SISTEMA NACIONAL DE EDUCACION SUPERIOR TECNOLOGICA

INSTITUTO TECNOLOGICO DE LA REGION MIXE

INGENIERIA EN DESARROLLO COMUNITARIO

Compil: M.C. Carlos Antonio Martine

Santa Mara Tlahuitoltepec, Mixe, Oaxaca. Agosto 2007

MICROBIOLOGIA

APORTACIN DE LA ASIGNATURA AL PERFIL DEL EGRESADO Permite adquirir conocimientos bsicos organizacin de los microorganismos. OBJETIVO(S) GENERAL(ES) DEL CURSO El alumno conocer la diversidad de los microorganismos y su aplicacin como productores, transformadores y causantes de enfermedades. Utilizar tcnicas especficas para su cultivo, aislamiento, purificacin e identificacin de los mismos. fin de incrementar la produccin agropecuaria, forestal e industrial! optimizando el uso de los recursos disponibles para ello, sin afectar el ambiente TEMARIO. Unidad 1. Intr d!""i#n a $a %i"r &i $ '(a. ".". ".#. ".&. ".(. ".*. ntecedentes $esarrollo %istrico 'onceptos bsicos )elacin con otras ciencias +mportancia ".*.". ,a distribucin de los microorganismos en la naturaleza ".*.#. 'ampos de aplicacin de la microbiologa. relacionados con la

Unidad ). M*t d + %i"r &i $#'i" +. #.". -todos de cultivo #.".". .ipos #.".#. 'lasificacin de medios por uso #.#. Preparacin de medios #.&. .cnicas de cultivo #.&.". -todos para aislar cultivos puros. #.&.#. /iembra en tubo #.(. Preparaciones para microscopia #.(.". .ipos de microscopios #.*. 'aractersticas para la identificacin #.*.". -orfolgicas #.*.#. 0ioqumicas #.*.&. ntignicas Unidad ,. N %-n"$at!ra. ta/ n %(a 0 "ara"t-r(+ti"a+ d- $ + %i"r r'ani+% + &.". 1irus &.".". Propiedades generales &.".#. 'riterios de clasificacin 2
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&.".&. 2omenclatura y ta3onoma &.".(. Estructura &.".*. )eproduccin &.".4. +mportancia 0acterias &.#.". Propiedades generales &.#.#. 'riterios de clasificacin &.#.&. 2omenclatura y ta3onoma &.#.(. Estructura &.#.*. )eproduccin &.#.4. +mportancia lgas &.&.". Propiedades generales &.&.#. 'riterios de clasificacin &.&.&. 2omenclatura y ta3onoma &.&.(. Estructura &.&.*. )eproduccin &.&.4. +mportancia Protozoarios &.(.". Propiedades generales &.(.#. 'riterios de clasificacin &.(.&. 2omenclatura y ta3onoma &.(.(. Estructura &.(.*. )eproduccin &.(.4. +mportancia 5ongos &.*.". Propiedades generales &.*.#. 'riterios de clasificacin &.*.&. 2omenclatura y ta3onoma &.*.(. Estructura &.*.*. )eproduccin &.*.4. +mportancia 2ematodos &.4.". Propiedades generales &.4.#. 'riterios de clasificacin &.4.&. Estructura &.4.(. )eproduccin &.4.*. +mportancia

Unidad 1. Fa"t r-+ A%&i-nta$-+ 2!- a3-"tan -$ "r-"i%i-nt . d-+arr $$ 0 r-4r d!""i#n d- %i"r r'ani+% +. (.". 6actores de crecimiento (.#. Presin 5idrosttica (.&. .emperatura (.(. Potencial de 5idrgeno 7p58 (.*. 93geno (.4. 2utrientes Unidad 5. M-ta& $i+% Mi"r &ian .

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*.". 9rigen de las cepas industriales *.#. Propiedades de un microorganismo industrial *.&. Productos industriales *.&.". Empleo de microorganismos en la elaboracin alimentos *.(. -etabolitos microbianos *.(.". Primarios *.(.#. /ecundarios *.*. 'ontrol del crecimiento microbiano en alimentos *.*.". 'ontrol qumico *.*.".". ctividad antimicrobiana *.*.#. 'ontrol biolgico *.*.#.". ntimicrobianos naturales FUENTES DE INFORMACIN

de

". A$-/and-r. M. ":;<. Introduccin a la microbiologa del suelo. ed. =.. -3ico. #. A$-/ 4 !$ +. C. J. ":>:. Introduction to Mycology. $e. ?o%n @iley and /ons. U/ . &. ATLAS. R.M. ":;;. Microbioly fundamentals and applications. ed. -ac-illan Publis%ing 'ompany. U/ . ;<> p. (. Br "6 T.D.. S%it7. D.8. 0 Madi'an. M.T. ":;>. Microbiologa. ed. PrenticeA5all. -3ico. :<4 p. *. Car n-. D.M. ":;4. Micologa. ed. Pueblo y Educacin. -3ico. 4. Cart-r G.R. M.M. C7-n'a44a. "::;. Bacteriologa y Micologa Veterinaria. spectos esenciales. Ed. -anual -oderno /. de '.1. >. Fra9i-r. 8.C. 0 8-+t7 33. D.C. "::". Microbiologa de Alimentos. ed. cribia, EspaBa. *## p. ;. Fr--d%an B.A. "::;. Microbiologa de Burrows. Editorial +nteramericana -c =raCA5ill :. I.P.N. "::". Manual de prcticas de microbiologa sanitaria. $epartamento de microbiologa de la E2'0. -3ico. #*< p. "<. Ja0. J. M. ":;4. Modern Food Microbiology. .%ird edition. 1an 2ostrand )eCin%old 'ompany, 2eC DorE. "". : n-%an. A$$-n. D ;-$$. S %%-r+. 8inn. Diagnostico Microbiolgico. .e3to y tlas de color Editorial -edica Panamericana /. "#. L rrain-. A.S. ":;*. Principles of Microbiology. .imes -irrorF-osby. 'ollege Publis%ing. 'anad. :#: p. "&. Madi'an. T.M. -t. a$ "::;. Biologa de los Microorganismos. ;a. Edicin. Prentice 5all +beria, -adrid, EspaBa. "(. P-$"9ar. M.J. Jr.. R-id. R. 0 C7an. E.C.S. ":;&. Microbiologa. ed. -c =raC 5ill. -3ico. ;#4 p. "*. Ri"7ard+. B.N. ":;>. !e Microbiology of terrestrial ecosystems. ed. ,ogman. England. &:: p. "4. S"-$-0. <.8. and Van D-%ar6. P.J. ":;>" Microbes in action# a laboratory manual of microbiology. ed. @.5. 6reeman 'ompany. U/ .

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">. Vi$$--. A.C. "::4. Biologa. ;a. Edicin. -c=raC 5ill Editores. -3ico, $6. VINCULOS DE UTILIDAD= ". %ttp!FFCeb.uct.ac.zaFmicrobiologyFmanualF-ol0iol-anual.%tm #. %ttp!FFCCCAmicro.msb.le.ac.uEF#"<Fbs#"<.%tml &. %ttp!FFCCC.slic#.Csu.edu!;#F%urlbertFmicro"<"FpagesF"<"%mpg.%tml (. %ttp!FFCCC.umsl.eduFGmicrobesFlinEs.%tml *. %ttp!FFCCC.bact.Cisc.eduFmicrote3tbooEF

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Unidad 1. Intr d!""i#n a $a %i"r &i $ '(a

1.1. Antecedentes El conocimiento %umano sobre los efectos producidos por los microorganismos %a estado presente incluso desde antes de tener conciencia de su e3istenciaH debido a procesos de fermentacin provocados por levaduras se puede %acer pan, bebidas alco%licas y productos derivados de la lec%e. En la antigIedad la causa de las enfermedades era atribuida a castigos divinos, fuerzas sobrenaturales o factores fsicos 7,a palabra malaria significa Jmal aireK, se crea que era el aire viciado de los pantanos el que provocaba esta enfermedad8. $urante este periodo previo al descubrimiento de los microorganismos, los naturalistas solo podan especular sobre el origen de las enfermedades. ,a microbiologa es la ciencia encargada del estudio de los microorganismos, seres vivos pequeBos 7de mi$ros LpequeBoL, bios, LvidaL y logos, LestudioL8, tambin conocidos como microbios. Es la rama de la biologa dedicada a estudiar los organismos que son solo visibles a travs del microscopio 7virus, procariontes y eucariontes simples8. /on considerados microbios todos los seres vivos microscpicos consistentes en una sola clula, es decir unicelulares, as como aquellos que forman agregados celulares en los cuales todas las clulas son equivalentes 7en los cuales no e3iste diferenciacin celular8. ,os microorganismos pueden ser eucariotas 7las clulas poseen nMcleo8, tales como los %ongos y los protistas, o procariotas 7clulas carentes de nMcleo8, como las bacterias y los virus 7aunque los virus no son considerados seres vivos estrictamente %ablando8. unque los conocimientos microbiolgicos de que se dispone en la actualidad son muy amplios, todava es muc%o lo que queda por conocer y constantemente se efectMan nuevos descubrimientos en este campo. .anto es as que, segMn las estimaciones ms %abituales, slo un "N de los microbios e3istentes en la biosfera %an sido estudiados %asta el momento. Por lo tanto, a pesar de que %an pasado ms de &<< aBos desde el descubrimiento de los microorganismos, la ciencia de la microbiologa se %alla todava en su infancia en comparacin con otras disciplinas biolgicas tales como la zoologa, la botnica o incluso la entomologa. l ser muc%os de estos organismos patgenos, la microbiologa se relaciona con ramas de la medicina como patologa, inmunologa y epidemiologa. 1.2. Desarrollo histrico.

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En la %istoria evolutiva de la microbiologa a permitido intervenir a varios cientficos. ,a microbiologa inicio cuando el %ombre empez a pulir el vidrio y a combinarla con el obOeto de lograr amplificaciones de organismos muy pequeBos 7inicio con la aparicin del microscopio8. En el siglo P+++ )oger 0acon, postulo que las enfermedades son causadas por seres invisibles. En 1>5? un monOe llamados Qirc%er, %izo referencia de gusanos invisibles que intervenan en la descomposicin de cuerpos orgnicos, en la carne, en la lec%e y en e3udados diarreicos. 6ue el primero en determinar que las bacterias y otros miembros producen enfermedades. En 1>55 descubri la clula en un pedazo de corc%o. $e 1>,) a1@), el %olands Ant ni Van L--!;-n7 "6 fue el primero en %acer descripciones y dibuOos precisos de bacterias y protozoarios que fueron observados por el microscopio. /u descubrimiento no fue apreciado. L !i+ Pa+t-r. $escubri la participacin de los microorganismos en la fermentacin para la elaboracin de vinos y cervezas. $emostr mediante e3perimentos que las bacterias son la causa de algunas enfermedades. ?unto con )obert Qoc% comprobaron que el carbunco en los animales era producido por una bacteria. En 1??A aisl el germen causante del clera aviar 7gallinas8, desarrollando la bacteria en cultivo puro. .rabaOo con la vacuna contra la %idrofobia o rabia, aislando el germen en cultivo puro. R &-rt : "7. isl las bacterias que causan el carbunco en bovinos y ovinos, descubriendo los bacilos en las puntas angulosas en la sangre. 6ue la primera vez que se comprob que una bacteria causa enfermedad en los animales. 'on este antecedente estableci unos postulados! 7postulado de Qoc%8, que indican los siguientes. ". El organismo especfico debe siempre estar asociado a la enfermedad. #. El organismo debe ser aislado y obtenido a cultivo puro en laboratorio. &. El cultivo puro inoculado a un animal susceptible, produce la enfermedad. (. $ebe recuperarse en cultivo puro el organismo en el animal infectado e3perimentalmente. isl la bacteria que causa la tuberculosis. Estableci las reglas para indicar que las bacterias son las causantes de enfermedades. 9bservo 7
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que si se e3tiende las bacterias en una lamina de vidrio delgada agregndola colorantes se podr observar meOor. En 1BA5 fue acreedor al premio novel por los descubrimientos realizados 'on ,ouis Pasteur y )obert Qoc% se abri una nueva era de conocimiento para la microbiologa, a ellos asistieron varios cientficos para ser asociados, para distribuir esos conocimientos en toda mrica y Europa. ?osep% ,ister en 1?@? obtuvo por primera vez cultivos pares de bacterias por diluciones sereadas en medios lpidos. 0usco una forma de apartar bacterias de las %eridas y por las incisiones causadas por los ciruOanos, utilizando el acido fenico y polvenizaciones de bicloruro de mercurio estableciendo la antisptica quirMrgica y los principios de la tcnica asptica 7sin intencin8 de %oy. EdCin Qlebs y 6redericE ,eoffler descubrieron el bacilo de la difteria. Emil y Qitasado crearon la antito3ina para controlar el ttano, a dems de que ellos fueron seguidores de los descubrimientos de Pasteur y Qoc% que fueron aprovec%ados inmediatamente en el campo agropecuario y en la industria. finales del siglo P+P el ruso /ergio CinogradsEi, demostr que las bacterias adsorban nitrgeno de la atmsfera %acindose indispensable para el alimento de las plantas y de los animales. En 1BA1 el microbilogo %olands 0einbOerinE descubri el nitrgeno producida por las bacterias en el suelo. +ndicando que stas producen fertilidad en el suelo. El $ans nes Emil 'ristian 5ansen, realiz estudios para uso industrial de las fermentaciones mediante el cultivo de bacterias en la produccin de vinagre 7acido actico8. 'onn, 'ennicut y @eisman, en lemania de 1?BA a 1?B1 realizaron cultivos puros para la fabricacin de mantequilla. En 1??B el austriaco queso. vamert, cre cultivo puro para la fabricacin de

final del siglo P+P 0arril, descubri la enfermedad del tizn en la pera. En 1B15 /mit% y 0unquet descubrieron que los insectos son portadores de enfermedades virosas de planta infectadas a planta sana.

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En el aBo de 1BAA la microbiologa caus gran importancia por que se le incluy como una rama de la biologa 1.3. Conceptos bsicos $esde el punto de vista general la microbiologa! es la ciencia que trata sobre el estudio de microorganismos o microbios, sus caracterstica y su influencia con su %abitad 7tiende a modificar su %abitad8. En puntos de vista mas amplio la microbiologa estudia a los microorganismos y sus actividades, las formas, estructuras, metabolismo, fisiologa, reproduccin y crecimiento, identificacin, distribucin en la naturaleza. /u relacin con otros seres, sus efectos perOudiciales y benficos en %umanos en plantas y animales, as como las alteraciones fsicas y qumicas que provocan en su medio. ,a microbiologa estudia a los seres unicelulares. .odos los organismos vivos unicelulares estn compuestos qumica y biolgicamente de una misma forma, poseen %idratos de carbono, lpidos, protenas, cidos nucleicos, estn bien constituidos por el nMcleo, membrana o pared celular. .odos los sistemas biolgicos tienen en comMn las caractersticas de! ". 'apacidad de reproducirse. #. 'apacidad de asimilar e ingerir sustancias nutritivas y tienen la facultad de metabolizarla. Para producir energa y desarrollarse &. 'apacidad de e3cretar productos de desec%os (. 'apacidad de reaccionar a los cambios de medio ambiente 7irritabilidad8. *. ,a susceptibilidad a mutacin. 1.4. Relacin con otras ciencias La &i $ '(a Es el estudio de los diversos organismos vivientes, en otras palabras es el estudio de la vida. Para su comprensin y entendimiento se divide en dos grandes partes! 1). Unidad microbiologa. ta/ n#%i"a! 'ontempla la botnica, zoologa,

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B tCni"a. Estudia diversas especies de plantas, se dividen en criptgamas! 2o poseen semillas y se reproducen se3ualmente. ,as fanergamas! $an frutos y flores, se divide en! D ngiosperma. .iene el ovulo dentro del fruto y se divide en monocotiledneas, dicotiledneas. =imnosperma. .ienen el ovulo fuera del fruto y el ovulo fuera del ovario. $ '(a. Estudia las diversas especies de animales se divide en! +nvertebrados. 2o tienen %uesos, y se dividen en invertebrados inferiores, son los que tienen mas clulas comoH moluscos, lombrices, los invertebrados superiores son las que pueden tener algo de dureza, los artrpodos por eOemplo, c%ic%arras, c%apulines. 1ertebrados. .ienen %uesos y se encuentran los cordados inferiores que pueden ser es la mobranquias 7tiburn, pez, espora, mantaraya8, y los cordados superiores comoH anfibios, reptiles, aves, mamferos.

Mi"r &i $ '(a. 'iencia que trata sobre el estudio de microbios o microorganismos! bacterias, %ongos, virus, protozoarios, algas, nematodos. )). Unidad &C+i"a! 'orresponde al estudio de la interrelacin de los diversos organismos y ciencias que la poseen. Or'ani+% + 4r "ari#ti" + 0 -!"ari#ti"a+. 1). L + r'ani+% + 4r "ari#ti" +. ,os constituyen las clulas incompletas, porque no tienen nMcleo definido, el Ougo nuclear esta en contacto directo con la membrana celular. )). Or'ani+% + -!"ari#ti" +. ,os constituyen las clulas completas. Estn constituidas por organelos y microestructuras. Or'an-r +. .ienen membrana propia y estn en contacto directo con el citoplasma. C$a+i3i"a"i#n d- $ + r-in + 4ara $ + +-r-+ EiE +. Reino monera. ,o constituyen algunas bacterias y algas cianofitas, poseen clulas procariticas.

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Reino protista. ,a conforman los protozoarios, algunas bacterias y algas 7clorofceas, rodofceas, feofceas8. Estn constituidas por clulas eucariticas. Reino fung. ,o integran los %ongos, mo%o y levaduras. Poseen clulas eucariticas. Reino egetal. +ntegrado por planta criptgamas, fanergamas, gimnosperma, angiosperma, monocotiledneas, dicotiledneas. Poseen clulas eucariticas. Reino animal. +ntegrados por seres invertebrados y vertebrados poseen clulas eucariticas. 1.!. "mportancia de la microbiologa. ,os microbios son microorganismos ideales para investigacin, porque utilizan menos espacios y tiempo para la observacin y e3perimentacin. ,os microorganismos proporcionan conceptos bsicos para la comprensin de la fisiologa y gentica y las reacciones fsicas A qumicas que son la base de la vida. Proporcionan conocimiento sobre la reproduccin y desarrollo de organismos, en una bacteria por eOemplo! en #( %oras. /e conoce el proceso metablico de los microorganismos, que es igual a los organismos superiores. Es importante porque se observan los diferentes cambios que se presentan por alterar el medio que nos rodea. ,os microorganismos poseen potencialidades mayores que otros organismos, en el aspecto fisiolgico y bioqumico. 'on la microbiologa se conocen y describen nuevos microbios Mtiles y perOudiciales. 'on el conocimiento de la microbiologa, para los microbios benficos, se utilizan, en la industria, alimento, agricultura, medicina y en la ciencia en general. 'on los nuevos conocimientos en la qumica, fsica, matemticas 7bioestadstica o biometra, ingeniera gentica8 se podr aportar mayores caractersticas de la microbiologa. ,os microbilogos %an %ec%o contribuciones fundamentales a la biologa y medicina, especialmente en los campos de la bioqumia, gentica y biologa celular. ,os microbios tienen muc%as caractersticas que los %acen organismos modelo ideales!

/on pequeBos, por lo que no consumen muc%os recursos.

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lgunos tienen tiempos de generacin muy cortos 7el tiempo necesario para la divisin de una clula baterial en dos en condiciones ptimasH G&< minutos para %" coli, pero de "# a #( % para Mycobacterium tuberculosis8. ,as clulas pueden sobrevivir fcilmente separadas de otras clulas. ,os eucariontes unicelulares se reproducen por divisin mittica y los procariontes mediante fisin binaria. Esto permite la propagacin de poblaciones clnicas genticamente iguales. Pueden permanecer congelados por grandes perodos de tiempo. Mn y cuando el :<N de las clulas mueran en el proceso de congelacin, e3isten millones de clulas en cada mililitro de lquido cultural.

