Slide: Os alimentos geneticamente modificados(ou OGMs) so organismos
geneticamente modificados. S considerado um ser transgnico se for introduzido no seu material gentico parte do material gentico do outro ser. Sofia: Quando os produtores de mas agarram numa rvore que produz mas particularmente boas e sumarentas e a enxertam com uma rvore que resiste bem ao frio, esto a produzir uma planta hbrida uma macieira geneticamente modificada. Mas isto apenas manipular algo que j acontece na Natureza, graas polinizao cruzada feita pelos insectos. Quando falamos de organismos geneticamente modificados, ou OGM, falamos daqueles em que, na definio da Organizao Mundial de Sade, o material gentico foi alterado de uma forma que no acontece naturalmente. Um exemplo real o que vamos ver a seguir.
Tcnicas de produo de um ser transgnico
Slide: Um bom exemplo real um tipo de morango que foi geneticamente modificado para amadurecer nas condies meteorolgicas da Europa do Norte. Os cientistas isolaram uma protena anticongelante que se encontra naturalmente no ADN de um peixe chamado solha-de-inverno e inseriram-na no ADN dos morangos. Este ADN modificado passou para as outras geraes de morangos.
Gene do peixe DNA do morango Sofia : A esta tcnica damos o nome de DNA recombinante, ou seja, uma forma de DNA artificial que criada pela combinao de dois ou mais genes que naturalmente no ocorreria. Slide: A tcnica de DNA recombinante permite juntar na mesma molcula de DNA genes provenientes de organismos diferentes, ou seja, possibilita retirar genes de uma espcie e introduzir num microorganismo, que posteriormente se vai multiplicar e assim produzir inmeras copias desse gene e consequentemente o produto desse gene.
Reaco em cadeia Polimerase (http://learn.genetics.utah.edu/content/labs/pcr/) Slide: A tcnica de reaco em cadeia da polimerase (PCR) veio possibilitar novas estratgias de analises de genes no mbito da tecnologia do DNA recombinante. De um modo geral, a tcnica PCR pode ser considerada como meio de clonagem e baseia-se na ampliao do DNA replicando-o. Sofia: A PCR possibilita a sntese de fragmentos de DNA, usando a enzima DNA-polimerase, a mesma que participa da replicao do material gentico nas clulas. Esta enzima sintetiza uma sequncia complementar de DNA, desde que um pequeno fragmento (o iniciador) j esteja ligado a uma das cadeias do DNA no ponto escolhido para o incio da sntese. Os iniciadores definem a sequncia a ser replicada e o resultado obtido a amplificao de uma determinada sequncia DNA com bilhes de cpias. Sofia: Agora vocs perguntam Porqu fazer isto? A modificao gentica permite que alguns genes bons sejam transferidos para outras plantas, criando colheitas mais lucrativas, mais nutritivas, mais duradouras ou mesmo mais resistentes aos pesticidas. Tal como no exemplo dos morangos, a ideia ter todos os benefcios do gene introduzido sem perder nenhum dos outros atributos do alimento. Por isso, no, o morango no sabe a peixe. Pelo menos, aparentemente.
Vantagens e desvantagens:
Vantagens: Desvantagens: Melhoria da Qualidade dos Alimentos Resistncia aos antibiticos
A tecnologia usada nos transgnicos permitem-nos melhorar e corrigir os mais variados alimentos de modo a produzirmos novos alimentos com as caractersticas desejadas. Podem ser obtido alimentos com maior teor em certos nutrientes, alimentos com vitaminas que naturalmente no conseguiriam produzir, reduzirmos a sntese de algumas protenas para que os alimentos durem mais tempo, entre outros. Os genes que lhes conferem resistncias a certos antibiticos (caracterstica que lhes permitem serem distinguidas dos no modificadas), passam a ter probabilidade de causar essa mesma resistncia ao antibitico no ser que o consumiu, ou seja, nos humanos. O resultado ser ento a ineficincia desse antibitico numa possvel infeco provocada por uma bactria, ou seja, quando necessitarmos desse antibitico, seremos resistentes a este, e assim, no nos far efeito, com isso, podem multiplicar o nmero de problemas de sade que envolvem bactrias imunes e dificultar o tratamento de doenas.
