12.

CALCIO
12.1. Principio. Se entiende por contenido en calcio de la leche la cantidad total de calcio expresada en porcenta- je en peso, determinada por el procedimiento expuesto a continuacin, que corresponde a la norma FIL-3 ! 1" de la Federacin Internacio- nal de Lecher#a. $ste m%todo se aplica a todas las leches l#qui- das normales, as# como a las leches reconstitui- das por dilucin o disolucin de leches concen- tradas o de leches desecadas. $l calcio total se lle&a a disolucin por precipi- tacin de las materias proteicas con 'cido triclo- roac%tico. $l calcio contenido en el (iltrado es precipitado )ajo (orma de calcio oxalato, que se separa por centri(u*acin + se &alora con potasio perman*anato. 12.2. Material y aparatos. 12.2.1. ,alan-a anal#tica. 12.2.2. .atra- a(orado de /0 ml. 12.2.3. Pipeta para leche de 20 ml. 12.2.1. Papel (iltro sin ceni-as para (iltracin lenta. 12.2./. 2entr#(u*a que pueda desarrollar una aceleracin centr#(u*a de 1,100 * 3* 4 aceleracin de la *ra&edad5. 12.2. . 6u)os de centr#(u*a cil#ndricos con (ondo redondo de 30 ml, aproximadamente, mar- cados a 20 ml. 12.2.7. Pipetas de 2 + / ml. 12.2.8. 9ispositi&o de si(n por succin, pro- &isto de un tu)o capilar. 12.2.". ,a:o de a*ua, a temperatura de e)ulli- cin. 12.2.10. ,ureta *raduada. 12.3. Reactivos. 131008 ;cido ;c%tico *lacial P;-;2S 2/2373 ;cido 6ricloroac%tico solucin 20< p=& 92 131071 ;*ua P;-;2S 1310/8 ;cido Sul(>rico " < P;-IS? 13112" ;mon#aco 2/< 3en @A35 P; 13113 ;monio ?xalato 1-hidrato P; 13108/ $tanol " < &=& P; 182111 Potasio Perman*anato 0,01 mol=l 30,0/@5 SB 171 17 Cojo de .etilo C$-;2S 12.3.1. ;cido 6ricloroac%tico solucin 20< p=& 92. 12.3.2. ;cido 6ricloroac%tico solucin acuosa al 12< p=&. Dsese ;cido 6ricloroac%tico solucin 20< p=& 92 + diluir con&enientemente. 12.3.3. ;monio ?xalato 1-hidrato P;! Solucin acuosa saturada en (r#o. 12.3.1. Cojo de .etilo 32.I. 130205 C$-;2S! solucin al 0,0/< p=& en $tanol " < &=& P;. 12.3./. ;cido ;c%tico! solucin acuosa al 20< &=&. Dsese ;cido ;c%tico *lacial P;-;2S + diluir con&enientemente.

