Professional Documents
Culture Documents
EXTERNA”
BIOQUÍMICA Y NUTRICIÓN
PRACTICA Nº 1
CICLO: II
PUCALLPA - PERÚ
2009
INSTRUMENTACION BIOQUIMICA: ANALISIS DE SEDIMENTOS URINARIOS
I. INTRODUCCION:
CENTRIFUGACIÓN:
Definición de Centrifugación:
2. Principios Físico-Químicos
Donde:
Vs es la velocidad de caída de las partículas (velocidad límite)
g es la aceleración de la gravedad,
ρp es la densidad de las partículas y
ρf es la densidad del fluido.
4. Componentes de la centrífuga
• Rotor: Dispositivo que gira y en el que se colocan los tubos. Existen varios
tipos:
• Cámara de Vacío: Es una pieza cóncava que sirve para contener dentro de
ella el rotor y su respectivo soporte que lo une o conecta con el motor.
• Aceleración de la gravedad
Se relaciona con la fuerza de atracción de la tierra sobre los objetos. Al
aumentar la gravedad aumenta la velocidad.
• Coeficiente de Difusión
Es la facilidad con que cada soluto en particular se mueve en un solvente
determinado. Esto dependerá de la consistencia del medio líquido.
• Tiempo
La centrifugación debe hacerse en el tiempo justo, ya que en el proceso se
pierden elementos de gran importancia para el estudio.
• Temperatura
Básicamente lo mismo que en el tiempo. Esto también dependerá del tipo
de análisis que se desea realizar.
• Presión y Velocidad
La presión viene siendo la relación que existe entre una fuerza y la
superficie donde se aplica. La velocidad, en cambio, la magnitud con la que
se cambia a posición de un objeto. Ambas afectan a la centrifugación ya
que el aumento o disminución de las mismas pueden hacer perder
componente importantes de lo que se quiere analizar.
6. Tipos de Centrífugas:
- Pequeño tamaño.
- Sin refrigeración.
- Máxima velocidad: 5000 rpm.
- Útil para partículas grandes (células, precipitados de sales insolubles…etc.)
• Ultracentrífugas.
7. Tipos de Centrifugación
• Centrifugación Analítica
Se pretende es estimar propiedades físicas (coeficiente de sedimentación o peso
molecular) de alguna partícula en concreto: sus propiedades hidrodinámicas. Para
poder aplicar la tecnología de la centrifugación analítica deben cumplirse una serie
de requisitos:
- Que presenten una mayor capacidad de giro, en torno a las 100.000 r.p.m.
- En cuanto al tipo de rotores, se necesita que las paredes del tubo se encuentren
alineadas con las líneas de fuerza y estén provistos de sistemas ópticos capaces
de detectar la sedimentación de la partícula en cada momento.
Después de la producción de orina por los riñones, ésta recorre los uréteres hasta
la vejiga urinaria donde se almacena y después es expulsada al exterior del
cuerpo a través de la uretra, mediante la micción.
A.Materiales y Reactivos
Eritrocitos.
Leucocitos.
Levaduras.
Tricomonas.
Espermatozoides.
células epiteliales.
Cilindros.
huevos y larvas de parásitos.
Cristales.
Valoración
0-10 Normal +
10-20 Moderada ++
Orina:
Después de la producción de orina por los riñones, ésta recorre los uréteres
hasta la vejiga urinaria donde se almacena y después es expulsada al exterior
del cuerpo a través de la uretra, mediante la micción.
Características de la orina:
Composición química
El principal producto sólido de la orina es la urea que se forma como producto
de degradación en el metabolismo de las proteínas. Entre el resto de los
sólidos podemos encontrar sodio, cloro, amonio, creatinina, ácido úrico y
bicarbonato. Tanto la urea como el ácido úrico son tóxicos para el organismo.
El olor de la orina
La orina tiene un olor característico. Algunas personas con infecciones de orina
recurrentes detectan un principio de infección por un olor característico, más
fuerte y desagradable de lo habitual.
El olor de la orina es más fuerte cuando nos levantamos y la descomposición
de la orina produce un olor parecido al amoniaco.
Algunos alimentos y medicamentos también alteran y cambian el olor de la
orina como por ejemplo, los espárragos, el marisco, el pescado, etc.
Una orina con olor a manzana puede hacernos sospechar de diabetes.
