Descubriendo el asma de origen alrgico a travs del ratn.

Un repaso a la patogenia de los modelos de asma alrgica en el ratn y su similitud con el asma alrgica humana. R Torres, C Picado, F de Mora http://www.archbronconeumol.org/es/descubriendo-el-asma-origenalergico/articulo/13071585/

Modelos de asma alrgica en el ratn

Se han propuesto muchos modelos experimentales de asma inducida en el ratn. En general, todos los protocolos de induccin se basan en una sensibilizacin sistmica mediante la inyeccin de un alrgeno con el fin de generar una respuesta inmunitaria de memoria, seguida de la reexposicin local del sistema respiratorio al mismo alrgeno. En ocasiones, en la sensibilizacin se administra el alrgeno junto con un coadyuvante o compuesto inmunopotenciador inespecfico como el sulfato de aluminio o alum para garantizar una respuesta inmunitaria suficientemente intensa. A continuacin se describen de forma breve algunos de los factores a tener en cuenta a la hora de disear un protocolo de induccin de asma alrgica en el ratn. Cepa de ratn. Estudios comparativos han demostrado que no todas las cepas de ratn responden de igual manera al contacto con un alrgeno. Se han observado diferencias entre unas y otras, probablemente sustentadas en diferencias genticas, en el grado de hiperreactividad bronquial, en la produccin de IgE e incluso en el tipo de respuesta inmunitaria celular. En lo que concierne a las cepas ms comnmente utilizadas, se ha visto, por ejemplo, que los ratones BALBc sensibilizados desarrollan una mayor hiperreactividad bronquial33,34, generan 4 veces ms IgE total e IgE especfica34 y contienen ms clulas y una mayor concentracin de citocinas en el BAL 33,34 que los ratones C57BL/6 sensibilizados. Los investigadores se decantan, por lo general, por las cepas ms propensas a expresar un fenotipo atpico y por eso la BALBc se cuenta entre las ms utilizadas. Estudios recientes, sin embargo, proponen que para la evaluacin de las modificaciones estructurales en los bronquios se utilice un modelo crnico en la cepa A/J por la mayor semejanza con los cambios observados en pacientes35. Alrgeno. De entre los numerosos antgenos utilizados en la induccin de asma en ratones, el ms comn ha sido la OVA, si bien actualmente se tiende a emplear aeroalrgenos causantes del asma espontnea en personas, como caros del polvo (Dermatophagoides pteronyssimus y D. farinae)13 y plenes, sobre todo el de la ambrosa (ragweed)36, una planta comn en el norte de Europa y en Norteamrica (en Espaa predominan el polen de las gramneas, de la parietaria y el olivo como causa de alergia, pero en nuestro conocimiento no se han establecido modelos con stos). Los aeroalrgenos naturales ofrecen la ventaja de que son compuestos suspendidos en el aire que de forma natural alcanzan el organismo a travs de las vas respiratorias, al contrario que la OVA, que en todo caso accedera espontneamente al organismo sobre todo por va digestiva para desencadenar alergias de origen alimentario. La identificacin y produccin mediante tcnicas biotecnolgicas de los alrgenos permiten, en vez de administrar extractos de stos, exponer a los ratones a molculas muy puras. ste es el caso del caro del polvo, del cual se sabe que al menos 2 componentes (Der p 1 y Der p 5) son en parte responsables de la activacin de la respuesta inmunitaria y de la subsiguiente induccin de asma 37. Recientemente se ha estudiado un nuevo enfoque de induccin, que es el de sensibilizar a los ratones con 2 antgenos recombinantes, uno de caros del polvo ( Der f 1) y otro de cucarachas (Bla g 2), y se ha visto que esta combinacin produce ms inflamacin pulmonar y dao epitelial que cada uno de ellos por separado38. Con respecto a la dosis de alrgeno que debe utilizarse, el rango de concentraciones administradas es muy amplio y vara segn la fase del protocolo de induccin y el alrgeno. Para la sensibilizacin sistmica se han utilizado desde 1 hasta 800 g de antgeno, aunque en un estudio en el que se comparan diferentes dosis de OVA se vio que 10 g eran suficientes para inducir asma en el ratn39. En la fase de challenge o activacin, como normalmente se utilizan aerosoles, las soluciones de OVA suelen ser de entre el 1 y el 5%. En cambio, utilizando directamente uno de los principales alrgenos de los caros del polvo (Der p 1) es suficiente 1 g para sensibilizar a los ratones 40. En cualquier caso, las

