Guia de Prácticas - MicrobiologiaMedica

GUIA DE TRABAJOS PRACTICOS
Dr. Nicanor Domnguez Navarrete

Coorinaor e! cur"o
A#O $%&$
A!umno' .........................................................
URP. Facultad de Medicina
INSTRUCCIONES GENERA(ES
&.) Recomenacione"
Las personas que tienen que desarrollar alguna actividad dentro de un laboratorio
manipulando materiales biolgicos, tejidos o microorganismos, deben observan
un comportamiento denominado Normas de Bioseguridad, que son un
conjunto de disposiciones orientadas a proteger la salud evitar la contaminacin
de las personas.
La contencin primaria es la proteccin del personal del medio ambiente
inmediato contra la e!posicin de agentes in"ecciosos, lo que se logra con el
manejo de buena t#cnica microbiolgica, el uso apropiado de equipos de
seguridad la prevencin con vacunas.
La contencin secundaria se re"iere a reducir la e!posicin del personal del
laboratorio de otras personas a agentes potencialmente peligrosos prevenir el
escape de #stos al e!terior.
a.$ Usar mandil de mangas largas, que cubra la ropa de vestir
b.$ %o est& permitido comer, beber, "umar ni aplicarse cosm#ticos.
c.$ 'esarrollar el (&bito de mantener las manos lejos de la boca, nari), ojos cara,
para evitar la autoinoculacin.
d.$ Utili)ar guantes cuando se manipulan l*quidos org&nicos.
e.$ +obre la mesa de trabajo slo se podr& ubicar el cuaderno de notas.
".$ 'isponer siempre de un bocal con desin"ectante ,Fenol al - ./ para descartar el
material de vidrio reusable.
g.$ 0l "inali)ar los trabajos pr&cticos, lavarse las manos con jabn.
$.) *ane+o e! micro"co,io
1n microbiolog*a el manejo del microscopio es de gran auda para el reconocimiento
de los microorganismos. 1n preparaciones en "resco se utili)an los objetivos secos
de 234 534 en preparaciones coloreadas el objetivo de inmersin de 2334, el
cual necesita de aceite de cedro en la inter"ase objetivo6portaobjeto.
'espu#s de usar el microscopio debe (acerse una limpie)a con alco(ol isoprop*lico.

-.) *ani,u!aci.n e cu!tivo"
Los cultivos bacterianos deben ser tratados con el maor cuidado, para evitar tanto la
contaminacin del operador como la de los cultivos mismos, recomendando7
a.$ 8rabajar siempre "rente a la llama de un mec(ero
b.$ Mantener los tubos en posicin vertical tapados
c.$ 9olocar las placas petri en posicin invertida, para evitar que el agua de
condensacin contamine la super"icie mantenerlas cerradas.
d.$ 1liminar los portaobjetos laminillas en soluciones desin"ectantes.
e.$ 1l asa de siembra debe ser esterili)ada antes despu#s de su uso
:
".$ 8odos los cultivos deben tener las anotaciones siguientes7 nombre del germen,
nombre del alumno, n;mero de mesa "ec(a.
g.$ 1n caso de accidente durante el trabajo, avisar al pro"esor.
TE*A %& ' E/A*EN EN 0RESCO
Introucci.n7
1l e!amen en "resco tiene por "inalidad apreciar el tama<o de las bacterias, que es del
orden de la micra ,mil#sima de mil*metro/, su relacin con las c#lulas (umanas
algunas caracter*sticas de inter#s para su identi"icacin, como la movilidad o
presencia de c&psula.
1ste estudio se reali)a mientras las bacterias se encuentran viables, en cultivos
l*quidos jvenes ,menos de 2= (oras de incubacin/ o en muestras biolgicas reci#n
obtenidas.
*ateria!e"7
+uspensin de me)cla de bacterias, levaduras (emat*es
L&minas portaobjetos laminillas cubreobjetos
+uero "isiolgico ,9l%a =.- .o/ en gotero
0sa de siembra o microgotero
Proceimiento'
8omar dos a tres asadas o una microgota de la me)cla bacteriana depositarla en un
Porta objetos. 9ubrir la preparacin con un cubreobjetos.
>bservar al microscopio, utili)ando objetivo de 53 4
Re"u!tao"7
0notar la proporcin del tama<o de las c#lulas (umanas las bacterias.
0preciar el tipo de movimiento bacteriano7 vibratorio, polar o peritrico.

?
TE*A %$ ' OBSER1ACI2N DE CAPSU(A
Introucci.n7
0lgunos microorganismos tienen la capacidad de producir una estructura que rodea a
la bacteria, denominada c&psula, que le otorga un "actor de virulencia al germen, a
que impide la "agocitosis.
1sta estructura se puede observar con "acilidad en "orma indirecta utili)ando tinta
c(ina, que no penetra en las bacterias capsuladas, dejando un (alo transparente
alrededor del microorganismo.
*ateria!e"7
2. +uspensin de cultivo de Cyptococcus n.
:. +olucin de tinta c(ina
?. L&minas portaobjetos laminillas cubreobjetos
Proceimiento7
2. 'epositar una microgota o asada de tinta c(ina sobre un portaobjetos.
:. 'epositar mu junto a la anterior una microgota o asada de la suspensin del
cultivo de Ciptococcus.n
?. +eguidamente colocar una laminilla cubreobjetos sobre ambas muestras, de tal
manera que se junten obtener una gradiente de la me)cla.
5. >bservar al microscopio con objetivo de 53 4
Re"u!tao"'
Registrar las levaduras redondeadas o gemadas de los 9rptococcus n., el (alo
transparente que los rodea en un "ondo oscuro proporcionado por las part*culas de
tinta c(ina.
5
TE*A %- ' CO(ORACI2N DE A3U( DE *ETI(ENO
Introucci.n7
La coloracin de las bacterias permite estudiar la mor"olog*a ,bacilar, redondeada o
espirilar/ las di"erentes agrupaciones de ellas ,pares, tetradas, racimos, cadenas/,
caracter*sticas que son ;tiles para su identi"icacin.
Los colorantes con radical &cido coloreado ,eosina, "ucsina &cida, a)ul de anilina
"luoresce*na/ colorean el protoplasma de las c#lulas. 1n cambio los colorantes con
radical b&sico coloreado ,a)ul de metileno, violeta de genciana, "ucsina b&sica,
sa"ranina/ ti<en el n;cleo de las c#lulas.
La c#lula bacteriana es rica en &cido nucleico, el que se combina con colorantes
b&sicos. Los colorantes &cidos no ti<en a las c#lulas bacterianas, son usados como
contraste.
Para proceder a colorear a las bacterias es necesario (acer un frotis, que es el
resultado de depositar la muestra sobre un portaobjetos "ijarla con calor suave.
9uando el material es l*quido se deposita una microgota o asada cuando es slido
,agar/ se debe reali)ar una suspensin ligera de la colonia en solucin salina luego
"ijarla.
+e denomina coloracin simple cuando se emplea un slo colorante compuesta
cuando se emplean varios colorantes.
*ateria!e"7
2. +uspensin de me)cla bacteriana
:. L&minas portaobjetos
?. 0sa de siembra
5. +olucin de colorante 0)ul de metileno
-. Microscopio con objetivo de inmersin
Proceimiento7
2. Preparar un "rotis a partir de la me)cla bacteriana. Fijarlo con calor suave
:. 9ubrir la preparacin con 0)ul de Metileno dejarlo actuar durante 23 minutos
?. Lavar la preparacin con agua corriente. +ecar la l&mina con calor suave
5. >bservar al microscopio con objetivo 233!, a<adiendo una peque<a gota de
aceite de inmersin.
Re"u!tao" 7
@acer esquema de las diversas "ormas bacterianas agrupaciones observadas.
-
TE*A %4 ' CO(ORACI2N DE 1AGO
Introucci.n7
Las espiroquetas no toman con "acilidad los colorantes usados con "recuencia en
microbiolog*a. Para colorearlas se emplean las t#cnicas de Aiemsa o impregnacin
arg#ntica. Una t#cnica sencilla es la de 1ago, que se describe.
*ateria!e"7
2. Mondadientes
:. +olucin de Mercuro cromo al : . , mertiolate coloreado /
?. +olucin de Bioleta de Aenciana al 2 .
5. L&minas portaobjetos.
Proceimiento7
2. 9on la auda de un mondadientes obtener una muestra de sarro dental (acer un
"rotis.
:. 'ejar secar al ambiente. 9ubrir con mercuro cromo dejar actuar durante ?
minutos
?. Lavar con agua corriente. 9ubrir con Bioleta de Aenciana dejar actuar durante
? minutos.
5. Lavar con agua corriente secar.
-. >bservar al microcopio con objetivo de inmersin.
Re"u!tao"7
@acer esquema de las diversas mor"olog*as bacterianas observadas, buscar en
especial las "usi"ormes espirilares.

C
>D+1RB09EF% '1 1+P>R0+7
0lgunos grupos bacterianos, como el 9lostridium, tienen la capacidad de "ormar
esporas, estructura que le otorga resistencia supervivencia en condiciones
ambientales adversas ,temperatura, nutricionales, etc./.
>bservaremos "rotices de (eces de pacientes con diarrea, coloreados con Aram.

CUESTIONARIO'
2. GHu# bacterias poseen c&psula cu&l es su "uncinI. Procedimientos para
observarla.
:. +e<ale los tipos de movilidad bacteriana su relacin a la posicin de los "lagelos.
?. 1squematice las di"erentes agrupaciones de los cocos.
5. Las espiroquetas, Ga que g#neros agrupaI
-. G'e qu# color se ti<eron las espora qu# ubicacin tuvieronI.
'1+0RR>LL>

J
TE*A %5 ' CO(ORACI2N DE GRA*
Introucci.n7
1s la coloracin mas empleada en bacteriolog*a, puesto que permite agrupar a las
bacterias en dos categor*as, las Aram Positivas que son las que retienen el colorante
violeta de genciana las Aram %egativas que pierden el colorante primario por
accin del decolorante, para luego te<irse con un colorante b&sico de contraste ,rojo/.
1sta coloracin tiene relacin con la composicin qu*mica de la pared se describen
varias modi"icaciones.
*ateria!e"7
2. +uspensin de me)cla bacteriana
:. Kuego de colorantes para Aram 7
a. Bioleta de Aenciana al 2 .
b. +olucin de Lodo
c. 'ecolorante 7 alco(ol$acetona al -3.
d. Fucsina b&sica al 3.2 .
?. L&minas portaobjetos
Proceimiento7
2. @acer un "rotis a partir de la me)cla bacteriana. Fijarla con calor suave.
:. 9ubrir la l&mina con violeta de genciana. 'ejar actuar por ?3 segundos
?. Lavar con agua. 9ubrir con solucin Lodo. 'ejar actuar por ?3 segundos
5. 'ecolorar con 0lco(ol$0cetona (aciendo movimientos de vaiven durante die)
segundos
-. Lavar con agua. 9ubrir con solucin de Fucsina. 'ejar actuar durante ?3
segundos
C. Lavar la l&mina con agua +ecar.
J. >bservar al microscopio con objetivo de inmersin.
Re"u!tao"7
@acer esquema de la mor"olog*a coloracin de las bacterias. Las Aram positivas
se ti<en de color a)ul violeta las Aram negativas de color rojo.

=
TE*A %6 ' CO(ORACI2N DE 3IE7()NEE(SEN
Introucci.n7
0lgunos grupos bacterianos poseen un elevado contenido de l*pidos en su estructura,
que impide tomar los colorantes en soluciones acuosas. Las Mycobacterias las
Nocardias tienen #sta propiedad.
La coloracin de Mie(l$%eelsen utili)a "ucsina con "enol la auda del calor para
que el colorante penetre en la pared celular. 9omo decolorante emplea una me)cla de
alco(ol con &cido clor(*drico. Luego las bacterias que retienen el colorante se les
denomina &cido alco(ol resistentes.
9oloracin ;til para el diagnstico de en"ermedades como la tuberculosis y la lepra.
*ateria!e"7
2. Kuego de colorantes para Mie(l$%eelsen
a. +olucin de Fucsina "enicada
b. +olucin de alco(ol$&cido al ? .
c. +olucin de 0)ul de metileno -.
d. Mec(ero de alco(ol
:. Muestra de esputo
Proceimiento7
2. @acer un "rotis a partir de la muestra de esputo. Fijarlo al calor suave.
:. 9olocar el portaobjetos con "rotis sobre un soporte en el lavatorio
?. 9ubrir la l&mina con colorante Fucsina "enicada
5. 9on la auda del mec(ero de alco(ol, calentar suavemente la preparacin (asta
que se desprendan vapores, retirar la llama repetir por tres veces #ste
procedimiento. 1l colorante %> debe (ervir ni secarse.
-. 1liminar el colorante lavar la l&mina con agua.
C. 'ecolorar con alco(ol$&cido, cubriendo la preparacin (acer movimientos de
vaiven durante 2- a ?3 segundos, (asta que no se desprenda colorante.
J. Lavar con agua cubrir la l&mina con solucin 0)ul de metileno. 'ejar actuar
durante 23 minutos.
=. Lavar con agua +ecar.
N. >bservar al microscopio con objetivo de inmersin
Re"u!tao"7
@acer esquema de las estructuras celulares observadas de color a)ul resaltar los
bacilos &cido resistentes de color rojo con mor"olog*a caracter*stica.
N

