MICRORGANISMOS

COMO ANALISAR UMA COLUNA DE WINOGRADSKY

Numa coluna clssica, como a que figura no Guia 27 (Como montar uma coluna de Winogradsky), observa-se a liberao de gs (SH2, CO2). No fundo da coluna podem aparecer algumas manchas pretas, devidas reao qumica do SH 2 liberado pela ao bacteriana com o ferro do solo, representada na equao: H2S + Fe2+ FeS + H2 Dependendo da quantidade de ferro, as manchas podem se estender por toda a coluna. Um pouco mais acima, manchas de cor prpura e verde indicam o crescimento das bactrias do enxofre. Sendo menos exigentes em relao ao SH 2, as bactrias prpuras crescem antes que as verdes e acima delas. Havendo pouco oxignio, as bactrias prpuras podem florescer (blooming) chegando a ser visualizadas no lquido da parte superior da coluna. A apario de manchas de cor vermelha ou ferrugem por cima das bactrias prpuras do enxofre pode se dever ao crescimento das denominadas bactrias no dependentes do enxofre (Rhodospirillum), que s suportam baixas concentraes de SH 2. Dependendo da origem das amostras do solo e do enriquecimento se observaro na superfcie organismos pertencentes a diferentes grupos: Cianobactrias, Algas, Protistas e Invertebrados. De particular interesse Beggiatoa, uma bactria filamentosa que cresce en solos anxicos e pode ser considerada um indicador de poluio.

INTERPRETAO No fundo da coluna, a celulose e o enxofre estimulam o crescimento de bactrias especficas. Algumas (Clostridium) degradam a celulose liberando glicose, que tanto fonte de carbono como fonte de energia, via fermentao. Cria-se um ambiente anxico e, ao longo da coluna, se estabelece um gradiente de oxignio onde o fundo anaerbio e a superfcie aerbia. No ambiente anxico do fundo da coluna proliferam outras bactrias (Desulfovibrio). Sua fonte de carbono so os subprodutos das fermentaes anteriores. A energia obtida mediante respirao anaerbica, reduzindo o enxofre S0 e o sulfato SO42- disponvel a SH2. Este ltimo se difunde formando na coluna um gradiente de SH2 inverso ao do oxignio. Parte do SH2 que chega at a parte superior da coluna oxidado a sulfato por bactrias incolores aerbias (Beggiatoa, Thiobacillus, Thiotrix) que turvam a superfcie do lquido. O sulfato se difunde at embaixo, instaurando na coluna um conjunto de reaes de oxidao e reduo caracterstico do ciclo do enxofre. Ao longo da coluna e em funo das condies ambientais (presena de oxignio e de SH 2) possvel reconhecer outras comunidades bacterianas relacionadas com o ciclo do enxofre. Na parte inferior, onde as condies so anaerbias, crescem bactrias dependentes do enxofre, visualizadas como manchas verdes (Chlorobium) e/ou prpuras (Chromatium). Trata-se de um grupo de bactrias que realiza uma fotosntese anoxignica, onde o SH2 substitui a gua e se produz S elemental.

Guia 28

Maria Antonia Malajovich / Guias de atividades Biotecnologia: ensino e divulgao http://www.bteduc.bio.br

Organismos autofototrficos e quimio-heterotrficos (Invertebrados, Protistas, Algas, Diatomeas, Cianobacterias)

Colunas de Winogradsky construdas com areia e gua das praias de Urca e Angra dos Reis (RJ)

Bactrias quimioautotrficas (Beggiatoa, Thiobacillus, Thiotrix) Bactrias no dependentes do enxofre foto-heterotrficas (Rhodospirillum, Rhodopseudomonas)

Bactrias do enxofre fotoautotrficas (Chromatium, Chlorobium)

Bactrias quimio-heterotrficas (Desulfovibrio, Clostridia)