Instrues: The human genome is made up of 3 billion chemical base pairs.Scientists often need to isolate a very specific segment of DNA from within a vast amount of genetic material since this segment is just one tiny piece of the genome, they need many copies to have enough to work with. Traduo: O genoma humano composto de 3 bilhes de pares de bases qumicas. Os cientistas muitas vezes precisam de isolar um segmento muito especfico de DNA a partir de uma vasta quantidade de material gentico uma vez que este segmento apenas um pequeno pedao do genoma, eles precisam de muitas cpias de ter o suficiente para trabalhar com ele. The Polymerase Chain Reaction, or PCR, can generate 100 bilion identical copies of a specific DNA sequence in a matter of hours. As the inventor of PCR explained, the technique requires no more than a test tube, a few simple reagents, and a source of heart. Traduo: A Reao em Cadeia da Polimerase, ou PCR, pode gerar 100 bilion cpias idnticas de uma sequncia especfica de DNA em questo de horas. Como o inventor da PCR explicou, a tcnica de "no requer mais do que um tubo de ensaio, em alguns reagentes simples, e uma fonte de corao" To perform a PCR reaction you need DNA that has been extracted from cells. Because the purpose of PCR is to make more DNA copies, you dont need very much DNA to start the reaction. For example, you could extract DNA from a small sample of blood, skin, saliva or even hair follicles. Traduo: Para realizar uma reaco de PCR necessrio que o DNA foi extrado a partir de clulas. Como o objectivo da PCR fazer mais cpias de DNA, no precisas de muito DNA para iniciar a reao. Por exemplo, possvel extrair DNA de uma pequena amostra de sangue, a pele, saliva ou mesmo folculos cabelo. Start by moving your extracted DNA into a special PCR tube. PCR works by heating and cooling the solution over and over so PCR tubes are designed for even heat distribution. Traduo: Comece por mover o DNA extrado para o tubo especial PCR.O PCR funciona atravs do aquecimento e arrefecimento da soluo mais e mais nos tubos de PCR so feitos para distribuio uniforme do calor. Drag the EXTRACTED DNA to the PCR tube. Traduo: Arraste o DNA extrado para o tubo de PCR. Release the EXTRACTED DNA in the PCR tube. Traduo: Solte o DNA extrado no tubo de PCR. Next add primer 1 to the PCR tube. Primers attach to sites on the DNa strands that are at either end of the segment you want to copy. They are powerful tools for copying very specific DNA sequences since there is almost no chance that they will target the wrong sites. Traduo: De seguida adicionar um iniciador para o tubo de PCR. Primers anexar a sites sobre as fitas de DNA que esto numa das extremidades do segmento que desejas copiar. Eles so ferramentas poderosas para copiar seqncias de DNA muito especficas j que no h quase nenhuma chance de que eles vo atingir os locais errados. Drag PRIMER 1 to the PCR tube Traduo: Arrastar Iniciador 1 para o tubo de PCR Release PRIMER 1 in the PCR tube Traduo: Lanamento indicador 1 no tubo de PCR. Now add Primer 2 which will attach to the second site. Traduo: Agora adicione indicador 2, que ir anexar o segundo site. Drag primer 2 to the PCR tube Traduo: Arrastar indicador 2 para o tubo de PCR Release Primer 2 in the PCR tube Traduo: Lanamento indicador 2 no tubo de PCR . Add nucleotides to your PCR tube. Nucleotides are the As, Cs, Gs , Ts that make up the DNA code. These genetic building blocks will be used to create billions of DNA copies. Traduo: Adicionar nucletidos no seu tubo de PCR. Nucletidos so As , Cs, Gs,Ts que compem o cdigo de DNA. Estes blocos de construo gentica vai ser usado para criar milhares de milhes de cpias de DNA. Drag the nucleotides to the PCR tube Traduo: Arrastar os nucleotidos para o tubo de PCR Release the nucleotides in the PCR tube Traduo: Lanar os nucletidos para o tubo de PCR Last, youll add DNA Polymerase to the PCR tube. DNA polymerase molecules act like tiny machines that read the DNA code and then attach matching nucleotides to create DNA copies. This particular DNA polymerase has been specially selected to withstand the high heat of the PCR reaction. Traduo: Por ltimo, vais adicionar Polimerase DNA ao tubo PCR. Molculas de DNA polimerase vo agir como pequenas mquinas que lem o cdigo de DNA e, em seguida, anexas nucletidos correspondentes para criar cpias de DNA. Esta polimerase de DNA particular foi escolhido especialmente para resistir a altas temperaturas da reaco de PCR. Drag the DNA POLYMERASE to the PCR tube Traduo: Arrastar a polimerase de ADN para o tubo de PCR. Release the DNA POLYMERASE in the PCR tube. Traduo: lanamento da polimerase de ADN para o tubo de PCR. Now that the PCR tube is filled with all of the reaction componentes, you will place it into a DNA Thermal Cycler. This machine can precisely heat and cool