CUESTIONARIO7
2. 'esarrolle el "undamento de la coloracin de Aram
:. +e<ale cuatro g#neros bacterianos Aram positivos cuatro Aram negativos
?. Hu# bacterias no toman la coloracin de AramI
5. +e<ale las di"erencias entre la coloracin de Aram de Mie(l %eelsenI
-. 'escriba usted la mor"olog*a del bacilo tuberculoso observado7
'1+0RR>LL>
23
TE*A %8 ' *ETODOS DE ESTUDIO DE (AS BACTERIAS
Introucci.n7
Las bacterias son capaces de desarrollar en medios inertes provistos de sustancias
nutritivas como compuestos nitrogenados, inorg&nicos, energ#ticos, concentracin
apropiada de (idrogeniones, (umedad, condiciones ambientales de temperatura,
o!*geno, an(*drido carbnico, etc.
'e acuerdo a la consistencia los medios de cultivo se agrupan en l*quidos, slidos
semislidos. Los medios l*quidos se emplean como enriquecimiento para incrementar
la poblacin bacteriana el desarrollo se observa por turbide). 1n cambio el medio
de cultivo slido se obtiene a<adiendo el compuesto agar, que a temperatura de -3O
9 mantiene la consistencia l*quida se dispensa en placas petri, que luego a
temperatura ambiente se solidi"ica. 1stas se utili)an para separar las bacterias
obtener colonias, cuas caracter*sticas son propias de cada g#nero bacteriano.
+eg;n la necesidad de o!*geno las bacterias pueden ser 0erobias estrictas que
desarrollan slo en presencia de o!*geno, 0naerobias "acultativas que crecen en
presencia o ausencia de o!*geno, 0naerobias estrictas que crecen slo en ausencia de
o!*geno las Microaer"ilas que desarrollan en tensiones bajas de o!*geno.
T9cnica e "iem:ra7 es el procedimiento por el cual se pone en contacto el
microorganismo con el medio de cultivo, para que en condiciones ptimas de
nutricin, temperatura tiempo pueda desarrollarse la bacteria in vitro. 1l
dispositivo empleado se denomina asa de siembra, asa de platino o asa de
Polle se usan diversos m#todos7 puntura, estr*a, agotamiento, etc.
*eta:o!i"mo :acteriano7
Los microorganismos reali)an diversas reacciones bioqu*micas para su crecimiento.
0lgunas de estas reacciones corresponden a sistemas en)im&ticos codi"icados por
genes cromosmicos, que permite la identi"icacin del g#nero o especie bacteriano.
>tras veces e!cretan compuestos, en)imas o to!inas, que son da<inos para el
organismo (umano amerita demostrar su presencia, para identi"icar la especie
patgena.
La ubicacin de un grupo bacteriano como Familia, A#nero o 1specie depende en
gran medida de la capacidad metablica "rente a sustratos de"inidos ,marcadores/ la
"ormacin de compuestos qu*micos intermediarios espec*"icos. 0 #ste estudio se
denomina biotipo bacteriano.
1n la pr&ctica se demostrar& algunas reacciones bioqu*micas7
22
Utili)acin del carbo(idrato lactosa, la bacteria lo trans"orma en &cido pir;vico, que
acidi"ica el medio, cambio de p@ que puede ser demostrado a su ve), por cambio de
color a amarillo del indicador Rojo de "enol.
Utili)acin del amino&cido tripto"ano, produciendo &cido pir;vico, amon*aco, otros
metabolitos como Endol, #ste ;ltimo se demuestra su presencia porque reacciona con
el p$dimetilamino ben)alde(ido originando un compuesto de color rojo soluble en
alco(ol am*lico.
Produccin de to!inas7 algunas bacterias elaboran en)imas o sustancias que destruen
c#lulas, cemento intercelular o alteran la coagulacin, acciones que "avorecen la
virulencia. La actividad (emol*tica se puede demostrar in vitro, a<adiendo sangre al
medio de cultivo, observando (alos de (emlisis alrededor de las colonias.

*ateria!e"7
2. Placas petri con cultivos de Bacillus subtilis, Escherichia coli
Staphylococcus
:. 8ubos con medio de cultivo l*quido de Staphylococcus sp. Bacillus subtilis.
?. 8ubos con medio semislido sembrados por puntura con Escherichia coli
Pseudomona .
5. 8ubos con Lactosa e indicador, sembrado con Escherichia coli y Pseudomonas
-. 8ubos con caldo peptonado ,tripto"ano/ sembrados con Escherichia coli y
Pseudomonas
C. Placas petri sembradas con bacteria (emol*tica
J. L&minas portaobjetos
=. Kuego de colorantes para Aram
Proceimiento7
2. >bservar registrar las caracter*sticas de las colonias desarrolladas en los
medios de cultivo slidos7 "ormacin de colonia
:. 8ama<o7 medido en mil*metros.
Forma7 circular, el*ptica, punti"orme, "ilamentosa.
+uper"icie7 lisa, rugosa, granular.
1levacin7 plana, conve!a, umbilicada.
Dorde7 entero, ondulado, dentado, "ilamentoso.
9onsistencia7 cremosa, membranosa, mucosa.
9romog#nesis7 amarillo, rojo, verde, negro
?. +eleccionar dos o tres colonias di"erentes, preparar un "rotis de ellas colorearlas
con Aram. >bservar al microscopio con objetivo de inmersin.
5. >bservar las caracter*sticas del desarrollo en los medios l*quidos7 turbide),
sedimento, presencia de nata.
-. >bservar las caracter*sticas del desarrollo en los medios semi slidos7 turbide)
uni"orme ,aero anaerbico "acultativo/, turbide) slo en super"icie ,aerobio/ o
slo en el "ondo ,anaerobio/
C. >bservar el cambio de color en el medio con lactosa
J. 0<adir al caldo peptonado, gotas de reactivo 1rlic( o Povac, apreciar el cambio
de color
2:
=. >bservar las placas de agar sangre apreciar la ausencia de (emat*es en el &rea
circundante a las colonias.
Re"u!tao"7
2. 'escribir las colonias observadas.

9>L>%E0 D09ELLU+ 1+9@1RE9@E0 +80P@LL>9>99U+
8ama<o
Forma
+uper"icie
1levacin
Dorde
9onsistencia
9romog#nesis
:. >bservar la movilidad en agar blando
?. >bservar el metabolismo de Alucosa
2?
5. >bservar el metabolismo del tripto"ano
-. >bservar el desarrollo de una bacteria aerobia anaerobia

0erobio 0naerobio 0naerobio
"acultativo
C. >bservar al microscopio la (emlisis en el medio agar con sangre.

CUESTIONARIO7
2. Para agrupar a las bacterias por el biotipo, qu# procedimiento debo seguirI
:. GHu# inter#s tiene para el campo m#dico evaluar la capacidad de una bacteria en
producir en)imas, to!inas o metaboli)ar determinado sustratoI
?. G9u&l es la "inalidad de conocer las caracter*sticas de una colonia bacterianaI
5. 'e"ina usted el concepto de colonia bacteriana.
-. 'escriba usted su concepto de una medio de cultivo ,caracter*sticas utilidad/

'1+0RR>LL>
25
TE*A %; ' ESTERI(I3ACI2N' AGENTES 0<SICOS
Introucci.n7
1l t#rmino esterili)acin implica un procedimiento por el cual un material
determinado queda libre de microorganismos.
1l comportamiento de los microorganismos "rente a diversos agentes "*sicos es
variable, en algunas condiciones puede estimular la multiplicacin bacteriana, en
otros inactiva su metabolismo e incluso logra destruirlos. 1ste ;ltimo e"ecto es
utili)ado para obtener la esterili)acin de instrumentos m#dicos material biolgico.
E! ca!or "eco ,(orno/ necesita temperaturas de 2=3 o9 durante C3 minutos de
e!posicin para obtener esterilidad.
E! ca!or =>meo ,ba<o mar*a (irviendo/ necesita periodos superiores a :3 minutos
para destruir a las bacterias.
E! ca!or =>meo a ,re"i.n ,autoclave/ es el procedimiento de esterili)acin m&s
con"iable. 0 una presin de 2- libras por pulgada cuadrada se obtiene 2:2 o9 de
temperatura, que por un periodo de 2- minutos se consigue la esterili)acin total,
libre de bacterias patgenas o no, esporuladas e incluso de virus.
Raiacione" u!travio!eta. +on radiaciones de una longitud de onda de ?33 nm que
tienen propiedad bactericida cuando act;an directamente sobre las bacterias se le
emplean en ambientes quir;rgicos, cub*culos de laboratorio, para eliminar las
bacterias suspendidas en el aire.
0i!traci.n. 'emostracin de "iltro de 9(amberland ,porcelana/ Millipore
,sint#tico/.
*ateria!e"7
2. +uspensin de un cultivo de Staphylococcus sp, Bacillus subtilis, Escherichia
coli y Pseudomonas sp.
:. Placas petri con 0gar nutritivo
?. 'ispositivo para calentar agua (asta (ervir
5. L&mpara de mercurio que emite radiaciones UB
2-
-. 0sas de siembra
Proceimiento7
07 90L>R @QM1'>
2. 9alentar agua (asta (ervir
:. 'ividir la placa petri con agar nutritivo en cuatro partes rotular con7 3, 2, -,
23. que son los tiempos de e!posicin.
?. 8omar de la suspensin bacteriana una asada sembrar en la placa petri con
0gar, en el &rea marcada con 3, que ser& el control de viabilidad de la bacteria
de re"erencia.
5. 9olocar la suspensin bacteriana en el ba<o mar*a (irviendo durante 2 minutos,
seguidamente sembrar una asada en la )ona rotulada con 2
-. Bolver a colocar la suspensin bacteriana en el ba<o mar*a (irviendo completar
el tiempo de e!posicin de : minutos. Luego sembrar una asada en la )ona
rotulada con :
C. Bolver a colocar la suspensin bacteriana en el ba<o maria (irviendo (asta
completar el tiempo de - minutos. Luego sembrar una asada en la )ona de la
placa rotulada con -
J. Encubar la placa petri a ?J o9 durante :5 6 5= (oras
Re"u!tao"7
La presencia de colonias indica desarrollo bacteriano ,viabilidad/. Las )onas
marcadas con 3, son los controles de viabilidad, donde siempre debe (aber
desarrollo.
Registrar el desarrollo bacteriano ,presencia de colonias/7
a/ 1scaso 2R ,menos de 23 colonias/.
b/ Moderado :R ,23 a -3 colonias/
c/ 0bundante ?R ,colonias incontables/

8iempo de
e!posicin a 233O9
+80P@LL>$
9>99U+
D09ELLU+
+UD8ELE+
1+9@1RE9@E0
9>LE

9ero minutos
2 minuto
: minutos
2C
- minutos
0notar el n;mero de colonias presentes en cada area
D. R0'E09E>%1+ UL8R0 BE>L180
2. 9on una asa de platino (umedecida en la suspensin bacteriana de Pseudomonas
sp. sembrar por agotamiento toda la super"icie del agar.
:. Llevar la placa sembrada al cub*culo que tiene una l&mpara de mercurio ,UB/
?. 'estapar la placa e!ponerla a las radiaciones, pero cubrir la mitad de la
super"icie sembrada con un papel. 'ejar en e!posicin durante 23 minutos
5. Retirar la placa del cub*culo, rotularla e incubarla a ?J O9 durante :5 6 5= (oras.
Re"u!tao"7
0. Leer las placas de cultivo, la presencia de colonias indica desarrollo bacteriano
,viabilidad/, en cambio la ausencia de colonias es e!presin de muerte bacteriana.
D. >bservar (acer un esquema de la presencia de colonias en la )ona e!puesta las
radiaciones UB la )ona cubierta con el papel.
0rea cubierta de
las radiaciones
Comentario" e !o" re"u!tao" o:tenio" en !a ,re"ente ,r?ctica7
2J
TE*A %@ ' ACCION DE AGENTES AU<*ICOS
Introucci.n'
%umerosos compuestos qu*micos inorg&nicos como org&nicos son t!icos para los
microorganismos. Los agentes qu*micos que destruen g#rmenes patgenos suelen
denominarse e"inBectante" a los que se aplican tpicamente se les denomina
anti"9,tico"C.
1l e"ecto biolgico de #stos agentes puede ser bactericida o bacteriost&tico.
1n la pr&ctica se demostrar& comparativamente la actividad de los compuestos
qu*micos mas empleados en medicina.
*ateria!e"7
2. +uspensin bacteriana de Staphylococcus sp Escherichia coli
:. +olucin de desin"ectante Mertiolate, 0septil rojo 0lco(ol J3O, ,- ml cada uno/
?. Placas petri con 0gar nutritivo, divididas en cuatro areas. Una para cada bacteria.
5. Pipetas Pasteur est#riles , goteros /
Proceimiento7
2. 'ividir la placa petri con 0gar en cuatro areas 7 Control, *ertiolate , Aseptil
Rojo Alco(ol
:. 9on la auda de un gotero depositar una gota de la suspensin bacteriana en la
)ona marcada con 9 control de viabilidad
?. 0 cada solucin de desin"ectante, a<adirle - gotas de la suspensin bacteriana.
'ejar actuar durante 23 minutos.
5. +eguidamente tomar una gota de cada me)cla depositarla en la super"icie del
agar rotuladas con M, 0R 0, respectivamente.
2=
-. 1sperar unos minutos (asta que el inculo se seque e incubar la placa a ?J o9
durante :5 a 5= (oras.
Re"u!tao"7
Registrar el desarrollo bacteriano por la "ormacin de colonias.
9omparar el desarrollo n;mero de colonias de la )ona de control con los de la
me)cla con desin"ectantes.
Microorganismo7 Staphylococcus sp
9>%8R>L 0+1P8EL R>K> M1R8E>L081 0L9>@>L

