PRCTICA N 4

MTODO ANALTICO EN MEDIO ACUOSO PARA

METRONIDAZOL

Objetivo:
Desarrollar y validar un mtodo analtico que nos sea til para la cuantificacin de
Metronidazol en medio acuoso.

Fundamento:

En Qumica, se le llama mtodo analtico al conjunto de operaciones y tcnicas
aplicadas al anlisis de una muestra, el cual, dependiendo de su naturaleza,
puede clasificarse en:

-Mtodos de cuantificacin
-Mtodos de reconocimiento de impurezas
-Pruebas lmite
-Identidad

Para estudiar estos mtodos se usan parmetros como, la linealidad, la
especificidad, la exactitud, la tolerancia, etc. La calidad de los mtodos analticos
se medira segn su exactitud, precisin, sensibilidad, lmite de deteccin,
intervalo dinmico, selectividad, etc., adems claro est, del costo y rapidez con
que se consiga realizar la prueba, as como el nivel de peligrosidad, los residuos
que genere, entre otros.

Un procedimiento analtico muy utilizado en anlisis cuantitativo es el llamado de
calibracin que implica la construccin de una curva de calibracin. Una curva
de calibracin es la representacin grfica de una seal que se mide en funcin
de la concentracin de un analito. La calibracin incluye la seleccin de un
modelo para estimar los parmetros que permitan determinar la linealidad de esa
curva. y, en consecuencia, la capacidad de un mtodo analtico para obtener
resultados que sean directamente proporcionales a la concentracin de un
compuesto en una muestra, dentro de un determinado intervalo de trabajo. En el
procedimiento se compara una propiedad del analito con la de estndares de
concentracin conocida del mismo analito. Para realizar la comparacin se
requiere utilizar mtodos y equipos apropiados para la resolucin del problema de
acuerdo al analito que se desee determinar.

La linealidad de la curva de calibracin es un requerimiento fundamental en la
prctica del anlisis qumico cuando se realizan curvas de calibracin.. Para
demostrar la linealidad se requieren cumplir ciertos criterios de aceptacin en la
que estadsticamente se puede justificar sta; para ello es necesario calcular:

-La pendiente (m)
-La ordenada al origen (b)
-El coeficiente de determinacin (R
2
)

Como criterio de aceptacin de la linealidad a partir de la curva de calibracin se
considera R
2
>0.98.


La curva de calibracin que desarrollamos en esta prctica, tiene como fin
servirnos de referencia al realizar el perfil de disolucin del Metronidazol, por lo
cual, utilizaremos como solvente HCl 0.1 N, ya que este es el medio de disolucin
sugerido por la Farmacopea de los Estados Unidos Mexicanos para pruebas de
disolucin de este frmaco (MGA 0291). As mismo, en un mtodo analtico por
espectroscopia UV validado por Volont et al., se utiliza el HCl 0.1 N como
solvente.

Metodologa:









Leer las absorbancias de
cada una de las soluciones
a 277 nm.
Preparar una solucin
madre de 100 ug/ml,
llevando 0.01 gramos
de estndar de
Metronidazol a un
aforo de 100 ml con
HCl 0.1 N.
A partir de la solucin
madre se tomaron alcuotas
de 5, 10, 15 y 20 ml
respectivamente y se
aforaron a 100 ml con HCl
0.1 N, para obtener
concentraciones de 5, 10,
15 y 20 ug/ml
respectivamente.
Graficar los resultados,
colocando concentracin (eje
x) vs absorbancia (eje y).
Obtener la lnea de tendencia
(regresin lineal), la ecuacin de
la recta y el coeficiente de
determinacin (R
2
). Calcular el
coeficiente de correlacin (R).








Resultados:

En la siguiente tabla se muestran las
lecturas de absorbancia de cada una de
las soluciones analizadas.




Rango lineal: 0.2794 a 0.9368
R: 0.9985
R
2
: 0.997



Ecuacin de la Recta: y= (0.044)(x) + 0.043

La grfica de la curva de calibracin se encuentra anexa al final de esta prctica,
y en ella puede observarse una lnea recta que pasa cerca de todos los puntos
que representan los resultados obtenidos.

Discusin:

Inicialmente, al llevar a cabo esta prctica, utilizamos concentraciones de hasta
30 ug/ml, sin embargo, obtuvimos lecturas mayores a 1.0 de absorbancia y una R
de 0.9693 y R2 de 0.9395, lo cual ya no era del todo aceptable, por lo cual,
decidimos establecer nuestro rango lineal hasta la lectura ms grande pero menor
a 1, correspondiente a la solucin de 20 ug/ml; con este rango lineal obtuvimos
los valores ya reportados que s son aceptables para poder decir que nuestra
variable dependiente (absorbancia) se encuentra directamente afectada por la
variable independiente (concentracin) en un 99%, lo cual coincide con la lnea
recta que se observa en la grfica anexa.

Conclusin:

El anlisis de los resultados demuestra que el mtodo realizado es vlido para ser
utilizado como referencia para calcular la concentracin de muestras acuosas de
metronidazol a partir de la curva de calibracin obtenida.

Fuentes:

Harris DC. Anlisis Qumico Cuantitativo, 2da. Ed. Espaa: Editorial Revert;
2001.

Concentracin [ug/ml] Absorbancia
5 0.2794
10 0.4657
15 0.7125
20 0.9368


Hernndez HL, Gonzlez PC. Introduccin al Anlisis Instrumental, 1ra. Ed.
Espaa: Editorial Ariel; 2002.

Qumica-La gua <PGINA WEB>
Consultado el 2 de Mayo de 2014 en:
http://quimica.laguia2000.com/general/quimica-analitica



Universidad de Valencia <PGINA WEB>
Consultado el 2 de Mayo de 2014 en:
http://www.uv.es/~baeza/metodo.html

Volont MG, Ruiz G, Rubini A, Pozzo R. Equivalencia Farmacutica de
Comprimidos conteniendo Metronidazol 500 mg. Lat. Am. J. Pharm. 2008 Oct;
27(5): 887-93.