your tube at specific times during the next hour. These changes in temperature are crucial for making the reaction work. Traduo: Agora que o tubo de PCR preenchido com todos os Componentes de reaco, vai coloc-lo num termo ciclador de DNA. Esta mquina pode precisamente aquecer e arrefecer o seu tubo em horrios especficos durante a prxima hora. Estas mudanas de temperatura so cruciais para tornar o trabalho de reaco. Drag the PCR tube to the THERMOCYCLER Traduo: Arrastar o tubo de PCR para o termociclador Place the PCR tube in the THERMOCYCLER Traduo: Colocar o tubo de PCR no termociclador Click the start button on the THERMOCYCLER Traduo: clicar para comear Inside your PCR tube, cycle one has begun. The thermal cycler heats up to 95 degrees Celsius. Thats 203 degrees Fahrenheit, which is almost boiling. At this temperature, the DNA double helix separates, creating two single-stranded DNA molecules. Traduo: Dentro do seu tubo de PCR, um ciclo j comeou. O termociclador aquece at 95 graus Celsius. Isso 203 graus Fahrenheit, que quase a ferver. A esta temperatura, a dupla hlice de DNA separa-se, criando duas molculas de ADN de cadeia simples. Now the termal cycle cools down to 50 degrees Celsius, about 122 degrees Fahrenheit. At this temperature, single stranded DNA molecules naturally attem pt to pair up. However, there are many more primer sequences than DNA strands in the tube. The primers crowd their way in and lock onto their target before strands can rejoin. Traduo: Agora o ciclo termal arrefece a 50 graus Celsius, cerca de 122 graus Fahrenheit. Nessa temperatura, as molculas de DNA de cadeia simples naturalmente attem pt para emparelhar-se. No entanto, existem muitas outras sequncias iniciadoras do que cadeias de ADN do tubo. Os indicadores lotam seu caminho e miram o seu alvo antes que os fios voltem. The thermal cycler now changes the temperature to 72 degrees celsius, which activates DNA polymerase. When DNA polymerase locates a primer attached to a single DNA strand, it begins to add complementary nucleotides onto the strand. It continues until it gets to the end of the strand and falls off. Traduo: O termociclador agora muda a temperatura de 72 graus Celsius, o que activa DNA polimerase. Quando o DNA polimerase localiza um indicador ligado a uma nica cadeia de DNA, ele comea a adicionar nucleotdeos complementares na vertente. Ele continua at que ele chegue ao final da fita e cai. Cycle one is complete. Click the next button to begin cycle two. Traduo: Um ciclo est completo. Clique no boto ao lado para iniciar ciclo de dois. The same three steps happen in cycle two. The temperature is raised again to separate the DNA strands. Traduo: Os mesmos trs passos aconteceram no ciclo de dois. A temperatura aumentada de novo para separar as cadeias de ADN. The temperature so lowered so the primers will attach. Traduo: A temperatura reduziu, para os indicadores anexarem. And the temperature is raised again slightly to simulate DNa polymerase to copy the strand. Click the next button to begin cycle three. Traduo: E, a temperatura aumentou novamente ligeiramente para simular ADN-polimerase para copiar a cadeia. Clique no boto ao lado para iniciar ciclo de trs. During cycle three, your desired products begin to appear two strands that begin with primer one and end with primer two. These are DNa copies of just the segment of DNA you have targeted. Although there are only two desired fragments at this stage, as you continue with the cycles, these products will quickly become the majority. Traduo: Durante o ciclo de trs, os produtos desejados comeam a aparecer - duas cadeias que comeam com um primrio e uma extremidade com dois iniciadores. Trata-se de cpias de DNA de apenas o segmento de DNA que escolheu. Embora existam apenas dois fragmentos desejados nesta fase, se continuar com os ciclos, estes produtos iro rapidamente tornar-se a maioria.
At the end of cycle four you have eight fragments that contain only your target sequence. Traduo: No final do ciclo quatro, vais ter oito fragmentos que contm apenas a sua sequncia alvo. Now you have twenty-two fragments that contain only your target sequence and only tem longer length copies. Click the fast Forward button to run more cycles. Traduo: Agora tens vinte e dois fragmentos que contm apenas a sua seqncia alvo e s dez cpias de comprimento. Clique no boto de avano rpido para executar mais ciclos. After thirty cycles there are over a billion fragments that contain only your target sequence and only sixty copies of the longer length molecules. You now have a solution of nearly pure target sequence. Traduo: Aps trinta ciclos existem mais de um bilho de fragmentos que contm apenas a sua sequncia alvo e apenas sessenta exemplares das molculas de comprimento mais longo. Tens agora uma soluo de sequncia alvo quase puro.