Microorganismo7 Escherichia coli
9>%8R>L 0+1P8EL R>K> M1R8E>L081 0L9>@>L
Comentario
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1B0LU0R 9>%91%8R09EF% '1L 0%8E+SP8E9> L 8E1MP> '1
14P>+E9EF%
2. Utili)ar el Mertiolate7 9oncentrado, 'iluido 2T-, 2T:- 2T2:-
:. 5 8ubos que contienen 5 ml de la solucin de Mertiolate ,concentrado diluidos/
?. 0<adir 3-.ml de un cultivo de 2= (oras de incubacin ,1sc(eric(ia coli o
+tap(lococcus sp/
5. Luego de 2 minuto - minutos de e!posicin, sembrar una asada a tubos con
caldo nutritivo respectivamente. ,= tubos/
2N
-. Encubar a ?J O9 durante :5 a 5= (oras. >bservar turbide) ,desarrollo bacteriano/
Re"u!tao"7
9oncentrado 'ilucido 2T- 'iluido 2T:- 'iluido 2T2:-
2 minuto
- minutos
Comentario
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$$
TE*A &% ' ACCION DE AGENTES AUI*IOTERAPICOS
ANTIBIOGRA*A
Introucci.n7
La actividad de los antibiticos quimioter&picos debe ser evaluada in vitro para
obtener la in"ormacin que permita decir si un microorganismo es susceptible o
resistente a determinado producto.
La determinacin de la concentracin m*nima in(ibitoria ,ME9/ nos proporciona la
dosis m*nima necesaria del quimioter&pico para impedir el desarrollo bacteriano, lo
que permite (acer estudios de uso cl*nico detectar mutantes resistentes.
'os son los procedimientos empleados para conocer #sta in"ormacin, el m#todo del
tubo dilucin el del disco di"usin en agar, a #ste ;ltimo se le denomina
antibiograma.
*9too e! Tu:o i!uci.n'
*ateria!e"7
2. +e presenta una gradilla con die) tubos en los que se (an reali)ado diluciones
sucesivas al medio, a partir de una solucin de antibitico con :33 microgramos,
obteniendo concentraciones decrecientes de 233 6 -3 6 :- 6 2:,- 6 C,:- 6 ?.2: 6
:3
2.-C 6 3.J= 6 3.?N mcgTml. 1l ;ltimo tubo no contiene antibitico, es control de
viabilidad de la bacteria en estudio.
0 cada tubo se (a a<adido 3.- ml de un cultivo de 2= (oras de la bacteria en
estudio. 8oda la gradilla de tubos (a sido incubada a ?J o9 durante :5 (oras.
(ectura7
2. Leer el desarrollo bacteriano como turbide), por lo tanto resistencia bacteriana al
quimioter&pico.
:. Los tubos que permanecen transparentes indican ausencia de desarrollo, luego
susceptibilidad bacteriana al quimioter&pico.
?. Eniciar la lectura por el tubo que contiene maor concentracin de quimioter&pico
5. 1l ;ltimo tubo transparente ,ausencia de desarrollo/ representa la dilucin de
quimioter&pico denominada ME9
-. 1l ;timo tubo, que no contiene quimioter&pico, debe estar siempre turbio, control
de viabilidad bacteriana.
Re"u!tao"7 @acer esquema de lo observado
8ubo 2 : ? 5 - C J = N 23
9oncentracin
de antibitico
233
-3 :- 2:.- C.:- ?.2: 2.-C 3.J= 3.?N $$$$
ME9
*9too e Di"co iBu"i.n en agar'
*ateria!e"'
2. Placas petri con 0gar Mueller @inton
:. +uspensin bacteriana a probar, con turbide) 5 de escala Mac Farland.
,233,333Tml/
?. @isopo de algodn est#ril.
5. 'iscos de papel de "iltro embebidos en antibiticos7 Penicilina ,P/, 0mpicilina
,0M/, 9e"alotina ,9F/, 9e"tria!ona ,984/, +ul"atrimetoprim ,+48/, Panamicina
,P/, 0miUacina ,0P/, %itro"uranos ,F'/, 0cido nalid*!ico ,0%/, etc.
Proceimiento7
2. @umedecer el (isopo est#ril en la suspensin bacteriana.
:. Frotar el (isopo en la super"icie del agar Mueller @inton en "orma radiada, de tal
manera que toda la super"icie reciba el inculo uni"ormemente.
?. 9on la auda de una pin)a, depositar los discos con antibiticos en la super"icie
del agar, con una separacin superior a : cm.
5. Encubar el cultivo a ?J o9 durante :5 (oras.
:2
(ectura7
2. 1l desarrollo bacteriano se lee por la presencia de colonias.
:. >bservar alrededor de los discos la "ormacin de (alos transparentes sin
desarrollo bacteriano, indica que la bacteria es sensible a dic(o producto.
?. 1l di&metro de los (alos de ausencia de desarrollo deben ser medidos llevados
a la tabla de Dauer Pirb para catalogar los resultados.
5. +i (a desarrollo bacteriano alrededor del disco, se deduce que es resistente a
dic(o antibitico. ,no v&lido para uso cl*nico/
Re"u!tao"7
@acer esquema de lo observado

8abla de Dauer Pirb7
::
CUESTIONARIO7
2. 9u&l es el procedimiento temperatura conveniente para esterili)ar los medios de
cultivoI
:. 0l esterili)ar en ba<o de mar*a (irviendo, G9u&l es la duda de la esterilidadI
?. 1nuncie el concepto de ME9 cual es la utilidadI
5. +e<ale los "actores que pueden alterar el resultado en un antibiograma.
-. 1n la pr&ctica dnde se utili)an las radiaciones ultravioletasI
'1+0RR>LL>
Huimioter&pico 9oncentracin
del disco mcg
@alo de in(ibicin de desarrollo
Resistente Entermedio +ensible
0mpicilina 0M
0miUacina 0P
0c nalid*!ico 0%
9e"alotina 9F
9e"o!itina 984
9e"tria!ona 9R>
9loran"enicol 9
Panamicina P
%itro"uranos F'
+ul"atrimetoprim+48
9ipro"lo!acina 9EP
8etraciclina 8
23
?3
?3
?3
?3
?3
?3
?3
?33
:?2
-
?3
$ 2? 25 6 2C R 2J
$ 2- 2C 6 2C R 2J
$ 2? 25 $ 2= R 2N
$ 25 2- 6 2J R 2=
$ 2- 2C 6 :3 R :2
$ 2? 25 6 :3 R :2
$ 25 2- 6 2J R 2=
$ 2? 25 6 2J R 2=
$ 25 2- 6 2C R 2J
$ 23 22 6 2- R 2C
$ 2- 2C 6 :3 R :2
$ 25 2- 6 2= R 2N
:?
TE*A && ' STAP7D(OCOCCUS
Introucci.n7
1ste microorganismo se encuentra mu distribuido en la naturale)a "orma parte de
la "lora normal del (ombre.
La especie +tap(lococcus aureus es causante de diversos procesos in"ecciosos como
la "orunculosis, imp#tigo, abscesos, into!icaciones alimentarias, etc.
Las caracter*sticas que permiten identi"icar al A#nero son la mor"olog*a de cocos
agrupados en racimos, que se ti<en como Aram positivos, en los cultivos desarrollan
en medios (ipertnicos producen una potente en)ima catalasa.
1studiaremos las especies de inter#s m#dico7 aureus, saprop(ticus epidermidis
*atera!e"7
2. 9ultivo de Staphylococcus en caldo nutritivo
:. 9ultivo de +tp(.. aureus en medio (ipertnico con manitol ,M@/ 0gar
nutritivo con disco de %ovobiocina.
?. 9ultivo de +tp(. epidermidis en medio (ipertnico con manitos ,M@/ 0gar
nutritivo con disco de %ovobiocina
5. 9ultivo de +tp(. saprop(ticus en medio (ipertnico con manitol ,M@/ 0gar
nutritivo con disco de %ovobiocina.
- Plasma (umano diluido al -3 .
C. 0gua o!igenada ?3 vol.
J. Kuego de colorantes para Aram.
Proceimiento7
:5
2. >bservar el desarrollo del Staphylococcus en caldo con turbide) uni"orme.
@acer un "rotis colorearlo con Aram.
:. >bservar las caracter*sticas de las colonias de las tres especies de Staphylococcus
desarrolladas en medio (ipertnico apreciar el metabolismo del manitol.
?. >bservar el comportamiento de las tres especies "rente a la %ovobiocina.
5. 'epositar una gota de agua o!igenada sobre un portaobjetos. 9on el asa de
siembra tomar una peque<a colonia de Staphylococcus ponerla en contacto con
el agua o!igenada, apreciar la "ormacin de burbujas, por accin de la en)ima
catalasa.
-. 'epositar 2 ml de plasma en tubo peque<o. 9on el asa de siembra tomar una
peque<a colonia del cultivo depositarla en el plasma. Encubar a ?J o9 durante :
(oras. >bservar la "ormacin de co&gulo por accin de la en)ima coagulasa.
Proceder por separado con cada especie bacteriana.

Re"u!tao"7
Registrar las observaciones
'esarrollo 9aldo Aram 9oagulasa 9atalasa
en 9aldo %utritivo
:-
Medio @ipertnico con manitol 0gar nutritivo %ovobiocina
TE*A &$ ' STREPTOCOCCUS
Introucci.n7
1ste g#nero comprende un grupo numeroso de microorganismos, muc(os viven como
comensales, algunos son patgenos para el (ombre, como el pygenes, agalactiae,
pneumoniae. Producen in"ecciones "ocales como "aringitis, imp#tigo, endocarditis,
escarlatina, neumon*a, meningitis, otitis s*ndromes posin"ecciosos como la
cardiopat*a reum&tica la glomerulo ne"ritis aguda.
1stos microorganismos son cocos es"#ricos o lanceolados que se orientan en cadenas
o pares, Aram positivos.
La clasi"icacin mas pr&ctica es la basada en el tipo de (emlisis que se produce en la
placa con agar sangre.
1l +t. pgenes produce (emolisina tipo beta o total es sensible a la bacitracina
1l +t viridans produce (emlisis tipo al"a o parcial,
1l +t pneuminae tambi#n produce (emlisis tipo al"a, pero es "ormador de c&psula
sensible a la etil(idrocupreina ,optoc(in/
1l 1nterococo tiene la capacidad de desarrollar en medio salino ,C.- . de 9l %a/
*ateria!e"7
2. 9ultivo de Streptococcus sp.en caldo nutritivo
:. 9ultivo de Streptococcus pygenes en agar sangre , con disco de bacitracina
?. 9ultivo de Streptococcus viridans en agar sangre con disco de optoc(in
5. 9ultivo de Streptococcus pneumoniae en agar sangre con disco de optoc(in
-. 9ultivo de Enterococcus en agar sangre caldo salino
:C
C. Kuego de colorantes para Aram
Proceimiento7
2. >bservar la caracter*stica de desarrollo del +treptococcus en caldo nutritivo, con
"ormacin de sedimento transparencia en el sobrenadante
Me)clar el tubo (acer un "rotis, colorearlo con Aram
:. >bservar las placas de agar sangre, estudiar las caracter*sticas de las colonias su
comportamiento con la sangre. 8ipo de (emlisis alrededor de ellas.
?. >bservar el comportamiento de cada especie bacteriana "rente a la bacitracina
el optoc(in
5. 0preciar el desarrollo uni"orme del 1nterococcus en el caldo salino.
Re"u!tao"7
Registrar lo observado
9aldo nutritivo +treptococcus
+treptococcus 9oloracin Aram
+treptococcus +treptococcus %eumococo
beta Cu!tivo Agar "angre viridans
(emol*tico
:J

1nterococcus

9aldo %utritivo
0gar nutritivo
+in sangre

TE*A &- ' CORDNEBACTERIU*
Introucci.n7
1l Corynebacterium dip(t h eriae es la ;nica especie patgena de #ste grupo, su rol
patgeno est& *ntimamente relacionado con la produccin de e!oto!ina la
transmisin es inter$(umana. @a varias especies sapro"itas.
+on microorganismos de "orma bacilar, pleomr"ica, que se agrupan en letras
c(inas, Aram positivas. 'esarrollan con "acilidad en los medios de cultivo que
contengan plasma o sangre.
*ateria!e"7
2. Frotis de cultivo de Corynebacterium sp para colorear con Aram
:. 9ultivo de Corynebacterium sp. en 0gar sangre
?. Kuego de colorantes para Aram
Proceimiento7
2. 9olorear los "rotices presentados con Aram observar con lente de inmersin.
0preciar la "orma bacilar corta , gruesa en empali)ada
:. 'escribir las colonias del cultivo en 0gar sangre
:=
Re"u!tao"7
@acer esquema de lo observado en el microscopio
CUESTIONARIO'
2. +e<ale oc(o caracter*sticas principales que aseguran que estamos "rente a un
Staphylococcus aureus.
:. Hu# in"ecciones produce mas "recuentemente el Staphylococcus saprophyticusI
?. 1n pacientes con "aringo amigdalitis aguda Gqu# "inalidad tiene (acer un cultivo
de e!udado "aringeoI L porqu#I
5. 1n las (eces puede (aber +treptococcusI
-. 9aracter*sticas principales para diagnosticar Streptococcus pneumoniae.
'1+0RR>LL>
:N
TE*A &4 ' ENTEROBACTERIAS
Introucci.n7
+on un grupo de microorganismos que (abitan el suelo, agua, materia en
descomposicin e intestino del (ombre de los animales. La maor*a de las especies
son sapro"itas oportunistas, producen in"ecciones nosocomiales, pero algunas son
agentes causales de en"ermedades gastrointestinales, la Fiebre ti"oidea la disenter*a
bacilar.
1stos g#rmenes son bacilos Aram negativos, no esporulados, que desarrollan
"&cilmente en los medios de cultivo. 8odos "ermentan la glucosa poseen una
diversidad de en)imas que permite clasi"icarlos en di"erentes g#neros de acuerdo al
substrato utili)ado al producto terminal del metabolismo. 9arecen de la en)ima
citocromo o!idasa.
Para la identi"icacin se emplean estudios del metabolismo ,biotipo/ e
inmunoserolgicos ,serotipo/.
*ateria!e"7
2. +uspensin de (eces en solucin salina
:. Placas petri con medio de Mac 9onUe, sembradas con cepas de Escherichia
coli, Klebsiella, Proteus, Salmonella y Shigella.
?3
?. Placas petri con medio de ++ agar, sembradas con cepas de Escherichia coli,
Klebsiella, Proteus, Salmonella Shigella.
5. 8ubos con medios di"erenciales7 8+E ,tres a);cares (ierro/, LE0 ,lisina (ierro
agar/, 9itrato Urea, todos sembrados con las cepas de Escherichia coli,
Klebsiella, Proteus, Salmonella y Shigella.
-. Kuego de colorantes para Aram.
Proceimiento7
2. @acer un "rotis de la suspensin de (eces colorearlo con Aram.
:. @acer un "rotis de cada una de la cepas presentadas colorearlo con Aram.
?. 1studiar comparativamente las caracter*sticas de desarrollo de las diversas
especies bacterianas en los medios de Mac conUe agar ++.
5. 1studiar las reacciones bioqu*micas, producto del metabolismo bacteriano en los
medios di"erenciales.
8+E LE0
Lactosa sacarosa ,pico/
Bia o!idativa7 acide) amarillo 'ecarbo!ilacin, color lila al
"ondo
Por alcalinidad de aminas libres
Produccin de +@:
9olor negro ,sul"uro de (ierro/ 'esaminacin, color guinda por
acide) de los radicales carbo!ilos libres.
Alucosa ,"ondo/ %o utili)acin del amino&cido
Bia "ermentativa7 acide) amarillo Encoloro al "ondo

Re"u!tao" '
Registrar los cambios observados producto de la actividad metablica de la especie
bacteriana.