,a e3tensiva caracterizacin de microbios %a permitido que stos sean usados en la industria como herramientas experimentales en diferentes ramas de la biologa 1.!.1. #a distribucin naturale$a. de los microorganismos en la

,os microorganismos se encuentran en todas partes, son transportados por la corriente de aire desde la superficie de la tierra %asta el contacto con la atmsfera. /e localizan desde las partes mas profundas de los ocanos %asta las partes ms altas de las montaBas. /e encuentran en los suelos frtiles 7porque proporcionan nitrgeno 728 y transforman la materia orgnica8. /on arrastrados por arroyos y ros para ser depositados en algunos lugares como! lagos, lagunas, esteros. /e localizan en los desec%os %umanos, si estas son arrastrados por aguas se infectan y causan enfermedades. bundan donde se encuentra muc%o alimento, %umedad y una temperatura propicia. ,os microorganismos viven en las mismas condiciones ambientales que las personas por lo que estamos rodeados de microbios, por eOemplo en el aire, en el alimento, en la superficie de nuestros cuerpos, en las partes interna y orificios corporales, nariz, boca, esfago, odo, etc. fortunadamente la gran mayora de los microbios son inocuos para las partes sanas, a dems de poseer defensas contra ellos. 1.!.2. Campos de aplicacin de la microbiologa. Para su aplicacin varios microbilogos se especializan en cierto tipo de conocimiento especficos de microbios, e3istiendo! la bacteriologa, la protozoologa, la parasitologa 7estudio de los parsitos micro y macro, e3istentes8, micologa 7trata el estudio de %ongos, mo%os y levaduras8, la virologia, ficologa 7estudio de algas8. 12
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E3isten tambin otras disciplinas muc%os ms especficos como la gentica bacteriana, la fisiologa de las algas, la citologa de los protozoarios. 5ay muc%os campos de aplicacin de la microbiologa tales como! la microbiologa mdica, industrial, de alimentos, de suelo, ambiental, acutica, agua, drenaOe, aire, lec%e, de los insectos del espacio 7e3obiologa8 y los microorganismos y transformaciones bioqumicas

Unidad ). M*t d + %i"r &i $#'i" +.

2.1. %edio de culti o -aterial nutritivo en el que se pueden recuperar, multiplicar y aislar los microorganismos, as como efectuar pruebas de susceptibilidad. =eneralmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular, pero tambin pueden presentarse %idratados y preparados.

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Por su tamaBo de los microbios solo se pueden distinguir a travs del microscopio. Por lo que no se puede estudiar una sola clula en forma aislada. Por esta razn se estudia en grupos constituyendo los cultivos. En esta forma se estudia millones de microbios. %l culti&o de microorganismos" Es el procedimiento que promueve el crecimiento y desarrollo de microorganismos en el laboratorio, proporcionndoles las condiciones ambientales favorables como! nutrimentos, temperatura, p5 y una a creacin. /on tambin controlados otros factores como la concentracin salina, presin osmtica, la luz para organismos fotosintticos. 2.1.1. &ipos de medios de culti o ,os tipos dependen de la cantidad, clase y lugar o medio donde se realicen los estudios de los microorganismos. 1. Culti o a'enico# Es aquel microorganismo, bacteria, %ongo, alga, protozoo, etc., se cultiva en un medio libre, de otro tipo de microorganismo. 2. Culti o (uro# /e realiza en microorganismos, protozoo, bacteria, %ongo, que se cultivan en un medio artificial, y de laboratorio, obteniendo una generacin en una sola clula para conservar sus caractersticas genticas puras. Diferencias) En el cultivo a3enico es un grupo de bacterias en cultivo, pero sin control, y en el cultivo puro, se lleva un control de reproduccin para que conserve sus caractersticas genticas puras. 3. Culti os %i'tos# /e realiza cuando dos o mas especies de microorganismos, se desarrollan en su conOunto en un solo medio. Es comMn este tipo en la naturaleza. 2.1.2. %edios de culti o Es el medio seleccionado para realizar una investigacin dependiendo de la especie, en general, para establecer un medio o mtodo de cultivo, se tienen las siguientes consideraciones! ". /e puede levantar una cosec%a de clulas que se tiene a la mano. #. $eterminar el tipo de organismo para investigacin o realizar el cultivo. &. islar un tipo de microorganismo de su fuente natural, para poder obtener lo anterior se requiere del medio de cultivo, como es el! a'" (aboratorio# Es el espacio donde se realizan las actividades.

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b'" Materiales de (aboratorio# .ubo de ensayo, matraces, capsula de petri, mec%ero de bunsen, etc. c'" )ustancias! Productos qumicos a utilizar, agar, agua des%idratada 7purificada8, reactivos 7medir el P58, etc. e'" %*uipo# Estufas, autoclave, microscopios, balanzas, etc. 2.2. (reparacin de medios de culti o Para la preparacin de los medios se debe tener a disposicin la sustancia. Por eOemplo para el caso de bacterias en ocasiones se usa la lec%e entera semidescremada o descremada. ,os materiales deben ser esterilizados a travs de las autoclaves. .ener a disposicin el agar 7e3tracto polisacrido de las algas roOas rodofceas es utilizado en microbiologa como solidificante8 o caldo nutritivo que ser como base del medio para reproduccin. Rue se le agregar agua mediante se vaya requiriendo. Para la preparacin de los medios de cultivo se debe de seguir los siguientes pasos!
". 'ada ingrediente, o el medio des%idratado completo se debe

disolver en un volumen adecuado de agua destilada.

#. /e determinar el P5 del medio y si es necesario se aOustara, el P5

se determina por medio de indicadores o potencimetro. A$"an"- d-$ Indi"ad r d-$ P<
Indi"ad r-+ " %Fn) (N %&r-

cido 2eutro < " # & ( * 4 > ; : " <

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lcalino " " " # & (

zul de .imol zul de 0romotenol )oOo de -etilo zul de 0romatimol )oOo de 6e3iol )oOo de 'resol 6enolftalena

CAMBIO DE COLOR A"id A$"a$in

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)oOo marrillo )oOo marrillo marrillo marrillo +ncoloro

marillo zul marrillo zul )oOo )oOo )oOo

&. El medio se pondr en recipiente adecuado como tubos de

ensayo, matraz, botellas, cuyas bocaduras se cerraran con tapones de algodn plsticos o cubiertas de metal. (. ,os medios se esterilizaran en autoclaves. 2.3. &*cnicas de culti o. 2.3.1. %*todos para aislar culti os puros. 1+. ,iembra por estras en placa - t*cnica de siembra por difusin en placa. En un asa bacteriolgica, se pone una porcin de la muestra a un medio de cultivo a base de agar, se siembra las bacterias por estras o difusin.

Para realizar la siembra por lo general se utiliza una varilla de cristal estril o el asa de platino, para dispersar la muestra. 'on la varilla se %ace la dilucin 7adelgazamiento8 de la muestra para que las bacterias queden separadas una de otras.

'uando la muestra bacteriolgica se distribuye uniformemente en el asa, es un tipo de siembra llamado difusin. 'uando se ralla con la varita el medio de cultivo o el agar, es un tipo de siembra llamada por estras. El propsito de rayar el agar de la muestra es para separar los grupos de bacterias, y no lleguen a mezclarse. 'ada grupo obtendr descendencia e3clusiva, el cual ser un cultivo puro.

El cultivo o siembra por difusin las bacterias no quedan sobre puestas, por lo que su descendencia es Mnica y ser un cultivo puro.

$iferencia! en el cultivo por estras %abr descendencia en grupoH por difusin, se obtiene descendencia en forma individual o sola. Es la tcnica de siembra ms comMn en los laboratorios por su baOo costo y sin muc%o recurso material.

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2.3.2. ,iembra en tubo 2+. &*cnica de placa ertida.

Esta tcnica consiste en %acer la dilucin de la muestra en tubos de ensayo con agar fundido y enfriado. Para %acer las diluciones se requieren de ms de dos tubos, para obtener colonias aisladas. El medio de cultivo se mantiene en estado lquido a (* S' para permitir la mayor reproduccin y distribucin de la muestra. Una vez %ec%a la mezcla se coloca en caOa de petri y se incuban. /e procede aislar bacterias, que es el principal obOetivo de esta tcnica aislar tipos de bacterias en forma cuantitativa y cualitativa. 3+.&*cnica de enri.uecimiento de culti o. El obOetivo de esta tcnica es la de crear un tipo de ambiente adecuado para cierta bacteria u otros microorganismos para su proliferacin. Este tipo de ambiente ser adecuado para una determinada bacteria especfica, pero no para cualquier otra o en su caso la bacteria no deseada pueda desarrollarse con certitud en relacin a la bacteria deseada. Por eOemplo se desea la reproduccin y desarrollo de la bacteria azotobacter que es la generadora de nitrgeno en el suelo. /e toma una muestra del suelo, al observarla se encontrar en esa muestra varios tipos de bacterias. Para proliferar a la azotobacter e3clusivamente se criar un medio de cultivo e3clusivo para la azotobacter con el fin que pueda ser la Mnica de reproducirse y desarrollarse en ese medio. 4+. &*cnica de aislamiento de una sola c*lula Para obtener un solo microorganismo, para su estudio, se necesita de equipo especial como el micromanipulador 7aparato que permite observar y maneOar microorganismos muy pequeBos8. Este aparato permite al cientfico o investigador controlar los movimientos con una micropipeta o microcnula 7aguOas finas con canaletas8. l observando bacterias, si se desea investigar, a una en especial se utiliza la micropipeta para atrapar a la clula, a travs de una cnula para ser depositada a un medio de cultivo. Esta tcnica se utiliza en estudios especializados con operadores o investigadores especializados 2.4. (reparaciones para microscopia Un microscopio simple 7de un lente o varios lentes8, es un instrumento que amplifica una imagen y permite la observacin de mayores detalles de los posibles a simple vista. El microscopio ms simple es una lente de aumento o un par de anteoOos. 17
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El poder de resolucin del oOo %umano es de <,# mm es decir que para ver dos obOetos separados estos deben estar como mnimo a esa distancia. El poder de resolucin del oOo %umano es de <,# mm es decir que para ver dos obOetos separados estos deben estar como mnimo a esa distancia. El microscopio aumenta la imagen %asta el nivel de la retina, para captar la informacin ,a resolucin depende de la longitud de onda de la fuente luminosa, el espesor del espcimen, la calidad de la fiOacin y la intensidad de la coloracin. .ericamente la m3ima resolucin que se puede alcanzar es de <,# um dada por una luz con longitud de onda de *(< nm, la cual pasa por un filtro verde 7muy sensible por el oOo %umano8 y con obOetos condensadores adecuados. El ocular aumenta la imagen producida por el obOetivo, pero no puede aumentar la resolucin. E3isten distintos microscopios pticos generales y de investigacin que se diferencian en factores tales como la longitud de onda de la iluminacin del espcimen, la alteracin fsica de la luz que incide en la muestra y procesos analticos que se aplican a la imagen final 2.4.1. &ipos de microscopios -icroscopio de campo claro T Es descendiente de los disponibles a partir de ";<< 'ompuestos por! 6uente luminosa que ilumina la muestra 'ondensador que enfoca los rayos de luz sobre la muestra Platina sobre la cual se coloca la muestra 9bOetivo que recibe la luz que atraves la muestra 9cular que recibe directamente la imagen formada por el obOetivo ,a muestra a observar debe ser fina para que pueda ser atravesada por la luz. 'on este tipo de microscopio se deben utilizar mtodos de tincin porque el campo claro de este no produce un nivel Mtil de contraste. -icroscopio de contraste de fase T Permite observar clulas sin colorear y resulta especialmente Mtil para clulas vivas Este aprovec%a las pequeBas diferencias de los ndices de refraccin en las distintas partes de una clula y en distintas partes de una muestra de teOido. ,a luz que pasa por regiones de mayor ndice de refraccin e3perimenta una defle3in y queda fuera de fase con respecto al %az principal de ondas de luz que pasaron la muestra. parea otras longitudes de onda fuera de fase por medio de una serie 18
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de anillos pticos del obOetivo y del condensador, anula la amplitud de la porcin fuera de fase inicial del %az de luz y produce un contraste Mtil sobre la imagen. ,as partes oscuras de la imagen corresponden a las porciones densas del espcimenH las partes claras de la imagen corresponden a porciones menos densas. Por lo tanto estos microscopios se utilizan para observar clulas vivas, teOidos vivos y cortes semifinos no coloreados.

$os modificaciones del microscopio de fase son el microscopio de interferencia y el microscopio de interferencia diferencial. -icroscopio de campo oscuro T El obOetivo recibe la luz dispersa o refractada por las estructuras del espcimen. Para lograrlo, el microscopio de campo oscuro est equipado con un condensador especial que ilumina la muestra con luz fuerte indirecta. En consecuencia el campo visual se observa como un fondo oscuro sobre el cual aparecen pequeBas partculas brillantes de la muestra que refleOan parte de la luz %acia el obOetivo. El efecto es similar a las partculas de polvo que se ven en el %az de luz emanado de un proyector de diapositivas en una %abitacin oscura. ,a luz refleOada por las partculas de polvo llega %asta la retina del oOo y las %acen visibles. ,a resolucin de este microscopio no puede ser meOor que la del microscopio de campo oscuro porque emplea la misma fuente de longitud de onda, sin embargo puede detectar partculas individuales ms pequeBas en las imgenes de campo oscuro, debido al contraste creado. Es Mtil para observar autorradiografas, cristales en la orina y para detectar espiroquetas en particular el reponema pallidum microorganismo causante de la sfilis. -icroscopio de fluorescencia T Una molcula que fluorece emite luz de longitud de onda que se encuentra dentro del espectro visible, cuando es e3puesta a una fuente de luz ultravioleta. /e usa para revelar molculas fluorescentes naturales, como la vitamina y algunos neurotransmisores. l ser escasas las molculas autofluorecentes su aplicacin ms difundida es para revelar una fluorescencia agregada, como en la deteccin de antgenos o anticuerpos en procedimientos de coloracin inmunocitoqumica. .ambin se puede inyectar molculas fluorescentes especficas en un animal o directamente en clulas y usarlas como marcadores. Estos mtodos sirvieron para estudiar uniones intercelulares, trayectorias de las fibras nerviosas en neurobiologa y en deteccin de marcadores del crecimiento fluorescentes en teOidos mineralizados.

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/e insertan distintos filtros entre la fuente de luz ultravioleta y la muestra para producir luz monocromtica o casi monocromtica, o entre el espcimen y el obOetivo permitiendo que la estrec%a banda de longitudes de onda de fluorescencia llegue %asta el oOo o incida en una emulacin fotogrfica u otro procedimiento analtico. -icroscopio de barrido confocal T /e usa para estudiar la estructura de los materiales biolgicos. Emplea un sistema de iluminacin con rayo lser que es muy convergente y, en consecuencia produce un punto de barrido muy poco profundo. ,a luz que emerge del punto es dirigida a un tubo fotomultiplicador, donde es analizada. /e utiliza un sistema de espeOos para mover el rayo lser a travs del espcimen, iluminando un solo punto por vez. /e registran los datos de cada punto de la muestra recorrida con este rayo mvil y se guardan en una computadora. ,uego se puede llevar la imagen a un monitor de alta resolucin. Este mtodo tiene la ventaOa de que se pueden tomar imgenes de la muestra en cortes muy finos. ,as regiones fuera de foco se restan de la imagen mediante un programa para dar una definicin m3ima a la imagen -icroscopio de polarizacin T Este microscopio es una simple modificacin del microscopio ptico, contiene un filtro polarizante llamado polarizador entre la fuente de luz y la muestra y se ubica un segundo polarizador, denominado analizador entre el obOetivo y el observador. /e puede rotar el polarizador y el analizadorH la diferencia entre sus ngulos de rotacin se usa para determinar el grado en que una estructura afecta el %az de luz polarizada. ,a capacidad que tiene un cristal o estructura cristalina de rotar el plano de la luz polarizada se denomina birrefringencia. E3%iben birrefringencia el mMsculo estriado o esqueltico y las inclusiones cristaloides de las clulas intersticiales testiculares -icroscopia electrnica. $entro de los microscopios electrnicos tenemos el de barrido y el de transmisin. ,a ventaOa de los microscopios electrnicos frente a los pticos esta en que la longitud de onda del %az de luz es apro3imadamente "F#<<, lo cual aumenta la resolucin. -icroscopio electrnico de transmisin T ,a ptica es muy similar al ptico pero se diferencia en que usa un %az de electrones en vez de un %az de luz visible. Este microscopio se basa en los siguientes principios! A Una fuente, un filamento de tungsteno calentado que emite electrones 7ctodo8. A Un nodo, %acia el cual son atrados los electrones.

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A Una diferencia de potencial entre el ctodo y el nodo imparte un voltaOe de aceleracin entre #<.<<< y #<<.<<< voltios a los electrones, que crea el %az. El %az pasa por una serie de electroimanes que tienen las mismas funciones que las lentes de vidrio de un microscopio ptico El %az que atraviesa la muestra se coloca en foco y se aumenta por medio de un obOetivo y se aumenta aun ms con una o ms lentes proyectoras. ,a imagen final se visualiza sobre una planilla cubierta por fsforo. ,as porciones de la muestra que %an sido atravesadas por los electrones aparecen brillantes, las porciones que absorbieron o esparcieron los electrones por su densidad in%erente o debido al agregado de metales pesados durante la preparacin del espcimen aparecen oscuras. /e coloca una placa fotogrfica o un detector de video por encima o por debaOo de la pantalla del visor, con la finalidad de obtener un registro permanente de la imagen sobre la pantalla. -icroscopio electrnico de barrido T /e asemeOa ms que al microscopio electrnico de transmisin a los tubos de televisin de donde deriva la microscopia electrnica. Para analizar la mayora de los teOidos se deOa la muestra, se des%idrata por desecacin de punto crtico, se cubre con una pelcula evaporada de oroAcarbn, se monta en un taco de aluminio y se coloca en la cmara de muestras del microscopio. En los teOidos mineralizados es posible eliminar todos los teOidos blandos con una leOa y analizar las caractersticas estructurales del mineral. /e logra el barrido con el mismo tipo de rastreo que e3plora el %az de electrones a travs de la superficie un tubo de televisin. ,os electrones refleOados desde la superficie y los electrones forzados %acia el e3terior de la superficie son captados por uno o ms detectores y reprocesados para formar una imagen tridimensional en una televisin. /e pueden tomar fotografas para registrar los datos o la imagen en una cinta de video. /e pueden usar otros detectores para medir los rayos P emitidos desde la superficie, la catodoluminiscencia de las molculas del teOido por debaOo de la superficie y los electrones de uger emitidos en la superficie. -uc%os microscopios combinan las caractersticas de un microscopio electrnico de transmisin y de barrido, el cual permite microanlisis por rayos P con sonda electrnica. 2.!. Caractersticas para la identificacin 2.!.1. %orfolgicas 'onsiste en determinar forma, tamaBo y color del microorganismo, en s es la estructura e3terna. Para poder identificarlos se utilizan equipos como el microscopio. Por ser organismos unicelulares y su medida es en micras 7U8. 21
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lgunas bacterias particularmente tienen forma de bacilos 7bastones8, en ocasiones esos bacilos se unen en cadena, como en el caso del carbunco. ,as bacterias esfricas al unirse en dos forman el gonococo, al agruparse en mas de dos o tres se llaman estreptococos, la agrupacin en forma de racimos de uva se les llama estafilococos. ,as algas por lo general, particularmente son ovoides o esfricas, al agruparse forman cenobios que son laminosos, filamentosos o globulosos, son inmviles. ,os %ongos estn formados por un soma vegetativo. El soma del %ongo se denomina micelio, y las bifurcaciones individuales y filamentosas del micelio en su conOunto forman %ifas, estas contiene esporas, las %ifas tienen forma de bifurcaciones y filamentos, las esporas comMnmente son esfricas. ,os virus tiene formas y tamaBos distintos, son muy pequeBos, se miden por amstrong, por lo comMn son de forma de varilla rgida o filamentos, ondulados con dimensiones de "* a &<< miliamstrong 7como el mosaico del tabaco que es e mas pequeBo8. 2.!.2. /io.umicas En ocasiones no basta identificar a un microbio por su estructura e3terna, para asegurar su identificacin, se requiere de estudios mas profundos sobre toda su constitucin qumica y la forma de transformacin de alimento. E3isten tambin organismos parecidos unos a otros que a travs de las caractersticas metablicas se llegan a identificar. Por eOemplo, la %sc!eric!ia coli, organismo natural y comMn en nuestro intestino, es confundido con la )almonella yp!a causante de la fiebre tifoidea, para poder diferenciarlos e identificarlos se realiza en cada uno de ellos, medios de cultivos, y as ver sus reacciones metablicas de cada uno, que enzimas intervienen, cuales son los productos intermedios y en si la reaccin final de cada clula. 2.!.3. Antig*nicas El estudio de la composicin antignica de los microorganismos nos revela un aspecto especial de la composicin qumica. ,a caracterizacin antignica supone la inyeccin de microorganismos, o alguna parte del mismo, en un animal, con el fin de estudiar el suero sanguneo de ese animal en busca de anticuerpos. ,as reacciones antgeno T anticuerpo son muy especficas. ,os microorganismos poseen muy deficientes clases de antgenos que por lo comMn se detectan con precisin e3traordinaria.

