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GLICMIA E GLICOSRIA

A glucose o principal acar existente no sangue, que serve como "fonte de energia" aos
tecidos. A glicmia a taxa de glucose existente no sangue, e o seu nvel em geral mantido
dentro duma gama de valores considerados normais. Glicosria refere-se presena de
glucose na urina e sempre anormal.

Mtodos Enzimticos de determinao das concentraes de glucose
Usam enzimas especficos, habitualmente a glucose oxidase. Na aula prtica ir utilizar um
mtodo deste tipo.
A glucose oxidase cataliza a oxidao da glucose em cido glucnico, com formao de
perxido de hidrognio (H
2
O
2
). Este reage com o fenol e 4-aminofenazona, na presena da
peroxidase, com formao de um composto vermelho-violeta, a quinoneimina:

Glucose Oxidase
D-Glucose + O
2
+ H
2
O D-Gluconato (cido glucnico) + H
2
O
2


Peroxidase
H
2
O
2
+ 4-Aminofenazona + Fenol Quinoneimina + 4H
2
O

A intensidade da colorao proporcional quantidade de glucose contida na soluo.
um mtodo sensvel e especfico para o doseamento da glucose.

Mtodos enzimticos semi-quantitativos (mtodos de comparao)
Trata-se de testes enzimticos rpidos, sob a forma de fitas contendo a glucose-oxidase e
peroxidases, indispensveis para o auto-controlo dos doentes diabticos. So usados tanto
para o sangue (ex: Glucostix, BMtest), como para a urina (ex: Combur, Ketodiastix).
Nestes mtodos basta uma gota de sangue/ urina para estimar a concentrao da glucose, por
comparao com uma escala de cores.
No caso do sangue, h actualmente disponvel no mercado uma grande variedade de
dispositivos que fazem a leitura da glicmia automaticamente.
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A urina habitualmente avaliada por comparao de cores a olho n, embora tambm j
existam aparelhos de leitura automtica.

Glicmia
Os valores normais da glicmia variam com as refeies, o stress e o local de colheita:
O valor normal em jejum de 8h de 0,5 a 1,1 g/ l ou 50-110 mg% (mg/100ml) ou seja 2,8
6,1 mmol/ l (mM).
Em situaes de stress, ex: traumatismos graves, pode verificar-se hiperglicmia por
libertao de adrenalina e cortisol.
Na prtica clnica, a determinao da glicmia faz-se em dois grupos de circunstncias:
1- Suspeita de hiperglicmia
Esta surge genericamente por:
a) dfice de aco da insulina diabetes mellitus
b) exagero de aco de uma ou mais hormonas da contra-regulao (ex: sndrome de
Cushing cortisol , hipertiroidismo tiroxina).
A diabetes mellitus uma doena crnica provocada por alteraes do metabolismo de
hidratos de carbono, lpidos e protenas, resultantes do dfice de insulina. Manifesta-se
clinicamente por: polifagia, polidipsia (sede excessiva), poliria e perda de peso.
Define-se pela existncia de glicmia em jejum 126mg/dl ou 200mg/dl em determinao
ocasional ou 2h aps teste de tolerncia glucose oral (i.e. a ingesto de 75g de glucose em
200ml de gua, no adulto).
Na diabetes mellitus, a hiperglicmia deve-se diminuio da captao de glucose pelas
clulas dos tecidos perifricos, particularmente do tecido muscular e do tecido adiposo, por
dfice de aco da insulina.
Distinguem-se dois tipos de Diabetes:
Diabetes Tipo 1 por dfice da produo de insulina- mais frequente no jovem e
insulinodependente.
Diabetes do Tipo 2 por resistncia aco da insulina - mais frequente no adulto e
habitualmente controlvel com antidiabticos orais, necessitando de insulina ocasionalmente
ou mais tardiamente na sua evoluo.

