DETERMINACIÓN DEL CONTENIDO DE NITROGENO

POR EL MÉTODO DE MICROKJELDAHL

YULI DIANA LUISA

ESTEFANY 07431 VANESSA 07456 MARIA 074231
53 62 3
LOPEZ MELO OSSA

Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Departamento de Química,

Universidad del Valle, Cali, Colombia
Octubre 14 del 2009

RESUMEN: Para la determinación de contenido de proteína en un alimento por

el método de microkjeldahl, se digirió la muestra en ácido sulfúrico
concentrado, de disolvieron los residuos en agua destilada, en un equipo de
destilación microkejeldahl, se agrego NaOH e indicador mixto, haciendo
reaccionar acido borico a calentamiento constante, se inicio la destilación
hasta el viraje de la solución. Se titula el borato formado con ácido clorhídrico.
Se obtuvo un porcentaje de proteína de 15.78%.

DATOS, CALCULOS Y 0.0152gNa2CO₃×1mol Na₂CO₃106g

Na₂CO₃
RESULTADOS
×2mol HCl1mol Na₂CO₃×12.0mL
HCl
Tabla N° 1. Datos obtenidos
×1000mL HCl1L solución
durante la práctica. HCl=0.143M
Peso de la Peso de Na₂CO₃
• Porcentaje de N en la
muestra muestra:
0.0365 g 0.0152 g
0.5mL HCL×0.143mol
HCl1000mL HCL×
Volumen de Volumen de
HCl para HCl para la 1 B2O66mol
HCl×2H3BO31 B2O6×
titulación estandarizació
n 3NH31H3BO3×1mol
0.5 mL 2.0 mL N1mol NH3×

• Concentración real de HCl: 14g N1mol N

=1.001×10-3g N
 %N= significativa entre el %
1.001×10-3g N0.0365g real de proteína presente
de muestra×100 en el cereal y el valor
obtenido:
=2.74%
• Porcentaje de N como x=46.25
proteína: s= 35.02
n=6
2.74 × 5.76=15.78 % μ= 10.3
Proteína
tcalculado=μ- x×ns

Tabla N° 2. Porcentaje de tcalculado=10.3-

nitrógeno y proteína 46.25×635.02
encontrados por todos los
grupos. tcalculado=2.51