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Unidad ,. N %-n"$at!ra. ta/ n %(a 0 "ara"t-r(+ti"a+ d- $ + %i"r r'ani+% +

3.1. 0irus 3.1.1. (ropiedades generales /on organismos de grupo muy grandes %eterogneo. 7diversos, o sea no tienen una caracterstica igual para todos8. /on agentes infecciosos, son parsitos de las clulas y viven intracelularmente. /on muy pequeBos, se permiten atravesar todo tipo de poros, %asta los de porcelana. /e propagan en el interior de la clulas, producen una gran variedad de enfermedades en plantas y animalesH en animales y %ombres producen enfermedades como, gripe, sida, evoca, poliomielitis, %idrofobias y varios tipos de tumores, en plantas producen enfermedades como el enanismo, mosaico 7la %oOa tiende a ser dura

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con varios colores, brillo8, enrizamiento, manc%as anulares foliares 7tienen en las %oOas formas de anillo8, tristeza. ,a cantidad de virus que se conocen en la actualidad sobrepasan el milln y se podra decir que cada mes se descubren ms. ,os virus producen enfermedades en las clulas alterando su metabolismo produciendo sustancias anormales, que va a influir en las funciones y vidas de las clulas. 3.1.2. Criterios de clasificacin ,a mayora de los nombres de los virus derivan de las caractersticas clnicas, patolgicas y epidemiolgicas asociadas con las infecciones virales. 'omo eOemplos podemos citar el &irus de la dermatitis postular contagiosa que pertenece al grupo de los po3virus, y el &irus de la degeneracin &ascular del fri+ol grueso" lgunos virus %an sido nombrados de acuerdo con la localidad geogrfica donde fueron aislados por primera vez! el virus de /endai. 9tros virus llevan el nombre de sus descubridores! virus de EpsteinA0arr. lgunos virus son conocidos solamente en la versin abreviada de su nombre originalH as, reovirus corresponde a respiratory enteric orp!an &irus, y arbovirus corresponde a art!ropod-borne &irus" El mtodo ms e3tendido y aceptado para clasificar los virus agrupa a estos agentes de acuerdo con el tipo de %ospedero que infectan! bacterias, %ongos, plantas, invertebrados 7particularmente insectos8, animales, %umanos. ,os virus pueden ser subdivididos de acuerdo con un particular nivel de inters sobre los mismos. En aBos recientes el uso de un sistema ta3onmico racional basado en principios de estructura y formacin molecular %a sido promovido por el 'omit +nternacional de .a3onoma de los 1irusH la figura P1" es un esquema simplificado de este tipo de clasificacin. 'onsiderando lo anterior, podemos citar algunas de las mMltiples definiciones de virus producidas a lo largo del tiempo. Por eOemplo, ndr ,Coff propuso en ":*> que un virus es! Luna entidad estrictamente intracelular y potencialmente patgena que se caracteriza por tener una fase infecciosa, poseer solamente un tipo de cido nucleico, multiplicarse en la misma forma que su material gentico, incapaz de crecer o dividirse en forma binaria, carente de un sistema productor de energa metablicaL. $e acuerdo con esta definicin, el virus es fundamentalmente de naturaleza no celular y es dependiente por completo del metabolismo de la clula %ospedera, adems de que en cierto estadio del ciclo replicativo el material viral se reduce e3clusivamente al cido nucleico.

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9tra definicin muy conocida es la propuesta por /alvatore ,una en ":*:! Llos virus son elementos de material gentico que pueden determinar en las clulas donde se reproducen la biosntesis de un sistema que constituye un aparato especfico para permitir la propia transferencia del virus %acia otras clulasL.

,os virus se %an venido clasificando atendiendo al tipo de cido nucleico que contienen, a las caractersticas de la envoltura del virin, cuando e3iste, a la posicin ta3onmica de sus %uspedes, a la patologa que producen, etc. $ada su falta de autonoma para el desarrollo y su probable carcter polifiltico, es muy difcil aplicarles de forma consistente los criterios de clasificacin y nomenclatura que sirven tan bien para la clasificacin de los organismos celulares, o verdaderos organismos. 'ombinando caracteres como los enumerados, y por ese orden de importancia, se %an reconocido unos &< grupos de virus internamente bien definidos. En este artculo consideraremos tres grupos segMn el tipo de clulas que infecten, y en cada grupo se citarn los eOemplos ms destacados y sus otras caractersticas definitorias. 1irus del 2ilo oeste! produce enfermedades en aves y mamferos, incluidos %umanos. /e transmite a travs de los mosquitos. El primer virus descrito fue el de la fiebre aftosa 7,oeffler y 6rosc%, finales del siglo P+P8. ,a mayora de ellos tienen envoltura lipoproteica! Entre los virus con )2 monocatenario se pueden citar los de la rabia, el sarampin, la gripe y la rubola. ,os retrovirus contienen )2 monocatenario y la enzima transcriptasa inversa. l infectar la clula, transcriben el )2 en una molcula de $2 bicatenario que se une al $2 celular. Pertenecen a este grupo el virus del /+$ y algunos virus oncognicos.

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Entre los virus con $2 bicatenario se puede citar el grupo de los %erpesvridos como los del %erpes, y de la %epatitis. 5ay tambin virus de clulas animales icosadricos sin envoltura lipoproteica! El virus de la polio %umana tiene )2 monocatenario. ,a mayor parte de los reovirus 7con )2 bicatenario8 infectan clulas animales. ,os virus que contienen $2 bicatenario suelen ser poco virulentos, como los adenovirus 7de los resfriados8 y los virus de las verrugas 7papovirus8. Vir!+ 2!- in3-"tan &a"t-ria+ 6ueron descubiertos independientemente en ":"* y ":"> por 6redericE .Cort, bacterilogo britnico y 6eli3 $V5erelle en 'anad. ,a mayora son virus compleOos y contienen $2 bicatenarioH pertenecen al grupo de los myovridos. 5ay tambin bacterifagos que no responden al tipo comMn, como los corticovridos, icosadricos, o los levivridos, con )2 monocatenario, o los bacterifagos con envoltura lipoproteica. Vir!+ 2!- in3-"tan "*$!$a+ E-'-ta$-+ /on los primeros que se descubrieron 7virus del mosaico del tabaco, +vanovsEi, ";:#8. ,a mayor parte de ellos contienen )2 monocatenario y cpsida %elicoidal, y carecen de envoltura lipoproteica. El virus del mosaico del tabaco es un eOemplo. lgunos reovirus 7virus con )2 bicatenario, icosadricos y sin envoltura lipoproteica8 producen tumores en las %eridas de las plantas. En este grupo %ay tambin virus con $2 y cpsida icosadrica, como el del estriado del maz o el del mosaico de la coliflor. C$a+i3i"a"i n-+ a$t-rnatiEa+ El esfuerzo por alcanzar una necesaria clasificacin natural, %a producido distintos resultados, de los que consideramos aqu dos, la clasificacin de 0altimore y la del +nternational 'ommittee for .a3onomy of 1iruses 7+'.18.

C$a+i3i"a"i#n d- Ba$ti% r,a clasificacin de 0altimore distribuye los virus en siete grupos fundamentales basados en la base qumica del genoma! =rupo +! 1irus $2 bicatenario 7doble cadena8.

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,os virus de $2 de dos cadenas entran en la clula 7independientemente del mecanismo de infeccin8 y las )2 polimerasas no distinguen el genoma celular del genoma vrico, forman )2m, que se traduce en los ribosomas y da lugar a las protenas de la cpsida, y a veces a enzimas replicativos. /on los virus ms simples. EOemplo! los fagos de la serie . par, fueron los primeros que se descubrieron. =rupo ++! 1irus $2 monocatenario 7de carcter positivo8.

/u material gentico es $2 de una cadena. Da que es de polaridad positiva, necesita una cadena negativa para poder transcribirH as, al entrar a la clula la $2 polimerasa 7enzima de reparacin o alargamiento8 %ace un $2 bicatenario que sirve para sintetizar 7a partir de la %ebra negativa8 un )2m que lleva la informacin necesaria para fabricar capsmeros y enzimas replicativos. =rupo +++! 1irus )2 bicatenario.

/on virus de )2 bicatenario. ,levan como parte del virin una transcriptasa viral que es una )2 polimerasa )2 dependiente que utiliza para, a partir de la %ebra negativa del )2 bicatenario, fabricar el )2m. dems de ser una enzima es una protena estructural, ya que forma parte de la cpsida, por ello slo se replica si a la clula entra la cpsida Ounto al genoma vrico. =rupo +1! 1irus )2 monocatenario positivo.

/on virus de )2 monocatenario cuyo genoma tiene naturaleza de )2m. /on virus simples. =rupo 1! 1irus )2 monocatenario negativo.

/on virus de )2 monocatenario con polaridad de antimensaOero. Poseen una )2 polimerasa dependiente de )2 de una cadena. s, dentro de la clula infectada forman el )2 complementario a su genoma y que actMa de )2m. =rupo 1+! 1irus )2 monocatenario retrotranscrito.

/on virus de )2 cuyo genoma podra actuar como mensaOero pero Jin vivoK no lo %ace. Poseen una transcriptasa inversa que de un genoma )2 transcribe una molcula de $2, primero de una cadena y luego de dos. Posteriormente y usando los enzimas celulares se elabora un mensaOero. Estos virus son capaces de alcanzar el nMcleo de las clulas, se insertan a los cromosomas de las clulas que infectan, son los retrovirus =rupo 1++! 1irus $2 bicatenario retrotranscrito.

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Es el grupo ms recientemente descubierto y descrito. .iene un genoma de $2 bicateario, que se e3presa formando un mensaOero, que se traduce como el grupo +. 2o obstante, en el momento de la encapsidacin, es el mensaOero el que se encapsida. Wste, por retrotranscripcin a partir de una .ranscriptasa inversa, en el interior del virin, forma de nuevo una molcula de $2, primero mono y despus dicatenaria, que se convierte en el genoma del virus. /on eOemplos claros de estas rarezas, las familias 5erpesviridae y 'aulimoviridae. C$a+i3i"a"i#n d-$ ICTV El +'.1 7+nternational 'ommittee on .a3onomy of 1iruses8 intenta conseguir una clasificacin universal que pueda funcionar como el necesario estndar de clasificacin de los virus, regulando la descripcin formal de las nuevas cepas y ordenando su ubicacin dentro del esquema clasificatorio. +ntenta que las reglas de nomenclatura y clasificacin se asemeOen lo ms posible al estndar tradicional de la clasificacin de los organismos utilizando algunas de sus categoras, sufiOos que indican el rango ta3onmico y aplicando cursiva a los nombres de los ta3ones! 9rden 7Avirales8 6amilia 7Aviridae8 /ubfamilia 7Avirinae8 =nero 7Avirus8 Especie 7Avirus8 ,os nombres de los ta3ones de categora superior se escriben en cursiva, como en el 'digo +nternacional de 2omenclatura 0otnica 7pero no en el Xoolgico8. ,os nombres de especie siguen una regla sistemtica, nombrndose en la lengua verncula con el nombre de la enfermedad y la palabra que significa virus. Por eOemplo, virus de la inmunodeficiencia %umana. El reconocimiento de rdenes se %a producido tardamente y se usan con parsimonia, %abindose designado %asta a%ora slo tres, de manera que la mayora de las ;< familias todava no %an sido adscritas a ninguno. ,a lista de +'.1 contiene unas (.<<< especies. 3.1.3. 1omenclatura - ta'onoma ,a sptima comunicacin del International .ommittee on a/onomy of Viruses 7+'.18 describe estos organismos como biosistemas elementales que poseen algunas de las propiedades de los seres vivos 7genoma8 y que se adaptan a las condiciones del ambiente. ,os virus pertenecen a la biologa porque tienen genes, se replican, evolucionan y se adaptan a los %uspedes y distintos nic%os ecolgicos.

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1irus es un trmino general que denota varias propiedades relacionadas 7%usped, vector, capacidad infecciosa8. Estas caractersticas Apropiedades emergentesA son tpicas del biosistema viral en conOunto y no estn presentes en los elementos constitutivos individuales. 'uando un virus inicia el ciclo de vida adopta diversas formas y estadios, por eOemplo como cido nucleico en replicacin en la clula %usped o en el vector. Un estadio en este ciclo es la partcula viral o virin que se caracteriza por propiedades intrnsecas como tamaBo, masa, composicin qumica, secuencia de nuclotidos en el genoma y secuencia de aminocidos en las subunidades proteicas. ,os viriones pueden ser completamente descritos segMn sus propiedades fsicas y qumicas intrnsecas, pero la definicin no se vincula con las propiedades que pertenecen al virus. N %-n"$at!ra &inaria 4r 4!-+ta 4ara -+4-"i-+ d- Eir!+. A&r-Eiat!ra+ d- $ + n %&r-+ d- Eir!+ $urante aBos los grupos que estudian virus de plantas utilizaron un sistema de dos nombres no oficial para referirse a la especie viral. /egMn este sistema, la palabra virus que aparece en cursiva al final del nombre oficial de la especie se reemplaza por el nombre de gnero que tambin finaliza en virus. $e esta forma Bluetongue &irus se transforma en Bluetongue orbi&irus y Measles &irus en Measles morbilli&irus. ,a ventaOa de este modelo de denominacin es que la inclusin de un nombre de gnero en el nombre de la especie indica la relacin e3istente con otros virus y, por lo tanto, brinda informacin adicional acerca de las propiedades de los miembros de las especies. $ebido a que este modelo parece ser preferido por una amplia mayora de virlogos, el +'.1 decidir si deben introducirse los nombres binarios de especies de virus 3.1.4. 2structura E/t-rna= ,os virus tienen una variedad de forma y tamaBo, pero por lo general son en forma de varilla rgida, filamentos ondulados, esfricas o de bacilos. En el saso de varilla rgida la tiene el parasito de mosaico de tabaco y llegan a medir de "* 3 &<< nm 7nanmetro8 %asta los #<< nm. ,as de formas de bacilos, casos del enanismo amarillo de la papas, llegan a medir de >* 3 &*< nm. ,os esfricos, caso de necrosis del tabaco, llegan a tener un dimetro de >* nm, algunos tumores de %eridas, tienen %asta 4< nm de dimetro. Int-rna= 29
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Un virus por lo menos debe tener en su constitucin qumica en acido nucleico, que le da su capacidad infectante y tiene protena que le da especifidad. El acido nucleico lo tiene en proporcin de * a (< N en su constitucin corporal y de protenas de :* a 4<N. El acido nucleico est cubierta por una membrana ' P/+$ , constituidos por subunidades de protenas llamadas ' P/9-E)9/. ,a partcula viral de un virus se llama virion y las partes completas del virus o unidades completas se llama viriones, los viriones tienen lpidos y lipoprotenas. ,os cidos nucleico y protenas tienen residuos de carbo%idratos, lpidos, metales, algunos contiene vitaminas. ,os virus se diferencian por su contenido de $2 o )2 . Un virion contiene ( posibles asidos nucleicos, se %a visto que los virus de las plantas, contienen solo )2 de una o doble cadena. ,os virus en animales contienen en todos los tipos de acido nucleico e3cepto $2 de doble cadena. dems de la estructura de cada nucleico, en la partcula viral es lineal o particular.

E+tr!"t!ra d- !n Eir!+

3.1.!. Reproduccin

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,os virus no son clulas, no constan de ellas, son parsitos de clulas y producen una infinidad de enfermedades en seres vivientes. ,os virus no se dividen ni producen una estructura reproductora especializada, pero si inducen a las clulas %ospederas a producir ms virus ,os virus se producen dentro de las clulas animal y vegetal, as como de otros seresH no tienen capacidad de metabolismo, tampoco movilidad dependiente. /e reproducen por replicacin, en donde sus dos partes constitutivas los cidos nucleicos y protenas se incrementan dentro de las clulas %usped, cuando la clula se infecta con el acido nucleico, se sintetiza partculas virales completas. E3isten varios tipos de virus en la naturaleza, con estructuras compleOas diferentes, y que utilizan varios lugares para la reproduccin, algunos lo realizan en el citoplasma, otros en el nMcleo, por lo tanto %ay diferentes lugares para la replicacin de virus. R-4r d!""i#n d- !n Eir!+

3.1.3. "mportancia ,os virus %an representado %istricamente un problema muy grave para la salud de los %umanos. $espus del reconocimiento de estos agentes como causantes de enfermedad, la virologa %a evolucionado muy rpido, incluso los virus fueron de los primeros modelos para el estudio del funcionamiento del genoma, conocimiento indispensable %oy en da para el trabaOo de investigacin en ciencias biolgicas. En general, la palabra virus inmediatamente refiere a enfermedad, y no es para menos! en ":"; una pandemia de gripe 7influenza8 ocasion la muerte de ms de &< millones de personas alrededor del mundo, posteriormente este virus %a ocasionado epidemias de menor intensidad pero igualmente temidas. Entre ":*> y ":;4 se estima

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que, slo en Estados Unidos, los virus de la influenza ocasionaron ms de "< <<< muertes. ,a fama de los virus es merecida en el caso del /+$ por eOemplo, actualmente una de las causas ms importantes de mortalidad en el mundo, o bien, en el caso de la viruela, que en el pasado provoc miles de muertes. ,os casos ms recientes de enfermedades altamente contagiosas son los %emorrgicos y letales filovirus 7-arburg y Wbola8 y, por supuesto, el sndrome respiratorio agudo severo 7/ )/, por sus siglas en ingls8. En el Mltimo cuarto del siglo PP, los virus cobraron una importancia mdica inusitada por la aparicin de enfermedades %asta entonces desconocidas como las anteriormente mencionadas, as como el resurgimiento con mayor virulencia de enfermedades ya conocidas, como el sarampin, el dengue o la influenza. En "::: %ubo una gran epidemia en Europa ocasionada por el virus de la influenza que ocasion la %ospitalizacin de miles de personas y la muerte de varias decenas de ellasH dos aBos antes, en 5ong Qong se tuvieron que sacrificar casi diez millones de pollos por una epidemia de influenza aviar que ya amenazaba con e3pandirse a regiones vecinas. $urante esta Mltima tambin se registraron muertes entre personas que tuvieron contacto con los animales infectados. En los Mltimos aBos se detectaron algunos virus nuevos, como el de 5endra y el de 2ipa% 7ambos en -alasia, "::;8, los cuales inicialmente ocasionaron problemas en ganado equino y porcino respectivamente. /in embargo, personas que tuvieron contacto con los animales enfermos tambin fueron infectados, algunas de ellas incluso murieron. Estos casos %acen destacar la importancia del estudio de los virus que infectan animales, no slo por cuestiones ecolgicas o comerciales, sino tambin por su influencia sobre la salud %umana. La tra "ara d- $ + Eir!+

