a 20 mg de saponina se adiciona HCl 2N metanlico. Se refluja al menos durante una hora. Se neutraliza con NaHCO3 y se extrae la sapogenina mediante particin con cloroformo.
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NOMENCLATURA Muy comnmente, a las saponinas esteroides se las denomina con nombres vulgares con terminacin INA. La IUPAC establece el nombre de estas a partir del ncleo bsico ESPIROSTANO. La figura 3 muestra las estructuras de varias saponinas esteroides conocidas.
Figura 3. Estructuras de algunas saponinas esteroides naturales Para el caso de la sapogenina de la dioscina, la cual se conoce con el nombre comn de diosgenina, su nombre IUPAC es (24R)-Espirost-5-n-3-ol. Por otro lado, para la hecogenina (la sapogenina de la heconina) su nombre IUPAC es: (24R)-11-oxa-espirostn-3-ol. ENSAYOS DE RECONOCIMIENTO Las saponinas esteroides se pueden reconocer fcilmente en los anlisis fitoqumicos preliminares mediante los ensayos de la espuma, hemlisis de glbulos rojos, Liebermann-Burchard y ensayos para carbohidratos. a. Ensayo de la Espuma
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Al agitar una solucin acuosa de una muestra que sea o contenga saponinas, se forma una espuma estable como la obtenida al agitar la solucin acuosa de un jabn. Puesto que existen otras sustancias que pueden formar tambin espuma, se debe asumir este ensayo como una prueba presuntiva de la presencia de saponinas esteroides. b. Ensayo de Hemlisis Este ensayo es ms confiable que el de la espuma. A una suspensin de glbulos rojos en solucin salina diluida, se aade una solucin de la muestra que se presume que es o que contiene saponinas. Si los glbulos rojos se rompen (lisan o hemolizan), se asume que la prueba es positiva. Este ensayo puede realizarse en tubo de ensayo, en cajas de Petri con agar-sangre o en cajas de Petri con gelatina-sangre. Cuando la muestra contiene taninos, deben eliminarse antes de realizar la prueba ya que la interfieren. Esto se logra por tratamiento repetido de la muestra con xido de magnesio, el cual forma complejos insolubles con los taninos, por lo cual es fcil eliminarlos por filtracin. Este ensayo, junto con el de la espuma, cuando ambos resultan positivos en una muestra vegetal (extracto, fraccin sustancia pura) permiten establecer que la muestra es contiene saponinas. La sola prueba de espuma positiva no es concluyente para determinar la presencia de saponinas. Adems hay sustancias que interfieren estas dos pruebas como son los taninos. Si la muestra contiene taninos, estos pueden eliminarse pues se absorben en MgO. c. Ensayo de Liebermann-Burchard Por la porcin esteroide que poseen las saponinas esteroides, este ensayo puede confirmar su presencia por ejemplo en muestras y extractos vegetales, tal como se indic anteriormente para los esteroles, pero debe tenerse en cuenta que al igual que en el caso de los esteroles -y los esteroides en general- solamente dan un resultado positivo los que tengan grupos dienos conjugados reales o potenciales. Sin embargo otras saponinas como las triterpenoides tambin dan positiva la prueba. d. Ensayos para carbohidratos La presencia de carbohidratos ligados puede reconocerse fcilmente mediante ensayos como el de Molisch, el de la Antrona, etc., o mediante anlisis por cromatografa en papel, utilizando carbohidratos de referencia. EXTRACCION Y AISLAMIENTO Las saponinas esteroides por su carcter glicosdico, son insolubles en solventes apolares. Para obtenerlas de las plantas o animales, el material seco y molido se desengrasa previamente con un solvente apolar (generalmente ter de petrleo o n-hexano). El marco se extrae con etanol, metanol, n-butanol, mezclas de diferentes proporciones de estos alcoholes y agua. El extracto acuoso (libre de alcohol) se liofiliza o se concentra en rotavapor, y se hace pasar por resinas de intercambio inico a fin de eliminar sustancias inicas. El eluato acuoso se pasa luego a travs de materiales como el Sephadex LH-20 para separar las saponinas 70
de otras molculas como pptidos y macromolculas que dificultan su purificacin cromatogrfica. Una vez obtenidas las saponinas crudas, se pueden purificar por cromatografa en columna o lquida de alta eficiencia. En el caso de la cromatografa en columna, se puede utilizar slica gel y eluentes como los BAW y mezclas Cloroformo-Metanol-Agua. Para el anlisis por cromatografa en capa fina pueden utilizarse condiciones como las reportadas para el anlisis de saponinas en frutas. Para el anlisis y fraccionamiento por HPLC pueden utilizarse condiciones similares a las reportadas para saponinas triterpenoides, gimsensidos y saponinas de la soya. La determinacin de los carbohidratos ligados se hace mediante la hidrlisis cida. Los carbohidratos liberados se identifican por cromatografa en papel frente a muestras autnticas o por cromatografa de gases de derivados estables (p. ej. trimetilsililteres, metilteres, etc.). Ciertos derivados como los teres TMS-(+)butilglicsidos permiten adems identificar los ismeros D y L. La tcnica combinada cromatografa de gases-espectrometra de masas (CG-EM) permite tambin el reconocimiento de los carbohidratos ligados en forma de derivados trimetilsililteres de alditoles-MBA11 mediante el mtodo de Hakomori, como se explica ms adelante. CARACTERISTICAS ESPECTRALES a. Espectroscopia Infrarrojo Adems de las bandas de absorcin caractersticas de las sustancias esteroides, las saponinas y sapogeninas esteroides presentan varias bandas originadas por tensiones C-O de los anillos pirano y furano, localizadas alrededor de 850, 900, 920 y 987 cm-1. Por otro lado, la intensidad relativa entre las bandas a 900 y 920 cm-1 permite determinar la estereoqumica del carbono 25. De acuerdo con esto si la banda alrededcor de 900 es ms intensa que la de 920 cm-1, la configuracin del carbono 25 es R, y en el caso inverso es S. Algunos procedimientos para la deteccin y valoracin de sapogeninas esteroides se basan en estas bandas de absorcin. En el caso de los furastanoles (sapogeninas sin el anillo pirnico), estas cuatro bandas no se observan. b. ESPECTROMETRIA DE MASAS Las sapogeninas esteroides presentan espectros de masas 70 eV, en los cuales pueden apreciarse el ion molecular y los fragmentos m/z: 115 y 139, siendo alguno de estos el pico base del espectro. La figura 4 muestra los mecanismos de fragmentacin que explican la formacin de estos dos ltimos iones. Budzikiewicz y col. tambin racionalizaron los mecanismos de formacin probable para iones M114, M-129 y M-143, la figura 5 describe dichos mecanismos.
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Para las saponinas esteroides se estn utilizando actualmente tcnicas de Espectrometra de masas con ionizacin suave como Desorcin de Campo (FD), Ionizacin Qumica (CI) y Bombardeo con Atomos Rpidos (FAB) las cuales permiten adems de conocer el peso molecular, establecer los carbohidratos ligados. Un ejemplo de su utilidad se observa para el caso del espectro de masas FAB de iones negativos de la saponina: (22s, 25s)-5a-espirostn-3b-ol 3-O{O-b-D-galactopiranosil-(12)-O-[b-D-xilopiranosil]-(13)-O-b-D-glucopiranosil-(1 4)-b-D-galactopiransido}:
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Otras variantes de la Espectrometra de masas son por ejemplo MALDI-TOF y la CID (disociacin inducida por colisiones) que permiten reconocer patrones de fragmentacin de saponinas esteroides. c. ESPECTROMETRIA DE RESONANCIA MAGNETICA NUCLEAR Las sapogeninas esteroides pueden reconocerse en sus espectros de Resonancia Magntica Protnica por las seales de los protones localizados sobre los carbonos unidos a tomos de oxgeno como son: C-16, C-3, C-26, C-18 y C-19. La seal delprotn 16 aparece alrededor de 4.0-4.5 d en forma de un cuartete o un doble doblete. La seal del protn 3 aparece alrededor de 3.5 d cuando en el carbono 3 existe un grupo hidroxilo. Los protones del C-26 resuenan en 3.3-4.0 d (H-26 ecuatorial dd, J=10 y 2-3 Hz; H-26 axial dd, J=10 y 10 Hz). Los protones del metilo-18 resuenan como un singlete en 0.7-0.8 ppm y los del metilo-19 en 0.9-1.2 ppm, tambin en forma de singlete. El desplazamiento qumico de los protones de los metilos 21 y 27 depende de la estereoqumica del C-25. As, estos resuenan como dobletes (J=7 hz) alrededor de 1.08 y 0.98 ppm respectivamente en ismeros 25S, mientras que en los ismeros 25R resuenan en 0.96 y 0.78 ppm respectivamente.
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En los espectros de Resonancia Magntica de Carbono-13, se aprecian las seales de los carbonos 16, 22, 25, 26 y 27, alrededor de 80, 110, 30, 65 y 17 d respectivamente. En el caso del ismero 25S los carbonos C-25, C-26 y C-27 resuenan alrededor de 27, 65 y 16 ppm respectivamente si no tienen sustituyentes oxigenados, mientras que en el ismero 25R resuenan alrededor de 30, 67 y 17 ppm, respectivamente. Los carbohidratos ligados presentan espectros caractersticos.
Debido a que esta ltima tcnica de anlisis permite asignaciones estructurales finas, es muy utilizada actualmente. d. REGLA DE KLYNE A partir de las rotaciones pticas de la saponina y la sapogenina correspondiente, es posible determinar si los carbohidratos ligados estn enlazados a travs de un enlace a- b-glicosdico. Para esto se convierten los valores []D de la saponina y la sapogenina en valores de rotaciones moleculares [M]D mediante la frmula: [M]D = []D. M / 100 74
Donde M es el peso molecular. Con estos valores se determina la diferencia: La regla de Klyne establece que si C es alrededor de +305, el enlace glicosdico es , pero si es alrededor de -61, el enlace glicosdico es . Un ejemplo de la aplicacin de esta regla est reportado para el -glucopiransido de yamogenina. Metodo de Hakomori Debido a que muchas saponinas esteroides contienen ms de un monosacrido ligado, generalmente en el C-3, para poder establecer las uniones glicosdicas entre ellos y asignar la estructura total de tales compuestos se utiliza el denominado mtodo de Hakomori. Este mtodo se basa en que al hacer una metilacin exhaustiva del glicsido, todos los grupos hidroxilos libres presentes en los carbohidratos ligados son convertidos en grupos metoxilos. En cambio los enlaces glicosdicos y hemiacetal permanecen estables. La hidrlisis cida del producto de metilacin libera los grupos hidroxilos que participan en los enlaces glicosdicos a determinar y rompe los enlaces hemiacetal generando un grupo carbonilo y un hidroxilo libre en cada molcula de carbohidrato. Luego de esto se hace una reduccin con NaBH4, en la cual los grupos carbonilos obtenidos a partir de los enlaces hemiacetal son reducidos hasta grupos metileno. La acetilacin de esta mezcla lleva a que los hidroxilos formados por la hidrlisis de los enlaces hemiacetal, y los hidroxilos obtenidos por la reduccin del enlace ter formen los correspondientes acetatos. Los productos obtenidos corresponden a los denominados alditoles metilados y acetilados, y el patrn de metilacin/acetilacin permite establecer las uniones entre ellos. Estos derivados son lo suficientemente estables y se pueden identificar por CG-EM, y utilizando fases estacionarias quirales se pueden reconocer si se trata de derivados alditoles de monosacridos ismeros D L. Para comprender mejor este mtodo supongamos que se tiene una saponina como la siguiente:
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Al someter a metilacin exhaustiva esta saponina se produce:
Al someter a hidrlisis cida este producto se rompen los enlaces glicosdico (1-6) y (1-O-aglicona), y los dos enlaces hemiacetal de los dos monosacridos, se obtiene:
Al tratar esta mezcla de derivados con borohidruro de sodio se reducen los grupos carbonilo y se obtiene:
La acetilacin de esta mezcla produce:
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Al analizar por CG-EM esta mezcla se obtiene por un lado el tiempo de retencin el cual es caracterstico de este tipo de derivados (denominados derivados alditol) y el espectro de masas, el cual tambin es caracterstico de cada uno de estos derivados, y se comparan con compuestos de referencia. De esta manera se identifica con precisin cada uno de ellos. Volviendo al ejemplo, el derivado alditol I corresponde al 1,5-diacetato de 2,3,4-trimetoxi-ramnitol con un peso molecular de 306 g/mol, y el derivado alditol II corresponde al 1,5,6-triacetato de 2,3,4trimetoxi-glucitol con un peso molecular de 336 g/mol. El que un derivado sea 1,5diacetilado y el otro sea 1,5,6-triacetilado sugiere que en la saponina natural el C-6 de uno de los dos monosacridos est implicado en el enlace glicosdico con el otro monosacrido, y descartando el C-5 (presente en la mayora de carbohidratos luego de romper el enlace hemiacetal), se puede establecer que la unin glicosdica entre los dos carbohidratos en este caso es (1-6). DISTRIBUCION NATURAL Las saponinas esteroides se encuentran principalmente en varias familias de la clase monocotilednea, como son: Liliaceae, Dioscoreaceae y Amaryllidaceae (Agavaceae). En las dicotiledneas, se las ha encontrado en las familias Solanaceae y Scrofulariaceae. En el reino animal, las estrellas de mar constituyen el nico ejemplo de animales con saponinas esteroides. IMPORTANCIA FARMACEUTICA DE SAPONINAS ESTEROIDES Aunque algunas saponinas esteroides han mostrado diversas actividades biolgicas (antimicrobiana, citotxica, antitumoral, ictiotxica, molusquicida, insecticida, antihelmntica, expectorante, diurtica, cardiovascular, antiinflamatoria, anti-lcera, espermicida, analgsica, antipirtica, sedante, antifertilidad, antihepatotxica, hemoltica, antimictica, etc.) fundamentalmente se han constituido desde hace bastante tiempo, como precursores nicos de muchos medicamentos esteroides tales como hormonas sexuales, corticoides, contraceptivos orales y diurticos. La figura 7 muestra algunos ejemplos de medicamentos esteroides producidos a partir de esteroides naturales. La produccin industrial de estas sustancias requiere una serie de procesos microbiolgicos de fermentacin y una serie de conversiones qumicas relativamente complejas y en su gran mayora patentadas por los grandes laboratorios farmacuticos. La Figura 8 muestra un esquema de la produccin de hormonas esteroides a partir de la diosgenina obtenida de los rizomas de Dioscorea sp. La Figura 9 muestra un esquema de la produccin de medicamentos corticoides a partir de la hecogenina acetilada. La Figura 10 muestra un esquema para la produccin de hidrocortisona a partir del estigmasterol presente en la semilla de soya ( Glycine max o Glycine soja) o del haba de calabar (Physostigma venenosum). La Figura 11 describe el proceso de produccin de medicamentos esteroides a partir de colesterol (obtenido de la lana de oveja, de la mdula espinal y cerebro de ganado vacuno) o sitosterol (obtenido de la soya o del aceite se semilla de algodn). La Figura 12 describe la obtencin de medicamentos esteroides a partir del denominado "compuesto s" que es el 77
intermedio clave para varias clases de medicamentos esteroides. La Figura 13 describe cmo la progesterona puede ser convertida por fermentacin con hongos en varios productos esteroides. La conversin de sapogeninas 3-hidroxiladas en derivados 3-oxa-4-eno (una funcionalidad presente en muchos esteroides bioactivos) se puede realizar a travs de microorganismos como Mycobacterium sp. En nuestro pas existen varias especies de ames silvestres como Dioscorea coriacea, propia de los sitios altos cerca a la ciudad de Medelln (Santa Elena, La Ceja, San Pedro, etc.), Dioscorea polygonoides (sudoeste de Antioquia), Dioscorea santanderensis (en Puerto Valdivia), el "ame de aire" Dioscorea bulbifera que crece en Medelln, y Dioscorea trifida "ame o batata" una planta promisoria de Colombia y otros pases del Convenio Andrs Bello. El fique, el cual es usado por los campesinos para elaborar canastas y productos artesanales, se obtiene de las hojas de Agave sp., sin embargo no se ha evaluado su uso potencial como fuente de saponinas esteroides.