1sc(eric(ia
coli
Plebsiella Proteus +almonella +(igella
Mac
9onUe
++ agar
Alucosa
Aas
?2
Lactosa
@:+
'esami$
nacin
'ecarbo!i
lacin
9itrato
Urea
8.+.E.
TE*A &5 ' CA*PD(OBACTER ) 7E(ICOBACTER
Introucci.n7
1stos g#neros agrupan a microorganismos con "orma (elicoidal, coma, en +,
e!igentes para desarrollar en medios de cultivo.
1l Campylobacter se asocia con in"ecciones intestinales, para su aislamiento se
requiere de medios de cultivo selectivos, enriquecidos, e incubados en ambiente con
-. de 9>: a 5: o9 . >tra metodolog*a es (acer uso del lo delgado que el germen
"iltrar la muestra por milipore de 3.5- mu.
1l Helycobacter pylori se asocia con gastritis ;lcera g&strica, para su diagnstico se
debe investigar la produccin de ureasa la mor"olog*a t*pica en biopsias de la
mucosa.
*ateria!e" 7
2. Frotis de (eces de lactante, coloreados con Aram Bag
:. 9orte (istolgico de mucosa g&strica , coloreados con @$1
?. 9ultivo de Campylobacter sp. en 0gar sangre.
?:
Proceimiento'
2. >bservar al microscopio con objetivo de inmersin las l&minas presentadas.
Re"u!tao"7
Frotis de (eces Aram Bag
9amplobacter j,
9orte (istolgico de mucosa g&strica
@elicobacter p.
CUESTIONARIO7
2. 9u&l es el sustrato que divide a las enterobacterias en dos categor*asI
:. +e<ale las enterobacterias productoras de +@:, evidenciado por el ennegrecimiento
del medio.
?. +e<ale el agente de ;lceras gastro duodenales la en)ima ;til para identi"icarlo
5. GHu# ocasiona el Campylobacter euni cmo lo identi"icaI
-. Hu# utilidad tiene el estudiar el metabolismo de la enterobacteriasI
'1+0RR>LL>
??
TE*A &6 ' 1IBRIOS
Introucci.n7
La "amilia Bibrionaceae comprende tres g#neros de importancia m#dica! "ibrio,
#eromonas Plesiomonas. 8odos son de origen acu&tico, luego la contaminacin
(umana es consecuencia de la ingesta de alimentos o agua con grandes cantidades de
microorganismos.
Los agentes patgenos mas importantes son "ibrio cholerae, "ibrio
parahemol$ticus #eromonas.
8odos ellos son de "orma bacilar o curvada, Aram negativos, con movilidad polar.
'esarrollan con "acilidad en los medios de cultivo, "ermentan glucosa poseen una
potente en)ima citocromo o!idasa.
?5
*ateria!e" 7
2. 9ultivo de "ibrio cholerae en caldo tripticase agar 89D+ ,sacarosa, bilis,
citrato t(isul"ato/
:. 9ultivo de "ibrio parahemol$ticus en caldo tripticase agar 89D+
?. Reactivo para detectar o!idasa.
5. Kuego de colorantes para Aram.
Proceimiento7
2. @acer un "rotis de los cultivos en medio l*quido, de todas las cepas
presentadas, colorearlos con Aram. >bservar con objetivo de inmersin.
:. >bservar comparativamente el desarrollo de las cepas presentadas sembradas en
0gar 89D+, apreciar el cambio de color por la utili)acin de la "acaro"a.
?. Reali)ar la reaccin de o!idasa de las cepas presentadas.
Re"u!tao"7
1i:rio c=o!erae 1i:rio ,ara=emo!itico
Aram
0gar
89D+
,sacarosa/
?-
TE*A &8 ' BACI(OS GRA* NEGATI1OS NO 0ER*ENTADORES
Introucci.n7
9on #ste t#rmino se agrupa a microorganismos de di"erentes "amilias que (abitan en
el medio ambiente o "orman parte de la "lora normal del cuerpo. +on patgenos
oportunistas, que tienen en com;n la incapacidad para metaboli)ar los carbo(idratos
por v*a "ermentativa.
Enclue a las Pseudomonas, #cinetobacter #lcal$genes, , Cromobacterias,
%lavobacterias, etc. 1n la pr&ctica estudiaremos los dos primeros.
*ateria!e"7
2. 9ultivo de Pseudomonas aeruginosa en 9aldo nutritivo, 0gar Mac conUe, 0gar
nutritivo.
:. 9ultivo de Pseudomonas aeruginosa sembrado en medio 8+E 0gar movilidad
?C
?. 9ultivo de #cinetobacter en 9aldo nutritivo, 0gar Mac conUe 0gar nutritivo
5. 9ultivo de 0cinetobacter en medio 8+E 0gar movilidad
-. Reactivo para reaccin de o!idasa
C. Kuego de colorantes para Aram
Proceimiento7
2. >bservar el desarrollo en super"icie de la Pseudomonas a. en caldo nutritivo.
:. @acer "rotis a partir del caldo con Pseudomonas colorearlo con Aram
?. 1studiar comparativamente las colonias de Pseudomonas 0cinetobacter en los
medios de Mac 9onUe 0gar nutrtivo. 0preciar "ormacin de pigmento verde
que di"unde en el medio de 0gar nutrtivo sembrado con Pseudomonas.
5. >bservar el comportamiento de ambas cepas en el medio de 8+E , desarrollo slo
en super"icie / en el medio movilidad
-. Reali)ar la reaccin para >!idasa.
Re"u!tao"7
Pseudomonas 0cinetobacter
9oloracin
Aram

0gar
Mac %utritivo
9aldo
%utritivo
?J

8+E
9itocromo >!idasa
CUESTIONARIO7
2. 'e los vibrios estudiados, Gcu&l es de origen marino cmo lo di"erencia del otroI
:. Para in"ectarme con clera Gcu&l es la dosis m*nima in"ectanteI
?. +e<ale las bacterias productoras de citocromo e!idasa.
5. 'escriba las caracter*sticas de cultivo de la Pseudomonas ;tiles para su diagnstico
-. GHu# utilidad tiene estudiar 0cinetobacterI
'1+0RR>LL>
TE*A &; ' (ISTERIA
Introucci.n7
La &isteria monocitgenes, especie bacteriana sapro"ita, (abita en los vegetales en
el intestino de los animales. La in"eccin (umana est& relacionada a la ingesta de
alimentos a la contaminacin de los genitales "emeninos, con riesgo en la gestante
producir sepsis neonatal, en adultos inmunocomprometidos puede producir
meningitis.
La identi"icacin se orienta por la mor"olog*a bacilar corta, Aram positivo, desarrolla
en 0gar sangre produciendo una discreta (emlisis. Lo m&s caracter*stico es la
capacidad de desarrollar a bajas temperaturas poseer movilidad slo a :: o9

*ateria!e"7
2. Frotis de cultivo de &isteria m, para colorear con Aram.
?=
:. 9ultivo de &isteria m. en 0gar angre
?. 9ultivo de &isteria m. en 0gar blando movilidad, incubado a :: o9 a ?J o9
Proceimiento7
2. 9olorear el "rotis con Aram observar con lente de inmersin.
:. >bservar las caracter*sticas de las colonias del cultivo en 0gar sangre
?. >bservar el desarrollo mvil en agar blando a :: o9, por la presencia de turbide)
en el tercio superior del tubo dando una imagen de paraguas.
Re"u!tao"'
@acer esquema de lo observado
9oloracin de Aram
0gar movilidad
?J V9 :: V9
TE*A &@ ' BRUCE((A
Introucci.n7
La brucelosis es una )oonosis. 1n los animales la in"eccin es sist#mica de
locali)acin en los rganos genitales gl&ndulas mamarias. Produce aborto en
animales
1ste microorganismo tiene cierta especi"icidad de especie animal, asi Brucella
abortus es selectiva para ganado vacuno, Brucella mellitensis para ganado caprino
lanar, Brucella suis para el porcino.
1l (umano se in"ecta ingiriendo productos l&cteos contaminados, luego (ace
septicemia con locali)acin en el tejido ret*culo endotelial ,(*gado, m#dula sea
ba)o/.
?N
1ste microorganismo es mu peque<o, tipo coco$bacilar, Aram negativo, que
desarrolla con lentitud en los medios de cultivo ,? a J d*as/ dando colonias
caracter*sticas.
*ateria!e"7
2. Frotis de cultivo de Brucella mellitensis, para colorear con Aram
:. @emocultivo en medio bi"&sico ,Rui) 9asta<eda/ para aislar Drucella
?. Kuego de colorantes para Aram
5. +uero de paciente con brucelosis
-. 0nt*geno de Drucella para aglutinacin en l&mina
Proceimiento7
2. 9olorear con Aram el "rotis de cultivo. >bservarlo al microscopio apreciar el
diminuto tama<o de #ste microorganismo.
:. >bservar el sistema bi"&sico para aislar la Drucella a partir de l*quidos org&nicos,
asi como las caracter*sticas de las colonias.
?. +obre un portaobjetos depositar una microgota ,3.35/ del suero del paciente
a<adirle una microgota del ant*geno.
Me)clar por rotacin durante ? minutos, apreciar la presencia de aglutinacin
,grumos/, cuando (a anticuerpos.
Re"u!tao"7
Registrar lo observado
9oloracin Aram
Medio bi"&sico
@emocultivo
TE*A $% ' (ACTOBACI((US ) 1AGINOSIS
Introucci.n7
Los &actobacillus son un grupo de g#rmenes sapro"itos que tienen la capacidad de
producir &cido l&ctico como producto "inal del metabolismo de los (idratos de
carbono. La especie &actobacillus acidphilus (abita las v*as genitales "emeninas
,bacilo de 'oderlein/ metaboli)a el glucgeno manteniendo el p@ &cido de la )ona
vaginal, evitando la sobrecontaminacin.
53
9uando las de p@ se modi"ican (acia la neutralidad se crean condiciones que
permiten la proli"eracin de algunos microorganismos patgenos oportunistas. Un
ejemplo t*pico es el cuadro cl*nico denominado vaginosis, que se inicia con la
disminucin de la produccin estrog#nica que condiciona la elevacin del p@
vaginal (acia la neutralidad, permitiendo la proli"eracin de microorganismos como
'ardnerella, (obiluncus, etc.
'ardnerella, bacilo que colorea variablemente con el Aram, anaerobio "acultativo,
que invade las c#lulas vaginales dando una imagen caracter*stica denominada c#lulas
clave ,clu cells/.
(obiluncus, bacilo curvado, en (o), Aram variable, anaerobio.
*ateria!e"7
2. Frotis de "lujo vaginal normal, coloreado con Aram
:. Frotis de "lujo vaginal con vaginosis coloreado con Aram
Proceimiento7
2. >bservar con objetivo de inmersin el "rotis coloreado
Re"u!tao"'
@acer esquema de lo observado en el microscopio
TE*A $& ' BARTONE((A
Introucci.n7
+iendo el Per; un pa*s end#mico de bartonelosis estamos obligados a pensar en #sta
en"ermedad cuando un paciente proviene de )onas verrucgenas.
1n la "ase (em&tica el diagnstico se (ace mediante la b;squeda de los
microorganismos en los (emat*es, por estudios microscpicos de "rotices sangu*neos
coloreados con Wrig(t o Aiemsa , o mediante cultivos incubados a :: o9.
52
1n la "ase (istioide el diagnstico es slo por cultivo, asociado a datos
epidemiolgicos caracter*sticas (istolgicas de la verruga.
*ateria!e"7
2. Frotices sangu*neos de pacientes con bartonelosis, coloreados con Wrig(t.
Proceimiento7
2. >bservar al microscopio con objetivo de inmersin, apreciar la variacin del
tama<o de los glbulos rojos ,anisocitosis/, el di"erente tono de color de los
(emat*es ,policromato"ilia/ la presencia de microorganismos coco$bacilares
dentro de los glbulos rojos.
Re"u!tao"7

CUESTIONARIO7
2. GHu# grupo (umano es proclive a la listeriosisI
:. G9u&les son las muestras ideales para aislar la DrucellaI L que medio se utili)aI
?. 'escriba el concepto de vaginosis agentes condicionantes.
5. G0 qu# se denomina )ona verrucgenaI. +e<ale el agente transmisor de D.
bacilli"ormis de D quintana.
-. +e<ale las di"erentes especies de Drucella su (ospedero.
'1+0RR>LL>
5:
TE*A $$ ' BACI((US
Introucci.n7
1ste g#nero agrupa a un gran n;mero de especies bacterianas que (abitan en el medio
ambiente, algunas son utili)adas en el campo de la biotecnolog*a como productoras
de antibiticos ,polimi!ina, bacitracina/, alco(oles, en)imas vitaminas.
+lo una especie, el Bacillus anthracis , es causante de en"ermedad en (umanos
animales, denominado carbunco.
5?
1n la pr&ctica estudiaremos la especie Bacillus subtilis, sapro"ito contaminante
ambiental, para apreciar sus caracter*sticas de bacilo grande, Aram positivo, "ormador
de espora no de"ormante que cultiva en condiciones aerbicas.
*ateria!e"7
2. 9ultivo de Bacillus subtilis en caldo nutritivo
:. 9ultivo de Bacillus subtilis en 0gar nutritivo
?. 9ultivo de Bacillus subtilis en tubo con 0gar blando
5. Kuego de colorantes para Aram
Proceimiento7
2. >bservar las caracter*sticas de desarrollo del D subtilis en la super"icie de los
medios l*quidos agar blando.
:. 1studiar las caracter*sticas de las colonias en agar nutritivo
?. @acer un "rotis a partir del caldo nutritivo colorearlo con Aram