El surgimiento y resurgimiento de los virus se deben en parte a su relativo baOo nivel de compleOidad, por lo que pequeBos cambios en su informacin gentica ocasionan grandes cambios en su estructura y funcionamiento general, lo cual permite evadir la respuesta inmunolgica de los organismos, variar sus comportamientos dentro de las clulas %ospederas y perder su sensibilidad a tratamientos comunes para esas enfermedades. Un caso tpico son los virus de la inmunodeficiencia %umana 7causantes de /+$ 8 cuyos tratamientos son generalmente limitados porque los virus que infectan al paciente son sustancialmente diferentes de los que evolucionan en su organismo en un determinado intervalo de tiempo. Esta variabilidad de los virus, sin embargo, aparte de causarnos los problemas mencionados, se convierte en una %erramienta muy Mtil en 32
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el estudio de la evolucin de los organismos en el nivel molecular. El estudio de la variabilidad de los virus %a producido conocimientos en el mbito de la evolucin, lo cual puede ser aplicado %asta cierto punto y en diferentes formas a la generalidad de la biologa. ctualmente se considera a los virus no slo como causantes de enfermedades sino tambin como agentes muy importantes que colaboran en el mantenimiento del equilibrio ecolgico. ,os virus, adems de producir la disminucin de poblaciones animales o vegetales en un determinado %bitat, sirven como mediadores en el intercambio gentico entre individuos de una misma o de diferentes especies, cooperando en la variabilidad de los organismos que son susceptibles de ser infectados. Este fenmeno %a sido bastante estudiado en las bacterias que pueden ser infectadas por los virus denominados bacterifagos 7o simplemente fagos8 y de esta manera poder intercambiar informacin entre unas cepas bacterianas y otras, los fagos pueden contener informacin Mtil para que la clula bacteriana realice ciertas funciones que en otras condiciones no podra realizar. En los animales, de modo anlogo, los retrovirus y los adenovirus, entre otros, pueden introducir informacin nueva a la clula infectada y posteriormente llevarse informacin a una clula diferente logrando as una comunicacin gentica entre diferentes poblaciones celulares o individuos. $e esta manera, algunas especies de virus revisten %oy una importancia clave en la medicina porque pueden servir como ve%culo para introducir informacin a clulas con algMn defecto gentico o adquirido que les permita alcanzar un funcionamiento normal. Esta rea de la biomedicina es actualmente una de las ms apoyadas ya que representa una esperanza en la cura de enfermedades genticas como la fibrosis qustica y el cncer. Es imposible deOar de ver a los virus como peligrosos agentes causales de enfermedad, pero a esto %ay que agregar, por una lado, que tambin contribuyen al mantenimiento del equilibrio ecolgico y, por otro, que en pocos aBos pueden ser de gran utilidad en el tratamiento de muc%os problemas que aqueOan a los %umanos, incluyendo las enfermedades causadas por los virus mismos. 3.2. /acterias 3.2.1. (ropiedades generales ,as bacterias son organismos microscpicos, se conocen apro3imadamente "4<< especies. ,a mayora son organismos estrictamente saprofitos, no causan daBo al %ombre, animales y plantas. 33
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.ambin e3isten bacterias parsitos nocivas que producen enfermedades, en el %ombre! ttano, clera, gonorrea, tuberculosis, neumona, fiebre tifoideaH en los animales! el carbunco, ntra3 y brucelosisH en las plantas se producen enfermedades en los gneros! agrobacterium, erCinia 7producen el tizn del fuego8, seudomonas, 3ant%omonas y la streptomyces. ,as bacterias de acuerdo a su constitucin, algunos organismos son procariticos y eucaritico. En ocasiones se Ountan para formar colonias. .iene variadas formas! Y En dos bateras se llaman diptococos Y 'undo son ( se llaman tetrmeras Y $e tres a ms se llaman estreptococo En forma de racimos de uvas estafilococos y cuando se forman en un plano ovoide se llama sarcinas. 3.2.2. Criterios de clasificacin ,a identificacin de las bacterias es tanto ms precisa cuanto mayor es el nMmero de criterios utilizados. Esta identificacin se realiza a base de modelos, agrupados en familias y especies en la clasificacin bacteriolgica. ,as bacterias se reMnen en "" rdenes. ,as eubacteriales, esfricas o bacilares, que comprenden casi todas las bacterias patgenas y las formas fottrofas. ,as pseudomonadales, orden dividido en "< familias entre las que cabe citar las Pseudomonae y las )pirillacae" ,as ,as ,as ,as ,as ,as ,as ,as ,as espiroquetales 7treponemas, leptospiras8 actinomicetales 7micobacterias, actinomicetes8. ricEettsiales micoplasmales clamidobacteriales %ifomicrobiales beggiatoales cariofanales mi3obacteriales

R-$a"i n-+ -ntr- $a &a"t-ria 0 +! 7!*+4-d 'iertas bacterias viven independientes e otros seres vivos. 9tras son parsitas. Pueden vivir en simbiosis con su %usped ayudndose mutuamente o como comensales 7sin beneficio8. Pueden ser patgenas, es decir, vivir de su %usped. ,a virulencia es la aptitud de un microorganismo para multiplicarse en los teOidos de su %usped 7creando en ellos alteraciones8. Esta virulencia puede estar atenuada 7base del principio de la vacunacin8 34
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o e3altada 7paso de un suOeto a otro8. ,a virulencia puede ser fiOada por liofilizacin. Parece ser funcin del %usped 7terreno8 y del entorno 7condiciones climticas8. ,a puerta de entrada de la infeccin tiene igualmente un papel considerable en la virulencia del germen. El poder patgeno es la capacidad de un germen de implantarse en un %usped y de crear en l trastornos. Est ligada a dos causas! (a produccin de lesiones en los te+idos mediante constituyentes de la bacteria, como pueden ser enzimas que ella e3creta y que atacan teOidos vecinos o productos t3icos provenientes del metabolismo bacteriano (a produccin de to/inas" /e puede tratar de to3inas proteicas 7e3oto3inas e3cretadas por la bacteria, transportadas a travs de la sangre y que actMan a distancia sobre rganos sensibles8 o de to3inas glucoproteicas 7endoto3inas8, estas Mltimas actuando Mnicamente en el momento de la destruccin de la bacteria y pudiendo ser responsables de c%oques infecciosos en el curso de septicemias provocadas por grmenes gramnegati&os en el momento en que la to3ina es brutalmente liberada estas agresiones microbianas, el organismo opone reacciones defensivas ligadas a procesos de inmunidad, mientras que el conflicto %uspedAbacteria se traduce por manifestaciones clnicas y biolgicas de la enfermedad infecciosa 3.2.3. 1omenclatura - ta'onoma ,os procariotas son las clulas vivas ms sencillas. ,as procariotas constituyen el reino -onera. los miembros reino -onera se les llama moneras. ,as moneras estn divididas en grupos principales! las bacterias azulAverdoso 7llamadas antes algas! verdosas8 y las dems bacterias. ,as moneras e3isten como clulas individuales o como colonias. ,a colonia es un grupo de clulas parecidas que estn pegadas unas a otra. ,as bacterias incluyen muc%as formas diferentes, la mayora de las cuales son %etertrofas. ,as bacterias son las moneras ms numerosas, ellas pertenecen al flum /c%izomycetes /c%izo 7significa LpartidoL8 porque se refiere al proceso de divisin sencilla mediante el cual se multiplican. El sufiOo mycete quiere decir L%ongoL, un trmino que viene de cuando las bacterias y los %ongos pertenecan al mismo grupo. 'asi siempre, la gente piensa en las bacterias como JgrmenesK que producen enfermedades. Esta creencia no es totalmente correcta. ,as ms de "*<< especies de bacterias, slo unas #*< causan enfermedades. ,as actividades de la mayora de las bacterias son Mtiles y necesarias, la

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gente %a utilizado muc%as bacterias en la produccin de alimentos y medicinas. 3.2.4. 2structura ,as bacterias pueden tener forma de vacilo, filamentosas, esteritas en forma de camas, elipsoidales, espirales. ,os bacilos en su etapa Ooven son cilndricos y pueden llegar a medir. <.4 a &.* milimicra de longitud, y un dimetro de <.* a ".< milimicra. ,as bacterias en cultivos vieOos, los filamentos son ms grandes. ,as bacterias estn cubiertas por un material viscoso y gomoso llamada capa mucilaginosa 7forma de baba8H o puede tambin estar cubierta por una capa dura llamada cpsula. lgunas bacterias poseen un solo flagelo, y otros, dos o %asta un ramillete. El color de las bacterias pueden ser blanquizcos, blancos amarillentos, 7cuando estn en grupos8 o translucidos. ,as bacterias al formar colonias, estas presentan caractersticas morfolgicas diferentes, varan en forma, tamaBo, color, elevacin, en bordes. Forma! Pueden ser circulares, ovoides e irregulares. ama0o. 1aran desde milmetro %asta centmetros. .olor# 0lanquizco, amarillento, negrusco y grisceo. %le&acin! 1aran segMn su posicin 0ordes= Pueden ser rugosos, lisos, angulares, globulares. ,a clula bacteriana puede estar constituida por un capa mucilaginosas capsula, flagelos, pared o membrana celular citoplasma. Posen tambin encimas digestivas para nutricin y secrecin o e3crecin. ,as bacterias parasitas de plantas posen cloroplasto .odas las bacterias poseen o estn constituidas por productos orgnicosH carbo%idratos lpidos, protenas, encimas, vitaminas, cidos nucleicos. 'ontienen tambin sales minerales y sobre todo muc%a agua

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E+tr!"t!ra d- !na &a"t-ria 3.2.!. Reproduccin ,as bacterias, realizan la reproduccin ase3ual conocida como fusin binaria. Esta se realiza, por la invasin de la membrana citoplsmica %acia el centro de las clulas, formando un tabique membranoso transversal que divide a la bacteria en dos partes. $urante este proceso, se sintetizan o secretan dos capas de material de la pared celular, entre las dos capas de la membrana. 'uando se concluye la formacin de las paredes celulares, las dos capas se separan dando como resultado a dos clulas %iOas. -ientras la pared celular y el citoplasma estn sufriendo fisin el material se organiza formando cromosomas, las cuales se autoduplican distribuyndose en partes iguales en las dos clulas formadas. ,as bacterias se reproducen a una velocidad muy rpida en condiciones favorables, las bacterias pueden dividirse cada #< minutos, de aqu se duplica en (, ;, "4 etc. esta velocidad, una sola bacteria puede reproducir un milln de bacterias en "< %oras. Pero debido a la reduccin de alimentos, espacio, a las condiciones desfavorables, la reproduccin tiende a disminuir o %asta cesar. Pero en si, las bacterias alcanzan cantidades numerosas en corto tiempo, y efectMan cambios qumicos en el medio que lo rodea. Estos cambios permiten alterar a la naturaleza, produciendo enfermedades, realizando descomposiciones de alimentos, en las industrias, realizan la fermentacin y pudricin de desperdicios orgnicos.

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R-4r d!""i#n d- !na &a"t-ria 3.2.3. "mportancia E3isten bacterias en todos los sitios. 5emos visto el inters de su estudio para la comprensin de la fisiolgica celular, de la sntesis de protenas y de la gentica. unque las bacterias patgenas parecen ser las ms preocupantes, su importancia en la naturaleza es ciertamente menor. El papel de las bacterias no patgenas es fundamental. +ntervienen en el ciclo del nitrgeno y del carbono, as como en los metabolismos del azufre, del fsforo y del %ierro. ,as bacterias de los suelos y del las aguas son indispensables para el equilibrio biolgico Por Mltimo, las bacterias pueden ser utilizadas en las industrias alimenticias y qumicas! intervienen en la sntesis de vitaminas y de antibiticos ,as bacterias tienen, por lo tanto, un papel fundamental en los fenmenos de la vida, y todas las reas de la biologa %an podido ser meOor comprendidas gracias a su estudio 3.3. Algas 3.3.1. (ropiedades generales En la naturaleza se localizan miles de tipos de algas. bundan en lugares %Mmedos, aguas de ocanos, lagunas, lagos, ros. .ambin se localizan en troncos paredes, rocas, piedras, cortezas de rboles. ,as algas sobre viven en un medio donde %aya suficiente luz, %umedad y suficientes alimentos simples. ,as algas de vida acutica, viven en las partes de aguas profundas formando el plancton, que sirve de alimentos a algunos organismos 7peces8 incluyendo a las ballenas. lgunas especies se desarrollan en lugares elevados, sobre %ielo, sobre el pico de montaBas. /e desarrollan en aguas termales muy calidas que alcanzan %asta los :< Z', aunque su temperatura adecuada para estos lugares son de *< a *( Z' ,as algas estn adecuadas para la concentracin de sales de mares, se aOustan a la desecacin por periodos prolongados en tiempos crticos. En el %emisferio norte, se localizan algas en aguas a una profundidad no mayor de *< a 4< metros, pero en lugares tropicales o calidos, con aguas cristalinas, se localizan a una profundidad de %asta "*< metros. 38
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,as algas que crecen sobre troncos, rocas y cortezas de rboles, al degradarse se descomponen qumicamente y forma suelo frtil, es decir las algas son formadores de suelo orgnico. En algunos lugares como los balnearios, las algas crecen con e3ceso, que producen olores y sabores indeseables, no permiten la disolucin del o3igeno y tambin obstaculizan la fotosntesis de otras plantas que se localizan en las partes profundas del agua. lgunas algas son endofiticas, porque viven sobre protozoarios, sobre las %iedras, corales, esponOas. 3.3.2. Criterios de clasificacin ,as algas se pueden dividir en ; subdivisiones que son las siguientes! ". 'ianfitos A /e trata de organismos unicelulares carentes de un nMcleo verdadero y de plastidios, que se multiplican por divisin transversal. ,a mayora de estas especies vive en el agua aunque algunas de estas tienen la %abilidad de vivir en la tierra porque pueden fiOar el nitrgeno atmosfrico a ellas. #. Euglenfitos A /on algas de estructura muy sencilla cuya caracterstica mas distintiva es la presencia de una manc%a de pigmento fotosensible. Estas disponen de uno o de dos flagelos lo cual les permite cambiar su forma y estas se multiplican por divisin longitudinal. &. Pirrfitos A /on algas en su mayora unicelulares que tienen dos flagelos de longitud distinta. ,a clula se encuentra desnuda o va provista de una cubierta ms o menos dura. l igual que los Euglenfitos tienen un ocelo que Ounto con su forma de vida parasitaria o depredativa 7en algunos casos8 posibilita que en el pasado se les tomara como organismos animales. Esta especie tambin es marina e3cepto por algunas que son terrestres. aA Un eOemplo es! 2octuluca miliaris. (. 'risfitos A 'onocidos como algas amarillas, son organismos unicelulares o pluricelulares que se reMnen en colonias. /u principal caracterstica es la presencia de cromatoforos con pigmentos de color amarillo que les confiere un aspecto dorado. /on de morfologas variable con flagelos y sin ellos y en algunos casos se mueven por rizpodos. /iempre se reproducen por reproduccin vegetativa. *. 'lorfitas A ,as clorfitas o algas verdes son en su mayora de colores verdes, unicelulares o pluricelulares y de formas muy variables. ,a mayora de las especies microscpicas son propias de agua dulce, aunque %ay numerosos grupos marinos que alcanzan cierto tamaBo, como la conocida lec%uga de mar. /e multiplican por 39
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divisin celular, o se3ualmente, o por la fusin de dos gametos de tamaBos diferentes. Este grupo de algas se %alla muy e3tendido en la naturaleza, ya que algunas de estas le dan color a los estanques o cubren la cubierta de los rboles. Esta especie se mantiene en grupos como muc%as de las especies de la costa marina. 4. 'arfitos A /on algas muy compleOas cuya estructura se parece a veces a la de las fanergamas. $e color verde en su mayora, son frecuentes en las orillas de los ros y lagos y muy pocas especies estn en la vida marina. Estas se reproducen se3ualmente o por va vegetativa. >. 6efitos A /on algas que alcanzan mayor tamaBo 7%asta "<<m8. unque poseen clorofila los pigmentos marrones las esconden, por lo que presentan coloracin marrn o parda. Estas algas son tpicas del agua salada pero muy pocas de ellas viven en agua dulce. ;. )odfitas A estas algas se le conoce como alga roOa, comprenden especies tpicas de aguas marinas de grandes profundidades en zonas donde otras especies no pueden sobrevivir por la falta de la luz. /on de color roOo aunque poseen as mismo clorofila. /e reproducen se3ualmente y ase3ualmente y poseen complicados ciclos de alternancia de generaciones. 3.3.3. 1omenclatura - ta'onoma ,a diversidad de seres vivos estudiados por la 0otnica abarca desde las formas ms simples unicelulares %asta los vegetales con flores con estructuras morfolgicas ms elaboradas, conectados por formas intermedias, que evidencian la evolucin de la vida vegetal desde el medio acutico %asta la colonizacin del medio terrestre, no implicando este proceso la desaparicin de las formas ya establecidas, sino una mayor adaptacin a ocupar nuevos medios. ,a tendencia en esta evolucin %a sido el paso! P i2!i$ 7idria= usencia de regulacin del contenido %drico, dependencia directa del agua y desecacin del vegetal en ausencia de sta. < %- 7idria= )egulacin del contenido %drico y minimizacin los efectos de la desecacin. El mundo vegetal se separa en tres niveles morfolgicos de organizacin segMn el grado de compleOidad!

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P)9.[6+.9/ '9)-[6+.9/ . ,[6+.9/ Unicelulares o Pluricelulares, Pluricelulares, agregados, %omeo%idros, con poiquilo%idros, con poliquilo%idros, sin especializacin entre las especializacin entre especializacin entre clulas y aparicin de las clulas 7talo8 las clulas teOidos 7cormo8 Pr t#3it += +ncluyen los procariotas, muc%as algas, y algunos %ongos. /e puede alcanzar un elevado grado de especializacin en los orgnulos citoplasmticos. 0sicamente son unicelulares pero tambin aparecen agregados simples de clulas. .endencias evolutivas! A -ovilidad, por la presencia de flagelos se pasa de formas inmviles 7cocales8 a formas mviles 7monadales8 A Polaridad, por la distribucin de orgnulos citoplsmicos A umento de tamaBo ! )etencin de las clulas %iOas formando agregados irregulares o con forma definida ,os agregados de clulas pueden ser de tres tipos! 'enobios, todas las clulas descienden de una misma clula madre, puede aparecer un cierta especializacin del trabaOo de algunas clulas o incluso una polaridad, pero la duracin de estas agrupaciones es s"lo de una generaci"n 'olonias, todas las clulas descienden de una misma clula madre, tambin puede %aber cierta especializacin y polaridad, pero la agrupacin es ms permanente y se suceden las generaciones. 'onsorcios de agregacin, %ay una reunin de clulas que al principio estaban separadas y eran independientes, en general en un nMmero determinado Ta$#3it + +ncluye a la mayor parte de las algas, los %ongos, y los lquenes. /on vegetales que presentan talo, esto es, un cuerpo vegetativo pluricelular sin vascularizacin 7%aces vasculares8. .odas las clulas proceden de una clula madre y quedan unidas por e3istencia de una pared celular, celulosa o quitina.

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En general aparece una cierta especializacin en funciones vegetativas y funciones reproductivas. ,os talos e3perimentan crecimiento, reproduccin y muerte, el mantenimiento se consigue a travs de las clulas reproductoras. En los talfitos ms compleOos pueden aparecer estructuras similares 7anlogos8 a las del cormo 7raz, tallo y %oOas8, pero estructuralmente diferentes 7rizoides, cauloides y filoides8, resultado de fenmenos de convergencia evolutiva. El desarrollo del talo a partir de la clula inicial puede ser bsicamente de dos tipos! 5aplstico, divisiones slo transversales, se origina un filamento de una fila de clulas. Polstico, divisiones transversales y longitudinales, se origina un filamento de varias filas de clulas. Una mayor compleOidad en el talo se consigue por! )amificaciones, apicales o laterales. 'recimiento %etertrico, diferenciacin en el talo de filamentos erectos y postrados. Paso de eOes simples o unia3iles a eOes multia3iales formando por varias filamentos. En el caso de que no se diferencien clulas en el talo tenemos talos sifonales o cenocticos 7plurinucleados8, y si aparecen grandes compartimentos plurinucleados se denomina sifonocladal. En los talos ms avanzados el crecimiento no se origina por la actividad de una Mnica clula sino por un grupo de clulas especializado en el crecimiento, los meristemos, y se pueden llegar a forma teOidos medulares en el centro del talo y teOidos corticales en la periferia. En los %ongos el talo est formado por filamentos o %ifas, el micelio, que pueden aparecer entrelazados de forma postgnita formado plectnquimas o falsos teOidos miceliares. Bri#3it + +ncluye los musgos y las %epticas. 9cupan una situacin intermedia entre talfitos y cormfitos. /u dependencia del agua es manifiesta, aunque no mueren si se desecan, ya que presentan una organizacin simple.

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bsorben agua directamente por todo el cuerpo vegetativo. El crecimiento se debe a una sola clula apical que puede originar ramificaciones.

