Microscopio ptico --- OPTICAL MICROSCOPE

Objetivos
Al trmino de este paquete de enseanza y aprendizaje, usted debe:
Apreciar las diferencias entre la luz reflejada y luz transmitida microscopios.
Entender el uso de la luz polarizada en un microscopio de transmisin.
Ser capaz de configurar y utilizar un microscopio para estudiar una serie de muestras.
Conocer los pasos necesarios para preparar muestras metalogrficas, cermicas y
polmeros.

Introduccin
Microscopios pticos tienen una amplia variedad de aplicaciones; que son herramientas
muy poderosas para la inspeccin de la microestructura de una gran variedad de
materiales. Es importante utilizar el modo apropiado para la muestra, la eleccin de la luz
reflejada o modos de luz transmitida.
Microscopa de luz reflejada se utiliza para una amplia gama de materiales, incluyendo
metales, cermicas y materiales compuestos. El contraste entre las diferentes regiones
cuando se ve en luz reflejada puede surgir de las variaciones en la topografa de la
superficie y las diferencias en la reflectividad (por ejemplo, de las diferentes fases,
diferentes orientaciones de grano, o regiones de frontera). Estas caractersticas se revelan
por una serie de tcnicas de preparacin de muestras que, cuando se lleva a cabo con
cuidado, puede producir imgenes de alta calidad tiles.
Modo de transmisin se puede utilizar cuando la muestra es transparente. La muestra es por
lo general en la forma de una rebanada delgada (por ejemplo, decenas de micras de
espesor). Contraste surge de las diferencias en la absorcin de la luz a travs de diferentes
regiones. Este mtodo se utiliza para el examen de minerales y rocas, as como vidrios,
cermicas y polmeros. Adems, el modo de transmisin a menudo puede mejorarse an
ms con el uso de la luz polarizada.
Microscopa de luz polarizada es un uso especializado del modo de transmisin, y el
contraste es debido a diferencias en la birrefringencia y espesor de la muestra. Esto puede
permitir la observacin de los granos, la orientacin del grano y el espesor.

Preparacin de la muestra
Para Metales
En la preparacin de muestras para microscopa, es importante para producir algo que sea
representativo de toda la muestra. No siempre es posible lograr esto con una sola
muestra. De hecho, es siempre una buena prctica para montar muestras de un material en
estudio en ms de una orientacin. La variacin en las propiedades del material afectar a
cmo debe manejarse la preparacin, por ejemplo materiales muy blandos o dctiles
pueden ser difciles de pulir mecnicamente.
Cortar un espcimen
Es importante estar alerta al hecho de que la preparacin de una muestra puede cambiar la
microestructura del material, por ejemplo a travs de la calefaccin, los ataques qumicos o
daos mecnicos. La cantidad de dao depende del mtodo por el cual se corta la muestra y
el material en s.
El corte con abrasivos puede causar una gran cantidad de dao, mientras que el uso de una
sierra de diamante de baja velocidad puede causar menos problemas. Hay muchos mtodos
de corte diferentes, aunque algunos se utilizan slo para tipos de muestras especficas.
Montaje
Montaje de especmenes es generalmente necesario para que puedan ser manejados
fcilmente. Tambin minimiza la cantidad de daos que puedan ser causados a la propia
muestra.
El material de montaje utilizado no debe influir en la muestra como resultado de una
reaccin qumica o tensiones mecnicas. Debe adhiere bien a la muestra y, si el espcimen
ser electropulido (un proceso electroltico ) o examinada bajo un microscopio electrnico
de barrido , entonces el material de montaje tambin debe ser elctricamente conductor.
Las muestras se pueden montar en caliente (en torno a 200 C) usando una prensa de
montaje, ya sea en un plstico termoestable ( por ejemplo, resina fenlica), o un plstico de
reblandecimiento trmico ( por ejemplo, resina acrlica). Si el montaje caliente va a alterar
la estructura de la muestra de una resina de endurecimiento en fro se puede utilizar, por
ejemplo . epoxi, acrlico o resina de polister. Los materiales porosos deben estar
impregnados por la resina antes de montar o de pulido, para evitar que arena, pulido de
medios de comunicacin o reactivo de ataque estar atrapado en los poros, y para preservar
la estructura abierta del material.
Con una muestra montada por lo general tiene un espesor de aproximadamente la mitad de
su dimetro, para evitar oscilante durante el rectificado y pulido. Los bordes de las muestras
montadas deben ser redondeados para minimizar el dao a los discos de lijado y pulido.

Un diagrama de un espcimen montados
Molienda
Las capas superficiales daadas por la corte deben ser eliminadas mediante lijado. Muestras
montadas se muelen con discos de papel abrasivo barrido con un refrigerante adecuado de
rotacin para eliminar los desechos y el calor, por ejemplo papel de carburo de silicio
hmedo. La aspereza del papel se indica mediante un nmero: el nmero de granos de
carburo de silicio por pulgada cuadrada. As, por ejemplo, papel de lija 180 es ms gruesa
que 1.200.
El procedimiento de molienda implica varias etapas, usando un papel ms fino (el nmero
superior) para cada etapa sucesiva. Cada etapa de molienda elimina los araazos de papel
ms grueso anterior. Esto se consigue mediante la orientacin de la muestra perpendicular a
los araazos anteriores, y viendo para estos araazos orientados previamente para ser
borrados ms fcilmente. Entre cada grado de la muestra se lava a fondo con agua y jabn
para evitar la contaminacin de grano ms grueso presente en la superficie de la
muestra. Tpicamente, el grado ms fino de papel utilizado es el 1200, y una vez los nicos
araazos dejados en la muestra son de este grado, la muestra se lava a fondo con agua,
seguido por el alcohol y luego se deja secar.
Es posible determinar el punto de inicio para el rectificado utilizando la siguiente relacin
emprica donde la anchura de la ms grande de cero se mide bajo un microscopio:

Esto impide poner ms dao a la muestra que ya existe; los grados ms gruesas de papel a
menudo no son tiles.
Especmenes de limpieza en un bao ultrasnico tambin puede ser til, pero no es
esencial.
La serie de fotos de abajo muestra la progresin de la muestra cuando se muele con papel
ms fino progresivamente.

Suelo espcimen de cobre con lija de grano
180
Suelo espcimen de cobre con una lija de
grano 400

Suelo espcimen de cobre con 800 lija de
grano
Suelo espcimen de cobre con una lija de
grano 1200
Pulido
Discos de pulir se cubren con un pao suave impregnado con partculas de diamante
abrasivos y un lubricante aceitoso. Se usan partculas de dos grados diferentes: un esmalte
ms grueso - tpicamente con partculas de diamante 6 micrmetros de dimetro lo que
debera eliminar los araazos producidos a partir de la etapa de molienda ms fina, y un
pulido ms fino - tpicamente con partculas de diamante 1 micra de dimetro, para
producir una suave superficie. Antes de utilizar un disco de pulir fina del espcimen se
deben lavar muy bien con agua tibia y jabn seguido de alcohol para evitar la
contaminacin del disco.

