MEDICAMENTOS BIOTECNOLGICOS Y SU EVALUACIN

Dr. Francisco Javier Flores Murrieta.

Jefe de la Unidad de Investigacin en Farmacologa, Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias y Profesor Titular de la Seccin de Estudios de Posgrado e Investigacin de la Escuela Superior de Medicina del IPN. E-mail: fjfloresmurrieta@yahoo.com.mx

Biotecnologa
Uso de organismos vivos para la elaboracin de productos de utilidad

MEDICAMENTOS BIOTECNOLGICOS
Iniciativas teraputicas generadas a partir de procesos biolgicos Medicamentos basados en molculas biolgicas incluyendo protenas y cidos nucleicos Diferentes a la sntesis qumica de molculas

MEDICAMENTOS BIOTECNOLGICOS
I. Protenas recombinantes: Las protenas producidas por cualquier ente biolgico procariote o eucariote al que se le introduce, por tcnicas de ingeniera gentica, una secuencia de cido desoxirribonucleico que las codifica; II. Anticuerpos monoclonales: Las inmunoglobulinas intactas producidas por hibridomas, inmunoconjugados, fragmentos de inmunoglobulinas y protenas recombinantes derivadas de inmunoglobulinas;

MEDICAMENTOS BIOTECNOLGICOS
III. Pptidos sintticos: Los pptidos constituidos por menos de cuarenta aminocidos producidos por tcnicas de biotecnologa molecular; IV. cidos nucleicos sintticos o de plsmidos: Los cidos nucleicos obtenidos de plsmidos naturales o modificados por tcnicas de ingeniera gentica, y V. Los dems que, en su caso, determine mediante acuerdo la Secretara, conforme a los avances tcnicos y cientficos.

Clasificacin
Anticuerpos. Protenas. Pptidos.

Clasificacin
Anticuerpos Monoclonales. Interleucinas. Interferones. Factores Estimulantes de Colonias. Vacunas. Terapias Gnicas.

Que son los Mab?

Son anticuerpos producidos por un nico clon, linfocitos B ( derivado de una misma clula), son qumicamente puros y que pueden producirse a voluntad. Antisuero convencional formado por una mezcla variada de inmunoglobulinas que nunca puede ser reproducida: Policlonales.

Caractersticas
Policlonales
1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. Mezcla heterognea. Variacin. Irrepetibles. Se usan antigenos. Reconocen varios epitopos Fcil produccin Baratos.

Monoclonales
1. 2. 3. 4. Qumicamente puros. Invariables. Produccin ilimitada. No se necesitan Ags. Purificados. Muy especficos. Un solo isotipo. Produccin compleja. Caros

5. 6. 7. 8.

 En 1975 George Kohler y Cesar Milstein describieron la tcnica de produccin de hibridomas para la obtencin de Mab. Se les concedi el Premio Nobel en 1984. Trabajo de gran impacto en la investigacin, desarrollo e innovacin de todos las reas que emplean la unin antigeno-anticuerpo.

Tecnologa anticuerpos monoclonales

Interleucinas
Protenas solubles de bajo peso molecular Crecimiento celular, inmunidad, diferenciacin tisular, inflamacin, entre otros Son el principal medio de comunicacin intracelular ante una invasin microbiana. 33 interleucinas, las cuales difieren entre si tanto desde el punto de vista qumico como biolgico.

Interferones
Protena la mayora de los animales como respuesta a agentes externos. En los seres humanos hay tres tipos principales de Interfern: El primer tipo est compuesto por 14 diferentes isoformas del Interfern. Alfa, y otras individuales del beta, omega, epsilon y kappa. El segundo es el Interfern gamma. Tercera clase el Interfern lambda.

Interferones
Acciones bsicas: Impide la replicacin en clulas infectadas que an no han sido destrudas por la accin vrica. Activa linfocitos especficos, NK capaces de reconocer clulas infectadas por el virus y eliminarlas.

