Practica Biologia 2014-I

UNIVERSIDAD NACIONAL DE INGENIERIA
FACULTAD DE CIENCIAS
ESCUELA PROFESIONAL QUIMICA

M A N U A L D E P R A C T I C A S
L A B O R A T O R I O DE
B I O L O G A
CH 061

SEMESTRE ACADEMICO 2014-1

PILAR GARCA AVELINO
Jefe de Prcticas

Manual de Prcticas: Laboratorio de Biologa, elaborado por Pilar Garca Avelino

2

ESCUELA PROFESIONAL DE QUMICA
BIOLOGA (CH 061)

Cronograma de Practicas de Laboratorio de BIOLOGA - CH 061

LABORATORIO
Fecha de
ejecucin
Entrega de
Informe
Martes Mirc. Martes Mirc.
CLASE INTRODUCTORIA AL
LABORATORIO
26 de marzo
1. Reconocimiento de Biomolculas
1
abril
02
abril
08
abril
09
abril
2. Extraccin de ADN
22
abril
23
abril
29
abril
30
abril
PRACTICA CALIFICADA 1:
Laboratorios: 1, 2
07 mayo
3. Actividad enzimtica de las
oxidoreductas
13
mayo
14
mayo
20
mayo
21
mayo
4. Factores que influyen en la Actividad
enzimtica: AMILASA SALIVAL
27
mayo
28
mayo
03
junio
04
junio
PRACTICA CALIFICADA 2
Laboratorios: 3, 4
18 junio
EXAMEN PARCIAL 12 al 16 mayo
EXMENES FINALES 07 al 11 de julio
EXMENES SUSTITUTORIOS 14 al 18 de julio

En la fecha de realizacin de los laboratorios se entregarn los preinformes
correspondientes

* Las fechas de los exmenes: parcial, final, sustitutorio; sern definidas por el Dr.
Guy Carvajal

Prof. Pilar Garca Avelino


3

PRESENTACION DEL MANUAL DE PRCTICAS
El propsito del Laboratorio es familiarizar al estudiante con la metodologa de trabajo de la
biologa, proporcionarle un ambiente donde tenga oportunidad de encontrarse con sustancias e
instrumentos que le motive a experimentar.
Considerando al laboratorio como un lugar donde el trabajo en equipo se facilita, da lugar a un
proceso de constante integracin, comunicacin, investigacin, construccin de ideas,
surgimiento de nuevas preguntas, donde las actividades experimentales propician la
reorganizacin de conocimientos y facilitan el alcanzar un aprendizaje significativo.
Para logra tales fines, se propone esta gua que, como material de apoyo didctico, reforzara el
proceso constante de enseanza aprendizaje, requiriendo la participacin y gua del profesor.
Material necesario para trabajar por alumno:
Individualmente: un mandil, gafas de seguridad, guantes, plumn marcador, toalla, cuaderno
de apuntes.
Por equipo: El que se indique para cada prctica.

INSTRUCCIONES GENERALES.
1. Busca conceptos, antecedentes previos a la realizacin de las prcticas.
2. Construye la hiptesis de trabajo, antes de solicitar su material.
3. Lee cuidadosamente los experimentos antes de ejecutarlos.
4. Recurre a tus libros de texto y/o consulta para aclarar dudas despus de realizadas las
practicas, o consulta al profesor responsable.
5. Al efectuar cada uno de los pasos del desarrollo experimental, observa minuciosamente
y anota los cambios ocurridos.
6. Al concluir el desarrollo experimental, resuelve el cuestionario para su futura revisin.
7. Elabora tus conclusiones.
PRECAUCIONES PARA EL DESARROLLO DE CADA EXPERIMENTO
Las medidas oportunas y la compresin de las prcticas a seguir, har del laboratorio un
lugar seguro como cualquier ambiente de clases.
Para ello debern tenerse en cuenta, en forma general las siguientes precauciones:
1. Observa donde dejas el material caliente, cerciorndote que este frio antes de tomarlo
con la mano.
2. Cuando calientes un tubo de ensayo, no lo apuntes hacia ti o hacia tus compaeros,
pude proyectarse su contenido.
3. Si cae sobre ti o en tu ropa un material corrosivo, lvate inmediatamente con
abundante agua, e infrmalo al profesor del curso.
4. Nunca pruebes una sustancia.
5. Al detectar el olor de un lquido, no coloques la cara sobre la boca del recipiente, con
tu mano abanica hacia ti el aroma.
6. Antes de usar un reactivo lee dos veces la etiqueta de su contenido.
7. Los tubos de ensayo no pueden calentar ser por el fondo sino por las paredes, para
evitar su expulsin del contenido.
8. No arrojes cuerpos slidos en los lavaderos, no viertas directamente los cidos.
9. Rotula tu material de trabajo, as te ser fcil identificarlos.
10. Cuando trabajes con el mechero mantn tu cabello recogido.
11. Nunca emplear papel para encender el mechero.

4

BIOLOGA (CH 061)

PRESENTACION DEL INFORME

No olvidarse de indicar el grupo de laboratorio (incluido horario) al que pertenecen:
A B (A1, A2, A3 y B1, B2, B3)

I. Resumen (1 p)
Qu teoras lo sustentan? En relacin al desarrollo de los experimentos.
II. Objetivos especficos (1 p)
Tema central de estudio para cada experimento desarrollado

III. Observaciones experimentales, datos y resultados (para c/experimento) (3 p)
Durante el desarrollo del experimento:
Qu se observ? Qu datos hubieron? Cules fueron los resultados?Qu reacciones
se dieron?
Se indican los resultados tal y como se dieron durante la investigacin. Se debe
describir los pasos ejecutados durante la experimentacin
Se pueden presentar los datos en tablas, grficas, o figuras, debidamente numeradas

IV. Discusin de las observaciones experimentales, datos y resultados (3 p)
Se obtuvieron los resultados correctos segn la teora? Si, no? Qu sucedi?
Es la etapa que encadena los resultados obtenidos por la investigacin. Se relaciona,
interpreta y discute los resultados.
Se pone a prueba la capacidad analtica y de autocrtica del investigador.
La discusin pone el toque personal al trabajo.