Espcimen de cobre pulido a 6 nivel de
micras
Espcimen de cobre pulido a 1 nivel de
micras. Lo ideal sera que no debe haber
scatches despus de pulir, pero a menudo es
difcil de eliminar todos ellos por completo.
Pulido mecnico siempre dejar una capa de material perturbado en la superficie de la
muestra, si la muestra es particularmente susceptible a los daos mecnicos (o fuerza
excesiva se usa en la molienda y las etapas de pulido) los desechos pueden incrustarse en la
superficie y la deformacin plstica puede existir bajo la superficie. Electropulido o pulido
qumico puede ser utilizado para eliminar esto, dejando una superficie sin ser molestados.
Aguafuerte
Aguafuerte se utiliza para revelar la microestructura del metal a travs de ataque qumico
selectivo. Tambin elimina la capa delgada, altamente deformado introducido durante el
rectificado y pulido.
En las aleaciones con ms de una fase, grabado crea contraste entre las diferentes regiones a
travs de las diferencias en la topografa o la reflectividad. La tasa de ataque qumico se ve
afectada por la orientacin cristalogrfica, la fase presente y la estabilidad de la regin. Esto
significa contraste puede surgir a travs de diferentes mecanismos - por lo tanto, revelando
diferentes caractersticas de la muestra.
En todas las muestras, reactivos de ataque sern preferentemente atacar los sitios de alta
energa, como los lmites y defectos.

El espcimen se graba usando un reactivo. Por ejemplo, para el grabado de acero inoxidable
o cobre y sus aleaciones, una solucin acuosa saturada de cloruro frrico, que contiene unas
pocas gotas de cido clorhdrico se usa. Esto se aplica con un bastoncillo de algodn
limpiado por la superficie un par de veces (Se debe tener cuidado de no sobre-grabado -
esto es difcil de determinar, sin embargo, las fotos a continuacin pueden ser de alguna
ayuda). La muestra debe inmediatamente lavarse con alcohol y se secan.
Tras el proceso de grabado puede haber numerosos pequeos hoyos presentes en la
superficie. Estos son los hoyos de grabado causados por ataque qumico localizado y, en la
mayora de los casos, no representan caractersticas de la microestructura. Pueden ocurren
preferentemente en regiones de alta trastorno local, por ejemplo, donde hay una alta
dislocaciones concentrationof.
Si la muestra es de ms grabada, es decir. grabado al agua fuerte por mucho tiempo, estos
pozos tienden a crecer, y oscurecer las caractersticas principales que se deben observar. Si
esto ocurre, puede ser mejor para moler la superficie mal grabado y re-pulido y grabado de
pistas, aunque es importante tener en cuenta las caractersticas que usted est tratando de
observar - varias veces moler una muestra muy delgada puede dejar nada que ver.

Espcimen de cobre grabadas Espcimen de cobre en grabados
Idealmente, la superficie a examinar pticamente debe ser plana y nivelada. Si no es as, la
imagen pasar dentro y fuera de foco como el rea de visualizacin se mueve por la
superficie. Adems, har que sea difcil tener todo el campo de visin en el enfoque -
mientras que el centro est enfocado, los lados estarn fuera de foco. Mediante el uso de
una prensa de nivelacin espcimen (que se muestra a continuacin), este problema puede
ser evitado, ya que presiona el espcimen montados en plastilina en un portaobjetos de
microscopio, por lo que es nivel. Un pequeo trozo de papel o tela cubre la superficie de la
muestra para evitar que se raye.

Espcimen de nivelacin de prensa

Cermicas y Polmeros
Cermica
Secciones finas
Para preparar las muestras de cermica para microscopa de luz transmitida, una rebanada
delgada, de aproximadamente 5 mm de espesor, se corta con una sierra de diamante o de la
rueda de corte. Una superficie se ha rodado a continuacin, utilizando suspensiones lquidas
de polvos de carburo de silicio cada vez ms finas. Entre las etapas del proceso de la
muestra deben ser limpiados a fondo. Despus del lavado final y secado de la superficie del
suelo est unido a un portaobjetos de microscopio con resina. Una sierra de corte se utiliza
en la cara expuesta para reducir el espesor de aproximadamente 0,7 mm. La muestra se ha
rodado a continuacin para llevarlo al espesor requerido - por lo general alrededor de
30 m, aunque algunas muestras de cermica se adelgazan hasta un mnimo de 10 m,
debido a su tamao de grano ms fino.La corredera se comprueba para el espesor bajo el
microscopio, y luego acabado a mano. El portaobjetos se cubre con una hoja de cubierta
protectora.
Pulido
El proceso de lapeado es una alternativa a la molienda, en la que las partculas abrasivas no
se fijan firmemente al papel. En lugar de ello una pasta y lubricante se aplica a la superficie
de un disco. La rugosidad superficial de las etapas de preparacin ms gruesas se elimina
por la micro-impacto de partculas abrasivas de rodadura.
Secciones pulidas
Estos difieren de las secciones delgadas ordinarias en que la superficie superior de la
muestra no est cubierto con una hoja de cubierta, pero se pule. Se debe tener cuidado para
evitar la rotura de la muestra. Las secciones pueden ser examinadas usando tanto
transmitida y reflejada microscopio de luz, lo cual es especialmente til si algunos
componentes son opacos.
Polmeros
Secciones delgadas
Secciones delgadas de polmeros orgnicos se preparan a partir de material slido mediante
la reduccin de las rebanadas usando un microtomo - un instrumento mecnico que se
utiliza para el corte de secciones delgadas. Ellos deben ser cortados a una temperatura por
debajo de la temperatura de transicin vtrea del polmero. Una seccin de corte se queja
durante el corte y debe ser desenrollado y montado sobre un portaobjetos de microscopio y
se cubre con un cubreobjetos. Unas pocas gotas de adhesivo de montaje se utilizan y deben
ser compatibles con el espcimen. Como siempre la temperatura de montaje no debe afectar
a la microestructura de la muestra.
El espesor de las rebanadas cortadas de polmero tienden a estar en el intervalo de 2 a
30 m dependiendo del tipo de material.
Polmeros ms duros se pueden preparar de la misma manera las muestras de cermica
como delgadas.
Secciones pulidas
Estos se preparan de la misma manera que las muestras metalogrficas. Los elastmeros
son ms difciles de pulir que termoestable polmeros y requieren mayores tiempos de
pulido. Los lubricantes usados durante el pulido no debe ser absorbida por la muestra.
Dado que las regiones cristalinas son atacados ms lentamente que los amorfos, grabado de
especmenes de polmero puede producir contraste que revela la estructura del polmero.

Utilizando el Microscopio Reflexin
Mirando hacia abajo un microscopio reflexin vemos la luz reflejada por una
muestra. Recuerde que contraste puede surgir de diferentes maneras. A continuacin se
muestra un diagrama de un microscopio ptico de reflexin; mover el ratn sobre las piezas
y sus nombres para ver una descripcin

Utilizando el Microscopio de Transmisin
Microscopios pticos de transmisin se utilizan para mirar en secciones delgadas - la
muestra debe transmitir la luz. Aqu es un diagrama de un microscopio de
transmisin; mover el ratn sobre las piezas y sus nombres para ver una descripcin.
Para ms informacin ver las placas de entintado , el asunto entradas del glosario sobre la
profundidad de campo , profundidad de foco , y la pgina en la luz polarizada y la
birrefringencia .