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Otras drogas vegetales son saponinas esteroides incluyen la sarsaparrilla, la alfalfa, otras especies de Dioscorea, etc.
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UNIDAD 8. ALCALOIDES Se llaman alcaloides (de lcali y -oide) a aquellos matabolitos secundarios de las plantas sintetizados, generalmente, a partir de aminocidos. Un alcaloide es, un compuesto qumico que posee un nitrgeno heterocclico procedente del metabolismo de aminocidos; de proceder de otra va, se define como pseudoalcaloide. Son bsicos (excepto colchicina) Efedrina
Generalidades Diversidad estructural Variedad biolgica Grupo ms importante de sustancias de inters teraputico Plantas superiores, en ms de 100 familias de fanergamas, en menor proporcin en criptgamas, microorganismos (ergotamina) y animales: peces, sapos (Bufotenina). Actividad biolgica en SNC Su actividad biolgica a nivel de SNC dio lugar a las primeras investigaciones, siendo los alcaloides las primeras sustancias estudiadas. El termino alcaloide(de lcali), fue propuesto por el farmacutico W. Meissner en 1819, se aplic a los compuestos de origen vegetal con propiedades alcalinas, este carcter bsico es debido a la presencia de nitrgeno amnico en su estructura. No existe una definicin exacta para los alcaloides, pero se puede considerar como: un compuesto orgnico de origen natural (generalmente vegetal), nitrogenado, derivados generalmente de aminocidos, mas o menos bsicos, de distribucin restringida, con propiedades farmacolgicas importantes a dosis bajas y que responden a reacciones comunes de precipitacin. Se dividen en cuatro clases Alcaloides verdaderos: cumplen estrictamente con las caractersticas de la definicin de alcaloide: tienen siempre un nitrgeno heterocclico, son de carcter bsico y existen en la naturaleza normalmente en estado de sal, biolgicamente son formados a partir de aminocidos. Protoalcaloides: son aminas simples con nitrgeno extracclico, de carcter bsico y son productos del metabolismo de los aminocidos. 81
Pseudoalcaloides: presentan todas las caractersticas de la definicin de alcaloide pero no son derivados aminocidos. Alcaloides imperfectos: son derivados de bases pricas, no precipitan con los reactivos especficos para alcaloides.
En cuanto a su estado natural, los alcaloides son esencialmente sustancias presentes en las angiospermas (plantas que tienen sus semillas recubiertas por un epicarpio), sobre todo en ciertas familias como Lauraceae, Magnoliaceae, Renunculacease Annonaceae, Menispermaceae, Papaveraveae, Fumariaceae, Rutaceae, Apocynaceae, Loganiaceae, Rubiaceae y Solanaceae, se encuentran excepcionalmente en bacterias (Piocianina de Pseudomonas aeriginosa); y en hongos (psilocina de los hongos alucingenos mexicanos y ergopptidos de ergot del centeno).
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4-hidroxi-N,N-dimetil-triptamina o 3-(2-(dimetilamino)etil)-1H-indol-4-ol. La psilocina es un alcaloide derivado de la psilocibina y encontrado en la mayor parte de los hongos psilocibios. Tiene propiedades alucingenas Incorporacin del nitrgeno El nitrgeno est presente en muchas sustancias orgnicas en los seres vivos, en especial en aminocidos y protenas, en nucletidos y cidos nuclecos. Todos los organismos son capaces de sintetizar protenas a partir de aminocidos, pero no pueden sintetizar todos los aminocidos indispensables para la sntesis , debido a esto, requieren en su dieta de algunos aminocidos proteicos; solo las plantas y algunos microorganismos pueden sintetizar los aminocidos a partir de nitrgeno inorgnico, ya sea Nitrgeno molecular N2 o como nitratos. El trmino fijacin de nitrgeno comprende los pasos que intervienen en la conversin del N2 o del nitrato en amoniaco. En el primer caso, ocurre en bacterias por medio de diaztrofos, organismo capaz de utilizar el dinitrgeno o nitrgeno molecular, como nica fuente de nitrgeno, reducindolo a amoniaco por medio de una nitrogenasa e incorporndolo luego como nitrgeno orgnico. Los diaztrofos pueden ser de vida libre o formar aosciaciones con otros organismos formando ndulos en las races, como es el caso de algunas leguminosas. Las bacterias asociadas a los diaztrofos forman bacteriodes por un proceso que implica un cambio en la permeabilidad de la pared celular que hace posible el intercambio de metabolitos, producindose la protena leghemoglobina, que asegura una disminucin de la presin de oxigeno para que tenga lugar la fijacin de nitrgeno, la planta posee el gen para la formacin de la globina pero el bacteroide es el que suministra el grupo hemo prottico.
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Funcin de los alcaloides en plantas La funcin de alcaloides en las plantas no es aun clara, existen algunas sugerencias sobre el rol que juegan estas sustancias en los vegetales como: * sirven como productos de desecho o almacenamiento del nitrgeno sobrante, esta funcin es equivalente a la de cido rico o de la urea en los animales. * en algunos casos los alcaloides pueden servir como productos de almacenamiento del nitrgeno no metabolizado o para transporte del mismo: en el caso de las Solanaceas midriticas, los steres del tropano se forman en las races y son transportados a las partes areas donde pueden ser hidrolizados. * la microqumica ha permitido mostrar en forma general, que los alcaloides son localizados en los tejidos perifricos de los diferentes rganos de la planta, es decir en el recubrimiento de las semillas, corteza del tallo, raz o fruto y en la epidermis de la hoja; esto no permite pensar que los alcaloides cumplen una importante funcin como es la de proteger a la planta, por su sabor amargo de estos, del ataque de insectos. * los alcaloides pueden servir de reguladores del crecimientos, se ha demostrado que los alcaloides derivados de la putrescina se incrementan notablemente en algunas plantas cuando se encuentran en suelos deficientes de potasio. * mediante tcnicas biotecnolgicas, las plantas que normalmente acumulan alcaloides en las partes areas, como es el caso de la nicotiana y daturas, se han producido sin alcaloides, la prdida de alcaloides en el vstago, no impide el desarrollo de la planta, lo cual sugiere que los alcaloides no son esenciales para los vegetales.
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Si bien, la presencia de alcaloides no e vital para la planta, estos deben de participar en secuencias metablicas y no son solamente productos de desecho del metabolismo. Propiedades fisicoqumicas Los alcaloides tienen masas moleculares que varan entre 100 y 900 (conina C8H17N=127, vincristina C46H56N4O10=824); son casi siempre incoloros a excepcin de aquellos altamente conjugados como berberina (amarillo), sanguinarina (rojo), urabaina (verde) y oxoaporfinas que van de amarillo a rojo; son normalmente slidos a temperatura ambiente, algunas bases no oxigenadas como la conina, la nicotina y la espartena que son lquidas; con algunas excepciones como la arecolina que es oxigenada y lquida; los alcaloides base son poco solubles en agua. Ensayos de reconocimiento de los alcaloides Las tcnicas de reconocimiento son basadas en la capacidad que tiene los alcaloides en estado de sal (extractos cidos), de combinarse con el yodo y metales pesados como bismuto, mercurio, tungsteno formando precipitados; estos ensayos preliminares se pueden realizar en el laboratorio o en el campo. En la prctica, se utilizan reactivos generales para detectar alcaloides como: la solucin de yodo-yoduro de potasio (Reactivo de Wagner), mercurio tetrayoduro de potasio (reactivo de Mayer), tetrayodo bismuto de potasio (reactivo de Dragendorff), solucin de cido pcrico (reactivo de Hager), cido slico tngico (Reactivo de Bertrand), p-dimetilamino benzaldehdo (reactivo de Ehrlich); nitracin de alcaloides (reaccin de Vitali-Morin se usa para alcaloides en estado base). Preparacin de algunos reactivos para alcaloides: Mayer: se prepara disolviendo 1.3g de bicloruro de mercurio en 60ml de agua y 5g de yoduro de potasio y se afora a 100ml. Los alcaloides se detectan como un precipitado blanco o de color crema soluble en pacido actico y etanol. Dragendorff: mezcla 8g de nitrato de bismuto pentahidratado en 20ml de cido ntrico al 30% con una solucin de 27.2g de yoduro de potasio en 50ml de agua. Se deja en reposo por 24 horas, se decanta y se afora a 100ml. La presencia de alaloides se detecta por la formacin de un precipitado naranja rojizo cuando se le adiciona este reactivo a una solucin cida de alcaloides. De los precipitados lavados se puede recuperar los alcaloides con una solucin saturada de carbonato de sodio. Algunas sustancias oxigenadas con alta densidad electrnica como es el caso de las cumarinas, chalconas, maltol, aacetogeninas, etc., pueden dar falsos alcaloides con el reactivo de Dragendorff. 85
Hager: consiste en una solucin saturada de cido pcrico en agua, este reactivo precipita la mayora de los alcaloides, los picratos se pueden cristalizar y ellos permite por medio de resinas intercambiadoras, separar alcaloides. Ehrlich: se prepara disolviendo p-dimetil amino benzaldehdo al 1% en etanol y luego se le adiciona cloruro de hidrgeno, en presencia de alcaloides, se forma una coloracin naranja. Vitali-Morin: consiste en la nitracin de los alcaloides con cido ntrico fumante, se forma una coloracin en presencia de hidrxido de potasio con los derivados nitrados en solucin alcohlica, la presencia de acetona estabiliza la coloracin. La tcnica consiste en adicionar a los alcaloides base 10 gotas de cido ntrico fumante, evaporar al bao mara, despus de enfriar, se adiciona 1ml de etanol 96, 0.5 ml de acetona y una pastilla de KOH; sin agitar se observa una coloracin violeta que se desarrolla alrededor de la pastilla.
EXTRACCIN Y AISLAMIENTO
Puesto que los alcaloides son compuestos de carcter bsico, su solubilidad en los diferentes solventes caria en funcin del pH, es decir segn se encuentre en estado de base o de sal: En forma de basen son solubles en solventes orgnicos no polares como benceno, ter etlico, cloroformo, diclorometano, acetato de etilo. En forma de sales, son solubles en solventes polares agua, soluciones cidas e hidroalcohlicas. El fundamento de la extraccin se basa en el carcter bsico de los alcaloides y en el hecho de su existencia en las plantas como sales de cidos orgnicos o como combinaciones solubles de otras sustancias, entre los principales se encuentran: los cidos tglico, 3 metil butrico, benzoico, cinmico, hidroxifenil propionico, trpico y tricarboxlicos, y adems con otro tipo de sustancias como taninos y fenoles.
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Los vegetales contienen generalmente cantidades apreciables de materia grasa que impide el buen desarrollo en los procesos extractivos, produciendo emulsiones, por lo tanto es til proceder a una delipidacin o desengrase de la planta seca y molida con solventes como hexano o ter de petrleo; es excepcional, pero puede ocurrir que se extraiga en estos solventes y en medio neutro alcaloides. Preparacin del material vegetal El material vegetal (races, hojas, semillas, corteza o flores) seleccionados con base a los resultados de las reacciones de precipitacin, es secado en estufa a una temperatura menor a 50C, pulverizado, para luego ser desengrasado con un solvente orgnico apolar. Extraccin *Por un solvente orgnico en medio alcalino La droga pulverizada y desengrasada se mezcla con una solucin alcalina que desplaza los alcaloides de sus combinaciones salinas; las bases liberadas son en seguida solubilizadas en un solvente orgnico mediante polar.
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El solvente orgnico conteniendo los alcaloides bases es separado y concentrado a presin reducida, luego se agita con una solucin acuosa cida, donde los alcaloides se solubilizan en su forma de sales, mientras que otras sustancias que se encuentren en el extracto como pigmentos, esteroles y otras impurezas restan en la fase orgnica. Las soluciones acuosas de las sales de alcaloide son alcalinizadas y extradas con un solvente orgnico no miscibles; el solvente orgnico es deshidratado sobre una sal anhidra, filtrado y concentrado a presin reducida, el residuo que queda son los alcaloides totales (AT). *Extraccin de alcaloides en medio cido Hay que recordar que en su estado natural, los alcaloides se encuentran en forma de sales solubles en soluciones acuosas o hidroalcohlicas. La droga seca, pulverizada y desengrasada es extrada con agua acidulada o con alcohol o solucin hidroalcohlica acidulada, tendremos extractos de alcaloides en forma se sales. En estos casos los extractos pueden ser tratados de diferentes formas: -alcalinizacin y extraccin de los alcaloides base con un solvente orgnico no miscible.
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-fijacin de los alcaloides sobre resinas intercambiadoras de iones para luego separarlas por elucin con cidos fuertes. -precipitacin de los alcaloides en forma de yodomercuriatos con el reactivo Mayer concentrado; el complejo formado es recuperado por filtracin centrifugacin, luego se redisuelve en una mezcla de agua-alcohol-acetona y separan los alcaloides hacindolos pasar sobre resinas intercambiadoras iones. (Esta tcnica es particularmente til para alcaloides cuaternarios). ce o se de
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Extraccin de los alcaloides del opio
La basicidad de los alcaloides es muy variable y en algunos casos es estrechamente relacionada con el par de electrones libres del nitrgeno: los grupos electro atrayentes adyacente o vecinos al nitrgeno disminuyen la basicidad, es el caso del carbonilo de las amidas como la colchicina, la piperina y de las oxoaporfinas, esto hace que sean compuestos prcticamente neutros; esto ocurre tambin cuando en la molcula, el tamao de la parte hidrocarbonada es muy grande con relacin a la nitrogenada (algunos alcaloides esteroidales y bisaporfinas), se puede extraer en medio neutro con solventes apolares (en el desengrase).
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Clasificacin de los alcaloides Habitualmente los alcaloides se han clasificado en funcin de su estructura, distinguindose principalmente los compuestos heterocclicos de los no heterocclicos, actualmente existen varias formas de clasificarlos: * de acuerdo a sus propiedades farmacolgicas. * de acuerdo a su distribucin botnica. * de acuerdo a su origen biosinttico. En este texto adoptaremos esta ltima forma de clasificacin, donde se muestra una gran diversidad estructural en una gran homogeneidad bioqumica, es decir, podemos agrupar todos los alcaloides naturales conocidos por ser originados por un restringido nmero de aminocidos o de precursores biogenticos. Esta aproximacin biogentica es indispensable como ayuda quimiotaxonmica y esta aplicada especialmente para la qumica estructural en la asignacin de posiciones oxigenadas y para las sntesis biomimtrica de sustancias. Se puede distinguir: -Alcaloides alifticos: * derivados de la ornitina (pirrolidinas, tropnicos, pirrolizidnicos) * derivados de la lisina (piperidinas, quinolizidnicos) -Alcaloides aromticos * derivados del cido nicotnico (piridinas) * derivados de la fenil alanina y tirosina (isoquinoleinas) * derivados del triptfano (indolicos, quinoleinas) * derivados de la histidina (imidazoles) -Alcaloides de origen diverso * alcaloides terpnicos y esteroidales * alcaloides diversos (purinas, macrociclos, etc.)