V. Conclusiones (2 p)
Qu significan los resultados?
Las conclusiones estn relacionadas con los objetivos.
Es el anlisis del cumplimiento de cada uno de los objetivos de la prctica

VI. Cuestionario (1.5 p)
Preguntas relacionadas al tema

VII. Bibliografa (0.5 p)
Qu autores se consultaron para fundamentar la investigacin?
Qu fuentes han sido consultadas (libros, artculos, tesis?
REVISAR: ANEXO de Referencias Bibliografas


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BIOLOGA (CH 061)

PREINFORME DEL LABORATORIO N 1

RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS

Nombre del Alumno:
Calificacin

Fecha:

Recuerde que el PREINFORME debe de entregarlo de manera individual, el da de realizacin del laboratorio,
se presenta en hojas A4 bond, que tiene un peso mximo de 4 ptos. sobre la nota del Laboratorio.

1. Realice el DIAGRAMA DE FLUJO de los experimentos a desarrollar PROCEDIMIENTO,
realice un esquema de trabajo de cada experimento.
Es el plan ordenado de la forma en que se realiz la prctica para lograr el objetivo de la
misma. (2 puntos)
Ejemplo:

Se indica el proceso (Se adiciona se separa)

a. Identificacin de azucares reductores
b. Hidrolisis de la sacarosa
c. Reconocimiento del almidn
d. Reconocimiento de protenas
e. Reconocimiento de lpidos
2. Cuestionario:
a. Mencione algunos carbohidratos alimenticios, segn la clasificacin de la siguiente
tabla:
Monosacridos (3 ej.)
Disacridos (3 ej.)
Oligosacridos (1 ej.)
Polisacridos (2 ej.)
b. Qu es la inversin de la sacarosa?
c. Qu sucede qumicamente al aadir lugol a las muestras positivas para la reaccin?
d. Cul es la reaccin que tiene lugar entre el reactivo de Biuret y las protenas?
e. Cul es el valor de la polaridad de la acetona y el cloroformo?
3. Bibliografa: cite correctamente la bibliografa consultada

A
B
C
GRUPO


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BIOLOGA (CH 061)

GUIA DE LABORATORIO N 1

INTRODUCCIN
En los organismos se encuentran cuatro tipos diferentes de molculas orgnicas en gran
cantidad: carbohidratos, lpidos, protenas y nucletidos. Todas estas molculas contienen
carbono, hidrgeno y oxgeno. Adems, las protenas contienen nitrgeno y azufre, y los
nucletidos, as como algunos lpidos, contienen nitrgeno y fsforo.
Se ha dicho que es suficiente reconocer cerca de 30 molculas para tener un conocimiento que
permita trabajar con la bioqumica de las clulas. Dos de esas molculas son los azcares
glucosa y ribosa; otra, un lpido; otras veinte, los aminocidos biolgicamente importantes; y
cinco las bases nitrogenadas, molculas que contienen nitrgeno y son constituyentes claves
de los nucletidos.
En esencia, la qumica de los organismos vivos es la qumica de los compuestos que contienen
carbono, es decir, los compuestos orgnicos.
El carbono es singularmente adecuado para este papel central, por el hecho de que es el
tomo ms liviano capaz de formar mltiples enlaces covalentes. A raz de esta capacidad, el
carbono puede combinarse con otros tomos de carbono y con tomos distintos para formar
una gran variedad de cadenas fuertes y estables y de compuestos con forma de anillo. Las
molculas orgnicas derivan sus configuraciones tridimensionales primordialmente de sus
esqueletos de carbono. Sin embargo, muchas de sus propiedades especficas dependen de
grupos funcionales. Una caracterstica general de todos los compuestos orgnicos es que
liberan energa cuando se oxidan. Entre los tipos principales de molculas orgnicas
importantes en los sistemas vivos estn los carbohidratos, los lpidos, las protenas y los
nucletidos.

OBJETIVOS
Determinar cualitativamente los azucares reductores.
Hidrolizar la sacarosa.
Reconocer la presencia de almidn.
Reconocer cualitativamente las protenas presentes en muestras biolgicas.
Demostrar la solubilidad de los lpidos en diferentes tipos de solventes.

MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo, mechero, placas petri, vasos de precipitado, gradillas, pipetas graduadas,
propipetas, pinzas de madera, pisceta, almidn.

Reactivo de Fehling, solucin de azucares, solucin de almidn, acetona, cloroformo, sulfato de
cobre, hidrxido de sodio

Por grupo: un huevo, 5 ml leche, 1 papa (elementos crudos)

7

IDENTIFICACIN DE AZCARES REDUCTORES (I)
FUNDAMENTO
Los monosacridos (figura 1) y la mayora de los disacridos poseen poder reductor, que
deben al grupo carbonilo que tienen en su molcula. Este carcter reductor puede ponerse de
manifiesto por medio de una reaccin redox, llevada a cabo entre ellos y el sulfato de cobre (II).
Tras la reaccin con el glcido reductor se forma xido de cobre (I) de color rojo. De este modo
el cambio de color indica que se ha producido la reaccin y que el glcido presente es reductor.
Figura N1. Algunos monosacridos

Reaccin de Fehling:
Es una reaccin cualitativa que sirve para determinar la presencia de un azcar reductor que
no sea sacarosa (carece de carbono anomrico y no es azcar reductor).
El reactivo de Fehling presenta sulfato de cobre, carbonato de sodio, citrato de sodio, y agua.
En la reaccin para determinar a los azucares reductores los agentes estabilizantes de la
reaccin son el carbonato y citrato, el sulfato de cobre es el reactante especficamente el Cu
que va a reaccionar con los grupos qumicos de aldehdos y cetonas. Que en reacciones de
oxido reduccin el Cu se convierte en CuO dando un color rojo ladrillo que precipitar
posteriormente, como lo expresa la siguiente reaccin (figura 2):

Figura N2. Reaccin de Fehling

PROCEDIMIENTO
- Rotular 6 tubos de ensayo, adicionar el azcar correspondiente.
- Adicionar los reactivos en el orden sealado
- Mezclar por inversin el reactivo con cada uno de sus componentes
- Someter a la accin del calor hasta ebullicin
- La reaccin ser positiva si en la muestra se forma un precipitado color rojo ladrillo
(CH
2
O), y ser negativa si se queda azul o cambia a un tono de azul-verdoso.