concentraciones de alrge no a las que se someten los animales son por lo general elevadas, aspecto que se corrige paulatinamente con la introduccin de los modelos crnicos. Va de administracin o de exposicin al alrgeno . En la mayora de los modelos descritos la sensibilizacin del animal se realiza por va intraperitoneal, mientras que en la reexposicin al antgeno (activacin o challenge) suele utilizarse la va intranasal por inyeccin directa en las fosas nasales o bien por nebulizacin41,42. Los protocolos ms recientes y ms depurados proponen que ambas fases se realicen por va aergena con el fin de imitar el proceso natural de exposicin en los pacientes asmticos13,36. Duracin de la induccin de asma en ratones. La induccin de asma alrgica en los ratones requiere entre das y meses dependiendo del protocolo. Se ha trabajado principalmente con los modelos de corta duracin (o exposicin corta al alrgeno), en los que en un perodo relativamente breve (entre das y pocas semanas) se expone a los animales a elevadas concentraciones de alrgeno, lo que da lugar al llamado "modelo de asma aguda". Los modelos de exposicin corta o agudos no reproducen algunos de los signos del asma alrgica observados en los asmticos crnicos. Esta carencia impuls el desarrollo de los modelos de exposicin larga o crnicos. En el intento de inducir modelos de asma crnica mediante OVA, se observ que la nebulizacin del alrgeno durante largos perodos, sin sensibilizacin sistmica previa, conduca a tolerancia inmunolgica; es decir, el sistema inmunitario dejaba de responder al contacto con la OVA tras sucesivas exposiciones 43,44. Este fenmeno de tolerancia en modelos murinos de asma sugerira que la respuesta inmunitaria de la mucosa respiratoria es autolimitante, y ste podra ser uno de los mecanismos utilizados por el sistema inmunitario para prevenir el avance de la inflamacin alrgica en el pulmn; por lo tanto, en los pacientes con asma crnica habra habido previamente un defecto en la regulacin de este proceso45. En otros experimentos se observ que la administracin prolongada de OVA a animales sensibilizados no consegua mantener las "caractersticas asmticas" y acababa con un descenso bien de la inflamacin pulmonar 46, bien de la hiperreactividad bronquial42,47. Adems, se han empezado a desarrollar modelos de exposicin continua a dosis bajas de aeroalrgenos, es decir, modelos en los que no se distingue una fase de sensibilizacin de una fase de activacin o challenge. Se destaca el modelo crnico de asma alrgica a extractos de caros del polvo, recientemente descrito por Johnson et al13, cuyos resultados son muy esperanzadores porque se han logrado mimetizar caractersticas del asma crnica que no se observan en los modelos agudos, como la reestructuracin sostenida de los tejidos (o remodeling) subsiguiente a la inflamacin. Esta semejanza pudiera deberse a que, adems, el protocolo de induccin recoge muchas similitudes con la exposicin natural a los alrgenos. En funcin de lo que se quiera estudiar convendr ms el uso de un modelo de asma alrgica de exposicin corta o larga al alrgeno. As, los modelos de asma aguda ofrecen ventajas prcticas para el estudio de mecanismos del proceso inflamatorio y el broncospasmo, mientras que lo s modelos crnicos permiten estudiar cambios estructurales a largo plazo y su influencia en la obstruccin bronquial.

La exposicin continua a caros del polvo domstico provoca la inflamacin de las vas respiratorias crnicas y la remodelacin estructural.
Johnson JR
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/14597485