Interferones
Conjuntamente con quimio y radioterapia para tratamiento del cncer. Hepatitis B y C. Esclerosis Mltiple. Shock Sptico.

Factores Estimulantes de Colonias

Estimulan las clulas madre de la mdula sea para que se dividan y se conviertan en leucocitos, plaquetas y glbulos rojos. Tratamiento para cncer y otras patologas daan este proceso.

Factores Estimulantes de Colonias

Los mas utilizados son: El G-CSF ( Filgastrim) y el GM-CSF (Sargramostim): aumenta el N de leucocitos. La Eritropoyetina (Epoiten)puede aumentar el N de glbulos rojos y reducir la necesidad de transfusiones. La Interleucina-11(Oprelvekin) ayuda al organismo a producir plaqueta y reduce la necesidad de transfusiones.

Aspectos importantes de drogas basadas en protenas

1) Antigenicidad. 2) Estabilidad. 3) Administracin.

Antigenicidad
Protenas extraas pueden inducir reacciones alrgicas Administrar protenas humanas Anticuerpos humanizados i) Anticuerpos quimricos. ii) Anticuerpos producidos por ratones transgnicos.

Vida de drogas proteinarecombinantes

Protein Humulin Orthoclone OKT3 HI MuMAb Physical Form liquid liquid Expiration Dating Period 2 years (2-8 C) 1 year (2-8 C)

Roferon-A
Intron A Activase Protropin

IFN-a2a
IFN-a2b TPA hGH

solid
solid solid solid

3 years (2-8 C)
3 years (2-8 C) 2.5 years (2-8 C) 2 years (2-8 C)

Estabilidad del TNF1 almacenado (2-8C)

Time in Storage (months) 0 3

Potency 100 % 100 %

6
9 12

70 %
60 % 50 %

Administracin del medicamento

Problemas Desnaturalizacin / alteracin qumica. Depuracin heptica.

Solucin: Mtodos alternativos Parenteral. Nasal. Implantes. Inhaladores: Insulina.

TERAPIA ANTI-IgE

La prevalencia de asma se relaciona con el nivel de IgE-srica *

Prevalencia de asma (%) 40 Edad 6 a <35aos Edad 35 a <55 aos 30 Edad 55+ aos

20

10

<1.5

1.5 <0.5 0.5 <0.5

0.5 <1.5

1.5+

Rangos de IgE Z puntaje en suero

* Estandarizado para edad y sexo

Burrows B et al. N Engl J Med 1989

Terapias Anti-IgE: Omalizumab anticuerpo monoclonal anti-IgE

Basado en esqueleto de IgG1 humano 5% de aminocidos de ratn antibody complementaritydetermining regions (Mw~150kD) Fija IgE libre en la circulacin

Evita que IgE se fije a receptores de alta y baja afinidad (FceRI y II)
Riesgo mnimo de anafilaxia

Forma pequeos complejos inactivos de omalizumab:IgE

El anticuerpo no fija complemento

Omalizumab detiene la cascada alrgica

Omalizumab forma complejos con IgE libre Linfo B estimulado por alergeno produce IgE

IgE FcRI

Omalizumab
Linfo B

Clula cebada

Pacientes que pudieron suspender CE inhalados por completo

Pacientes (%) 60 50 40 30 20 10 0 Estudio 008 Asma adultos
**p<0.01, ** p<0.001 vs placebo

Omalizumab Placebo *** **

***

Estudio 009 Asma adultos

Estudio 010 Asma nios

Fuente: 008, 009 and 010 CTR

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

Bioequivalencia de dos formulaciones, innovador y genrico, de un medicamento convencional (molcula pequea)

Concentracin plasmtica (mg/L)

Tiempo (horas)

Flores-Murrieta, Castaeda-Hernndez y Medina-Santillan, 2002

Determination of conventional drugs in plasma

Diclofenac

HPLC

Diclofenac

Peso molecular en kDa

Conventional Drugs
Aspirin 0.180 Adrenaline 0.183 Diclofenac 0.296 Paroxetine 0.329 Ranitidine 0.351 Doxorubicin 0.580 Levofloxacin 0.740 Tacrolimus 0.804 Paclitaxel 0.854