Re"u!tao"'
@acer esquema de lo observado.
'esarrollo
en 8(ioglico
lato
>bservacin de esporas

TE*A $- ' C(OSTRIDIU*
Introucci.n7
+on microorganismos ampliamente distribuidos en la naturale)a en el intestino de
los animales (erb*voros. La in"eccin (umana es circunstancial a un trauma, a la
ingesta de alimento contaminado a la presencia de e!oto!ina espec*"ica.
+e pueden agrupar en citot!icos, enterot!icos los productores de into!icaciones
espec*"icas como el t#tanos el botulismo.
55
8odos los 9lostridium son bacilos, Aram positivos, "ormadores de esporas que
de"orman al bacilo desarrollan en condiciones de anaerobiosis.
*ateria!e"7
2. Frotis de secrecin de (erida gangrenosa coloreada con Aram.
:. 9ultivo de Clostridium sp, en medio de t(ioglicolato agar semislido
?. +istemas para obtener anaerobiosis
Proceimiento7
2. >bservar con objetivo de inmersin los "rotices coloreados, anotar las
caracter*sticas de los bacilos.
:. >bservar la "orma de desarrollo, alejada de la super"icie, en el medio de
t(ioglicolato.
?. 1valuar los sistemas para obtener anaerobiosis.
Re"u!tao"7

'esarrollo
en 8(ioglico
lato
>bservacin de esporas
TE*A $4 ' NEISSERIAS
Introucci.n7
1l (umano es el ;nico reservorio de g#nero Neisseria, (abitan el tracto respiratorio
alto sus mucosas. 'os especies tiene un rol patgeno de"inido, la Neisseria
gonorrhoeae la Neisseria meningitidis .
5-
Las neisserias son cocos Aram negativos que se agrupan en pares, son mu sensibles
a las condiciones adversas para su desarrollo en medios de cultivo, requiriendo
medios enriquecidos ,8aer Mart*n/ , producen una en)ima respiratoria que las
identi"ica , la citocromo o!idasa.
*ateria!e"7
2. Frotis de secrecin uretral de paciente con Aonorrea, coloreado con Aram 0)ul
de metileno.
:. 9ultivo de %eisseria sp en 0gar 8aer Mart*n, incubado a ?J o9 en ambiente con
9>:.
?. Reactivo tetrametil para "enil diamino al 2 . para detectar la en)ima o!idasa
5. Kuego de colorantes para Aram
Proceimiento7
2. >bservar con objetivo de inmersin los "rotices de secrecin uretral. 0preciar la
"orma de diplococo su ubicacin intracelular.
:. >bservar las caracter*sticas de las colonias del cultivo de %eisseria
?. Reali)ar la reaccin de o!idasa7 tomar una peque<a porcin de colonias
ponerla en contacto con el reactivo, observar de inmediato el cambio del color
por la o!idacin del reactivo.
Re"u!tao"7
Registrar lo observado.
9itocromo o!idasa
Aram 0)ul de metileno
Frotis de secrecin uretral
TE*A $5 ' TREPONE*A
Introucci.n7
1l )reponema pallidum es agente causal de la s*"ilis o Lues.
1s una espiroqueta que no cultiva en medios inertes, luego el estudio de #ste
microorganismos debe (acerse en base a e!&menes microscpicos de la muestra o a
la demostracin de anticuerpos en sangre.
5C
1l e!amen microscpico con condensador de campo oscuro, se reali)a a partir de las
lesiones d#rmicas, en la )ona de inoculacin, denominados c(ancro duro ,en la
primera etapa/ en las "ormaciones papulosas en toda la piel, denominada roseola
,en la segunda etapa/.
Para la demostracin de anticuerpos se dispone de dos categor*as de pruebas, las que
usan ant*geno %> trepon#mico7 B'RL, RPR, Pa(n, Wasserman, de gran
sensibilidad pero poca especi"icidad las que utili)an un treponema como ant*geno7
Reiter, F80, E8P, denominadas con"irmatorias.
*ateria!e"7
2. +uero pacientes con Lues
:. 0nt*geno no trepon#mico 7B'RL o RPR
?. L&minas portaobjetos.
Proceimiento7
2. 'epositar una gota ,3.3- ml/ de suero problema en una l&mina o tarjeta.
:. 0<adir una gota de ant*geno me)clar por rotacin durante ? minutos
?. >bservar la "ormacin de grumos o p#rdida de la (omogeneidad de la suspensin
cuando la reaccin es positiva ,precipitacin/
Re"u!tao"7

%egativo Positivo
CUESTIONARIO'
2. 'escriba las condiciones para aislar un 9lostridium. G9mo lo apreci en la
pr&cticaI
:. +i un paciente tiene B'RL positivo : diluciones. '# su opinin
recomendaciones.
?. +i todas la %eisserias ,sapro"itas patgenas/ mor"olgicamente son iguales, qu#
debo (acer para identi"icar a las especies patgenasI
5J
5. Porqu# es tan ;til el "rotis coloreado con Aram para diagnosticar in"eccin por
gonorreaI
-. Hu# signi"ica F80, se<ale la utilidad.
'1+0RR>LL>
TE*A $6 ' *DCOBACTERIU*
Introucci.n7
5=
1ste g#nero inclue a dos especies patgenas para el (ombre, que producen
en"ermedades de importancia en +alud P;blica, son la 8uberculosis la Lepra.
1stos micoorganismos ti<en con una coloracin espec*"ica, la de Mie(l$%eelsen.
1l (ycobacterium tuberculosis ,bacilo de Poc(/ desarrolla en medios de cultivo mu
nutritivos como el LoXenstein Kensen, >gaXa, MiddlebrooU tarda mas de 2- dias
en "ormar colonias. 1stas caracter*sticas obligan, a que las muestras que van a ser
cultivadas ,esputo, contenido g&strico/ para aislar Mcobacterium, deban seguir un
proceso de (omogeni)acin decontaminacin de g#rmenes comunes de desarrollo
r&pido, lo que se consigue a<adiendo a la muestra (idr!ido de sodio, "os"ato
trisdico o % acetil cisteina, seguidamente se neutrali)a la muestra con &cido (asta
obtener un p@ de J.: .
0dem&s del Mcobacterium tuberculosis bovis se describen los at*picos, Runon
los clasi"ica de acuerdo a la velocidad de desarrollo "ormacin de pigmento en
cuatro grupos7 E 'esarrollo lento "oto cromgenos ,Pansasii, simiae/, EE 'esarrollo
lento escoto cromgenos ,gordonae, scro"ulaceum/, EEE 'esarrollo lento no
cromgeno ,avium, t#rrea/ EB 'esarrollo r&pido antes de los siete d*as ,"ortuitum,
smegmatis, p(lei/
1l diagnstico microscpico de la tuberculosis se reali)a mediante la baciloscop*a,
procedimiento de bajo costo, de elevada especi"icidad de gran utilidad en el
diagnstico evolucin del tratamiento.
*ateria!e"7
2. Frotices de esputo para colorear con Mie(l$%eelsen
:. 9ultivo de (ycobacterium tuberculosis en medio LoXenstein Kensen
?. 9ultivo de (ycobacterium at$picos en medio LoXenstein Kensen
Proceimiento7
2. 9olorear los "rotices con el m#todo de Mie(l$%eelsen. >bservarlos con objetivo
de inmersin.
:. 9ontar los bacilos &cido resistentes observados en 233 campos microscpicos.
?. 9ali"icar la l&mina de acuerdo a la siguiente tabla 7
%egativo7 no se observan bacilos
Positivo 2 R 2 a 23 bacilos en 233 campos observados
Positivo : R de 23 a 233 bacilos en 233 campos observados
Positivo ? R mas de 233 bacilos en 233 campos observados.
5. Registrar las caracter*sticas de las colonias del (ycobacterium tuberculosis
-. Registrar las car&cter*sticas de las colonias de los (ycobacterium at$picos

Re"u!tao"7
D09EL>+9>PE0 7
5N

9UL8EB>+7
Revisar el "undamento de la (omgeni)acin, decontaminacin concentracin
previa de la muestra para ser cultivada.
>bservar la caracter*stica de las colonias el pigmento en el medio de LoXenstein de
cepas de Mcobacterium tuberculosis Mcobacterium at*picos.
+ensibilidad o resistencia a los "&rmacos7 La utilidad de estudiar #ste
comportamiento in Bitro es de vigilancia en paciente que no (an recibido tratamiento
previo ,resistencia primaria/ en los paciente con recaidas o abandono del
tratamiento ,resistencia secundaria/ como indicador de multidrogoresistencia ,M'R/
Para ello se utili)a el concepto de las proporciones, se emplean diluciones 2T2,333,
2T23,333 2T233,333 de una suspensin de las colonias problemas que luego se
siembran en medios de LoXenstein sin antibitico con "&rmaco individual en
concentraciones equivalentes al ME9. Luego se incuban a ?JO9 cuando (a
desarrollo se cuentan las colonias, considerando como 233 . el tubo sin "&rmaco se
obtiene as* la proporcin denominada cr*tica de resistencia a cada droga.
-3
TE*A $8 ' 0(ORA BACTERIANA NOR*A(
Introucci.n7
Los microorganismos que (abitan el medio ambiente ,suelo, agua, aire, residuos
org&nicos/ est&n en relacin constante con los organismos vivientes.
1l cuerpo (umano est& poblado de microorganismos en las )onas e!puestas al
ambiente, asi como en la lu) intestinal. 1sta "lora residente cumple una "uncin
determinada para conservar la salud como sinteti)ar vitamina P, completar el
catabolismo de los alimentos, contribuir a su absorcin, prevenir la coloni)acin de
bacterias patgenas, etc.
1n determinadas circunstancias como traumatismos, (eridas, sistema inmune
deprimido, o sobrepoblacin bacteriana, la "lora residente puede producir
en"ermedades.
1n la pr&ctica se va a demostrar la presencia de microorganismos en diversas &reas
del cuerpo para comprobar la presencia de bacterias autctonas.
2. 1!udado "ar*ngeo
:. Regin interdigital de la mano
?. Regin a!ilar
5. Regin conducto auditivo e!terno
-. 0mbiente del dormitorio de un alumno
*ateria!e"7
2. @isopos de algodn est#ril
:. Daja lengua
?. Placas petri con agar sangre 0gar +abouraud
5. 8ubos con ? ml de caldo %utritivo
-. Kuego de colorantes para Aram
Proceimiento7
2. +eguir las instrucciones del Pro"esor para la toma de las di"erentes muestras7
:. 9on auda del (isopo baja lengua tomar una muestra de e!udado "ar*ngeo.
?. @umedecer un (isopo en 9aldo nutritivo para cada una de las regiones se<aladas
5. +embrar el (isopo en la super"icie de 0gar sangre e Encubar a ?J o9 T:5 (oras.
-. La placa de 0gar +abouraud usada por el alumno en su dormitorio, se incubar& a
temperatura ambiente.
C. >bservar el tipo de colonias aisladas, presencia de (emlisis, pigmento, etc.
J. Reali)ar "rotices coloraciones de Aram para (acer una identi"icacin primaria.
-2
Re"u!tao"7
Muestra 9ultivoTcolonias 9oloracin de Aram Posibilidad
diagnstica
Regin
interdigital
de mano
Regin
a!ilar
9onducto
auditivo
e!terno
0mbiente