El pH de la orina
El pH normal de la orina está entre 4.6 y 8. Podemos modificarlo con la dieta de
forma que la orina es ácida en el hombre y los carnívoros, y alcalina en los
herbívoros y vegetarianos.
La orina ácida tiene tendencia a producir cristales de xantina, cistina, ácido
úrico y oxalato cálcico pero disminuye la presencia de infecciones. Sin
embargo, la orina alcalina tiende a formar cálculos de carbonato cálcico, fosfato
cálcico, y fosfato de magnesio.
Formación de la orina
Fig. 12: Estructura del riñón seccionado para mostrar las principales
estructuras internas.
a) Filtración glomerular
b) Reabsorción tubular
Si en los glomérulos se filtran 180 litros diarios, se deduce que debe haber
reabsorción, pues evidentemente no se eliminan 180 litros diarios de orina. La
reabsorción se produce en todo el sistema tubular del nefrón (túbulo proximal,
asa de Henle y túbulo distal), pero es más activa en el túbulo proximal. La
reabsorción tubular permite conservar sustancias importantes para el
organismo, como el agua, glucosa, aminoácidos, vitaminas, etc., pasando a la
sangre nuevamente. También se produce la absorción de importantes iones
como el Na+ y Cl-. Además, la reabsorción es capaz de adaptarse a las
necesidades del momento, es decir, participa en la homeostasis del medio
interno.
c) Secreción
d) Excreción de la orina
• Deshidratación
• Diarrea
• Sudoración excesiva
• Glucosuria
• Insuficiencia cardíaca (relacionada con la disminución del flujo
sanguíneo a los riñones)
• Estenosis de la arteria renal
• Síndrome de secreción inadecuada de hormona antidiurética (SIADH)
• Vómitos
• Restricción hídrica
pH en la orina y alteraciones
• Succión gástrica
• Insuficiencia renal
• Acidosis tubular renal
• Infección del tracto urinario
• Vómito
En los individuos normales, cada micción tiene un volumen que oscila entre
200 y 400 ml, realizándose entre 3 y 4 micciones. En algunas condiciones
patológicas (hipertrofia prostática, cistitis, etc.) pueden observarse micciones
más frecuentes con escasa emisión de orina.
EL pH
Los puntos rojos señalan los cuerpos que pudimos identificar en nuestra
muestra de orina de varón y que se nombran en el cuadro de
comparaciones.
Muestra de varón:
Muestra de Mujer:
Como podemos observar en ambos cuadros que la mayor parte de los cuerpos
encontrados están en condiciones normales a excepción de la muestra de la
mujer que se colocaron 3 cruces en las células epiteliales escamosas, lo que
nos incitaría a diagnosticar una posible patología, en este caso estaríamos
hablando de una infección del tracto urinario.
El complejo formado exhibe una área cortical con gran capacidad reactiva, por lo
que puede captar en su trayecto hacia el exterior elementos de la más diversa
índole (células epiteliales, leucocitos, hematíes, gránulos minerales o lipídicos),
dan lugar a los distintos tipos de cilindros. Sin embargo, estudios con anticuerpos
monoclonales no han podido ratificar para el cilindro céreo una configuración
molecular parecida, por lo que son los cilindros más enigmáticos tanto en su
formación como en su composición molecular. La hipótesis mas barajada en la
actualidad es que el cilindro céreo sería el resultado evolutivo de la degeneración
de cilindros epiteliales (previo paso por la fase de granulo-lipídico), o bien, la
modificación molecular de los cilindros lipídicos de origen plasmático (Figura 4). La
evolución molecular de los cilindros granulo-lipídicos hacia los céreos vendría
determinada por la unión seriada y progresiva de los gránulos lipídicos para formar
un cada vez mayor componente graso. Este desequilibrio fomentaría el proceso de
fusión grasa, acelerándolo progresivamente al perder capacidad de ionización y
transformando cada vez mas el cilindro inicial en un componente apolar. La
consecuencia seria una deshidratación y desionización del gel acuoso de la matriz
original compuesta por proteína de Tamm-Horsfall, una progresiva invasión del
cilindro por material lipídico hasta acabar en el recubrimiento a modo de película.
Esta remodelación molecular de la superficie por componente graso comporta
profundos cambios en la relación de los cilindros céreos con el medio acuoso que
los rodea. Explicaría su aspecto seco estando en un ambiente hidrófilo, su mayor
contrastación respecto del medio y su elevada birrefringencia.