8

Tabla N1. Azucares reductores
COMPONENTES
TUBO DE ENSAYO
1 2 3 4
1.Solucin de glucosa 1% 1 ml
2.Solucin de lactosa 1% 1ml
3.Solucin de fructuosa 1% 1 ml
4.Solucin de sacarosa 1% 1 ml
Reactivo de Fehling A 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Reactivo de Fehling B 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml
Calor: ebullicin: Bao mara 5

(CH2O), ser negativa, si la hidrolisis no se ha realizado correctamente, apareciendo una
coloracin verde en el tubo de ensayo.

ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS
(De las distintas muestras)


9

HIDROLISIS DE LA SACAROSA (II)
FUNDAMENTO
La sacarosa (figura 3) es un disacrido que no posee carbonos anomricos libres por lo que
carece de poder reductor y la reaccin con el licor de Fehling es negativa, como ha quedado
demostrado en el anterior experimento. Sin embargo la presencia de HCl y el calor, la sacarosa
se hidroliza, es decir incorpora una molculas de agua y se descompone en los monosacridos
que la forman: glucosa y fructuosa, que s son reductores (figura 4).
Figura N 3. Sacarosa

Figura N 4. Disacridos: (a) reductor, (b) no reductor

PROCEDIMIENTO
- Mezclar por inversin el reactivo con cada uno de sus componentes, ver la tabla 3.
- Someter a la accin del calor hasta ebullicin
Tabla N2. Componentes de la hidrolisis de la sacarosa
COMPONENTES
Muestra
sacarosa
Solucin de sacarosa 0.5% 2 ml
cido clorhdrico HCl 1M 1 ml
Calentar al mechero/bao mara 1 5
Enfriar
Hidrxido de sodio NaOH 1M 1 ml
Reactivo de Fehling A 1 ml
Reactivo de Fehling B 1 ml
Calor: ebullicin bao mara
(CH
2
O), ser negativa, si la hidrolisis no se ha realizado correctamente, apareciendo
una coloracin verde en el tubo de ensayo. //ANOTAR SUS OBSERVACIONES

10

RECONOCIMIENTO DE POLISACARIDOS: ALMIDN (III)

FUNDAMENTO
El almidn es un polisacrido vegetal formado por dos componentes: la amilosa y la
amilopectina. Esta prueba usa como reactivo el lugol, se basa en la especificidad del almidn
cuando est presente en solucin, la cual da un color azul en presencia del Yodo. El lugol
presenta: yoduro de potasio y yodo, ms agua (solucin de Lugol). El yodo de la solucin
tiene afinidad por los enlaces 1-4 y 1-6 de la molculas de almidn, esta interaccin del
yodo por dichos enlaces producen el cambio de coloracin no por una reaccin qumica sino
por una reaccin de adsorcin o fijacin de iodo en la superficie de la molcula de amilosa, lo
cual solo ocurre en frio (a temperatura ambiente) La amilosa en disolucin coloidal y en
presencia de iodo se colorea de azul toma color azul, la amilopectina da una coloracin rojo
violcea.
Figura N 5. Fragmento de la molcula del almidn (amilopectina)
En el crculo un monmero de glucosa.

PROCEDIMIENTO
- Colocar los componentes indicados en la tabla 4, adicionar el reactivo de lugol y
observar los primeros cambios de coloracin.

Tabla N 3. Reconocimiento del almidn
COMPONENTES
TUBO DE ENSAYO
1 2 3
Solucin de almidn 2% 1 ml
Papa rallada 1 gr
Albmina 1 ml
Reactivo de Lugol 3 gotas 3 gotas 3 gotas

- Mezclar por inversin y anotar los resultados, ser positivo si se torna azul, violceo.
- Calentar suavemente, sin que llegue a hervir, hasta que pierda el color.
- Enfriar el tubo de ensayo en agua fra, observar como a los 2-3 minutos reaparece el
color azul. // ANOTAR SUS OBSERVACIONES Y RESULTADOS

11

RECONOCIMIENTO DE PROTENAS (IV)

FUNDAMENTO

Las protenas son macromolculas formadas por la unin de muchos aminocidos (figura 6) por
enlace peptdico (estructura primaria). Adems pueden darse uniones por enlaces dbiles de
distinta naturaleza que hacen que la protena adquiera una conformacin tridimensional
caracterstica (estructura terciaria) ver la figura 7. Las variaciones de pH, temperatura o
concentracin salina pueden destruir esos enlaces dbiles de manera que la protena pierde
su conformacin y se dice que se desnaturaliza.

Figura N6. Unidad de la protena:
aminocido

Figura N7. Estructura de las protenas

Las protenas debido al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones
coloidales que pueden precipitar formndose cogulos al ser calentadas a temperaturas
superiores a 70C o al ser tratadas con soluciones salinas, acidas, alcoholes, etc.
Una de las reacciones coloreadas especficas de las protenas, que sirven para su
identificacin, cabe resaltar la reaccin de Biuret (figura 8). Esta reaccin los producen los
pptidos y las protenas, pero no los aminocidos, ello se debe a la presencia del enlace
peptdico CO-NH que se destruye al liberarse los aminocidos

Reaccin de Biuret (figura 8)
Se debe a los componentes que presenta: el hidrxido de sodio y sulfato de cobre (II); el cual el
agente denaturante de las protenas es el hidrxido y el reactante es el sulfato de cobre. Las
protenas despus de ser denaturadas facilitan la interaccin del Cu con los pares de
electrones sin compartir del grupo amino del pptido mediante enlaces de coordinacin con la
formacin de un complejo coloreado prpura violceo, cuya intensidad depende de la
concentracin de protenas.

12

Figura N8. Complejo de cobre formado en la reaccin de Biuret

PROCEDIMIENTO
- Rotular tres tubos de ensayo, en el primero agregar 2 ml de albmina (huevo), en el
segundo tubo 2 ml de leche, y en el tercero 2 ml de la solucin de almidn.
- Aadir 0.5 ml de hidrxido de sodio (NaOH) al 5%, y 0.5ml de sulfato de cobre
(Cu
2
SO
4
) al 1% a cada tubo.

Tabla N4. Ensayos de protenas
COMPONENTES
TUBO DE ENSAYO
1 2 3
Albmina (huevo) 2 ml
Casena (lcteo) 2 ml
Sol. almidn 2 ml
NaOH 5% 0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml
Rvo. Biuret:
Cu
2
SO
4
1%
0,5 ml 0,5 ml 0,5 ml
- Observe la formacin del color violeta en los tubos que presentan protenas, siendo
Biuret (+), de no haber un cambio de color ser Biuret (-).