Usando microscopios
Ambos tipos de microscopio se utilizan de manera muy similar, aqu hay algunas pautas sobre cmo configurar un modelo
que deber observar:
La muestra se monta y se coloca en el escenario; empezar por aumentar lentamente la potencia de la fuente de luz
hasta que haya un punto brillante visible en la muestra (sin mirar por el ocular)
Con la lente de aumento ms bajo en lugar de enfoque utilizando la perilla de enfoque: sin mirar por el
microscopio, baje la lente del objetivo cerca de la superficie de la muestra y, a continuacin, utilice la perilla de
enfoque para aumentar poco a poco hasta que el crculo de luz sobre el espcimen razonablemente agudo. Ahora,
mirando a travs del ocular, ajuste el control de enfoque grueso. Cuando mirando hacia abajo el ocular utilice
siempre grueso del enfoque con el fin de mover la muestra de distancia del objetivo.
La distancia del ocular (para microscopios binoculares) debe ajustarse a una separacin cmoda y, mirando a travs
de los oculares, use el botn de enfoque fino para llevar la imagen a un enfoque ntido.
La imagen debe centrarse en el ocular no ajustable y luego el otro cambia de tal manera que tambin est en el
foco.
Para aumentar la ampliacin, deslice la torreta giratoria alrededor (asegurando la lente no toca la muestra) y luego
re-enfoque con el enfoque fino (debe tener muy poco ajuste!).
Una vez que un rea representativa se encuentra, y se centr una cmara digital se puede utilizar para hacer una foto y un
dibujo se puede hacer. Es importante, incluso en casos en que haya acceso a las cmaras de microscopio, para hacer
dibujos con anotaciones de los aspectos importantes del campo de visin. Recuerde que un boceto no tiene por qu ser una
copia de lo que se ve, sino que debe incluir los aspectos clave de la microestructura.
Las barras de escala
Observaciones en el microscopio no tienen ningn valor si no existe una escala que les acompaen, por lo que es muy
importante para entender la escala. Todos los dibujos deben tener barras de escala y software de la cmara del
microscopio permite a menudo una barra de escala que se aadir antes de guardar la imagen (dada la informacin
correcta acerca de la ampliacin).
La manera ms fcil de medir el tamao de una caracterstica bajo un microscopio es de relacionarlo con el tamao del
campo de visin. La forma ms sencilla de lograr esto es medir el tamao del campo de visin con una ampliacin baja y,
a continuacin, la escala del tamao apropiadamente a medida que aumenta la magnificacin. El campo de visin se
puede medir aproximadamente observando una regla bajo la lente de aumento ms bajo.
La precisin puede ser mejorada mediante el uso de una retcula. Una retcula es una diapositiva con una muy fina rejilla
que, de mtrica, se suele medir 1 mm de dimetro, y se divide en 100 segmentos, es decir, cada segmento es de 10 m de
dimetro. Esto permite una precisin mucho mayor en la medicin del campo de visin, y por lo tanto una mayor
precisin en la medicin de caractersticas.

Retcula mtrica en luz polarizada
En algunos microscopios, una barra de escala se superpone a uno de los oculares, que pueden ser utilizados para mejorar
an ms la precisin de la medicin de tamaos de la caracterstica. La barra de escala se puede calibrar mediante la
observacin, ya sea una retcula o una regla con una ampliacin baja. Por ejemplo, si la divisin 1 es equivalente a 20 mm
con una lente de aumento x 5, cada divisin es equivalente a 2 mm con una lente de aumento x 50. Mediante la medicin
de una caracterstica usando la escala en el ocular, el tamao real de la caracterstica se puede calcular conociendo la
anchura de las divisiones en el ocular. La barra de escala en el ocular es particularmente til porque se puede girar, y por
lo que ambas anchuras y longitudes se puede medir sin girar la muestra.

La luz polarizada
La luz visible es una forma de radiacin electromagntica, con vectores elctricos y magnticos oscilante perpendicular a
la direccin de propagacin. Por lo general, las oscilaciones son en cualquier direccin perpendicular a la direccin de
propagacin; la luz polarizada es la luz con oscilaciones en unos pocos, restringidos, direcciones.
La luz polarizada tiene una variedad de usos, incluyendo gafas de sol Polaroid, que bloquean la luz de una cierta
polarizacin, la eliminacin de gran parte de la mirada del suelo. La siguiente animacin flash da una introduccin a cmo
se utiliza luz polarizada en microscopa.

Como puede verse, dos pelculas de polarizacin a 90 entre s transmiten sin luz; la insercin de un material pticamente
anisotrpica entre los polarizadores puede resultar en el vector de luz ser giradas.
Cuando la luz entra en un material pticamente anisotrpico, los vectores de luz se polarizan en dos direcciones de
vibracin permitidas (PVD). La diferencia en el ndice de refraccin de estas direcciones resulta en un retraso de un rayo
con respecto a la otra; los rayos se propagan a velocidades diferentes dentro del material y de salida con una diferencia de
fase entre ellos. Esto causa una frecuencia de luz (es decir, una longitud de onda) para mostrar la interferencia destructiva,
y que la longitud de onda de la luz se pierde. Otras longitudes de onda se constructiva interferir (en diferentes grados), por
lo que diferentes colores se ven, en funcin del retraso. Esto se llama birrefringencia .
Una cua de cuarzo bajo LPA muestra cmo los cambios de color observados como los aumentos de retraso. En la foto de
abajo, los incrementos en el grosor de la cua de izquierda a derecha. Como el espesor aumenta, el retardo tambin
aumenta. La cua de cuarzo muestra una gama de colores birrefringentes como su espesor vara. La relacin entre el
retraso, la birrefringencia y el espesor se puede ver en un grfico de Michel-Levy .


El retraso tambin depende de la orientacin de los ejes pticos del material con relacin a la luz polarizada (as la
rotacin de la etapa puede cambiar el color).
La disposicin de las polares cruzados tambin permite la insercin de placas a 45 a los planos de polarizacin. Estos se
utilizan para mejorar el contraste en una muestra. Para ms efectos, tambin es a menudo posible girar uno de los
polarizadores si polares cruzados no son para ser utilizado.
Al observar una muestra, las diferencias en la birrefringencia permiten fases y granos a ser identificados. Por ejemplo, las
diferentes orientaciones de grano pueden presentar diferencias en birrefringencia y esto provocar que aparezcan de un
color diferente.
La serie de fotos de abajo muestra la diferencia en la aparicin de algunos ejemplares de cermica de vidrio se insertan
como diferentes platos.

Imagen de microscopio de transmisin de cermica de
cristal hecho con luz no polarizada.
Imagen de microscopio de transmisin de cermica de
cristal hecho con luz polarizada.
Vase tambin la entrada DoITPoMS Micrografa
Biblioteca

Imagen de microscopio de transmisin de cermica de
cristal hecho con luz polarizada y la placa de cuarto de
onda.
Imagen de microscopio de transmisin de cermica de
cristal hecho con luz polarizada y la placa de onda
completa.
Vase tambin la entrada DoITPoMS Micrografa
Biblioteca
Materiales pticamente anisotrpicas alineados con una de las direcciones de vibracin permitidos paralela a la direccin
del vector de la luz polarizada aparecen 'en la extincin' (es decir, negro) entre polares cruzados.