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Biosntesis de alcaloides La biosntesis de los alcaloides ser abordada en forma general por la diversidad estructural de estos metabolitos secundarios, en forma detallada, se mostrar la biosntesis de algunos grupos de alcaloides. Segn la clasificacin de los alcaloides de acuerdo a su origen biosinttico. Los aminocidos precursores son (figura 5): la ornitina, la lisina, el cido nicotnico, la fenilalanina, la tirosina, el triptfano, el cido antranlico y la histidina, adems de estos aminocidos, intervienen tambin bases pricas y unidades terpnicas y derivadas del acetato. Para entender bien la biosntesis de alcaloides se deben recordar algunas reacciones que intervienen:
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Reacciones comunes en la biosntesis de alcaloides Los aminocidos como precursores de los alcaloides, sufren una serie de transformaciones tpicas que pueden resumirse en: *Formacin de bases de Schiff (genera enlaces C=N)
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*Condensacin Mannich (genera enlaces C-C-N), es una condensacin entre un carbanin (orto o para de grupo fenlico), un aldehdo o cetona y una amina primaria o secundaria.
OXIDACIONES
REDUCCIONES
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CONDENSACIN ALDLICA
DESCARBOXILACION (Usualmente catalizada por fosfato de piridoxal)
ALCALOIDES DERIVADOS DE AMINOCIDOS ALIFTICOS Los alcaloides pirrolidnico y piperidnicos provienen salvo raras excepciones del metabolismo de los aminocidos ornitina y lisina, la utilizacin de aminocidos con el nitrgeno marcado (15N), permiti que Herbert y col. Demostraron por marcacin isotpica en plantas del gnero Belladona, que la -N-metilornitina es un componente natural de estas plantas y que el amino terminal de la ornitina y lisina es el que finalmente se incorpora para formar las iminas cclicas.
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MECANISMOS Los mecanismos para la formacin del 1 pirrolidina y del 1 piperidina son muy semejantes, por lo tanto se va a mostrar solo el mecanismo de formacin del 1 pirrolidina:
ALCALOIDES DERIVADOS DE LA ORNITINA Los alcaloides derivados de la ornitina llamados alcaloides pirrolidnicos, son menos frecuentes que sus anlogos piperidnicos, varios tipos de alcaloides se derivan del aminocido ornitina, estos son biogenticamente derivados del 1 pirrolidina, algunos adicionan cadenas laterales formadas por unidades de acetato y comprenden (figura 6): * las pirrolidinas simples como las higrinas y los alcaloides tropnicos de ciertas Solanaceae y Erythroxylaceae (coca), los alcaloides del tabaco y la stachidrina de Stachys officinalis, * las pirrolicidinas de Borraginaceas y de algunas Compuestas. * las indolicidinas en los gneros Eleacarpues y Tylofora, son derivadas del metabolismo de la ornitina, en los otros casos como los alcaloides del gnero Securinega, son del metabolismo de la lisina. De este grupo y por su accin farmacolgica, los alcaloides derivados del ncleo tropnico son los de mayor inters.
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Alcaloides derivados del ncleo tropnico El ncleo tropnico comprende un heterocclico nitrogenado bicclico:
La posicin 3 es hidroxilada (tropanol) dando origen a dos ismeros: * el trans tropanol o el verdadero tropanol tiene el grupo OH en (OH en posicin trans en relacin al grupo N-CH3). * el cis tropanol o pseudotropanol tiene el grupo OH en (OH en cis en relacin al grupo N-CH3)
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El tropanol o sus derivados, son esterificados con cidos orgnicos. El principal de estos cidos es el cido trpico el cual posee un carbn asimtrico y se forma por un reagrupamiento tipo Many de la fenil alamina luego de una transformacin y posterior reduccin.
Existen dos importantes grupos con alcaloides conteniendo este ncleo tropnico: 1. Grupo de la atropina (alcaloides derivados del tropanol): * la hiosciamina = ster del tropanol con el cido l-trpico * la atropina = ster del tropanol con el cido dl-trpico * la escopolamina o hioscina = ster del escopanol con el cido l-trpico
Estos alcaloides son midraticos (dilatan la pupila) con propiedades parasimpatolticas y se encuentran en algunos gneros de la familia Solanaceae (Atropa, Datura, Brugmansia, Hyoscyamus y Duboisias). 2. El grupo de la cocana (alcaloides derivados del pseudotropanol) tiene propiedades anestsicas y es el principio activo de la coca (Erythroxylacea). Biognesis del ncleo tropnico La mayora de los trabajos sobre la biosntesis de los alcaloides del ncleo tropnico se han realizado sobre diversas especies del gnero Datura, los datos disponibles, evidencian la similitud de las rutas de formacin del ncleo tropnico en este gnero con otras plantas productoras de este tipo de alcaloides. El primer trabajo con istopos radiactivos mostr que al aminocidos ornitina se le incorporaban unidades de acetato para formar el ncleo, luego se demostr que esta incorporacin era esteroespecfica dependiendo de la especie.
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Para el caso del tropanol de Solanaceas y de la ecgonina de Erythroxylaceas, el mecanismo de formacin del ncleo, se divide luego de la condensacin de la cadena de acetato. Actividad Biolgica Actividad del grupo Atropina-hiosciamina. Estos dos alcaloides poseen las mismas propiedades farmacolgicas, en general la hiosciamina es entre 10 y 50 veces mas activa que la atropina, pero esta es ms estable. * sobre el sistema nervioso central (snc) A dosis bajas tienen poca accin pero a dosis altas, provocan una excitacin que se traduce en delirio llamado delirio atropnico. * sobre el sistema nervioso autnomo (sna) A dosis teraputicas estos alcaloides son antagonistas de la acetil colina produciendo: - a nivel de los ojos, midriasis - a nivel del corazn, una aceleracin - a nivel de los vasos capilares una vaso construccin - a nivel del tubo digestivo un relajamiento del peristaltismo y un agotamiento de las secreciones. - tienen adems, una accin espasmoltica neurotpica. Accin de la escopolamina - a dosis teraputicas es una sustancia sedatica del SNC y antiparkinsoniana. - es un parasimpatoltico de accin mas dbil que los dos alcaloides anteriores. - tienen una accin sedativa del SNC con un efecto hipntico. - a dosis fuerte la escopolamina es capaz de provocar una intoxicacin con narcosis y de vez en cuando alucinaciones. Accin de la cocana - la cocana es el principal anestsico de superficie natural, potencia la conduccin a nivel de todos los tipos de fibras nerviosas, ha servido de modelo para la sntesis de los actuales anestsicos locales. - otro efecto de la cocana son las propiedades simpatomimticas que se manifiesta por una aceleracin cardiaca y una vaso construccin prolongando la accin anestsica. - la cocana disminuye la reaccin sobre las fibras lisas y agota las secreciones. - estimula el sistema nervioso central aumentando la eficiencia muscular, al mismo tiempo disminuye la sensacin de hambre. Plantas con alcaloides derivados del tropanol: Solanaceae midriticas Son grandes plantas herbceas, poseen hojas aisladas y flores regulares, con cliz gamospalo persistente, el fruto es una baya poliesperma como el caso de la 99
Belladona o una cpsula como la Datura, la hoja presenta en las nervaduras y en el limbo, cristales o grnulos de oxalato de calcio. BELLADONA: Atropa belladona, Solanaceae. Droga: hojas solas o mezcladas con inflorescencia. Descripcin: planta de 50-150 cm de altura, muy ramificada. Hojas ovadas, de bordes enteros, de hasta de mas de 15 cm de largo, en la zona de la inflorescencia se agrupan por pares, con una hoja del par siempre mayor que la otra, sus frutos son bayas del tamao de una cereza, tan txicas que 3 o 4 pueden producir la muerte a un nio. La Atropa belladona es actualmente cultivada en Inglaterra, en Europa continental y en los Estados Unidos. Composicin qumica; la droga contiene una importante cantidad de material mineral (12 al 15%) donde el principal componente es oxalato de calcio que se encuentra nicamente a nivel del limbo. Se encuentra adems una cumarina la 7-hidroxi 6 metoxi cumarina, llamada escopoletol, la cual puede servir para diferenciar la belladona de otras Solanaceas midriticas.
Los principios activos son alcaloides entre 0.3 y 1%, principalmente derivados del tropanol esterificado por el cido trpico: hiosciamina, antropina y escopolamina, durante el perodo de secado, la hiosciamina se transforma en atropina; el conjunto de hiosciamina y atropina representan entre 90 y 95% de los alcaloides totales. Existen tambin trazas de alcaloides menores como apoatropina (ster del tropanol y del cido atrpico). La raz de belladona contiene alrededor de 0.3-1.0% de alcaloides de estos un 8397% es de hiosciamina, 3-15% de atropina y hasta 2.6% de escopolamina y otros alcaloides menores. ESTRAMONIO: Datura stramonio, Solanaceae Droga: hojas e inflorescencia Descripcin: es una planta anual originaria del Oriente que alcanza una altura de 1.5m, tiene una raz blanquecina y numerosas raicillas, el tallo areo es erecto, redondo, liso, ramificado y de color verde. Hojas alternas, cortamente pecioladas, triangulares y dentadas, miden de 8 a 25 cm de largo por 7 a 15 de ancho. Las flores solitarias son grandes tubulosas, axiliares y cortamente pecioladas, poseen 100
un suave aroma, tiene el cliz tubular con cinco dientes de unos 5 cm de largo, la corola acampanada, blanca de unos 8 cm de longitud, cinco estambres. El fruto es una cpsula espinosa, consta de cuatro cavidades conteniendo numerosos granos de color pardo oscuro. Composicin qumica: la composicin qumica del estramonio es cualitativamente anlogo al de la belladona y al beleo. El contenido de alcaloides totales esta entre 0.2 y 0.45% donde la escopolamina representa una tercera parte, en las plantas jvenes el alcaloide predominante es la escopolamina. Las semillas de estramonio contienen alrededor de 0.2% de alcaloides midriticos y entre 15 y 30% de aceites. HOJA DE DATURA: Datura metel, Solanaceae Droga: Hojas Descripcin: planta herbcea con flores blancas o violetas de olor desagradable. Al igual que el estramonio, las hojas desecadas de Datura metel estn abarquilladas y retorcidas, son de color mas pardusco con mrgenes enteros y con diferenciacin en cuanto a la nervadura y a los pelos, los frutos tambin caractersticos son cpsulas espinosas pero los granos de color pardo claro, tienen forma de oreja, son mayores y mas aplanadas que las semillas de estramonio. Composicin qumica: el contenido alcalodico (escopolamina, con trazas de atropina y de hioscimina) es aproximadamente 0.2% y algunos alcaloides menores como el caso de la datumetina (ster del tropanol con el cido p-metoxibenzoico). ARBOL DATURA: este nombre se le ha dado a varias plantas del gnero Brugmansia considerado como una seccin del gnero Datura por lo que se refiere a su morfologa y qumica. La Brugmansia sangunea (R&P), Solanaceae es la mas importante del gnero por su contenido alcalodico. Droga: flores y hojas Descripcin: son especies arbreas 1.5-4.0m de altura, perennes originarias de Sudamrica, cultivadas principalmente como ornamentales, entre 2000 y 3700m. s.n.m. sus hojas son alteras de 9.0-14cm de largo por 4.5-6.5 de ancho, ovaladas, base oblicua, pice agudo, margen lobado-dentado, haz y envs estrigosos; pecolo tomentoso. Flores solitarias, axiliares, pndulas, pedicelo de 3-6cm de largo, cliz gamocpalo de color verde, corola infundibuliforme de 19-24cm de longitud, anteras blancas, estigmas verdosos. Fruto capsular, oval acuminado. Composicin qumica: alcaloides derivados del tropano se encuentran en varios rganos de la planta en diferentes proporciones. DUBOISIAS, Solanaceae
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Comprenden rboles y arbustos originarios de Australia; dos especies son utilizadas para la extraccin de hiosciamina y escapolaina: la Duboisia myoporoides que contiene en sus hojas entre 0.6 y 3% de alcaloides totales donde el mayoritario es la escopolamina y la Duboisia leichardii cuyas hojas contiene entre 2 y 4% de alcoloides tropnicos donde la hiosciamina es el mayoritario. MANDRGORA Mandragora officcinarum Solanaceae Esta hierba mediterrnea tiene un rizoma carnudo, a veces bifurcados antropomorfo, de hace tiempo tiene una gran reputacin y ha suscitado mltiples leyendas; soporfero para los griegos y los romanos, en la edad media se usaba como analgsico pero por sus caractersticas antropomorfas se deca que era una planta demoniaca. Seis variedades se han encontrado desde el Mediterrneo hasta los Himalayas y comprenden diferentes proporciones de alcaloides tropnicos como la hiosciamina escopolamina y mandragorina, adems, como la belladona contiene tambin la sustancia fluorescente escopoletina. Plantas con alcaloides derivados de pseudotropanol COCA: Erythroxylon cocca o E. truxillense, Erythroxylaceae. Descripcin: es un pequeo arbusto (alrededor de 1.5m de altura) de las regiones tropicales y subtropicales de Sudamrica. Las hojas son enteras y elpticas de longitud variable segn la variedad y el origen geogrfico. Comercialmente existen dos variedades de coca: ka coca de Bolivia o de huanuco la (E. coca) y la de Per o Trujillo la (E. tixillense), cultivados en Per, Bolivia, Colombia e Indonesia. Las hojas se coca de Huanuco o Bolivia son cortamente pecioladas, ovaladas de 2.5 a 7.5 cm de longitud y de 1.5 a 4 cm de ancho, el limbo va de color pardoverdoso a pardo, el nervio medio que es prominente, sobre el envs tiene una arista en su superficie superior. Tambin muestra dos lneas curvadas muy caractersticas una a cada lado del nervio medio. Olor caracterstico sabor amargo y producen adormecimiento en la lengua y los labio. Segn Johnson, la cocana es mas abundante en las hojas nuevas durante el comienza de la floracin. Composicin qumica: La droga contiene pequeas cantidades de taninos, flavonoides y aceite esencial. La hoja de coca contiene adems de alcaloides con el ncleo tropnico, bases voltiles derivadas de la N-metil pirrolidina como la y higrina y cuscohigrina.
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Los principales activos (entre 0.7 y 1.5%) son alcaloides derivados del pseudotropanol (3-alcohol) mas precisamente del ncleo ecgonina
Comprende monosteres y disteres de la ecgonina donde el principal es el dister (cocana) o metil benzoil exgonina.
Tambin se encuentran pequeas cantidades de cinamil cocana (metil cinamil ecgonina) y truxilina (metil truxilil ecgonina).
En cuanto a los monostres estos se encuentran en trazas siendo el principal la tropacocana o benzoil pseudotropanol el cual no tiene inters teraputico.
En el comercio ilcito se ven diferentes formas de cocana, la cocana pura al 100% llamada nieve es el clorhidrato de cocana, en forma de pequeos cristales blancos la cual permite ser inhalada, es sobre todo la forma exportada ilcitamente, se venden de 10 a 15 veces ms cara que la torta o pasta de cocana o bazuco o crack siendo esta el sulfato de cocana, se trata de una sustancia qumicamente anloga al clorhidrato de cocana, es el producto de la primera parte de la extraccin a partir de hojas de coca. La pasta de cocana es llamada la cocana del pobre pues su costo es bajo debido a la simplicidad de su extraccin y a los bajos precios de los productos utilizados: carbonato de sodio, gasolina o 103