Biotherapeutic Products
Insulin 5.8 Filgrastim 18.8 Interferon alpha 19.5 Somatotropin 22 Erythropoietin 30.4 Rituximab 145 Trastuzumab 146 Infliximab 149 Bevacizumab 149

Diclofenac

Eritropoyetina

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

ARTCULO 177 Bis 2. Para obtener el registro sanitario de medicamentos biotecnolgicos biocomparables se requiere presentar solicitud en el formato oficial, que para tal efecto se publique en el Diario Oficial de la Federacin, a la que se anexar la documentacin contenida en las fracciones I a IX del artculo 177 y los estudios preclnicos y clnicos que seale la Secretara como estudios de biocomparabilidad, estudios de inmunogenicidad y reportes de eventos adversos, y otros que la Secretara determine, previa opinin del Comit de Molculas Nuevas, previa consulta que ste realice al Subcomit de Evaluacin de Productos Biotecnolgicos

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

Los estudios in vitro. No se requerirn de stos cuando la Secretara, con base en la opinin del Comit de Molculas Nuevas, previa consulta que ste realice al Subcomit de Evaluacin de Productos Biotecnolgicos, as lo determine

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

Estudios preclnicos:
a. Reporte comparativo del efecto farmacodinmico y actividad relevante para la aplicacin clnica; b. Reporte comparativo de toxicologa (llevando a cabo las pruebas que apliquen incluyendo la toxicocintica).

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

Estudios clnicos:
Estudios comparativos de farmacocintica (incluyendo parmetros de absorcin y eliminacin).

Podrn realizarse en voluntarios sanos o en pacientes.

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

Estudios de farmacodinamia con las siguientes caractersticas: Los marcadores acordes a la relevancia para demostrar eficacia teraputica del producto; b. El efecto farmacodinmico del medicamento biotecnolgico biocomparable y del medicamento biotecnolgico de referencia debe compararse en una poblacin donde puedan observarse las posibles diferencias y no se utilIzar la dosis que alcanza el efecto mximo. c. El diseo y duracin de los estudios deben justificarse.

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

Los estudios combinados de farmacocintica y farmacodinamia pueden proporcionar informacin de utilidad sobre la relacin entre la exposicin y el efecto, y segn lo determine el subcomit de biotecnolgicos del Comit de Molculas Nuevas de la COFEPRIS, con estudios en los que se obtengan resultados satisfactorios puede ser suficiente para el registro.

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

Los estudios clnicos de eficacia y seguridad comparativa Se debern establecer los parmetros y mrgenes de biocomparabilidad Se deber cumplir con la normatividad aplicable de buenas prcticas de investigacin clnica que aseguren la validez cientfica del estudio,

EVALUACIN DE LOS BIOCOMPARABLES

Para aquellos medicamentos en donde la respuesta inmune pudiera afectar a la protena endgena o a su funcin biolgica, las pruebas de anticuerpos deben realizarse en los ensayos clnicos de seguridad, tomando en cuenta el papel que pudieran tener la hipersensibilidad, reacciones de infusin, la autogenicidad y prdida de la eficacia.

Posibles Problemas al Escalar

Posibilidad de diferencias 1. En el corte del gene. 2. En la introduccin del DNA a la clula. 3. En la unin al DNA del gene con el celular. 4. En el tipo de clula (cepa o clona). 5. En los eventos postransduccin. 6. En la conformacin de la protena. 7. En la purificacin de la protena. 8. En el vehculo de la formulacin. EL PRODUCTO ES EL PROCESO

Una nueva estrategia para el tratamiento de enfermedades crnico degenerativas: Los anticuerpos monoclonales