Resolucin e Imagen
El lmite de resolucin (o poder de resolucin ) es una medida de la capacidad de la lente objetivo para separar en los
Datos de la imagen adyacentes que estn presentes en el objeto. Es la distancia entre dos puntos en el objeto que slo se
resuelven en la imagen. El poder de resolucin de un sistema ptico est limitada en ltima instancia por difraccin por la
abertura. As, un sistema ptico no se puede formar una imagen perfecta de un punto.
Para que se produzca la resolucin, por lo menos el haz directo y el haz difractado de primer orden deben ser recogidos
por el objetivo. Si la apertura del objetivo es demasiado pequeo, slo el haz directo es recogida y la resolucin se pierde.

Considere la posibilidad de una rejilla de separacin d iluminado por la luz de longitud de onda , con un ngulo de
incidencia i .

La diferencia de camino entre el rayo directo y el haz difractado de primer orden es exactamente una longitud de
onda, . As,
d pecado i + d pecado =
donde 2 es el ngulo a travs del cual se difracta el haz de primer orden. Puesto que los dos haces son simplemente
recogidos por el objetivo, i= , por tanto, el lmite de la resolucin es,

La longitud de onda de la luz es un factor importante en la resolucin de un microscopio. Longitudes de onda ms cortas
producen a mayor resolucin. El mayor poder de resolucin en microscopa ptica requiere casi la luz ultravioleta, la
longitud de onda efectiva de imagen visible ms corta.
Apertura Numrica
La apertura numrica de un objetivo de microscopio es una medida de su capacidad para resolver detalle espcimen
bien. El valor de la apertura numrica est dada por,
Apertura numrica (NA) = n sen
donde n es el ndice de refraccin y igual a 1 para el aire y es el medio ngulo subtendido por los rayos que entran en la
lente del objetivo.
Apertura numrica determina el poder de resolucin de un objetivo, mayor es la apertura numrica del sistema, mejor es la
resolucin.

Bajo apertura numrica
valor bajo para una
baja resolucin
De alta apertura numrica
alta valor para una
alta resolucin
Airy discos
Cuando la luz de los diversos puntos de una muestra pasa a travs del objetivo y se crea una imagen, los diferentes puntos
en el espcimen aparecen como patrones pequeos en la imagen. Estos son conocidos como discos de Airy. El fenmeno
es causado por la difraccin de la luz a medida que pasa a travs de la abertura circular del objetivo.
Discos de Airy consisten en pequeos, ligeros concntrica y ojeras. Los ms pequeos son los discos de Airy proyectadas
por un objetivo en la formacin de la imagen, ms detalles de la muestra es discernible. Lentes de objetivo de mayor
apertura numrica son capaces de producir discos de Airy ms pequeos, y por lo tanto pueden distinguir un detalle ms
fino en la muestra.
El lmite en el que dos discos de Airy se pueden resolver en entidades separadas se llama a menudo el criterio de
Rayleigh. Esto es cuando el primer mnimo de difraccin de la imagen de un punto de origen coincide con el mximo de
otra.



Irresoluble Criterio de Rayleigh Soluble
Aberturas circulares producen patrones de difraccin con simetra circular. El anlisis matemtico da la ecuacin,

R es la posicin angular del mnimo de difraccin de primer orden (el primer anillo oscuro) es la longitud de onda de la
luz incidente d es el dimetro de la abertura


De la ecuacin se puede ver que el radio de la mxima central es directamente proporcional a / d . As, el mximo es
ms dispersa para longitudes de onda ms largas y / o aberturas ms pequeas.
El mnimo primaria establece un lmite en el aumento til de la lente objetivo. Una fuente puntual de luz producida por la
lente siempre es visto como un punto central, y el segundo y ms alto mximos fin, que slo se evita si la lente es de
dimetro infinito. Dos objetos separados por una distancia inferior a R no se pueden resolver.

Resumen
El microscopio ptico es una herramienta muy til para la observacin de los materiales y se puede utilizar para
obtener informacin valiosa acerca de una gran variedad de muestras. Es esencial para determinar las mejores
tcnicas a emplear en la preparacin y el examen de especmenes Algn conocimiento del material y la informacin
que se requiere.
Preparacin de la muestra es una parte crtica de la microscopa, ya que esto determina la calidad de las imgenes
producidas. Muchas tcnicas, aplicadas correctamente cuando a un espcimen, pueden mejorar la informacin
presente.
Una de las limitaciones del microscopio ptico es que de la resolucin. De formacin de imgenes de alta
resolucin se lleva a cabo ms comnmente en un microscopio electrnico de barrido (SEM).
Adems, para los especmenes "transparente", en particular las de los materiales anisotrpicos, la microscopa de
luz polarizada puede ofrecer grandes beneficios, con alto contraste posible.

Algunas tcnicas de microscopa ptica
HKDH Bhadeshia
Iluminacin de campo brillante

Una imagen de tres guiones de dureza en
iluminacin de campo brillante. La
superficie de la muestra es normal al eje
ptico del microscopio de luz blanca y se
utiliza para iluminar la muestra. Haces
reflejados de vuelta en una direccin que
es casi antiparalela al haz incidente
formar la imagen. Por lo tanto, las
superficies inclinadas (como los de las
muescas) aparecen oscuras, ya que no
reflejan el haz incidente de nuevo en el
microscopio para formar la imagen.
Iluminacin de campo oscuro

Imagen de tres guiones de dureza en la
iluminacin de campo oscuro
correspondiente. Haces reflejados en un
ngulo grande al eje ptico se recogen
para formar la imagen. Por lo tanto, las
superficies inclinadas aparecen brillantes.
Tolansky contraste de interferencia

Microscopa de interferencia se utiliza
cuantitativamente para detectar cambios
en la altura de la superficie. El espejo
parcialmente transparente divide el haz
incidente en dos. Los dos haces entonces
interfieren para producir franjas cuya
separacin es equivalente a un cambio
en la altura de la mitad de la longitud de
onda de la luz utilizada. La imagen
muestra a dos vigas de interferencia. Esto
le da un perfil sinusoidal a la variacin en
la intensidad entre flecos, que puede
hacer que sea difcil para localizar la
posicin precisa de la franja. Las franjas
se pueden afilar utilizando interferometra
de haces mltiples, como en la imagen
Tolansky se presenta a continuacin.

Tolansky imagen de contraste de
interferencia de las tres muescas de
dureza. Las franjas estn en los mapas
de contorno de efecto, est ms
estrechamente espaciados a planos
inclinados abruptamente. Tenga en
cuenta que monocromtica (verde) la luz
se utiliza para la microscopa de
interferencia Tolansky.
Nomarski contraste de interferencia

En esta tcnica cualitativa los diferentes
colores representan una variedad de
inclinaciones. El ejemplo muestra los
desplazamientos de superficie producidos
cuando la austenita en el acero se
transforma en martensita.
Iluminacin Oblicua


El relieve en un espcimen metalogrfico grabadas se puede mejorar
utilizando una iluminacin oblicua. La imagen de la izquierda utiliza
iluminacin incidente, mientras que la iluminacin es oblicua para que a
la derecha.
Presentacin de diapositivas de PowerPoint (3 Mb)
Artculo sobre Microscopa ptica, reproducido con permiso
del Mundo de los Materiales .