En las %epticas puede aparecer una diferenciacin en parnquima aerfero 7cloroflico8 y parnquima de asimilacin, incluso puede aparecer un cutcula simple y unos poros para permitir la difusin de los gases, pero sin regulacin alguna como en los estomas. En los ms desarrollados aparecen estructuras parecidas 7anlogas8 a races, tallos y %oOas, pero muy simplificados, los tallitos 7caulidios8 ms avanzados pueden presentar una diferenciacin simple en teOidos conductores centrales y parenquimticos perifricos. C r%#3it + +ncluye las plantas vasculares, %elec%os y plantas con semillas o espermatofitos. El aparato vegetativo o cormo esta formado por raz, tallo y %oOas, originados por meristemas. /on vegetales adaptados a la vida terrestre fuera del agua y presentan mecanismos para conservar y regular el agua de sus teOidos! )az para absorber el agua y los nutrientes. .allo vascularizado para conducir el agua y con teOidos de sostn. 5oOas con una epidermis con cutcula y estomas. 3.3.4. 2structura ,as algas tienen variadas formas! esfricas vacilares, filamentosas o puntiagudas. /on unicelulares, algunas son multicelulares por que se forman en conglomeraciones o colonias de varias formas! filamentosas, ramificadas, membranosas. lgunas colonias se dividen, formando grapas de colonias idnticas. Estos grupos de algas o colonias, llegan a asemeOarse a plantas superiores. ,as algas contienen clulas eucariticas y otros procariticas, las que pertenecen a las procariticas se asemeOan a las bacterias por su aspecto individual y su agrupacin. lgunas algas y bacterias poseen pared celular rgida impregnada de slice. 9tras tienen envolturas celular fle3ible y gelatinoso. 'on las algas eucariticas a e3cepcin de las verdiazuladas tienen incrustaciones de nMcleo, vacuola, cloroplasto, e incrustaciones de productos orgnicos. 43
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E+tr!"t!ra+ d- $a+ a$'a+ 3.3.!. Reproduccin En las algas e3isten dos tipos de reproduccin. Una de estas es la vegetativa y la otra es reproduccin se3ual. En la reproduccin vegetativa ocurre por una simple divisin de la clula en dos partes o bien por fragmentacin.

R-4r d!""i#n +-/!a$ 3.3.3. "mportancia #as algas tienen un alto contenido de carbohidratos$ protenas$ %itaminas & especialmente minerales 'hasta 30( por %olumen) *omparadas con l+cteos$ las algas pro%een hasta 10( m+s calcio & hierro & tambi,n contienen otras importantes tra-as de minerales .n las ci%ili-aciones orientales tradicionalmente se ha reconocido la

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importancia de este alimento para fortalecer la sangre$ el cora-"n & el sistema circulatorio .studios cientficos recientes han descubierto tambi,n /ue las algas tienen efectos antibacteriales$ anti%irales & anticancerosos 0e ha descubierto tambi,n /ue el 1ombu$ 2a1ame$ nori$ hi-i1i & otras algas comunes reducen los ni%eles de colesterol en la sangre$ pre%ienen el desarrollo de la hipertensi"n & arteriosclerosis & me3oran el metabolismo de grasas 0e ha descubierto adem+s /ue di%ersas %ariedades de algas contienen anticoagulantes sanguneos similares a la heparina$ el anticoagulante natural de la sangre /ue a menudo se da en forma intra%enosa a los pacientes cardacos para pre%enir co+gulos .n el 4ap"n se ha demostrado /ue en las regiones donde los habitantes consumen ma&or cantidad de algas la incidencia de longe%idad es m+s ele%ada .n la agricultura$ se ha comprobado su importancia como fuente de sustratos$ abonos org+nicos$ fertili-antes foliares$ etc 0on un grupo de tal di%ersidad$ /ue en un sentido amplio se les considera ba3o esta denominaci"n global$ carente de %alor sistem+tico & /ue re5ne di%ersas di%isiones .stas recogen en la actualidad los di%ersos tipos de algas desde las microsc"picas hasta las /ue pueden medir m+s de un pie #as algas se definen como talofitas$ es decir plantas cu&o cuerpo %egetati%o no esta di%idido en tallo & ra-$ sino /ue su 5nica unidad es el talo 0e diferencian de otros tipos de plantas por tener una menor comple3idad comparati%amente$ & por poder lle%ar a cabo funciones cloroflica 3.4. (roto$oarios 3.4.1. (ropiedades generales ,os protozoarios, son protistas eucariticasH son microscpicos unicelulares. ,a palabra proviene del vocablo griego, de la palabra protos \primero, zoon\ animales. ,os protozoarios constituyen colonias, en las colonias, cada una de los protozoarios estn unidos, por filamentos citoplsmicos. ,os protozoarios por su estructura, tienen caractersticas en comMn, pero al parecer e3isten diferencias entre un protozoario semeOante a animal, con uno semeOante a vegetal. ,os protozoarios, establecidos por colonias, cada uno tiene vida independiente.

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/e estima que e3isten apro3imadamente (*,<<< especies, de estos casi #,<<< son fsiles, ";,<<< son de vida libre o saprofitas y unas >,<<< especies, son parsitos de plantas y animales Pr t 9 ari += =ialia alombra, se encuentran en el duodeno que provoca enterocolitis o inflamacin. A%i&a+= 'ausa la disentera, ataca al intestino delgado o grueso provoca amibiasis. 3.4.2. Criterios de clasificacin ,a clasificacin de 5onigberg 7":4(8, dominante en los te3tos de zoologa, trata a los protozoos como un slo filo dividido en cuatro clases basadas sobre todo en el modo de locomocin! Ri9#4 d + 71!i2opoda8. Estos protozoos, como las amebas, se desplazan por medio de pseudpodos, es decir, formando apndices temporales desde su superficie, que adems les sirven para captar el alimento. ,os pseudpodos tambin son utilizados para capturar el alimento, que engloban en el interior, en un proceso llamado fagocitosis. /on muc%os los grupos en los que e3isten especies que responden a este concepto. Ci$iad + 7.iliop!ora8. Wste es el Mnico de los grupos tradicionales que se identifica como grupo natural en las clasificaciones modernas, con la categora de filo. parecen rodeados de cilios y presentan una estructura interna compleOa. El paramecio 7gnero Paramecium8 es un representante muy popular del grupo. F$a'-$ad + 7Mastigop!ora8. /e distinguen por la posesin de uno o ms flagelos. ,as formas unicelulares desnudas 7sin pared celular8, dotadas de dos flagelos, representan la forma original de la que derivan todos los eucariontes. Por eso son tantos y tan variados los protistas diferentes que encaOan en este concepto. lgunas especies portan plastos y son por lo tanto auttrofas. E+4 r 9 + 7)poro2oa8. Parsitos con una fase de esporulacin 7divisin mMltiple8. 5ay por lo menos cuatro grupos distintos sin relacin entre s, y ni siquiera son todos protistas, sino que tambin %ay animales y %ongos. El eOemplo ms conocido es el plasmodio 7gnero Plasmodium8, causante de la malaria. ,.1.,. N %-n"$at!ra 0 ta/ n %(a =eorg . =oldfuss propuso una clase Proto2oa 7protozoos8 en ";#<, dentro del reino nimales, en la cual englobaba a los infusorios 7'iliop%ora8, a los (it!o2oa, es decir, los corales, a los P!yto2oa, las formas unicelulares pigmentadas y fotosintetizadoras, y los Medusinae, las medusas y sus parientes. Este concepto no tiene nada

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que ver con el de ":4( de 5onigberg, porque slo los ciliados son comunes a ambas definiciones. En ";(* 'arl .%eodor von /iebold utiliz el nombre para designar a un filo de animales dividido en dos clases, +nfusoria, equivalentes al actual filo 'iliop%ora 7'iliados8, y )%izopoda, ms o menos equivalentes a los de 5onigberg. 1on /iebold los describi como animales unicelulares, una definicin que %a acompaBado al grupo %asta su reciente abandono. 5ay que tener en cuenta que en esos aBos estaba recibiendo su consagracin la teora celular. 2o todos, en las dcadas siguientes, estuvieron de acuerdo con la interpretacin de 1on /iebold, viendo muc%os a estos organismos como un caso de organizacin acelular. 6ue necesario el desarrollo de la microscopa electrnica, a mediados del siglo PP, para que se viera confirmada de manera definitiva la %omologa entre el organismo protozoario entero y cada una de las clulas en que se basa la organizacin microscpica de los organismos compleOos l cambio del siglo el concepto de 5aecEel, que no pretendi nunca ser ms que un concepto pragmtico, fue siendo visto como e3cesivamente polifiltico, con autores, como 9tto 0utsc%li, que rec%azaban el tercer reino, a la vez que se recuperaba la nocin de Proto2oa como conOunto de organismos de tipo animal y nucleados. 3.4.4. 2structura /u tamaBo, aspecto, estructura y caractersticas fisiolgicas, varan notablemente. ,a movilidad o locomocin de los protozoarios, es un criterio importante para la clasificacin. ". ,os que se movilizan por seudpodos #. ,os que se movilizan por flagelos &. ,os que se movilizan por cilios (. ,os que se movilizan por inercia esporozoarios eOemplo la amiba eOemplo giardia lamplia eOemplo paramecio eOemplo los

,as amibas por eOemplo se mueven por seudpodos otros se desplazan a travs de cabellos finos, pestaBas cortas conocidas como cilio, otros se desplazan por flagelo, que son en forma de ltigos para movilizarse en un medio liquido. ,os esporozoos, se movilizan por fle3in del cuerpo, ya que no tienen organelos de locomocin.

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E+tr!"t!ra+ d- a%i&a+ 3.4.!. Reproduccin /e reproducen a+-/!a$%-nt- por divisin binaria, por gemacin y por esporulacin 7fragmentacin de la clula madre en esporas8 del trofozoito o forma vegetativa del protozoo. 'uando sucede este Mltimo caso, pueden permanecer muc%o tiempo enquistados en una cpsula. 9tro tipo de reproduccin ase3ual es la divisin mMltiple caracterstica de las amebas. En algunos grupos la reproduccin ase3ual alterna con fases de reproduccin se3ual la cual esta condicionada a cambios desfavorables del medio. ,a reproduccin +-/!a$ se inicia con la formacin de gametos, macrogametos y microgametos, por diferenciacin de las clulas del trofozoito.

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/u unin da lugar a la formacin del cigoto seguido de meiosis. ,a fusin celular puede ser total, dando lugar a un cigoto 7singamia8, como sucede en los esporozoos o parcial, por conOugacin, como sucede en algunos ciliados. $urante el apareamiento en la conOugacin, el macronMcleo de un protozoario se degenera y el micronMcleo por meiosis da origen a cuatro micronMcleos con reduccin de su material gentico, uno de estos micronMcleos es transferido de un protozoo al otro para formar el cigoto, los otros tres micronMcleos degeneran. En este proceso se produce intercambio de informacin gentica entre dos individuos. El cigoto por divisin mMltiple da lugar a numerosas clulas denominadas esporozoitos.

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3.4.3. "mportancia ,os protozoarios ocupan un lugar importante en la cadena alimenticia de las comunidades naturales y de vida libre. /irven de alimento a ciertos organismos acuticos, algunos son saprofitas y otros parsitos. ,os protozoos tienen importancia en las cadenas alimentarias como componentes del plancton. /on considerados como bioindicadores en el proceso de tratamiento de aguas residuales. /e utilizan para detectar vetas petrolferas. 'ontibuyen a degradar la celulosa en el rumen. $ebido a su fcil y rpida reproduccin en el laboratorio son utilizados en investigaciones sobre nutricin y crecimiento, por eOemplo, El protozoo ciliado etra!ymena t!ermop!ila fue el primer microorganismo eucariota en el que se desarroll la induccin de cultivos sincrnicos, facilitando el anlisis de las diferentes fases del ciclo celular eucariota. Este protozoo tambin particip en el descubrimiento de los lisosomas y pero3isomas. Un equipo de investigadores argentinos logr convertir el colesterol presente en la lec%e y el %uevo en pro vitamina $., a travs de la aplicacin directa del protozoo ciliado denominado etra!ymena" .ambin se %a provocado parasitismo artificial con protozoos de vida libre con el fin de llegar a conocer los cambios que ocurren en la adaptacin a la vida parastica. lgunos de tienen la %abilidad de concentrar sustancias radioactivas disueltas en el agua. Estas sustancias pueden pasar a travs de la cadena alimenticia %asta el %ombre, producindole un incremento en las mutaciones, cncer y otras enfermedades. ,a mayor importancia de los protozoos para el %ombre lo constituyen las numerosas enfermedades que provocan los protozoos parsitos como se mencion anteriormente 3.!. 4ongos 3.!.1. (ropiedades generales ,os %ongos son organismos unicelulares microscpicos, carecen de clorofilas y teOidos conductores.

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$e las "<<< especies actualmente conocidas, la gran mayora son saprofitas. pro3imadamente *< especies, causan enfermedades al %ombre, casi al mismo numero en animales, que afectan sobre las superficie de la piel o de sus apndices. EOemplo, sarnas, tiBa, sabaBones, caspas, etc. pro3imadamente ;<< especies, causan enfermedades en las plantas. lgunos %ongos viven en las plantas como parsitos y son parsitos obligadas, aquellos que viven sobre plantas, forzosamente sobre un tipo e3clusivo de plantas o familia 7como el fitium, ataca a la razH la roya del genero cuncinia, que ataca a los cereales8. ,os no obligados utilizan cualquier tipo de plantas para pasar un determinado ciclo de reproduccin o %ibernacin. 3.!.2. Criterios de clasificacin pesar de que en muc%os te3tos se emplean sistemas de clasificacin relativamente complicados, los miclogos utilizan por lo comMn un sistema sencillo, que tiene la ventaOa de ser cmodo de usar. /egMn este sistema, los cuatro filos principales son! 9omicetes 73omycota8, Xigomicetes 74ygomycota8, scomicetes 7Ascomycota8 y 0asidiomicetes 7Basidiomycota8 y sus respectivos individuos forman oosporas, zigosporas, ascosporas y basidiosporas. O %i"-t-+ El filo 9omicetes 73omycota8 se compone de %ongos que se parecen a las algas. barca desde organismos unicelulares %asta compleOas masas de %ifas que no estn tabicadas por septos 7micelios no septados8. dems de producir oosporas, los oomicetes forman zoosporas que se mueven por medio de dos flagelos. /e incluyen en el filo los mo%os acuticos, las royas blancas y los mildius vellosos. ,a mayora de los mo%os acuticos viven sobre materia orgnica muerta, aunque )aprolegnia parasitica, parasita peces vivos. ,as royas blancas y los mildius vellosos, pertenecientes al orden Peronosporales, son parsitos de plantas. En algunos mildius vellosos, por eOemplo en los gneros P!ytop!t!ora y Peronospora, los receptculos que contienen las zoosporas pueden estar modificadosH en ese caso, los receptculos se parecen a los conidios y funcionan como tales. .!ytridiomycota ,os miembros del filo Ruitridiomicetes 7.!ytridiomycota8 son considerados parientes cercanos de los oomicetes. En algunos sistemas de clasificacin se incluyen en el reino Protistas, en lugar de situarlos con los %ongos 7&5ase Ruitridiales8.

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D0' %i"-t-+ ,os %ongos pertenecientes al filo Xigomicetes 74ygomycota8 se caracterizan por formar zigosporas con gruesas paredes, de origen se3ual y esporangiosporas no nadadoras, de origen ase3ual. El mo%o negro del pan 71!i2opus nigricans8, un representante bien conocido de este grupo del orden -ucorales, produce masas de %ifas sobre pan, fruta y otros alimentos deteriorados. ,os %ongos del orden Entomoftorales son parsitos de las moscas y de otros insectos. .ienen esporangiosporas sencillas dentro de unos receptculosH en el interior de cada uno de ellos se desarrollan unas estructuras que llegan a independizarse y funcionar como conidios. El orden Xoopagales comprende %ongos parsitos de amebas, nematodos y artrpodos. A+" %i"-t-+ ,os %ongos del filo scomicetes 7Ascomycota8, tambin llamados %ongos con forma de saco, producen un nMmero determinado de ascosporas en el interior de unas bolsas semeOantes a vesculas, denominadas ascas. 'on la e3cepcin de algunas levaduras y otros pocos organismos, los ascomicetes tienen %ifas bien desarrolladas, por lo general con un Mnico nMcleo en cada %ifa. 'iertas clulas se transforman en binucleadas poco antes de la formacin de los sacos esporales. ,a unin de los nMcleos se da en las ascas OvenesH tras la posterior divisin, suelen producirse oc%o nMcleos, los cuales darn lugar a las ascosporas. lgunos ascomicetes tienen solo una ascosporaH otros pueden tener varios cientos. ,as tres clases principales de este filo son! 5emiascomicetes, Euascomicetes y ,oculoascomicetes. ,os %emiascomicetes abarcan a las levaduras y otros %ongos similares, cuyas ascas no se forman dentro ni sobre un soporte de masas de %ifas. ,a levadura de la cerveza 7)acc!aromyces cere&isiae8, adems de reproducirse por medio de ascosporas, lo %ace tambin mediante unas protuberancias, o yemas, que a la larga se separan de las clulas parentales. ,as levaduras del gnero )c!i2osacc!aromyces se dividen por fisin. ,os miembros del orden .afrinales, como el parsito del melocotonero que causa el rizamiento de sus %oOas, se clasifican a menudo dentro de esta clase, pero la verdadera relacin entre estos organismos es confusa. ,os tipos ms simples entre los miembros de la clase Euascomicetes, como los pertenecientes al orden Eurotiales, son aquellos cuyas ascas estn esparcidas por todo el interior de unas bolas de %ifas, llamadas cleistotecios. Penicillium y Aspergillus son etapas conidiales de los eurotiales. ,os %ongos pertenecientes al orden Erisifales, un grupo de parsitos de plantas llamados los mildius de la podredumbre, tienen cleistotecios con formas especializadas. lgunos ascomicetes, que se suelen denominar pirenomicetes, tienen ascas originadas en el interior de unas estructuras con forma de matraz llamadas peritecios. -uc%os peritecios se desarrollan sobre una masa de %ifas que sirve 52
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de soporte, que se llama ascocarpo. ,as colmenillas o morc%elas, las trufas y pezizas, son ascocarpos muy conocidos, con las ascas situadas en la cara superior de los cuerpos fructferos. 9tro pirenomicete, el mo%o roOo del pan 7del gnero 6eurospora8, se %a utilizado comMnmente en el estudio de la %erencia gentica. ,os miembros de la clase ,oculoascomicetes difieren de los grupos descritos anteriormente por tener ascas con doble pared que se forman dentro de unas cavidades que %ay en el interior de la masa de %ifas. lgunos rdenes representativos de este grupo son! -iriangiales, $otideales y Pleosporales. Ba+idi %i"-t-+ El filo 0asidiomicetes 7Basidiomycota8 comprende numerosos y variados tipos de %ongos, cuyas estructuras reproductoras son basidios que se localizan en las puntas de las %ifas, sobre unos salientes con forma de tallo. ,o normal es que, en cada basidio, se formen cuatro basidiosporas. ,os basidios pueden ser con forma de maza, cilndricos u ovales. ,as dos clases principales de este filo son! 5eterobasidiomicetes, que tienen basidios con cuatro clulas y 5omobasidiomicetes que, de manera tpica, tienen basidios con una clula. ,a clase 5eterobasidiomicetes engloba a algunos importantes parsitos de las plantas, tales como las royas del orden Uredinales, o los tizones del orden Ustelaginales. Estos grupos tienen basidios que estn divididos en varias clulas, por lo general cuatro, las cuales forman una espora cada una. -uc%as royas, entre ellas Puccinia graminis, la roya negra de los tallos del trigo y de otras gramneas, tienen un ciclo de vida complicado y requieren vivir en dos %uspedes distintos para producir sus variadas formas de esporas. ,a roya negra de los tallos del trigo forma unas estructuras pequeBas con forma de matraz llamadas espermatogonias. Wstas tienen numerosos cuerpos diminutos semeOantes a esporas, llamados espermtidas, situados sobre la cara superior de las %oOas del agraceOo 7Berberis &ulgaris8. En la cara inferior se desarrollan, as mismo, unas estructuras con forma de copa, llamadas ecidios, desde cuya base se originan %ileras de ecidiosporas. ,as ecidiosporas nunca reinfectan a otras plantas de agraceOo, sino que atacan Mnicamente a las gramneas, en las que forman unas pMstulas roOas llamadas uredios que contienen esporas. Estos uredios son los que dan la apariencia de royas a los tallos y las %oOas de las plantas parasitadas. -s tarde, durante la misma estacin, se producen otro tipo de esporas llamadas teliosporas, o esporas de invierno. Wstas son negras, con paredes gruesas y se forman en los tallos del trigo. En la primavera siguiente, las teliosporas desarrollan protecciones cilndricas, dividindose entonces en cuatro clulas que originan basidiosporas individuales. ,as royas 53
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que utilizan dos %uspedes se denominan %eteroicasH aquellas cuyas etapas de desarrollo se realizan en un solo %usped se llaman autoicas. En los tizones, las teliosporas se llaman clamidosporas. Estas esporas pueden reinfectar a otras plantas poco despus de formarse, pero es ms frecuente que germinen en el suelo durante la primavera siguiente. Producen unos filamentos cortos que tienen, apro3imadamente, cuatro clulas. Wstas dan lugar a basidiosporas llamadas esporidios. Entre el resto de los %eterobasidiomicetes se agrupan diversos %ongos de consistencia gelatinosa de los rdenes uriculariales, $acrimicetales y .remelales. ,a clase 5omobasidiomicetes se subdivide en dos grupos principales que pueden considerarse subclases! 5imenomicetes, cuyo %imenio 7superficie en la que se aloOan los cuerpos fructferos8 es e3terno, y =asteromicetes, en los cuales los basidios se forman en el interior del cuerpo fructfero. ,a mayora de estos %ongos son saprofitos, es decir, viven sobre materia orgnica muerta o en descomposicin. ,a subclase 5imenomicetes engloba diversas familias que abarcan desde los c%ampiBones y otros %ongos similares, a las clavarias 7%ongos con forma de coral8 y a los %ongos porosos o polporos. Estos %ongos difieren entre s por el tipo de cuerpo fructfero, o basidiocarpo. En los c%ampiBones y en otros %ongos de la familia Agaricaceae, el %imenio se forma a lo largo de unas %oOas alargadas, o laminillas. ,as especies de la familia .la&ariaceae tienen los basidiocarpos muy ramificados. El %imenio se sitMa sobre la suave superficie de stos. ,os polporos, de la familia Polyporaceae, son comunes sobre troncos en descomposicin. /u %imenio se alinea dentro de unos tubos. ,os %ongos con aguiOones, de la familia 7ydnaceae, tienen su %imenio sobre unas espinas que crecen %acia fuera. ,a subclase =asteromicetes comprende %ongos tan familiares como los pedos o cuescos de lobo, del orden ,icoperdales, y los %ongos malolientes con forma de falo, del orden 6alales. ,os basidiocarpos de los pedos de lobo son estructuras globulares, a menudo grandes, que contienen una enorme cantidad de esporas. ,os cuerpos fructferos de los falales son unas estructuras cilndricas. /us esporas se disponen en la superficie del pice de estos basidiocarpos. 'uando maduran despiden un olor repugnante que atrae a los insectos carroBeros y de esta forma aseguran la dispersin de las esporas.

