C CLAMP Experimento N 1 Propiedades activas de la membrana Con la aplicacin de un pulso de corriente Ud.

Deber pasar el umbral para generar los potenciales de accin. Para ello cargue el archivo PASSIVE.CCS y cambie la corriente de inyeccin de 1.5 nA a 2nA luego presione la tecla B. Anote lo observado.

La energa se propaga, por ello se pierde de acuerdo a su nivel de propagacin.

Experimento N2 efecto de los iones sobre la generacin del impulso Cargue el archivo ACTIVE.CCS y cambie las concentraciones de los iones en el exterior a 0.1 mM y cada vez que lo haga presione la tecla B, recuerde restaurar los valores originales caragndo el archivo ACTIVE.CSS con la tecla O despus de haber cambiado la concentracin de un ion en particular Qu iones son particularmente significativos en el potencial de membrana? Cargue ACTIVE.CSS y presione la tecla B. Ahora reduzca la concentracin del [K+]o a 0.1mM y luego presione la tecla Y. Ud notar que los resultados de esta manipulacin en el potencial de membrana de reposo se hiperpolariza. Para compensar este cambio en el potencial de membrana cambie la corriente base a 0.8 nA y luego presione la tecla B. la disminucin de la concentracin del potasio [K+]o elimina la generacin del potencial de accin? Por qu?

Baja la corriente disminuye el potencial.

V-CLAMP Experimento N 3: anlisis del voltaje CLAMP de las corrientes de sodio y potasio Entre al programa V-Clamp, presione O y cargue NA_K.VCS presione B en este experimento Ud. Tiene que llevar el potencial de membrana de -100mV a 0mV y medir la corriente que Ud tuvo que aplicar para mantener este potencial de membrana constante el cual, en un sistema cerrado es igual a la corriente que fluye por los canales ionicos. Experimento N 4: Efecto de la concentracin de iones sobre las corrientes ionicas Cargue Na_K.VCS y luego cambie las concentraciones de [Na+], [K+] en el interior y el exterior (no olvide restaurar los valores originales despus de casa cambio). Por ejemplo cambie [Na+]o a 30 mM y luego anote las observaciones respecto a las corrientes del Na+ y K+. Ahora restaure su valor original de [Na+]o = 145 y cambie la concentracin del potasio [K+]i a 3.1 mM de tal modo que la corriente del potasio quede eliminado, presione B. Notar que la corriente del Na+ y la corriente K+ difieren en varios aspectos. Cules son esas diferencias? Cuando se elmininan el K las concentraciones son iguales , El Na es igual a la concentracin de Na.

Experimento N5 Voltaje dependiente de las corrientes del Na+ y K+ Presione O y cargue Na_K_IV.VCS. ahora presione I despus de cada simulacin. Cada vez presione la tecla I, el potencial de membrana es incrementado por 10mV. Ahora bloqueemos la corriente de Na y K selectivamente con bloqueadores farmacolgicos como el Tetrodotoxine (TTX) que bloquee los canales de sodio que generan el potencial de accin Ud. Puede simular el bloqueo de estos canales reduciendo al mximo la conductancia del sodio [gNa] = 0S. Despues de bloquear la corriente del Na presione repetidamente la tecla I y anote lo observado. gNa es igual a0 conductancia 0 por lo tanto la corriente sube. gk es igual a la conductancia 0 por lo que la corriente disminuye. Restaure el valor de [gNa] = 10 S y probemos otro bloqueador farmacolgico como el Tetraethylammonium (TEA) que permite bloquear el potasio pero no los canales del Na. Podemos ahora simular el experimento haciendo [gk] = 0S. Repetidamente presione la tecla I y anote sus observacones.