Introduccin a la microscopa ptica,
la imagen digital, y Fotomicrogafa
Este tratado sobre la microscopa ptica se divide en varias secciones que estn disponibles a
travs de los enlaces que se muestran inmediatamente a la izquierda (en los cuadros de
navegacin ms oscuras) y por debajo. Con el fin de imprimir toda la imprimacin microscopa
como documento en papel, debe descargar cada enlace de manera independiente, enviar el
archivo a la impresora, y poner los resultados juntos.
En la bibliografa, se han incluido enlaces a otros trabajos sobre la microscopa ptica y
nuestra seccin de Recursos de la Web contiene enlaces a otros sitios de microscopa en
Internet. Este material est dirigido nicamente para fines educativos, y no est disponible
para ser publicado en los sitios web remotos (ya sea con fines comerciales o educativos) o
distribuidos en cualquier formato electrnico.
Preguntas ms frecuentes - Mortimer Abramowitz, microscopista senior de Olympus America
Inc., responde a las 50 preguntas ms frecuentes acerca de la microscopa y microfotografa.
Fsica de la Luz y color - La luz visible representa slo una pequea parte de todo el
espectro electromagntico de la radiacin que se extiende desde los rayos gamma de alta
frecuencia a travs de los rayos X, luz ultravioleta, radiacin infrarroja y microondas a las
ondas de radio de onda larga de muy baja frecuencia. El complejo fenmeno de la luz visible
se discute clsicamente en trminos de rayos y frentes de onda. A partir de la naturaleza de la
radiacin electromagntica, una amplia variedad de temas se tratan en esta seccin,
incluyendo refraccin, reflexin, difraccin, interferencias, birrefringencia, polarizacin, colores
primarios, la visin humana, espejos, prismas, divisores de haz, sistemas de lser, la ptica
geomtrica, filtracin, temperatura de color, y la velocidad de la luz.
Anatoma del microscopio - Una discusin detallada de los elementos que componen los
microscopios modernos y teoras detrs de conceptos tan importantes como la ampliacin, la
formacin de imgenes, especificaciones objetivas, iluminacin Khler, aberraciones pticas,
medios de inmersin, fuentes de luz, los oculares, condensadores, y la ergonoma, entre otros.
Fuentes de luz para microscopa ptica - El rendimiento de las diferentes fuentes de
iluminacin disponibles para microscopa ptica depende de las caractersticas de emisin y
geometra de la fuente, as como la longitud focal, ampliacin y apertura numrica del sistema
de lentes colector. En medir la idoneidad de una fuente de luz particular, los parmetros
importantes son la estructura (la distribucin espacial de la luz, geometra de origen, la
coherencia, y la alineacin), la distribucin de longitud de onda, la estabilidad espacial y
temporal, el brillo, y en qu grado estos diversos parmetros pueden ser controlada.
Tcnicas de microscopa Especializados - temas ms avanzados en la microscopa se
describen en esta seccin, incluyendo tcnicas de mejora de contraste, tales como la
modulacin de Hoffman y iluminacin oblicua, as como microscopa de fluorescencia, de
contraste de interferencia diferencial, contraste de fase y otras tcnicas pticas importantes
que se utilizan en la microscopa.
Imagen Digital en Microscopa ptica - Digitalizacin de un vdeo o una imagen electrnica
capturada a travs de un microscopio ptico los resultados en un aumento dramtico en la
capacidad de mejorar las caractersticas, extraer informacin, o modificar la imagen. Cuando
se compara con el mecanismo tradicional de captura de imagen, fotomicrografa en la pelcula,
la imagen digital y de procesamiento de post-adquisicin permite una modificacin libre de
ruido reversible, essentialy de la imagen como una matriz ordenada de nmeros enteros en
lugar de una serie de variaciones analgicas en color y la intensidad . En esta seccin se
aborda una variedad de temas de actualidad en acquistion y tratamiento de imgenes para
microscopa ptica.
Fotomicrografa - El medio principal para fotomicrografa era pelcula hasta la ltima dcada
cuando las mejoras en las cmaras electrnicas y computadoras hechas de imagen digital
ms barata y ms fcil de usar que la fotografa convencional. Esta seccin se ocupa de los
mtodos clsicos de la fotomicrografa en la pelcula e incluye un anlisis exhaustivo de la
causa y la correccin de errores y faltas en microfotografa.
Conceptos y frmulas en Microscopa - Muchos de los conceptos bsicos de la microscopa
ptica se pueden destilar en unas pocas reglas y frmulas. En esta seccin, desde el sitio web
de Nikon microscopyu, revisa los elementos importantes y las ecuaciones necesarias para la
comprensin de conceptos tales como la resolucin, el campo de visin, apertura numrica,
brillo de la imagen, rango de aumento til, y la profundidad de campo. Muchos de estos temas
se discuten en mayor detalle en el Molecular Expresiones Microscopa Primer, pero esto
debera servir como una referencia rpida para los visitantes interesados.
Fundamentos de Estereomicroscopa - Teniendo en cuenta la amplia gama de accesorios
disponibles para los sistemas estereoscpicos, esta clase de instrumentos es muy til en
multitud de aplicaciones. Soportes y bases iluminadoras para una variedad de tcnicas de
mejora de contraste estn disponibles en todos los fabricantes, y se pueden adaptar a
prcticamente cualquier situacin de trabajo. Hay una amplia variedad de objetivos y oculares,
realzado con lentes de fijacin e iluminadores coaxiales que se montan en el microscopio
como un tubo intermedio. Distancias de trabajo pueden variar partir de 3-5 centmetros a tanto
como 20 centmetros en algunos modelos, lo que permite una considerable cantidad de
espacio de trabajo entre el objetivo y la muestra.
Microscopa Virtual - Nuestros microscopios virtuales interactivas de Java de propulsin
permiten a los visitantes explorar las muestras seleccionadas con su navegador Web
mediante una variedad de tcnicas de mejora del contraste. Las tcnicas de microscopa
virtuales incluyen contraste de interferencia diferencial, fluorescencia, iluminacin Rheinberg, y
la luz polarizada.
Olympus FluoView Laser Scanning Confocal Microscopy - El nuevo FluoView
Olympus
TM
FV1000 es la ltima en el punto de exploracin, deteccin de punto, los
microscopios de escaneo lser confocal diseados para las investigaciones de investigacin
biolgica intensivos y exigentes de la actualidad. Excelente resolucin, ptica brillantes y
ntidas y de alta eficiencia de la excitacin, acoplado a una interfaz de usuario intuitiva y la
asequibilidad son las caractersticas principales de este sistema de microscopa ptica de
estado-of-the-art.
La Olympus MIC-D Microscopio digital - Olympus ha lanzado las puertas abiertas a una
nueva era en la educacin de microscopa ptica con la introduccin del MIC-D invertida
microscopio digital. Diseado especficamente para una amplia gama de aplicaciones que van
desde la instruccin bsica aula para anlisis ms avanzado laboratorio, este microscopio
verstil ofrece una paleta de tcnicas de contraste mejora que muchos instrumentos de nivel
de investigacin rivales.
Java y Flash Tutorial Basics - Interactivo Java y Flash tutoriales se han desarrollado para
ayudar a los estudiantes a explorar conceptos complejos en todas las fases de la microscopa
ptica, la fsica de la luz y el color, microfotografa, y la tecnologa de imagen digital. Los