-:
CUESTIONARIO7
2. GPorqu# los Mcobacterium no toman "&cilmente los colorantes acuososI
:. +e<ale las ventajas de la bacilosocop*a en el diagnstico de la tuberculosis.
?.GHu# microorganismos se encontraron en los cultivos tomados en las diversas
regiones del cuerpoI
5.GHu# microorganismos in"ectan con mas "recuencia a pacientes de cuidados
intensivos o neonatos prematurosI L porqu#I
'1+0RR>LL>
-?
PROTOCOLO I. : CULTIVO DE EXUADO NASAL
Materiales:
Hisopo de algod! de " p#lgadas$ est%ril &'(
Pla)as petri )o! Agar sa!gre * agar +ipert!i)o &'(
Pro)edi,ie!to:
Se to,ar- a #! al#,!o ,#estra de e.#dado !asal$ para lo
)#al el pro/esor +arla de,ostra)i! respe)ti0a.
1rotar &sie,2ra( el +isopo e! #! ter)io de la s#per/i)ie de los
,edios de )#lti0o$ l#ego )o! a*#da del asa de plati!o )o!)l#ir
la sie,2ra por agota,ie!to.
Rot#lar e i!)#2ar a 345C d#ra!te 67 +oras.
I!terpreta)i!:
E! el ,edio Hipert!i)o$ sele)ti0o para el desarrollo del
Stap+*lo)o))#s$ sele))io!ar )olo!ias *:
o A partir de ellas +a)er #! /rotis * )olorearlo )o! 8ra,$
o2ser0ar al ,i)ros)opio.
o So2re #! portao29etos$ po!erlas e! )o!ta)to )o! #!a
gota de Ag#a o.ige!ada. Apre)iar la /or,a)i! de
2#r2#9as por la a)ti0idad de la )atalasa.
o Sele))io!ar las )olo!ias :#e +a! )a,2iado de )olor a
a,arillo &,eta2olis,o del ,a!itol( * se,2rarlas e!
plas,a +#,a!o$ para dete)tar la prod#))i! de la
e!;i,a )oag#lasa. &i!)#2ar 345C . <6 +oras.
E! el agar sa!gre$ sele))io!ar )olo!ias pe:#e=as apla!adas
)o! al/a +e,lisis$ a partir de las )#ales +a)er /roti)es para
)olorear )o! 8ra,$ e! 2#s)a de diplo)o)os la!)eolados 8ra,
positi0os e! )ade!as )ortas. Correspo!die!tes a !e#,o)o)o.
-5
PR>8>9>L> EE. 9UL8EB> '1 14U'0'> F0RE%A1>
Materiales:
Hispo de algod! de " p#lgadas$ est%ril &'(
T#2o )o! '> ,l de agar !#triti0o li)#ado &>?5C( &'(
1ras)o )o! > ,l de )aldo !#triti0o est%ril &'(
T#2o )o! '.? ,l de sa!gre est%ril &'(
Pla)a de petri est%ril &'(
Pro)edi,ie!to:
Se to,ar- a #! al#,!o ,#estra de e.#dado /ar@!geo$ para lo
)#al de2er- a2rir la 2o)a * pro!#!)iar la letra AAB$ para
e.po!er la ;o!a /ari!goC a,igdalia!a.
Co! la a*#da del +isopo /rotar la ;o!a e.p#esta * l#ego
depositar el +ispo e! el /ras)o )o! > ,l de )aldo !#triti0o$
rotarlo e!%rgi)a,e!te &,#estra(. Dese)+ar el +ispo.
Retirar del 2a=o ,ar@a el t#2o )o! agar li)#ado$ a=adirle dos
AasadasB de la ,#estra. Taparlo * rotarlo e!tre las ,a!os.
I!,ediata,e!te a=adir '.? ,l de sa!gre al t#2o )o! agar
li)#ado * ,#estra. Taparlo. Rotarlo e!%rgi)a,e!te e!tre las
,a!os$ +asta la +o,oge!i;a)i!.
E! )o!di)io!es ade)#adas &9#!to al ,e)+ero$ si! +a2lar !i
toser$ et).($ destapar la pla)a de petri 0a)@a est%ril * 0erter e!
ella el agar li)#ado )o! sa!gre * ,#estra. Tapar * esperar :#e
se solidi/i:#e.
Rot#lar e I!)#2ar a 345C d#ra!te 67 +oras.
I!terpreta)i!:
O2ser0ar el desarrollo de )olo!ias de!tro de agar.
D#s)ar las )olo!ias aisladas$ des)ri2irlas * apre)iar el
)o,porta,ie!to )o! la sa!gre$ si +a* +e,lisis total &2eta( o
par)ial &al/a(. Ha)er #so del ,i)ros)opio estereos)pi)o.
--
PROTOCOLO III. : ESTUDIO DACTERIOLE8ICO DE HECES
&Copro)#lti0o(
Materiales:
1ras)o pe:#e=o )o! s#spe!si! de +e)es e! sol#)i! sali!a
&'(
L-,i!as portao29etos &<(
Pla)as de petri )o!te!ie!do ,edios de )#lti0o sele)ti0os:
Agar Ma) )o!Fe* * Agar SS. &D#s)ar )o,posi)i!(
&'(
Pro)edi,ie!to:
Co! a*#da del asa de plati!o +a)er #! /rotis de la s#spe!si!
de +e)es$ /i9arla al )alor * )olorearla )o! 8ra,.
O2ser0ar al ,i)ros)opio la di0ersidad 2a)teria!a. Ha)er
es:#e,a e! la g#@a de pr-)ti)as.
Co! el asa de plati!o$ se,2rar por estr@a * agota,ie!to #!a
asada de la s#spe!si! de +e)es e! la s#per/i)ie de los
,edios sele)ti0os.
Rot#lar la pla)a petri e i!)#2arla a 345C d#ra!te 67 +oras.
I!terpreta)i!:
E! los ,edios de )#lti0o #tili;ados el s#strato 2ase e,pleado
es la La)tosa * el i!di)ador de pH ro9o !e#tro. L#ego las
)olo!ias de )olor ro9o so! a:#ellas :#e +a! ,eta2oli;ado la
la)tosa &Es)+eri)+ia$ GHe2siella$ E!tero2a)ter $ Citro2a)ter(.
E! )a,2io las )olo!ias i!)oloras so! las :#e !o +a!
,eta2oli;ado la la)tosa &Prote#s$ Sal,o!ella$ S+igella(.
El ,edio de SS )o!tie!e ade,-s +ierro$ para dete)tar a:#ellas
2a)terias )apa)es de ,eta2oli;ar el A;#/re de los a,!io-)idos$
&Sal,o!ella$ Citro2a)ter * Prote#s($ /or,a!do s#l/#ro de +ierro
:#e es de )olor !egro$ l#ego las )olo!ias se te=ir-! de !egro.
Se de2e sele))io!ar #!a )olo!ia aislada para reali;ar las
di0ersas pr#e2as ,eta2li)as &TSI$ LIA$ Citrato$ #rea$
,o0ilidad$ et)( para ide!ti/i)ar el A2iotipoB o g%!ero.
&DEMOSTRATIVO(.
-C
PR>8>9>L> EB7 0AU0 P>80DL1
&. Introucci.n 7
Muc(os procesos in"ecciosos son transmitidos por v*a oral, siendo el agua el ve(*culo
principal. +e puede se<alar in"ecciones como la @epatitis 0 ,in"ecciosa/, 1nterovirus
,polio/, Rotavirus, Bibrio c(olerae, +almonelosis, entre otras.
1l agua de bebida debe tener caracter*sticas organol#pticas, qu*micas bacteriolgicas
aceptables para no producir da<o al (umano, denomin&ndole potable.
'esde el punto de vista microbiolgico el agua potable debe reunir las siguientes
caracter*sticas7
2. Dacterias mes"ilas 7 1n n;mero in"erior a -33 UF9 en 233 ml de agua
:. Dacterias coli"ormes7 1n n;mero in"erior a ? UF9 en 233 ml de agua
?. 1sc(eric(ia coli7 0usente en 233 ml de agua
5. Pseudomonas aeruginosa7 0usente en 233 ml de agua
%ota7 UF9 unidades "ormadoras de colonias
$. Proceimiento' para demostrar el n;mero m&s probable de bacterias contenidas
en una muestra de agua, se siembra por triplicado, en medio l*quido, tres
vol;menes de agua ,23 ml, 2.3 ml 3.2 ml/.
Encubar a ?JO9 por :5 (oras.
>bservar la turbide) de los cultivos re"erirlos a la 8abla de @osUins.
23 ml
agua
2.3 ml
agua
3.2 ml
agua
%MP en
233 ml
0AU0
23 ml
agua
2.3 ml
agua
3.2 ml
agua
%MP en
233 ml
0AU0
$$$ $$$ 2 ? ? $$$ $$$ :?
$$$ 2 $$$ ? ? $$$ 2 ?N
2 $$$ $$$ 5 ? $$$ : C5
2 $$$ 2 J ? 2 $$$ 5?
2 2 $$$ J ? 2 2 J-
2 2 2 22 ? 2 : 2:3
2 : $$$ 22 ? : $$$ N?
: $$$ $$$ N ? : 2 2-3
: 3 2 25 ? : : :23
: 2 $$$ 2- ? ? $$$ :53
: 2 2 :3 ? ? 2 5C3
: : 3 :2 ? ? : 2,233
-J
: : 2 :=
+e anota el n;mero de tubos positivos ,turbios/ con cada volumen de agua se obtiene el
n;mero de bacterias m&s probable en 233 ml de agua.
PROTOCOLO V : CULTIVO DE ORINA &UROCULTIVO(
Materiales:
1ras)os est%riles de 2o)a a!)+a$ de >? ,l de )apa)idad
Pla)as petri )o! ,edios de Agar Ma) Co!Fe* &MC(* Agar
sa!gre&AS(
Asa de sie,2ra )ali2rada$ de ?.?' ,l
Pro)edi,ie!to:
To,a de la ,#estra:
o Co!di)io!es del pa)ie!te: si! terapia a!ti2iti)a tres d@as
pre0ios al est#dio e +igie!e ge!ital a!tes de e,itir la
ori!a dire)ta,e!te e! el /ras)o.
o La ,#estra de2e ser pro)esada e! las dos pri,eras
+oras de re)ep)io!ada$ de !o ser posi2le )o!ser0arla a >
IC +asta por 67 +oras.
Sie,2ra: To,ar #!a asada &?.?',l( de ori!a e i!o)#larla e! la
s#per/i)ie de )ada #!o de los ,edios de Agar MC$ AS$ sie,2ra
por estr@as paralelas.
To,ar #!a asada * depositarla e! #! portao29etos$ /i9arla *
)olorearla )o! 8ra,. O2ser0ar al ,i)ros)opio.
I!terpreta)i!:
Est#diar las )olo!ias desarrolladas:
o Co!tarlas$ )ada )olo!ia represe!ta '$??? 2a)terias por
,l. C#e!tas i!/eriores a '?$??? J,l se )o!sidera!
)o!ta,i!a!tes de #retra *Jo ge!itales.
o Ide!ti/i)ar las )olo!ias desarrolladas
E! el /rotis de ori!a )oloreado )o! 8ra, ge!eral,e!te !o se
o2ser0a g%r,e!es. La prese!)ia de le#)o)itos * a2#!da!tes
g%r,e!es es i!di)ati0o de i!/e))i!.
-=
La prese!)ia de #! solo tipo de )olo!ias * desarrollo
+o,og%!eo so! i!di)ati0os de :#e el ger,e! aislado es el
)a#sa!te de la i!/e))i!.
Ha)er la sie,2ra para el a!ti2iogra,a.
CCCCCCCCCCCCCCCCC
PROTOCOLO VI: CULTIVO DE SAN8RE &HEMOCULTIVO(
Materiales
Heri!ga des)arta2le de '? > ,l
Ligad#ra
Material desi!/e)ta!te &algod!$ al)o+olC*odado(
8#a!tes des)arta2les
1ras)o )o! ,edio de )#lti0o l@:#ido &I!/#si! de )ere2ro *
)ora;!$ Caldo Tripti)ase so*a$ Caldo !#triti0o K e.tra)to de
le0ad#ra K a!ti)oag#la!te(.
Pro)edi,ie!to
Lo ideal es :#e el pa)ie!te est% e! el i!i)io /e2ril * :#e !o est%
to,a!do a!ti2iti)os. La a#se!)ia de estas dos )o!di)io!es !o
i,pide la to,a de ,#estra.
Desi!/e)tar proli9a,e!te la ;o!a de p#!)i!. O2te!er sa!gre
e! 0ol#,e! &> a '? ,l( e:#i0ale!te al '?L del )o!te!ido del
/ras)o de )#lti0o. Verter la sa!gre e! el ,edio de )#lti0o$
p#!;a!do el tap! del /ras)o$ pre0ia,e!te desi!/e)tado * si!
to)ar la ag#9a.
Rot#lar: No,2re$ 1e)+a * Hora de to,a de ,#estra.
SegM! el )#adro )l@!i)o se p#ede! to,ar 0arias ,#estras
s#)esi0as.
I!)#2a)i!: el /ras)o +e,o)#lti0o se )o!ser0ar- e! i!)#2a)i!
a 34IC para la ,a*or@a de 2a)terias :#e +a)e! 2a)terie,ias *
a <"IC )#a!do se sospe)+a de Darto!elosis.
I!terpreta)i!:
-N
Le)t#ra: Todos los d@as se o2ser0a si +a* )a,2ios es el
aspe)to ,a)ros)pi)o del +e,o)#lti0o &t#r2ide;$ )olor g#i!da
e! el /o!do$ o prese!)ia de gr#,os e! la s#per/i)ie del
sedi,e!to de +e,at@es(.
Ha)er #! /rotis * )olorearlo )o! 8ra,.
E! /#!)i! de lo o2ser0ado e! el 8ra, se reali;ar-! los
s#2)#lti0os e! di0ersos ,edios de )#lti0o$ para ide!ti/i)ar el
,i)roorga!is,o aislado.
Reali;ar el a!ti2iogra,a respe)ti0o.
PROTOCOLO VII: CULTIVO DE SECRECION DE HERIDAS.
Materiales:
Hisopo de algod! o si!t%ti)o est%ril
T#2o )o! tapa de ros)a est%ril )o!te!ie!do ,edio de
tra!sporte
Medios de )#lti0o: Caldo T+iogli)olato &CT+($ Agar Sa!gre
&AS($ Agar Ma) Co!Fe* &MC($ Medio Hipert!i)o &MH( * Agar
Sa2o#ra#d &SAD(
L-,i!a porta o29etos
Pro)edi,ie!to:
Es re)o,e!da2le :#e el pa)ie!te !o est% to,a!do a!ti2iti)os
La lesi! do!de se 0a a to,ar la ,#estra !o de2e te!er
)re,as o a!ti,i)ro2ia!os
H#,ede)er el +isopo )o! la se)re)i!$ te!ie!do )#idado de !o
to)ar s#per/i)ie de piel sa!a. Ha)er #! pe:#e=o /rotis e! el
portao29etos e i!trod#)ir el +isopo e! el t#2o )o! ,edio de
tra!sporte.
La sie,2ra de2e ser i!,ediata$ de !o ser posi2le el t#2o )o!
,edio tra!sporte * ,#estra de2e! )o!ser0arse a >IC +asta s#
pro)esa,ie!to &!o ,as de 67 +oras(
Sie,2ra: Co! el +isopo +a)er #! pe:#e=o /rotis e! #! -!g#lo
de )ada ,edio de )#lti0o$ para l#ego )o! el asa de sie,2ra
distri2#ir la ,#estra por agota,ie!to. I!)#2ar las pla)as a
C3
34IC por <6 a 67 +oras. A=adir al t#2o )o! ,edio de
tra!sporte KJC 3 ,l de )aldo t+iogli)olato e i!)#2ar a 34IC.
I!terpreta)i!:
La o2ser0a)i! del /rotis de la se)re)i! )oloreado )o! 8ra,
es de s#,a i,porta!)ia para i!terpretar el )#lti0o.
La le)t#ra de los )#lti0os se +ar- )o! la a*#da del Pro/esor
Ide!ti/i)ar las )olo!ias aisladas$ )o! a*#da de la g#@a de
pr-)ti)as$ reali;ar las pr#e2as 2io:#@,i)as o e!;i,-ti)as
!e)esarias.
Ha)er la sie,2ra parta el a!ti2iogra,a.
81M0 := 7 @>%A>+ 0MDE1%80L1+
Introucci.n7
Los (ongos ambientales son los que viven a e!pensas de la materia inerte. La
maor*a son sapro"itos, algunas especies son productoras de antibiticos otros
pueden actuar como alergenos ocasionando sensibili)acin.
1stos (ongos pueden ser oportunistas producir in"ecciones secundarias en
pacientes con inmunode"iciencias, con in"ecciones crnicas
1n los medios de cultivo desarrollan con gran "acilidad en :5 a 5= (oras.
*ateria!e"7
2. 9ultivo de Penicillium, 0spergillus, Fusarium R)opus en medio de +abouraud
:. Microcultivos en l&mina de cada una de los (ongos en estudio.
?. 9ultivo de R(odotrula en medio +abouraud.
Proceimiento7
2, 1studiar las caracter*sticas macroscpicas de las colonias ,aspecto, color,
consistencia, pigmento di"undido etc./
:. 9on objetivo de menor aumento ,234/ observar los microcultivos describir la
caracter*stica de los micelios, conidias conidi"oros.
Re"u!tao"7
PEN*C*&&*+(7 colonias pulverulentas
de color a)ul verdoso.
@i"as tabicadas con conidi"oros rami"icados
C2
en su e!tremo distal con la apariencia de pincel
conidias dispuestas en cadena .

