Este documento proporciona instrucciones para realizar un recuento manual de leucocitos utilizando una solución de Türk. Explica cómo diluir una muestra de sangre en la solución, contar los leucocitos en una cámara de recuento bajo el microscopio, y calcular el número de leucocitos por microlitro de sangre. También proporciona valores normales de recuento de leucocitos y notas sobre el almacenamiento, preparación de muestras, diagnóstico e indicaciones para la eliminación de residuos.
Este documento proporciona instrucciones para realizar un recuento manual de leucocitos utilizando una solución de Türk. Explica cómo diluir una muestra de sangre en la solución, contar los leucocitos en una cámara de recuento bajo el microscopio, y calcular el número de leucocitos por microlitro de sangre. También proporciona valores normales de recuento de leucocitos y notas sobre el almacenamiento, preparación de muestras, diagnóstico e indicaciones para la eliminación de residuos.
Este documento proporciona instrucciones para realizar un recuento manual de leucocitos utilizando una solución de Türk. Explica cómo diluir una muestra de sangre en la solución, contar los leucocitos en una cámara de recuento bajo el microscopio, y calcular el número de leucocitos por microlitro de sangre. También proporciona valores normales de recuento de leucocitos y notas sobre el almacenamiento, preparación de muestras, diagnóstico e indicaciones para la eliminación de residuos.
Solucin de Trk para microscopia Reactivo para recuento manual de leucocitos Principio El recuento de leucocitos es uno de los mtodos de rutina. La condicin previade todos los mtodos de recuento es la dilucin y preparacin programadas deuna muestra de sangre. El cido actico contenido en la solucin de Trkhemoliza los eritrocitos y el colorante contenido tie los leucocitos. Serecuenta el tipo de clula deseado en un volumen definido y se calcula elnmero de clulas en un microlitro de sangre.
Material Sangre venosa anticoagulada, en casos excepcionales sangre capilar Reactivos Merck art. nro. 1.09277 Solucin de Trk 100 ml, 500 ml
Auxiliares Cmara de recuento de Neubauer Pipeta para leucocitos (con bola de mezcla blanca) Preparacin Llenado de la pipeta Aspirar sangre en una pipeta de leucocitos hasta la marca 1.0, seguidamenteaspirar solucin de Trk hasta la marca 11. La dilucin es 1:10.
Tambin es posible una dilucin de 1: 20 (sangre hasta la marca 0.5 ysolucin de Trk hasta la marca 11).
Mezclar cuidadosamente la sangre y la solucin de Trk, dejar en reposocomo mximo durante 1 hora. Llenado de la cmara de recuento Desechar las 3 primeras gotas del lquido, llenar la cmara de recuento yefectuar el recuento. Tcnica Recuento en el microscopio Recuento con objetivo 10x, en microscopios antiguos con condensador bajado, cuya lente frontal est desplegada.Se cuentan los 4 grandes cuadrados de las esquinas, de 1 mm de lado cadauno.Se recomienda hacer siempre determinaciones dobles cuyos resultados nodeben diferir ms del 15 %. Resultado Clculo Nmero de leucocitos = x
10
10 ( dilucin 1:10)
4Nmero de leucocitos = x
25 (clulas/
l)
X = Suma de las clulas contadas en los 4 grandes cuadrados exterioresComo hallazgo se indica el valor medio de ambas determinaciones dobles. Valores normales Nmero de leucocitos/
l __________________________________________________________ Adultos 4.000 - 9.000
Escolares 5.000 - 12.000
Nios pequeos 6.000 - 15.000
Lactantes 7.000 - 17.000
Recin nacidos 10.000 - 30.000 Nota tcnica El microscopio usado debera corresponder a los requisitos de un laboratoriode diagnstico mdico.Utilizar pipeta para leucocitos y cmara de recuento (Neubauer) estndar.Utilizar solamente pipetas y cmaras de recuento (Neubauer) limpias. Preparacin de las muestras Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de latecnologa.Todas las muestras deben estar rotuladas inequvocamente.Deben usarse instrumentos adecuados para la toma de muestras y en lapreparacin, y deben seguirse las instrucciones del fabricante para laaplicacin/el empleo. Diagnstico Los diagnsticos debern ser establecidos solamente por personasautorizadas y cualificadas.Debern emplearse terminologas vigentes.Debern elegirse y realizarse ensayos ulteriores segn mtodosreconocidos. Almacenamiento La solucin del reactivo debe almacenarse entre +15C y +25C.La solucin puede usarse hasta la fecha de caducidad indicada. Estabilidad Despus de abrir el frasco por primera vez, el contenido almacenado entre+15C y +25C es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada.Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados. Notas sobre el empleo Solamente para uso profesional. Para evitar errores, el mtodo debera ser realizado por personalespecializado.Deben cumplirse las directivas nacionales sobre seguridad en el trabajo yaseguramiento de la calidad.Deben emplearse microscopios equipados de acuerdo con el estndar. Proteccin contra infecciones Debe observarse a toda costa una proteccin eficaz contra infecciones deacuerdo con las directivas de laboratorio. Indicaciones para la eliminacin de residuos Las soluciones usadas y las soluciones caducadas deben eliminarse comodesechos especiales, debindose cumplir las directivas locales deeliminacin de residuos.Merck, adems de aceptar la devolucin de productos usados o caducadosa travs del servicio de retrologstica, ofrece tambin ayuda tcnica parasoluciones locales de eliminacin de residuos. Tener en cuenta la clasificacin de substancias peligrosas en la etiqueta ylas indicaciones en la ficha de datos de seguridad.La ficha de seguridad de Merck est disponible en Internet y a solicitud.