tutoriales estn incrustadas en las pginas web que contienen discusiones acompaan sobre
el fenmeno objeto y las instrucciones para el uso y control de los applets. Esta seccin trata
sobre los fundamentos de la navegacin tutorial y funcionamiento.
Museo de Microscopa - Visite nuestro museo de microscopios que van desde antiguos
modelos holandeses de lente nica del siglo XVI a los modernos microscopios de
investigacin de usos mltiples microprocesadores potencia. Estos microscopios fueron
construidos en 3D Studio Max para recrear cmo podran haber aparecido cuando primero
construido.
Las innovaciones en la microscopa ptica - microscopista Se tom nota y autor Martin L.
Scott examina los avances recientes en el tren ptico del microscopio, incluyendo sistemas
pticos de borde infinito con correccin y nuevos motivos de diseo de objetivos
modernos. Tambin se incluye en el artculo es una visin general de cmo estas
innovaciones han llevado a mejores imgenes cuando se combina con las ltimas tcnicas del
estado de la tcnica en microscopa ptica. Ergonoma, una preocupacin cada vez mayor de
usuarios de microscopios y los fabricantes, tambin se discute.
Microscopio: Conceptos bsicos y ms all (50 pginas en formato PDF, 20,7 Mbytes) -
Descargar la ltima edicin de la famosa introduccin de Mortimer Abramowitz para
microscopa ptica a todo color. El volumen cubre todos los conceptos bsicos importantes,
que van desde lupas simples para microscopios compuestos complejos, incluyendo la
iluminacin, objetivos, oculares, condensadores, la aberracin, la iluminacin Khler,
resolucin, apertura numrica, y la profundidad de campo. Numerosos apndices revisan de
enfoque del microscopio y de inmersin en aceite, y contienen nmeros tiles, frmulas y una
breve bibliografa.
Revisin Microscopa ptica - Descargue nuestro ltimo artculo de revisin en la
microscopa ptica. Co-escrito por Michael W. Davidson y Mortimer Abramowitz, este artculo
describe los fundamentos de la formacin de la imagen, objetivos, oculares, condensadores,
mejora del contraste y microfotografa con ilustraciones a todo color.Haga clic en el enlace
para descargar el documento en PDF format (1,75 Mb).
Libros recomendados sobre Microscopa ptica - Varios cientos de libros que se ocupan
de diversos aspectos de la microscopa ptica y campos relacionados son actualmente
disponibles de los libreros. Esta seccin muestra los mejores del equipo del sitio web
Expresiones Moleculares 10 libros recomendados en la microscopa, imgenes digitales,
fluorescencia, vdeo y microtechnique.
Libros recomendados sobre Microscopa Confocal - Un nmero sorprendentemente
limitado de libros que tratan de diversos aspectos del escaneado lser y microscopa confocal
de girar el disco y las tcnicas relacionadas se encuentran actualmente disponibles en los
libreros. En esta seccin se enumeran 12 mejores libros recomendados por el equipo de
desarrollo de sitio web del Centro de Recursos FluoView. Aunque los volmenes enumerados
en esta seccin tratan pricipally con microscopa confocal y la metodologa relacionada,
existen una serie de libros adicionales que contienen los tratamientos enfocados de los
materiales descritos a continuacin, y estos tambin deben ser consultados para las tcnicas
especficas y artculos de revisin oportunas.
ZEISS Campus Microscopa Reference Library - La literatura cientfica contiene abundantes
recursos en forma de libros, artculos de revisin y los informes originales de investigacin que
se ocupan de numerosos temas en microscopa ptica. El Zeiss MicroImaging Online Campus
Library Referencia Carl contiene enlaces a los informes seleccionados que deben ser tiles a
los investigadores que buscan material de introduccin de una variedad de tcnicas, sondas,
fuentes de luz, y vivir de clulas aplicaciones de imagen.
Recursos Web - El equipo del sitio web ha revisado y proporcionadas enlaces a ms de 100
sitios web de microscopa en nuestra seccin de recursos. Los sitios estn ordenados de
acuerdo a su origen (universidad o comercial), pblico objetivo, y por nivel educativo.Tambin
se incluyen enlaces a glosarios y grupos de noticias.
Bibliografa - Todos los materiales de referencia utilizados en la preparacin del Expressions
Molecular Microscopa ptica Primer se citan en esta seccin junto con otros libros acerca de
electrones y microscopa de sonda de barrido, microfotografa, las tcnicas de microscopa de
alta especializacin, y libros ms antiguos que se ocupan de la historia de la microscopa y
microscopa a principios del siglo XX.
Conceptos Bsicos en Microscopa ptica
Microscopios compuestos son modernas y tienen un diseo de dos etapas de aumento en
torno a sistemas de lentes separados, el objetivo y el ocular (comnmente llamado
unocular ), montados en extremos opuestos de un tubo, conocido como el tubo del
cuerpo . El objetivo est compuesto de varios elementos de la lente que en conjunto forman
una imagen real magnificada (la imagen intermedia ) de la muestra examinada.La imagen
intermedia se magnifica an ms por el ocular. El microscopista es capaz de observar una
muy ampliada imagen virtual de la muestra por mirando a travs de los oculares. El aumento
total de un microscopio se determina multiplicando las ampliaciones individuales del objetivo y
el ocular. Esta seccin trata sobre los conceptos bsicos asociados con la microscopa ptica,
incluyendo los objetivos, oculares, condensadores, estadios, ampliacin, apertura numrica,
aberraciones pticas, y una variedad de otros temas relacionados.
Introduccin a la microscopa - Los microscopios son instrumentos diseados para producir
magnificados imgenes visuales o fotogrficas de objetos demasiado pequeos para ser
vistos a simple vista. El microscopio debe cumplir tres tareas: producir una imagen ampliada
de la muestra, separar los detalles de la imagen, y brindar los detalles visibles al ojo o la
cmara humana. Este grupo de instrumentos incluye no solo-lente mltiple (microscopios
compuestos) disea con objetivos y condensadores, sino tambin instrumentos de lente nica
muy simples que a menudo se llevan a cabo a mano, como una lupa o lente de aumento.
El concepto de Ampliacin - La imagen de un objeto se puede ampliar cuando se ve a
travs de una lente simple. Mediante la combinacin de un nmero de lentes de la manera
correcta, un microscopio se puede producir que producir valores muy altos de aumento.
Introduccin a Lentes y ptica geomtrica - La accin de una lente simple, similar a
muchos de los que se utilizan en el microscopio, se rige por los principios de la refraccin y
reflexin y se puede entender con la ayuda de unas cuantas reglas sencillas acerca de la
geometra involucrada en rastreo de los rayos de luz a travs de la lente. Los conceptos
bsicos explorados en esta discusin, que se derivan de la ciencia de laptica geomtrica ,
conducirn a una comprensin del proceso de ampliacin, las propiedades de las imgenes
reales y virtuales, y lente aberraciones o defectos.
Microscopio Componentes pticos - Los componentes pticos contenidos dentro de
microscopios modernos se montan en una base estable, de diseo ergonmico que permite el
intercambio rpido, de centrado de precisin, y una cuidadosa alineacin entre los conjuntos
que son pticamente interdependientes. Juntos, los componentes pticos y mecnicos del
microscopio, incluyendo el espcimen montado en un portaobjetos de vidrio y de micro