D-!t-r %i"-t-+

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,a mayora de los miembros del filo $euteromicetes 7Deuteromycota8 son fases conidiales de ascomicetesH sin embargo, unas pocas especies son zigomicetes o basidiomicetes. ,os gneros Aspergillus, Penicillium, Verticillium, Alternaria y Fusarium, pertenecen al orden -oniliales. En estos %ongos, los odios y los conidios se forman sobre una almo%adilla vellosa de %ifas entrelazadas. ,os %ongos pertenecientes al orden -elanconiales, con gneros como .olletotric!um, tienen cuerpos fructferos semeOantes a diminutos platillos, llamados acrvulos. ,os conidios de los miembros del orden Esferopsidales se originan en el interior de unas estructuras con forma de matraz llamadas picnidios. 3.!.3. 1omenclatura - ta'onoma N %-n"$at!ra lgunos miclogos usaban te3tos parecidos a los de los zologos. Pero el te3to bsico se basa en un cdigo internacional de nomenclatura botnica. El rango bsico es la especie. 2o obstante, no e3iste una definicin obOetiva de especie y cada autor lo considera de una forma diferente. 5ay problemas. 5ay ms acuerdo cuando se trata de rangos! A+ntraespecficos o supraespecficos. $ominio ] )eino ] /ubgnero ] $ivisin ] 'lase ] /ubclase ] 9rden ] /uborden ] 6amilia ] /ubfamilia ] .ribu ] /ubtribu ] =nero ]... N r%a+ &C+i"a+ d- -+tr!"t!ra ,os gneros y especies no presentan terminaciones estndar. /egMn los autores, cuando descubren una nueva especie, le dan un nombre nuevo, generalmente en latn binomial. El gnero se usa en mayMsculas y la especie en minMsculas en cursiva o subrayado. E3isten sinnimos aceptados y otros que no en las mismas especies de %ongos. Ta/ n %(a 3Fn'i"a +ntentan ordenar el panorama de los microorganismos u organismos. 5ay diferentes partes! A'lasificacin agrupa los microorganismos atendiendo a su parecido.

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A+dentificacin incluye los nuevos aislamientos dentro de los grupos que ya estn establecidos. ,a clasificacin e identificacin son diferentes. A2omenclatura consiste en poner nombre a los nuevos aislamientos segMn una normativa internacionalmente aceptada. F!n"i n-+ d- $ + ta/ n#%i" + A +dentificar y describir de la forma ms concreta posible las unidades ta3onmicas bsicas 7especies8. A $esarrollar sistemas para ordenar y catalogar estas unidades. A Estudiar las relaciones que e3isten entre los %ongos y otros organismos vivos. A $ar nombre a organismos siguiendo las normas internacionales E+ta&$-"i%i-nt d- $a 3i$ '-nia

A -orfologa comparativa. A 'itologa. A 'apacidad biosinttica segMn si usan la ,isina! A ^cido minoadpico 7 8 %ongos superiores y algas. A ^cido $iaminopimlico 7$ P8 bacterias, plantas y %ongos inferiores. A $iagnstico serolgico protenas diferentes. A 5uellas deOadas por los pocos fsiles. 2o se sabe ni donde ni cuando ni como se formaron. ,a solucin que se %a encontrado es la ta3onoma molecular mediante genomas para ver las relaciones que %ay. /e cree que se formaron con el origen de los eucariotas a los "*<< millones de aBos. ,os fsiles encontrados pertenecen a los &*< millones de aBos. 5ay muc%o tiempo en el que no se conoce. ,os fsiles ms conservados son los asociados a plantas superiores, que estaban asociadas a plantas a las que parasitaban %ongos epfilos. -uc%os miclogos los %an estudiado como animales y, otros, como plantas. ,o %acan porque los mi3omicetos se mueven. ,os organismos vivos estn agrupados en & dominios! 0acteria, rc%aea y EuEarya. rc%aea est ms pr3imo al ms evolucionado.

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Por la molecular, %ay %ongos tan diferentes que algunos estn ms pr3imos al %ombre que de los propios %ongos superiores. .odas se basan en relaciones de $2 ribosomal. 5aCEsCort%, propuso que los %ongos se utilicen arbitrariamente como los organismos estudiados por los miclogos para incluir los que estn en otros reinos. $entro de los diferentes reinos que se implican en el dominio EuEarya! nimalia, Plantae, '%romista, 6ungi y Protozoa. En estos tres Mltimos dominios, %ay organismos clasificados como %ongos. 3.!.4. 2structura ,a mayora de los %ongos poseen un soma vegetativo 7van a dar origen a un nuevo organismo8, conocidas como septo o esporas. Este soma produce una parte vegetativa, llamada micelios, y esta produce una serie de %ifas, que son alargadas o bifurcadas 7forma de %orquetas8. ,as %ifas pueden tener un grosor de <.* milimicra o %asta "<< milimicra, en algunos %ongos. lgunos %ongos, el micelio, pueden tener una longitud de algunas micras, pero en otros, %asta en varios metros. En los micelios, pueden tener las clulas, %asta dos nMcleos 7dinucleadas8, algunos son cinocticos 7poseen clulas multinucleadas8. En algunos %ongos inferiores, no poseen micelios verdaderos, si no forman una parte llamada plasmodios. En otros constituyen los disomicelios.

E+tr!"t!ra d- !n 7 n'

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3.!.!. Reproduccin ,a mayora de los %ongos se reproducen por esporas, diminutas partculas de protoplasma rodeado de pared celular. El c%ampiBn silvestre puede formar "#.<<< millones de esporas en su cuerpo fructferoH as mismo, el pedo o cuesco de lobo gigante puede producir varios billones. ,as esporas se forman de dos maneras. En el primer proceso, las esporas se originan despus de la unin de dos o ms nMcleos, lo que ocurre dentro de una o de varias clulas especializadas. Estas esporas, que tienen caractersticas diferentes, %eredadas de las distintas combinaciones de genes de sus progenitores, suelen germinar en el interior de las %ifas. ,os cuatro tipos de esporas que se producen de esta manera 7oosporas, zigosporas, ascosporas y basidiosporas8 definen los cuatro grupos principales de %ongos. ,as oosporas se forman por la unin de una clula mac%o y otra %embraH las zigosporas se forman al combinarse dos clulas se3uales similares entre s. ,as ascosporas, que suelen disponerse en grupos de oc%o unidades, estn contenidas en unas bolsas llamadas ascas. ,as basidiosporas, por su parte, se reMnen en conOuntos de cuatro unidades, dentro de unas estructuras con forma de maza llamadas basidios. El otro proceso ms comMn de produccin de esporas implica la transformacin de las %ifas en numerosos segmentos cortos o en estructuras ms complicadas de varios tipos. Este proceso sucede sin la unin previa de dos nMcleos. ,os principales tipos de esporas reproductivas formadas as son! odios, conidios y esporangiosporas. Estas Mltimas se originan en el interior de unos receptculos, parecidos a vesculas, llamados esporangios. ,a mayora de los %ongos producen esporas se3uales y ase3uales. 'omo se menciono, la reproduccin ase3ual se efectMa por la formacin de esporas, que son cuerpos pequeBos que contienen un nMcleo y una pequeBa porcin de citoplasma. ,as esporas de los organismos terrestres, son por lo general, muy livianas y poseen una pared protectora. Estos dos rasgos determinan que la esporulacin sea algo ms que un simple mecanismo de reproduccin. /u tamaBo pequeBo y su peso liviano las %abilita para ser transportadas a grandes distancias por medio de corrientes de aire. s las esporas funcionan como agentes de dispersin, que %acen posible la propagacin del organismo en nuevos lugares ,os %ongos producen esporas en abundancia. Un solo micelio de lycoperdon produce alrededor de ><< millones de esporas en cada perodo en sus esporangios. /i se deOa un pedazo de pan %Mmedo 7que no contenga sustancias in%ibidoras del crecimiento del mo%o8 en un lugar caliente, oscuro y e3puesto a las corrientes del aire, se desarrolla un micelio abundante y e3uberante que muestra cuan 58
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amplia es la distribucin de las esporas de este %ongo. ,os musgos, los licopodios y los %elec%os producen tambin enorme cantidad de esporas pequeBas que se dispersan por el viento y, sirven para propagar la especie a nuevas localidades

R-4r d!""i#n +-/!a$ a+-/!a$ 3.!.3. "mportancia

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$esde que e3istimos como especie con conciencia de s misma, %emos usado a los %ongos para muy diversos propsitos. Por otro lado, muc%os de ellos tambin se %an valido de nosotros para lograr sus fines 7sobrevivir, ante todo8. Por tanto, antes de que la -icologa se estableciera como ciencia, las sociedades %umanas %an interactuado con los %ongos. ,os %ongos son unos organismos que desde siempre %an fascinado a los %umanos 7vase 6ig. "8. 2os rodean por doquier, y %an sido empleados para los ms diversos y e3traBos menesteres, en ocasiones sin que nos percatramos de ello. Por eOemplo, la fermentacin. ,os pueblos antiguos, como los egipcios, %an usado a las levaduras 7vase 6ig. #8 para obtener cerveza, vino y pan 7lo consideraban un don de 9siris8. ,os romanos celebraban las 0acanales, en %onor a 0aco, dios del vino. $e %ec%o, la ingestin de bebidas alco%licas, aparte de la euforia asociada a ellas, era necesaria para nuestros antepasados. El

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agua corriente, debido al desconocimiento de las medidas %iginicas, poda provocar desde diarreas a enfermedades ms graves. En cambio, el vino y la cerveza eran inofensivos y adems el alco%ol serva de germicida. Por supuesto, las antiguas bebidas alco%licas no eran tan fuertes como los licores actuales, fruto del desarrollo de las tcnicas de destilacin. l igual que el alco%ol, muc%os %ongos Ouegan un gran papel en las religiones, ya que en ocasiones son necesarios para alcanzar estados alterados de consciencia. ,os c%amanes siberianos solan emplear la seta Amanita muscaria. Psilocybe cubensis, un %ongo alucingeno, es usado en ciertas ceremonias religiosas americanas. .ambin se %an utilizado carpforos de Fomitopsis officinalis 7un yesquero8 para tallar figuras sagradas, se crea que algunos %ongos, como setas y trufas, eran directamente generados por los dioses 7por el rayo de ?Mpiter, sin ir ms leOos8. ,os %ongos yesqueros %an sido utilizados para encender fuego. 'oncretamente, los carpforos secos de Fomes fomentarius se molan, y el polvo resultante era conocido como yesca, muy inflamable. /u uso es muy antiguoH se %an encontrado restos de yesqueros en la momia del 5ombre de los 5ielos %allado en .irol. .ambin %ay %ongos luminiscentes 7fo/fire8, usados incluso por algunos soldados en incursiones nocturnas. 2o slo las setas brillan en la oscuridad, sino la madera atacada por el micelio. )ealmente, la gente no suele ser consciente de la importancia de los %ongos en nuestras vidas. $e %ec%o, muc%os de nosotros estamos vivos gracias a ellos. 5ace no demasiadas dcadas, la tasa de mortalidad infantil era elevadsima. Una simple septicemia poda llevarle a uno a la tumba. partir del descubrimiento de la penicilina, los antibiticos %an salvado incontables vidas. 9tro antibitico fMngico interesante es la ciclosporina. +ncluso %ay %ongos que producen ta3ol, un anticancergeno. +ndiscutiblemente, la importancia de los %ongos en la biosfera se debe a su carcter de descomponedores, especialmente en bosques. )eciclan la materia orgnica 7y no slo la madera8 con notable eficacia, regulan la liberacin de nutrientes y son esenciales para la supervivencia de plantas y animales. Por desgracia, tambin descomponen madera de construcciones, postes, embarcaciones, etc., sobre todo si %ay muc%a %umedad 7destaca la podredumbre seca de )erpula lacrimans8. 9tros pueden descomponer desde productos alimenticios %asta las cosas ms e3traBas 7papel, emulsiones fotogrficas, pintura, fungicidas, incluso discos compactos o %asta papel pintado, generando a veces en el proceso gases t3icos8, y nos obligan a luc%ar contra ellos por medios qumicos, refrigeracin, enlatado, etc. Ello supone un gran gasto de tiempo y dinero. 60
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lgunos descomponedores fabrican micoto3inas, que envenenan los alimentos. Por eOemplo, las aflato3inas son cancergenas, e incluso se %an empleado como armas de guerra biolgica. /in embargo, la peligrosidad de las to3inas producidas por %ongos no es un fenmeno actual. Es bien conocido el envenenamiento por cornezuelo del centeno, del cual, a pesar de todo, se obtienen substancias de enorme inters en medicina. Uno se pregunta la cantidad de antibiticos y productos Mtiles que quedan por descubrir, y que tal vez se estn perdiendo mientras permitimos que una especie tras otra se e3tinga. $ic%o sea de paso, otros %ongos %an sido usados en medicina popular. ,os ms conocidos son los cuescos de lobo y %ongos afines, empleados como anti%emorrgicos. Por supuesto, las setas comestibles son conocidas desde tiempo inmemorial. En '%ina se cultivan desde el aBo 4<< a. '., mientras que en Europa se empez %acia "4*<. 5oy son cultivadas muc%as especies que crecen en estircol, paOa, desec%os de arroz y otros sustratos baratos. lgunas %an sido usadas como afrodisacas 7eO.! trufas8. D, por supuesto, %ay setas venenosas que pueden llegar a ser mortales. En algunos lugares 7'ataluBa, sin ir ms leOos8 %ay toda una tradicin de ir a buscar setas en otoBo. E3isten sociedades micolgicas que se ocupan de que este pasatiempo se realice de forma instructiva para los aficionados y sin daBar al entorno. Por desgracia, abundan los desaprensivos que e3polian los bosques en su bMsqueda de setas, bien para consumo propio o con fines de e3portacin. 2o slo las tpicas setas se consideran un manOar. lgunos %ongos comestibles son peculiares, como el cuitlacoc%e 7agallas inmaduras del carbn del maz8 en -3ico, o algunos esclerocios gigantes buscados por los aborgenes australianos. 1arias especies de Penicillium dan sabor a ciertos quesos 7)oquefort, 'abrales, etc.8, mientras que diversas especies de Aspergillus o mucorceos son empleados en sia para obtener alimentos fermentados a partir de soOa, arroz, etc. /u sabor podr ser ms o menos e3traBo, pero lo cierto es que la digestibilidad de estos productos fermentados aumenta. ,as levaduras, adems de para fermentar, pueden fabricar enormes cantidades de protenas 7por desgracia, su consumo %umano es complicado, ya que tienen un e3ceso de cidos nucleicos t3icos y carecen de algunos aminocidos esenciales8. 9tros %ongos producen ergosterol, cortisona, enzimas varias, cidos, giberelinas, etc. +ncluso el mo%o gris, un %ongo destructor de cosec%as, es empleado en ciertos viBedos para lograr la podredumbre noble. ,a cantidad y diversidad de bebidas alco%licas que los %umanos %an fabricado gracias a los %ongos son admirables. ,os %ongos son los parsitos vegetales por e3celencia, como muy bien saben los fitopatlogos, los especialistas que estudian las enfermedades de las plantas. Por otro lado, algunos de estos %ongos 61
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podran convertirse en valiosos mico%erbicidas contra las malas %ierbas, bien aplicados directamente, bien mediante substancias fitot3icas obtenidas a partir de ellos. 5ay %ongos que viven en simbiosis con otros organismos. ,os ms importantes son las micorrizas con las races de las plantas y los populares lquenes, pero %ay otros. ,os %ongos endfitos parasitan a ciertas plantas, pero a la vez las protegen del ataque de los animales, convirtindolas en venenosas. ,as asociaciones de los %ongos con los artrpodos y otros pequeBos animales tambin son fascinantes, y van desde el parasitismo y la depredacin de unos sobre otros 7y viceversa8 %asta e3traBas formas de simbiosis 7%ormigas Oardineras, %ongos que viven dentro de algunos insectos y deto3ifican sus alimentos, etc.8. ,as estrategias de dispersin conOunta de insectos y %ongos pueden llegar a ser muy compleOas. Por otro lado, algunas moscas son resistentes a las amanitinas, las cuales matan a los nematodos que parasitan a dic%as moscas. El empleo de %ongos parsitos o depredadores en el control de enfermedades vegetales es un campo en constante desarrollo. ,os %ongos tambin provocan micosis en %umanos. bundan especialmente en pases tropicales, pero poco a poco se van e3tendiendo a otros mbitos. Estas micosis varan desde los omnipresentes pies de atleta y candidiasis %asta los %ongos que matan a los enfermos inmunodeprimidos. ,as esporas de varios %ongos 7eO.! Alternaria8 tambin pueden causar alergias. Por Mltimo, algunos %ongos son empleados como organismos de laboratorio para el estudio de procesos biolgicos fundamentales 7)acc!aromyces, 6eurospora, .oprinus, )c!i2op!yllum, P!ycomyces, Aspergillus, 8stilago, etc.8. 'iertos venenos, como las amanitinas, tambin pueden convertirse en Mtiles %erramientas de investigacin. ,as enzimas %idrolticas de los %ongos se utilizan en diversos procesos industriales. 'uando crecen sobre salvado caliente de trigo o de arroz, algunas especies fMngicas producen una amilasa que se usa en la fermentacin alco%lica. ,as proteasas que se obtienen de otros %ongos se emplean en la fabricacin de pegamento lquido. ,a produccin industrial de alco%ol etlico 7etanol8 se realiza por fermentacin de melaza de caBa de azMcar o de almidn %idrolizado mediante enzimas formadas por otros %ongos. En el proceso de elaboracin del pan se aBade levadura a la masa para producir di3ido de carbono. 3.3. 1ematodos 3.3.1. (ropiedades generales