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BIBLIOGRAFIA
MADIGAN, M.T. et al. Microbiologia de Brock. So Paulo, Pearson Education do Brasil, 2004. Existem inmeros e bons protocolos na Internet, sendo os meus preferidos: Building a Winogradsky Column. An Educator Guide with Activities in Astrobiology. http://quest.nasa.gov/projects/astrobiology/fieldwork/lessons/Winogradsky_5_8.pdf Deacon, J. The Microbial World: Winogradsky column: perpetual life in a tube. http://www.biology.ed.ac.uk/research/groups/jdeacon/microbes/winograd.htm La colonne de Winogradsky. Illustration de la photosynthse microbienne et du cycle du soufre. http://www2.ac-lyon.fr/enseigne/biotech/Winogradsky.html

COMPLEMENTOS

Tabela 1: Diferentes modalidades nutritivas dos seres vivos.

Modalidade nutritiva

Fonte de carbono

Fonte de energia

Grupos que apresentam essa modalidade Plantas, Protistas, Eubactrias Eubactrias

Fotoautotrfica Autotrfica Quimioautotrfica ou litoautotrfica

Inorgnica (CO2) Inorgnica (CO2)

Luz (fotossntese oxignica o anoxignica) Oxidao de compostos inorgnicos: H2, NH3, Fe2+, H2S (metabolismo litotrfico) Luz Oxidao de compostos orgnicos (respirao aerbia, respirao anaerbia, fermentao)

Foto-heterototrfica Heterotrfica Quimioheterototrfica

Orgnica Orgnica

Eubactrias, Arqueas Animais, Fungos, Protistas, Eubactrias, Arqueas

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Tabela 2: A estratificao microbiana em uma coluna de Winogradsky. O2 SH2 SO4 ZONA DA COLUNA AERBIA gua MICRORGANISMOS Protozorios, Algas, Cianobactrias CARACTERSTICAS METABLICAS Microrganismos quimio-hetrotrficos Microrganismos foto-autotrficos (fotossntese oxignica) Microrganismos quimio-autotrficos Obtm energia por oxidao do SH 2 proveniente das camadas inferiores a sulfato ou enxofre; sintetizam sua prpria matria orgnica a partir de CO2. Estes microrganismos turvam a gua; Beggiatoa forma filamentos; os Thiobacilli podem oxidar S, SH2, tiossulfato e Fe. Bactrias vermelhas e verdes no dependentes do enxofre (Rhodospirillum, Rhodopseudomonas, Rhodobacter, Chloroflexus) Microrganismos foto-heterotrficos Trata-se de um grupo de bactrias muito versteis que obtm energia por fotossntese anoxignica, utilizando como fonte de carbono os cidos orgnicos do meio, acares ou lcool. Na escurido, so capazes de respirar ou fermentar. Fixam N2. Estas bactrias so inibidas por altas concentraes de SH2. Geralmente, formam manchas de cor vermelho ferrugem. ANAERBIA MDIA Lodo rico em H2S Bactrias vermelhas (prpura) dependentes do enxofre (Chromatium) Bactrias verdes dependentes do enxofre (Chlorobium) Bactrias redutoras de sulfato (Desulfovibrio) Microrganismos foto-autotrficos. Estas bactrias absorvem a energia luminosa e fotossintetizam utilizando, em vez de H2O, o SH2 como fonte de H2. No produzem oxignio. Acumulam ou excretam S. Sua fonte de carbono o CO 2. Microrganismos quimio-heterotrficos. Obtm energia por respirao anaerbia utilizando sulfato (ou enxofre) como aceptor alternativo de eltrons e produzindo SH 2 que se difunde em direo s camadas superiores. Sua fonte de carbono so os produtos de fermentao da camada bacteriana inferior. Microrganismos quimio-heterotrficos. Obtm energia por fermentao da glicose liberada por digesto da celulose. Sua fonte de carbono a celulose. Formam compostos orgnicos simples que se difundem na camada superior.

MICROAERFILA Interface gualodo

Bactrias sem pigmentos que oxidam o SH2 (Beggiatoa, Thiobacillus, Thiotrix)

ANAERBIA SUPERIOR Lodo pobre em H2S

ANAERBIA INFERIOR Lodo enriquecido com enxofre e celulose

Bactrias estritamente anaerbias (Clostridium)

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