cubreobjetos, forman un tren ptico con un eje central que atraviesa la base del microscopio
y de pie.
Microscopio Iluminacin - Uno de los aspectos ms crticos de la microscopa ptica es
asegurar la muestra se ilumina con la luz que es brillante, sin reflejos, y uniformemente
dispersas en el campo de visin. Las discusiones acerca de la iluminacin del microscopio
cubren la teora de la iluminacin Khler (acompaado de tutoriales interactivos), y los
aspectos prcticos de ajuste de un microscopio en busca de la iluminacin adecuada, tanto en
luz transmitida y reflejada.
Fuentes de luz para microscopa ptica - El rendimiento de las diferentes fuentes de
iluminacin disponibles para microscopa ptica depende de las caractersticas de emisin y
geometra de la fuente, as como la longitud focal, ampliacin y apertura numrica del sistema
de lentes colector. En medir la idoneidad de una fuente de luz particular, los parmetros
importantes son la estructura (la distribucin espacial de la luz, geometra de origen, la
coherencia, y la alineacin), la distribucin de longitud de onda, la estabilidad espacial y
temporal, el brillo, y en qu grado estos diversos parmetros pueden ser controlada.
Brillo de imagen - Independientemente del modo de imagen utilizado en microscopa ptica,
brillo de la imagen se rige por el poder de recoleccin de luz del objetivo, que es una funcin
de la apertura numrica. As como el brillo de la iluminacin de la fuente microscopio se
determina por el cuadrado del condensador de trabajo apertura numrica, el brillo de la
imagen de la muestra es proporcional al cuadrado de la apertura numrica objetivo.
Objetivos de microscopio - objetivos de microscopio son los componentes ms importantes
de un microscopio ptico, ya que determinan la calidad de las imgenes que el microscopio es
capaz de producir. Hay una amplia gama de diseos de objetivos disponibles que ofrecen un
excelente rendimiento ptico y prevn la eliminacin de la mayora de las aberraciones
pticas.
Las especificaciones y la identificacin - fabricantes de microscopios ofrecen una
amplia gama de diseos de objetivos para satisfacer las necesidades de rendimiento
de los mtodos de imagen especializados, para compensar las variaciones de espesor
de vidrio de cubierta, y para aumentar la distancia de trabajo eficaz del objetivo. A
menudo, la funcin de un objetivo particular no es evidente con slo mirar a la
construccin del objetivo, pero muchas especificaciones estn grabados
permanentemente en el cuerpo del objetivo.
Objetivos para aplicaciones especializadas - Objetivos de campo claro estndar,
corregidos por diversos grados de aberracin ptica, son los ms comunes y son tiles
para examinar las muestras con tcnicas de iluminacin tradicionales. Otras ms
complejas, mtodos requieren configuraciones objetivos especficos, que a menudo
incluyen la colocacin de un detector en o cerca del plano focal trasero. Para
complicar el asunto, el plano focal trasero objetivo puede residir en el centro de un
elemento de lente de cristal interno, un rea que no es de fcil acceso para el
microscopista.
Objetivos de inmersin en agua - investigaciones microscpicas de corte fijo
secciones de tejido finamente y las clulas que viven adheridos a sustratos de vidrio
producen rutinariamente magnficas imgenes de alta resolucin cuando se emplea
apochromat plan o los objetivos de fluorita que tienen una apertura numrica alta. Sin
embargo, una cantidad significativa de investigacin biolgica actual involucra la
investigacin de la dinmica celular dentro del tejido donde pueden ocurrir eventos
importantes en lo profundo de la muestra, lejos de la cubierta de vidrio que viven. Los
intentos de Datos de la imagen y las actividades celulares a un micrmetro distancias
de la cubierta de vidrio de muestras con tcnicas de inmersin en aceite
convencionales a menudo sufren de artefactos, incluyendo (esfrica) aberracin ptica
severa. El uso de agua en lugar de aceite, ya que el medio de inmersin, es un
mtodo eficaz para superar los problemas de aberracin, y altamente corregidas de
inmersin en agua objetivos se han introducido por varios fabricantes para
aplicaciones que implican las clulas vivas y tejidos.
Ajuste de collares de correccin Objetivo - La mayora de los objetivos de
microscopio estn diseados para ser utilizado con una cubierta de vidrio que tiene un
espesor estndar de 0,17 milmetros y un ndice de refraccin de 1,515, que es
satisfactoria cuando la apertura numrica objetivo es 0,4 o menos. Sin embargo,
cuando se utilizan objetivos de alta apertura numrica secos (apertura numrica de 0,8
o mayor), cubrir las variaciones de espesor de cristal de slo unos pocos micrmetros
causar degradacin de la imagen dramtica debido a la aberracin, que empeora con
el aumento de grosor del cubreobjetos. Para compensar este error, los objetivos ms
altamente corregidos estn equipadas con un collar de correccin para permitir el
ajuste de la posicin de grupo de lente central para coincidir con las fluctuaciones en el
espesor de vidrio de cubierta. Este tutorial interactivo explora cmo se ajusta un collar
de correccin para lograr una calidad de imagen mxima.
Apertura numrica y resolucin - Apertura numrica aplicada a objetivos de
microscopio es una medida de la capacidad de recoger la luz y resolver detalles
espcimen bien a una distancia objeto fijo. La resolucin de un objetivo de microscopio
se define como la distancia ms pequea entre dos puntos en una muestra que
todava se puede distinguir como dos entidades separadas. La resolucin es un valor
algo subjetivo en microscopa, porque en la alta ampliacin, una imagen puede
aparecer de enfoque pero an resolverse a la capacidad mxima del objetivo. Apertura
numrica determina el poder de resolucin de un objetivo, pero la resolucin total de
un sistema de microscopio tambin depende de la apertura numrica de la lente
condensadora. Cuanto mayor es la apertura numrica del sistema total, mejor es la
resolucin.
Formacin de la imagen - en el microscopio ptico, formacin de la imagen se
produce en el plano de imagen intermedio a travs de la interferencia entre la luz
directa que ha pasado a travs de la muestra inalterada y luz difractados por las
caractersticas minutos presentes en la muestra. La imagen producida por una lente de
objetivo es conjugado con la muestra, lo que significa que cada punto de la imagen en
el plano intermedio est geomtricamente relacionado con un punto correspondiente
en la muestra.
Aberraciones pticas - Salidas de las ideales de la ptica Gaussian son conocidos
como aberraciones pticas. Trenes pticos Microscopio tpicamente sufrido hasta
cinco aberraciones comunes: esfricas, cromticas, curvatura de campo, de coma y
astigmatismo. Distorsin geomtrica es otro artefacto encontrado a menudo en los
sistemas de lentes de zoom que se encuentran en los microscopios estereoscpicos.
Inmersin de Medios - La mayora de los objetivos de baja potencia estn diseados
para ser usados "en seco" con aire como medio de obtencin de imgenes. Objetivos
aumento mayor frecuencia utilizan los medios de inmersin de lquidos para ayudar a
corregir las aberraciones y aumentar la apertura numrica.
Mecnica Longitud del tubo - La longitud del tubo mecnica de un microscopio
ptico se define como la distancia desde la abertura de boquilla, donde est montado
