UNIVERSIDAD DE CRDOBA

LABORATORIO DE BIOQUIMICA
PRACTICA N 10
IDENTIFICACIN DE CUERPOS CETNICOS EN ORINA
OBJETIVOS
1. Determinar la presencia de cuerpos cetnicos en orina, mediante pruebas
cualitativas para cada uno de ellos.
2. Familiarizarse con algunos protocolos empleados en laboratorios clnicos para el
reconocimiento de cuerpos cetnicos
TEORA RELACIONADA.
Los cuerpos cetnicos son los cidos acetoactico, la acetona y el cido
!idr"ibutirico. #n la cetsis, !allamos un aumento de estas sustancias en la sangre y en
la orina. $a%o buenas condiciones de salud, los cuerpos cetnicos se &orman en el !gado
y son completamente metabolizados, de tal manera 'ue solo cantidades insigni&icantes
aparecen en la orina. (or el contrario, en casos de diabetes, inanicin, vmitos con
des!idratacin y despus de la e"posicin al &ro y)o e%ercicio vigoroso, los cuerpos
cetnicos pueden encontrarse en cantidades apreciables en la orina, lo cual permite su
determinacin cualitativa.
La determinacin de acetona *+todo de ,mbert-, se &undamenta en la &ormacin de un
&erropentacianuro con el derivado isonitrado de la acetona, la determinacin de acido
acetoactico *+todo de .er!rdt-, se basa en la aparicin de una coloracin ro%ovinosa
con el cloruro &rrico y en el +todo de /art, el acido !idr"ibutirico es
trans&ormado en acetona, la cual se identi&ica mediante el reactivo de ,mbert.
MATERIALES Y REACTIVOS
2 tubos de ensayo 0gua destilada
1 gradilla 1rina de diabtico *traer-
2 pipetas 0cido actico glacial.
1 bea2er de 234ml 0moniaco
1 capsula de porcelana 5loruro &rrico al 146
1 pinza para crisol (ero"ido de !idrogeno al 146
1 pinza para tubos de ensayo 7itroprusiato de sodio al 36 en 5/
8
511/
al 346
PROCEDIMIENTO
DETERMINACIN DE ACETONA:
0 3 ml de orina, agregue 4.3ml de nitroprusiato de sodio disuelto al 36 en acido actico
al 346, adicione 4.3ml de amoniaco por las paredes del tubo, la aparicin de un anillo
ro%o violceo en l contacto de los l'uidos, es indicativo de la presencia de acetona.
DETERMINACION DE ACIDO ACETOACTICO.
0 3 ml de orina de adicionan unas gotas de cloruro &rrico, en presencia de acido
acetoactico se produce una coloracin ro%ovinosa.
DETERMINACION DE ACIDO -IDRO!IBUTIRICO
#n una capsula de porcelana se mezclan 14ml de agua y 14 ml de orina, se acidi&ica con
unas 3 gotas de acido actico y se calienta en una estu&a !asta reducir el volumen a la
mitad. 5on este calentamiento se eliminan la acetona y el acido acetoactico, al
contenido de la capsula se le agregan 14ml de agua y se trans&iere en partes iguales a
dos tubos de ensayo, uno de estos tubos servir como control, al otro se le adiciona 1ml
de pero"ido de !idrogeno al 146 y se calienta en ba9o de +ara por 3 min, se de%a
en&riar y &inalmente se practica la prueba de ,mbert a ambos tubos.
PRE"UNTAS DE ACTIVIDAD COMPLEMENTARIA
1. :u otro tipo de sustancias pueden determinarse en la orina por un metabolismo
anormal de lpidos.
2. :u es la cetsis y la 5etonuria.

BIBLIO"RAFIA:
(L;+#<, D.=. ,ntroduccin a la bio'umica prctica. +e"ico. +a.ra> /ill
Latinoamericana, ?.0.
5177, # y ?tump&, (.@. $io'umica F.
L1(#A, # y 07A1L0, 5. .uas de laboratorio de $io'umica. Facultad de
ciencias. ;niversidad 7acional de 5olombia sede $ogota