kerosene, cido sulfrico y soda custica. El bazuco se extrae como una pasta pardusca donde el grado de pureza varia entre 80 y 90%; para su consumo no se puede inhalar (es una pasta), ni inyectar (el sulfato de cocana es insoluble en agua), solamente se puede fumar combinada con tabaco, esta prctica es muy usada en Amrica del sur principalmente en Bolivia, Colombia y Per. En cambio el crack preparado en los pases no productores es de mayor pureza, pues se toma el clorhidrato de cocana pura, se pasa por medio de un lcali a base, (alrededor de 10 veces menor) que el clorhidrato puro, pero al pasarla a sulfato aumenta su peso lo que la hace rentable. El crack es la versin Norteamericana de la pasta Colombiana o Boliviana. TIPOS DE ALCALOIDES Alcaloides Pirrolicidnicos Mas de centenar de alcaloides pirrolicidnicos son actualmente conocidos, sin alcanzar una importancia farmacolgica; la gran mayora son steres de alcaminas formadas entre aminoalcoholes de tipo pirrolicidina llamados necinas y cidos alifticos monocarboxlicos (caractersticos de Borraginaceae) como actico, tglico, cido 3-metil butpirico o hidroxipropil butanoico o cidos mas complejos (caractarsticos de Compuestas y Leguminosea) como el cido sensico o el cido monocrotlico. Excepcionalmente estos alcaloides son esterificados por cidos aromticos. S han encontrado principalmente en plantas de familias pertenecientes a las Borraginaceae como Echium, Cynoglossum, Heliotropium, etc., en las Asteraceae (Compuesta) en el gnero Senecio y Eupatorium y en algunas Leguminoseae, Orchidaceae y Apocynaceae. El ncleo pirrolicidina puede variar su estructura o configuracin: puede haber un hidroxilo en 7, puede cambiar su configuracin en 8 o dobles enlaces en su estructura generalmente entre los carbonos 1 y 2.
Alcaloides de este tipo han sido aislados de especies de la familia Compuesta (Asteraceae) como la senecianina de Senesio formosus: rnica o suelda 104
consuelda. Hierba de unos 0.40 a 1.50 cm, crece en grupos ms o menos densos, con tallos acanalados de color purpura; hojas alternas, ssiles, lanceoladas, obtusas y agudas en el pice de 8-15cm de largo por 2-3 cm de ancho; con numerosas flores radiculares de color morado, disco de 1.5 de largo y de 1.4 a 2.5 de dimetro, con pedicelos pilosos de 1 a 7 cm de largo, con bractolas lineales. La toxicidad de diversos Senecios es conocida por si efectos en animales, produciendo lesiones en el hgado.
Biogenticamente, el heterociclo necina es formado a partir de dos molculas de ornitina, segn en la figura 8. ALCALOIDES DERIVADOS DE LA LISINA La lisina como homlogo de la ornitina produce alcaloides anlogos a los producidos por la 1 pirrolidina, por lo tanto, su biosntesis, es similar a los de los alcaloides derivados de la 1 piperidina, estos poseen anillos de seis miembros, mientras que lo primeros poseen anillos de cinco miembros. Comprenden estructuras simples como en el caso de los alcaloides de las Lobelias, de la granada, los alcaloides de las Piperaceae y algunas estructuras policclicas como es el caso de los alcaloides quinilicidnicos. Hay algunos alcaloides que teniendo el ncleo 1 piperidnico, como en el caso de la conina y pinidina, aunque su origen no es el aminocido lisina sino va acetato.
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Un grupo especial de derivados quinolicidnicos es constituido por los azafenalenos, cuyo principal representante es el N-oxido de la coccinellina, feromona de defensa del insecto coleptero del gnero Cossinellides, pequeos cucarrones, comnmente llamados mariquitas, donde tambin se ha reportado la adalinina.
Plantas con alcaloides conteniendo el ncleo 1 piperidnico simple. Tabaco indio: Lobelia inflata Lobeliaceae Droga: partes areas. Descripcin: hierba anual (20-50cm) originaria de Norte Amrica, actualmente se cultiva en EU y Holanda, hojas cortamente pecioladas y cubiertas de pelos, flores de color azul claro, el fruto es una cpsula. Composicin qumica: el tabaco indio contiene entre 0.25 y 0.4% de alcaloides totales donde el principal es la lobelina: 106
La lobelina es usada contra diferentes afecciones broncopulmonares como analptico respiratorio, en la reanimacin de los recin nacidos. Granada: Punica granatum Punicaceae Droga: corteza de la raz y del fruto. Descripcin: arbusto abundante en zonas tropicales, se caracteriza por flores rojas de 5 a 7 ptalos y el fruto que es una baya con pequeos granos rojos comestibles. Composicin qumica: contiene entre 0.5 y 0.7% de alcaloides totales, donde los principales son la peleitiarina y la -peletiarina y sus derivados N-metilados.
La droga tiene propiedades antihelmnticas (tenfugo), actualmente es usada solo en medicina veterinaria. Pimienta Piper nigrum Piperaceae Droga: fruto Descripcin: la planta es mas conocida como especie alimenticia, de tallo sermentoso y trepador, nudoso, verde, redondo y ramoso. Las hojas son alternas, de forma aovada, de color verde oscuro: las flores pequeas crecen a lo largo de una especie de cordn de 4 a 5 pulgadas de longitud. Los frutos son pequeos y redondos y constituyen la pimienta que se vende en el comercio. Composicin qumica: contiene entre 1 y el 25% de aceites esenciales sobre todo hidrocarburos mono y sesquiterpnicos que le dan su olor, su sabor es debido al contenido de amidas (0.5 y 0.7%) donde la piperina es el mayoritario.
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Plantas con alcaloides policclicos conteniendo el ncleo 1 piperidinaQUINOLIZIDINAS Localizadas principalmente en Leguminoseae y Nympheaceae, pueden ser bicclicos como la lupinina del gnero Lupinus, tricclicos como la cyticina, tetracclicos como la espartena aislados del gnero Cytus (ratama blanca o de jardn); de algunos lotos o nenfares se han aislado la matrina, ormosia y nufaridina.
Alcaloides piperidnicos no derivados del metabolismo de la lisina Este restringido grupo de alcaloides comprende el ncleo d la piperidina sustituido por una cadena aliftica ya sea corta como la connina de la cicuta Conium maculatum Umbeliferae y pinidina de Pinus sabiniana Coniferae o larga como la carpana extrada de Carica papaya.
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El cido nicotnico es precursor de alcaloides del tabaco, nuez de areca, de la ricinina de Ricinus comunes, entre otros.
En el caso de la anatabina y la anabasina, alcaloides encontrados en Nicotiana sp. Y que difieren poco en su estructura, su biognesis es diferente; en la anabasina el anillo piperidnico proviene del intermediario 1 piperidina, mientras que en la anatabina este anillo se origina a partir del cido nicotnico. El anillo pperidnico tiene entonces dos orgenes el cido nicotnico y 1 piperidina. Drogas con alcaloides derivados del cido nicotnico El Tabaco. Nicotinia sp. Solanaceae Comprende dos tipos de Nicotiana la N. tabacum de mayor tamao y N, rustica llamada el pequeo tabaco. Droga: hojas Descripcin botnica: los tabacos son plantas originarias de Amrica del Sur, fue introducido a Amrica Central y Mxico en pocas precolombianas, a Europa en el siglo XV por el francs Jean Nicot, dentro de un paquete de plantas teraputicas, actualmente es usada para la fabricacin de productos fitofarmacuticos y en especial para la fabricacin de cigarrillos.
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Es un planta herbcea de 1 a 3 metros, hojas ovaladas, agudas o acuminadas de hasta 30 cm o ms, las inferiores decurrentes en el tallo. Racimos o panculas terminales, cliz de 12 mm, lbulos aocados; carola embudada de 5 cm rosada, lbulos triangulares subulados. Cpsula mas larga que el cliz. Composicin qumica: el contenido de las hojas en material mineral es elevado (15 a 20%), en cuanto a los alcaloides contiene entre 1 y 10% donde el principal es la nicotina. HIGUERA Ricinus comunis, Euphorbiaceae Drogas: semillas Descripcin botnica: arbusto de hasta 6 metros. Hojas palmeado lobuladas de 10 a 60 cm, lbulos oblongos o lanceolados, agudos, glandular-dentados. Flores monicas en racimos con flores pistiladas en la base; cliz estaminado de 6 a 12 mm, el pistilado de 4 a 8 mm. Cpsula de 1.5 a 2.5 cm, oval con espinas carnosas; semillas con mancha o enteramente negras de 10 a 17 mm. Composicin qumica: la semilla contiene 50% de lpidos de donde se extrae el aceite de ricino, rico en cido ricinoleico, ricina una toxialbmina de constitucin polipeptdica, y la ricinina un cianoalcaloide derivado de la piridona que a su vez se deriva del cido nicotnico.
ALCALOIDES DERIVADOS DE LA FENILALANINA Y TIROSINA Los derivados de los aminocidos fenil alanina, tirosina y sus productos de descarboxilacin, comprenden una variada y gran cantidad de estructuras alcalodicas como: * Aminas simples o fenil etil aminas * Isoquinolenas simples * Derivados benciisoquinoleinas: - Alcaloides del opio - Aporfinoides * Participacin de cido mevalnico (emetina y cefalina) Estos alcaloides tienen una variada actividad farmacolgica, muchos de ellos usados en teraputica como es el caso de la emetina, morfina, codena, tubocurarina, etc. 110
AMINAS SIMPLES O FENIL ETIL AMINAS Las feniletilaminas se presentan en un gran nmero de vegetales y tiene efectos farmacolgicos marcados como es el caso de la mezcalina, efedrina, catinona, etc.
Drogas con alcaloides de tipo fenil etil aminas EFEDRAS, Ephedra sp. Ephedraceae Entre las efedras se encuentran la E. snica y E. equisetina Droga: partes areas Descripcin botnica: son hierbas perenes, originarias de China, luego pasaron a la India. Sus tallos poseen numerosas aristas longitudinales muy finas con hojas muy pequeas cnicas en la base. Composicin qumica: sus principales acivos son alcaloides de tipo fenil etil aminas (1.5%) donde el principal es la efedrina, adems se encuentran la norefedrina y sus ismeros; estas estructuras se conocen como anfetaminas (poseen un OH en el carbono benclico). La efedrina es empleada contra el asma con accin ms prolongada que la adrenalina.
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T DE LOS ABISINOS: Catha edulis Celastraceae Droga: hojas Composicin qumica: esta planta originaria de Africa contiene 1% de catinona, sustancia que produce farmacodependencia, la masticacin provoca euforia, sensacin de bienestar, locuacidad, estimulacin motriz e intelectual y una fase depresiva produciendo insomnio.
PEYOTE O BOTONES DE MEZCAL: Lophophora williansii o Echinocactus williansii Cactaceae Este cactus posee entre 3 y 6% de alcaloides totales donde el principal es la mezcalina, contiene tambin alcaloides de tipo tetrahidroisoquinoleina como la anhalanina y lofoforina. El peyote es una de las drogas mgico religiosas usada por los aztecas en ceremonias rituales, la ingestin produce efectos squicos: alucinaciones como visiones coloreadas, distorsin en la percepcin visual y de los sonidos, luego una fase depresiva acompaada de hipotensin, nauseas, sudacin y midriasis. La mezcalina es usada en psiquiatra.
ISOQUINOLENAS SIMPLES De este tipo de alcaloides se han descubierto pocos ejemplares, su biognesis es descrita por Hebert
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BENCILISOQUINOLEINAS En este grupo de alcaloides se encuentran Bencil isoquinoleinas simples BIQ, Bencil tetrahidro isoquinoleinas BTHIQ y las Bisbencil terahidro isoquinoleinas BBTHIQ. Aunque estos alcaloides presentan actividad dopaminrgica, solo la papaverina una bencilisoquinoleina es usado en teraputica, casi inactiva sobre el sistema nervioso central, esta molcula es un espasmoltico que relaja la musculatura lisa sobre todo a nivel de vasos de la regin cerebral, pulmonar y perifrica. Las benciltetrahidroisoquinolenas BTHIQ y las besbenciltetrahidroisoquinoleinas BBTHIQ representa mas de 400 estructuras repartidas en una decena de familias donde las principales son: Menispermaceae (alrededor de 25 gneros), Ranunculiaceae, Berberidaceae, Monimiaceae, Annonaceae y Lauraceae. Existen unas 30 clases de compuestos dependiendo del tipo de enlace o puente (bifenlico o de tipo ter), segn el npumero de estos (mono, di o tripuente), segn el tipo de sustitucin y la presencia de dos centros asimtricos, aumenta la complejidad de estos compuestos.
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Farmacolgicamente el inters de estas sustancias es limitado, aunque muchas presentan un potencial interesante, ninguna es actualmente comercializada. Un cierto nmero de sustancias tienen una importante actividad como paralizantes musculares, solo son actualmente utilizados sus compuestos hemisintticos o sintticos. El trmino curare se aplica a un gran nmero de productos vegetales complejos, utilizados por los indgenas de Amrica del Sur por medio del envenenamiento de sus flechas para cazar sus presas, estos productos son inocuos va oral y activos va parenteral produciendo parlisis muscular y parlisis respiratoria.
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Los CURARES Principalmente constituidos por extractos de corteza de Menispermaceae pertenecientes a los gneros Chondrodendron (C. tomentosum) y Curarea (C. toxifera o C. candicans), y de Loganiaceae al gnero Strychnos (s. toxifera, S. castelnaeana, S. letalis y s. rondetelioides). Aunque la estructura de la tubocurarina no esta bien establecida (hace algunos aos se crea en forma equivocada que los tomos de nitrgeno eran cuaternarios) se demostr por cristalografa de rayos X que la distancia entre los tomos de nitrgeno es de 1.03 mm; esta distancia se puede lograr con anlogos sintticos mas sencillos de la tubocurarina, donde los nitrgenos estn separados por cadenas de 9 a 12 tomos de carbono con distintos grados de estiramiento o plegamiento. Esta observacin llev a la sntesis de compuestos con estructura general Me3N+-(CH2)n-N+Me3 encontrndose que estos homlogos muestran fuertes actividades curarizantes. Dos relajantes musculares de uso corriente que surgieron de estas investigaciones de fines de la dcada de los 40 son el decametonio de accin un poco prolongada y el succinil colina fcilmente hidrolizable y de accin breve.
Otros curares de origen natural Los alcaloides de las Erytrinas tienen una estructura diferente a los curares propiamente dicho. Las Erytrinas pertenecientes a la familia Fabaceae presentes en Amrica del sur, en frica y Asia tropical; farmacolgicamente estos alcaloides son curarizantes muy txico que actan, a diferencia de los anteriores va oral.
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Alcaloides morfinanos Este tipo de alcaloides son exclusivos del gnero Papaver, gnero que cuenta con mas de cien especies, solo una decena biosintetizada la tebana y la morfina es solamente elaborada por P. somniferum y P. setigerum. Las adormideras (amapolas) Pertenecen a la familia Papaveraceae, gnero Papaver la especie principal es Papaver somniferum y P. rhoeas. Papaver somniferum: adormidera, es una planta anual de 0.5 a 1.5 m de altura, con flores solitarias insertadas sobre pednculo velloso, la planta contiene entre 5 a 8 cpsulas. Adems de numerosos hbridos de jardn se conocen las siguientes variedades P. somniferum var. Grabrum. Cultivada en Turqua, sus flores son generalmenre prpuras pero a veces se presentan blancas; cpsula subglobular; 10-12 estigmas, semillas de color blanco a violeta oscuro. P. somniferum var Album. Cultivada en la India; flores y semillas blancas; cpsulas mas o menos aovadas de 4-8 cm de dimetro, sin poros bajo el estigma. OPIO. Es el ltex desecado obtenido de las cpsulas inmaduras de P. somniferum. Obtenido por la incisin de las cpsulas de las diferentes variedades, que luego de secado y oxidado, forma una pasta de color caf oscuro y de sabor acre y amargo. Composicin qumica: el opio contiene cerca de 25 alcaloides combinados con gran parte de cido mecnico el cual se puede detectar por la prueba del cloruro frrico: se extrae el cido mecnico con ter en medio clorhdrico y luego se caracteriza por una coloracin roja granate en presencia de una solucin diluida de percloruro de hierro.
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Su biognesis es a partir de la reticulina, girando la molcula por una lnea imaginaria entre el metoxilo en 2 y el carbono en 6 aa vecino al nitrgeno, luego un acoplamiento oxidativo de fenoles con el fn de formar el ncleo fenantrnico. Accin fisiolgica La morfina * sobre el sistema nervioso central (snc): accin analgsica que se manifiesta a dosis bajas produciendo depresin de la percepcin dolorosa; paralelamente, desarrolla una sedacin seguida de euforia que pasa progresivamente a sueo, el