#SPE,'*&&+S7 colonias "ilamentosas
de color blanco, amarillo, verde,
marrn o negro.
@i"as tabicadas con ensanc(amiento
en su e!tremo distal que da origen a
esterigmas de donde nacen las conidias
en cadena.
%+S#,*+(7 colonias algodonosas
de color rosado .
@i"as tabicadas que dan origen a
conidi"oros macroconidias
multiseptadas "usi"ormes, curvadas.
,H*-.P+S 7 colonias algodonosas
blanco grisaceas con puntos negros
,esporangios/.
@i"as no septadas agrupadas como
raices, a partir de las cuales se proectan
"ilamentos largos ,esporangi"oro/
"ormando en su e!tremo una estructura
redonda oscura que contiene gran cantidad
de esporas.
C:
,H./.)0,+&# 7 colonias cremosas
de color rosado.
0l microscopio se observan c#lulas ovoides
o redondas.
TE*A $@ ' 7ONGOS DER*ATO0ITOS
Introucci.n7
+on (ongos "ilamentosos que tienen predileccin por la queratina, por lo que a"ectan
piel, pelo u<a. Por su (abitat pueden clasi"icarse en Aeo"*licos, Moo"*licos
0ntropo"*licos, pueden in"ectar al (ombre a los animales.
8res g#neros patgenos son de inter#s7 8ric(op(ton, Microsporum
1pidermop(ton que producen ti<a corpis, capitis, cruris, pedis onicomicosis.
La identi"icacin de cada uno est& basada en la mor"olog*a de la colonia de las
estructuras de reproduccin ,microconidias o macroconidias/
*ateria!e"7
2. Muestras patolgicas de piel pelo u<a en preparaciones en "resco con P>@
:. 9ultivo de ). rubrum, ) mentagrophytes, ) tonsurans, ( canis, ( gypseum y E
1loccosum en agar sabouraud glucosado
?. Microcultivos de los mismos (ongos con a)ul de lacto"enol
Proceimiento7
8oma de muestra7 1n lesiones de piel se obtiene por raspado de los bordes de la
lesin 1n cuero cabelludo se retiran los pelos de la )ona a"ectada. Las u<as son
previamente (umedecidas con alco(ol luego recortadas asi como raspado del
lec(o ungueal.
1!amen directo7 +e prepara un e!amen en "resco con (idr!ido de potasio al :3.. +e
observa al microscopio con objetivo 534 buscando la presencia de esporas
redondeadas aisaladas o agrupadas en racimos re"ringentes, (i"as cortas o largas
C?
cil*ndricas con los e!tremos redondeados. 1n los pelos se puede observar esporas
ubicadas en el interior ,endotri!/ o alrededor del pelo ,e!otri!/.
9ultivo7 1l medio de cultivo de eleccin es el +abouraud que contiene 53 gTL de
de!trosa. La siembra se (ace por puntura e incuba a medio ambiente, esperando
desarrollo entre el -O l-vo d*a.
Re"u!tao"'
0/ 1!amen en "resco de D/ 1!amen en "resco de
escamas de piel pelo in"ectado

),*CH.PH2).N ,+B,+( 7
9olonias algodonosas de color blanco
con pigmento rojo en el reverso del tubo.
@i"as septadas con microconidias
piri"ormes s#siles.
),*CH.PH2).N (EN)#',.PH2)ES!
9olonias pulverulentas granulosas
esosas, blanquecinas con pigmento
amarillo pardusco en el reverso.
@i"as septadas con abundantes
microconidias es"#ricas en racimos
C5
),*CH.PH2).N ).NS+,#NS !
9olonias membranosas crateri"ormes,
acartonadas.
@i"as septadas en raqueta, microconidias
piri"ormes clamidosporas.
(*C,.SP.,+( C#N*S!
9olonia blanquecina con pigmento
amarillo naranja en el reverso.
@i"as septadas con macroconidias
el*pticas o "usi"ormes con tabiques
transversales e!crecencias en la
super"icie.
(*C,.SP.,+( '2PSE+(!
9olonia algodonosa o "inamente
pulverulenta de color blanco cremoso.
@i"as septadas con macroconidias de
super"icie lisa con tabiques transversales.
EP*/E,(.PH2).N %&.CC.S+( !
9olonias aterciopeladas o "inamente
pulverulentas, con pliegues en el centro,
de color amarillo a)u"re.
@i"as septadas con macroconidias grandes
con el e!tremo distal romo anc(o,
tabicadas transversalmente.
C-
TE*A -% ' 7ONGOS (E1ADURI0OR*ES
Introucci.n7
Las levaduras son (abitantes del medio ambiente "orman parte de la "lora normal.
+ituaciones del (u#sped como terapia antibitica prolongada, corticoterapia,
radiaciones, diabetes, inmunode"iciencias, etc pueden permitir la coloni)acin de las
levaduras oportunistas producir in"eccin.
Las levaduras mas importantes en patolog*a (umana son la C3ndida albicans, que
produce micosis super"iciales sist#micas, el Criptococcus neo1ormans ,torula/ que
produce meningoence"alitis el Pityrosporum ovale, causante de la pitiriasis
versicolor.
*ateria!e"7
2. Frotis de "lujo vaginal coloreado con Aram
:. 9ultivo de C3ndida albicans en medio +abouraud.
?. +uspensin de C3ndida albicans en suero incubado a ?J o9 T : (oras
5. 9ultivo de Critococcus neo1ormans en medio +abouraud
-. 9ultivo de Criptococcus neo1ormans en agar urea.
C. Preparaciones en "resco con tinta c(ina l*quido ce"aloraquideo de paciente con
9riptococosis.
J. 1!amen directo con P>@ de escamas de piel con pitiriasis versicolor ,Malasse)ia
"ur"ur/
Proceimiento7
CC
2. >bservar con objetivo de inmersin el "rotis de "lujo vaginal.
0preciar las "ormaciones levaduri"ormes pseudomicelios de 9&ndida albicans.
:. 'escribir las caracter*sticas del cultivo de 9&ndida albicans.
?. @acer una preparacin en "resco a partir de la suspensin de c&ndida en suero.
>bservar con objetivo 534 apreciar las prolongaciones digiti"ormes,
caracter*stico de la 9&ndida albicans ,tubo germinativo/
5. 'escribir las caracter*sticas del cultivo de 9riptococcus apreciar el metabolismo
de la urea.
-. >bservar las preparaciones en "resco con tinta c(ina, apreciar la presencia de
c&psula del 9ritococcus neo"ormans como un (alo transparente alrededor de las
esporas.
Re"u!tao"7
8ubo germinativo 9ultivo de 9&ndida Frotis de secrecin vaginal

9ultivo de
9riptococcus neo"ormans >bservacin de c&psula

CUESTIONARIO7
2. Emportancia de llegar a un diagnstico etiolgico mictico de una lesin d#rmica.
:. +iendo la 9&ndida una levadura que "orma parte de la "lora microbiana del cuerpo
(umano, Gcu&ndo le dar*a importancia cl*nica que amerite tratamientoI
?. +e<ale los (ongos sapro"itos productores de antibiticos
5. Hu# (ongo produce meningo ence"alitis se<ale un m#todo pr&ctico r&pido para
diagnosticarloI
-. Hu# "uncin tiene el P>@ al :3 . en las preparaciones en "resco para investigar
(ongosI
CJ
'1+0RR>LL>
TE*A -& ' *ICOSIS SISTE*ICAS E7ongo" im.rBico"F
*ICOSIS SUBCUTANEAS
Introucci.n7
1stos (ongos se encuentran distribuidos en la naturale)a ,suelo, "ragmentos de
vegetales, e!cretas de aves murci#lagos/. +e les denomina dimr"icos por su doble
comportamiento, en el (u#sped a temperatura de incubacin de ?J o9 son
levaduri"ormes, en cambio a temperatura ambiental se comportan como "ilamentosos.
Las personas animales se contaminan con los (ongos dimr"icos por in(alacin
produciendo in"ecciones sist#micas. Representan a #ste grupo el Paracoccidioides
brasiliensis 4blastomyces br5 el Hystoplasma capsulatum.
Las micosis subcut&neas son producidas por diversos (ongos, siendo el mas "recuente
el Sporothri6 schenc7ii, que se transmite por inoculacin traum&tica con espinas o
restos de plantas produciendo in"eccin crnica del sistema lin"&tico.
*ateria!e"7
9ultivo de Paracoccidiodes br. en 0gar +abouraud en 0gar cerebro cora)n ,D@E/
Preparaciones en "resco con a)ul de lacto"enol de Paracoccidioides br en D@E
Frotis de esputo de paciente in"ectado con Paracoccidiodes br.
9ultivo de @istoplasma c. en 0gar sabouraud en 0gar cerebro cora)n ,D@E/
Preparaciones en "resco con a)ul de lacto"enol de @istoplasma c. en sabouraud.
C=
Preparaciones (istolgicas de tejidos in"ectados con @istoplasma c.
9ultivo de +porotri! sc(. en 0gar +abouraud en D@E incubado a ?J O9
Preparaciones coloreadas con Aram de cultivo de +porotri! sc(. en D@E.
Proceimiento7
2. >bservar las caracter*sticas de las colonias de cada una de las tres especies de
(ongos dimr"icos presentados tanto en agar sabouraud como en agar D@E
:. >bservar al microscopio, con objetivo de 534, las preparaciones en "resco
presentadas.
?. >bservar con objetivo de inmersin las preparaciones (istolgicas presentadas
Re"u!tao"7
Registrar las observaciones macroscpicas microscpicas.
Paracocciioie" :ra"i!ien"i"
1sputo coloreado con Wrig(t
>bservar las esporas grandes de 23$C3 mu
de pared gruesa con varias gemaciones
9ultivo a ?J o9 9ultivo a :: o9

1sporas multigemadas
en timn de barco u
orejas de MicUe
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
$$
7i"to,!a"ma ca,"u!atum
9orte (istolgico ,(*gado/7
>bservar levaduras peque<as de 2 a ? micras
en el citoplasma de los (istiocitos.
CN
9ultivo a ?J o9 9ultivo a :: o9

@i"as con
macroconidias
tuberculadas
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
$
S,orotriG "c=enHii 7
9ultivo a ?J o9 9ultivo a :: o9 ,(i"as con conidias
distribuidas en margarita/
TE*A -$ ' ESTUDIO DE (OS 1IRUS
Introucci.n7
1l diagnstico de las en"ermedades virales se (a "ortalecido con los avances en los
conocimientos t#cnicas en inmunolog*a, pero nunca se puede obviar la con"eccin
de la (istoria cl*nica del paciente, la que nos da in"ormacin mu importante como
tiempo de en"ermedad, sintomatolog*a, entorno epidemiolgico, etc., datos que
permiten llegar a un diagnstico presuntivo, necesario para orientar los estudios en el
laboratorio.
Para "acilitar la interpretacin de los estudios inmunolgicos muc(as veces es
recomendable obtener dos muestras de sangre con intervalo de ? semanas, que
permite establecer si la en"ermedad est& en sus inicios, periodo de estado o
convalecencia.
EGamen micro"c.,ico7
+i bien los virus tienen un tama<o mu peque<o que no pueden ser observados con el
microscopio de lu), algunos virus tienen la capacidad de "ormar estructuras
intracelulares denominadas cuerpos de inclusin que se pueden reconocer con el
microscopio corriente, estructuras patognomnicas de ciertos virus.
J3
1iru" Nom:re U:icaci.n Caracter"tica
Viruela /Vacuna Auarnieri citoplasma 0cid"ilo
Rabia %egri citoplasma 0cid"ilo
Molusco
contaioso
@enderson Paterson citoplasma Das"ilo
Con!unti"itis de
inclusi#n
$$ citoplasma Das"ilo
$iebre amarilla Margarino 8orres nuclear 0cid"ilo
%erpes simples Lipsc(ut) nuclear 0cid"ilo
Citomealo"irus $$ nuclear 0cid"ilo