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/on uno de los grupos que pertenecen al reino animal. ,a gran mayora de los nematodos, son de vida libre, viviendo en las aguas dulces o saladas. 'omo parsitos, viven en el suelo alimentndose de las races de las plantas, otras viven en los nudos de los vegetales, produciendo gran variedad de enfermedades. E3isten tambin los que parasitan en animales y en el %ombre. 3.3.2. Criterios de clasificacin $ebido a su gran variedad de formas de vida, los 2ematodos se %an estudiado por investigadores de distintas disciplinas interesados en grupos particulares. Por ello, se %an investigado independientemente los de vida libre, los zooparsitos y los fitoparsitos, %abindose propuesto diferentes formas de clasificacin. /u ordenacin en gneros, familias y superfamilias es satisfactoria, pero la ordenacin en grupos superiores es controvertible ,a clasificacin ms aceptada de los 2ematodos es la propuesta por 0. =. '%itCood y -. 0. '%itCood 7":*<8, segMn la cual forman un filo dividido en dos clases, P%asmidia y p%asmidia ,a clase P%asmidia 76asmidios o 6smidos8 o /ecernentea 7/ecerntidos8 incluye a los 2ematodos provistos de fasmidios, rganos sensoriales pares en forma de pequeBas bolsas que se ubican en la zona caudal. Estructuras pares similares 7anfidios8 del e3tremo anterior, estn escasamente desarrolladas. /istema e3cretor presente, con uno o dos canales laterales, con o sin clulas glandulares asociadas. ,os 6smidos comprenden parte de las especies que %abitan en el suelo, la mayora de los parsitos animales y casi todos los parsitos de los vegetales. Entre los fsmidos se encuentran los estrongilinos, los ascaridinos 7grupo al que pertenecen los scaris y los o3iuros8 y los espirulinos 7al que pertenecen las filarias, como @uc%ereria8. ,a clase p%asmidia 7 fasmidios o fsmidos8 o denop%orea 7 denofridos8 incluye a los que carecen de glndulas fasmidiales y poseen anfidios de formas variables, generalmente bien desarrollados, detrs de los labios. /istema e3cretor con una o ms clulas e3cretoras 7renetas8. 'omMnmente con glndulas %ipodrmicas y caudales. ,a mayora son de vida libre. 'omprenden a casi todas las especies acuticas, tanto dulceacucolas como ocenicas, parte de las especies del suelo, parte de los parsitos animales 7como las triquinas .ric%inella y tricoffalos.ric%uris8 y algunos parsitos de los vegetales. 3.3.3. 2structura ,os nematodos son microorganismos que pueden llegar a medir de &<< a "<<< milimicra. Especficamente algunas llegan a medir apro3imadamente ( milimicras de longitud por "* a &< milimicras de anc%o. /u tamaBo pequeBo %ace a que no se puedan observar a 63
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simple vista, si no que, se facilita a travs de microscopio. ,os nematodos pueden ser en formas de anguilas, otras en forma redondas, son de cuerpo liso y no son segmentados, incluso carecen de patas o apndices. El cuerpo de los nematodos son ms o menos transparentes cubierta por una cutcula incolora. Esta cutcula se reemplaza por otra, en su momento de muda. .ienen longitudinalmente dispuestos unos mMsculos muy potentes, que permiten su movilizacin y su accin parsita. Estos mMsculos y otros especializados, tambin se localizan en la boca, en la estructura digestiva y reproductora. ,a cavidad del cuerpo, coordina un lquido en el cual se realiza la circulacin y la respiracin. El sistema digestivo, es un tubo %ueco, que inicia desde la boca, pasa al esfago, despus al intestino y concluye en el recto y ano. .odos los nematodos fitoparasitos, poseen un estilete, que utilizan para perforar las paredes celulares.

I%a'-n d- n-%at d + 3.3.4. Reproduccin ,a reproduccin es siempre se3ual 7por Oebecillos8 y la fecundacin interna. 'asi todos los 2ematodos son de se3os separados 7dioicos o bise3uales8, y en la mayora de los casos el mac%o es menor que la %embra. ,os mac%os presentan caracteres se3uales secundarios, tales como glndulas ventrales, lbulos caudales y testiculos. ,as %embras, poseen uno o dos ovarios, un oviducto, un Mtero, que finaliza en la vulva. E3isten algunos pocos 2ematodos terrestres que son %ermafroditas o partenogenticos. 5ay casos en que se desconocen los mac%os. ,as especies %ermafroditas son proterndricas, es decir los rganos masculinos y los espermatozoides se desarrollan antes que los rganos femeninos y los vulos. En ellas e3iste un ovotestculo. En general se autofecundan. ,os espermatozoides se desarrollan primero y son almacenados en las vesculas seminales. ,a autofecundacin ocurre despus de la formacin y maduracin de los vulos. 64
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Peridicamente surge un pequeBo nMmero de mac%os que fecundan cruzadamente a los %ermafroditas. El sistema reproductor es generalmente par. ,as gnadas, en nMmero de una o dos, se comunica con el e3terior por un poro Mnico, la cloaca, en los mac%os, y un gonoporo o vulva en las %embras. ,a posicin de la vulva vara, siendo a veces posterior y otras veces anterior. En los mac%os, %ay un testculo tubular, con forma de un cordn macizo apelotonado sobre s mismo. En algunos 2ematodos %ay dos testculos, orientados generalmente en forma opuesta. El o los testculos se convierten imperceptiblemente en un largo espermiducto o conducto deferente. 'ada espermiducto se ensanc%a en el e3tremo posterior formando una larga vescula seminal, donde se acumulan los espermatozoides. Un conducto eyaculador muscular, con glndulas prostticas, conecta las vesculas seminales con la cloaca. ,as secreciones prostticas son ad%esivas y posiblemente facilitan la cpula. ,a vescula seminal desemboca en el recto, modificado en una cloaca. ,a pared de la cloaca est evaginada formando dos sacos que se unen antes de desembocar en la cmara cloacal. ,a regin posterior de los mac%os presenta una considerable variacin. /uele estar curvada en forma de ganc%o o la cutcula ensanc%ada en e3pansiones alares con forma de abanico, constituyendo un accesorio copulador llamado bursa. veces presentan papilas pedunculadas, sedas sensoriales o e3pansiones a modo de ventosas. El poro genital masculino est situado muy cerca del ano y tiene ganc%os cuticulares 7espculas copuladoras8, varillas utilizadas para asir a la %embra durante la cpula y para mantener abierto el gonoporo femenino durante la transmisin de espermatozoides. 'ada saco contiene una espcula, que generalmente es corta, con forma de %oOa aguzada y curva. ,as espculas asoman a travs de la cloaca y salen por el ano o abertura, mediante mMsculos especiales, pueden ser evaginadas y retradas en la bolsa cutnea. ,as espculas copuladoras del mac%o asoman por la cloaca y el ano. ,os espermatozoides, de distintas formas 7redondos, cnicos, sinuosos o alargados8, se pueden mover lentamente en forma ameboide y carecen de flagelo. ,os espermatozoides pueden estar formados por cabeza y cola, la cola suele poseer una larga mitocondria central con microtMbulos laterales. Puede %aber uno o dos ovarios, tubulares, cordones apelotonados tpicamente pares. 2ormalmente una gnada est orientada %acia la parte anterior y la otra %acia la parte posterior, con sus e3tremos opuestos enfrentados. En muc%as especies cada gnada se dobla sobre si misma y en algunas especies parsitas cada gnada es larga y enrollada en espiral. ,a parte germinativa es terminal, en las especies mayores las clulas suelen agruparse alrededor de un 65
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cordn nutricio central 7raquis8. ,a clula ms interna de cada gnada, la clula del e3tremo distal, secreta una substancia promotora de la mitosis, que produce la proliferacin de nMcleos de clulas germinales. 'ada ovario se prolonga poco a poco convirtindose primero en oviducto tubular y luego en un Mtero largo y muy amplio. En algunos casos %ay un ovario Mnico y un solo oviducto. El e3tremo superior del Mtero puede funcionar como receptculo seminal. 'ada Mtero desemboca en un tubo muscular corto comMn, denominado vagina. ,a vagina desemboca al e3terior por el poro se3ual generalmente impar 7vulva8, situado ventralmente, generalmente en la zona media del cuerpo. El poro se3ual femenino est situado en la parte ventral del e3tremo anterior del cuerpo, aunque a veces se traslada %acia las pro3imidades del ano. ,os %uevos son pequeBos, generalmente alargados y estn rodeados por envolturas muy duras, que les permiten esperar indefinidamente la aparicin de condiciones ambientales adecuadas. E3isten tres cubiertas! una lipdica, otra cuticular y una tercera proteica, con ornamentaciones. /on numerosos en las especies parsitas. Por eOemplo, una %embra de ascride pone muc%os millones de %uevos. /e conocen casos de %embras que produOeron #> millones de %uevos, e3pulsando #<<.<<< diariamente. Esta elevada fertilidad puede producir deformaciones, la %embra adquiere forma redondeada, con intestino, sistema nervioso y otros rganos involucionados, a veces se evagina la vagina y crece intensamente formando una envoltura para el ovario, el Mtero y los embriones, quedando el cuerpo como un apndice diminuto. ,as %embras de algunas especies producen una feromona que atrae a los mac%os. ,a fecundacin es interna. $urante la cpula, las espculas cloacales del e3tremo posterior en forma de ganc%o del mac%o son e3pulsadas por la abertura cloacal, se enredan en torno a la regin de los poros genitales de la %embra y se insertan en el gonoporo femenino, mantenindolo abierto. ,os espermios ameboides migran %acia la vagina y se dirigen al receptculo seminal, en el e3tremo superior del Mtero, donde ocurre la fecundacin. El vulo fecundado secreta una gruesa membrana de fecundacin, que se endurece. esta capa se agrega otra cubierta e3terna, secretada por las paredes uterinas, que a menudo presenta estructuras caractersticas. ,a superficie de los %uevos est esculpida de diferentes formas especficas para cada especie. ,os %uevos son retenidos en el Mtero durante algMn tiempo antes de ser depositados. veces el desarrollo comienza cuando los %uevos aMn estn dentro de la %embra.

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R-4r d!""i#n d-$ n-%at d 3.3.!. "mportancia /on pocos los animales o plantas que carecen de 2ematodos parsitos. +nciden en el ser %umano, como parsitos propios, de sus animales domsticos y de sus cultivos. E3isten numerosos 2ematodos parsitos del ser %umano que causan enfermedades que no %an podido ser controladas por la medicina, y los que parasitan a los animales domsticos causan prdidas por valores de miles de millones de dlares. /e consideran que unas "* especies de 2ematodos parasitan %abitualmente al ser %umano, pero otras "* adicionales que se encuentran %abitualmente en otros animales, pueden parasitarlo ocasionalmente 7zoonosis8. E3isten varios 2ematodos pequeBos 7"A# mm de largo8 que producen lesiones en vegetales Mtiles, como %erbceas, flores, frutos y rboles. /e calcula que consumen apro3imadamente un "<N de los cultivos. PerOudican a su %usped por su accin corrosiva, porque agotan la savia de la planta, lesionan los puntos de crecimiento, y por la transmisin de virus o al abrir caminos de entrada a bacterias u %ongos. ,os principales medios de control son la rotacin de cultivos, la esterilizacin de la tierra y el desarrollo de variedades de plantas resistentes. Entre los aspectos positivos que tienen los 2ematodos para el ser %umano, debe considerarse que son parcialmente responsables de la destruccin de multitud de cadveres, atacan a muc%os animales y vegetales perOudiciales para el ser %umano y que las actividades de los 2ematodos del suelo facilitan la aireacin del suelo y la circulacin de componentes minerales y orgnicos. 'omo una alternativa al uso de insecticidas qumicos se %a propuesto el control biolgico con 2ematodos parsitos. /e basa en la aplicacin de un biolarvicida a

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base de 2ematodos parsitos )omanomermis culicivora3 y )omanomermis iyengari. Estos biolarvicidas, se caracterizan por ser especficos para larvas de mosquitos. D no afectan ni a la flora, ni a la fauna, incluyendo al %ombre mismo. 9tra caracterstica de estos biolarvicidas es que se pueden obtener o producir a baOo costo, con materias primas locales. dems, se pueden establecer en los criaderos tratados debido a que reciclan, manteniendo un control biolgico a mediano plazo. $esde el punto de vista cientfico, debe destacarse que el 2ematodo 'aenor%abditis elegans es uno de los animales ms estudiados. $e l se conoce el destino de cada una de sus clulas durante el curso del desarrollo y su genoma es uno de los meOores conocidos

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Unidad 1. Fa"t r-+ A%&i-nta$-+ 2!- a3-"tan -$ "r-"i%i-nt . d-+arr $$ 0 r-4r d!""i#n d%i"r r'ani+% +.
4.1. 5actores de crecimiento Cr-"i%i-nt = Es el incremento ordenado de todos los componentes del organismo. /e realiza al multiplicarse o reproduccin de las clulas, pero en forma ordenada. Por lo tanto, se establece un crecimiento por la produccin ordenada de clulas en un organismo. Para que esto suceda, la clula, debe captar productos orgnico e inorgnicos! carbo%idratos, lpidos, protenas 7para que el alimento sea aprovec%ado8 y agua, sales minerales. ,a multiplicacin celular tiene como consecuencia el crecimiento. En los rganos unicelulares, su crecimiento o multiplicacin conduce a la formacin de colonias, poblacin, cultivo. Un cultivo detiene su crecimiento cuando sucede cualquiera de estas tres causas! ". 'uando se agotan uno o ms nutrimentos #. 'uando se acumulan productos t3icos. &. 'uando establece un desequilibrio del +on desfavorable. EOemplo, P5 inadecuado8 Un factor de crecimiento, es aquel producto orgnico que una clula debe contener, pero que ella, por si sola, es incapaz de sintetizarlo. 'uando un organismo celular es suministrado los nutrimentos! donadores de %idrogeno, aceptores de %idrgeno, fuentes de carbono, nitrgenoH son capaces de sintetizar los componentes orgnicos de la clula, incluyendo los aminocidos, especialmenteH protenas, vitaminas 7piriminas8, cidos grasos 7glicerol8, cidos nucleicos 7 $2, )28. .odos los componentes orgnicos se sintetizan por enzimas 7protenas8 y coenzimas 7vitaminas8, si no e3isten encimas la reaccin metablica no se realiza.

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,os factores de crecimiento de los organismos, estn en relacin directa a su crecimiento e inversamente proporcional a la falta de ellas 7falta de los factores8 E3isten microorganismos, que requieren de mayor o menor calidad de elementos o factores para su crecimiento. Fa"t r-+ a%&i-nta$-+ 2!- a3-"tan -$ "r-"i%i-nt . Un determinado cultivo debe tener todos los nutrimentos necesarios y el medio ambiente adecuado para su crecimiento! temperatura, aeracin, p%, luz. El cultivo debe estar en un medio lquido 7agar8, para ser gelificado, este es un medio adecuado para cultivos. 4.2. (resin 4idrosttica .odo microorganismo o clulas, su alimentacin o e3crecin, la realiza a travs del fenmeno de osmosis. /e establece la presin osmtica, cuando de un lugar de alta concentracin de molculas, pasa a travs de una membrana permeable, a un lugar de baOa concentracin de molculas Posterior a esto, se establece otro fenmeno, llamado! transporte activo. $onde a travs de la osmosis, permite la seleccin de molculas de sustancias orgnicas o inorgnicas. Una vez efectuada el transporte activo, sucede otro fenmeno llamado! difusin. Establece la distribucin uniforme de molculas, en el cuerpo de la clula. 'uando las molculas de sustancias orgnicas e inorgnicas no pueden ingresar al cuerpo de la clula, por el tamaBo que presentan, son devueltas para realizar acciones metablicas y, se constituyen en productos muc%o ms pequeBos, para su ingreso, constituyndose los iones de productos, que pueden ser positivos o negativos, formando la fuerza inica. Un +on, de un producto, tiende a ingresar en la clula, siempre y cuando se localice su polo inverso dentro de la clula. E3isten ciertos microorganismos con altas concentraciones de sal, que siendo marinos, no tan fcilmente puede ingresar agua en su cuerpo. ,os organismos que requieren alta concentracin de sal se llaman %alofilos. ,os organismos que requieren alta presin osmtica se llaman osmofilos.

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4.3. &emperatura ,a mayora de las bacterias, varan ampliamente en las condiciones de temperatura, en el cual se desarrollan y reproducen. ,as formas psicrofilas, crecen a una temperatura menor "* a #< Z'H las formas mesofilas, crecen a una temperatura de &< a &> Z' y las formas termofilas, se desarrollan a una temperatura de *< a 4< Z' . ,a mayora de las bacterias son mesofilos, pues crecen a una temperatura de &< Z', pero la ptima de desarrollo y crecimiento es de #* a&* Z', al igual que otros organismos superiores. ,a adaptacin a las diversas temperaturas, estarn con bas en o relacionada en la concentracin de protenas de los microorganismos. 4.4. (otencial de 4idrgeno 6p4+ ,a mayora de los microorganismos, se reproducen en una cantidad muy estrec%a de acidez y alcalinidad. ,a mayora de los microorganismos crecen a un P5 de 4.< a ;.<, aunque algunos, crecen a un P5 ptimo de #.< 7 !iobacillus t!io/idans8 y otros %asta un P5 de ;.* 7Alcalgenas faciales8. 4.!. 7'geno lgunos microorganismos estn adaptados para vivir en forma aerbica 7necesitan o3igeno8, otros en forma mnima, son aerobios 7se desarrollan en presencia del o3igeno como el acetobacter que forma el vinagre8, y otros pueden vivir en forma aerobia o anaerobia, segMn las condiciones que se presenten. +ncluso otros no requieren el o3igeno o su presencia, si no que utilizan al %idrogeno para su desarrollo, por que son sensibles al o3igeno. ,a to3icidad del o3igeno, se debe a la reduccin de enzimas en la clula 7como la fluvoprotena8, o el per3ido de o3igeno 75#9#8, y el radical mas to3ico del o3igeno el 9A# 7supero3ido8. ,a provisin de o3genos en los cultivos %ermticamente cerrados, se realizan por la agitacin de envase, para producir aire o bien, es introducido el o3igeno por el aire a travs de presin y succin, porque el o3igeno es indispensable para la supervivencia y desarrollo de la clula, esta accin ser para rganos aerbios. Para los rganos anaerobios, el problema es mayor, se debe eliminar el o3igeno en el cultivo pudiendo utilizar el tioglicolato de sodio, posteriormente los tubos de ensayo se sellan con parafina, vaselina.

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.ambin se puede eliminar o3igeno, por otros mtodos qumicos, o colocar el microorganismos en una Oarra anaerobiosis. 4.3. 1utrimentos ,a provisin de un nutrimento, para un determinado microorganismo, se denomina nutricin. ,os nutrimentos, se clasifican de acuerdo a su papel metablico. D nad r-+ d- 7idr#'-n El %idrgeno es indispensable, por que interviene en la o3ido reduccin de la energa. 'arbo%idratos _ %idrogeno \ energa En los rganos aerobios, requieren el 5 a travs del o3igeno gaseosos, y los anaerobios obtienen %idrogeno de productos inorgnicos 7sulfatos, nitratos y fumaratos8, tambin de productos orgnicos. F!-nt- d- nitr#'-n -uc%os constituyentes orgnicos celulares, principalmente las protenas contienen nitrgeno. En las bacterias los nitrgenos constituyen el "<N del peso seco celular. ,os microorganismos contienen su nitrgeno! 25&, 29&, 29#, 2# 7nitrgeno atmosfrico8 )A25&. En general en la preparacin con los cultivos de microorganismos, en relacin a sus nutrientes, deben estar en la siguiente proporcin. ". $e los receptores y aceptores de %idrogeno #gFl #. 6uente de carbono "gFl &. 6uente de nitrgeno "gFl (. -inerales! fsforo, azufre apro3. *<Fl cada uno, 9ligoelementos! 2, Q 'a, -g de <."mgFl *. 6actores decrecimiento 7aminocidos8 pirimidina, purina, *<mgFl cada uno. -uc%as veces para preparar cultivo, no se cuenta a la mano con productos sintticos, por lo que muc%as veces es utilizado el e3tracto de levaduras, los %idrolizados de protenas y otros similares. En muc%os organismos son utilizados los aminocidos, pues estos contienen fuente de nitrgeno, carbono, que sirven de energa. Min-ra$-+

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dems del 5, 2, '. los microorganismos requieren de minerales para su crecimiento. A9!3rl igual que otros compuestos, el azufre es un constituyente celular. En su mayora, se localiza en los grupos T/5 7sulfidrilo8, en las protenas, como al igual que el 2. -uc%os microorganismos, consiguen azufre en las fuentes orgnicas 7)A/58 o 5#/ o lo puede conseguir en los productos inorgnicos como /9( 7sulfato8, para convertirlo en orgnico 7protena8. F#+3 r El fsforo, lo requieren los microorganismos como un componente de .P. En los cidos nucleicos y en las coenzimas como el 2 $ y las fluvinas. El fsforo es introducido a las clulas como un fosfato libre 7P98

A"tiEidad-+ -n9i%Cti"a+ 2umerosos minerales actMan como activadores enzimticos! Por eOemplo, el +on 7-g__8 y el +on ferroso 7fe__8, se encuentran como activadores en las porfirinas 7partculas que se encuentran dentro del nMcleo, permitan absorber luz para activar el fotoperiodo8. El +on -g__ y Q_, son importante para la accin e integracin de los ribosomas. El +on 'a__ indispensable como constituyente de las paredes celulares En la mayor parte de los cultivos de microorganismos, deben estar presentes los estibadores enzimticos como +on o gram positivo -g__, 'a__, 6e__ y el +on positivo Q_.