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despertar es particularmente desagradable, por lo tanto es un buen analgsico pero mal hipntico. * sobre la respiracin es un depresor respiratorio; la morfina y sus derivados a bajas dosis tienen accin antitusiva. La etilacin del OH fenlico de la morfina produce un producto mas potente que la codena de aplicacin oftalmolgica. Mientras que la diacetil morfina, la herona tiene va intravenosa una accin euforiante; mientras que si se sustituye el Nmetilo de la morfina por un grupo N-alilo produce la nalorfina, aunque tiene un efecto analgsico, se usa como antagonista del efecto narctico de la morfina. La codena Es el mas usado en teraputica la metilacin del hidroxilo fenlico de la morfina produce modificaciones de la actividad farmacolgica: * disminucin de la accin analgsica * disminucin del efecto depresor respiratorio * disminucin de la toxicomana Excelente antitusivo ; produce accin sedativa a dosis fuertes y prolongadas. La tebana Este es un alcaloide sin accin teraputica propia. * txico (convulsivamente a dosis altas) La papaverina * espasmoltico sobre la musculatura lisa. La noscapina *no txico, sedativo de la tos ALCALOIDES ISOQUINOLEICOS MONOTEERPNICOS El rizoma de la hipecacuana Cephaelis sp. Rubiaceae, Planta tpica de los bosques fluviales tropicales de Amrica del sur y central causan vmito y son utilizadas en infusiones contra la disentera amibiana.
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Alcaloides derivados del triptfano (alcaloides indlicos) Desde el punto de vista farmacolgico ha habido mucho inters sobre las bases que contiene el ncleo indlico a raz del descubrimiento de la actividad alucingena del LSD as como la actividad sedante de la reserpina aislada del gnero Rauwolfia, el auge de el estudio fitoqumico ocurri en la dcada de los 60 y se diriga principalmente a la familia Apocynaceae. Existen unos 800 alcaloides de este tipo distribuidos principalmente en la familia Apocynaceae, (gpeneros Rauwolfia, Aspidos-perma, Strychnos y Vinca), menos frecuentes en hongos y familias como Leguminoseae, Malphigiaceae, Rubiaceae y Rutaceae donde los alcaloides presentan el grupo indlico sencillo. El trotofano es el precursor de estos alcaloides los cuales se clasifican en triptaminas y en no triptaminas; las triptaminas a su vez, se subdividen en carbolinas y en indoleninas y pueden ser triptaminas simples o triptaminas complejas y estas pueden ser isoprnicas o no isoprnicas.
Poseen accin fisiolgica intensa en los animales aun a bajas dosis con efectos Psicoactivos. Son muy usados en medicina para tratar problemas en la mente y calmar el dolor. Ejemplos: cocana, morfina, atropina, colchicina, quinina, y estricina, quinidina.
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Cocana Erythroxylum coca
Morfina Papaver somniferum
Atropina Atropa belladona
La cocana es un estimulante adictivo que funciona mediante la modulacin de la dopamina, un neurotransmisor que se encuentra en ciertas zonas y neuronas del cerebro. Formas de produccin: a) Produccin de pasta base de cocana: queroseno, gasolina u otros disolventes orgnicos parecidos; alcalis, por ejemplo Na2CO3, K2CO3, Ca2CO3, NaOH, H2SO4). b) Produccin de cocana base: oxidantes, por ejemplo: KMnO4, H2O2, H2SO4; alcalis, por ej: solucin acuosa de NH4. c) Produccin de clorhidrato de cocana: solventes orgnicos, por ejemplo: ter etlico, acetona, metiletilcetona o tolueno; HCl. Para la preparacin de la pasta bse de cocana, se procede a la alcalinizacin de la hoja de coca, secado, extraccin con solvente orgnico (queroseno), precipitacin con cido fuerte (cido sulfrico), disolucin del residuo en agua y precipitacin ltima con lcalis.
Dopamina
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Quinidina
Colchina
DMPP = dimetiolo alil pirofosfato IPP= isopentenil pirofosfato GPP= geranil pirofosfato
Vinblastina R=CH3; Vincristina R=CHO de Catharanthus roseus Estn constituidos adems por C y H, muchos llevan O 2, lo que les confiere una serie de propiedades fsicas (slida, cristalizable), y raramente suelen contener azufre. Las bases nitrogenadas pricas y pirimidnicas estn excluidas del grupo de los alcaloides por carecer de actividad fisiolgica notable y por sus relaciones bioqumicas con los cidos nuclicos. Se han encontrado unos 50 alcaloides en rganos animales, solo 12 de stos no se han localizado en vegetales y por definicin se acostumbra excluirlos del grupo. Los alcaloides aparecen en muy diversas familias de plantas, unos 256 en los hongos, algas y otros vegetales inferiores. La mayora de los alcaloides son slidos incoloros, aunque algunos como la coniina y la nicotina son lquidos. Otros son amarillos como la berberina; o rojos como la queliretrina.
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Nicotina
Coniina
Gran parte de los alcaloides derivan de unos pocos aminocidos, bien de cadena abierta o aromticos, la clasificacin puede realizarse de la siguiente forma I.-Alcaloides derivados de ornitina y lisina: tropnicos, pirrolizidnicos, piperidnicos y quinolizidnicos. II.-Alcaloides derivados del cido nicotnico. III.-Alcaloides derivados de fenilalanina y tirosina: feniletilamnicos e isoquinolenicos. IV.-Alcaloides derivados del triptfano: indlicos y quinolenicos. V.- Alcaloides derivados de la histidina: imidazlicos VI.- Alcaloides derivados del cido antranlico. VII.-Alcaloides derivados del metabolismo terpnico: diterpnicos y esterodicos. VIII.- Otros alcaloides: bases xnticas I.-ALCALOIDES DERIVADOS DE LA ORNITINA Y LISINA: Alcaloides tropnicos Estructura bicclica hidroxilada, esterificada con cidos orgnicos, que se origina por la condensacin de un anillo pirrolidnico y otro piperidnico, compartiendo dos tomos de carbono. El anillo piperidnico presenta una conformacin en forma de silla.
Lisina La disposicin espacial del grupo OH situado sobre el C3, determina la existencia de dos tipos de estructuras tropnicas: 3--hidroxitropano o tropanol (hiosciamina, atropina, hidroxitropano o pseudotropanol (cocana, tropococana). escopolamina) y 3--
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Alcaloides pirrolizidnicos Los alcaloides pirrolizidnicos son sustancias muy txicas que carecen de aplicacin a la teraputica. Los efectos txicos, ms importantes para compuestos que poseen estructura de dister macrocclico, causan entre otros daos un incremento considerable de los valores de transaminasas en sangre y hepatomegalia. Estos alcaloides tambin actan como agentes mutgenos, teratgenos inductores de tumores hepticos. e
Se localizan en diferentes familias botnicas, especialmente Asteraceae y Boraginaceae. De las especies que contienen alcaloides pirrolizidnicos se mencionarn simplemente, como ej: consuelda, tuslago y senecios, aunque tambin estaran el eupatorio (Eupatorium cannabinum L.) y borraja (Borago officinalis L.).
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Alcaloides quinolizidnicos En este grupo se consideran una serie de compuestos que biogenticamente derivan de la lisina y que poseen en su estructura simplemente una o dos quinolizidinas (estructura heterocclica nitrogenada bicclica) por lo que se diferencian de otras estructuras alcalodicas en las que coexiste la quinolizidina con otra estructura nitrogenada diferente. Son especialmente abundantes en la familia Fabaceae, aunque tambin se han identificado en plantas de las familias Solanaceae, Berberidaceae, Ranunculaceae, Rubiaceae y Quenopodiaceae. II.- ALCALOIDES DERIVADOS DE FENILALANINA Y TIROSINA Un grupo importante de alcaloides es el procedente de aminocidos aromticos, fenilalanina y tirosina. Es un grupo muy amplio en el que se encuentran compuestos dotados de actividades farmacolgicas de gran inters. Se incluyen en este grupo los alcaloides feniletilamnicos, cuyo nitrgeno no forma parte de un heterociclo, son considerados como protoalcaloides y no como verdaderos alcaloides. Podemos citar entre estos la efedrina, mescalina del peyote, con propiedades alucingenas. Principalmente forman este grupo los alcaloides isoquinolenicos, derivados qumicamente de la isoquinolena si bien, habitualmente se trata de compuestos 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolenicos, o an mas frecuentemente de derivados de la benciltetrahidroisoquinolena. Su biosntesis tiene lugar a partir del aminocido descarboxilado o de un homlogo, al que se une generalmente otro aminocido desaminado o en contadas ocasiones, una unidad isoprnica. Los alcaloides constituidos por tetrahidroisoquinolenas sencillas, no son muy frecuentes y carecen de inters. Mucho mas importantes son los alcaloides bencilisoquinolenicos. Segn su formacin en el vegetal y su estructura qumica podemos subdividirlos en varios grupos, citando entre los ms interesantes: - Bencilisoquinolenicos - Aporfnicos - Morfinanos - Protoberberinas - Bisbencilisoquinolenicos - Fenetilisoquinolenicos 124
- Isoquinolein-monoterpnicos.
III.- ALCALOIDES DERIVADOS DEL TRIPTFANO Y OTROS ALCALOIDES Alcaloides derivados del triptfano Los alcaloides derivados del triptfano constituyen el grupo ms numeroso de alcaloides. La mayor parte proceden de la triptamina, producto de la descarboxilacin del triptfano, que se une en casi todos los casos a otras unidades como son las unidades acetato, mevalonato, secologansido (aldehdo monoterpnico) y otras. Podemos por tanto hablar de varios subgrupos dentro de los alcaloides indlicos de los que citaremos a continuacin los principales:
a) Alcaloides simples, derivados normalmente de la triptamina. Aqu se incluiran por ejemplo los alcaloides alucingenos del peyote como la psilocina.
4-hidroxi-N,N-dimetil-triptamina o 3-(2-(dimetilamino)etil)-1H-indol-4-ol. 125
La psilocina es un alcaloide derivado de la psilocibina y encontrado en la mayor parte de los hongos psilocibios. Tiene propiedades alucingenas. b) Alcaloides derivados de la -carbolina, biogenticamente formados por condensacin de un aldehdo o cetocido con la triptamina. Los alcaloides de algunas especies alucingenas de la zona del Amazonas o los de la pasiflora, son de este tipo. c) Alcaloides procedentes de la ciclacin de la triptamina, como la eserina o fisostigmina del Haba del Calabar (Physostigma venenosum), inhibidor de la colinesterasa que en la actualidad prcticamente no se utiliza en teraputica. Alcaloides derivados de la ergolina, su estructura qumica corresponde a la unin de un indol con una quinolena hidrogenada, aqu se encuentran los alcaloides del cornezuelo de centeno (Claviceps purpurea). e) Alcaloides indolmonoterpnicos, proceden de la unin de la triptamina con el secologansido. En este amplio grupo de compuestos se encuentran estructuras qumicas muy diversas como la estricnina, alcaloide muy txico con actividad estimulante medular y procedente de la nuez vmica (Strychnos nux-vomica) o, la reserpina, alcaloide antihipertensivo aislado de la rauwolfia (Rauwolfia sp.) f)Alcaloides quinolenicos, biogenticamente incluidos en el subgrupo anterior ya que su biosntesis se realiza a partir del triptfano por unin al secologansido va estrictosidina pero qumicamente su estructura deriva de la quinolena. Alcaloides derivados de la histidina La histidina es un aminocido con un anillo pentagonal dinitrogenado del cual derivan los alcaloides imidazlicos. Estos alcaloides constituyen un grupo muy pequeo y de localizacin muy restringida en la naturaleza. nicamente merece la pena citar en este grupo las hojas de jaborandi, Pilocarpus sp. perteneciente a la familia de las Rutaceae de donde se extrae la pilocarpina, alcaloide con actividad parasimpaticomimtica empleado en forma de colirio en el tratamiento del glaucoma.
Histidina 126
Alcaloides terpnicos Aunque algunos autores consideran que estos compuestos son pseudoalcaloides, para nosotros se trata de autnticos alcaloides. Se forman a partir del isopreno va cido mevalnico. Los ms interesantes y que deben conocerse adems por su toxicidad, son los formados por unin de cuatro unidades isoprnicas es decir, los diterpnos. Se encuentran principalmente en especies de la familia Ranunculaceae. Entre las plantas medicinales con este tipo de alcaloides citaremos la raz de acnito. Bases pricas (bases xnticas) Qumicamente derivan del anillo de la purina formado por condensacin de una pirimidina con un imidazol. Las bases pricas con mayor inters por su utilizacin en teraputica son tres metilxantinas: 1,3,7-trimetilxantina, 1,3-dimetilxantina y 3,7-dimetilxantina, conocidas respectivamente como cafena, teofilina y teobromina. Presentan caractersticas especiales como es su comportamiento como anfteros o el hecho de ser solubles en agua caliente, por lo que para muchos autores no se trata de autnticos alcaloides. Pirimidas Timina
Citosina
Uracilo
Purinas Adenina
Guanina
Parece ser que el mecanismo de accin de estos alcaloides est relacionado con la inhibicin de las fosfodiesterasas del AMPc y en menor medida del GMPc, incrementando por ello las concentraciones de estos importantes mediadores celulares. 127
Precisamente este AMPc acta como regulador celular de los enzimas implicados en el metabolismo energtico, induciendo una disminucin de la sntesis de glucgeno y una activacin de la glucogenolisis y de la lipolisis en las clulas hepticas, adipocitos y clulas musculares. Por esta razn, las acciones de las drogas que contienen estos alcaloides presentan cierta similitud con las de las catecolaminas en cuanto a su influencia sobre el metabolismo energtico. La cafena es consumida de forma habitual por la mayora de la poblacin mundial. Se encuentra presente en diversas plantas, especialmente en el caf, t, cola, guaran y mate.
Usos medicinales de los alcaloides La morfina se emplea legalmente con fines medicinales: Como analgsico en hospitales para tratar dolencias, como:
Dolor en el infarto agudo de miocardio Dolor post-quirrgico Dolor asociado con golpes Como analgsico para tratar dolencias crnicas, como: Cncer Dolor producido por clculo renal Dolor de espaldas severo Como anestesia general Como anestesia epidural Para cuidados paliativos Antitusivo para tos severa Antidiarreico en situaciones crnicas (por ejemplo, diarrea asociada al SIDA). Aunque la loperamida (un opioide que no se absorbe y acta slo en el intestino) se emplea con mayor frecuencia
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Tcnicas de Obtencin Extraccin con cido tartrico Tratamiento con hidrxido de calcio Separacin selectiva Extraccin etanlica Extraccin cida
Reacciones caractersticas Soluciones de varios cidos de metales pesados, como: El silicotungstico, cloroplatnico, fosfomolbdico, forman precipitados con la mayora de los alcaloides, igualmente el mercuriyoduro de potasio (Reactivo de Mayer), el yoduro de bismuto (Dragendorff) o el yoduro de potasio (Wagner). Solucin de Dragendorff Solucion A : 0.85 mg de subnitrato de bismuto disueltos en una mezclka de 10 ml de cido actico y 40 ml de agua. Solucin B: 8 g de yoduro de potasio disueltos en 20 ml de agua. Se mezclan 5 ml de A y 5 de B y se aforan a 100 ml con agua destilada. Cromatografa en papel en capa delgada y fase gaseosa Cromatografa en papel Cromatografa en capa fina K2HPO4M/15 con NaH2PO4M/15, pH 6.5 y secado antes de colocar la muestra. Fase estacionaria formamida Fase movil heptano-metiletilacetona 4:1v/v, butanol,-cido actico-acetona 10:2:1 Agentes cromognicos: vapores de yodo, luz ultravioleta, solucin de Dragendorff modificada. Cromatografa de gases acoplada a espectrmetros de masas.
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UNIDAD 9. METABOLITOS DERIVADOS DEL CIDO SHIKIMICO
Se aisl en 1885 Planta Shikimi-no-ki Ilicium sp (Illiciaceae) Precursor de un gran nmero de sustancias naturales que con anillos aromticos Metabolito universal de plantas supriores y organismos no mamferos