13

SOLUBILIDAD DE LOS LPIDOS (V)
FUNDAMENTO
Los lpidos son insolubles en agua. Cuando se agitan fuertemente en ella se dividen en
pequesimas gotas formando una emulsin de aspecto lechoso que es transitoria, pues al
dejarlo en reposo desaparece por la reagrupacin de las gotitas de grasa en una capa que por
su menor densidad se sita sobre el agua. Las grasas son solubles en disolventes orgnicos.

En este experimento el reconocimiento de lpidos ser por la prueba de solubilidad,
identificando el comportamiento de las molculas de aceite con el agua, las cuales no se
homogenizan, debido a que estas presentan caractersticas diferenciales, mientras que el agua
es polar, el aceite es no polar, esto hace que microscpicamente se note que el aceite forme
micelas en solucin acuosa. Donde las colas hidrofbicas de las molculas de aceite se
esconden del agua adoptando la forma de micelas.

PROCEDIMIENTO
Tabla 8. Reconocimientos de lpidos por solubilidad
COMPONENTES
TUBO DE ENSAYO
1 2 3
Aceite 1 ml 1 ml 1 ml
Agregar por las paredes del tubo cada componente:
Agua destilada 2 ml
Acetona 2 ml
Cloroformo 2 ml

- Rotular los tubos y en cada uno de ellos adicionar 1 ml de aceite
- Luego por las paredes de cada tubo adicionar: 2ml de agua para el primer tubo, 2ml de
cloroformo para el segundo tubo y cloroformo para el tercer tubo
- NO HOMOGENIZAR! Hacer la primera observacin.
- Mezclar por inversin cada tubo, dejar en reposo por 5 minutos
- Anotar las observaciones respectivas.

Tabla 9. Resultados de la solubilidad de los lpidos
Muestra
Aceite
+ agua destilada
Aceite
+ acetona
Aceite
+ cloroformo
Soluble



14

BIOLOGA (CH 061)

INFORME DEL LABORATORIO N 1


1 Resumen (1p)

Nombre del alumno
(Apellidos, Nombre)
Pre informe
(4 p)
Informe
(12 p)
Desempeo
(4 p)
Nota

GRUPO


15

2 Objetivos especficos (1p)

3 Datos y observaciones experimentales (3 p)
Experimento N 1: Identificacin de Azucares Reductores

Tabla N1. Resultados de azucares reductores
GLCIDO glucosa lactosa fructuosa sacarosa
Reductor
Importante: Es necesario indicar la formacin de precipitado y la cantidad con un signo (+++).


16

Experimento N 2: Reconocimiento del Almidn
Tabla N2. Resultado de reconocimiento del almidn
Muestra almidn papa
Clara de
huevo
Reaccin al lugol

Experimento N 3: Reconocimiento de polisacridos: Almidn
Tabla N3. Resultado de reconocimiento del almidn
Muestra almidn papa huevo
Almidones?
Importante: Es necesario indicar la intensidad del color con un signo (+++).


17

Experimento N 4: Reconocimiento de Protenas
Tabla N4. Ensayos de protenas

Muestra albmina casena almidn
Protenas
Importante: Es necesario indicar la intensidad del color con un signo (+++).

Experimento N 5: Solubilidda de los Lpidos
Tabla N5. Resultados de la solubilidad de los lpidos
Muestra
Aceite
+ agua destilada
Aceite
+ acetona
Aceite
+ cloroformo
Soluble?


18

4. Discusin de observaciones, datos y resultados (3 p)


19

5. Conclusiones (2 p)

6. Cuestionario (1.5 p)
1. Qu azcares son reductores?
2. Qu funcin tiene el cido clorhdrico?
3. En el experimento 2: reconocimiento del almidn, al trabajar con el lugol Por qu se da
el cambio de coloracin despus de sometido al calor? Fundamente su respuesta.
4. Qu es la desnaturalizacin?
5. Qu la provocado que la desnaturalizacin en la muestra?
6. Cul de las muestras empleadas tiene mayor cantidad de protenas?
7. Qu es una emulsin transitoria?
8. Qu es una emulsin permanente?
9. Con cul de los solventes orgnicos fue soluble el aceite?
10. En nuestro sistema digestivo que enzima se encarga de solubilizar las grasas que
consumimos?

7. Bibliografa (0.5 p)


20

BIOLOGA (CH 061)

ANEXO 1

PREPARACION DE REACTIVOS
LABORATORIO: RECONOCIMIENTO DE BIOMOLECULAS

a. Soluciones de azucares glcidos al 1%
Glucosa, maltosa, lactosa, fructuosa, galactosa, sacarosa, almidn.
Se pesa 1 gramo de un glcido y se disuelve en 100 ml de agua destilada, agitando
hasta disolverse por completo.
Se vierte en un frasco limpio y se rotula, indicando la fecha de preparacin.
As para cada uno de ellos.
Para el caso del almidn, debe emplearse agua destilada caliente y agitacin constante

b. Solucin de almidn al 2%
Se pesa 2 gramos de almidn y se disuelve en 100 ml de agua destilada caliente y en
agitacin constante.

c. Hidrxido de sodio al 5%
Se pesa 5 gramos de NaOH y se disuelve en 100 ml de agua destilada.

d. Reactivo de Fehling
Solucin A: solucin al 3% de sulfato cprico cristalizado
Pesar 30 g de sulfato cprico Cu
2
SO
4
y aforar en un litro con agua
destilada
Solucin B: solucin al 15% de sal de Rochelle (tartrato de sodio y potasio) en
solucin acuosa al 5% de hidrxido de sodio NaOH.
Preparar un litro de hidrxido de sodio al 5% (50 grs en 1 L) y adicionarle
150 g de tartrato de sodio y potasio

e. Solucin de lugol: yodo/yoduro de potasio
Adicionar 2 g de yoduro de potasio y1 g de yodo a 80 ml de agua destilada, agitar hasta
solubilizar los reactivos Aforar 100ml de agua.

f. Reactivo de Biuret
Solucin A: 17.3 g de sulfato de cobre Cu
2
SO
4
en 100 de agua destilada caliente
Solucin B: 17.3 g de citrato sdico Na
2
CO
3
y 100 g de bicarbonato de sodio anhidro
NaHCO
3
en 800 ml de agua destilada caliente.
Se mezclan ambas soluciones, se enrazan a un litro y se ponen en un matraz cubierto
para evitar la accin de la luz. El reactivo se guarda en un frasco color mbar.