Tamaño
Se considera en los compuestos potencialmente significativos que la presencia de
unidades cristalinas superiores a 20-25 µ m para los oxalatos cálcicos dihidratado
y
monohidratado y >100 µ m para Ácido úrico y Fosfato cálcico hidrogenado indican
la existencia de alteraciones patológicas (litiasis + alteraciones metabólicas o
alteraciones metabólicas solitarias)
Espesor
La visión en todos los compuestos que cristalizan en unidades prismáticas (oxalato
cálcico monohidratado, ácido úrico, fosfato cálcico) de la cara correspondiente al
tercer eje cristalográfico (habitualmente no visible por la delgadez del prisma)
constituye un signo inequívoco para una valoración patológica, puesto que indica
que se están dando en la orina los condicionantes idóneos para el desarrollo y
crecimiento del cristal. En el caso del oxalato cálcico dihidratado (OCD), el espesor
se manifiesta por el crecimiento prismático de la cara de unión de las dos
pirámides dando una unidad cristalina dodecaédrica frente a la habitual
cristalización octaédrica. Es el mejor signo para definir la cristaluria de OCD como
patológica (litiasis + severa hipercalciuria o severa hipercalciuria aislada)
Número
La presencia por campo microscópico (ocular x7, objetivo x40) de mas de 5
cristales es un factor predictivo de patología. Debe ser informado como
“Abundantes” consignando el número aproximado medio entre paréntesis. Este
parámetro carece de importancia en presencia de cristales o maclas gigantes,
porque su tamaño excede a menudo a la del campo microscópico y suelen
contarse ≤ 1 cristales por campo, dando una falsa sensación de normalidad. La
valoración del riesgo se adscribe entonces a los demás factores con marcado
énfasis en el correspondiente al tamaño o al espesor.
Tasa de maclación
Se define como macla al crecimiento conjunto de dos o más cristales siguiendo
una ley (plano, centro o eje de macla), de tal forma que ciertas direcciones
reticulares son paralelas mientras otras están en posición inversa. La formación de
maclas y su porcentaje relativo se esgrime como una propiedad de valor
patogénico y elevado riesgo litógeno. En este sentido, cuanto más alta sea la
facilidad de una sustancia para maclarse y más alta sea su tasa real de maclación
en la muestra mayor será el riesgo. Este parámetro incluye a todas las cristalurias.
Es importante utilizar orinas frescas y consignar en el informe la tasa aproximada
que se observa de cristales maclados. Acido úrico, cistina, fosfato bicálcico,
oxalato cálcico monohidratado e indinavir son los compuestos de mayor capacidad
de maclación, seguidos de oxalato cálcico dihidratado, sulfamidas y triamterene.
Tasa de agregación
La presencia de microagregados de unidades cristalinas o de sus maclas se
considera como un factor de muy alto riesgo litógeno. Es evidente que la
agregación de maclas constituye el máximo riesgo. Este parámetro incluye a todas
las cristalurias. Recientes estudios han postulado que la agregación cristalina esta
mediada por la presencia de una proteína que actúa como puente de unión entre
las unidades o maclas cristalinas. Debe consignarse en el informe si se observan
agregados y la cantidad aproximada. Atención a la velocidad de centrifugación (no
sobrepasar las 1.500 rpm, ni el tiempo de tres minutos), porque un exceso tiende a
fracturar los agregados induciendo a un error de interpretación.
Centrífuga
Muestra de orina del varón
INFOGRAFIA
http://www.educarchile.cl/Portal.Base/Web/VerContenido.aspx?
GUID=123.456.789.000&ID=133109
http://www.urologia.tv/icua/es/diagnostics.aspx?cod=9
http://www.ferato.com/wiki/index.php/Orina
http://www.tecuidamos.org/educa/educacion0-2c.html
http://www.iqb.es/monografia/fichas/ficha051.htm
http://www.iqb.es/monografia/fichas/orina/orina.htm
http://www.susmedicos.com/art_cuadro_hematico.htm
http://www.revistanefrologia.com/mostrarfile.asp?ID=2990
http://www.cepis.org.pe/cursoreas/e/modulos/unidad1.ppt
http://www.sepeap.org/archivos/libros/NEFRO/ORINA/INTRODUCCION.
pdf
http://usuarios.lycos.es/damisoto/ORINA.htm