Proporciona un patrn de oxigenacin en el anillo aromtico, permite reconocer los derivados del cido shikmico, las posiciones oxigenadas son de tipo catecol (orto) o pirogalol (diorto), en el caso de los fenoles monoxigenados son generalmente p-hidroxi-compuestos. En compuestos derivados de la ruta del acetatomalonato los grupos oxigenados estn en disposicin meta entre s, o sea que los polifenoles son derivados tipo resorcinol. Oseltamivir: Es un derivado del c. Shikimico, es un medicamento antiviral selectivo contra el virus de la influenza, inhibe la replicacin del virua A y B de la gripe. Lo produce la casa Roche bajo la marca de Timiflu El oseltamivir es una prodroga, que se transforma en un compuesto activo en el organismo disminuyendo los sntomas en los pacientes con la gripe adquirida recintemente y reduce la incidencia de los sntomas propios de una gripe confirmada, como las infecciones bacterianas: bronquitis, sinusitis y neumona.
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BIOSNTESIS DEL CIDO SHIKMICO Ocurre a partir de los precursores de 3 y 4 tomos de carbono, como son el cido fosfoenolprvico (PEP) y la eritrosa 4-fosfati (E4P) por una condensacin tipo aldlica, produciendo un compuesto C7 travs de una serie de tapas que se resumen en la figura 4.
Los aminocidos fenilalanina y tirosina se sintetizan por reacciones posteriores del cido shikimico con PEP, seguida de las transformaciones que se muestran en el esquea de la figura 6, va del cido corsmico como intermediario del cido prefnico para luego formar el fenilpirvico. En microorganismos y plantas, estos aminocidos, se forman separadamente a partir del cido prefnico. Fig 5 Los cidos prefnico, fenilpirvico y el p-hidroxifenilpirvico son los precursores de fenilalanina y tirosina, estos aminocidos son los constituyentes universales de protenas y es punto de partida de la secuencia biosinttica que lleva a los llamados compuestos C6C3.
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En el caso de los animales, se produce la hidroxilacin de la fenil alanina a tirosina y luego a dihidroxifenil alanina (L-DOPA), precursor de las catecolaminas como el neurotransmisor noradrnalina y la hormona adrenalina, Fig 6
Biognesis se los cidos cinmicos La ruta principal para la produccin de los cidos cinpamico a partir de fenilalanina o tirosina, se revel cuando se encontr que los tejidos vegetales contienen sistemas enzimticos capaces de catalizar la remocin de amonaco de estos aminocidos:
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En los mecanismos PAL (fenilalanina-amonioliasa) o el TAL (tirosina-amonioliasa) las enzimas actan cobre los grupos salientes en posicin trans, como una eliminacin tipo Hoffmann Fig 7
Las evidencias experimentales muestran al parecer que la enzima (PAL) se encuentra ampliamente distribuida en los vegetales, mientras que la (TAL) se encuentra principalmente en ciertas gramneas. Estas enzimas son esteroespecficas ya que son capaces de desaminar los L-aminocidos pero no los D-aminocidos. Los cidos cinmicos producidos por accin de los aminoliasas, constituyen el punto de partida para una cantidad enorme de procesos metablicos secundarios. Fenilpropanoides C6C3, C6C2 Y C6C1 Compuestos C6C3 (cidos cinmicos) La importancia fundamental de la secuencia de reacciones cido shikimico cido prefnico fenilalanina (o tirosina) cidos cinmicos y la amplia distribucin natural de los cidos cinmicos y sus productos de biodegradacin. Lleca a la conclusin de que muchos compuestos naturales que contienen cadenas laterales de 3 tomos de carbono ligados a ncleos fenlicos, son productos de reducciones biolgicas de los cidos cinmicos: la naturaleza ofrece muchos ejemplos de casi todos los niveles de oxidacin de la cadena lateral de estos compuestos. Una caracterstica estructural general, en este tipo de sustancias es la presencia frecuente de funciones oxigenadas en posiciones 4, 3 y 4, 4 y 5 y 3, 4 y 5, que son las mismas posiciones oxigenadas presentes en el cido shikmico.
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Los siguientes son los ncleos principales de los fenil propanos, se puede observar que las sustancias oxigenadas del anillo son en para o en meta de la cadena
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Entre los derivados de los cidos cinmicos, se encuentra el cloranfenicol (cloromicetina), agente bacteriosttico de amplio espectro, inicialmente aislado de cultivos Streptomyces venezuelae, se sintetiza a partir de la tirosina por medio de una aminacin produciendo la p-aminofenilalanina (L-PAPA) que luego de una serie de reacciones produce el cloranfenicol. Actualmente es sintetizado en forma de steres (succinato y palmitato): activo frente a bacterias gran-positivas y grannegativas, incluyendo anaerobios, clamidas y ricketsias. Exhibe actividad bactericida frente a Haemophilus influenza, Streptococcus pnrumoniae y Neisseria meningitidis. Por sus efectos secundarios, actualmente no se considera antibitico de primera eleccin. Su biognesis se muestra en la figura siguiente:
Compuestos C6C2 Una clase de compuestos C6C2 que provienen de compuestos C6C3 por un proceso de descarboxilacin, estos compuestos son derivados tipo estireno, fenil etanoide y acetofenona.
Compuestos C6C1 A partir de los cidos cinmicos las plantas pueden generar compuestos aromticos C6C1 formando inicialmente el ster de la coenzima A del cido cinmico, el cual puede sufrir degradacin de la cadena lateral, mediante un proceso enzimtico similar a la oxidacin de los cidos grasos. Esquema fig 9
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El derivado del cido benzoico as originado, puede descarboxilarse para generar compuestos C6, o sufrir una o varias etapas de reduccin para general derivados tipo benzaldehdo, alcohol benclico y compuestos derivados del tolueno. El derivado del cido benzoico as originado, puede descarboxilarse para generar compuestos C6, o sufrir una o varias etapas de reduccin para general derivados tipo benzaldehdo, alcohol benclico y compuestos derivados del tolueno.
Compuestos C6 Son pocos los compuestos que han sido aislados en la naturaleza, los ms comunes son la arbutina (el -D-glucopironsido de la hidroquinona) y su ter metlico. La arbutina es derivada de la ruta del cido shikmico fenilalanina; esto se comprob por experimentos en los cuales se administr fenilalanina, cido cinpamico, tirosina y cido shikpimico marcados 14C, a hojas de Pera, Pyrus communis (familia Rosaceae), demostrando que la arbitina era originada a partir de estos precursores ya que efectivamente se aisl arbutina radiactiva. Estos resultados y la posterior demostracin experimental de la formacin de arbutina a partir de fenilalanina marcada en Grenvillea robusta (Fam. Proteaceae) confirmaron este hallazgo. Figura 10
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Compuestos C6C2C6 (ESTILBENOS) Los estilbenos son compuestos naturales de frecuente aparicin en diferentes plantas como Cyraceae. Dipterocarpaceae. Gnetaceae y Vitaceae, pueden encontrarse libres o como glicsidos. Pertenecen al grupo de los polifenles no flavonidicos, su esqueleto estructural comprende de anillos bencnicos unidos por un puente etileno C6C2C6 donde el resveratrol (3,5,4-trihidroxiestilbenceno), con gran actividad antioxidante; es de anotar que el resveratrol proviene de do vas metablicas diferentes, va acetato (el primer anillo) y va cido shikmico el segundo anillo.
El resveratrol de Vitus vinfera (Vitaceae) y otros estilbenos como la combrestastatina A-4 del sauce africano Rhus lancea (Anacardiaceae) mediante inhibiciones enzimticas, se ha demostrado que actan como compuestos quimiopreventivos del cncer, capaces de prevenir, inhibir o reversar procesos de carcinognesis. La biosntesis de los estilbenos se produce por el alargamiento de cadena de un cinamil CoA (va Shikmico) con tres unidades de malonil CoA (va acetato).
Plantas que contienen compuestos fenil propanos Las hojas secas de Gayuba, Arctostaphylos uva-ursi. Fam. Ericaceae. La gayuba es un pequeo arbusto perenne de montaa, localizado en centro y norte de Europa y en Norteamrica. El extracto acuoso de las hojas secas de Gayuba, es tradicionalmente utilizado para el tratamiento de infecciones en las vas urinarias (Farmacopea Francesa 10 edicin). La gayuba es diurtica y astringente, durante la excrecin ejerce una accin antisptica sobre las vas urinarias, en forma tpica se usa para quitar manchas de la piel. 138
La droga contiene flavonoides, cido urslico (triterpeno pentacclico), 10% de taninos glicos y entre 5 y 10 % de arbutosido y metil arbutosido. Vainilla, Vainilla planifolia, Fam Orchidaceae. La vainilla esta constituida por los frutos inmaduros, curados y desarrollados de la orqudea Vainilla planifolia, cultivada en Mxico y algunas islas ocenicas. La vainilla verde contiene hetersidos principalmente glucovainilla y alcohol glucovainillico. Durante el curado, estos compuestos sufren oxidacin e hidrlisis, los principales constituyentes son vainilla, anisaldehido y piperonal. Fruto de ans, Pinpinella anisum, Fam. Umbeliferaceae/Apiaceae Esta es una planta herbcea originaria de Egipto y del Medio Oriente y cultivada en casi todas las regiones del planeta. La droga comprende los frutos maduros y secos, son de solor gris verdoso y olor aromtico agradable, empleados en forma natural como infusiones es carminativo, estomacal, antiespasmdico, espectorante germicida y aromatizante. Los frutos contienen entre 2 y 3% de aceite escencial, que es incoloro cuyo principal componente es el anetol (hasta un 90%), estragol, anisaldehdo. Uva roja (Vitus vinifera, Fam. vitaceae) La coloracin es debido a una importante concentracin de compuestos de tipo antocianinas, concentracin, que vara en funcin del tipo de maduracin. Sus principales compuestos se encuentran en las semillas y la piel de la uva. Entre estos compuestos destacan los flavonoides, polifenoles (entre ellos el resveratrol), antocianinas, proantocianidinas. Compuestos (C6C3)2 (LIGNANOS) Los lignanos son una clase de compuestos derivados de fenilpropanos ampliamente distribuidos en la naturaleza, formados por dimerizacin oxidativa de unidades C6C3. Dentro de esta clase de compuestos, se puede distinguir varios grupos: Los lignanos propiamente dichos: son dmeros oxigenados de fenilpropanos sencillos con puente en la cadena lateral.
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De estos dmeros se han aislado mas de 500 compuestos en aproximadamente 60 familias, del orden Magnoliales y Piperales, se han encontrado principalmente en Myristicaceae, Magnoliaceae, Piperaceae y Aristolacaceae. En races y rizomas de especies de Podophyllum Berberidaceae, y de otras especies, se extraen las tetralinas como podofilotoxina, un anti cancergeno: en races de Artemisia absinthium (Asteraceae), se han extrado furofuranos de tipo sesamina, usando como sinergista de piretos, el cido nor-dihidroguairtico y sus derivados, presentan una importante actividad antioxidante.
Los lignanos propiamente dichos, dependiendo de las cadenas laterales, se pueden dividir en cinco grupos de estructuras fundamentales: Diaril butanos: cuando las cadenas laterales no son sustituidas como el caso de cido guairtico.
Butirolactonas: una de las cadenas en un cido carboxlico y la otra un alcohol que al deshidratarse forman un lactona, pueden ser saturadas o insaturadas.
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Furanos y Furanoides
Furofuranos o Difuranos
Ariltetrahidronaftalenos (Tetralinas)
Neoliganos: son compuestos cuyas uniones son diferente a -
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Lignoides o los Olignomeros de lignanos, con este trmino se designa al resultado de la condensacin de tres a cinco unidades de fenilpropanos. Lignanos diversos
Lignanos conjugados Dentro de esta clase de sustancias existes los lignanos conjugados con otros compuestos fenlicos como los flacolignanos: condendacin entre un lignano y un flavoniode, constituyentes de Sylibum marianum (Asteraceae) o cardo mariano Biognesis de lignanos La biognesis de los lignanos se basa en el acoplamiento oxidativo de fenoles, este acoplamiento por dimerizacin de los precursores C6C3 puede explicarse de forma bi-electrnica o por radicales libres. 142
El acoplamiento bi-electrnico se explica segn el esquema siguiente: luego del acoplamiento oxidativo de fenoles, actan NADPH +H+ y aromatizar los anillos, segn el esquema de la formacin del cido guaiartico por radicales libres.
El acoplamiento mediante radicales libres, mostro en el esquema siguiente, permite determinar las posiciones activas del anillos las cuales son en para y en meta a la cadena lateral. Extraccin de lignanos Los lignanos se pueden aislar por extracciones con metanol seguidas por particiones son solventes de diferentes polaridades. Los lignanos que poseen grupos fenlicos, se pueden separar por precipitacin: a las soluciones alcohlicas se les adiciona KOH acuoso concentrado, estos se precipitan como sales de potasio o con acetato de plomo, precipitan como sales de plomo, en este ltimo caso, los fenoles se librean por la adicin de H2S a la suspensin alcohlica. Una vez obtenido el extracto se monitorea por cromatografa en capa fina (ccf) y las manchas se observan en UV a 254 nm o con vapores de yodo. Caractersticas espectrales de lignanos Una caracterstica importante de los lignanos, es que todos producen rotacin especfica de la luz polarizada, o sea tiene un valor de ]D. Los espectros UV carecen de detalles particulares exceptuando aquellas conjugaciones con los anillos aromticos, generalmente tienen dos mximos de absorcin de similar intensidad uno entre 230-240 nm y otro entre 280 y 290 nm. Las insaturaciones conjugadas con los anillos aromticos originan desplazamientos de las seales. El espectro de masa muestra los diferentes fragmentos para la asarinina un bifurnixo y para el dimetoxi galgravina un tetrhahidrofurano.
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Inters biolgico de los lignanos Gran nmero de lignanos y neolignanos poseen diferentes usos teraputicos, en especial como inhibidores enzimticos y antihipertensivos como los derivados del pinoresinol, potencializadores de la accin de piretros, como el aceite de ssamo, hepatoprotertor como la shisandrina B aislado de los frutos de Schisandra chinensis Fam. Magnoliaceae, etc., pero solo los derivados hemisinteticos de la podofilotoxina, con propiedades citostticas y antimitticas y los flacolignanos del cardo mariano, con propiedades antioxidantes y hepatoprotectoras se encuentran con formulaciones farmacuticas y son explotadas teraputicamente. ALGUNAS PLANTAS QUE CONTIENEN LIGNANOS Podofilo, resina de podofilo, Podophyllum peltatum, Fam. Erberidaceae La droga esta constituida por las races y el rizoma desecado, es una planta herbceaa, penenne, comn en lugares hmedos del oriente de Canad y EU. Los principios activos del podofilo entre 8 y 12%, son podofilotoxima y y pelatatina, los cuales se obtienen precipitando el extracto alcohlico de resina en agua. La resina de podofilo es citotxica y se usa localmente en el tratamiento de verrugas. Hyptis verticillata Fam. Lamiaceae Las partes areas de este arbusto de 1 a 2 metros de altura, son usadas por los indgenas centroamericanos, como antibacteriano y antiinflamatorio, antihelmntico y antifngico. Contienen triterpenos, esteroides y los lignanos podofilotoxina, peltatina y cido rosmarnico. Hyptis verticillata, Fam. Lamiaceae Las partes areas de este arbusto de 1 a 2 metros de altura, son usados por los indgenas centroamericanos, como antibacteriano y antiinflamatorio, antihelmntico y antifngico. Contiene Triterpenos, esteroides y los lignanos podofilotoxina, peltatina y cido rosmarnico. Cardo mariano, Silybum marianum, Fam Asteraceae Hierba bianual que alcanza hasta 2 m de altura, con hojas alternas, grandes y el margen muy espinoso, limbo verde oscruro, brillante, con manchas blancas irregulares. Las semillas de Cardo Mariano, desde pocas antiguas, han sido utilizadas en el tratamiento de los trastornos hepticos. La semilla est compuesta por: principios amargos, aceite esencial, resina, tiramina, hitamina y flavonas. El componente 144
