PRACTICA No.

1 BIOSEGURIDAD Y ESTERILIZACION EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA Johana Acosta; 4120011 Alexis Cruz; 1120242 Sandra Daz; 1120302 Jimena Ortega; 1120712
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Ingeniera Agroindustrial. 2Ingeniera Agronmica. Universidad Nacional de Colombia Sede Palmira RESUMEN

La bioseguridad y la esterilizacin son importantes para obtener buenos resultados en la prctica que se lleva a cabo en el laboratorio de microbiologa, con el fin de tomar medidas preventivas destinadas a proteger la salud del personal y eliminar de forma total los microorganismos presentes en los implementos a utilizar. El objetivo de esta prctica fue conocer las normas para la proteccin del personal que labora en las instalaciones reduciendo riesgos en las etapas del proceso y las metodologas de desinfeccin de la superficie de trabajo e implementos del laboratorio. La prctica consisti primero en la socializacin de las normas de seguridad del laboratorio, adems se desinfecto el lugar de trabajo y se esterilizaron los materiales; obteniendo como resultado implementos limpios y un sitio de trabajo seguro y ordenado. Con la esterilizacin se logr la destruccin completa de todos los microorganismos presentes en los materiales evitando que estos intervengan en estudios futuros. Palabras clave: Bioseguridad, esterilizacin, desinfeccin. INTRODUCCION La bioseguridad en el laboratorio es la contencin, conjunto de medidas preventivas destinadas a proteger la salud de las personas para disminuir los riesgos que se puedan presentar debido a agentes infecciosos; para ello se lleva a cabo primero la esterilizacin que es la eliminacin o muerte de todos los microorganismos que contiene un objeto o sustancia, por lo general se acondiciona de tal forma que no puedan contaminarse nuevamente. Existen varios mtodos de esterilizacin, que pueden ser fsicos: (calor seco, calor hmedo, radiaciones, filtracin) y agentes qumicos: (cloro y compuestos clorados, aldehdos, xido de etileno, compuestos fenlicos, cidos y lcalis); y en segundo lugar la desinfeccin que es la destruccin de microorganismos presentes en la superficie de implementos, equipos y manipuladores utilizando sustancias qumicas denominadas desinfectantes (o antispticos de acuerdo al uso) aplicadas sobre objetos y superficies. (Rojas, 2011). MATERIALES Y METODO El objetivo principal es la proteccin del personal que labora en el laboratorio reduciendo riesgos y evitando contaminacin durante la prctica. Para la prctica de bioseguridad y esterilizacin se utilizaron los siguientes materiales: 3 cajas Petri, 1 beaker, 4 pipetas de 1ml, hisopos, 1 tijera, 1 Erlenmeyer, papel kraft, algodn, papel aluminio, 1 autoclave, 1 mechero de alcohol, 2 asas bacteriolgicas y 2 micolgicas, alcohol etlico, toallas de papel absorbente. Dadas las indicaciones del tutor, se conocieron las normas de bioseguridad del laboratorio de microbiologa adems de los elementos que se deben utilizar para prevenir los riesgos en la salud de las personas. Entonces en primer lugar realizamos la desinfeccin de la superficie de trabajo con alcohol para destruir los microorganismos presentes en la superficie de los implementos. En segundo lugar, se identific el mtodo de esterilizacin adecuado para los siguientes materiales: cajas de Petri, pipetas, asas, beaker. Donde se envolvieron con papel kraft las cajas de Petri, a las pipetas se les coloco algodn en la parte superior, luego se envolvieron con papel kraft y al beaker se le coloca un hisopo en la parte superior que fue tapado con papel aluminio; para despus llevar los instrumentos al autoclave o al horno donde se realiza el proceso de esterilizacin. Para la esterilizacin de las asas se hizo por calor utilizando el mechero. Por ltimo se vuelve a desinfectar la superficie. Estos procedimientos son sencillos de hacer, y representan un paso importante antes de llevarlos a esterilizacin RESULTADOS Y DISCUSION