21

BIOLOGA (CH 061)


EXTRACCION DE ADN ANIMAL Y VEGETAL

Nombre del Alumno:
Calificacin

Fecha:


1. Realice el DIAGRAMA DE FLUJO de los experimentos a desarrollar PROCEDIMIENTO,
realice un esquema de trabajo de cada experimento.
misma. (2 puntos)

Ejemplo:


2. Cuestionario:
- Qu es cdigo gentico?
- Cuntos genes tiene el hombre?
- Presente un diagrama de flujo de la extraccin de ADN en una de las siguientes
muestras: en cabellos, sangre, tejido seo,


A
B
C
GRUPO


22

BIOLOGA (CH 061)


EXTRACCIN DE ADN ANIMAL Y VEGETAL
INTRODUCCIN

El ADN es una cadena de nucletidos, es un polinucletido. Esta
cadena est formada por muchas unidades de nucletidos unidas entre
s, por un enlace peptdico, y cada nucletido est formado por un
azcar (desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser adenina
(A), timina (T), citosina (C) guanina (G)) y un grupo fosfato que acta
como la unin de nucletidos. Ver la figura 1.
La secuencia del ADN se especifica nombrando slo la secuencia de
sus bases. La disposicin secuencial de estas cuatro bases a lo largo
de la cadena, es decir, el ordenamiento de los nucletidos, es la que
codifica la informacin gentica.
El ADN se presenta como una doble cadena de nucletidos, en la que
las dos hebras estn unidas entre s por enlaces. El ADN forma el gen,
que es la unidad bsica de la herencia.
Figura 1. Estructura del ADN
El ADN tiene algunas propiedades por las que es importante en la evolucin:
1) Almacena informacin,
2) Es una molcula estable, por lo que no cambia (muta) con mucha frecuencia.
3) En ocasiones ocurren pequeos cambios en el ADN que dan lugar a la variacin
necesaria para que se produzca la seleccin natural.

En las plantas, los animales y los hongos, el ADN se encuentra mayormente en el ncleo de las
clulas. Para extraer el ADN de las clulas vegetales hay que romper la fuerte pared celular
exterior, emulsionar los lpidos de la membrana plasmtica y la envoltura nuclear.

La extraccin del ADN celular es una etapa clave en muchos procedimientos de biologa
molecular y aplicaciones de ingeniera gentica. El mtodo vara dependiendo de la clula o
tejido desde donde se necesita extraer el DNA, sin embargo, cualquier protocolo tiene las
siguientes etapas bsicas:

Primero las clulas deben ser homogenizadas, lisadas (rotas) para liberar el ncleo (si est
presente). El ncleo tambin debe ser roto para liberar el DNA. En este punto el DNA debe ser
protegido de enzimas que podran degradarlo (nucleasas). Una vez que el DNA es liberado.
Debe ser precipitado con alcohol (etanol) para purificarlo y concentrarlo. Dependiendo de las
aplicaciones posteriores, puede ser necesario someter el DNA a etapas de purificacin
adicionales. Usualmente el DNA extrado se analiza mediante electroforesis en geles de
agarosa y/o espectrometra UV.
OBJETIVOS
Lograr la extraccin y visualizacin de ADN de una muestra animal.

23

Vasos de precipitado de: 500, 250 y 100 ml; probetas de 100 y 50 ml, 2 pipetas graduadas de
10 ml, 1 propipeta,1 pisceta, 1 pipeta pasteur, 2 tubos de ensayo de 15 ml, 1 gotero, 1 gradilla,
1 varilla de vidrio, 1 embudo, gasa, papel filtro, hielo, shampoo de color claro,
cloruro de sodio 2M, alcohol a bajas temperaturas (muy frio: 0 C), azul de metileno.

Por grupo: gasa, alcohol de 96 C (100ml)
muestra animal: hgado de pollo // muestra vegetal: platano de seda
FUNDAMENTO
El ADN se encuentra en el interior del ncleo celular, disperso y replegado, unido a protenas
para formar la cromatina. Para extraerlo es necesario homogenizar el tejido y romper las
clulas para separar el ncleo, al lograrlo se libera el ADN, se debe separar de las protenas y
precipitarlo para extraerlo de la solucin. Se visualizara como un agregado de fibras
blanquecinas que se podrn adherir a una varilla de vidrio.
EXTRACCION DE ADN ANIMAL
PROCEDIMIENTO (A cada paso indicado, escriba la finalidad en el respectivo informe)
1. Triturar en un mortero una porcin de hgado de pollo (20 grs), aadir 1 gramo de arena
fina, seguir homogenizando. Una vez que el hgado mas arena este triturado
homogneamente (como una pasta) ir adicionando de a pocos agua destilada fra, en un
volumen total de 50 ml

2. Filtrar el homogenizado en una gasa contenido sobre un embudo depositndose en la
probeta de 50 ml, para obtener la suspensin

3. En un vaso precipitado de 50 ml colocar 5 ml de la suspensin, adicionar 5 ml de NaCl 2M
frio y agitar. Este vaso deber estar contenido en otro vaso precipitado de 500 ml que
contenga hielo.

4. Aadir 1 ml de detergente (shampoo en solucin fra) y remover suavemente con la varilla
de vidrio, mezclando, y evitando la formacin de espuma. Repetir el procedimiento 3 veces
dejando reposar un minuto cada vez. Si de forma espuma retirarla con la pipeta pasteur.
Trasvasar el material contenido en el vaso precipitado de 50 ml a un tubo de ensayo
grande.

5. Aadir 10 ml de alcohol frio, inclinando el tubo de ensayo y dejando resbalar muy
lentamente el alcohol por la pared, para formar una capa sobre la solucin. Dejar
reposar, no mover, evitando que se mezclen ambas soluciones. Porque?

6. El ADN aparecer poco a poco lentamente en la interfase de agua-alcohol en forma de
grumos blancos. Se favorece la precipitacin y recoleccin as se va recogiendo mediante
la varilla de vidrio o un hisopo largo, introducindola lentamente bajo la interfase y
hacindola girar suavemente mientras se extrae. As se conseguir que se adhiera a la
varilla unas hebras blancas, poco a poco se irn enrollando los fragmentos de mayor
tamao de ADN. Pasado un minuto, retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo
cual el ADN quedar adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodn mojado.