ms importante y que justifica su accin es la silimarina que es un componente ligno-flavonoide muy amargo y con marcada accin hepato-desintoxicante y regenerador heptico, por lo que resulta particularmente til en el tratamiento de transtornos hepticos, tanto lesiones como funcionales txicos (tetracloruro de carbono, tioacetamida, paracetamol, etc.), infecciones virales (hepatitis tipo A, B, etc.) Estructuras polimricas A partir de derivados del cido shikmico, se forman tres tipos de polmeros Fig 11: Las ligninas, los taninos y los derivados de la tirosina, pasando por dopa amina y que genera la melanina responsable de la pigmentacin de la piel. Ligninas son polmeros de unidades C6C3 con peso molecular alto -8000 correspondiente a =40 unidades y constituye entre un 22 a un 34% de la madera, contiene tres tipos de residuos aromticos de Guaiacil o coniferil, el siringil o sinapli y el p-cumaril. Se detecta la lignina con el test de floroglusinol en HCl dando un color rojo o tambin con el test de Male, que se puede determinar la clase de material vegetal. Se trata el material con KMnO 4 seguido de HCl y luego amoniaco, dando un color prpura para las Gymnospermas y con un color marrn para las Angiospermas dependiendo de cual sea el residuo. Los polmeros de las Gymnospermas contienen solo residuos de alcohol coniferilico, las Angioespermas dicotiledneas contiene solo residuos coniferil alcohol y sinapil alcohol, mientras que las Angioespermas monocotiledoneas contienen los tres residuos coniferil alcohol, sinapil alcohol y p-cumaril alcohol. Taninos son sustancias de origen vegetal y de estructura polifenlica, peso molecular entre 500 y 3000; so amorfas, de sabor astringente, solubles en agua, en alcohol y en acetona en forma de soluciones coloidales, pero su solubilidad depende del grado de polimerizacin, son insolubles en solventes apolares; por su capacidad de precipitar protenas, se usan para curtir la piel. Se encuentran repartidos en la mayora de las especies vegetales, especialmente en familias como: Coniferae, Ericaceae, Labiadas, Leguminosae, Myrtaceae, Poligonaceae, Rosaceae Rubiaceae, Fagaceae, fabaceae, etc. Desde el punto de vista farmacolgico, presentan acciones derivadas de su capacidad de formar complejos y precipitar metales, alcaloides y protenas: * astringentes y antidiarreicos, se unen y precipitan las protenas presentes en las secreciones. * antimicrobianos y antifngicos. * antdotos para el envenenamiento con alcaloides y metales pesados. Su toxicidad en general es baja y deriva de la posible intolerancia gstrica y estreimiento que puede causar. Se localiza en vacuolas, combinados con alcaloides y protenas y desempean una funcin defensiva frente a insectos: agallas, maduracin de los frutos. 145
Se pueden encontrar en todos los rganos de la planta: Corteza: roble (Quersus colombiana), castao (Sterculia apetala), eucalipto (Eucalyptus globulus), granada ( Punica granatum), canela (Cinnamomun zeilanicum) quina (Cinchona sp.) Madera: mangle (Rysophora mangle), acacia (Delonix regia). Hoja: hamamelis (Hamamelis virginiana), t (Thea sinesis), guayaba (Psidium guajava), almendro (Terminalia catappa) Flores: rosa roja (Rosa canina) Granos o semillas: caf (Coffea sp.), kola (Cola nitida). Tejidos patolgicos y rganos viejos: agallas de alepo (corteza de roble resultado de la descomposicin a la ovoposicin de las avispas). Taninos condensados o proantocianinas: o tambin llamados catecol taninos, son molculas ms resistentes a la ruptura y cuyas unidades son derivados flavonidicos. Taninos hidrolizables: galotaninos y elagitaninos que pueden ser hidrolizados por cidos o enzimas, son formados por varias molculas de cidos fenlicos derivados del shikmico unidos por enlaces ster a un ncleo central de glucosa. -Galotaninos: son aquellos en los cuales son unidades que comprenden ya sea el cido glico o el cido diglico. Algunos ejemplos ruibarbo, clavero, ptalos de rosa roja, hojas de gayuba, agallas de China, hamamelis, castao y arce. -Elgitaninos: son aquellos cuyas unidades contienen el cido elgico o el cido hexahidro difnico. Algunos ejemplos:
Estos taninos pueden ser hidrolizados por enzimas como la tanasa, secretada por Aspergillus sp. y Penicillum sp., hidrolizando la glucosa y liberando los cidos que los conforman. Las soluciones acuosas de los taninos precipitan con sales de metales pesados Cu, Fe, Hg, Pb, Zn. Con sales frricas los taninos hidrolizables producen una coloracin azul oscura y los taninos condensados una coloracin verdosa.
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Principales plantas que contienen taninos Agallas de Roble (alepo) Quercus infectoria, Fam. Fagaceae Son excrecencias o verrugas formadas sobre las ramas jvenes del roble, como resultado de la ovodeposicin de la avispa de agalla, al desarrollarse la larva, induce a la proliferacin celular de los tejidos del husped, formndose una masa globosa, dura y densa de coloracin verde, donde se acumulan steres galotnicos de glucosa en gran proporcin (50-70%). Hamemelis Hamamelis virginiana, Fam. Hamamelidaceae Es un arbusto de 2 a 5 m de altura, ampliamente distribuido del norte de Amrica, la droga esta constituida por las hojas secas, utilizadas por sus propiedades astringentes y vasocontrictoras. Las hojas de hamamelis contienen -10% de galitaninos y elagitaninos, proantocianinas y principios amargos.
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Almendro tropical Terminalia catappa, Fam Combretaceae rbol extico ampliamente distribuido en zonas tropicales y subtropicales es considerado como la mayor fuente de taninos del trpico, de altura considerable de hasta 25 metros y can recto, cuyas ramas o brazos casi horizontales, saliendo de un mismo punto en todas direcciones, asemeja un quitasol sin curvatura; por cuya agradable y peregrina apariencia se destina para alamedas y jardines; la madera es blanca, cscara lisa, roja por dentro: hojas grandes, nerviosas, ovoides, algo angostas por sus extremos y rematando en punta, verdes o moraduzcas, verdes amarillosas por debajo y speras; flores pequeas, inodoras, de un verde blancuzco y en espigas; el fruto se asemeja a la almendra comn. Las hojas han sido empleadas en la medicina tradicional en Taiwan, la India, Filipinas, Malasia e Indonesia, para el tratamiento de la dermatitis y la hepatitis. Los compuestos presentes en las hojas de la Terminalia catappa son fundamentalmente taninos hidrolizables como: punicalagina, punicalina Fig 12.m cido chebulgico y geranina.
Cumarinas Las cumarinas su nombre ciene de Coumaron nombre comn de la haba tonca (Dipteryx odorata Willd., Coumarouna odorata Aubl. Fam. Leguminosea/Fabaceae), sus metabolitos tpicos de plantas superiores y algunos pocos microorganismos, su ncleo es venzo 2 pirona o venzo pirona. En general son lactonas insaturadas y comprenden otra clase de compuestos C6C3 prcticamente todas la cumarinas, a excepcin de la cumarina propiamente dicha, posee un sustituyente oxigenado en posicin 7, ya sea hidroxilado como sucede en la umbeliferona o combinado (metilo, azcares, etc.) Se han asilado unas 1000 cumarinas naturales en unas 150 especies distribuidas en aproximadamente 30 familias, principalmente en Umbeliferae/Apiaceae, Rutaceae, Leguminoseae/Fabaceae, Papilionaceae, Rubiaceae, Lamiaceae, Asteraceae, Solanaceae, Graminneae, etc. En forma libre o como glicsidos. 148
La propiedad fsica mas importante de estos compuestos es la fluorescencia generada con la luz ultravioleta (365 nm), propiedad ampliamente usada para su deteccin. Estos compuestos presentan un amplio rango de actividad biolgica, podemos citar: la accin anticoagulante y antibacterial de dicumarol, la accin antibitica de la novobiocina, la hepatoxicidad y carcinogenicidad de ciertas aflatoxinas, la accin estrognica del cumestrol, la accin fotosensibilizadora de ciertas furanocumarinas, etc., se destacan adems, el uso de cumarinas como saborizantes y en perfumera. Las cumarinas se clasifican en: *cumarinas simples *cumarinas complejas Estas a su vez se clasifican en Furanocumarinas y Piranocumarinas las cuales dependiendo de la posicin del anillo furano o pirano, se subclasifican en lineales y angulares. *cumarinas diversas. Biosntesis de cumarinas La biognesis de las cumarinas simples presentes en Gramneas y algunas plantas superiores, se derivan biogenticamente del cido shikmico, va cido cinmico, la especificidad del proceso consiste en la hidroxilacin del carbono 2, produciendo un rompimiento (-oxidacin) de la cadena lateral, como ocurre en plantas del gnero Salix,o una isomerizacin de la cadena y posterior lactonizacin generando la umbeliferona, se explica segn el esquema siguiente.
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Las cumarinas simples pueden tener sustituciones oxigenadas en las posiciones 6, 7 y 8 del ncleo bencnico, como se muestra en la siguiente tabla.
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Cumarinas complejas Adems de las cumarinas simples citadas anteriormente, tambin se originan a partir del cido shikmico las llamadas cumarinas pirnicas y furnicas, estas a la vez se dividen en lineales y angulares dependiendo de la posicin donde se condensa el isopentenil pirofosfato para luego ciclarse y formar el heterociclo. Furanocumarinas. En 1934 se aisl el primero de estos compuestos, el bergapteno (psoroleno metoxilado en posicin 5) de Citrus bergamina y posteriormente la xantotoxina (8 metoxi psoroleno); en 1940 se identificaron estos compuestos como los responsables de producir fotodermatitis, estos compuestos son altamente fluorescentes bajo luz UV y aun en la regin visible.
Los Psoralenos o furanocumarinas lineales, son ampliamente distribuidas en plantas y son particularmente abundantes en Umbeliferae (Apiaceae) y Rutaceae, los ejemplos ms comunes son psoraleno, bergapteno (visnagia), xantotoxina (metoxaleno) e isopimpinelina (kelina). Las plantas que contienen sporalenos, son usadas interna o externamente en PUVAterapeutico (ttratamiento fotoquimioterapeutico donde se utiliza el Psoraleno con la luz ultravioleta Acercana al visible-) en el tratamiento de la de psoriasis, vitligo y otras afecciones de la piel o para producir bronceado.
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El metoxaleno o xantotoxina, un constituyente de los frutos de Ammi majus Umbeliferae (Apiaceae), (apio cimarrn) es usado para facilitar la repigmentacin de la piel, en casos de vitiligio y psoriasis, administrado via oral y luego exposicin a la luz UV, minimiza el riesgo de quemaduras extremas y cncer de piel, el metoxaleno reacciona con las bases pirimdicas del DNA inhibiendo la replicacin y reduciendo la rata de divisin celular.
La actividad fotosensibilizante de estos compuestos, se explica fundamentalmente por la reactividad en su estado excitado triplete (T1), que se genera por efecto de la luz UV, ocasionando posibles reacciones de tipo radicalario. Las piranocumarinas tienen el ncleo purano unido en posiciones 6-7; tipo xantiletina y 7-8 tipo sesilina
La biognesis se estas cumarinas relativamente complejas pueden proceser por una ciclizacin de una cumarina simple previamente prenilada, el esquema general para la biognesis de este tipo de cumarinas es el mostrado en la figura 14:
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Cumarinas diversas El dicumarol se forma por fermentacin bacteriana de trboles y pasto, se aisl de hojas descompuestas de Melilotus albus Leguminosae/Fabaceae. El dicumarol (bishidroxicumarina) antagoniza con la protombina y otras protenas necesarias para la coagulacin de la sangre, presentando un problema para el ganado al consumirlo, tambin es utilizado comercialmente en venenos para ratas.
Anlogos sintticos del dicumarol son utilizados va oral como anticoagulantes para el tratamiento de la trombosis, como es el caso de las sales de warfarina y acenocumarol (nicumalona).
Una aproximacin a la biognesis del dicumarol es hidroxilando la posicin 4 de la cumarina, luego capta una molcula de formaldehido y condensarse con otra 153
molcula de cumarina hidroxilada en 4 y por ltimo, enolizar el grupo ceto formando el dicumarol, figura 14.
Derivados de 3 fenil cumarinas del tipo cumestrol y el antibitico novobiosina, son ejemplos de cumarinas diversas.
Las aflatoxinas son un grupo de sustancias relacionadas estructuralmente con las cumarinas; son micotoxinas producidas po Aspergillus flavum y A. versicolor y que han sido causa de mortalidad animal por ingestin de alimentos enmohecidos, provocando lesiones hepticas.
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Tcnicas de extraccin de cumarinas La extraccin de las cumarinas pueden realizarse tanto sobre material seco como fresco, con solventes de polaridades diferentes, dependiendo de los tipos de estructura, algunas son ligeramente solubles en solventes apolares y a menudo pueden cristalizar directamente en ellos por enfriamiento o concentracin del solvente. Mtodos espectroscpicos para determinar cumarinas UV: hay que diferenciar las cumarinas de las cromonas simples, estas presentan fuertes absorciones entre 240-250nm, mientras que las cumarinas simples absorben a 274 y 311 nm debido a los anillos bencnico y pirona respectivamente y presentan variaciones segn sus sustituyentes, fig 15. La mayora de las cumarinas presentan sustituciones oxigenadas en C-7 (solo 35 de las 800 conocidas no la tienen), esta sustitucin causa un efecto batocrmico en la banda de la banda de la pirona, la posicin de nuevas bandas depende de la posibilidad de conjugacin del grupo hidroxilo con otros agentes cromforos. Para el caso de las Furanocumarinas; las lineales tipo Psoroleno presentan bandas de absorcin a 205-225, 240-255, 260-270 y 298-316nm.
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Principales plantas que contiene cumarina Haba tonca, Dipteryx odorata Willd., Fam. Leguminosae/Fabaceae rbol originario de Sur Amrica y cultivada actualmente en Venezuela, Guayana y Brasil, la droga esta constituida por las semillas desecadas que contienen entre 1 y 3% de cumarina, 25% de grasas y gran cantidad de almidn; utilizadas en perfumera y como aromatizante del tabaco y del whisky. Meliloto, Melilotus officianalis (L)Pallas, Fam., Fabaceae El melilotp constituye una especie forrajera de hojas trifoliales y flores amarillas, ampliamente distribuida, su nombre deriva del griego meli, miel, por ser una de las plantas silvestres mas visitada por colibres y abejas, tambin se le conoce como trbol oloroso, debido a que luego de ser recolectada, por su desecacin desarrolla un olor agradable. La droga contiene como principios mayoritarios flavonoides, saponinas triterpnicas pentacclicas y cidos fenlico, todas las especies en especial las de flores amarillas contienen el o.hidroxi cinmico (melitosido), el cual se hidroliza dando lugar a la lactinizacin y a la cumarina. Por una inadecuada conservacin de la planta, se origina a partir de eta, el dicumarol (figura 14), sustancia anticoagulante que han producido procesos hemorrgicos en el ganado. Frutos de apio, Apium graveolens Umbeliferae (Apiaceae) La droga esta constituida por frutos maduros y desecados los cuales contienen entre 2-3% de escencia constituida por terpenos con pequeas cantidades de anhdrido y lactonas del cido sedanlico y fenoles. Cumarinas, furanocumarinas, colina, tirosina, glutamina, aasparagina, apiona, oleonesina. Los frutos son utilizados como digestivos, carminativos, diurticos, tranquilizantes y anticonvulsivantes. Apio cimarrn, Ammi majus Umneliferae (Apiaceae) Planta distribuida en Mesoamrica y el norte de Suramrica los granos del apio cimarrn, contienen furanocumerinas principalmente bergapteno, isopimpinelina y xantotoxina.
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Manual de Apuntes de Qumica de Productos Naturales 4 Edicin, Enero 2014 Dra.