2- Suspeita de hipoglicmia
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Num indivduo normal, os mecanismos de regulao da glicmia so muito eficazes, de modo
que mesmo num jejum prolongado/ greve de fome no se verifica hipoglicma. A
hipoglicmia sempre uma situao anormal, cuja causa deve ser investigada, sobretudo se
recorrente. Clinicamente manifesta-se por dois grupos de sinais/sintomas: glicopnicos, por
falta de glucose cerebral (prostrao, tremores, convulses, coma) e adrernrgicos, por
estimulao da libertao de adrenalina (palidez, hipersudorese, taquicardia).
Qualquer alterao dos mecanismos produtores de glucose sangunea (glicogenlise,
gluconeognese) ou fornecedores de fontes de energia alternativas, poupando glucose,
nomeadamente no jejum (oxidao dos cidos gordos, cetognese) pode conduzir a
hipoglicmia. Essa alterao pode dever-se a dfice das reservas (ex: de glicognio, como nos
recm-nascidos prematuros) e/ou imaturidade dos sistemas enzimticos, a dfice enzimtico
hereditrio ou adquirido (ex: devido a uma doena heptica grave) ou a alterao hormonal
(excesso de secreo de insulina hiperinsulinismo- ou diminuio das hormonas da contra-
regulao, como o cortisol ou a hormona do crescimento). O consumo de lcool pode causar
hipoglicmia devido ao efeito inibitrio dos metabolitos do etanol sobre o ciclo de Krebs, a
gluconeognese e a oxidao dos cidos gordos, particularmente nas crianas (por excesso de
NADH/NAD
+
).

Glicosria
Normalmente, no se verifica a presena de glucose na urina. A glucose tem dimenses
pequenas e hidrossolvel, pelo que a sua concentrao no filtrado glomerular igual do
plasma. Para concentraes at 180-200mg/dl (limiar renal para a glucose), toda a glucose
filtrada reabsorvida no tbulo contornado proximal. Para concentraes superiores, que
ultrapassem a capacidade de reabsoro tubular, surge glucosria: glucosria por
hiperglicmia. Em caso de leso tubular renal proximal pode verificar-se glucosria, mesmo
com valores de glicmia normais, por incapacidade de reabsoro da glucose filtrada no
glomrulo: glucosria de causa renal.
Em qualquer circunstncia, a glucose, pelo seu efeito osmtico, arrasta grandes volumes de
gua, aumentando assim o dbito urinrio -poliria- com risco de desidratao.
Na prtica clnica, a determinao da glicosuria faz-se em dois grupos de circunstncias:
Suspeita de glicosria secundria hiperglicmia
- Diabetes mellitus: hiperglicmia associa-se glucosria e cetonria. A anlise da urina
frequentemente o primeiro teste a apontar o diagnstico. A glucosria no actualmente
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usada no controlo do doente diabtico, uma vez que s surge quando ultrapassado o limiar
renal para a glucose (o objectivo do controlo a manuteno da glicmia em valores prximos
do normal) e, por outro lado, porque aquele limiar apresenta grande variao individual. Para
esse efeito, usa-se a determinao da glicmia capilar ao longo do dia.
- Hiperglicmia de outras causas: nomeadamente durante a administrao de soros
intravenosos com concentrao elevada de glucose.
Suspeita de leso tubular renal proximal:
- glicosria associa-se aumento da excreo urinria de outras substncias normalmente a
reabsorvidas, com os aminocidos, o bicarbonato, o fsforo e o cido rico.























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PROTOCOLO - MTODO ENZIMTICO DE DETERMINAO DA
GLICMIA EM PLASMA OU SORO SANGUNEO
(Kit Randox Glucose GOD/PAP)

TER SUA DISPOSIO:
Amostra: Soro ou plasma isolado de sangue colhido em heparina ou EDTA. A glucose
estvel durante 24 horas a 2-8 C desde que o soro ou plasma sejam preparados at 30 min
depois da colheita de sangue.
Padro: Glucose 5,55 mM (100 mg/dl) (2-8 C)
Reagente: Tampo fosfato (50 mM, pH 7,0), tampo MOPS (50 mM, pH7,0), Fenol (11
mM), 4-Aminofenazona (0,77 mM), Glucose oxidase (> 1,5 kU/l), e peroxidase (> 1,5 kU/l)
(2-8 C).

PROCEDIMENTO:
1. Para 3 cuvettes de espectrofotmetro, pipete o seguinte:
Branco Padro Amostra
Padro ----- 20 l -----
Amostra ----- ----- 20 l
gua destilada 20 l
Reagente 2 ml 2 ml 2 ml
Abs ( = 500 nm)

2. Misture e incubar durante 10 minutos temperatura ambiente.
3. Leia a absorvncia da amostra e do padro, contra o branco (zero), a 500 nm.

Nota: A intensidade de cr estvel durante 60 minutos.

Linearidade: O mtodo linear at um concentrao de glucose 22,2 mM (400 mg%). Acima
desta concentrao, as amostras devero ser diludas 1:2 com gua destilada.
Especificidade: Este mtodo no influenciado pelo cido rico, cido ascrbico, glutationa,
anticoagulantes, bilirrubina e creatinina quando presentes em concentraes diludas.


Clculos: DO (amostra)
[Glucose] = X Concentrao do Padro
DO (padro)

Valores referncia: 4,2 6,4 mM ou 75 115 mg/dl.