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Unidad 5. M-ta& $i+%

Mi"r &ian .

!.1. 7rigen de las cepas industriales ,a fuente Mltima de todas las cepas de microorganismos industriales es el ambiente natural. Pero a travs de los aBos, a medida que los procesos microbianos a gran escala se %an ido perfeccionando, un cierto nMmero de cepas industriales se %an ido depositando en las colecciones de cultivos. 'uando se patenta un nuevo proceso industrial, al solicitante de la patente se le requiere para que deposite una cepa capaz de llevar a cabo el proceso, en una coleccin de cultivos reconocida. 5ay varias colecciones de cultivos que actMan de depositarias y suministradoras de cultivos microbianos. unque estas colecciones pueden ser una fuente rpida y fcil de cultivos, es comprensible que la mayora de las compaBas industriales se sientan poco dispuestas a depositar sus meOores cultivos en las colecciones de cultivos. dems de cultivos de microorganismos, muc%as colecciones de cultivos tienen tambin colecciones de varios plsmidos, de genes clonados y de vectores para su uso en ingeniera gentica, de lneas celulares animales para el cultivo de virus animales, y de %ibridomas para producir anticuerpos monoclonales M-G ra d- "-4a+ 'omo %emos indicado, la fuente inicial de un microorganismo industrial es el ambiente natural, pero el aislamiento original se modifica en gran medida en el laboratorio. 'omo resultado de esta

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modificacin, es posible anticipar una meOora progresiva en el rendimiento de un producto. El eOemplo ms espectacular de tal meOora progresiva es el de la penicilina, el antibitico producido por el %ongo Penicillium c!rysogenum. 'uando se produOo por primera vez la penicilina a gran escala, se obtuvieron rendimientos de "A "< 6gFml. lo largo de los aBos, como resultado de la meOora de las cepas acoplada a cambios en el medio y en las condiciones de cultivo, el rendimiento de penicilina aument %asta *<.<<< 6gFml. Es interesante decir que todo este incremento de *<.<<< veces el rendimiento, se obtuvo por mutacin y seleccinH no estuvo implicada ninguna manipulacin gentica. ,a introduccin de nuevas tcnicas genticas %a conducido a posteriores, aunque muc%o ms modestos, incrementos del rendimiento. !.2. (ropiedades de un microorganismo industrial Un microorganismo adecuado para su utilizacin industrial debe producir la sustancia de inters, pero %ay muc%os otros aspectos a considerar. Es preciso disponer del organismo en cultivo a3nico 7puro8, debe ser genticamente estable, y debe crecer en cultivo a gran escala. dems, debe ser posible mantener cultivos del organismo durante un perodo de tiempo largo en el laboratorio y en la planta industrial. El cultivo debe producir preferentemente esporas o alguna otra forma celular reproductora, para que los organismos se puedan inocular fcilmente en los grandes fermentadores. Una caracterstica importante es que el organismo industrial crezca rpidamente y produzca el compuesto deseado en un perodo de tiempo relativamente corto. El organismo, adems, debe ser capaz de crecer en un medio de cultivo lquido y relativamente barato, que se pueda obtener en grandes cantidades. -uc%os procesos microbiolgicos industriales utilizan fuentes carbonadas de desec%o de otras industrias, como principal ingrediente o como suplemento para los medios de cultivo a escala industrial. lgunas de estas fuentes son, por eOemplo, el licor de maceracin de ma2 7un producto rico en nitrgeno y factores de crecimiento8, el suero 7un producto lquido de desec%o de la industria lec%era, que contiene lactosa y sales minerales8 y otros materiales de desec%o industriales, que tienen elevado contenido de carbono orgnico. 7,a utilizacin de estos materiales carbonados de desec%o ayuda tambin a resolver los problemas de eliminacin de residuos, creados por la elevada demanda biolgica de o3geno 709$8 de los residuos orgnicos de desec%o8. dems, un microorganismo industrial debera no ser daBino para las personas ni para los animales y plantas econmicamente importantes. $ebido al gran tamaBo de la poblacin dentro del fermentador y a la imposibilidad prctica de evitar la contaminacin del ambiente fuera del fermentador, un patgeno podra plantear problemas potenciales desastrosos.

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9tro requisito importante de un microorganismo industrial es que sea posible eliminar las clulas microbianas del medio de cultivo con relativa facilidad. En el laboratorio, las clulas se retiran principalmente por centrifugacin, pero la centrifugacin a gran escala puede ser difcil o cara. ,os organismos industriales ms favorables son aquellos que tienen un tamaBo de clula grande, porque las clulas ms grandes se depositan rpidamente en un cultivo o pueden filtrarse fcilmente con materiales de filtro relativamente baratos. ,os preferidos son los %ongos, las levaduras y las bacterias filamentosas. ,as bacterias unicelulares, debido a su pequeBo tamaBo, son difciles de separar del fluido de cultivo. 6inalmente, un microorganismo industrial debera ser susceptible de manipulacin gentica. En microbiologa industrial, el incremento del rendimiento se %a obtenido primordialmente por medio de la mutacin y seleccin. .ambin es deseable que el organismo industrial sea capaz de sufrir recombinacin gentica, bien por un proceso se3ual o por algMn tipo de proceso ase3ual. ,a recombinacin gentica permite incorporar en un solo genoma, caractersticas genticas de ms de un organismo. /in embargo, muc%as cepas industriales se %an meOorado enormemente por mutacin y seleccin, sin el uso de la recombinacin gentica !.3. (roductos industriales !.3.1. 2mpleo de microorganismos en la elaboracin de alimentos

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,os productos microbianos de inters industrial pertenecen a varios tipos principales. +ncluyen a las propias clulas, como por eOemplo la levadura cultivada como alimento, para panadera o para la industria

cervecera y sustancias producidas por las clulas. 'omo eOemplos de estas Mltimas figuran enzimas como la glucosa isomerasa, agentes farmacolgicamente activos como los antibiticos, esteroides y alcaloides, especialidades y aditivos alimentarios como el popular LaspartameL y edulcorante de bebidas, as como productos qumicos tales como el etanol. En la imagen inferior se ofrece un resumen de algunos productos industriales importantes, muc%os de los cuales sern estudiados con detalle ms adelante.

!.4. %etabolitos microbianos nteriormente %ablamos del proceso de crecimiento microbiano y describimos las diversas etapas! fase de latencia, fase logartmica y fase estacionaria. En esta parte vamos a considerar el crecimiento microbiano tal como ocurre en un proceso industrial. 1amos a referirnos en primer lugar, a aquellos procesos en los que el producto deseado es un metabolito microbiano. 5ay dos tipos fundamentales de productos metablicos! primarios y secundarios. Un metabolito primario es el que se forma durante la fase primaria del crecimiento del microorganismo, mientras que un metabolito secundario es el que se forma cerca del final de la fase de crecimiento, frecuentemente cerca de, o en la fase estacionaria del crecimiento. ,as diferencias entre un metabolito primario y un metabolito secundario se ilustran en la imagen de la izquierda. !.4.1. (rimarios

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Un proceso microbiano tpico, en el que el producto se forma durante la fase primaria del crecimiento, es el alco%ol 7etanol8 obtenido por fermentacin (En microbiologa industrial, el trmino fermentacin se refiere a cualquier proceso
microbiano a gran escala, sea o no sea bioqumicamente una fermentacin. De hecho, la mayora de las fermentaciones industriales son aerbicas. El tanque en el cual se lleva a cabo la fermentacin industrial se denomina fermentador y el microorganismo implicado es el agente de la fermentacin.). El etanol

es un producto del metabolismo an3ico de la levadura y de algunas bacterias y se forma como parte del metabolismo de la energa. $ebido a que el crecimiento slo puede tener lugar si puede producirse energa, la formacin de etanol tiene lugar en paralelo con el crecimiento. En la imagen inferior, se muestra una tpica fermentacin alco%lica indicando la formacin de clulas, de etanol, y la utilizacin del azMcar. !.4.2. ,ecundarios Un tipo ms compleOo de productos industriales es aquel en el que el producto deseado no se produce durante la fase primaria del crecimiento sino durante la fase estacionaria. ,os metabolitos producidos durante la fase estacionaria se denominan metabolitos secundarios y son algunos de los metabolitos ms comunes y ms importantes de inters industrial. ,os ms conocidos y ms ampliamente estudiados son los antibiticos y en la imagen inferior puede verse la cintica del proceso de obtencin de la penicilina. -ientras que el metabolismo primario es generalmente similar en todas las clulas, el metabolismo secundario presenta claras diferencias entre un organismo y otro. ,as caractersticas reconocidas del metabolismo secundario son! ". 'ada metabolito secundario slo lo forman relativamente pocos organismos. #. ,os metabolitos secundarios, aparentemente no son esenciales para el crecimiento y la reproduccin. &. ,a formacin de metabolitos secundarios es e3tremadamente dependiente de las condiciones de crecimiento, especialmente de la composicin del medio. 'on frecuencia, se produce la represin de la formacin del metabolito secundario. (. 'on frecuencia, los metabolitos secundarios se producen como un grupo de estructuras estrec%amente relacionadas. Por eOemplo, se %a visto que una sola cepa de una especia del )treptomyces produce &# antibiticos distintos pero relacionados, del tipo antraciclina. *. 'on frecuencia es posible obtener una espectacular superproduccin de metabolitos secundarios, en tanto que los metabolitos primarios, ligados como estn al metabolismo primario, usualmente no se pueden superproducir de una manera tan espectacular.

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Tr 3 3a+- - idi 3a+-. En el metabolismo secundario, las dos fases distintas del metabolismo se denominan trofofase e idiofase. ,a trofofase es la fase de crecimiento 7el prefiOo trofos, significa LcrecimientoL8 mientras que la fase de produccin de metabolitos es la idiofase. /i estamos tratando con un metabolito secundario debemos asegurar que durante la trofofase se proporcionen las condiciones apropiadas para un e3celente crecimiento y que las condiciones se alteren adecuadamente y en el momento oportuno para que la formacin del producto sea e3celente. En el metabolismo secundario, la produccin en cuestin puede no derivarse del sustrato primario del crecimiento, sino a partir de un producto que l mismo form a partir del sustrato primario del crecimiento. Por tanto, el metabolito secundario se produce, generalmente, a partir de varios productos intermedios que se acumulan, bien en el medio de cultivo o bien en las clulas, durante el metabolismo primario. Una caracterstica de los metabolitos secundarios es que las enzimas implicadas en la produccin del metabolito secundario estn reguladas separadamente de las enzimas del metabolismo primario. En algunos casos se %an identificado inductores especficos de la produccin de metabolitos secundarios. Por eOemplo, se %a identificado un inductor especfico de la produccin de estreptomicina, un compuesto denominado 6actor .

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R-$a"i#n -ntr- -$ %-ta& $i+% 4ri%ari 0 -$ +-"!ndari . ,a mayora de los metabolitos secundarios son molculas orgnicas compleOas que para su formacin requieren un gran nMmero de reacciones enzimticas especficas. /e sabe, por eOemplo, que en la sntesis del antibitico tetraciclina estn implicados al menos ># pasos enzimticos separados y ms de #* en la sntesis de la eritromicina, y que ninguna de estas reacciones tiene lugar durante el metabolismo primario. /in embargo, las vas metablicas de estos metabolitos secundarios arrancan del metabolismo primario porque los materiales de partida para el metabolismo secundario vienen de las vas biosintticas principales. -uc%os metabolitos secundarios estructuralmente compleOos, se originan a partir de precursores estructuralmente muy similares. 80
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!.!. Control del crecimiento microbiano en alimentos ,a esterilizacin elimina completamente todos los microorganismos, incluidos los virus. ,a desinfeccin 7%igienizacin8 reduce el nMmero de patgenos %asta un nivel aceptable. ,a descontaminacin %ace que un instrumento o superficie que %aba sido contaminado previamente vuelva a ser estril. ,a antisepsia trata los teOidos vivos para destruir o in%ibir el crecimiento microbiano. ,a muerte microbiana tiene lugar cuando una clula no puede dividirse para dar lugar a nuevas clulas. $e la misma manera que el crecimiento microbiano la muerte microbiana se define con respecto a toda la poblacin, no en relacin a la muerte de las clulas individuales. !.!.1. Control .umico !.!.1.1. Acti idad antimicrobiana ,os agentes qumicos que matan los microorganismos se denominan germicidas. ,os germicidas que se utilizan para tratar obOetos inanimados se llaman desinfectantes. ,os germicidas que se aplican sobre teOidos vivos se denominan antispticos. ,os germiostticos son agentes qumicos que in%iben el crecimiento bacteriano. La +-$-""i#n d- !n '-r%i"ida En la seleccin de un germicida, %ay que considerar si daBar el teOido o el obOeto que se va a tratar, si lograr controlar el microorganismo deseado y si el propsito del tratamiento es controlar o eliminar todos los microorganismos. ,os germicidas se clasifican, de acuerdo con su actividad, en germicidas de alta actividad, baOa actividad y actividad intermedia. ,a eleccin de un germicida depende de la presencia de otras sustancias, como por eOemplo la sangre o las %eces, porque estos materiales poseen protenas protectoras. El coste puede ser otro factor a considerar. EEa$!a"i#n d- $ + '-r%i"ida+ ,os germicidas se evalMan comparando su actividad frente al fenol. El coeficiente de fenol es la relacin que e3iste entre la dilucin mas alta del fenol que mata un microorganismo en "< minutos, dividida por la dilucin ms alta del germicida que produce el mismo efecto. ,a actividad de un germicida frente a un microorganismo especfico se determina mediante el mtodo del disco de papel o el test de 81
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dilucin. ,a presencia y el tamaBo de un %alo de in%ibicin del crecimiento bacteriano, alrededor del disco impregnado con el germicida, indicar la actividad del mismo. En el test de dilucin, se inocula un organismo control en las soluciones seriadas del germicidaH a continuacin, se incuban los tobos. ,a actividad del germicida viene indicada por la dilucin ms alta del germicida, que permanece transparente despus del periodo de incubacin. L + ti4 + d- '-r%i"ida+ 0 +!+ %-"ani+% + d- a""i#n El fenol es un benceno con un grupo %idro3ilo. ,os compuestos fenlicos tienen la misma estructura y otros grupos adicionalesH todos ellos actMan desnaturalizando las protenas. ,os compuestos fenlicos tambin actMan /obre los lpidos. El %e3aclorofeno es un compuesto fenlico que %a sido reemplazado por la clor%e3idina, menos t3ica para la especie %umana. ,os alco%oles son compuestos con un grupo %idro3ilo. $ic%o compuestos matan los microorganismos porque desnaturalizan las protenas y desorganizan los lpidos de sus membranas plasmticas. 2o actMan sobre las endosporal. El etanol y el isopropanol son utilizados como desinfectantes y antispticos clnicos. ,os %algenos son agentes o3idantes. Estos compuestos inactivan las enzimas mediante la o3idacin de ciertos grupos funcionales. El iodo es un antisptico y el cloro un desinfectante. El per3ido de %idrgeno no es un %algeno pero actMa por el mismo mecanismo de accin. /e utiliza como antisptico dbil para la limpieza de %eridas y para desinfectar material mdico y lentes de contacto. ,as sales de los metales pesados reaccionan con los grupos sulf%idrilo de las protenas y LenvenenanL las enzimasH por lo tanto, matan los microorganismos. El -ertiolato y el -ercurocromo, compuestos orgnicos que contienen mercurio, son antispticos utilizados en los tratamientos de la piel y las mucosas. ,os surfactantes son compuestos que presentan en sus molculas una parte %idroflica y otra parte %idrofbicaH estos agentes penetran a travs de las sustancias oleosas suspendidas en agua y dan lugar a emulsiones. ,os surfactantes no matan los microorganismos pero facilitan su eliminacin mediante el lavado con agua. ,as sales de amonio cuaternario son poderosos agentes germicidas de accin surfactante. /on compuestos catinicos que matan todo tipo de microorganismos celulares y tambin los virus que tienen membranasH para el tratamiento de bacterias =ram negativas se necesitan mayores concentraciones de estos detergentes.

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,os agentes aninicos son desinfectantes de tipo medio que se utilizan generalmente para la desinfeccin de las mesas de trabaOo, en los laboratorios de microbiologa. ,os agentes alquilantes actMan aBadiendo pequeBas cadenas de tomos de carbono a las enzimas, que como consecuencia quedan inactivadas, lo que ocasiona la muerte de las clulas. El formalde%do, la formalina y el glutaralde%do son algunos de estos compuestos. El 3ido de etileno es un compuesto gaseoso que se utiliza como agente esterilizante para el tratamiento de material termosesible y obOetos voluminosos que no pueden ser esterilizados mediante otros sistemas. /in embargo, es un compuesto muy t3ico para la especie %umana. ,os conservantes qumicos se utilizan de forma rutinaria. Por eOemplo, el propionato clcico se utiliza para conservar el pan, que de este modo puede durar casi indefinidamente. !.!.2. Control biolgico !.!.2.1. Antimicrobianos naturales ,a temperatura es el factor medioambiental que ms a menudo se utiliza para conservar los alimentos. El enlatado es el mtodo ms antiguo. $os factores! el tiempo y la temperatura, determinan la efectividad del tratamiento en los alimentos enlatados. ,a refrigeracin 7alrededor de * <'8 suele ser suficiente para detener el crecimiento de la mayora de los microorganismos. /in embargo, los microorganismos psierfilos pueden crecer a dic%a temperatura. ,a ventaOa del calor es que penetra en los obOetos y, por tanto, puede matar todos los microorganismos 7algunos tratamientos solamente actMan sobre las superficies de los obOetos8. /e puede emplear calor seco 7flameado directo y %orno de aire caliente8 o %Mmedo 7ebullicin y esterilizacin mediante autoclave8. El calor mata porque desnaturaliza las protenas. ,a baOa temperatura es un tratamiento microbisostaticoH no esteriliza. El c%oque fro, enfriamiento repentino a *<', puede matar a la mayora de las clulas de un cultivo que se encuentre en crecimiento activo. ,a pasteurizacin es un tratamiento por calor que controla los microorganismos, pero no es un mtodo de esterilizacinH produce unos daBos mnimos sobre el alimento tratado. ,a congelacin mata a la mayora de las bacterias, pero las supervivientes permanecen vivas durante largos perodos de tiempo en un estado congelado. ,a congelacin rpida es un sistema para conservar los cultivos bacterianos 83
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E3isten dos formas de radiacin que matan las bacteriasH la luz ultravioleta 7U18 y la radiacin ionizante 7rayos P y rayos gamma8. ,a luz U1 mata los microorganismos mientras porque que la radiacin ionizante los destruye porque %ace que los tomos e3pulsen electrones. /olamente se esterilizan las superficies de los obOetos. ,a filtracin no mata los microorganismos simplemente los elimina de un material. 2o es un mtodo de esterilizacin propiamente dic%o, porque los virus pueden pasar a travs de los poros del filtro. ,a desecacin es la eliminacin del agua mediante evaporacion o sublimacin 7eliminacin del agua congelada mediante vacio. ,a desecacin no esteriliza, pero ayuda a controlar los microorganismos porque elimina un nutriente esencial, el agua. El incremento de la presin osmtica, mediante la adicin de sal o azucar, se utiliza para conservar alimentos. ,a desecacin y la salazn %an sido mtodos utilizados durante siglos para conservar la carne, el pescado y las frutas. mbos mtodos llevan consigo la eliminacin del agua, que es esencial para la supervivencia microbiana. ,os valores de p5 baOos ayudan a conservar los alimentos porque detienen el crecimiento de muc%os microorganismos. ,a adicin de vinagre a los alimentos es un mtodo para disminuir el p5.

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