Sonia Yesenia Silva Belmares _____________________________________________________________________________________________________________________________________________________

Manual de teora de Qumica de Productos naturales

Unidad 1.- Diferenciacin entre metabolito primario y secundario

Figura 1.- Metabolismo primario en plantas

Figura 2.- Metabolismo secundario

Flavonoides Importancia de los productos farmacuticos derivados de plantas

Uso Antihipertensivo Antipaldico Enfermedad Intestinal Antitumoral

Productos Naturales aplicados a la cosmetologa

Analgsicos de aplicacin general y tpica Hidrocortisona y derivados

Anestsicos generales y locales en bajas dosis.

Muchos productos naturales estrechamente relacionados pertenecern a ms de una clase.

ESTRUCTURA ANATMICA DEL LIMBO DE UNA HOJA

PARTES DE UNA FLOR

CH3 N O CH3 CH3 CH3 H3C

N O O H3C O O CH3 H3C

Estructura del -caroteno

R1 -H -OH -OH -OCH3 -OH -H -OCH3 -OCH3 -OH -OCH3

R3 -H -H -OH -OH -H -H -OCH3 -H -OCH3 -H

R4 -OH -OH -OH -OH -H -OH -OH -OH -OH -OH

-Biosntesis Fenilalanina cido cinmico

Se han encontrado con frecuencia en hongos a Timoquinona

Amanita muscaria muscarufina

Pereza adnata perezona (cido pipitzaico) antiparasitario

Embelia ribes embelina antiparasitario

Cloroplastos plastoquinonas difieren en longitud de su cadena isoprenoide

Usos *Tintoreas *Purgantes

NUMERO DE ONDA (cm-1) 3100-3200 3600 1725-1700 1740-1720 1715-1660

GRUPO FUNCIONAL -C C-C N -N=C=O -N=C=S C=C=C

NUMERO DE ONDA (cm-1) 2300-2100 ~ 2250 ~ 2270 ~ 2150 ~ 1950

NH C=NNO2 S=O sulfonas Sulfonamidas sulfonatos C-F C-Cl C-Br C-I y

Fragmentacin II O OH -CO R O -CO

Extraccin con grasas (Enflorado) Disolventes orgnicos

UNIDAD 7. ESTEROIDES SAPONINAS Y SAPOGENINAS

Al someter a metilacin exhaustiva esta saponina se produce:

La acetilacin de esta mezcla produce:

Extraccin de los alcaloides del opio

DESCARBOXILACION (Usualmente catalizada por fosfato de piridoxal)

Cocana Erythroxylum coca

Morfina Papaver somniferum

Atropina Atropa belladona

4-hidroxi-N,N-dimetil-triptamina o 3-(2-(dimetilamino)etil)-1H-indol-4-ol. 125

UNIDAD 9. METABOLITOS DERIVADOS DEL CIDO SHIKIMICO

Neoliganos: son compuestos cuyas uniones son diferente a -

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Usos Tintoreas Purgantes