Los instrumentos de laboratorio quedan correctamente preparados para su esterilizacin y el lugar de trabajo queda limpio y ordenado para las prximas prcticas. Llevando a cabo correctamente las normas bsicas de contencin se disminuye los riesgos durante la prctica, sin embargo tambin es necesario utilizar un mtodo de esterilizacin adecuado para ciertos implementos del laboratorio de microbiologa, en este caso la preparacin de algunos materiales, por ejemplo las pipetas y las cajas de Petri, se envolvieron con papel kraft, motivo por el cual no se llevan al horno de aire caliente, debido a la alta temperatura y a la posible incineracin de dicho material, lo que puede ocasionar un incendio. Por otro lado, por cuestiones de eficiencia y efectividad, es mucho ms conveniente la utilizacin de la autoclave, si lo comparamos con el horno de aire caliente.

<http://www.izt.uam.mx/ceu/publicaciones/MMBG/files/ manual_microbiologia_general.pdf> CONSULTA. 1. Liste al menos 3 microorganismos representativos para cada uno de los cuatro niveles de contingencia en los laboratorios de microbiologa, mencionando la importancia que representa para su rea de formacin. Nivel de Contencin 1: *(Saccharomyces cerevisiae): Es un hongo ascomiceto de gran importancia en la industria panadera y vitivincola. Sintetizan sustancias antimicrobiales y tiles para el crecimiento de las plantas a partir de aminocidos y azcares secretados por bacterias Fototrpicas, materia orgnica y races de las plantas. (Lactobacillus) bacterias Gram positivas de forma bacilar que suelen forman largas cadenas. Son capaces de fermentar la lactosa de la leche mediante una fermentacin cida, ayudan a descomponer la materia orgnica en el suelo. Esto les permite a las plantas absorber los nutrimentos, como (Ca, P, K). *(Penicillium) mohos, hongos filamentosos comunes que desarrollan sobre los ms diversos substratos: granos, paja, cueros, frutas, etc. producen una depreciacin del producto, que en muchos casos se ha de desechar y no se puede comercializar como lo es en ctricos atacados desde el momento de su recoleccin hasta su consumo. Nivel de Contencin 2: *(Staphylococcus spp) un tipo de bacteria con amplia distribucin y facilidad para llegar a los alimentos, extiende una eventual contaminacin. *(Salmonella) Bacteria patgena que produce en humanos y animales brotes al ser transportadas e ingeridas en alimentos. *(Toxoplasma gondii) Es una especie de protozoo parasito, la va de infeccin ms frecuente es el consumo de carne cruda y el manejo o consumo de vegetales crudos contaminados por las heces de gatos o el consumo de leche cruda contaminada. Nivel de contencin 3: *(Mycobacterium tuberculosis) Es el agente causal de la tuberculosis, una de las enfermedades infectocontagiosas ms letales y antiguas que afecta al ser humano. Se encuentra en alimentos como la carne mal cosida y leche sin pasteurizar de animales enfermos.

Fig.1. Implementos de laboratorio (A) Pipetas (B) Cajas Petri (C) Erlenmeyer. Para concluir la bioseguridad del personal, tanto como la esterilizacin de los implementos son dos factores clave para obtener los resultados esperados durante el transcurso y finalizacin de las prcticas del laboratorio de microbiologa. BIBLIOGRAFIA Rojas, A. 2011, Conceptos y Prcticas Microbiologa General, Universidad Nacional Colombia - Sede Palmira, pgs. 13-22. de de

Atlas, R. 1990, Microbiologa Fundamentos y Aplicaciones, COMPAA EDITORIAL CONTINENTAL, S.A, de C.V. calzada de tlalpan5022, col. la joya, delegacin tlalpan cdigo postal 14090, Mxico, D.F. pg.75-81. Ramos. A, Volque .S. T, Barragn. P. L, Matsumoto, K.S, Vives. F.R. Gonzales. M.S. Manual de prcticas de laboratorio Microbiologa general (2012) [en lnea]. Mxico: Universidad Autnoma Metropolitana. Divisin de ciencias Biolgicas y de Salud. [Consultado Agosto 24 de 2013]. Disponible en internet:

*(Vibrio vulnificus) Su infeccin produce gastritis. Propagado por algunos alimentos de mar. *(Bacillus anthracis) es una bacteria que forma esporas aerbicas que producen enfermedad en humanos y animales. Las bacterias se encuentran en dos formas: ntrax cutneo y ntrax por inhalacin. Nivel de contingencia 4: *(Citomegalovirus) Se relaciona con los virus que causan la varicela y la mononucleosis infecciosa en humanos. *(Epstein-barr) Es parte de la familia del virus que produce el herpes y es uno de los virus humanos ms comunes causa la enfermedad conocida como mononucleosis infecciosa. *(H1N1) Denominada comnmente gripa de cerdo, de alto contagio y de no ser tratada produce mortalidad. 2. Qu medida podra tomar usted para verificar la efectividad de la esterilizacin por autoclave? Aplicar este mtodo a todos aquellos artculos que pueden soportar el calor y humedad, conseguir una perfecta relacin entre la temperatura de esterilizacin y la presin de vapor saturado, eliminar eficazmente el aire del interior del autoclave, controlar la temperatura y el tiempo de esterilizacin, descargar la presin en caso de que esta pase el limite mximo. Tambin existen unos sensores de temperatura, con el propsito de arrojar datos de efectividad de las autoclaves segn las temperaturas utilizadas. 3. Defina liofilizacion? Proceso que se basa en la congelacin de un producto con fines de conserva. El producto congelado se pasa a una cmara de vaci donde se produce una separacin del agua, esto para eliminar los agentes que descomponen el producto (sublimacin). El agua se elimina tanto en su estado slido como gaseoso, esto sin pasar por un estado lquido. Se logra eliminar el agua contenida en el producto original pero con el beneficio de que esta no pierda su estructura molecular.

sistema mecnico que la convertir en vibraciones de alta intensidad generndose ondas de ultrasonido que generan millones de burbujas microscpicas, las cuales se expanden y colapsan contra las clulas causando la ruptura de su membrana.

5. .que metodologia de esterilizacion es la

adecuada para cada una de las siguientes muestras ambientales? (i)medios de cultivo solidos contaminados con salmonella sp. (ii) muestras de agua residual domestica, (iii) hisopos utilizados en muestreo de manipuladores de alimentos, (iv) tejidos de procedencia animal y origen desconocido, (v) suelo, (vi) suelo inoculado con patogenos de plantas y, (vii) antibioticos. i. Calor seco. ii. Radiacin, filtracin. iii. Calor hmedo. iv. Radiacin. v. Calor seco. vi. Calor seco. vii. Radiacin, filtracin. BIBLIOGRAFIA JFolch-Mallol, J. L. A, Garay .A. A. Lledias, F. Robles, C. A. La respuesta a estrs en la levadura Saccharomyces cerevisiae (2004) [en lnea].Mexico: Universidad autnoma de Mexico. Departamento de biologa molecular de plantas. [Consultado 25 de agosto de 2013. Disponible en internet: <http://www.ecologia.unam.mx/adriana/GalerasRevRL M04.pdf> Patarroyo, M.E. La ciencia y sus demonios Lactobacillus bulgaricus (2011) [en lnea].Colombia [consultado 24 agosto 2013] Disponible en internet: <http://lacienciaysusdemonios.com/2011/05/06/viernes -procariota-lactobacillus-bulgaricus/> Rojas-Trivio, A. (2011). Conceptos y Prcticas de Microbiologa General. Ed. UNAL S.P. 13-22p. Bioseguridad en el laboratorio, [consultado 24 Agosto, 2013], disponible en Internet:< http://depa.fquim.unam.mx/bacteriologia/20082/bioseg uridad.pdf> Autoclaves de esterilizacin, [en lnea]. [Consultado 24 Agosto 2013] disponible en internet: <http://www.twistermedical.com/docs/autoclaves.pdf>

4. Defina sonicacion?
Consiste en la aplicacin de ultrasonidos a una suspensin celular. La intensa agitacin producida destruye las membranas celulares. Dependiendo de la frecuencia, intensidad y energa aplicada se pueden destruir asimismo las estructuras subcelulares e incluso solubilizar complejos proteicos. Se suele aplicar en frio para evitar el sobrecalentamiento de las muestras que podra provocar la desnaturalizacin de las protenas. Se transmite una corriente elctrica a un