7. Tomar una muestra de ADN, depositarlo sobre un portaobjetos y teir con azul de metileno
durante 3 minutos. Secar la lmina y observarla al microscopio. Describir la muestra al
microscopio.

24

BIOLOGA (CH 061)


EXTRACCIN DE ADN ANIMAL Y VEGETAL

1. Resumen (1p)

Nombre del alumno
(Apellidos, Nombre)
Pre informe
(4 p)
Informe
(12 p)
Desempeo
(4 p)
Nota

GRUPO


25

2. Objetivos especficos (1p)

3. Datos y observaciones experimentales (4 p)
Experimento: EXTRACCION DE ADN ANIMAL
3.1 Triturar una porcin de hgado de pollo (20 grs) con 50 ml de agua destilada fra
en un mortero, aadir 1 gramo de arena fina, seguir homogenizando.

3.2 Filtrar 1 vez el homogenizado en una gasa contenido sobre un embudo en la
probeta de 50 ml, para obtener la suspensin.


26

3.3 En un vaso precipitado de 50 ml colocar 5 ml de la suspensin, adicionar 5 ml de
NaCl 2M frio y agitar. Este vaso deber estar contenido en otro vaso precipitado
de 500 ml que contenga hielo.

3.4 Aadir 1 ml de detergente (shampoo en solucin fra) y remover suavemente con
la varilla de vidrio, mezclando, y evitando la formacin de espuma. Repetir el
procedimiento 3 veces dejando reposar un minuto cada vez. Si de forma espuma
retirarla con la pipeta pasteur. (Trasvasar el material contenido en el vaso
precipitado de 50 ml a un tubo de ensayo grande)


27

3.5 Aadir 10 ml de alcohol frio, inclinando el tubo de ensayo y dejando resbalar muy
lentamente el alcohol por la pared, para formar una capa sobre la solucin. Dejar
reposar, no mover, evitando que se mezclen ambas soluciones. Porque?

3.6 El ADN aparecer poco a poco lentamente en la interfase de agua-alcohol en
forma de grumos blancos. Se favorece la precipitacin y recoleccin as se va
recogiendo mediante la varilla de vidrio o un hisopo largo, introducindola
lentamente bajo la interfase y hacindola girar suavemente mientras se extrae.
As se conseguir que se adhiera a la varilla unas hebras blancas, poco a poco
se irn enrollando los fragmentos de mayor tamao de ADN. Pasado un minuto,
retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedar
adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodn mojado.


28

3.7 Tomar una muestra de ADN, depositarlo sobre un portaobjetos y teir con azul
de metileno durante 3 minutos. Secar la lmina y observarla al microscopio.
Describir la muestra al microscopio.



29


a. Elabore el diagrama de flujo del procedimiento de la extraccin de ADN vegetal
b. Explique, cmo se puede determinar la concentracin del ADN.
c. Presente un diagrama de flujo de la extraccin de ADN en una muestra de sangre,
piel o cabellos?
d. Cmo se puede preservar el ADN despus de haberlo extrado?
e. Cul es la diferencia de extraer ADN animal, vegetal y bacteriano? (sealarlas)
f. Cul es la importancia de estudiar el ADN en muestras arqueolgicas?
Y en la actualidad?


30

BIOLOGA (CH 061)


ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LAS OXIDOREDUCTASAS

Nombre del Alumno:
Calificacin

Fecha:


1 Realice el DIAGRAMA DE FLUJO del experimento a desarrollar: PROCEDIMIENTO
misma. (2 puntos)

Ejemplo:


2 Cuestionario:
a. Qu es la catalasa?, Cul es su funcin? En dnde se encuentra?
b. Cules son las propiedades de las enzimas?
c. Qu es anabolismo?
d. Qu es catabolismo?

3 Bibliografa: cite correctamente la bibliografa consultada

A
B
C
GRUPO


31

BIOLOGA (CH 061)

INTRODUCCIN
Las reacciones qumicas que se dan en los seres vivos no podran tener lugar sin la presencia
de los enzimas. Estas macromolculas, que generalmente son protenas globulares
responsables de la mayor parte de la actividad qumica de los organismos vivos: catalizan las
reacciones bioqumicas actuando como catalizadores que son sustancias que aceleran las
reacciones qumicas sin ser destruidas o alteradas durante el proceso, permitiendo que los
sustratos se conviertan en los productos que necesita la clula. Como todo catalizador, los
enzimas no se consumen en las reacciones que catalizan, pero a diferencia de otros
catalizadores de naturaleza inorgnica, las reacciones que catalizan son muy especficas: slo
interaccionan con determinados sustratos, y slo facilitan el curso de determinadas reacciones.
Las enzimas trabajan sobre un substrato para producir un producto.
Aunque esta reaccin ocurre espontneamente, las enzimas incrementan la velocidad de
reaccin de forma considerable. Un enzima que podemos encontrar en todos los seres vivos
dos es dos enzimas diferentes catalizan esta reaccin: a) catalasa, que se encuentra en
animales y protistas; b) peroxidasa, que se encuentra en las plantas.
La catalasa, es necesaria para descomponer el perxido de hidrgeno (H
2
O
2
) que es txico
para la mayora de los organismos vivos, se produce durante el metabolismo celular. El H
2
O
2

se convierte en oxgeno y agua segn la siguiente reaccin:
2 H
2
O
2
2 H
2
O + O
2

La peroxidasa es una homoprotena altamente especfica para el aceptor de hidrogeno, que es
el peroxido de hidrogeno, pero es muy inespecfica en cuanto al sustrato donador que utiliza,
que puede ser una de muchas sustancias, por ejemplo: fenoles, aminofenoles diaminas,
indofenoles, leucocolorantes, ascorbato e incluso ciertos aminocidos como tirosina. La
reaccin se puede seguir de la siguiente manera:
Donador reducido + H2O2 peroxidasa donador oxidado + 2H2O
Esta enzima se encuentra en la mayora de las plantas y en ciertos microorganismos, pero es
escasa en los tejidos animales. Se observa la actividad de la peroxidasa en la leche
(lactoperoxidasa), en los leucocitos (leucoperoxidasa) o mieloperoxidasa), en la placenta una
de las formas ms activas en la peroxidasa del rbano.
La rapidez de una reaccin puede estudiarse de muy diversas formas como:
Midiendo la presin de los productos que aparecen (en este caso, O2)
Midiendo la velocidad de desaparicin del substrato (en este caso, H2O2)
Midiendo la velocidad de aparicin del producto (en este caso, O2 que se desprende
como gas)