12.3. . ;monio Aidrxido! solucin acuosa o)tenida me-clando &ol>menes i*uales de ;mon#aco 2/< 3en @A35 P; + de ;*ua P;-;2S. 12.3.8. ;cido Sul(>rico! solucin acuosa o)tenida a:adiendo 20 ml de ;cido Sul(>rico " < P;- IS? a 80 ml de ;*ua P;-;2S. 12.3.". Potasio Perman*anato 0,02@! @?6;! $n un matra- a(orado de 2/0 ml. introducir 100 ml. de Potasio Perman*anato 0,01 mol=l 30,0/@5 SB, diluir + enrasar con ;*ua P;-;2S. 9eterminar el (actor de la solucin 0,02@ resultante. 6odos los reacti&os de)en ser puros para an'lisis. 12.4. Procedimiento. 12.1.1. Preparacin de la muestra.- ;ntes del an'lisis, poner la muestra a 20E F 2E2 + me-clar con cuidado. Si no se o)tiene una dispersin homo*%nea de la materia *rasa, calentar lenta- mente la muestra a 10E2, me-clar sua&emente + en(riar a 20E F 2E2. 12.1.2. 9e(ecacin de la muestra.- $n un matra- a(orado de /0 ml pesar exactamente alrededor de 20 * de leche, con una aproximacin de 10 m*. ;:adir poco a poco mientras se a*ita una solucin acuosa de ;cido 6ricloroac%tico 20< p=& 92 + completar hasta /0 ml con este reacti&o. ;*itar (uertemente durante al*unos se*undos. 9ejar reposar 30 minutos. Filtrar so)re papel (iltro sin ceni-as. $l (iltrado o)tenido de)e ser l#mpido. 12.1.3. Precipitacin del calcio en (orma de oxalato + separacin del oxalato. $n un tu)o de centr#(u*a cil#ndrica de (ondo redondo, introducir / ml del (iltrado l#mpidoG despu%s / ml de ;cido 6ricloroac%tico al 12<, 2 ml de una solucin acuosa saturada de ;monio ?xalato 1 hidrato P;, dos *otas de solucin alcohlica de Cojo de .etilo C$-;2S + 2 ml de ;cido ;c%tico al 20<. .e-clar mediante a*itacin circular + a:adir poco a poco solucin de ;mon#aco 312.3. .5 hasta coloracin amarillo p'lidoG despu%s, al*unas *otas de ;cido ;c%tico al 20< hasta coloracin rosa. 9ejar reposar 1 horas a la temperatura am)iente. 9iluir hasta 20 ml con ;*ua P;-;2S + centri(u*ar 10 minutos a 1.100 * 3* 4 aceleracin de la *ra&edad5. .ediante un dispositi&o de succin, decantar el l#quido l#mpido que so)renada. La&ar las paredes del tu)o de centri(u*acin 3sin remo- &er el depsito de calcio oxalato5 con / ml de solucin de ;mon#aco diluido 312.3.7.5. 2entri(u*ar / minutos a 1.100 *. 9ecantar el l#quido que so)renada con el dispositi&o de succin. Proceder a tres la&ados sucesi&os. 12.1.1. Baloracin del oxalato.- 9espu%s de ha)er extra#do con si(n el a*ua del >ltimo la&ado, a:adir 2 ml de solucin acuosa de ;cido Sul(>rico + / ml de ;*ua so)re el precipitado de calcio oxalato. Poner el tu)o en )a:o de a*ua hir&iendo, + cuando el oxalato est% completamente disuelto, &alorar con solucin de Potasio Perman*anato 0,02@, hasta coloracin rosa persistente. La temperatura de)e permanecer superior a los 0E2 durante la &aloracin. 12.1./. $nsa+o en )lanco.- $(ectuar un ensa+o en )lanco con todos los reacti&os, utili-ando 20 ml de ;*ua P;-;2S en &e- de leche.

12.5. Clc lo. 2ontenido 1.000 en calcio< 4 0,0001 x 3B-&5 x HHHHHHH x I 4 P I 4 0,1 x 3B-&5 x HHHHHHHH P B 4 &olumen en ml de .n?1I 30,02@5 *astados en la &aloracin de la muestra. & 4 &olumen en ml de .n?1I 30,02@5 *astados en el ensa+o )lanco. P 4 peso en *ramos de la muestra inicial 3alrededor de 20 *5. I 4 coe(iciente de correccin del &olumen del precipitado resultante de la precipitacin tricloroac%tica.

Para leche entera 33,/ a 1,/ por 100 de materia *rasa5! I 4 0,"72 Para leche con 3 por 100 de materia *rasa! I 4 0,"7 . Para leche con 2 por 100 de materia *rasa! I 4 0,"80. Para leche con 1 por 100 de materia *rasa! I 4 0,"8/. Para leche desnatada! I 4 0,"8". La di(erencia entre los resultados de dos determinaciones e(ectuadas simult'neamente o una inmediatamente despu%s de otra por el mismo analista, no de)e ser ma+or de 0,002 * calcio por 100 * de leche. 12. . Ce(erencia. 12.!.1. "orma Internacional #IL$I%# 3!& 1'!!.