Linfoma con linfocitos B con CD20 y terapia con anticuerpos antiCD20

Produccin de anticuerpos monoclonales

Linfocitos Clona 1

Anticuerpo 1

Baja afinidad

Baja afinidad

Anticuerpo 2
Linfocitos Clona 2 Antgeno CD20

Alta afinidad Linfocitos Clona 3

Anticuerpo 3

Afinidades diferentes, dosis diferentes

Anticuerpo de alta afinidad

Unin del antgeno

50% de unin

Anticuerpo de baja afinidad

Dosis elevada
Dosis baja

Concentracin de anticuerpo

Different clones: Different selectivities

Importancia de la Formulacin en la Biodisponibilidad

A pesar de ser inyectables, la biodisponibilidad de biomolculas puede ser modificada por el vehculo. El ejemplo clsico es la insulina: Hay formas de accin rpida, intermedia y lenta. Por lo tanto, es crucial tener el vehculo adecuado para lograr eficacia y evitar toxicidad.

Eritropoyetina: Formulacin para uso humano

Eritropoyetina

Albmina

El caso Eprex
En 1998, la EMEA ordena retirar componentes humanos de medicamentos inyectables. Propsito: evitar contaminacin con VIH y enfermedad de Creutzfeld-Jakob. Resultado, en las formulaciones de eritropoyetina se sustituye el estabilizante habitual, la albmina humana, por un polisacrido, el polisorbato 80, y glicina (Eprex), excipientes comunes en formulaciones de molculas pequeas. Comenzaron a aparecer casos de anemia del tipo de aplasia pura de clulas rojas en Europa.
Lut S. Lessons from Eprex for biogeneric firms. Nature Biotechnology 2003; 21: 956 957.

Epoyetina y PRCA
Causas? Nmero de casos de PRCA asociados con epoyetina alfa
80 70

Investigacin

Accin EPO SC retirada

60
50 40 30 20

10
0 <1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003

Ao
EPO alfa (Eprex) fuera de EUA EPO alfa (Epogen /Procrit) en EUA

Johnson & Johnson Pharmaceutical Research & Development LLC. Summary of PRCA case reports Available at: http://www.jnj.com/news/jnj_news/1021024_095632.htm. Accessed December 15, 2003

FARMACOVIGILANCIA
ARTCULO 81 Bis. La farmacovigilancia de los medicamentos biotecnolgicos deber realizarse de conformidad con la norma correspondiente. Dicha farmacovigilancia deber permitir una clara identificacin del medicamento biotecnolgico, refirindose especficamente a su fabricante, a la Denominacin Comn Internacional, a la denominacin distintiva y al nmero de lote. Asimismo, esta farmacovigilancia deber facilitar la identificacin de las terapias biotecnolgicas administradas en todas las etapas del tratamiento.

Uso de biosimilares y originales

Original Paciente A Biosimilar Paciente B

OK

Original

Biosimilar Paciente C

Biosimilar

Original Paciente D

NO

El uso teraputico debe permitir la farmacovigilancia con datos sin confusin.

Resumen y Conclusiones (1)

1. En el caso de los frmacos tradicionales, la bioequivalencia se puede determinar a partir de las concentraciones plasmticas, ya que la sustancia qumica y sus propiedades estn perfectamente definidas.
2. Para las biomolculas, ste no es el caso. Dadas las caractersticas de la preparacin de estos medicamentos. El producto es el proceso.

Resumen y Conclusiones (2)

3. Solo aquellos biocomparables que cumplan con los requisitos legales pueden ser usados como sustituibles con respecto al original. 4. Sustituible quiere decir que en una licitacin se puede adquirir el biocomparable. 5. Nunca intercambiar en el mismo paciente. Un mismo medicamento (original o biocomparable) por paciente, para permitir la farmacovigilancia.

Resumen y Conclusiones (3)

6. Un biocomparable puede requerir de una dosificacin diferente al original por variaciones en afinidad. Por lo tanto, es un producto diferente y debe ser caracterizado.

MUCHAS GRACIAS POR SU ATENCIN