Ai"!amiento7
Para aislar los virus se requiere previamente preparar cultivos de c#lulas donde se
puedan multiplicar observar los cambios celulares producto de la in"eccin viral,
denominado e"ecto citop&tico, caracteri)ado por disminucin del tama<o celular,
redondeamiento, picnosis por ;ltimo lisis celular.
Los cultivos celulares pueden ser primarios, que slo duran uno o dos pasajes, como
los que provienen de "ibroblastos de embrin de pollo, ri<n de mono, etc los de
l*nea, que son c#lulas tumorales adaptadas en el laboratorio de multiplicacin
inde"inida ,@ela, @ep:, etc/.
%o olvidemos que el primer cultivo celular "u# la membrana corio alantoidea del
embrin de pollo ,(uevo/.
IentiBicaci.n7
Para identi"icar un virus que (a producido e"ecto citop&tico en un cultivo celular,
debemos disponer de los sueros espec*"icos de las diversas especies de la "amilia
viral que se sospec(a, ra)n por la cual necesitamos tener un diagnstico presuntivo
que oriente el estudio.
Los anticuerpos contenidos en dic(o suero in(ibir&n en "orma espec*"ica el e"ecto
citop&tico u otra propiedad ,(emaglutinacin o (emadsorcin/ de dic(o virus.
Las t#cnicas inmunolgicas permiten reconocer en el paciente la presencia de
anticuerpos, tipo de inmunoglobulina medir el nivel.
La presencia de anticuerpos no siempre nos indica in"eccin viral, en in"ecciones
crnicas o end#micas es mu ;til investigar la presencia de inmunoglobulinas M que
son e!presin de in"eccin aguda o periodo de estado.
Los procedimientos inmunolgicos ant*geno$anticuerpo en sus diversas "ormas7
0glutinacin de late!, Enmuno"luorescencia, 1n)ima inmuno ensao, Radio inmuno
ensao 1lectro"oresis e Enmunoprecipitacin son empleados en virolog*a.
9on #stas t#cnicas se puede investigar tanto la presencia de ant*geno viral como la de
anticuerpos "ormados por el (u#sped.
J2
9uando se investiga la presencia de anticuerpos es necesario obtener dos muestras de
sangre al paciente, con intervalo de 2- a :3 d*as, para demostrar conversin
serolgica La titulacin de anticuerpos contra los diversas in"ecciones virales en la
poblacin es el par&metro que las entidades de +alud P;blica emplean para establecer
sus pol*ticas de vacunacin.
$$$$$$$$$
E. +1ME%0RE>
8emario7 Re"i"tencia :acteriana a !o" anti:acteriano".
ARUP> 27 +e<alar la estructura bacteriana el mecanismo de accin de los anti
microbianos
a/ 'e la s*ntesis de la pared, ejemplos
b/ 0 nivel de la membrana citoplasm&tica, ejemplos
c/ +obre las mol#culas de &cido nucleico, ejemplos
d/ 1n la s*ntesis de las proteinas, ejemplos
e/ Mecanismos competitivos, ejemplos
ARUP> :7 'escribir los mecanismos %o gen#ticos mediante los cuales las bacterias
resisten la accin antibacteriana.
a/ Ubicacin de la in"eccin, ejemplos
J:
b/ 1stado de la bacteria, ejemplos
c/ 9aracter*stica qu*mica del antibacteriano, ejemplos
ARUP> ?7 'escribir los mecanismos gen#ticos de resistencia bacteriana
a/ +eleccin de mutante7 cromosmico, ejemplos
b/ Entercambio gen#tico7 e!tra cromosmico, ejemplos
ARUP> 57 Mecanismos bioqu*micos de resistencia
a/ Permeabilidad celular a la droga, ejemplos
b/ Enactivacin de la droga, ejemplos
c/ Modi"icacin del receptor ,)ona blanco/, ejemplos
d/ +*ntesis de metabolito, ejemplos
9>%91P8>+7
2. 0ntibitico
:. Huimioter&pico
?. Dactericida
5. Dacteriost&tico
-. Resistencia cru)ada
EE. +1ME%0RE>
8emario7 1ACUNAS
2. @istoria, 'e"inicin Finalidad
:. 9lasi"icacin. 9adena de "r*o
5. Endicaciones. 9ontraindicaciones. Riesgos de la vacunacin
-. 1squema de vacunacin del Ministerio de +alud
J?
C. Bacunas preparadas con agente vivo ,atenuadas/, caracter*sticas
ejemplos. .
J. Bacunas preparadas con agente muerto ,inactivadas/, caracter*sticas
ejemplos.
=. Bacunas preparadas con "racciones antig#nicas conjugadas,
caracter*sticas ejemplos.
-. Bacunas elaboradas a partir de to!inas, caracter*sticas ejemplos.
23. Bacunas elaboradas por ingenier*a gen#tica, caracter*sticas
ejemplos.
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
EEE. +1ME%0RE>

8emario7 E! 1iru" e !a InmunoeBiciencia 7umana E1I7F
2. 'e"inicin clasi"icacin de los Retrovirus.
:. 'escriba la estructura del virus de inmunode"iciencia (umana.
,BE@/.
?. Emportancia del conocimiento de los ant*genos del virus
5. @aga un resumen de la patogenia de la en"ermedad por BE@
J5
-. 'e"inicin de +E'0.
C. B*as de transmisin del BE@.
J. Pruebas de laboratorio para diagnosticar una in"eccin por BE@.
=. @aga un esquema de la reaccin 1LE+0
N. Marcadores serolgicos para diagnosticar in"eccin por BE@
23 GHu# investigamos en la prueba de Western blottI
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
P08>A1%>+ $ D0981RE0%>+
Re".7 Murra, PatricU et al.
*icroorgani"mo C!nica E,iemio!oga
2. 1nterococcus Dacteriemia, abscesos, Pacientes (ospitali)ados
"aecalis, "aecium En". urinaria, endocarditis
:. +tap(lococcus En"ecciones cut&neas, 9oloni)a piel mucosas,
aureus diseminadas, s(ocU t!ico, proli"era a temperaturas e!tre$
Ento!icacin alimentaria. mas en &reas (ipertnicas.
?. +tap(lococcus Patgeno oportunista con 9oloni)a piel mucosas,
coagulasa negat. cuerpo e!tra<o e in"ec. proli"era a temperaturas e!tre$
urinarias. mas en &reas (ipertnicas.
J-
5. +treptococcus En"ecciones supurativas Poblaciones diversas
pgenes de piel, mucosas, partes
blandas, s(ocU t!ico.
%o supurativa7 "iebre reum&tica
-. +treptococcus En"ecciones urinarias, Aestantes. %eonatos,
agalactiae 1n"ermedad neonatal Pacientes con a"ecciones
Dacteriemias. crnicas.
C. +treptococcus En"ecciones cut&neas, Poblaciones diversas
beta (emol*ticos partes blandas >RL
J. +treptococcus Dacteriemias, endocarditis 0dultos con 9a. de colon
bovis
=. +treptococcus 1ndocarditis subaguda. Pacientes con alteraciones
viridans abscesos, septicemias, en v&lvulas cardiacas.
En"ecciones odontgenas
N. +treptococcus %eumon*a. Meningitis. Poblaciones diversas
Pneumoniae Dacteriemia. En"ecciones %eonatos, adultos, ancianos
respiratorias. 1ndocarditis.
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
23. Dacillus 9arbunco cut&neo, Poblacin que trabaja con
ant(racis respiratorio digestivo ganado, consumo de carne
terrorismo.
22. Dacillus cereus Aastroenteritis, 0limentos contaminados,
En"ecciones oculares trauma ocular con tierra
2:. 9ornebacterium 'i"teria 9ontagio v*a respiratoria
dip(teriae
2?. 9ornebacterium En"eccin de (eridas a Pacientes inmunodeprimidos
jeiUeium cuerpo e!tra<o. con maor riesgo.
+epticemias.
25. 9ornebacterium En"ecciones urinarias. Pacientes inmunodeprimidos,
urealticum +epticemia. con "actores de riesgo, o post
quir;rgicos.
JC
2-. 1rsipelot(ri! Lesin cut&nea in"lama$ Manipuladores de carne,
R(usiopat(ie toria prur*tica. pescado. Aranjeros.
Beterinarios.
2C. Listeria 1n"ermedad neonatal. %eonatos. Aestantes. 0ncianos
monoctgenes Dacteriemia en adultos. Enmunodeprimidos.
,gestantes/
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
2J. Mcobacterium 1n"ermedad pulmonar Pacientes con en"ermedad
aviumTintracelular diseminada. cnica ,BE@, Enmunde"icien./
2=. Mcobacterium Lepra tuberculoide o 9ontacto *ntimo con en"ermo
leprae lepromatosa
2=. %ocardia sp. En"ecciones cut&neas, Patgeno oportunista
broco pulmonares
abscesos.
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
2N. %eisseria Aonorrea. 1n"ermedad 8ransmisin se!ual.
gonorr(oeae in"lamatoria p#lvica. +intom&tica T 0sintom&tica
0rtritis.
:3. %eisseria Meningitis. Dacteriemia 1stado de portador sano.
meningitidis 9ontagio via respiratoria.
%i<os adultos
jvenes.
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
:2. 0cinetobacter %eumon*a. +epticemia. Patgeno oportunista.
En"ecciones diversas En"ecciones nosocomiales
::. 0eromonas Aastroenteritis. Patgeno oportunista
En"eccin de (eridas.
:?. Dartonella Fiebre anemia aguda 1!posicin en )ona
bacilli"ormis verruga numular verrucgena
:5. Dartonella 1n"ermedad del ara<a)o Poblaciones diversas
(enselae del gato. 0ngiomatosis
bacilar. 1ndocarditis.
:-. Dartonella 0ngiomatosis bacilar Poblaciones diversas
quintana Fiebre de las trinc(eras
:C. Dordetella 8os "erina 9ontagio v*a respiratoria
pertussis
JJ
:J. Drucella sp. Drucelosis Engesta de lec(e o derivados
de vaca, cabra u ovejas
in"ectados. ,)oonosis/
:=. 9amplobacter Aastroenteritis Moonosis. Engesta de alimentos
jejuni T coli o agua contaminados.
:N. 9amplobacter +epticemia. 0borto. Paciente anciano e
"etus inmuno deprimidos
?3. 9ardiobacterium 1ndocarditis sub aguda Patgeno oportunista
(ominis. Pacientes con da<o valvular
1iUenella corrodens
Pingella Uingae
?2. 1sc(eric(ia coli En"ecciones urinarias %i<os, adultos, gestantes,
uropatgena 9istitis, pielone"ritis
?:. 1sc(eric(ia coli 0limentos aguas
contaminadas
a/ enteropatgena 'iarrea acuosa vmitos de pre"erencia en ni<os.
b/ entero(emorr&gica 'iarrea acuosa con sangre Uremia
c/ enteroto!ig#nica 'iarrea acuosa Y. 'iarrea en viajeros.
d/ enteroagregadora 'iarrea con moco
e/ enteroinvasiva 'iarrea acuosa con sangre
??. Francisella 8ularemia ulcero glandular Picadura de garrapata
tularensis neumon*a. 9ontaminacin con conejos
En"ectados.
?5. @aemp(ilus 9apsuladas7 septicemia 9ontagio via respiratria
En"luen)ae meningitis
%o capsuladas7 sinusitis,
otitis, bronquitis, neumon*a.
?-. @elicobacter Aastritis. Zlcera duodenal Frecuente.
plori
?C. Plebsiella %eumon*a. En"ecciones nosocomiales
pneumoniae En"ecciones urinarias
?J. Legionella %eumon*a Pacientes ancianos,
pneumop(ila Proceso seudo gripal inmuno deprimidos.
?=. Mora!ella En"ecciones de ojo, oido %i<os adultos
J=
9atarr(alis respiratorias.
?N. Proteus En"ecciones urinarias 9ontaminacinI
de (eridas. 0nomal*a del tracto
53. Pseudomonas En"ecciones cut&neas, En"ecciones nosocomiales
aeruginosa ticas, oculares, urinarias,
bacteriemia.
52. +almonella7 0limentos contaminados
tp(i Fiebre ti"oidea
enteritidis 'iarrea
5:. +erratia T En"eccions urinarias En"ecciones nosocomiales
1nterobacter de (eridas

5?. +(igella 'isenter*a bacilar 0limentos contaminados
55. +treptobacillus Fiebre por mordedura Mordedura de roedor
monili"ormis Engesta de alimento
contaminado
5-. Bibrio c(olerae 'iarrea acuosa intensa 0gua alimentos
contaminados
5C. Bibrio 'iarrea acuosa Engesta de mariscos
par(aemol*ticos
5J. Bibrio En"eccin de (eridas Pacientes con en"ermedades
vulni"icus +epticemia. crnicas.
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
$$
5=. 0ctinomces 0ctinomicosis c#rvico$ 9oloni)a mucosas
"acial, tor&cica, abdominal,
p#lvica.
5N. Dacteroides En"ecciones en abdomen, @abitante normal del
"ragilis )ona pelviana cut&nea. Entestino.
-3. 9lostridium Dotulismo alimentario Ubicuitario de aguas
residuales
botulinum
*icroorgani"mo C!nica E,iemio!ogia
-2. 9lostridium 'iarrea asociada a uso de 9oloni)a tracto intestinal
JN
di""icile antibiticos.
-:. 9lostridium En"ecciones de partes blandas @abitat7 suelo, aguas
residuales
per"ringes Mionecrosis. +epticemia. Entestino de animales
(ombre
Ento!icacin alimentaria.
-?. 9lostridium 8#tanos @abitat7 suelo, aguas
residuales
tetani Entestino de animales
(ombre
-5. Propinibacterium 0cn#. Prtesis 9oloni)a piel mucosas
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
$$
--. 9(lamdia %eumon*a %i<os adultos
pneumoniae
-C. 9(lamdia %eumon*a 1!posicin a p&jaros
psitaci
-J. 9(lamdia 8racoma7 conjuntiva, uretra, 8racoma.
8rac(omatis c#rvi!, trompas.
Lin"ogranuloma ven#reo 8ransmisin se!ual.
-=. 9o!iella burnetii Fiebre H Personas e!puestas a ganado
En"ectado.
-N. Micoplasma %eumon*a at*pica %i<os adultos
pneumoniae
C3. RicUettsia 8i"us e!antem&tico 8ransmitido por picadura del
proXat)eUii piojo in"ectado.
C2. RicUetrsia Fiebre manc(ada Por mordedura de garrapata
ricUettsii
$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$$
C:. Dorrelia 1ritema migratrio 8ransmitido por garrapatas
bugdor"eri compromisos diversos
C?. Dorrelia Fiebre recidivante 8ransmitida por el piojo
recurrentis
C5. Lepstospira 1n"ermedad de Weil 1!posicin a orina de roedores
interrogans "iebre e ictericia perros, animales salvajes.
=3
C-. 8reponema +*"ilis 8ransmisin se!ual
cong#nita
pallidum
$$$$$$$$$$$
=2

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Dr. Nicanor Domnguez Navarrete

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