32

OBJETIVOS
Observar la presencia de la enzima catalasa en tejidos animales y vegetales Ver el
efecto del pH y la temperatura sobre la actividad enzimtica.
Comparar la actividad enzimtica de las diferentes muestras midiendo el producto

Vasos de precipitado de: 50, 100 ml; 2 matraces de 125 ml, 5 tubos de ensayo de 15 ml, 2
pipeta graduada de 10 ml, 1 propipeta,1 pisceta, 1 gradilla, 1 varilla de vidrio, 1 tapon horadado
embudo, tubo de vidrio en forma de U, cronometro, placapetri, cuchilla.
Perxido de hidrogeno al 30%, del cual se preparan las siguientes diluciones: 0, 25, 50, 75 y
100%

Por grupo: muestra animal: hgado de pollo
muestra vegetal: papa, palta, tomate (solo una de ellas)

PROCEDIMIENTO
I. EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUBSTRATO SOBRE LA CATALASA
1. Cortar la muestra en cinco trozos de igual tamao, dados de 1x1 cm mm, pesar (1 g aprox.).
2. Rotular cinco tubos de ensayo con los nmeros 1, 2, 3, 4 y 5
3. Realizar cinco disoluciones de agua oxigenada (0, 25, 50, 75 y 100 %)
4. Introducir un trozo de muestra en tubo de ensayo, a continuacin la disolucin de agua
oxigenada correspondiente cubriendo la muestra.
5. Observar la velocidad de reaccin
Repetir los pasos anteriores para la siguiente muestra

II. COMPARACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE AMBAS MUESTRAS
1. Preparar 2 matraces de 125 ml, y colocar 5 gramos de muestra (animal y vegetal)
*Realizar primero una de las muestras
2. Preparar 2 tubos de 30 ml conteniendo agua destilada en su totalidad, introducir su
respectiva varilla de vidrio en forma de U, la cual debe estar a 1 cm de la base del tubo.
3. Adicionar 15 ml de perxido de hidrogeno al 75% y colocar su tapon con su correspondiente
varilla en forma de U.
4. Empezar a contar el tiempo, transcurridos 5, 10, 15 y 20 minutos marcar la produccin de
gas en cada tubo.
5. Medir en volumen cuanto fue la produccin de gas por el tiempo indicado en cada muestra
(muestra animal y muestra vegetal).


33

BIOLOGA (CH 061)



1. Resumen (1p)

Nombre del alumno
(Apellidos, Nombre)
Pre informe
(4 p)
Informe
(12 p)
Desempeo
(4 p)
Nota

GRUPO


34


Experimento I:
EFECTO DE LA CONCENTRACION DE SUBSTRATO SOBRE LA ENZIMA
Tabla N1 Efecto de la concentracin del substrato sobre la enzima
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3 Tubo 4 Tubo 5
Muestra vegetal:
Muestra animal
*Indicar con cruces +++ la intensidad de la reaccin ( a mas cruces mas veloz)


35

Experimento II:
COMPARACION DE LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE AMBAS MUESTRAS
Tabla N2 Comparacin de la actividad enzimtica de ambas muestras

MUESTRA ANIMAL:
Hgado de

ml/minuto

MUESTRA VEGETAL
-

ml/minuto

5
10
15
20


36



37


a. Qu es y qu hace un enzima?
b. El enzima empleado en esta prctica se denomina:
c. Su sustrato es:
d. Cules son las funciones de la enzima trabajada?
e. Cul es la estructura molecular de las enzimas trabajadas?
f. Qu efecto hace el cambio en la concentracin de la enzima en la
velocidad de descomposicin del H
2
O
2
?


38

BIOLOGA (CH 061)


FACTORES QUE INFLUYEN EN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA DE LA
AMILASA SALIVAL

Nombre del Alumno:
Calificacin

Fecha:


1. Realice el DIAGRAMA DE FLUJO del experimento a desarrollar: PROCEDIMIENTO
misma. (2 puntos)

Ejemplo:


2. Cuestionario:
a. Qu es la amilasa salival?, Cul es su funcin?
b. Cules son los actores que influyen en la actividad de las enzimas?
c.
d.


A
B
C

39

BIOLOGA (CH 061)

AMILASA SALIVAL
INTRODUCCIN
Propiedades del almidn.
El almidn es el polisacrido de reserva ms abundante en vegetales y constituye la principal
fuente de nutricin glucdica para la humanidad. Los almidones estn constituidos por una
mezcla de dos componentes:
a-amilosa: cadena lineal de unas 200 unidades de D-glucosa unidas por enlaces (1-4)
amilopectina: cadena lineal de D-glucosas unidas por enlaces tipo (1-4) con numerosas
ramificaciones (1-6). El polmero contiene unas 1000 unidades de glucosa.
La proporcin en que se mezclan la a-amilosa y la amilopectina para formar el almidn
depende de la especie vegetal en que aparece el almidn. La -amilosa se disuelve fcilmente
en agua, adquiriendo una estructura secundaria caracterstica, de forma helicoidal, en la que
cada vuelta de hlice comprende seis unidades glucosa.
Esta estructura secundaria, en la que los grupos hidroxilo que dan hacia afuera, permite que el
iodo, al penetrar en el interior del helicoide, confiera a la disolucin una coloracin azul violcea
intensa caracterstica que permite la identificacin positiva de trazas de almidn. Como esta
coloracin no es resultado de ninguna interaccin covalente, el calentamiento origina la
desestabilizacin del helicoide y la prdida de color, que se recupera al enfriar lentamente la
disolucin. La variacin en el pH tiene un efecto anlogo.

Figura 1. Estructura repetitiva de la amilosa.
Hidrlisis del almidn.
El almidn puede hidrolizarse por medios qumicos o enzimticos. La ebullicin con cidos o
lcalis hidroliza aleatoriamente los enlaces glucosdicos entre unidades de glucosa, dando
polisacridos de longitud intermedia denominados dextrinas, cada vez menores hasta la
obtencin de unidades de glucosa individuales.
Los compuestos que se obtienen en la hidrlisis del almidn y el color que producen con el iodo
son los siguientes:
Almidn (azul).