Grup % de % de tcritico> tcalculado

os N Proteína
1 5.43 30.96 2.51>2.57
2 43.79 249.62
3 2.90 16.47 La media y del valor real
4 2.74 15.63 de proteína no difieren
5 6.87 39.14 significativamente
6 12.35 70.40
7 18.40 104.9
ANALISIS Y DISCUSIÓN DE
RESULTADOS
• Prueba Q para datos
sospechosos: Desde hace más de 100 años se
está utilizando el método Kjeldahl
Dato sospechoso: 249.62% para la determinación del nitrógeno
en una amplia gama de muestras.
Qcal= La determinación del nitrógeno
Kjeldahl se realiza en alimentos y
Dato sospechoso-Dato bebidas, carne, cereales y forrajes
cercanoDato mayor-Dato para el cálculo del contenido en
menor proteína. También se utiliza el
método Kjeldahl para la
=144.72233.99=0.62 determinación de nitrógeno en
aguas residuales, suelos y otras
Qcritico< Qcalculado muestras1.
Este método se divide
0.62 >.58 esencialmente en tres pasos: la
digestión, la destilación y la
Se rechaza el valor valoración; en la digestión se trata
sospecho 249.62% la muestra con acido sulfúrico
concentrado a ebullición dado que
• Prueba t para determinar este oxida la muestra destruyendo
si existe diferencia la materia orgánica, además se
requiere la presencia de
catalizadores tóxicos para acelerar
el ataque químico sobre la
muestra2, en este caso se utilizo
CuSO4: Se; con la intención de
disminuir el tiempo de la digestión
se agrega sulfato de potasio, el cual
aumenta el punto de ebullición de la
solución de acido sulfúrico y por lo
tanto aumenta la temperatura para
que se lleve a cabo la
descomposición3. La reacción que
resume esta etapa es:
n - C -NH2 + mH2SO4 catalizadores y Δ
CO2
+ (NH4)2 SO4 + SO2
Si embargo se debe tener en
cuenta que la transformación del
nitrógeno depende de su estado
de combinación en la muestra
original, así el nitrógeno de
grupos amino y amida se
convierte en ion amonio;
mientras que los grupos nitro,
azo y azoxi (pertenecientes a la
serie aromática, se caracterizan por
el hecho de que en la molécula hay
dos átomos de nitrógeno unidos
entre sí por un doble enlace4),
pueden formar nitrógeno elemental
o algunos óxidos de nitrógeno que
se den en medio caliente5.
Para la segunda etapa se agrega
un exceso de solución de
hidróxido de sodio, de manera
que el ion amonio es liberado en
forma de amoniaco, como se
muestra en la reacción:
(NH2)SO4 + 2 NaOH→2NH3 +
Na2SO4+ 2H2O
El amoniaco es destilado y
recibido en una solución de acido
bórico en exceso que contiene un
indicador mixto, en este
momento la coloración es roja; el
ácido bórico se usa para recoger
todo el amonio (gas) para que no se
salga del sistema formando borato
de amonio, tomando una coloración
verde6.
NH3 + H3BO3 →NH4 + H2BO3-
Para la última etapa el borato de
amonio es titulado con HCl
estandarizado; el borato de
amonio en solución forma la
base conjugada del acido bórico,
al titular lo que se busca es
regresar a la base conjugada
H3BO3, de esta manera se
establece la relación
estequiometria entre el NH4+,
H2BO3 y HCl, siendo esta 1:1:17.
La reacción que ocurre durante
la titulación es:
H2BO3- + H+ H3BO3
Al realizar los cálculos el porcentaje
arrojado de nitrógeno en la muestra
fue de 2,74% y como proteína se
reporta 15,78%, el cual es un valor
cercano al sugerido en la etiqueta
10,3%; al realizar la prueba t a los
datos del grupo se obtuvo que la
media de los valores encontrados
no difería significativamente del
valor real; sin embargo se debió
rechazar por medio de un aprueba
Q un valor sospechoso que pudo
estar sujeto a errores que afectaron
de manera significativa los
resultados; en este método
constituyen fuentes de error:
La inclusión de nitrógeno no
proteico como parte de la proteína;
la pérdida de nitrógeno durante la
digestión, la digestión incompleta
de la muestra.
Las proporciones excesivas de s_s_articulos_984_BAL.htm. Octubre
sulfato de sodio o potasio que se 10 de 2009.
añaden al ácido (para elevar el
punto de ebullición) pueden resultar 3. SKOOG, Douglas A. Química
en una descomposición por calor y Analítica, sexta edición, p 350-351.
la consecuente pérdida de
amoníaco, generalmente se 4.http://www.aduanas-
recomiendan temperaturas de mexico.com.mx/cgi-
digestión de 370-410°C. bin/ctarnet/notas_ex/not_2927.html.
Octubre 10 de 2009.
Por ultimo puede ocurrir pérdida de
nitrógeno si se utiliza demasiado 5. SKOOG, Douglas A. Química
selenio o la temperatura de la Analítica, sexta edición, p 350-351.
digestión no se controla
cuidadosamente; las condiciones 6.
son aún más críticas que con el http://www.scribd.com/doc/504240/i
cobre o el mercurio cuando se usan nforme-microKjendhal. Octubre 10
como catalizadores8. de 2009.

7.http://www.scribd.com/doc/50424
CONCLUSIONES 0/informe-microKjendhal. Octubre
10 de 2009.

8.docencia.izt.uam.mx/lyanez/anali
BIBLIOGRAFIA sis/practicas/KJELDAHL.rtf.
Octubre 12 de 2009.
1.http://www.panreac.com/new/esp/
productos/docs/re_esp.pdf). Octubre
10 de 2009.

2.http://www.engormix.com/determi
nacion_nitrogeno_proteico_alimento