el objetivo, en el borde superior de los tubos de observacin donde se insertan las
mirillas (oculares). Hasta la dcada de 1980, la mayora de los microscopios tenan
una longitud de tubo fijo que van desde 160 hasta 210 milmetros, dependiendo del
fabricante y de aplicacin. Microscopios modernos estn equipados con objetivos
corregido al infinito que utilizan una lente de tubo en el cuerpo del microscopio para
formar una regin paralela de las ondas de luz en la que los accesorios pticos se
pueden insertar sin afectar seriamente a la calidad de imagen.
Funcin de Transferencia de Modulacin - La funcin de transferencia de
modulacin de una lente, objetivo del microscopio, u otro sistema ptico es una
medida de su capacidad para transferir contraste a un nivel de resolucin particular del
objeto (o muestra) a la imagen. Clculo de la funcin de transferencia de modulacin
es un mecanismo que se utiliza a menudo por los fabricantes pticos para incorporar
resolucin y los datos de contraste en una sola especificacin.
Infinity Optical Systems - En los microscopios modernos grado de investigacin
equipados con sistemas pticos de borde infinito con correccin, el objetivo ya no se
proyecta la imagen intermedia directamente en el plano de imagen intermedio.En lugar
de ello, los objetivos estn diseados de manera que la luz que emerge de la abertura
trasera est enfocado al infinito, y una segunda lente, conocida como lalente de tubo ,
forman la imagen en su plano focal.
Seleccionado Catlogos Referencias - El tema de los lentes del objetivo de
microscopio ha sido revisado en numerosas ocasiones por una serie de distinguidos
cientficos. Muchas referencias que figuran en esta seccin son integrales y cubren la
mayora de los temas relativos a la estructura y funcin de los objetivos, mientras que
otros se concentran en diferentes aspectos y aplicaciones especializadas de estas
lentes.
Mirillas (oculares) - Oculares trabajan en combinacin con objetivos de microscopio para
ampliar an ms la imagen intermedia de modo que los datos de muestra pueden ser
claramente observadas. Hay dos tipos principales de oculares que se agrupan de acuerdo a
disposicin de lentes y diafragma de apertura: Los oculares negativas con un diafragma
interno y oculares positivas que tienen un diafragma por debajo de las lentes del ocular. En
muchos casos, los oculares estn diseados para trabajar en conjunto con los objetivos de
eliminar la aberracin cromtica.
Las mediciones lineales (micrometra) - Se han adoptado las primeras medidas notificadas
realizadas con un microscopio ptico a finales de 1600 por el cientfico holands Antonie van
Leeuwenhoek, quien utiliz granos finos de arena como un indicador para determinar el
tamao de los eritrocitos humanos. Desde entonces, un sinnmero de enfoques han sido
empleados para la medicin lineal, rea y volumen dimensiones del espcimen con el
microscopio (una prctica conocida como micrometrao morfometra ), y una amplia variedad
de tcnicas tiles han surgido en los ltimos cien aos.
Condensadores Substage - El condensador de platina inferior recoge la luz de la fuente de
luz del microscopio y se concentra en un cono de luz que ilumina la muestra con intensidad
uniforme sobre toda la viewfield. Es fundamental que el cono de luz condensador ajustarse
correctamente para optimizar la intensidad y el ngulo de la luz entra en el objetivo delantera
del objetivo. Quizs el componente ms mal entendido en el tren ptico, el condensador es,
sin embargo, uno de los factores ms importantes en la obtencin de imgenes de alta calidad
en el microscopio.
Etapas de muestras - Todos los microscopios estn diseados para incluir una etapa en la
muestra (generalmente montados sobre un portaobjetos de vidrio) se coloca para la
observacin. Etapas a menudo estn equipados con un dispositivo mecnico que tiene el
portaobjetos en su lugar y se puede traducir sin problemas la diapositiva de ida y vuelta, as
como de lado a lado. Otras etapas estn diseados para permitir la rotacin de la muestra a
travs de 360 grados o para proporcionar anclajes para fuentes de luz auxiliares, la muestra
de herramientas de manipulacin, y otros accesorios.
Luz Reflejada Microscopa - Microscopa usando oblicua o epi-iluminacin se utiliza para el
estudio de los especmenes que son opacos, incluyendo semiconductores, cermicas,
metales, polmeros, y muchos otros.
Fundamentos de Estereomicroscopa - Teniendo en cuenta la amplia gama de accesorios
disponibles para los sistemas estereoscpicos, esta clase de microscopios es
extremadamente til en multitud de aplicaciones. Soportes y bases iluminadoras para una
variedad de tcnicas de mejora de contraste estn disponibles en todos los fabricantes, y se
pueden adaptar a prcticamente cualquier situacin de trabajo. Hay una amplia variedad de
objetivos y oculares, realzado con lentes de fijacin e iluminadores coaxiales que se montan
en el microscopio como un tubo intermedio. Distancias de trabajo pueden variar partir de 3-5
centmetros a tanto como 20 centmetros en algunos modelos, lo que permite una
considerable cantidad de espacio de trabajo entre el objetivo y la muestra.
Bsicos del microscopio Ergonoma - Con el fin de ver las muestras y los datos del registro,
los operadores de microscopio debe asumir una posicin inusual, pero exigente, con poca
posibilidad de mover la cabeza o el cuerpo. A menudo se ven obligados a asumir una postura
de trabajo torpe como la cabeza inclinada sobre los tubos de los ojos, la parte superior del
cuerpo inclinado hacia adelante, la mano que alcanza lo alto de un control de enfoque, o con
las muecas flexionadas en una posicin poco natural.
Limpieza, cuidado y mantenimiento de microscopios - Microscopios menudo representan
una importante inversin de fondos y son instrumentos pticos sofisticados que requieren un
mantenimiento peridico y limpieza para garantizar la produccin de imgenes de alto
contraste de igualdad a la calidad de los componentes pticos, electrnicos y
mecnicos. Cuando descuidado por la exposicin al polvo, la pelusa, el polen y la suciedad, el
fracaso para eliminar el aceite de inmersin en el momento oportuno, o cuando los objetivos
caros son abusados, rendimiento ptico puede experimentar una disminucin grave que
aumenta con el tiempo.
Microscopio anatoma interactivos tutoriales de Java - Hemos construido una variedad de
tutoriales de microscopa Java impulsado interactivas para ayudar a explicar algunos de los
conceptos ms difciles de la microscopa ptica. Los estudiantes pueden ver y utilizar estos
tutoriales mediante un navegador web sin la adicin de software plug-in.
Galeras de imgenes digitales
Campo claro Microscopa digital Galera de imgenes - iluminacin de campo claro ha sido
uno de los modos de observacin ms utilizados en la microscopa ptica para los ltimos 300
aos. La tcnica es ms adecuada para la utilizacin con muestras fijadas, teidas o de otros
tipos de muestras que naturalmente absorben cantidades significativas de la luz visible. Las
imgenes producidas con iluminacin de campo claro se ven oscuras y / o altamente de color
contra un fondo de color gris o blanco, brillante, a menudo la luz.Esta galera de imgenes
digitales explora una variedad de muestras teidas capturadas con un microscopio Olympus
BX51 acoplado a un sistema de cmaras QImaging Retiga 12 bits y un cristal lquido filtro
sintonizable de tres colores.