40

Amilodextrinas (violeta).
Eritrodextrinas (rojo).
Acrodextrinas (incoloro*).
Maltosa (incoloro*).
Glucosa (incoloro*).
* Tener en cuenta el ligero color amarillo propio del iodo.
El almidn tambin puede hidrolizarse enzimticamente.
Uno de los enzimas que hidrolizan el almidn es la amilasa, que se halla presente en el jugo
pancretico y la saliva. Este enzima ataca al azar los enlaces (1-4) del interior de la cadena.
As, rinde finalmente unidades de glucosa libre y maltosa. La amilasa no ataca los enlaces
(1-6), base de las ramificaciones de la amilopectina.
Estos enlaces pueden ser hidrolizados por otro enzima desramificador. La ptialina o amilasa
salival es una protena enzimtica presente en la saliva. Como todo enzima, la accin que
ejerce sobre su sustrato (almidn) depende de una serie de parmetros: pH, temperatura,
concentracin de enzima...
OBJETIVOS
Ver el efecto del pH sobre la actividad enzimtica.
Ver el efecto de la temperatura sobre la actividad enzimtica.
COMPARAR y DISCUTIR los resultados de la actividad de la amilasa a los diferentes
pH. Deducir el pH en el cual la enzima es ms activa.

PROCEDIMIENTO
I. OBTENCIN DEL ENZIMA.
1. Tras enjuagar la boca, se mastica un trozo de papel de filtro para estimular la salivacin. Los
lquidos segregados se van pasando a un embudo con un filtro humedecido colocado sobre un
tubo de ensayo, hasta recoger la suficiente cantidad de saliva para realizar la prctica.
2. La saliva as obtenida se diluye 1:10 con agua destilada, obteniendo as la preparacin de
enzima base.
II. EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD AMILASA SALIVAL.
1. Tomar tres tubos de ensayo y aadir respectivamente:

1 2 3
ClH 0.1 N 2 ml NaOH 0.1 N 2 ml Agua destilada 2 ml
Almidn 2% 2 ml Almidn 2% 2 ml Almidn 2% 2 ml
Saliva diluida 1:10 2 ml Saliva diluida 1:10 2 ml Saliva diluida 1:10 2 ml

2. Agitar bien y medir rpidamente el pH de cada tubo. Para medir el pH, se toma una gota de
la disolucin con una varilla limpia y seca y se humedece con ella un trocito de papel
indicador de pH, comparando el color obtenido con el de la escala.


41

Los tres tubos se colocan en un bao de agua termostatizado a 37C durante 15minutos,
dejando que la amilasa vaya hidrolizando al almidn. Una vez transcurridos los 15 minutos,
se sacan los tubos y se efectan las pruebas del iodo y de Benedict

Prueba del iodo o del lugol: permite identificar la presencia de almidn que con este reactivo
da un color azul-violeta caracterstico. Tomar 1 ml de muestra de cada uno delos tubos y
aadirle unas gotas de la disolucin de iodo iodurada. Si la actividad enzimtica de la
amilasa no se ve afectada, catalizar la hidrlisis del almidn y por tanto la prueba del iodo
ser negativa.
Prueba de Benedict: permite identificar a los azcares reductores, obtenidos por hidrlisis del
almidn, que con esta prueba dan una coloracin rojiza (el almidn no tiene poder reductor).
Tomar 1 ml de muestra de cada uno de los tubos y seguir el protocolo para la reaccin de
Benedict en la prctica de azcares.
III. INFLUENCIA DE LA TEMPERATURA EN LA VELOCIDAD ENZIMTICA.
1. Preparar 8 tubos: cuatro de ellos con 2ml de almidn 2% y los otros cuatro con 2 ml de
saliva diluida 1:10.
2. Colocar dos tubos, uno conteniendo almidn y la otra saliva, a cada una de las cuatro
temperaturas siguientes (marcar cada pareja de tubos segn la temperatura a la que se
ensaya):
en bao de hielo (OC, si se aade un poco de agua al hielo enfra ms;
cuidar que los tubos no vuelquen)
a temperatura ambiente (20C)
en bao a 37C
a ebullicin en bao Mara* (100C).
3. Mantener as los tubos durante 15 minutos para que alcancen la temperatura del
experimento.
4. Aadir al tubo que contiene el almidn el contenido del tubo que tiene la saliva, agitar bien y
dejar que siga a su temperatura correspondiente. Empezar a contar el tiempo (los tubos
deben mantenerse bien inmersos en los respectivos baos para que la accin de la amilasa
tenga lugar a las temperaturas indicadas).
Transcurridos 0, 2, 4, 6 y 8 minutos coger una muestra de 0,5 ml de cada tubo y ponerla en
la placa de pocillos.
* En el caso del bao Mara basta con 5 minutos.
5. Aadir a cada muestra unas gotas de reactivo de iodo. Una vez realizada la prueba
ANALICE los distintos cambios de color observados y la razn de estos.
Cuando el almidn est hidrolizado no produce ningn cambio de color a la solucin de iodo
(punto acromtico). El tiempo necesario para alcanzar tal punto da idea de la actividad de la
enzima. La inversa de dicho tiempo equivale a la velocidad de la reaccin enzimtica.


42

BIOLOGA (CH 061)


AMILASA SALIVAL

1. Resumen (1p)

Nombre del alumno
(Apellidos, Nombre)
Pre informe
(4 p)
Informe
(12 p)
Desempeo
(4 p)
Nota

GRUPO


43


Experimento II: EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD AMILASA SALIVAL
Tabla N1 Resultados del efecto del pH sobre la actividad
Tubo 1 Tubo 2 Tubo 3
pH
Prueba de Lugol
Benedict


44

Experimento II: EFECTO DEL pH SOBRE LA ACTIVIDAD AMILASA SALIVAL
Tabla N2 Resultados de la temperatura ptima para la actividad de la enzima
0 C
Ambiente:
C
37 C 100 C
0
1
2
4
6
8


45



46


a. A qu temperatura es mxima la velocidad de la actividad enzimtica para la
amilasa?
b. Cmo afecta el cambio de temperatura en la velocidad de trabajo de la enzima?
c. Cmo afectan los cambios de pH a la velocidad de la actividad enzimtica?
d. Explique cmo los factores ambientales afectan la velocidad de las reacciones
catalizadas por enzimas

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